天胡荽愈肝片在制备抑制前列腺癌细胞Du-145细胞增殖药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种天胡荽愈肝片在制备抑制前列腺癌细胞 Du-145细胞增殖药物中的应用及天胡荽愈肝片的制备方法。
【背景技术】
[0002] 天胡荽愈肝片标准号WS-10213(ZD-0213)-2002,记载于国家中成药标准汇编内科 肝胆分册。由天胡荽699g、杏叶防风1398g、酢衆草699g、虎掌草209g作为原料药制成，具有 清热解毒，疏肝利胆的功效，用于肝胆湿热所致的急、慢性肝炎。
[0003] 现有技术中，尚未有天胡荽愈肝片在在制备抑制人前列腺癌细胞Du-145细胞增殖 药物中的应用的报道，也未见有天胡荽愈肝片提取制备方面采用超临界萃取的报道，而传 统水煎煮的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响了本 品在临床上应用。
【发明内容】
[0004] 发明目的：本发明的目的在于提供一种天胡荽愈肝片在制备抑制前列腺癌细胞 Du-145细胞增殖药物中的应用。
[0005] 本发明的另一个目的在于提供一种天胡荽愈肝片的制备方法。
[0006] 本发明的目的是通过如下的方案实现的： 天胡荽愈肝片在制备抑制前列腺癌细胞Du-145细胞增殖药物中的应用，所述天胡荽愈 肝片由天胡荽699g、杏叶防风1398g、酢衆草699g、虎掌草209g作为原料药制成，所述天胡荽 愈肝片的制备方法包括如下步骤：取天胡荽699g、杏叶防风1398g、酢浆草699g、虎掌草 209g，加入到C0 2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为 4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30-50°C，C〇2流量l_3ml/g生药· min，萃取时间800-lOOOmin，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500 片，每片重0.30g。
[0007] 优选的，上述的天胡荽愈肝片在制备抑制前列腺癌细胞Du-145细胞增殖药物中的 应用，所述天胡荽愈肝片的制备方法包括如下步骤:取天胡荽699g、杏叶防风1398g、酢浆草 699g、虎掌草209g，加入到C〇2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体 积百分比为5%，萃取压力25MPa，温度40°C，C〇2流量2ml/g生药· min，萃取时间900min，得超 临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重 0·30g〇
[0008] 现有技术中，天胡荽愈肝片口服，一次6片，一日3次。天胡荽愈肝片服药量大。采用 本发明方法制备成的天胡荽愈肝片每片重0.30g，每次仅需3片，一日服用3次。在具有更多 活性成分的条件下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。
[0009] 试验一、不同方法制备的天胡荽愈肝片中齐墩果酸含量的比较 1、仪器及试药本发明天胡荽愈肝片:按实施例1方法制备，使用3005g原料药，经提取制 成500片，每片重0.30g。原天胡荽愈肝片，按照WS-10213(ZD-0213)-2002标准方法制备。 Agi 1 ent 1200高效液相色谱仪;METTLER AE240电子分析天平;齐墩果酸对照品（中国药品生 物制品检定所）。
[0010] 2、方法 照高效液相色谱法(中国药典2015年版第四部凡例十五)测定。
[0011]色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1 %磷 酸(80:20)为流动相;检测波长为210nm。理论板数按齐墩果酸峰计算应不低于3000。
[0012] 对照品溶液的制备精密称取齐墩果酸对照品适量，加甲醇制成每lml含0.2mg的 溶液，即得。
[0013] 本发明的天胡荽愈肝片供试品溶液的制备取本发明的天胡荽愈肝片，研细，取 0.75g( 2.5片的量），精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，称定重量，加热 回流1小时，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液l〇ml， 加20 %盐酸溶液5ml，加热回流2.5小时，加水30ml，水浴上浓缩至无醇味，放冷，用二氯甲烷 振摇提取3次(40ml、30ml、30ml )，合并二氯甲烷提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移 至l〇ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
[0014] 对照产品供试品溶液的制备取对照的天胡荽愈肝片20g，研细，取1.5g(5片的 量），精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放 冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液l〇ml，加20 %盐酸溶 液5ml，加热回流2.5小时，加水30ml，水浴上浓缩至无醇味，放冷，用二氯甲烷振摇提取3次 (40ml、30ml、30ml )，合并二氯甲烷提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10ml量瓶 中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
[0015] 测定法分别精密吸取对照品溶液与本发明的天胡荽愈肝片供试品溶液、对照产 品供试品溶液各1〇μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0016] 3、结果 结果表明，本发明天胡荽愈肝片中齐墩果酸的含量为3.22-6.45mg/片；而原天胡荽愈 肝片中齐墩果酸的含量为〇.81mg/片，每次服用量3片的齐墩果酸含量为原片剂6片含量的 2-4倍，在服用量减少的情况下，齐墩果酸含量有很大提高。
[0017] 上述研究表明，采用本发明制备方法制备的天胡荽愈肝片，有效成分含量远远高 于WS-10213(ZD-0213)-2002标准记载的方法制备的天胡荽愈肝片。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解 本发明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述 内容所实现的技术均属于本发明的范围。
[0019] 实施例1 取天胡荽699g、杏叶防风1398g、酢浆草699g、虎掌草209g，加入到C02超临界萃取器中， 乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa，温度40°C，C02 流量2ml/g生药· min，萃取时间900min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙 醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重0.30g。
[0020]经检测，成品中齐墩果酸的含量为6.45mg/片。
[0021] 实施例2 取天胡荽699g、杏叶防风1398g、酢浆草699g、虎掌草209g，加入到C02超临界萃取器中， 乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%，萃取压力15MPa，温度30°C，C02 流量lml/g生药· min，萃取时间lOOOmin，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70% 乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重0.30g。
[0022]经检测，成品中齐墩果酸的含量为4.98mg/片。
[0023] 实施例3 取天胡荽699g、杏叶防风1398g、酢浆草699g、虎掌草209g，