一种治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物及其制备方法和应用
【专利摘要】本发明公开了一种治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物及其制备方法，由中药复方药材经提取后加入不同配比的营养物和无机盐，高温灭菌，接入复合益生菌发酵后经稳定化处理制得。实验显示，本发明可以提高中药复方组合物中总黄酮的含量，增强本发明所涉及的中药复方组合物治疗疾病的功效。本发明的益生菌发酵中药复方组合物可减轻患者因放化疗产生的消化障碍、身体乏力等症状，且口感适中，易于患者服用，吸收快疗效好，并可有效抑制乳腺肿瘤的增长，改善患者的身体状况和生活质量，提高患者的免疫力，利于病情的好转，延长患者生命期，经临床试验，治愈率在85％左右，且安全有效，无毒副作用。
【专利说明】
一种治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物及其制备方法 和应用
技术领域
[0001] 本发明涉及一种中药提取物经肠道益生菌发酵制得的发酵组合物，以及该发酵组 合物在制备用于治疗乳腺癌的药品中的应用，属于生物发酵技术领域。
【背景技术】
[0002] 乳腺癌是危害女性健康最主要的恶性肿瘤。根据国家癌症中心2015年公布最新数 据显示，我国登记地区女性乳腺癌发病率为37.86/10万，每年正以3%的速度递增，中国已成 为乳腺癌发病率增长最快的国家之一。中国女性乳腺癌危险因素仅有部分与高收入国家的 一致。与西方相同的部分包括:生殖和激素因素例如月经年限长(初潮较早或绝经推迟），从 未生育，初产年龄推迟，母乳喂养受限。在中国人群中这些因素缓慢增加了患乳腺癌的风 险。生育率下降也能间接影响乳腺癌风险(例如缩短母乳喂养时间）。
[0003] 手术是治愈乳腺癌的方法之一，对早期的乳腺癌进行手术切除肿瘤是首选治疗方 式，术后一般都需要辅以放化疗，放化疗在杀死癌细胞的同时，也会杀死身体部分的正常细 胞，包括人体的免疫细胞，并且影响患者的消化系统，从而会引起患者的免疫力下降、消化 障碍等一系列不良反应，容易引起病情复发。中医药在治疗肿瘤方面具有独特的优势，天然 类药物具有毒副作用小、作用靶点多样、耐受性好等特点，在治疗肿瘤方面愈来愈受到重 视。但是传统汤剂味道较苦，患者一般难以下咽，并且抗肿瘤药多碍胃，破坏患者的身体平 衡，影响消化吸收，进一步影响患者的体质，降低了治疗效果。
【发明内容】
[0004] 为克服现有技术的不足，本发明提供了一种易于服用，吸收快且疗效好并且不良 反应低的抗乳腺癌中药制剂。
[0005] 本发明的一个目的是提供一种治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物，该组合 物由中药复方提取液经复合益生菌发酵后制得。采用的技术方案为：中药复方药材经提取 后加入不同配比的营养物和无机盐等，高温灭菌，接入复合肠道益生菌发酵后稳定化处理 即得本发明的益生菌发酵中药复方组合物。
[0006] 所述的中药复方由以下重量份的中药成分组成：浙贝母12~40份、土贝母12~40 份、山慈菇12~36份、夏枯草20~60份、蒲公英40~60份、连翘20~60份、漏芦12~36份、泽 兰12~48份、瓜蒌36~60份、路路通12~40份、柴胡12~40份、当归20~48份、白芍12~60 份、丹参24~60份、穿山甲4~40份、王不留行12~40份。
[0007] 优选的，所述的中药复方由以下重量份的中药成分组成：浙贝母24份、土贝母24 份、山慈菇20份、夏枯草24份、蒲公英48份、连翘24份、漏芦24份、泽兰24份、瓜蒌48份、路路 通24份、柴胡24份、当归24份、白芍24份、丹参40份、穿山甲6份、王不留行24份。
[0008] 本发明的另一个目的是提供本发明的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物 的制备方法，其步骤如下： 1) 浙贝母、土贝母、山慈菇、穿山甲、丹参粉碎过40-60目筛，加入2倍量的水浸泡1-2小 时，得药粉浸泡液备用；当归、连翘粉碎过20-40目筛，加入5倍量水浸泡0.5小时，水蒸气蒸 馏2小时收集挥发油，得蒸馏液备用，药渣与夏枯草等其它九味药加水煎煮两次，每次1-2小 时，煎液滤过，合并滤液，滤液浓缩至相当于上述浙贝母等药粉3-10倍量的体积，得浓缩液 a； 2) 将上述浙贝母等药粉浸泡液带药渣与浓缩液a混合，加入不同配比的葡萄糖、蛋白 胨、酵母膏、酵母粉、无机盐，调节pH值至7.0,于115°C高温高压灭菌1小时，得无菌中药复方 提取物； 3) 当上述无菌中药复方提取物温度降至39°C时，接种预培养的各体积百分比为0.5%~ 1.0%的一种或两种及以上双歧杆菌菌液，常规培养约2~6小时后，再次接种预培养的各体 积百分比为0.5%~1.0%的一种或两种及以上乳杆菌菌液，继续培养20~26小时；或者同时 接种预培养的各体积百分比为〇. 5%~1.0%的一种或两种及以上双歧杆菌菌液和各体积百 分比为0.5%~1.0%-种或两种及以上乳杆菌菌液，发酵22~30小时，当pH值降至4.1以下 时，结束发酵，得发酵液； 4) 将上述发酵液离心处理得发酵离心液备用，药渣加入5倍量的75%乙醇回流提取两 次，每次1小时，滤液合并得醇提液，减压蒸馏回收乙醇至相对密度为1.04-1.08,得浓缩液 b，与上述发酵离心液及步骤1)的蒸馏液混合，定容，于115°C高温高压灭菌40min，即得所述 的益生菌发酵中药复方组合物。
[0009]所述的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌或婴儿双歧杆菌； 所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌。菌 种来源于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)(中国，武汉）或中国普通微生物菌种保藏管理 中心(CGMCC)(中国，北京)或者从正常人的粪便或肠粘膜组织中分离得到这些细菌菌株。 [00?0]所述的葡萄糖的加入量为0.7g/100ml，所述的酵母膏的加入量为0.13g/100ml，所 述的酵母粉的加入量为〇. 07g/100ml，所述的蛋白胨的加入量为0.28g/100ml。
[0011]所述的无机盐为K2HPO4.3H2O 0.1g/100ml、KH2P〇4 0.1g/100ml、硫酸亚铁·7Η20 5.0mg/100ml、硫酸锌·7Η20 4.4mg/100ml、硫酸镁·7Η20 50mg/100ml。
[0012 ]为了改善口感，可在所述制备方法的步骤2中的浓缩液a或步骤4中的浓缩液b中加 入甜味剂，甜味剂种类和加入量为蔗糖〇~3.5g/100ml和/或三氯蔗糖0~0.02g/100ml。
[0013] 本发明的再一个目的是提供本发明所述的益生菌发酵中药复方组合物在制备治 疗乳腺癌的药物中的应用。
[0014] 本发明的益生菌发酵中药复方组合物中还可以添加一种或多种具有相同、相似或 不同生物学活性，并对基本活性成分表现有辅助或协同作用，但彼此间又互不拮抗的天然 或合成的其他药物成份或其混合物，配制成适于口服给药的液体制剂如水或油悬浮剂或其 它液体制剂如合剂、乳剂、糖浆等。
[0015] 也可将本发明的益生菌发酵中药复方组合物通过适当的干燥方法，制得固体粉 末，添加一种或多种具有相同、相似或不同生物学活性，并对基本活性成分表现有辅助或协 同作用，但彼此间又互不拮抗的天然或合成的其他药物成份或其混合物，配制成适于口服 给药的胶囊、片剂、颗粒剂等固体剂型的药物。
[0016] 有益效果： 1、本发明的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物根据中医药理论和乳腺肿瘤疾 病的发病特点，采用辨证论治的理论进行中药组方筛选，具有补血养血，消炎止痛，清热解 毒，消肿散结等功效。
[0017] 2、本发明的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物将中药和益生菌结合治疗 乳腺癌，治疗疾病的同时，可以改善患者的消化系统，减轻患者因放化疗产生的消化障碍、 身体乏力等不良症状，且口感适中，易于患者服用，吸收快疗效好，以达到扶正祛邪，增强自 身抗病能力的作用。
[0018] 3、本发明的制备方法可以提高本发明所涉及的中药复方组合物中总黄酮的含量， 从而可以从总黄酮方面增强本发明所涉及的中药复方组合物治疗疾病的功效;并且本发明 的制备方法可以提高本发明所涉及的中药复方组合物治疗乳腺癌的总有效率。
[0019 ] 4、本发明的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物可改善患者的生活质量，提 高患者的免疫力，利于病情的好转，延长患者生命期，治愈率在85%左右，且安全有效，无毒 副作用。
【具体实施方式】
[0020]实施例1:益生菌发酵中药复方组合物A的制备 按下列处方量称取药材，浙贝母24g、土贝母24g、山慈燕20g、夏枯草24g、蒲公英48g、连 翘24g、漏芦24g、泽兰24g、瓜蒌48g、路路通24g、柴胡24g、当归24g、白芍24g、丹参40g、穿山 甲6.0g、王不留行24g。将浙贝母、土贝母、山慈菇、穿山甲、丹参粉碎过40目筛，加入2倍量的 水浸泡1小时，得药粉浸泡液备用；当归、连翘粉碎过40目筛，加入5倍量水浸泡1小时，水蒸 气蒸馏2小时收集挥发油，得蒸馏液80ml备用，药渣与夏枯草等其它九味药加水煎煮两次， 每次1小时，煎液滤过，合并滤液，滤液浓缩至500ml，得浓缩液a;将上述浙贝母等药粉浸泡 液带药渣与浓缩液a混合，加入葡萄糖0.7g/100ml，酵母膏0.13g/100ml，酵母粉0.07g/ l〇〇ml，蛋白胨0 · 28g/100ml，无机盐(K2HPO4.3H20 0 · lg/100ml、KH2P〇4 0 · lg/100ml、硫酸亚 铁.7H20 5.0mg/100ml、硫酸锌.7H20 4.4mg/100ml、硫酸镁.7H20 50mg/100ml)，蔗糖30g，调 节pH值至7.0,于115°C高温高压灭菌1小时，得无菌中药复方提取物；当上述无菌中药复方 提取物温度降至39°C时，接种预培养的体积百分比为1.0%的短双歧杆菌(AS 1.2213)菌液， 常规培养约3小时后，再次接种预培养的体积百分比为1.0%的植物乳杆菌(AS 1.19)菌液， 继续培养23小时，当pH值降至4.1以下时，结束发酵，得发酵液;将上述发酵液离心处理得发 酵离心液备用，药渣加入5倍量的75%乙醇回流提取两次，每次1小时，滤液合并得醇提液，减 压蒸馏回收乙醇至相对密度为1.04-1.08,得浓缩液b，与上述蒸馏液、发酵离心液混合，加 水定容至l〇〇〇ml，于115°C高温高压灭菌40min，即得所述的益生菌发酵中药复方组合物A。 [0021 ]实施例2:益生菌发酵中药复方组合物B的制备 按下列处方量称取药材，浙贝母12g、土贝母40g、山慈燕12g、夏枯草60g、蒲公英40g、连 翘60g、漏芦12g、泽兰48g、瓜蒌36g、路路通40g、柴胡12g、当归48g、白芍12g、丹参60g、穿山 甲4.0g、王不留行40g。浙贝母、土贝母、山慈菇、穿山甲、丹参粉碎过45目筛，加入2倍量的水 浸泡1.5小时，得药粉浸泡液备用；当归、连翘粉碎过30目筛，加入5倍量水浸泡1小时，水蒸 气蒸馏2小时收集挥发油，得蒸馏液100ml备用，药渣与夏枯草等其它九味药加水煎煮两次， 每次1.5小时，煎液滤过，合并滤液，滤液浓缩至600ml，得浓缩液a;将上述浙贝母等药粉浸 泡液带药渣与浓缩液a混合，加入葡萄糖0.7g/100ml，酵母膏0.13g/100ml，酵母粉0.07g/ 100ml，蛋白胨Ο · 28g/100ml，无机盐(K2HPO4.3H20 Ο · lg/100ml、KH2P〇4 Ο · lg/100ml、硫酸亚 铁·7Η20 5.0mg/100ml、硫酸锌·7Η20 4.4mg/100ml、硫酸镁·7Η20 50mg/100ml)，调节pH值至 7.0,于115°C高温高压灭菌1小时，得无菌中药复方提取物；当上述无菌中药复方提取物温 度降至39 °C时，接种预培养的各体积百分比为0.5%的青春双歧杆菌(AS 1.2190)和婴儿双 歧杆菌(AS1. 853)菌液，常规培养约2小时后，再次接种预培养的体积百分比为0.7%的嗜酸 乳杆菌(AS 1.1854)菌液，继续培养22小时，当pH值降至4.1以下时，结束发酵，得发酵液;将 上述发酵液离心处理得发酵离心液备用，药渣加入5倍量的75%乙醇回流提取两次，每次1小 时，滤液合并得醇提液，减压蒸馏回收乙醇至相对密度为1.04-1.08,得浓缩液b，与上述蒸 馏液、发酵离心液混合，加入蔗糖30g和三氯蔗糖O.lg，混匀溶解，加水定容至1000ml，于115 °C高温高压灭菌40min，即得所述的益生菌发酵中药复方组合物B。
[0022] 实施例3:益生菌发酵中药复方组合物C的制备 按下列处方量称取药材，浙贝母40g、土贝母12g、山慈燕36g、夏枯草20g、蒲公英60g、连 翘20g、漏芦36g、泽兰12g、瓜蒌60g、路路通12g、柴胡40g、当归20g、白芍60g、丹参24g、穿山 甲40g、王不留行12g。浙贝母、土贝母、山慈菇、穿山甲、丹参粉碎过60目筛，加入2倍量的水 浸泡2小时，得药粉浸泡液备用；当归、连翘粉碎过20目筛，加入5倍量水浸泡1小时，水蒸气 蒸馏2小时收集挥发油，得蒸馏液60ml备用，药渣与夏枯草等其它九味药加水煎煮两次，每 次2小时，煎液滤过，合并滤液，滤液浓缩至650ml，得浓缩液a;将上述浙贝母等药粉浸泡液 带药渣与浓缩液a混合，加入葡萄糖0.7g/100ml，酵母膏0.13g/100ml，酵母粉0.07g/100ml， 蛋白胨0 · 28g/100ml，无机盐(K2HP〇4.3H20 0 · lg/100ml、KH2P〇4 0 · lg/100ml、硫酸亚铁.7H20 5 · Omg/lOOml、硫酸锌.7H2O 4 · 4mg/100ml、硫酸儀.7H2O 50mg/100ml)，调节pH值至7 · 0，于 115°C高温高压灭菌1小时，得无菌中药复方提取物；当上述无菌中药复方提取物温度降至 39°C时，同时接种预培养的体积百分比各为0.5%的两歧双歧杆菌(正常人体分离，经中国科 学院微生物研究所鉴定）、鼠李糖乳杆菌(AS 1.22)和德氏乳杆菌(AS 1.1480)菌液，常规培 养24小时，当pH值降至4.1以下时，结束发酵，得发酵液;将上述发酵液离心处理得发酵离心 液备用，药渣加入5倍量的75%乙醇回流提取两次，每次1小时，滤液合并得醇提液，减压蒸馏 回收乙醇至相对密度为1.04-1.08,得浓缩液b，与上述蒸馏液、发酵离心液混合，加水定容 至1000ml，于115°C高温高压灭菌40min，即得所述的益生菌发酵中药复方组合物C。
[0023] 实验例1、发酵前后总黄酮含量测定 黄酮类化合物是广泛存在于自然界中的一类多酚化合物，有许多潜在的药用价值，抗 肿瘤活性是其研究热点之一。其抗肿瘤作用主要表现在抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、干预 信号转导、影响细胞周期、影响血管生成、克服肿瘤细胞多药耐药性等方面。本实验例测定 了本发明的益生菌发酵中药复方组合物以及对应未发酵组合物中的总黄酮含量，旨在说明 通过本发明的制备方法发酵后所涉及的中药复方组合物中总黄酮的含量变化情况。
[0024] 1、样品:选自实施例中制备的益生菌发酵中药复方组合物A、B、C(编号为A、B、C)以 及对应的未发酵的中药复方组合物(编号为a、b、c)。
[0025] 2、测定方法:本测定方法采用中国药典2015年版一部中汉桃叶片的总黄酮含量测 定法。
[0026] 2.1对照品溶液的制备:准确称取102mg芦丁对照品置50ml容量瓶中，加入60%乙 醇35ml，超声处理使完全溶解，放冷，加60 %乙醇至刻度，摇匀。即得质量浓度为2.04mg/ml 的对照品溶液。精密量取5 m 1，置5 0 m 1容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得质量浓度为 0.204mg/ml的对照品稀释溶液。
[0027] 2.2标准曲线的制备：精密量取对照品稀释溶液11111，21111，31111，41111，51111，61111，分别 置25ml容量瓶中，加水至6ml，加5 %亚硝酸钠溶液lml，混匀，放置6分钟，加10 %硝酸铝溶液 lml，摇匀，放置6分钟，加4%氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应 的试剂作空白，照紫外-可见分光光度法，在500nm波长处测定吸光度。根据测定结果计算标 准曲线。
[0028] 所得标准曲线的回归方程为:Y=0 · 0092+0 · 0113X，R=0 · 9998 (X单位为ug/ml)。
[0029] 2.3测定总黄酮含量:将各发酵组合物的pH值调至和对应未发酵组合物相同的水 平，摇匀各样品，分别精密量取样品液l〇ml，缓缓加入无水乙醇15ml，边加边振摇，放置10分 钟后，密封，离心，上清液转移至25ml容量瓶中，加少量60%乙醇清洗沉淀并定容至刻度。精 密量取5ml加水定容至100ml，摇匀，即得供试品溶液。精密吸取供试品溶液5ml，置25ml容量 瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自"加水至6ml"起，依法操作，另精密吸取供试品溶液 5ml，加水稀释至25ml，摇匀，作空白，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品中芦丁的 量，计算，即得。
[0030] 3、结果:总黄酮含量测定结果见表1 表1各组别总黄酮含量测定结果比较
4、结论:从表中可以看出各组发酵组合物与对应未发酵组合物比较，发酵组合物各组 总黄酮含量明显增多，说明本发明的制备方法可以提高本发明所涉及的中药复方组合物中 总黄酮的含量，从而可以从总黄酮方面增强本发明所涉及的中药复方组合物治疗疾病的功 效。
[0031] 实验例2、临床试验： 1、病例选择： 选择确诊的乳腺癌患者140例进行临床观察，患者随机分成治疗组和对照组，治疗组又 分为治疗a组、治疗A组、治疗b组、治疗B组、治疗c组、治疗C组，各组患者均为女性，各组患者 的基本信息见表2,两组病例的基本信息及临床症状轻重程度基本一致，无显著差异，所涉 及资料数据具有可比性。
[0032]表2各组患者基本信息统计
2、药物选择： 治疗A、B、C组分别服用本发明益生菌发酵中药复方组合物A、B、C，治疗a、b、c组分别服 用与本发明益生菌发酵中药复方组合物A、B、C对应的未发酵组合物a、b、c，口服，每天 250ml，分早晚两次服用;30天为1个疗程，病情严重者遵医嘱酌增用量。
[0033] 对照组服用醋酸甲羟孕酮片，口服，一次100mg，一日3次，或口服500mg，每日1~2 次，作为肌内注射后的维持量。
[0034] 3、疗效判定： (1)治愈:肿块消失，身体恢复正常。
[0035] (2)显效:肿块明显缩小，身体明显好转。
[0036] (3)有效:肿块有所缩小，身体有所好转。
[0037] (4)无效:通过治疗后肿块扩大或无缩小。
[0038] 4、结果：（见表3) 结果显示，各治疗组的治愈率和总有效率明显高于对照组，并且发酵组合物治疗组的 总有效率均高于对应的未发酵组合物治疗组，说明本发明的制备方法可以提高本发明所涉 及的中药复方组合物治疗乳腺癌的总有效率。
[0039] 表3各组疗效对比
5、典型临床案例 临床案例1、李某，女，51岁，患者发觉右乳至右腋下不适，前往医院检查，确诊为右乳腺 癌，患者形体消瘦，心悸气短，面色晦暗，倦怠乏力，苔薄质红，脉细，服用本发明益生菌发酵 中药复方组合物A治疗一个疗程后，面色有所改善，精神状态好转，继续服用一个疗程，食欲 转好，体重正常，体力如常人，检查肿瘤指标均正常。
[0040] 临床案例2、陈某，女，63岁，诊断为乳腺癌，同时予乳腺根治术，入院行化疗方案治 疗，但因恶心呕吐等胃肠道反应强烈，食欲不佳，免疫力下降，终止化疗药治疗，改服本发明 益生菌发酵中药复方组合物B治疗，一周后可正常进食，服用一个疗程后，经检查身体状况 良好，且食欲较好，一切正常，长期服用本药物，病情稳定，随访至今未见复发。
[0041] 临床案例3、孙某，女，42岁，患者乳房有肿块，表面凹凸不平，边缘界限不清，推之 不动，腋窝淋巴结肿大，且伴有疼痛，身体乏力，食欲不振，睡眠质量差等症状，入院治疗确 诊为乳腺癌，服用本发明的益生菌发酵中药复方组合物C治疗一个疗程后，肿块有所缩小， 疼痛减轻，食欲有所改善，睡眠质量提高，可从事简单的体力劳动。继续服用一个疗程后，疼 痛消失，肿块缩小明显。又服用一个疗程后，肿块全部消失，精神状态较好，随访至今未复 发。
[0042] 6、结论： 本发明的益生菌发酵中药复方组合物可以提高本发明所涉及的中药复方组合物治疗 乳腺癌的总有效率，可减轻患者因放化疗产生的消化障碍、身体乏力等症状，且口感适中， 易于患者服用，吸收快疗效好，并可有效抑制乳腺肿瘤的增长，改善患者的身体状况和生活 质量，提高患者的免疫力，利于病情的好转，延长患者生命期，治愈率在85 %左右，且安全有 效，无毒副作用。
【主权项】
1. 一种治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物，其特征在于，该组合物由中药复方 药材经提取后加入不同配比的营养物和无机盐，高温灭菌，接入复合益生菌发酵后稳定化 处理制得； 所述的中药复方由以下重量份的中药成分组成:浙贝母12~40份、土贝母12~40份、山 慈菇12~36份、夏枯草20~60份、蒲公英40~60份、连翘20~60份、漏芦12~36份、泽兰12~ 48份、瓜蒌36~60份、路路通12~40份、柴胡12~40份、当归20~48份、白芍12~60份、丹参 24~60份、穿山甲4~40份、王不留行12~40份； 所述的营养物为葡萄糖、蛋白胨、酵母膏和酵母粉； 所述的益生菌为双歧杆菌和乳杆菌。2. 根据权利要求1所述的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物，其特征在于，所述 的中药复方由以下重量份的中药成分组成:浙贝母24份、土贝母24份、山慈菇20份、夏枯草 24份、蒲公英48份、连翘24份、漏芦24份、泽兰24份、瓜蒌48份、路路通24份、柴胡24份、当归 24份、白芍24份、丹参40份、穿山甲6份、王不留行24份。3. 根据权利要求1所述的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物，其特征在于，所述 葡萄糖的加入量为0.7g/100ml，所述酵母膏的加入量为0.13g/100ml，所述酵母粉的加入量 为0 · 07g/100ml，所述蛋白胨的加入量为0 · 28g/100ml。4. 根据权利要求1所述的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物，其特征在于，所述 的无机盐为K2HPO4.3H2O 0.1g/100ml、KH2P〇4 0.1g/100ml、硫酸亚铁·7Η20 5.0mg/100ml、硫 酸锌·7Η20 4.4mg/100ml、硫酸镁·7Η20 50mg/100ml。5. 根据权利要求1所述的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物，其特征在于，所述 的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌或婴儿双歧杆菌;所述的乳杆菌 选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌。6. 根据权利要求1-5任一项所述的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物，其特征 在于，在益生菌发酵中药复方组合物中，可添加或不添加甜味剂，所述的甜味剂为0~3.5g/ 100ml的鹿糖和/或0~0.02g/100ml的三氯鹿糖。7. 权利要求1 _6任一项所述的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物的制备方法， 其特征在于，步骤如下： 1) 浙贝母、土贝母、山慈菇、穿山甲、丹参粉碎过40-60目筛，加入2倍量的水浸泡1-2小 时，得药粉浸泡液备用；当归、连翘粉碎过20-40目筛，加入5倍量水浸泡0.5小时，水蒸气蒸 馏2小时收集挥发油，得蒸馏液备用，药渣与夏枯草等其它九味药加水煎煮两次，每次1-2小 时，煎液滤过，合并滤液，滤液浓缩至相当于上述浙贝母等药粉3-10倍量的体积，得浓缩液 a； 2) 将上述浙贝母等药粉浸泡液带药渣与浓缩液a混合，加入不同配比的葡萄糖、蛋白 胨、酵母膏、酵母粉、无机盐，调节pH值至7.0,于115°C高温高压灭菌1小时，得无菌中药复方 提取物； 3) 当上述无菌中药复方提取物温度降至39°C时，接种预培养的各体积百分比为0.5%~ 1.0%的一种或两种及以上双歧杆菌菌液，常规培养约2~6小时后，再次接种预培养的各体 积百分比为0.5%~1.0%的一种或两种及以上乳杆菌菌液，继续培养20~26小时；或者同时 接种预培养的各体积百分比为〇. 5%~1.0%的一种或两种及以上双歧杆菌菌液和各体积百 分比为0.5%~1.0%-种或两种及以上乳杆菌菌液，发酵22~30小时，当pH值降至4.1以下 时，结束发酵，得发酵液； 4)将步骤3)得到的发酵液离心处理得发酵离心液备用，药渣加入5倍量的75%乙醇回流 提取两次，每次1小时，滤液合并得醇提液，减压蒸馏回收乙醇至相对密度为1.04-1.08,得 浓缩液b，浓缩液b与上述发酵离心液及步骤1)的蒸馏液混合，定容，于115°C高温高压灭菌 40min，即得所述的益生菌发酵中药复方组合物。8. 根据权利要求7所述的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物的制备方法，其特 征在于，为了改善口感，可在所述制备方法的步骤2)的浓缩液a中或步骤4)的浓缩液b中加 入甜味剂，所述甜味剂的加入量为蔗糖〇~3.5g/100ml和/或三氯蔗糖0~0.02g/100ml。9. 权利要求1-6任一项所述的治疗乳腺癌的益生菌发酵中药复方组合物在制备治疗乳 腺癌的药物中的应用。10. 根据权利要求9所述的应用，其特征在于，将益生菌发酵中药复方组合物按照常规 的制药方法，配制成适于口服给药的液体制剂或固体剂型的药物。
【文档编号】A61K36/898GK106039001SQ201610379325
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月1日
【发明人】吴炳新, 甄宗武, 牛纪江, 孙筱林, 陆继臣
【申请人】三株福尔制药有限公司