lized silver nanoparticles: in vitro and in vivo studies[J]. Journal of Materials Chemistry B, 2015, 3(15): 3032-3043."，其结果见表 3 所示。
[0039] 表3样品0、1、2、3、4的力学性能测试结果
[0040] 表3是样品0、1、2、3、4的力学性能测试结果，由表3可知，随着纳米TiO2含量增 加，敷料整体的抗拉强度逐渐提高，当纳米TiO2添加比例达到5%时，其抗拉强度为I. 6MPa， 但当纳米TiO2添加比例达7%时，敷料的抗拉强度下降为1.0 MPa，这可能是由于过多的纳米 TiO2不能与胶原、壳聚糖之间形成键合作用，自身发生了强烈的氢键作用，形成团聚，导致 复合敷料力学性能的下降。
[0041] 2. 7透气性 透气性是衡量伤口敷料好坏的重要指标，良好的透气性能可以保证伤口表面通畅的气 体交换，有利于表皮细胞的粘附、增殖、生长和迀移，同时有利于伤口渗出液的挥发，减少伤 口发炎的几率。
[0042] 对样品0、1、2、3、4进行透气性测试，其测试方法参照国标YY/T 0471. 2- 2004,其 结果见表4所示，从表4可以看出，样品0的水蒸气透过率达到3500 g*m2*24 h1，随着 纳米1102添加比例的增大，其水蒸气透过率有一定的下降，但下降的幅度不是很大，均在 3000g ? m 2 ? 24 h 1附近，当纳米TiO 2添加比例达到7%时，其伤口敷料的水蒸气透过率最 低，为2900g ? m2 ? 24 h \均能满足伤口敷料的透气性要求。
[0043] 表4样品0、1、2、3、4的透气性测试结果
[0044] 2. 8降解性 对胶原（Co 1 )、壳聚糖（CS )以及样品0、1、2、3、4进行溶菌酶降解实验，分别记录1、2、3、 4周后各样品剩余量占初始量的百分比，其结果见图6所示， 从图6可知，经过4周的降解，纯胶原降解了将近一半，剩余的胶原重量占初始量的 55%，纯壳聚糖与胶原/壳聚糖(样品0)的剩余重量均占初始量的69%，样品1、2、3、4均占初 始量的75%。胶原与壳聚糖复合后(样品0)能够明显地降低胶原的降解率，特别是在第1周 和第2周，样品0的剩余量为82%，而胶原的剩余量为65%，这要归功于壳聚糖的抗酶解性以 及壳聚糖与胶原之间形成的稳定的键合作用。随着不同比例的纳米TiO 2 (1%、3%、5%、7%)的 加入，胶原/壳聚糖复合海绵的降解率都有一定的下降，这是因为纳米级的1102水溶胶表 面具有大量的羟基，进入到胶原与壳聚糖分子之间，与胶原、壳聚糖未反应的羟基、氨基和 羧基之间形成较为稳定的氢键，增加了胶原、壳聚糖分子间的作用，提高了胶原/壳聚糖复 合物的稳定性。当纳米TiO 2的比例提高到7%时，胶原/壳聚糖/纳米TiO 2多孔海绵的稳 定性低于含5%纳米1102的，这可能是由于在共混的过程中，由于纳米TiO 2较多，纳米TiO2 分子之间形成了较为强的氢键作用，减少了其与胶原、壳聚糖分子之间形成氢键的几率，从 而降低了胶原/壳聚糖复合物整体的稳定性。
[0045] 2. 9抗菌性能 2. 9. 1对大肠杆菌的抑菌抗菌实验 采用抑菌圈法评价了样品〇、1、2、3、4对大肠杆菌的抑菌抗菌效果。具体操作是将各样 品放置于培养了大肠杆菌的培养皿，在37°C恒温恒湿培养箱中培养24h后得到的结果，如 图7所示。由图7可见，随着纳米TiO 2含量的增加，抑菌圈逐渐增大，说明添加纳米TiO 2的 复合敷料对大肠杆菌具有明显的抑制作用，且随着纳米TiO2浓度的提高，其抑制作用也越 来越强。
[0046] 2. 9. 2对金黄色葡萄球菌的抑菌抗菌实验 方法如下：①将各测试样品剪切成0. 5cmX 0. 5cm的正方形，置于紫外灯下照射30min， 充分灭菌处理。②在无菌操作台中，将灭菌后的样品置于24孔培养板中，加入0. 5ml金黄 色葡萄球菌菌液和0. 5ml生理盐水，于室温下静置培养2h。③轻轻用生理盐水将样品表面 多余的金黄色葡萄球菌菌液洗去，空气中干燥〇. 5h。然后将样品置于37°C恒温恒湿箱中培 养24h。④从恒温恒湿箱中取出样品，用2. 5%戊二醛溶液固定2~3h。⑤用乙醇溶液干燥 样品，然后喷金处理于扫描电镜（SEM)下观察拍照。结果如图8所示。
[0047] 由图8可见，未添加纳米TiO2的胶原/壳聚糖(样品0)伤口敷料表面有大量金黄 色葡萄球菌菌落的生成，说明胶原/壳聚糖伤口敷料对金黄色葡萄球菌没有明显的抑制作 用，对金黄色葡萄球菌的生长没有太大的影响。添加纳米110 2的试验组(样品1、2、3、4)对 金黄色葡萄球菌表现出良好的抑制作用，从图8中还可以看出单个金黄色葡萄球菌的直径 为I y m左右，随着纳米TiO2含量的增加，金黄色葡萄球菌菌落数逐渐减少，这说明纳米TiO2 对金黄色葡萄球菌具有明显的抑制作用，添加纳米TiO2后能够给伤口提供一个清洁无菌的 愈合环境。
[0048] 2. 10红细胞聚集分析 在止血机理的研究中，血小板的粘附、聚集以及形成血栓是其重要的内容。胶原不仅能 够给血小板提供多种附着位点，同时能诱导血小板颗粒内容物的释放，刺激机体产生凝血 酶因子，进而生成凝血蛋白，包裹血小板和红细胞，形成血栓堵以住伤口破损处。
[0049] 壳聚糖的止血机理与胶原不同，它的止血机理不是依赖常规的血小板和凝血因子 的瀑布机制。在壳聚糖的止血机理中，最重要的一环是依靠与红细胞发生粘附聚集，进而使 血液快速凝固达到止血的目的。
[0050] 红细胞聚集分析方法： (一）光学显微镜观察 方法：1)分别取IOOmg的样品0、1、2、3、4溶于IOml 1%的醋酸溶液中，振荡使其充分 溶解，直至溶液呈透明状； 2)取上述溶液IOml于载玻片上，向载玻片添加50ml的红细胞（RBC)，用移液枪枪头 拨动，使红细胞与各样品溶液充分混合均匀，添加少许生理盐水稀释混合溶液，于光学显微 镜下观察红细胞在不同时间段的聚集状态形态；由于样品〇、1、2、3、4表现基本没有什么差 另IJ，因此只附上样品3的红细胞聚集光学显微镜照片进行说明，如图9所示。
[0051] (二）扫描电镜观察 方法：将样品0、1、2、3、4剪切成0.5〇11\0.5〇]1的正方形结构置于24孔板中，在室温下 加入0. 5ml RBC和0. 5ml的生理盐水，静置培养2h，然后用生理盐水轻轻地将样品表面的 RBC洗去，空气中干燥0. 5h，再取少量的2. 5%戊二醛溶液固定2~3h，随后用乙醇溶液干 燥，最后喷金处理后，于扫描电镜（SEM)下观察红细胞的状态。
[0052] 结果分析：图9为样品3不同时间段红细胞聚集状态的扫描电镜照片。Omin时，可 以清楚地看到单个的红细胞，此时红细胞呈现游离状态，到IOmin时，单个游离的红细胞逐 渐出现粘附聚集，此时边缘处还能观察到单个游离的红细胞，到30min时，红细胞基本上粘 附聚集在一起，细胞之间紧密连接，形成块状或片状的结构，说明胶原/壳聚糖/纳米TiO 2 多孔支架对红细胞的聚集具有良好的促进作用。
[0053] 图10为样品0、1、2、3、4促进红细胞聚集的SEM图。从图10可以看出，加入纳米 1102后，红细胞之间紧紧地