Trichinenlide A在制备治疗乳腺癌药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及化合物TrichinenlideA的新用途，具体涉及TrichinenlideA在制 备治疗乳腺癌药物中的应用。
【背景技术】
[0002] Jin-BiaoXu等人首次分离纯化出化合物TrichinenlideA，并将成果发表在著名 天然产物杂志JournalofNaturalProductJl(TrichinenlidesA-TjMexicanolide-Type LimonoidsfromTrichiliasinensis，J.Nat.Prod.，2013,76,1872-1880) 〇
[0003]目前尚未有该化合物关于乳腺癌的活性报道。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种TrichinenlideA的医药用途。
[0005] 上述目的是通过如下技术方案实现的：
[0006] TrichinenlideA在制备治疗乳腺癌药物中的应用，所述TrichinenlideA化学结 构式如下，
[0008] 进一步地，所述乳腺癌为乳腺癌MCF-7、乳腺癌MDA-MB-231和乳腺癌MDA-MB-453。
【附图说明】
[0009] 图1:不同剂量TrichinenlideA对乳腺癌细胞增殖活力的影响；
[0010] 图2 :不同剂量TrichinenlideA对乳腺癌细胞凋亡的影响。
【具体实施方式】
[0011] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容。
[0012] 实施例I:TrichinenlideA的分离制备及结构确证
[0013] TrichinenlideA的制备方法同文献报道的制备方法（Trichinenlides A-T,Mexicanolide-TypeLimonoidsfromTrichiliasinensis,J.Nat.Prod. ,2013,76, 1872-1880)〇
[0014] 结构确证：结构确证：白色无定形粉末，分子式为C33H37NO9，不饱和度为16。红外光 谱表明化合物含有羟基（3437cm1)和羰基（1724cm1)基团。核磁共振氢谱数据SH(ppm， DMS0-d6,400MHz) :H-2 (3.58, m)，H-3 (4.86, d，J = 9.4)，H-5 (3.59, s)，H-6 (4.62, s)， H-9(2. 31, dd, J = 12.5,5.0), H-Il (2. 07, ddd, J = 16.8,12.8,5.0), H-Il (I. 83, m), H-12 (I. 48, m)，H-12 (I. 71，m)，H-14 (2. 19, br，d，J = 5. 3)，H-15 (2. 71，dd，J = 8. 5, 5. 3)， H-15 (2. 64, d，J = 8. 5)，H-17 (5. 52, s)，H-18 (0? 95, s)，H-19 (I. 50, s)，H-21 (7. 53, br，s)， H-22 (6. 35, br，s)，H-23 (7. 43, br，s)，H-28 (I. 21，s)，H-29 (0? 99, s)，H-30 (5. 37, br，d，J = 7. 2)，H-3'（9. 12，s)，H-5'（8. 73，d，J = 4. 7)，H-6'（7. 38，dd，J = 7. 9,4. 7)，H-7'（8. 20，br， d，J = 7. 9)，6-OH(2. 98, s)，7-0Me (3. 80, s);核磁共振碳谱数据S c (ppm，DMS0-d6,100Hz): 215. 7 (C，1-C)，48. 9 (CH，2-C)，79. I (CH，3-C)，40.1 (C，4-C)，45. 2 (CH，5-C)，72. 6 (CH，6-C)， 175. 8(C，7-C)，139. 3(C，8-C)，57. 2(CH，9-C)，50. 7(C，10-C)，21. 0(CH2,11-C)，34. 8(CH2， 12-C)，36. 3 (C，13-C)，45. 3 (CH，14-C)，29. 8 (CH2,15-C)，168. 0 (C，16-C)，76. 4 (CH，17-C)， 21. I (CH3,18-C)，16. 2 (CH3,19-C)，120. 8 (C，20-C)，140. 8 (CH，2卜C)，109. 0 (CH，22-C)， 143. 3 (CH，23-C)，22. 6 (CH3, 28-C)，30.1 (CH3, 29-C)，123. 3 (CH，30-C)，164. I (C，1' -C)， 125. 3(C，2' -C)，150. 4(CH，3' -C)，153. 5(CH，5' -C)，123. 8(CH，6' -C)，136. 9(CH，7' -C)， 53. 3 (CH3, 7-0Me)。结构确证数据与文献报道一致，因此可以确定本发明制备的化合物即为 文南犬报道的TrichinenlideA。
[0015] 实施例2:TrichinenlideA的药理作用试验
[0016] -、材料和仪器
[0017]DMEM/F12高糖培养液购于北京Hyclone公司。改良型RPMI-1640培养基购于北 京Hyclone公司。标准胎牛血清购于天津TBD公司。CCK-8细胞活力检测试剂购于日本株 式会社同仁化学研究所。AnnexinV-FITC/PI凋亡检测试剂盒购于上海炎彬化工科技有限公 司。JC-I线粒体膜电位探针购于江苏碧云天生物技术研究所。二甲基亚矾（DMSO)和磷酸 盐缓冲溶液（PBS)购于Sigma公司产品。TrichinenlideA自制，制备方法见实施例1，HPLC 归一化纯度大于98%。
[0018] -70°(：低温冰箱$(^1^5(^61^1打(3111(3.公司，美国），电子天平（岛津4￡1-200 型，日本），超净工作台（SW-CJ-IC型，苏州），恒温振荡器（THZ-C型），高压蒸汽消毒 锅（YX-400B型），CO2细胞培养箱（FormaSeriesII，Thermalelectroncorp.，美国）， 恒温水浴锅（BHW2-I型，国产），倒置相差显微镜（CK40型，Olympus，日本），显微镜 (BX51型，Olympus，日本），显微数码采集系统（DP71型，Olympus，日本），多功能酶标仪 (InfiniteM200型，TECAN，瑞士），台式室温高速离心机（TGL-16G型，北京），台式低温高 速离心机（2K15型，sigma公司，美国），BL60电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公 司），LD4-40大容量离心机（北京京立离心机有限公司），2K15高温低速冷冻离心机（sigma 公司），UV765紫外分光光度计（上海精密科学仪器有限公司），激光共聚焦扫描显微镜 (MRC-1024 型，Bio-Rad，英国）。
[0019] 二、试验方法
[0020] 1、细胞株及培养
[0021] 选用乳腺癌MCF-7细胞（雌激素受体阳性ER+，人类表皮生长因子受体-2阴性 HERZ/neu)、乳腺癌MDA-MB-231 细胞（ER，HERZ/neu)和乳腺癌MDA-MB-453(ER，HERZ/ neu+)细胞株，三种细胞株均来自于中国科学院生物化学与细胞生物学研究所。MCF-7细胞 和10^-1^-231细胞培养于含10%标准胎牛血清的01^11作12高糖培养液中，10^-1^-453细 胞培养于含10%标准胎牛血清的RPMI-1640培养液中，以上细胞均于37°C、5%CO2条件下 常规培养传代。三种乳腺癌细胞均为贴壁细胞，贴壁细胞的传代：待细胞贴壁生长2~3d 至80%