本发明涉及肥料制备领域，具体涉及一种利用杏鲍菇菌糠制备的烟草专用有机菌肥。
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：杏鲍菇(Pleurtuseryngii)属于伞菌目侧耳科侧耳属，是一种食用菌。杏鲍菇菌肉又肥又厚，口感脆嫩香甜，丰富的营养和鲜美的味道给杏鲍菇带来了“平菇王”的美誉。杏鲍菇菌糠主要是利用作物秸秆、木屑、棉籽壳等原料进行食用菌代料栽培后的培养基剩余物，是食用菌菌丝残体和经过食用菌酶解作用结构发生质变的粗纤维的复合物。据统计，菌糠在农业、种植业、养殖业、燃料、环境等领域都有应用。杏鲍菇菌糠中的氮磷钾含量都比较丰富。如果将其加工处理成新型生物质有机肥，会使有机肥中的氮磷钾含量大幅度的提高。其可以作为蔬菜、果品的优质肥料，并且能够达到了保水保肥的功效，促进作物的产量和品质,还达到了环保效应。菌糠还可以作为沼气生产的原料，在农村非常适合使用生产食用菌所剩的菌糠废渣生产沼气，既可以作为燃气，又可以储粮、水果保鲜等等。菌糠作为沼气生产原料，是一条实现农作物、食用菌、沼气、有机肥、饲料、农作物循环利用高效生态农业模型的好途径。菌糠还可以作为牲畜的代替饲料。大多数牲畜体内缺乏纤维素，不能分解高纤维、高木质的玉米杆、棉籽壳等饲料，菌糠中含有菌丝体可以产生分解纤维素、木质素的活性物质和酶。烟草属草茄木，茄科一年生或有限多年生草本植物，基部稍木质化。花序顶生，圆锥状，多花；蒴果卵状或矩圆状，长约等于宿存萼。夏秋季开花结果。主要分布于南美洲、南亚、中国。《全国中草药汇编》记载，烟草性温味甘，有毒，具有消肿、解毒、杀虫等功效，主要用于疔疮肿毒，头癣，白癣，秃疮，毒蛇咬伤等症，还可治疗项疽、背痈、风痰、鹤膝(包括骨结核、慢性化脓性膝关节炎等)等病，也可用于灭“四害”(钉螺、蚊、蝇、老鼠)和杀虫等。烟草除能制成卷烟、旱烟、斗烟、雪茄烟等供人吸食外，尚有多种医疗用途。虽然烟草给人类带了很多危害，甚至被称为“毒草”，许多国家或地区明文限制流通或抽吸，世界卫生组织成员还签署了《烟草控制框架公约》。但作为一种历史悠久的药用植物，其医疗价值不能因其危害性而被抹杀。然而，烟草在生产中普遍存在产量不高等诸多不利因素。为了促进烟草产业的发展，开发效果优异的有机菌肥具有重大意义。技术实现要素：本发明的目的即是提供一种效果优异的利用杏鲍菇菌糠制备的烟草专用有机菌肥。本发明解决该技术问题的技术方案是：一种利用杏鲍菇菌糠制备的烟草专用有机菌肥，其通过以下方法制备而成：(1)菌种活化培养基的配制：称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中，溶解混合均匀后，调节pH，灭菌；(2)菌种的活化：将解淀粉芽孢杆菌在无菌操作台采用无菌操作的方法进行接种，放入恒温培养箱内培养；(3)菌种的扩大培养：按5gLB肉汤培养基：200mL水的比例将其振荡至培养基完全溶解，得LB肉汤培养基，灭菌，将活化好的菌种取出备用，在准备好的超净工作台上采用无菌操作的方法将活化的解淀粉芽孢杆菌接种后放置在带摇床的培养箱内培养；(4)菌糠的发酵：按25kg杏鲍菇菌糠：3000mL蒸馏水：400ml解淀粉芽孢杆菌菌液：400ml枯草芽孢杆菌菌液的比例将其混合发酵，用铁铲将单堆发酵样品反复翻动，达到透气效果，整个发酵过程中使菌糠始终保持处于湿润状态，即单手抓取发酵中的样品菌糠时，用力握紧菌糠恰有极少量液体流出，每天定时观察含水量变化，适当并等量地对各个发酵样品补充水分。所述步骤(1)调节pH为7.6。所述步骤(2)和步骤(3)中的培养时间为24h，温度为30℃。所述步骤(4)的发酵时间为14天。本发明的有益效果：实验结果表明，本发明通过腐熟发酵的杏鲍菇菌糠有机菌肥的全氮、全磷及全钾的含量有较明显的提高，说明经过腐熟发酵的杏鲍菇菌糠营养物质进一步的提高了，这将更好的利用到烟草种植中。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例或份数按重量计。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。实施例1利用杏鲍菇菌糠制备的烟草专用有机菌肥的制备(1)菌种活化培养基的配制a、称量：按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。牛肉膏玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。b、溶化：在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。在配制固体培养基时，在已溶化好的材料中加入琼脂，稍稍加热溶化琼脂，然后不断地搅拌，防止琼脂过热黏底使烧杯破裂。最后加水至所需的量。c、调pH：在调pH前，先用pH试纸测一下培养基的原来的pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中加入1mol﹒L-1的NaOH若干滴，一边加一边搅拌，然后用pH试纸测其pH值，直到pH达7.6。相反，则用1mol﹒L-1的HCl进行调节。d、分装要根据实验要求，将配制的培养基分别装入试管内或三角烧瓶内。(1)液体分装：分装高度最好在试管高度的1/4左右。(2)固体分装：装量最好在试管的1/5处，灭菌后制成斜面。若装在三角烧瓶，装量不超过三角烧瓶容积的一半最好。e、加塞：培养基分装好后，分别在试管口和三角烧瓶口上塞上棉花，阻止空气中的微生物跑进培养基内污染了培养基。然后将全部试管和三角烧瓶用麻绳捆扎好，再在外面包两层报纸，注明培养基名称、组别、日期。f、灭菌：将上述配置好的培养基及实验所需的玻璃仪器放于高压蒸汽灭菌锅中，在121℃条件下灭菌30min。g、搁置斜面：当灭菌的试管培养基冷却到50℃左右，将试管棉塞端搁靠着(用东西垫着)，搁置的斜面长度为试管总长的一半最好。h、无菌检查：将灭菌好的培养基放到37℃的恒温箱中培养24小时左右，检查灭菌是否彻底。(2)菌种的活化a、试管培养基制备：取6支灭菌后的试管，每支装培养基约8ml,编号1～6。将6只试管用棉塞密封，放入高压蒸汽灭菌锅中，在121℃条件下灭菌30min。冷却后取出放入恒温培养箱中培养24h，温度30℃。24h后，取出试管检查是否染菌。无染菌则取出备用；b、培养：将解淀粉芽孢杆菌在无菌操作台采用无菌操作的方法分别接种于1、2、3号试管内，将枯草芽孢杆菌采用无菌操作的方法分别接种于4、5、6试管内。放入恒温培养箱内培养培养24h，温度30℃。(3)菌种的扩大培养a、LB肉汤培养基的配制：取36个干净的500mL容量三角瓶，每个三角瓶装5gLB肉汤培养基与200mL水，振荡至培养基完全溶解，并用棉塞密封三角瓶。b、灭菌：将36个装有LB培养基的三角瓶用干净的报纸进行包裹，放于高压蒸汽灭菌锅中，在121℃条件下灭菌30min。待高压蒸汽灭菌锅冷却后，将灭菌后三角瓶取出放于培养相中培养24h，检验是否灭菌彻底。无染菌情况取出备用。c、将活化好的菌种取出备用，在准备好的超净工作台上采用无菌操作的方法将活化的解淀粉芽孢杆菌接种到18个三角瓶中，并将活化的枯草芽孢杆菌接种至另外18个三角瓶中，所有三角瓶塞上棉塞密封。d、最后将三角瓶放置在带摇床的培养箱内，培养24h，温度30℃。24h后，得到18个200ml解淀粉芽孢杆菌菌液，18个20芽孢杆菌菌液。(4)菌糠的发酵a、堆置发酵：以25kg杏鲍菇菌糠、3000mL蒸馏水、400ml解淀粉芽孢杆菌菌液、400ml枯草芽孢杆菌菌液混合成一堆为一个实验样品，堆置于开放通风室内，形状呈圆锥体，底部直径在100cm左右，高45cm左右。按照相同条件制作9个实验样品，在每个实验样品顶端垂直插入一支温度计，使体温计未被菌糠覆盖的长度控制在4cm左右。将9个实验样品依次编号为A1、A2、A3，B1、B2、B3，C1、C2、C3。b、含水量控制：整个发酵过程中使菌糠始终保持处于湿润状态，即单手抓取发酵中的样品菌糠时，用力握紧菌糠恰有极少量液体流出。每天定时观察含水量变化，适当并等量地对各个发酵样品补充水分。c、翻堆：用铁铲将单堆发酵样品反复翻动，达到透气效果。编号A1、A2、A3的发酵样品每天翻堆一次。编号B1、B2、B3的发酵样品每两天翻一次。编号C1、C2、C3的发酵样品每三天翻一次。翻堆时间在当天下午1时进行，翻堆前记录各样品温度计显示的温度数值及气温数值。d、发酵14天。试验例一杏鲍菇菌糠发酵产品中无机组分含量的测定(1)菌糠外观变化情况在发酵过程中对菌糠的外观进行了观察，结果如表1所以：表1发酵前后菌糠外观的变化结果显示，通过微生物发酵作用，在微生物发展繁殖过程中分泌了一些蛋白酶类，这些蛋白酶类对菌糠中的大分子物质进行分解和利用，部分菌糠成分被分解，随着微生物的不断生长繁殖，形态上菌糠粒径整体变小了，腐熟的挥发性气体越来越重，颜色也变深了。(2)全氮含量的测定采用凯氏定氮法测得样品的氮含量，结果如表2所示：表2发酵前后全氮含量对比结果显示，A、B、C三组菌糠样品在发酵后的全氮的含量分别提高了0.945％、0.954％、1.112％。(3)全磷含量的测定采用磷钼蓝比色法测样品全磷含量，结果如表3所示：表3发酵前后全磷(P2O5)含量对比结果显示，A、B、C三组菌糠样品在发酵后的全磷含量分别提高了0.249％、0.221％、0.221％。(4)全钾含量的测定按火焰光度法测得样品全钾含量，结果如表4所示：表4发酵前后全钾(K2O)含量对比结果显示，A、B、C三组菌糠样品在发酵后的全钾含量分别提高了1.184％、1.466％、1.480％。试验例二杏鲍菇菌糠发酵产品中有机物组分含量的测定(1)有机质含量测定通过重铬酸钾容量法，最后测得各组发酵菌糠中有机质的含量如表5所示。表5菌糠发酵后同组样品有机质含量平均值(2)纤维素含量测定纤维素是由葡萄糖基组成的多糖，在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖，然后在浓硫酸作用下，使单糖脱水生成糠醛类化合物。利用蒽酮试剂与糠醛类化合物的蓝绿色反应进行比色测定吸光度，通过纤维素标准浓度曲线计算样品纤维素含量，结果如表6所示。表6菌糠发酵后同组样品纤维素含量平均值(3)蛋白质含量测定蛋白质含量的测定使用全量凯氏定氮法测出样品中的总含氮量，再以总氮量乘以蛋白质系数而求出蛋白质的含量，结果如表7所示表7菌糠发酵后同组样品蛋白质含量平均值结果显示，此次菌糠发酵使用的菌种之一是解淀粉芽孢杆菌产蛋白酶，而解淀粉芽孢杆菌产蛋白酶，对蛋白质具有水解作用。所以，在发酵程度为A组>B组>C组的情况下，其蛋白质水解数量应为A组>B组>C组，蛋白质含量应为A组<B组<C组，实验结果与理论相符。(4)氨基酸含量测定菌糠发酵后测得的各组样品氨基酸含量结果如表8所示。表8菌糠发酵后同组样品氨基酸含量平均值结果显示，本发明的利用杏鲍菇菌糠制备的烟草专用有机菌肥的有机质、纤维素、蛋白质和氨基酸含量丰富。试验例三利用杏鲍菇菌糠制备的烟草专用有机菌肥在香姜种植中的应用效果将棚区平均分成两部分，一半施用实施例1的有机菌肥种植烟草，一半施用普通化肥种植烟草，其他管理同田间常规管理。(1)测定幼苗株高、茎粗、叶片数、叶绿素含量和根系活力，结果如表9所示。表9不同组别生长状况性状实施例1普通化肥株高(cm)8.95.9茎粗(cm)4.363.36叶片数(片)4.83.1叶绿素含量(mg/g)3.652.88根系活力(％)57.4841.27结果显示，苗期施用实施例1的有机菌肥后幼苗株高增加、茎粗增粗、叶片数增加、叶绿素含量高、根系活力明显增强。由此表明，本发明的有机菌肥对提高烟草幼苗素质，培育壮苗，促进植株生长方面具有积极作用。(2)测定烟草产品中烟碱、绿原酸和芦丁的含量，结果如表10所示。表10烟草产品中烟碱、绿原酸和芦丁的含量含量(w/w％)实施例1普通化肥烟碱0.720.51绿原酸3.211.89芦丁1.650.89结果显示，施用实施例1的有机菌肥后的烟草产品烟碱、绿原酸和芦丁的含量均有所增加，表明本发明的有机菌肥对提高烟草产品质量具有显著作用。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。当前第1页1 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