贝伐单抗组合疗法用于治疗乳腺癌的血浆生物标志物的制作方法
【专利说明】
[0001] 本申请是申请日为2011年7月18日、中国申请号为201180044840. 2、发明名称为 "贝伐单抗组合疗法用于治疗乳腺癌的血浆生物标志物"的发明申请的分案申请。
技术领域
[0002] 本发明提供通过将贝伐单抗（bevacizumab) ( Avastin? )添加至化疗方案，用于 改进患有乳腺癌，特别是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的化疗方案 的治疗效果的方法，其通过相对于诊断有乳腺癌，特别是局部晚期、复发性或转移性HER-2 阴性乳腺癌的患者的对照水平，测定VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的表达水平，特别 是血浆表达水平来进行。特别是，本发明提供改进治疗效果的方法，其中治疗效果为患者的 无进展存活。本发明进一步提供用于评估患者对与化疗方案组合的贝伐单抗（Avastin? )的敏感性或响应性的方法，其通过相对于诊断有乳腺癌，特别是局部晚期、复发性或转移 性HER-2阴性乳腺癌的患者中的对照水平，测定VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的表 达水平，特别是血浆表达水平来进行。
[0003] 因而，本发明涉及鉴定和选择乳腺癌，或局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳 腺癌中与对与化疗方案，诸如多西他赛（docetaxel)疗法组合的血管发生抑制剂，例如贝 伐单抗（Avastin:⑩）的敏感性或响应性有关的生物标志物。在这方面，本发明涉及相对 于诊断有乳腺癌，特别是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者中建立的对 照，VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的血浆特异性表达概况用于鉴定对将血管发生抑 制剂，例如贝伐单抗（Avasiin?)添加至标准化疗敏感或响应的患者的用途。本发明进一 步涉及通过将血管发生抑制剂，例如贝伐单抗（Avastin? )添加至标准化疗，例如多西他 赛疗法，用于改进患有乳腺癌，特别是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者 的治疗效果，特别是无进展存活的方法，其通过相对于诊断有乳腺癌，特别是局部晚期、复 发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者中的对照，测定VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多 项的血浆特异性表达水平来进行。本发明进一步提供用于鉴定依照本发明的方法确定和定 义的对血管发生抑制剂，特别是贝伐单抗（A^aStin⑩）敏感或响应的患者的试剂盒和组合 物。
【背景技术】
[0004] 血管发生是癌症形成所必需的，不仅调节原发性肿瘤尺寸和生长，而且影响侵入 性和转移性潜力。因而，作为定向抗癌疗法的潜在靶，已经调查了介导血管发生过程的机 制。在血管发生调控剂研究的早期，发现血管内皮生长因子（VEGF)信号传导途径优先调 节多种癌症类型中的血管发生活性。这种因子经由VEGF受体2 (VEGFR-2)，即介导发芽式 血管发生的主要VEGF信号传导受体发信号。已经开发了多种治疗剂在多个点调控这种途 径。这些疗法包括例如贝伐单抗、舒尼替尼（sunitinib)、索拉非尼（sorafenib)和瓦他拉 尼（vatalanib)。虽然血管发生抑制剂在临床中的使用已经显示出成功，但是并非所有患者 都响应或未能完全响应血管发生抑制剂疗法。不知道此类不完全响应背后的机制。因此， 越来越需要鉴定对抗血管发生癌症疗法敏感或响应的患者亚组。
[0005] 虽然知道多种血管发生抑制剂，但是最突出的血管发生抑制剂是贝伐单抗 (Avastin?）。贝伐单抗是一种特异性结合并阻断VEGF(血管内皮生长因子）的生物学效 应的重组人源化单克隆IgGl抗体。VEGF是肿瘤血管发生（肿瘤生长和转移（即肿瘤扩散 至身体其它部分）所需要的一个必要过程）的一种关键驱动物。Avastin⑧在欧洲批准用于 治疗晚期阶段的四类常见癌症：结肠直肠癌，腺乳癌，非小细胞肺癌（NSCLC)和肾癌，它们 每年总共引起超过250万例死亡。在美国，Avastin?是第一种得到FDA批准的抗血管发生 疗法，而且它现在批准用于治疗五类肿瘤：结肠直肠癌，非小细胞肺癌，腺乳癌，脑（成胶质 细胞瘤）和肾（肾细胞癌）。至今已经用Avastin治疗超过50万患者，而且有超过450项 临床试验的一个综合临床程序项目正在调查Avastin在不同情况（例如晚期或早期疾病） 中治疗多种癌症类型（包括结肠直肠、乳腺、非小细胞肺、脑、胃、卵巢和前列腺）中的更多 用途。重要的是，已经显示出作为共同治疗剂有希望，在与广泛的化疗和其它抗 癌疗法组合时展现功效。已经发表了 III期研究，证明将贝伐单抗与标准化疗方案组合的 有益效果（参见例如 Saltz 等，2008, J. Clin. Oncol.，26 :2013-2019 ;Yang 等，2008，(：1111· Cancer Res.，14 :5893-5899 ;Hurwitz 等，2004, Ν· Engl. J. Med.，350 :2335-2342)。然而，正 如在血管发生抑制剂的先前研究中，这些III期研究中的一些已经显示了一部分患者对将 贝伐单抗（Avastin? )添加至他们的化疗方案经历不完全响应。
[0006] 因而，需要确定那些对包括血管发生抑制剂，特别是贝伐单抗（Avastin? )的组 合疗法响应或有可能响应的患者的方法。如此，本发明下面的技术问题是提供用于鉴定患 有或倾向于患上乳腺癌，特别是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌，可能受益于 将血管发生抑制剂，特别是贝伐单抗（Avastin? )添加至化疗疗法，例如多西他赛疗法的 患者的方法和手段。
[0007] 该技术问题通过提供权利要求书中表征的实施方案得到解决。
【发明内容】
[0008] 因此，本发明提供一种通过将贝伐单抗添加至所述化疗方案，用于改进患有乳腺 癌的患者的化疗方案的治疗效果的方法，所述方法包括：
[0009] (a)测定患者样品中VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的蛋白质表达水平；并
[0010] (b)对VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的表达水平相对于在诊断有乳腺癌的 患者中测定的对照表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0011] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的患者的 化疗方案的治疗效果的方法，所述方法包括：
[0012] (a)自所述患者获得样品；
[0013] (b)测定VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的蛋白质表达水平；并
[0014] (c)对VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的表达水平相对于在诊断有乳腺癌的 患者中测定的对照表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0015] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的患者的 无进展存活的方法，所述方法包括：
[0016] (a)测定患者样品中VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的蛋白质表达水平；并
[0017] (b)对VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的表达水平相对于在诊断有乳腺癌的 患者中测定的对照表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0018] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的患者的 无进展存活的方法，所述方法包括：
[0019] (a)自所述患者获得样品；
[0020] (b)测定VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的蛋白质表达水平；并
[0021] (c)对VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的表达水平相对于在诊断有乳腺癌的 患者中测定的对照表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0022] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚期、复发 性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0023] (a)测定患者样品中VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的蛋白质表达水平；并
[0024] (b)对VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的表达水平相对于在诊断有所述乳腺 癌的患者中测定的对照表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗，
[0025] 其中该化疗方案包含多西他赛疗法。
[0026] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚期、复发 性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0027] (a)自所述患者获得样品；
[0028] (b)测定VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的蛋白质表达水平；并
[0029] (c)对VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的表达水平相对于在诊断有所述乳腺 癌的患者中测定的对照表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗，
[0030] 其中该化疗方案包含多西他赛疗法。
[0031] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的患者的 无进展存活的方法，所述方法包括：
[0032] (a)测定患者样品中VEGFA或VEGFR2的蛋白质表达水平；并
[0033] (b)对VEGFA或VEGFR2的表达水平相对于在诊断有乳腺癌的患者中测定的对照表 达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0034] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的患者的 无进展存活的方法，所述方法包括：
[0035] (a)自所述患者获得样品；
[0036] (b)测定VEGFA或VEGFR2的蛋白质表达水平；并
[0037] (c)对VEGFA或VEGFR2的表达水平相对于在诊断有乳腺癌的患者中测定的对照表 达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0038] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚期、复发 性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0039] (a)测定患者样品中VEGFA或VEGFR2的蛋白质表达水平；并
[0040] (b)对VEGFA或VEGFR2的表达水平相对于在诊断有所述乳腺癌的患者中测定的对 照表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗，
[0041] 其中该化疗方案包含多西他赛疗法。
[0042] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚期、复发 性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0043] (a)自所述患者获得样品；
[0044] (b)测定VEGFA或VEGFR2的蛋白质表达水平；并
[0045] (c)对VEGFA或VEGFR2中一项或多项的表达水平相对于在诊断有所述乳腺癌的患 者中测定的对照表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗，
[0046] 其中该化疗方案包含多西他赛疗法。
[0047] 本发明提供一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的患者的 化疗方案治疗效果的方法，所述方法包括：
[0048] (a)测定患者样品中VEGFA、VEGFR2和PLGF的蛋白质表达水平；并
[0049] (b)对VEGFA、VEGFR2和PLGF的组合表达水平相对于在诊断有乳腺癌的患者中测 定的对照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0050] 该乳腺癌可以是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌。该化疗方案可以 包含紫杉烧疗法，诸如多西他赛或帕利他赛疗法。
[0051] 因而，本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的 患者的化疗方案治疗效果的方法，所述方法包括：
[0052] (a)自所述患者获得样品；
[0053] (b)测定VEGFA、VEGFR2和PLGF的蛋白质表达水平；并
[0054] (c)对VEGFA、VEGFR2和PLGF的组合表达水平相对于在诊断有乳腺癌的患者中测 定的对照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0055] 该乳腺癌可以是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌。该化疗方案可以 包含紫杉烧疗法，诸如多西他赛或帕利他赛疗法。
[0056] 本发明提供一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的患者的 无进展存活的方法，所述方法包括：
[0057] (a)测定患者样品中VEGFA、VEGFR2和PLGF的蛋白质表达水平；并
[0058] (b)对VEGFA、VEGFR2和PLGF的组合表达水平相对于在诊断有乳腺癌的患者中测 定的对照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0059] 该乳腺癌可以是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌。该化疗方案可以 包含紫杉烧疗法，诸如多西他赛或帕利他赛疗法。
[0060] 因而，本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的 患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0061] (a)自所述患者获得样品；
[0062] (b)测定VEGFA、VEGFR2和PLGF的蛋白质表达水平；并
[0063] (c)对VEGFA、VEGFR2和PLGF的组合表达水平相对于在诊断有乳腺癌的患者中测 定的对照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0064] 该乳腺癌可以是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌。该化疗方案可以 包含紫杉烧疗法，诸如多西他赛或帕利他赛疗法。
[0065] 本发明，因此，涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚 期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0066] (a)测定患者样品中VEGFA、VEGFR2和PLGF的蛋白质表达水平；并
[0067] (b)对VEGFA、VEGFR2和PLGF的组合表达水平相对于在诊断有所述乳腺癌的患者 中测定的对照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗，
[0068] 其中该化疗方案包含多西他赛疗法。
[0069] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚期、复发 性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0070] (a)自所述患者获得样品；
[0071] (b)测定VEGFA、VEGFR2和PLGF的蛋白质表达水平；并
[0072] (c)对VEGFA、VEGFR2和PLGF的组合表达水平相对于在诊断有所述乳腺癌的患者 中测定的对照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗，
[0073] 其中该化疗方案包含多西他赛疗法。
[0074] 本发明提供一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的患者的 无进展存活的方法，所述方法包括：
[0075] (a)测定患者样品中VEGFA和VEGFR2的蛋白质表达水平；并
[0076] (b)对VEGFA和VEGFR2的组合表达水平相对于在诊断有乳腺癌的患者中测定的对 照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0077] 该乳腺癌可以是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌。该化疗方案可以 包含紫杉烷疗法，诸如多西他赛或帕利他赛疗法。施用的贝伐单抗剂量可以是低或高剂量 贝伐单抗。如所附示例性实施例中显示的，VEGFA和VEGFR2的组合表达水平特别在施用低 剂量贝伐单抗的患者中是预示性的。
[0078] 因而，本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚期、 复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0079] (a)自所述患者获得样品；
[0080] (b)测定VEGFA和VEGFR2的蛋白质表达水平；并
[0081] (c)对VEGFA和VEGFR2的组合表达水平相对于在诊断有所述乳腺癌的患者中测定 的对照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0082] 该化疗方案可以包含紫杉烷疗法，诸如多西他赛或帕利他赛疗法。施用的贝伐单 抗剂量可以是低或高剂量贝伐单抗。如所附示例性实施例中显示的，VEGFA和VEGFR2的组 合表达水平特别在施用低剂量贝伐单抗的患者中是预示性的。
[0083] 因此，本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚期、 复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0084] (a)测定患者样品中VEGFA和VEGFR2的蛋白质表达水平；并
[0085] (b)对VEGFA和VEGFR2的组合表达水平相对于在诊断有所述乳腺癌的患者中测定 的对照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗，
[0086] 其中该化疗方案包含多西他赛疗法。施用的贝伐单抗剂量可以是低或高剂量贝伐 单抗。如所附示例性实施例中显示的，VEGFA和VEGFR2的组合表达水平特别在施用低剂量 贝伐单抗的患者中是预示性的。
[0087] 本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚期、复发 性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0088] (a)自所述患者获得样品；
[0089] (b)测定VEGFA和VEGFR2的蛋白质表达水平；并
[0090] (c)对VEGFA和VEGFR2的组合表达水平相对于在诊断有所述乳腺癌的患者中测定 的对照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗，
[0091] 其中该化疗方案包含多西他赛疗法。施用的贝伐单抗剂量可以是低或高剂量贝伐 单抗。如所附示例性实施例中显示的，VEGFA和VEGFR2的组合表达水平特别在施用低剂量 贝伐单抗的患者中是预示性的。
[0092] 本发明提供一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的患者的 无进展存活的方法，所述方法包括：
[0093] (a)测定患者样品中VEGFA和PLGF的蛋白质表达水平；并
[0094] (b)对VEGFA和PLGF的组合表达水平相对于在诊断有乳腺癌的患者中测定的组合 对照表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0095] 该乳腺癌可以是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌。该化疗方案可以 包含紫杉烷疗法，诸如多西他赛或帕利他赛疗法。施用的贝伐单抗剂量可以是低剂量或高 剂量贝伐单抗。
[0096] 因而，本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有乳腺癌的 患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0097] (a)自所述患者获得样品；
[0098] (b)测定VEGFA和PLGF的蛋白质表达水平；并
[0099] (c)对VEGFA和PLGF的组合表达水平相对于在诊断有乳腺癌的患者中测定的对照 组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗。
[0100] 该乳腺癌可以是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌。该化疗方案可以 包含紫杉烷疗法，诸如多西他赛或帕利他赛疗法。施用的贝伐单抗剂量可以是低剂量或高 剂量贝伐单抗。
[0101] 因此，本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚期、 复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0102] (a)测定患者样品中VEGFA和PLGF的蛋白质表达水平；并
[0103] (b)对VEGFA和PLGF的组合表达水平相对于在诊断有所述乳腺癌的患者中测定的 组合对照表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗，
[0104] 其中该化疗方案包含多西他赛疗法。施用的贝伐单抗剂量可以是低剂量或高剂量 贝伐单抗。
[0105] 因而，本发明涉及一种通过将贝伐单抗添加至化疗方案，用于改进患有局部晚期、 复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的无进展存活的方法，所述方法包括：
[0106] (a)自所述患者获得样品；
[0107] (b)测定VEGFA和PLGF的蛋白质表达水平；并
[0108] (c)对VEGFA和PLGF的组合表达水平相对于在诊断有所述乳腺癌的患者中测定的 对照组合表达水平升高的患者施用与化疗方案组合的贝伐单抗，
[0109] 其中该化疗方案包含多西他赛疗法。施用的贝伐单抗剂量可以是低剂量或高剂量 贝伐单抗。
[0110] 本发明提供一种用于鉴定对将贝伐单抗治疗添加至化疗方案响应或敏感的患者 的体外方法，所述方法包括测定来自患有、怀疑患有或倾向于患上乳腺癌，特别是局部晚 期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者的样品中VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多 项的蛋白质表达水平，由此VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的表达水平相对于患有乳 腺癌（特别是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌）的患者中测定的对照表达水 平，特别是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者中测定的对照水平升高指 示患者对将贝伐单抗添加至所述化疗方案的敏感性。该化疗方案可以包含紫杉烷疗法，诸 如多西他赛或帕利他赛疗法。
[0111] 因而，本发明涉及一种用于鉴定对将贝伐单抗治疗添加至化疗方案响应或敏感的 患者的体外方法，所述方法包括：
[0112] (a)自患有、怀疑患有或倾向于患上乳腺癌，局部晚期、复发性或转移性HER-2阴 性乳腺癌的患者获得样品；并
[0113] (b)测定VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的蛋白质表达水平；
[0114] 由此VEGFA、VEGFR2和PLGF中一项或多项的表达水平相对于患有乳腺癌的患者中 测定的对照表达水平，特别是局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者中测定 的对照水平升高指示患者对将贝伐单抗添加至所述化疗方案的敏感性。该化疗方案可以包 含紫杉烧疗法，诸如多西他赛或帕利他赛疗法。
[0115] 本发明提供一种用于鉴定对将贝伐单抗治疗添加至化疗方案响应或敏感的患者 的体外方法，所述方法包括测定来自患有、怀疑患有或倾向于患上局部晚期、复发性或转移 性HER-2阴性乳腺癌的患者的样品中VEGFA和VEGFR2的蛋白质表达水平，由此VEGFA和 VEGFR2的组合表达水平相对于在患有局部晚期、复发性或转移性HER-2阴性乳腺癌的患者 中测定的对照组合表达水平升高指示患者对将贝伐