一种用于单细胞凝胶电泳的防脱载玻片的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型属于分子生物学领域，具体涉及一种用于单细胞凝胶电泳的防脱载玻片及用途。
【背景技术】
[0002]Singh于1988年建立了单细胞凝胶电泳技术(single cell gelelectrophoresis，SCGE)，即断裂的DNA碎片在碱性或中性细胞裂解液的作用下，从DNA的超螺旋结构中释放出来，在电泳时移向阳极呈彗星样影像。它可以检测到单个真核细胞中DNA单、双链断裂，碱性不稳定性位点和DNA延迟修复位点。
[0003]目前绝大多数SCGE研究均是通过在显微镜下拍照记录彗星图像，进一步使用相关软件分析彗星头和尾的参数。载玻片上铺胶是凝胶电泳成败的关键，目前多用磨砂载玻片，这种方法需要三层胶依次铺到载玻片上，每层胶制作完成后需要用盖玻片压平使其牢固结合载玻片或下层凝胶。每层胶凝固需要5-10分钟，整个铺胶需要30-60分钟，浸入电泳缓冲液中仍然出现凝胶漂浮现象或滑落，使得操作十分繁琐、费时，甚至导致实验失败。
【实用新型内容】
[0004]为了解决现有技术的缺陷，提供一种结构简单，操作方便，用于单细胞凝胶电泳的防脱载玻片。
[0005]本实用新型的第一个目是避免凝胶浸入电泳缓冲液及后续冲洗过程中出现漂浮或滑落现象。
[0006]本实用新型的二个目的是简化铺胶的过程。
[0007]本实用新型的第三个目是避免载玻片用标记笔做的各种标记浸入电泳缓冲液及后续冲洗过程中模糊或消失。
[0008]为达到以上目的，本实用新型采用的技术方案是:为了防止凝胶后从载玻片上滑落，本实用新型提供一种用于单细胞凝胶电泳的防脱载玻片，所述的防脱载玻片包括:载玻片主体，凹槽，T型圆柱；所述凹槽位于所述载玻片主体上，所述T型圆柱位于所述凹槽的中心。
[0009]本实用新型所述的载玻片上设计两个圆形的凹槽，加入凹槽中熔化后琼脂糖液体，液面低于载玻片表面，进入电泳缓冲液的过程时不易漂浮。在凹槽中心点设计有圆柱，熔化后琼脂糖液体凝固后可以包裹圆柱，同时圆柱设计成“T型”结构，顶部的结构可以防止凝胶漂浮后滑脱，采用以上技术方案可以将琼脂糖凝胶有效固定到载玻片凹槽及圆柱上。
[0010]进一步本实用新型采用上述技术方案设计，不需依靠盖玻片压到熔化后琼脂糖形成胶面，加入两个圆形的凹槽的熔化后琼脂糖液体依靠自身重量形成平整的胶面，本实用新型采用只需用滴加一层细胞溶液和凝胶按一定比例的混合物，使得铺胶过程简单，操作方便。
[0011]进一步，载玻片的一端刻有编号，避免后期用标记笔做的各种标记浸入电泳缓冲液及后续冲洗过程中模糊或消失，导致所观察的样品编号混乱。
【附图说明】
[0012]图1为本实用新型防脱载玻片的平面结构示意图；
[0013]图2为本实用新型防脱载玻片的剖面结构示意图；
[0014]图中所示:
[0015]1、载玻片主体，2、凹槽，3、T型圆柱，4、标记编号。
【具体实施方式】
[0016]下面结合附图和实施例对本实用新型进行详细的描述。
[0017]如图1所示，为了避免凝胶浸入电泳缓冲液及后续冲洗过程中出现漂浮或滑落现象，本实用新型载玻片上主体I设计两个圆形的凹槽2，凹槽直径l-2cm，并在凹槽中心点设计有圆柱3，圆柱高度与凹槽的深度一致为1-1.5mm,圆柱设计成T型结构，圆柱直径
1.5_2mm，顶部长度 2-2.5mm,厚度 0.3-0.5mm。
[0018]铺胶时需要将装有PBS (磷酸盐缓冲液)溶解琼脂糖的锥形瓶加热，等待温度下降到所需温度，滴到载玻片上冷却后形成凝胶。本实用新型设计了两个圆形的凹槽，加入熔化后琼脂糖液体，液面低于载玻片表面，进行各种操作时外力不容易使得凹槽中的凝胶漂浮。同时在凹槽中心点设计有圆柱，熔化后琼脂糖液体滴加到凹槽，确保液面覆盖整个凹槽底面，且液面高度低于载玻片表面，这样凝固后凝胶可以包裹圆柱，凹槽四周和圆柱的共同作用增加凝胶附着载玻片的力度。同时圆柱设计成“T型”结构，顶部的结构可以防止凝胶漂浮后通过圆柱滑脱，采用以上技术方案可以将琼脂糖凝胶有效固定到载玻片凹槽及圆柱上，防止凝胶从载玻片上漂浮或滑落。
[0019]进一步本实用新型采用上述技术方案设计，不需依靠盖玻片压到熔化后琼脂糖形成胶面，加入两个圆形的凹槽的熔化后琼脂糖液体依靠自身重量形成平整的胶面。传统方法需要铺三层胶，依靠第一层与磨砂载玻片牢固结合，中间胶含有细胞，上层再加一层胶，形成“三明治”样的结构。铺胶过程需要依靠盖玻片压到熔化后琼脂糖并在温度降低后凝固形成胶面，然后小心抽掉盖玻片，表面涂上矿物油，继续相同的步骤制作第二、第三层胶。操作过程需要熟练并掌握一定的技巧，才能保证操作成功。本实用新型的防脱载玻片由于采用了凹槽结构，“T型”圆柱等多重防止凝胶脱离载玻片措施，可以避免凝胶漂浮、滑落。所以采用本实用新型的防脱载玻片只需用滴加一层细胞溶液和凝胶按一定比例的混合物，使得铺胶过程简单，操作方便，成功率高。
[0020]本实用新型载玻片的一端刻有编号4，遇到中性，酸性，碱性液体，水溶性，脂溶性液体均不会破坏刻有的标记编号。标号从001-999，在一次或一批实验过程中样品基本不会重复。刻好的编号避免后期用标记笔做的各种标记浸入电泳缓冲液或后期冲洗过程中模糊或消失，导致所观察的样品编号标记混乱。同时标记的编号为雕刻从上向下凹进去，凝胶所含的细胞需要染色后在暗室中进行荧光显微镜观察，这时可以预先在标记编号上滴加少许荧光染料，暗室中观察凝胶细胞的图像时可以方便记录样品的编号。
[0021]显然，本领域的技术人员可以对本实用新型进行各种改动和变型而不脱离本实用新型的精神和范围。这样，倘若对本实用新型的这些修改和变型属于本实用新型权利要求及其同等技术的范围之内，则本实用新型也意图包含这些改动和变型在内。
【主权项】
1.一种用于单细胞凝胶电泳的防脱载玻片，其特征在于:所述的防脱载玻片包括:载玻片主体(1)，凹槽(2)，T型圆柱(3);所述凹槽位于所述载玻片主体上，所述T型圆柱位于所述凹槽的中心。2.如权利要求1所述的用于单细胞凝胶电泳的防脱载玻片，其特征在于:所述凹槽有两个，每个凹槽直径l_2cm，所述圆柱高度与凹槽的深度一致为1-1.5mm，圆柱直径1.5_2mm，顶部长度 2-2.5mm,厚度 0.3-0.5mm。3.如权利要求1或2所述的用于单细胞凝胶电泳的防脱载玻片，其特征在于:所述载玻片的一端刻有标记编号(4)。
【专利摘要】本实用新型公开了一种用于单细胞凝胶电泳的防脱载玻片，所述的防脱载玻片包括：载玻片主体，凹槽，T型圆柱；所述凹槽位于所述载玻片主体上，所述T型圆柱位于所述凹槽的中心。所述载玻片的一端刻有标记编号。本实用新型所述的载玻片上设计两个圆形的凹槽，加入凹槽中熔化后琼脂糖液体，液面低于载玻片表面，进入电泳缓冲液的过程时不易漂浮。在凹槽中心点设计有圆柱，熔化后琼脂糖液体凝固后可以包裹圆柱，同时圆柱设计成“T型”结构，顶部的结构可以防止凝胶漂浮后滑脱，采用本实用新型可以将琼脂糖凝胶有效固定到载玻片凹槽及圆柱上。
【IPC分类】G02B21/34
【公开号】CN204855929
【申请号】CN201520454101
【发明人】刘建功, 党旭红, 董娟聪, 张慧芳, 张睿凤, 张忠新, 刘红艳, 段志凯
【申请人】中国辐射防护研究院
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年6月29日