一种检测前列腺癌易感性的方法及试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及前列腺癌早期诊断领域，尤其涉及一种检测前列腺癌易感性的方法及试剂盒。
【背景技术】
[0002]前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤，占男性癌症死因的第二位，约占所有男性癌症患者的40%。近年随着人口老龄化及生活条件的改善，发病率有明显增加的趋势。前列腺癌通常生长缓慢，患者常常在发病数年之后才出现明显的症状或体征，因此及时发现并早期治疗是前列腺癌诊治的关键，然而前列腺癌的发病原因目前尚不清楚。针对国内外大量关联研宄及流行病学研宄表明，前列腺癌与遗传因素关系密切，现有技术中，通过基因检测能够提早诊断前列腺癌，但是这一基因检测方法主要是针对欧洲人群的检测，对于中国人，如果同样使用这一基因检测方法，则会产生较大误差。
【发明内容】
[0003]本发明提供一种检测前列腺癌易感性的方法及试剂盒，解决缺乏针对中国人群的前列腺癌基因检测方法的技术问题。
[0004]本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
[0005]一种检测前列腺癌易感性的方法，包括:
[0006]提取被测者外周血的DNA ；
[0007]对所述被测者外周血的DNA的8q24染色体上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031号SNP位点进行荧光定量PCR检测，确定该位点的基因型；
[0008]对基因型进行分析；
[0009]根据基因型的分析结果，计算被检测者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。
[0010]一种检测前列腺癌易感性的试剂盒，包括检测8q24染色体上的rs 1456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031号单核苷酸多态性位点的特异性引物对及特异性荧光探针对、荧光定量PCR的常规组件。
[0011]本发明提供一种检测前列腺癌易感性的方法及试剂盒，通过提取被测者外周血的DNA ;对所述被测者的外周血DNA的8q24染色体上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031号SNP位点进行荧光定量PCR检测，确定该位点的基因型；对基因型进行分析；根据基因型的分析结果，计算被检测者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。掌握了中国人群患前列腺癌的风险，提高了中国人群前列腺癌易感性的准确检测。
【附图说明】
[0012]为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可根据这些附图获得其他的附图。
[0013]图1为本发明实施例提供的一种检测前列腺癌易感性的方法的流程图。
【具体实施方式】
[0014]为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和【具体实施方式】对本发明作进一步详细的说明。
[0015]本发明实施例的应用基础主要为:运用特定的Illumina单核苷酸多态性(SNP)微阵列(iCOGS)分析，从495个前列腺癌病例以及640个对照的患者的外周血DNA中基因分型出211155个SNPs。利用meta分析的方法发现，主要存在4个8q24位点(rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031)与中国人群前列腺癌患病风险独立密切相关，而其他染色体区域似乎作用有限，并且在中国人群当中，在这4个位点上的风险等位基因出现的频率要显著高于欧洲人群。由于遗传异质性的存在，同一变异对不同群体的影响往往差异显著，本发明实施例中所选取的4个风险变异位点相比欧洲人群来说，证明更适合中国人群。基于以上的研宄基础，详细介绍本发明实施例中的一种检测前列腺癌易感性的方法，如图1所示，包括:
[0016]步骤101、提取被测者外周血的DNA ；
[0017]步骤102、对所述被测者的外周血DNA的8q24染色体上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031号SNP位点进行荧光定量PCR检测，确定该位点的基因型；
[0018]步骤103、对基因型进行分析；
[0019]步骤104、根据基因型的分析结果，计算被检测者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。
[0020]其中，步骤103具体可以包括:
[0021]步骤103-1、采用Tap-Man-SNP基因分型技术对基因型进行快速鉴定；
[0022]步骤103-2、根据染色体8q24上4个位点上风险等位基因的数目分析被检测者前列腺癌易感程度。
[0023]其中，本发明实施例涉及8个单核苷酸多态性SNP，4个位点中每个位点包含2个SNP,携带6个或者更多的风险等位基因的检测者是只携带1-2个等位基因检测者前列腺癌易感程度的3倍多。
[0024]本发明提供一种检测前列腺癌易感性的方法，通过提取被测者外周血的DNA;对所述被测者外周血的DNA的8q24染色体上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031号SNP位点进行荧光定量PCR检测，确定该位点的基因型；对基因型进行分析；根据基因型的分析结果，计算被检测者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。掌握了中国人群患前列腺癌的风险，提高了中国人群前列腺癌易感性的准确检测。
[0025]本发明实施例还提供了一种检测前列腺癌易感性的试剂盒，包括检测8q24染色体上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031号单核苷酸多态性位点的特异性引物对及特异性荧光探针对、荧光定量PCR的常规组件。
[0026]其中，所述荧光定量PCR的常规组件包括:Taq DNA聚合酶、dNTP混合液、MgC12溶液、荧光定量PCR反应缓冲液和去离子水。
[0027]其中，该试剂盒实际应用中，包括包装盒体、衬垫、装有检测四个SNP位点的荧光定量PCR反应液的四个试管、装有阳性对照品的一个试管、装有阴性对照品的一个试管组成，衬垫上设有容器孔，分别放置四管荧光定量PCR反应液、阳性对照品和阴性对照品。
[0028]本发明实施例依据染色体8q24区域上的这4个位点，开发出一种检测前列腺癌易感性的试剂盒，该试剂盒涉及8个SNP (每个位点包含2个SNP)，采用Tap-Man-SNP基因分型技术对其快速鉴定，根据患者携带染色体8q24区域中4个位点上风险等位基因的数目筛查前列腺癌遗传易感人群，以便尽早对其进行癌症预防措施，延缓甚至避免中国高危人群罹患前列腺癌。
[0029]以上对本发明进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在【具体实施方式】及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
【主权项】
1.一种检测前列腺癌易感性的方法，其特征在于，包括: 提取被测者外周血的DNA ； 对所述被测者的外周血DNA的8q24染色体上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031号SNP位点进行荧光定量PCR检测，确定该位点的基因型； 对基因型进行分析； 根据基因型的分析结果，计算被检测者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。2.根据权利要求1所述的检测前列腺癌易感性的方法，其特征在于，所述对基因型进行分析，包括: 采用Tap-Man-SNP基因分型技术对基因型进行快速鉴定； 根据染色体8q24上4个位点上风险等位基因的数目分析被检测者前列腺癌易感程度。3.—种检测前列腺癌易感性的试剂盒，其特征在于，包括检测8q24染色体上的rsl456315, rsl6901979，rs6983267和rs7843031号单核苷酸多态性位点的特异性引物对及特异性荧光探针对、荧光定量PCR的常规组件。4.根据权利要求3所述的检测前列腺癌易感性的试剂盒，其特征在于，所述荧光定量PCR的常规组件包括:Taq DNA聚合酶、dNTP混合液、MgC12溶液、荧光定量PCR反应缓冲液和去离子水。
【专利摘要】本发明涉及前列腺癌早期诊断领域，公开了一种检测前列腺癌易感性的方法及试剂盒，通过提取被测者外周血的DNA；对所述被测者外周血的DNA的8q24染色体上的rs1456315，rs16901979，rs6983267和rs7843031号SNP位点进行荧光定量PCR检测，确定该位点的基因型；对基因型进行分析；根据基因型的分析结果，计算被检测者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。掌握了中国人群患前列腺癌的风险，提高了中国人群前列腺癌易感性的准确检测。
【IPC分类】C12Q1/68
【公开号】CN104946786
【申请号】CN201510430981
【发明人】吕永杰, 冯宁翰, 毛雪莹, 鲁晓杰, 邵宁, 汪洋, 温丽婷, 徐新宇, 王纯才, 包文平
【申请人】冯宁翰
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年7月21日