后加水至刻度，摇勾，放置15min后得到相 应的芦丁对照品前处理液、空白对照前处理液和杨树花产品前处理液，并将这三种前处理 液分成两等分，待测。
[0021 ] (4)含量测定:将上述芦丁对照品前处理液、空白对照前处理液和杨树花产品前处 理液各取一份，按照紫外-可见分光光度法在510nm波长处测定吸光度。再将上述三种前处 理液的另外一份用定性滤纸过滤，然后再按紫外-可见分光光度法在510nm波长处测定吸光 度。
[0022] 未经过滤和过滤后的芦丁对照品前处理液、空白对照前处理液和杨树花产品前处 理液的检测结果见表1，其中总黄酮含量由过滤后杨树花提取液计算得到。
[0023] 表 1
(5)结论:表1的检测结果显示，用定性滤纸过滤对芦丁对照品的含量基本没有影响，且 对空白对照也没有影响，说明过滤对于用紫外-分光光度法检测总黄酮的含量没有影响。但 是，过滤对于杨树花提取液的检测却有明显的影响，说明过滤可以最大程度地消除杨树花 提取液中非黄酮类物质的干扰，但又不影响对总黄酮类物质的含量检测。
[0024] 由本试验可知，可以在杨树花提取液中总黄酮含量的检测中，仅需要对杨树花提 取液采用定性滤纸过滤，能够最大程度地消除杨树花提取液中非黄酮类物质的干扰，但又 不影响对总黄酮类物质的含量检测。
[0025] 通过表1中杨树花提取液中总黄酮得率的结果比较得知，实例4中的提取方法能得 到较高的总黄酮，提取率达到2.45%。
[0026] 采用上述实例得到的杨树花提取液可以进一步制成口服液、颗粒剂或注射液。
[0027] 以下是采用实例4的杨树花提取液工艺进一步制成口服液、颗粒剂、注射液的制备 方法。
[0028] 实例7 本实例为一种杨树花口服液的制备过程： (1) 将Ikg杨树花放入提取罐中，加入75%的乙醇水溶液25L，并调节pH到8.5，浸泡半小 时； (2) 加热至90 °C，提取150分钟，得到煎煮液； (3) 将上述煎煮液过滤，滤液浓缩至约900 ml，得到杨树花提取液； (4) 将5g苯甲酸钠溶解于40ml水中； (5) 将步骤(4)得到的溶液加入步骤(3)得到的溶液中，再加入IOml吐温-80,30ml二甲 基亚砜，20ml二甲基甲酰胺，调pH为5 · 0-7 · 0，定容至1000 ml; (6 )将上述溶液过滤、灌装即得杨树花口服液。
[0029] 实例8 本实例为一种杨树花颗粒剂的制备过程： (1) 将Ikg杨树花放入提取罐中，加入75%的乙醇水溶液25L，并调节pH到8.5，浸泡半小 时； (2) 加热至90 °C，提取150分钟，得到煎煮液； (3) 将上述煎煮液过滤，滤液浓缩至约900 ml，得到杨树花提取液； (4) 将步骤(3)得到的提取液液继续浓缩至稠膏状； (5) 向步骤(4)得到的稠膏中加入适量的蔗糖粉、糊精和可溶性淀粉等，制成均匀的软 材后，经制粒、烘干、过筛和分装，即得杨树花颗粒剂（Ig杨树花颗粒剂相当于Ig杨树花生 药)。
[0030] 实例9 本实例为一种杨树注射液的制备过程： (1) 将Ikg杨树花放入提取罐中，加入75%的乙醇水溶液25L，并调节pH到8.5，浸泡半小 时； (2) 加热至90 °C，提取150分钟，得到煎煮液； (3 )将上述煎煮液过滤，滤液浓缩至粘稠状； (4) 向步骤(3)得到的溶液中加入95%的乙醇，搅拌，至液体的终浓度为80%，静置48h，取 上清液； (5) 将沉淀物再按步骤(4)重复提取一次，取上清液； (6) 合并步骤(4)、（5)中得到的上清液，浓缩至约900ml， (7) 将上述浓缩液中加入苯甲醇10ml，定容，过滤，灌封，灭菌即得即得杨树花注射液。
[0031] 以上所述的本发明实施方式，并不构成对本发明保护范围的限定。任何在本发明 的精神和原则之内所作的修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的权利要求保护范 围之内。
【主权项】
1. 杨树花提取液的制备方法，包括以下步骤： (1)将杨树花放入提取罐中，按料液重量比为1:10~30加入乙醇水溶液，并用氢氧化钠 调节pH为7.5~9.5，浸泡半小时； (2 )在温度80~100 °C下提取90~180分钟，得到煎煮液； (3 )将所述煎煮液过滤，滤液浓缩即可得杨树花提取液。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1)中所述乙醇水溶液为55~85% 的乙醇水溶液。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述乙醇水溶液为75%的乙醇水溶液。4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述提取温度为90°C，提取 时间150分钟。5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述滤液浓缩至每lml提取 液相当于1 g杨树花生药。6. 对权利要求1所述的制备方法所得到的杨树花提取液的总黄酮含量检测方法，其特 征在于，包括以下步骤： (4) 制备芦丁对照品溶液； (5) 将步骤(3)制备得到的杨树花提取液按国标中总黄酮含量测定方法中的前处理方 法进行处理，得到杨树花提取液前处理液； (6) 将所述杨树花提取液前处理液用定性滤纸过滤后，按紫外-可见分光光度法在 510nm波长处测定吸光度。
【专利摘要】本发明公开了一种杨树花提取液的制备方法，包括以下步骤：（1）将杨树花放入提取罐中，按料液重量比为1:10～30加入乙醇水溶液，并用氢氧化钠调节pH为7.5～9.5，浸泡半小时；（2）在温度80～100℃下提取90～180分钟，得到煎煮液；（3）将所述煎煮液过滤，滤液浓缩即可得杨树花提取液。本发明提供一种能达到较高的总黄酮提取率的杨树花提取液的制备方法，其中总黄酮的提取率达到2.46%，同时改进了杨树花提取液的检测方法，使测得的杨树花提取液中总黄酮的含量更准确。
【IPC分类】G01N21/33, A61K36/76
【公开号】CN105560534
【申请号】CN201610083435
【发明人】王丽霞, 刘虎, 张会峰, 汪海龙
【申请人】安徽华澳生物技术有限公司
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2016年2月7日