艾塞那肽口服纳米粒的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物制剂领域，具体涉及含有艾塞郝肤口服纳米粒及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 糖尿病是一种W慢性高血糖为特征的全身代谢性疾病，表现为膜岛素分泌缺陷或 膜岛素生物作用出现障碍。据统计，目前全球范围内约有1.4亿糖尿病患者，而由于人口 老龄化，肥胖发病率增加等因素，估计在2025年全球糖尿病患者将达到3亿。按照病理学 特点可分为膜岛素依赖型（IDDM，I型）和非膜岛素依赖型（NIDDM，II型）糖尿病。！型糖 尿病，其特征是膜岛素分泌能力降低或彻底丧失，临床治疗需每天皮下注射膜岛素；II型 糖尿病，其特征是人体无法有效利用膜岛素，糖尿病患者中有90%是II型糖尿病。目前II 型糖尿病临床上W药物治疗为主，一部分患者需膜岛素和口服降糖药联合使用。
[0003] 膜高血糖素样肤-1 (GLP-I)类似物艾塞郝肤（exenatide)是近年来在II型糖尿 病治疗领域中研发出的W双激素缺陷为祀向的新型降糖药物之一。艾塞郝肤为肠促膜素类 似物，是膜高血糖素样肤-1 (GLP-I)受体激动剂，可与GLP-I受体结合发挥类GLP-I的作用 从而降低血糖，具有促进膜岛素分泌，增加膜岛素敏感性及改善膜岛细胞功能的作用，有着 传统治疗糖尿病药物不可比拟的优点。
[0004] 艾塞郝肤注射液（百泌达)已于2005年在美国上市，2007年在欧洲上 市，2009年获中国S抑A批准上市，作为二甲双脈药物的辅助治疗药物。！玲etta榮半衰期短 (ti/2约2. 4h)，不能持续控制血糖，导致药效受到一定局限，患者血药浓度波动大，不利于 疾病控制。阿斯利康制药公司在基础上进一步研究开发了艾塞郝肤长效缓释微球 賊舶rcot悼，于2011年获欧洲EMEA批准上市，2012年获美国抑A批准上市。
[0005] 艾塞郝肤为多肤类药物，目前临床给药方式均为注射给药。长期注射给药给患者 带来很大痛苦，患者顺应性差，而口服途径是目前应用最广、更加方便的给药方式，但由于 蛋白多肤类药物口服生物利用度低，大多数蛋白质多肤类药物很少或不能经胃肠道吸收， 限制了其临床应用，其原因主要有：（1)分子量大，脂溶性差，难W通过生物膜屏障；（2)胃 肠道中存在着大量肤水解酶和蛋白水解酶可降解多肤和蛋白质；（3)吸收后易被肝脏消 除；(4)存在化学和构象不稳定问题。
[0006] 因此，为了扩大艾塞郝肤制剂的临床应用，床急需开发一种给药更加方便的艾塞 郝肤口服制剂。
【发明内容】
[0007] 本发明提供了一种艾塞郝肤口服纳米粒，其特征在于含有艾塞郝肤和CSK-壳聚 糖。艾塞郝肤与CSK-壳聚糖的重量比为0. 5:10~3:10,优选1:10。
[0008] 所述CSK-壳聚糖为CSK多肤与壳聚糖的共聚物，所述CSK指CSK多肤，其氨基酸 序列为CSKSSDYQC;CSK与壳聚糖重量比为2:1~1:4,优选1:1。
[0009] 本发明提供的艾塞郝肤口服纳米粒中还含有离子交联剂，所述离子交联剂为H聚 磯酸钢（TPP)、焦磯酸钢、四聚磯酸钢、八聚磯酸钢和六聚磯酸钢，优选为TPP，纳米粒中多 肤修饰壳聚糖与离子交联剂的重量比为10:0.6~10:4. 5。优选10:0. 9~10:1。
[0010] 所述艾塞郝肤口服纳米粒采用下述方法制备：将CSK多肤修饰的壳聚糖溶解在低 浓度醋酸中，在磁力揽拌下加入艾塞郝肤水溶液，同法逐滴加入离子交联剂溶液并继续揽 拌直至形成纳米粒混悬液。
[0011] 所述艾塞郝肤口服纳米粒W口服制剂形式存在，优选口服液。所述口服制剂可W 采用药学常规方法制备得到，给药剂量为每日口服给药1. 25-2. 5Ug/kg。
【附图说明】
[001引图1;实施例3-6制备得到的纳米粒口服给药的药时曲线
[0013] 图2 ;实施例3-6制备得到的纳米粒口服给药后血糖变化情况
【具体实施方式】
[0014] W下通过实施例和试验例来进一步说明本发明，但不W任何方式限制本发明。
[001引实施例ICSK多肤的合成
[001引1.树脂溶涨
[0017] 将100树脂放入反应管中，加入1500ml二甲基甲醜胺值MF)，溶胀30min。
[001引2.脱保护
[0019] 除去DMF，加入1500ml20 %脈巧DMF溶液，5min后去掉，再加20 %脈巧DMF溶液 1500ml,15min。
[0020] 3.检测
[0021]抽掉脈巧溶液，取十几粒树脂，用己醇洗H次，加入巧H丽，氯化钟化CN)，苯酪溶 液各一滴，105C-110C加热 5min。
[002引4.洗涂
[0023] 分别用1000 mlDMF、甲醇、DMF各洗涂两次。
[0024] 5.缩合
[00巧]按所需要的多肤氨基酸序列加入IOmmol氨基端被保护氨基酸，30mmol偶联剂 2- (7-偶氮苯并H氮哇）-四甲基脈六氣磯酸醋（皿TU)，均用尽量少DMF溶解，加入反应管， 立刻加入IOOmmolW上量的甲基吗晰（NMM).反应30min〇 [002引6.洗涂
[0027] W1000 mlDMF洗涂一次，1000 ml甲醇洗涂两次，1000 mlDMF洗涂两次。
[0028] 7.重复2-6操作，在第5步加入氨基端被保护的氨基酸时，依次加入所需要的氨 基酸。
[002引8.最后一次洗涂
[0030]W1000 ml的比例用DMF洗涂两次，1000 ml甲醇洗涂两次，1000 mlDMF洗涂两次， 1000 ml二氯甲焼值CM)洗涂两次。
[00引]9.裂解
[003引配制裂解液含H氣己酸灯FA) 94. 5% ;水2. 5% ;1，2-己二硫醇巧DT) 2. 5%己异 丙基娃焼灯IS)1%，反应120min。
[003引10.吹干洗涂将裂解液用氮气尽量吹干，用己離洗六次，然后常温挥干即得。
[0034] 实施例2CSK-壳聚糖的制备
[003引1、将纯化好的多肤lOOmg，用PBS溶解，冰浴浸泡15min备用。
[0036] 2.向1中的多肤PBS溶液中加入过200mg的1-己基-3-(二甲基氨基丙基）碳醜 二亚胺盐酸盐巧DC)与200mgN-居基玻巧醜亚胺（N服）低温反应比。
[0037] 3.向反应液中加入壳聚糖lOOmg，反应4h。
[003引 4.配置PH为7. 4磯酸缓冲液2000ml。
[0039] 5.将反应液用透析袋装好扎紧，放入缓冲液中透析4她。
[0040] 6.将透析好的产物冻干，即可得到CSK-壳聚糖（1:1)。
[0041] 其他重量比CSK-壳聚糖采用上述相同方法，所需试剂及用量如表1所示：
[0042] 表1制备不同重量比CSK-壳聚糖所需试剂及用量
[0044] 实施例3
[0045] 1〇11111111旨/1111壳聚糖溶液（溶于0.25%醋酸），在磁力揽拌下，用51111注射器在重 力作用下加入0. 5ml2mg/mlExenatide溶液，用5ml注射器在重力作用下加入2. 5mg/ml TPP水溶液1. 8ml，在500巧m下磁力揽拌器揽拌50min，3500巧m下离必30min。向制备好的 纳米粒溶液加入防腐剂山梨酸钟0.Img,苹果酸钢矫味剂Img,即得纳米粒口服液制剂。
[004引 实施例4
[0047] 1〇11111111邑/1111〔51(-壳聚糖（1:1)溶液（溶于0.25%醋酸），在磁力揽拌下，用51111 注射器在重力作用下加入0.5ml2mg/mlExenatide溶液，用5ml注射器在重力作用下加入 0. 5mg/m；LTPP水溶液2.Oml,在500巧m下磁力揽拌器揽拌50min, 3500巧m下离必30min。向 制备好的纳米粒溶液加入防腐剂山梨酸钟0. 5mg，苹果酸钢矫味剂5mg，即得纳米粒口服液 制剂。
[004引 实施例5