杨树花提取液的制备方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及一种杨树花提取液的制备方法。
【背景技术】
[0002] 随着现代养殖业的快速发展，化学药物在过去很长时间滥用导致的细菌耐药性和 药物残留问题越来越严重，同时由于人们对健康饮食的要求也在逐渐提高，所以全社会对 食品动物的用药安全都呈现出前所未有的关注。因此，中药及其提取物以其具有天然性、无 残留、不易产生耐药性等特点，被越来越多的兽药生产者和使用者所青睐，中药也必将在现 代养殖的发展中发挥越来越重要的作用。
[0003] 杨树花系杨柳科植物毛白杨、加拿大杨或同属数种植物的干燥雄花序。富含黄酮、 生物碱、有机酸、维生素、酚类等成分，具有健脾养胃、化湿止痢、涩肠止泻、清热解毒之功 效。杨树花提取液被收载于2010版《中国兽药典》二部，临床多用于猪、羊、禽下痢。现代药理 学研究表明杨树花具有抗菌、抗炎、解热镇痛、止痢止泻等作用。因此杨树花提取液在现代 养殖业中也必然会有广泛的应用前景。
[0004] 目前对杨树花的提取工艺中主要有碱性溶液、乙醇溶液和纤维素酶解等作为提取 液，通过煎煮、超声波萃取和超临界C02萃取等方式提取，最终提取液采用总黄酮的国标检 测方法亚硝酸钠-硝酸铝溶液法直接检测。现有的提取工艺一是工艺相对复杂，二是提取液 中总黄酮的提取率较低，一般不超过1.60%。
[0005] 由于杨树花中成份复杂，提取溶液采用上述国标检测方法直接用紫外仪检测，容 易对黄酮总量的检测造成干扰，造成数据差异较大。因此虽然也有提取率能达到2.58%的， 但因前处理液未经过滤直接用紫外_可见分光光度法检测，所以所得提取率存在偏高的可 能。
【发明内容】
[0006] 本发明要解决的技术问题是提供一种杨树花提取液的制备方法。
[0007] 为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是，杨树花提取液的制备方法，包 括以下步骤： (1) 将杨树花放入提取罐中，按料液重量比为1:10~30加入乙醇水溶液，并用氢氧化钠 调节pH为7.5~9.5，浸泡半小时； (2) 在温度80~100 °C下提取90~180分钟，得到煎煮液； (3 )将所述煎煮液过滤，滤液浓缩即可得杨树花提取液。
[0008] 作为优选： 步骤（1)中所述乙醇水溶液为55~85%的乙醇水溶液。进一步优选，乙醇水溶液为75%的 乙醇水溶液。
[0009] 步骤(2)中所述提取温度为80°C，提取时间150分钟。
[0010] 步骤(3)中所述滤液浓缩至每1ml提取液相当于Ig杨树花生药。
[0011] 本发明还提供一种用于检测上述制备得到的杨树花提取液中总黄酮含量的方法， 包括以下步骤： (4) 制备芦丁对照品溶液； (5) 将步骤(3)制备得到的杨树花提取液按国标中总黄酮含量测定方法中的前处理方 法处理，得到前处理液； (6) 将上述前处理液用定性滤纸过滤后，按紫外-可见分光光度法在510nm波长处测定 吸光度。
[0012] 本发明的有益效果是： 提供一种能达到较高的总黄酮提取率的杨树花提取液的制备方法，其中总黄酮的提取 率达到2.45%，同时改进了杨树花提取液的检测方法，使测得的杨树花提取液中总黄酮的含 量更准确。
【具体实施方式】
[0013] 实例 1 本实例为一种杨树花提取液的制备过程： (1) 将100g杨树花放入提取罐中，加入55%的乙醇水溶液2. OL，并调节pH到7.5，浸泡半 小时； (2) 加热至100°C，提取90分钟，得到煎煮液； (3) 将上述煎煮液过滤，滤液浓缩至约90 ml，定容至100ml，得到杨树花提取液1。
[0014] 实例2 本实例为一种杨树花提取液的制备过程： (1) 将100g杨树花放入提取罐中，加入85%的乙醇水溶液1.0 L，并调节pH到8.0，浸泡半 小时； (2) 加热至90 °C，提取120分钟，得到煎煮液； (3) 将上述煎煮液过滤，滤液浓缩至约90 ml，定容至100mL，得到杨树花提取液2。
[0015] 实例3 本实例为一种杨树花提取液的制备过程： (1) 将100g杨树花放入提取罐中，加入65%的乙醇水溶液3. OL，并调节pH到9.5，浸泡半 小时； (2) 加热至80 °C，提取180分钟，得到煎煮液； (3) 将上述煎煮液过滤，滤液浓缩至约90 ml，定容至100mL，得到杨树花提取液3。
[0016] 实例4 本实例为一种杨树花提取液的制备过程： (1) 将100g杨树花放入提取罐中，加入75%的乙醇水溶液2.5L，并调节pH到8.5，浸泡半 小时； (2) 加热至90 °C，提取150分钟，得到煎煮液； (3)将上述煎煮液过滤，滤液浓缩至约90 ml，定容至100ml，得到杨树花提取液4。
[0017] 实例5 本实例为一种杨树花提取液的制备过程： (1) 将100g杨树花放入提取罐中，加入70%的乙醇水溶液1.5L，并调节pH到9.0，浸泡半 小时； (2) 加热至85°C，提取180分钟，得到煎煮液； (3) 将上述煎煮液过滤，滤液浓缩至约90 ml，定容至100mL，得到杨树花提取液5。
[0018] 实例6 本实例为针对杨树花提取液中总黄酮含量的检测方法的验证试验，具体步骤如下： (1)对照品溶液的制备:精密称取120°C干燥至恒重的芦丁对照品50mg，置于25ml的容 量瓶中，加甲醇溶解定容至刻度，摇勾。精密量取IOml，置100mL容量瓶中，加水至刻度，摇 匀，即得0.2mg/ml的芦丁对照品溶液。
[0019] (2)样品液的制备:分别精密量取实例1~5制备得到的杨树花提取液1、2、3、4、5各 lml，至于100mL容量瓶中，用用水稀释至刻度，得到样品液待用。
[0020] (3)样品液的前处理：分别精密量取上述芦丁对照品溶液、纯净水(做为空白对照 液）和步骤（2)所得的样品液各lml，分别置于7个100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，量取 3ml，置于25ml容量瓶中，加水至6ml，再加5%的亚硝酸钠 lml，混匀，放置6min，加10%硝酸铝 溶液Iml，摇勾放置6min，加氢氧化钠试液IOml，最