抑制水果或蔬菜收获后疾病或脱水的过敏反应诱导子的制作方法

文档序号:3541786阅读:466来源:国知局

专利名称::抑制水果或蔬菜收获后疾病或脱水的过敏反应诱导子的制作方法
技术领域
:本发明涉及对水果或蔬菜进行处理以抑制收获后疾病和/或收获后蔬菜或水果脱水的方法。
背景技术
:收获后疾病常常是发生在田地或果园的疾病的延伸。例如,果园中核果(Moniliniafructicola(Wint.)Honey)的褐腐病可导致花腐病和桑芽枯病。如果不对水果进行冷藏,果园中的感染在收获时可能是观察不到的。炭疽病可攻击柑橘、鳄梨、芒果、番木瓜、以及多种热带和亚热带物种的花或叶及未成熟的果实;发育中的果实的感染通常是潜伏性的,腐烂病变仅在水果开始成熟时显现。Peziculamalicorticis(Jacks.)Nannfld可引起苹果树和梨树枝干的枯病,此感染在发育中的果实中是潜伏性的,只有在果实储存几个月后,腐烂才会开始,并在-1℃储存时继续腐烂,因为这种生物在很低的温度下能够生长。上述例子中的真菌能够穿透果实的表皮和外皮。不管能不能直接穿透,伤口常常是真菌进入果实的通常方式。在收获和处理过程中,割伤、刺伤、碰伤、擦伤是不能完全避免的。如果外皮和表皮破了,孢子就能在新鲜伤口处发现对孢子萌发和繁殖较为理想的营养和湿度。收获时,从母体植物上分离果实就造成了不可避免的伤口来助长梗端腐烂。发生在花端的腐烂与之前在花部分发生的真菌繁殖有关联。例如,在-1℃下贮藏1-2月后,Barlett梨时常发生灰色葡萄孢蒂腐病。果肉腐烂的开始是与保留在果实中的老花柱以及雄蕊相关联的。对花的侵染是在开花期末在花的衰老部分中发生的。绝大多数的这些衰老部分遭受了链格孢和常见的腐生植物真菌的侵袭,而灰色葡萄孢偶尔可见。并非所有含有灰色葡萄孢侵袭过的花部分的果实都在贮藏时腐烂,但相当大比例的这些植物在贮藏时腐烂。相反,如果发育中果实的成熟花部分不含有灰色葡萄孢,测试水果就没有花端腐烂发生。在开花期末,利用杀真菌剂对整个果园进行一次喷药将会大大降低贮存水果的腐烂。许多非常常见的收获后病原体尤其严重的一方面是在腐烂水果上生长的菌丝与临近水果接触并穿透临近水果的接触感染。如果时间充足,通过真菌菌丝连接在一起的腐烂水果不断扩大的‘巢’将会涉及容器中的所有水果。在很大程度上,疾病或疾病的威胁规定了处理易腐坏水果的方式。在近几十年,人们将水果运送到离其产地越来越远的地方。然而,只有将商品的寿命延伸到其极限,对远途市场的开发才能带来大的经济效益。类似的,通过贮藏水果来延长销售时间直至它们接近生理寿命末期的时候就会引起另外的疾病问题。如果这些情况发生在市场上,损失就尤其严重,因为可能会造成远远超过生产成本的分类、包装、冷却、贮存及运输成本。甚至更重要的长期重要性是可能会损害声誉,导致未来销售下降。在世界范围内,水果收获后疾病每年导致水果工业15-25%的损失。其中很大程度要归因于微生物引起的腐烂。过去控制收获后疾病的主要方式是杀真菌剂,现在要慎重使用,因为杀真菌剂用于加工后的食品会引起潜在的致癌危险。因此,在开发对人体健康和环境较少危害的水果和蔬菜收获后疾病生物控制法方面的努力加强了。人们在利用拮抗性微生物作为合成杀真菌剂的可行性替代物的评估上给予了相当的注意力。在利用拮抗性微生物来控制收获后疾病方面有两种基本的方法。已经证明,已经存在于水果和蔬菜表面的天然拮抗剂能控制多种日用品上的许多腐烂病原体。另外,已经证明,人工导入的拮抗剂在生物控制收获后病原体方面是有效的。自1993年起,爆发了对利用人工导入拮抗剂来生物控制收获后疾病方面的研究,主要是在水果疾病方面(Janisiewicz,“BiologicalControlofDiseasesofFruit,”InBiocontrolofPlantDiseasesII,Mukergieetal.(ed.),CRCPress,RocaRaton,pp.153-165(1988)和Wilsonetal.,“PotentialforBiologicalControlofPostharvestPlantDiseases,”PlantDisease69375-378(1985))。例如,苹果腐烂是利用酵母来进行控制的(Wisniewskietal.,“BiologicalControlofPostharvestDiseasesofFruitInhibitionofBotrytisRotonApplesbyanAntagonisticYeast,”Proc.ElectronMicrosc.Soc.Am.46290-91(1988)),而杏的褐腐病是利用枯草芽孢杆菌来控制的(Puseyetal.,“PostharvestBiologicalControlofStoneFruitBrownRotbyBacillussubtilis,”PlantDis.68753-56(1984))。利用木霉的一个种进行控制后,柠檬皮中的发霉率从35%下降到8%(DeMatos,“ChemicalandMicrobiologicalFactorsInfluencingtheInfectionofLemonsbyGeotrichumcandidumandPenicilliumdigitatum,”Ph.D.dissertation,UniversityofCalifornia,Riverside,106pp.(1983))。对柑橘腐烂病原体的生物控制是利用枯草芽孢杆菌来进行的(Singhetal.,“BacillussubtilisasaControlAgentAgainstFungalPathogensofCitrusFruit,”Trans.Br.Mycol.Soc.83487-90(1984))。这些拮抗剂具有多种作用方式抗生现象或竞争营养与空间,或二者兼具,在宿主组织中诱导抗性、以及直接与病原体相互作用(Wilsonetal.,“BiologicalControlofPostharvestDiseasesofFruitsandVegetablesAnEmergingTechnology,”Annu.Rev.Phytopathol.27425-441(1989))。虽然利用拮抗性细菌或真菌进行处理至少可在一定程度上有效控制收获后疾病,但在这些方法用于商业应用之前,还需要考虑很多因素。首先,在处理过程中,一定要保证拮抗剂的生长及持续应用。这可能造成重大的开支和管理负担,这要依赖于这些拮抗剂的使用时间和使用频率。并且,种植者是否愿意维持生物反应器以使特定的拮抗剂菌株生长和繁殖也是值得怀疑的。其次,在收获后水果的运输过程中,那些拮抗剂的效力要依赖于贮存条件。一些拮抗剂可能不能承受运输途中条件的变化,从而使得病原体克服了拮抗剂的抑制作用。考虑到上述问题,已经报道的控制植物病原体的拮抗剂很少有成功的从实验室转移到田地或收获后环境中也就不足为奇了。因此,仍然需要提供有效的、商业可行的方法来处理水果和蔬菜以控制收获后疾病,这样可完全避免,或者显著减少对杀真菌剂处理的需要。尤其是,需要提供一种有效的、可行的并对人类或环境造成很小或不造成危害的处理方法。本发明是用来克服本领域中的这些缺陷及其他缺陷的。发明简述本发明涉及抑制水果或蔬菜收获后疾病或脱水的方法。此方法是在可有效抑制收获后疾病或脱水的条件下,利用过敏反应诱导子(elicitor)蛋白或多肽处理水果或蔬菜来进行的。本发明的进一方面涉及抑制水果或蔬菜收获后疾病或脱水的另一方法。此方法是通过提供利用编码过敏反应诱导子多肽或蛋白的DNA分子转化过的转基因植物或植物种子,并在可有效抑制从转基因植物收获得到的水果或蔬菜收获后疾病或脱水的条件下,种植这些转基因植物或从转基因植物种子得到的转基因植物来实现的。本发明的另一方面涉及DNA构建体,此DNA构建体包含有一个编码过敏反应诱导子蛋白或多肽的DNA分子、可操作性偶联到DNA分子5′端并在水果或蔬菜组织中可有效转录DNA分子的植物可表达启动子、以及可操作性偶联到DNA分子上的3′调节区域,其中,水果或蔬菜组织中的DNA分子的表达给予水果或蔬菜对收获后疾病或脱水的抗性。另外,也公开了表达系统、宿主细胞、以及含有本发明中的异源DNA构建体的转基因植物。按照本发明,过敏反应诱导子蛋白或多肽能用于抑制或控制水果或蔬菜的收获后疾病(即,病原体引起的)。同样的,这样的处理也可用于抑制处理后的水果或蔬菜的收获后脱水。通过实现这些目标,本发明就可使得农产品种植者、仓库包装工人、运输者、以及供货商在降低收获后疾病和脱水导致的损失的条件下来加工、处理和贮存水果和蔬菜。结果就降低了水果和蔬菜从产地到消费者中间的成本。重要的是,处理后的水果或蔬菜的质量提高了。发明详述本发明涉及抑制水果或蔬菜收获后疾病或脱水的方法。此方法是在可有效抑制收获后疾病或脱水的条件下,利用过敏反应诱导子蛋白或多肽处理水果或蔬菜来进行的。本发明的进一方面涉及抑制水果或蔬菜收获后疾病或脱水的另一方法。此方法是通过提供利用编码过敏反应诱导子多肽或蛋白的DNA分子转化过的转基因植物或植物种子,并在可有效抑制从转基因植物收获得到的水果或蔬菜收获后疾病或脱水的条件下,种植这些转基因植物或从转基因植物种子得到的转基因植物来实现的。对于这些方法的应用来讲,合适的过敏反应诱导子蛋白或多肽是那些来源于多种细菌和真菌病原体,优选细菌病原体的蛋白或多肽。源自细菌的示范性过敏反应诱导子蛋白或多肽包括,但并不局限于来源于欧文氏菌属的物种(如解淀粉欧文氏菌、菊欧文氏菌、斯氏欧文氏菌、胡萝卜欧文氏菌,等)、假单胞菌属的物种(如丁香假单孢菌、青枯假单胞菌等)、以及黄单胞菌的物种(如野油菜黄单胞菌)的过敏反应诱导子。除这些源于革兰氏阴性细菌的过敏反应诱导子之外,我们也可利用源于革兰氏阳性细菌的诱导子。一个例子就是源自密执安棍状杆菌坏腐亚种的过敏反应诱导子。源自真菌的示范性过敏反应诱导子蛋白或多肽包括,但并不局限于源于多种疫霉如寄生疫霉、隐地疫霉、肉桂疫霉、辣椒疫霉、大雄疫霉、柑橘褐腐病疫霉等)的过敏反应诱导子(也即elicitin)。优选的是源于解淀粉欧文氏菌、菊欧文氏菌、丁香假单孢菌或青枯假单胞菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽。源于菊欧文氏菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽含有相应于SEQ.IDNO.1的氨基酸序列,如下所示MetGlnIleThrIleLysAlaHisIleGlyGlyAspLeuGlyValSer151015GlyLeuGlyAlaGlnGlyLeuLysGlyLeuAsnSerAlaAlaSerSer202530LeuGlySerSerValAspLysLeuSerSerThrIleAspLysLeuThr354045SerAlaLeuThrSerMetMetPheGlyGlyAlaLeuAlaGlnGlyLeu505560GlyAlaSerSerLysGlyLeuGlyMetSerAsnGlnLeuGlyGlnSer65707580PheGlyAsnGlyAlaGlnGlyAlaSerAsnLeuLeuSerValProLys859095SerGlyGlyAspAlaLeuSerLysMetPheAspLysAlaLeuAspAsp100105110LeuLeuGlyHisAspThrValThrLysLeuThrAsnGlnSerAsnGln115120125LeuAlaAsnSerMetLeuAsnAlaSerGlnMetThrGlnGlyAsnMet130135140AsnAlaPheGlySerGlyValAsnAsnAlaLeuSerSerIleLeuGly145150155160AsnGlyLeuGlyGlnSerMetSerGlyPheSerGlnProSerLeuGly165170175AlaGlyGlyLeuGlnGlyLeuSerGlyAlaGlyAlaPheAsnGlnLeu180185190GlyAsnAlaIleGlyMetGlyValGlyGlnAsnAlaAlaLeuSerAla195200205LeuSerAsnValSerThrHisValAspGlyAsnAsnArgHisPheVal210215220AspLysGluAspArgGlyMetAlaLysGluIleGlyGlnPheMetAsp225230235240GlnTyrProGluIlePheGlyLysProGluTyrGlnLysAspGlyTrp245250255SerSerProLysThrAspAspLysSerTrpAlaLysAlaLeuSerLys260265270ProAspAspAspGlyMetThrGlyAlaSerMetAspLysPheArgGln275280285AlaMetGlyMetIleLysSerAlaValAlaGlyAspThrGlyAsnThr290295300AsnLeuAsnLeuArgGlyAlaGlyGlyAlaSerLeuGlyIleAspAla305310315320AlaValValGlyAspLysIleAlaAsnMetSerLeuGlyLysLeuAla325330335AsnAla此过敏反应诱导子蛋白或多肽的分子量为34kDa,是热稳定性的,甘氨酸含量大于16%,基本上不含半胱氨酸。此菊欧文氏菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽是由含有相应于SEQ.IDNO.2所示核苷酸序列的DNA分子编码的,SEQ.IDNO.2所示核酸序列如下cgattttacccgggtgaacgtgctatgaccgacagcatcacggtattcgacaccgttacg60gcgtttatggccgcgatgaaccggcatcaggcggcgcgctggtcgccgcaatccggcgtc120gatctggtatttcagtttggggacaccgggcgtgaactcatgatgcagattcagccgggg180cagcaatatcccggcatgttgcgcacgctgctcgctcgtcgttatcagcaggcggcagag240tgcgatggctgccatctgtgcctgaacggcagcgatgtattgatcctctggtggccgctg300ccgtcggatcccggcagttatccgcaggtgatcgaacgtttgtttgaactggcgggaatg360acgttgccgtcgctatccatagcaccgacggcgcgtccgcagacagggaacggacgcgcc420cgatcattaagataaaggcggctttttttattgcaaaacggtaacggtgaggaaccgttt480caccgtcggcgtcactcagtaacaagtatccatcatgatgcctacatcgggatcggcgtg540ggcatccgttgcagatacttttgcgaacacctgacatgaatgaggaaacgaaattatgca600aattacgatcaaagcgcacatcggcggtgatttgggcgtctccggtctggggctgggtgc660tcagggactgaaaggactgaattccgcggcttcatcgctgggttccagcgtggataaact720gagcagcaccatcgataagttgacctccgcgctgacttcgatgatgtttggcggcgcgct780ggcgcaggggctgggcgccagctcgaaggggctggggatgagcaatcaactgggccagtc840tttcggcaatggcgcgcagggtgcgagcaacctgctatccgtaccgaaatccggcggcga900tgcgttgtcaaaaatgtttgataaagcgctggacgatctgctgggtcatgacaccgtgac960caagctgactaaccagagcaaccaactggctaattcaatgctgaacgccagccagatgac1020ccagggtaatatgaatgcgttcggcagcggtgtgaacaacgcactgtcgtccattctcgg1080caacggtctcggccagtcgatgagtggcttctctcagccttctctgggggcaggcggctt1140gcagggcctgagcggcgcgggtgcattcaaccagttgggtaatgccatcggcatgggcgt1200ggggcagaatgctgcgctgagtgcgttgagtaacgtcagcacccacgtagacggtaacaa1260ccgccactttgtagataaagaagatcgcggcatggcgaaagagatcggccagtttatgga1320tcagtatccggaaatattcggtaaaccggaataccagaaagatggctggagttcgccgaa1380gacggacgacaaatcctgggctaaagcgctgagtaaaccggatgatgacggtatgaccgg1440cgccagcatggacaaattccgtcaggcgatgggtatgatcaaaagcgcggtggcgggtga1500taccggcaataccaacctgaacctgcgtggcgcgggcggtgcatcgctgggtatcgatgc1560ggctgtcgtcggcgataaaatagccaacatgtcgctgggtaagctggccaacgcctgata1620atctgtgctggcctgataaagcggaaacgaaaaaagagacggggaagcctgtctcttttc1680ttattatgcggtttatgcggttacctggaccggttaatcatcgtcatcgatctggtacaa1740acgcacattttcccgttcattcgcgtcgttacgcgccacaatcgcgatggcatcttcctc1800gtcgctcagattgcgcggctgatggggaacgccgggtggaatatagagaaactcgccggc1860cagatggagacacgtctgcgataaatctgtgccgtaacgtgtttctatccgcccctttag1920cagatagattgcggtttcgtaatcaacatggtaatgcggttccgcctgtgcgccggccgg1980gatcaccacaatattcatagaaagctgtcttgcacctaccgtatcgcgggagataccgac2040aaaatagggcagtttttgcgtggtatccgtggggtgttccggcctgacaatcttgagttg2100gttcgtcatcatctttctccatctgggcgacctgatcggtt2141上述核苷酸和氨基酸序列是已经公开的,并在Bauer等的美国专利NO.5,850,015和Wei等的美国专利NO.5,776,889中有进一步的描述,此处,这两个专利全文引用作为参考。源于菊欧文氏菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽含有相应于SEQ.IDNO.3的氨基酸序列,如下所示MetSerLeuAsnThrSerGlyLeuGlyAlaSerThrMetGlnIleSer151015IleGlyGlyAlaGlyGlyAsnAsnGlyLeuLeuGlyThrSerArgGln202530AsnAlaGlyLeuGlyGlyAsnSerAlaLeuGlyLeuGlyGlyGlyAsn354045GlnAsnAspThrValAsnGlnLeuAlaGlyLeuLeuThrGlyMetMet505560MetMetMetSerMetMetGlyGlyGlyGlyLeuMetGlyGlyGlyLeu65707580GlyGlyGlyLeuGlyAsnGlyLeuGlyGlySerGlyGlyLeuGlyGlu859095GlyLeuSerAsnAlaLeuAsnAspMetLeuGlyGlySerLeuAsnThr100105110LeuGlySerLysGlyGlyAsnAsnThrThrSerThrThrAsnSerPro115120125LeuAspGlnAlaLeuGlyIleAsnSerThrSerGlnAsnAspAspSer130135140ThrSerGlyThrAspSerThrSerAspSerSerAspProMetGlnGln145150155160LeuLeuLysMetPheSerGluIleMetGlnSerLeuPheGlyAspGly165170175GlnAspGlyThrGlnGlySerSerSerGlyGlyLysGlnProThrGlu180185190GlyGluGlnAsnAlaTyrLysLysGlyValThrAspAlaLeuSerGly195200205LeuMetGlyAsnGlyLeuSerGlnLeuLeuGlyAsnGlyGlyLeuGly210215220GlyGlyGlnGlyGlyAsnAlaGlyThrGlyLeuAspGlySerSerLeu225230235240GlyGlyLysGlyLeuGlnAsnLeuSerGlyProValAspTyrGlnGln245250255LeuGlyAsnAlaValGlyThrGlyIleGlyMetLysAlaGlyIleGln260265270AlaLeuAsnAspIleGlyThrHisArgHisSerSerThrArgSerPhe275280285ValAsnLysGlyAspArgAlaMetAlaLysGluIleGlyGlnPheMet290295300AspGlnTyrProGluValPheGlyLysProGlnTyrGlnLysGlyPro305310315320GlyGlnGluValLysThrAspAspLysSerTrpAlaLysAlaLeuSer325330335LysProAspAspAspGlyMetThrProAlaSerMetGluGlnPheAsn340345350LysAlaLysGlyMetIleLysArgProMetAlaGlyAspThrGlyAsn355360365GlyAsnLeuGlnAlaArgGlyAlaGlyGlySerSerLeuGlyIleAsp370375380AlaMetMetAlaGlyAspAlaIleAsnAsnMetAlaLeuGlyLysLeu385390395400GlyAlaAla此过敏反应诱导子蛋白或多肽的分子量大约为39kDa,pI大约为4.3,在100℃下能保持至少10分钟的热稳定性。此过敏反应诱导子蛋白或多肽基本上不含半胱氨酸。在Wei,Z-M.,etal.,“Harpin,ElicitoroftheHypersensitiveResponseProducedbythePlantPathogenErwiniaamylovora,”Science25785-88(1992)中对这个源自菊欧文氏菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽有更详细的描述,此处全文引用作为参考。编码此过敏反应诱导子蛋白或多肽的DNA分子含有相应于SEQ.IDNO.4所示的核苷酸序列,SEQ.IDNO.4所示核苷酸序列如下aagcttcggcatggcacgtttgaccgttgggtcggcagggtacgtttgaattattcataa60gaggaatacgttatgagtctgaatacaagtgggctgggagcgtcaacgatgcaaatttct120atcggcggtgcgggcggaaataacgggttgctgggtaccagtcgccagaatgctgggttg180ggtggcaattctgcactggggctgggcggcggtaatcaaaatgataccgtcaatcagctg240gctggcttactcaccggcatgatgatgatgatgagcatgatgggcggtggtgggctgatg300ggcggtggcttaggcggtggcttaggtaatggcttgggtggctcaggtggcctgggcgaa3604ggactgtcgaacgcgctgaacgatatgttaggcggttcgctgaacacgctgggctcgaaa420ggcggcaacaataccacttcaacaacaaattccccgctggaccaggcgctgggtattaac480tcaacgtcccaaaacgacgattccacctccggcacagattccacctcagactccagcgac540ccgatgcagcagctgctgaagatgttcagcgagataatgcaaagcctgtttggtgatggg600caagatggcacccagggcagttcctctgggggcaagcagccgaccgaaggcgagcagaac660gcctataaaaaaggagtcactgatgcgctgtcgggcctgatgggtaatggtctgagccag720ctccttggcaacgggggactgggaggtggtcagggcggtaatgctggcacgggtcttgac780ggttcgtcgctgggcggcaaagggctgcaaaacctgagcgggccggtggactaccagcag840ttaggtaacgccgtgggtaccggtatcggtatgaaagcgggcattcaggcgctgaatgat900atcggtacgcacaggcacagttcaacccgttctttcgtcaataaaggcgatcgggcgatg960gcgaaggaaatcggtcagttcatggaccagtatcctgaggtgtttggcaagccgcagtac1020cagaaaggcccgggtcaggaggtgaaaaccgatgacaaatcatgggcaaaagcactgagc1080aagccagatgacgacggaatgacaccagccagtatggagcagttcaacaaagccaagggc1140atgatcaaaaggcccatggcgggtgataccggcaacggcaacctgcaggcacgcggtgcc1200ggtggttcttcgctgggtattgatgccatgatggccggtgatgccattaacaatatggca1260cttggcaagctgggcgcggcttaagctt1288上述核苷酸和氨基酸序列是已经公开的,并在Beer等的美国专利NO.5,849,868和Wei等的美国专利NO.5,776,889中有进一步的描述,此处,这两个专利全文引用作为参考。源于解淀粉欧文氏菌的另一过敏反应诱导子蛋白或多肽含有相应于SEQ.IDNO.5的氨基酸序列,如下所示MetSerIleLeuThrLeuAsnAsnAsnThrSerSerSerProGlyLeu151015PheGlnSerGlyGlyAspAsnGlyLeuGlyGlyHisAsnAlaAsnSer202530AlaLeuGlyGlnGlnProIleAspArgGlnThrIleGluGlnMetAla354045GlnLeuLeuAlaGluLeuLeuLysSerLeuLeuSerProGlnSerGly505560AsnAlaAlaThrGlyAlaGlyGlyAsnAspGlnThrThrGlyValGly65707580AsnAlaGlyGlyLeuAsnGlyArgLysGlyThrAlaGlyThrThrPro859095GlnSerAspSerGlnAsnMetLeuSerGluMetGlyAsnAsnGlyLeu100105110AspGlnAlaIleThrProAspGlyGlnGlyGlyGlyGlnIleGlyAsp115120125AsnProLeuLeuLysAlaMetLeuLysLeuIleAlaArgMetMetAsp130135140GlyGlnSerAspGlnPheGlyGlnProGlyThrGlyAsnAsnSerAla145150155160SerSerGlyThrSerSerSerGlyGlySerProPheAsnAspLeuSer165170175GlyGlyLysAlaProSerGlyAsnSerProSerGlyAsnTyrSerPro180185190ValSerThrPheSerProProSerThrProThrSerProThrSerPro195200205LeuAspPheProSerSerProThrLysAlaAlaGlyGlySerThrPro210215220ValThrAspHisProAspProValGlySerAlaGlyIleGlyAlaGly225230235240AsnSerValAlaPheThrSerAlaGlyAlaAsnGlnThrValLeuHis245250255AspThrIleThrValLysAlaGlyGlnValPheAspGlyLysGlyGln260265270ThrPheThrAlaGlySerGluLeuGlyAspGlyGlyGlnSerGluAsn275280285GlnLysProLeuPheIleLeuGluAspGlyAlaSerLeuLysAsnVal290295300ThrMetGlyAspAspGlyAlaAspGlyIleHisLeuTyrGlyAspAla305310315320LysIleAspAsnLeuHisValThrAsnValGlyGluAspAlaIleThr325330335ValLysProAsnSerAlaGlyLysLysSerHisValGluIleThrAsn340345350SerSerPheGluHisAlaSerAspLysIleLeuGlnLeuAsnAlaAsp355360365ThrAsnLeuSerValAspAsnValLysAlaLysAspPheGlyThrPhe370375380ValArgThrAsnGlyGlyGlnGlnGlyAsnTrpAspLeuAsnLeuSer385390395400HisIleSerAlaGluAspGlyLysPheSerPheValLysSerAspSer405410415GluGlyLeuAsnValAsnThrSerAspIleSerLeuGlyAspValGlu420425430AsnHisTyrLysValProMetSerAlaAsnLeuLysValAlaGlu435440445此蛋白或多肽是酸性的,富含甘氨酸和丝氨酸,但缺乏半胱氨酸。其也是热稳定性的,对蛋白酶敏感,并可受植物代谢抑制剂的抑制。本发明中的蛋白或多肽的预测分子大小约为4.5kDa。编码此过敏反应诱导子蛋白或多肽的DNA分子含有相应于SEQ.IDNO.6所示的核苷酸序列,SEQ.IDNO.6所示核苷酸序列如下atgtcaattcttacgcttaacaacaatacctcgtcctcgccgggtctgttccagtccggg60ggggacaacgggcttggtggtcataatgcaaattctgcgttggggcaacaacccatcgat120cggcaaaccattgagcaaatggctcaattattggcggaactgttaaagtcactgctatcg180ccacaatcaggtaatgcggcaaccggagccggtggcaatgaccagactacaggagttggt240aacgctggcggcctgaacggacgaaaaggcacagcaggaaccactccgcagtctgacagt300cagaacatgctgagtgagatgggcaacaacgggctggatcaggccatcacgcccgatggc360cagggcggcgggcagatcggcgataatcctttactgaaagccatgctgaagcttattgca420cgcatgatggacggccaaagcgatcagtttggccaacctggtacgggcaacaacagtgcc480tcttccggtacttcttcatctggcggttccccttttaacgatctatcaggggggaaggcc540ccttccggcaactccccttccggcaactactctcccgtcagtaccttctcacccccatcc600acgccaacgtcccctacctcaccgcttgatttcccttcttctcccaccaaagcagccggg660ggcagcacgccggtaaccgatcatcctgaccctgttggtagcgcgggcatcggggccgga720aattcggtggccttcaccagcgccggcgctaatcagacggtgctgcatgacaccattacc780gtgaaagcgggtcaggtgtttgatggcaaaggacaaaccttcaccgccggttcagaatta840ggcgatggcggccagtctgaaaaccagaaaccgctgtttatactggaagacggtgccagc900ctgaaaaacgtcaccatgggcgacgacggggcggatggtattcatctttacggtgatgcc960aaaatagacaatctgcacgtcaccaacgtgggtgaggacgcgattaccgttaagccaaac1020agcgcgggcaaaaaatcccacgttgaaatcactaacagttccttcgagcacgcctctgac1080aagatcctgcagctgaatgccgatactaacctgagcgttgacaacgtgaaggccaaagac1140tttggtacttttgtacgcactaacggcggtcaacagggtaactgggatctgaatctgagc1200catatcagcgcagaagacggtaagttctcgttcgttaaaagcgatagcgaggggctaaac1260gtcaataccagtgatatctcactgggtgatgttgaaaaccactacaaagtgccgatgtcc1320gccaacctgaaggtggctgaatga1344上述核苷酸和氨基酸序列是已经公开的,并在Beer等的美国专利序列号NO.09/120,927中有进一步的描述,此处,这两个专利全文引用作为参考。源于丁香假单孢菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽含有相应于SEQ.IDNO.7的氨基酸序列,如下所示MetGlnSerLeuSerLeuAsnSerSerSerLeuGlnThrProAlaMet151015AlaLeuValLeuValArgProGluAlaGluThrThrGlySerThrSer202530SerLysAlaLeuGlnGluValValValLysLeuAlaGluGluLeuMet354045ArgAsnGlyGlnLeuAspAspSerSerProLeuGlyLysLeuLeuAla505560LysSerMetAlaAlaAspGlyLysAlaGlyGlyGlyIleGluAspVal65707580IleAlaAlaLeuAspLysLeuIleHisGluLysLeuGlyAspAsnPhe859095GlyAlaSerAlaAspSerAlaSerGlyThrGlyGlnGlnAspLeuMet100105110ThrGlnValLeuAsnGlyLeuAlaLysSerMetLeuAspAspLeuLeu115120125ThrLysGlnAspGlyGlyThrSerPheSerGluAspAspMetProMet130135140LeuAsnLysIleAlaGlnPheMetAspAspAsnProAlaGlnPhePro145150155160LysProAspSerGlySerTrpValAsnGluLeuLysGluAspAsnPhe165170175LeuAspGlyAspGluThrAlaAlaPheArgSerAlaLeuAspIleIle180185190GlyGlnGlnLeuGlyAsnGlnGlnSerAspAlaGlySerLeuAlaGly195200205ThrGlyGlyGlyLeuGlyThrProSerSerPheSerAsnAsnSerSer210215220ValMetGlyAspProLeuIleAspAlaAsnThrGlyProGlyAspSer225230235240GlyAsnThrArgGlyGluAlaGlyGlnLeuIleGlyGluLeuIleAsp245250255ArgGlyLeuGlnSerValLeuAlaGlyGlyGlyLeuGlyThrProVal260265270AsnThrProGlnThrGlyThrSerAlaAsnGlyGlyGlnSerAlaGln275280285AspLeuAspGlnLeuLeuGlyGlyLeuLeuLeuLysGlyLeuGluAla290295300ThrLeuLysAspAlaGlyGlnThrGlyThrAspValGlnSerSerAla305310315320AlaGlnIleAlaThrLeuLeuValSerThrLeuLeuGlnGlyThrArg325330335AsnGlnAlaAlaAla340此过敏反应诱导子蛋白或多肽的分子量为34-35kDa。其富含甘氨酸(大约13.5%),但缺乏半胱氨酸和酪氨酸。在He,S.Y.,etal.,“Pseudomonassyringaepv.syringaeHarpinPssaProteinthatisSecretedviatheHrpPathwayandElicitstheHypersensitiveResponseinPlants,”Cell731255-1266(1993)”中对这个源自丁香假单孢菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽有进一步的描述,此处全文引用作为参考。编码此源自丁香假单孢菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽的DNA分子含有相应于SEQ.IDNO.8所示的核苷酸序列,SEQ.IDNO.8所示核苷酸序列如下atgcagagtctcagtcttaacagcagctcgctgcaaaccccggcaatggcccttgtcctg60gtacgtcctgaagccgagacgactggcagtacgtcgagcaaggcgcttcaggaagttgtc120gtgaagctggccgaggaactgatgcgcaatggtcaactcgacgacagctcgccattggga180aaactgttggccaagtcgatggccgcagatggcaaggcgggcggcggtattgaggatgtc240atcgctgcgctggacaagctgatccatgaaaagctcggtgacaacttcggcgcgtctgcg300gacagcgcctcgggtaccggacagcaggacctgatgactcaggtgctcaatggcctggcc360aagtcgatgctcgatgatcttctgaccaagcaggatggcgggacaagcttctccgaagac420gatatgccgatgctgaacaagatcgcgcagttcatggatgacaatcccgcacagtttccc480aagccggactcgggctcctgggtgaacgaactcaaggaagacaacttccttgatggcgac540gaaacggctgcgttccgttcggcactcgacatcattggccagcaactgggtaatcagcag600agtgacgctggcagtctggcagggacgggtggaggtctgggcactccgagcagtttttcc660aacaactcgtccgtgatgggtgatccgctgatcgacgccaataccggtcccggtgacagc720ggcaatacccgtggtgaagcggggcaactgatcggcgagcttatcgaccgtggcctgcaa780tcggtattggccggtggtggactgggcacacccgtaaacaccccgcagaccggtacgtcg840gcgaatggcggacagtccgctcaggatcttgatcagttgctgggcggcttgctgctcaag900ggcctggaggcaacgctcaaggatgccgggcaaacaggcaccgacgtgcagtcgagcgct960gcgcaaatcgccaccttgctggtcagtacgctgctgcaaggcacccgcaatcaggctgca1020gcctga1026上述核苷酸和氨基酸序列是已经公开的,并在Collmer等的美国专利NO.5,708,139和Wei等的美国专利NO.5,776,889中有进一步的描述,此处,这两个专利全文引用作为参考。源于丁香假单孢菌的另一过敏反应诱导子蛋白或多肽含有相应于SEQ.IDNO.9的氨基酸序列,如下所示MetSerIleGlyIleThrProArgProGlnGlnThrThrThrProLeu151015AspPheSerAlaLeuSerGlyLysSerProGlnProAsnThrPheGly202530GluGlnAsnThrGlnGlnAlaIleAspProSerAlaLeuLeuPheGly354045SerAspThrGlnLysAspValAsnPheGlyThrProAspSerThrVal505560GlnAsnProGlnAspAlaSerLysProAsnAspSerGlnSerAsnIle65707580AlaLysLeuIleSerAlaLeuIleMetSerLeuLeuGlnMetLeuThr859095AsnSerAsnLysLysGlnAspThrAsnGlnGluGlnProAspSerGln100105110AlaProPheGlnAsnAsnGlyGlyLeuGlyThrProSerAlaAspSer115120125GlyGlyGlyGlyThrProAspAlaThrGlyGlyGlyGlyGlyAspThr130135140ProSerAlaThrGlyGlyGlyGlyGlyAspThrProThrAlaThrGly145150155160GlyGlyGlySerGlyGlyGlyGlyThrProThrAlaThrGlyGlyGly165170175SerGlyGlyThrProThrAlaThrGlyGlyGlyGluGlyGlyValThr180185190ProGlnIleThrProGlnLeuAlaAsnProAsnArgThrSerGlyThr195200205GlySerValSerAspThrAlaGlySerThrGluGlnAlaGlyLysIle210215220AsnValValLysAspThrIleLysValGlyAlaGlyGluValPheAsp225230235240GlyHisGlyAlaThrPheThrAlaAspLysSerMetGlyAsnGlyAsp245250255GlnGlyGluAsnGlnLysProMetPheGluLeuAlaGluGlyAlaThr260265270LeuLysAsnValAsnLeuGlyGluAsnGluValAspGlyIleHisVal275280285LysAlaLysAsnAlaGlnGluValThrIleAspAsnValHisAlaGln290295300AsnValGlyGluAspLeuIleThrValLysGlyGluGlyGlyAlaAla305310315320ValThrAsnLeuAsnIleLysAsnSerSerAlaLysGlyAlaAspAsp325330335LysValValGlnLeuAsnAlaAsnThrHisLeuLysIleAspAsnPhe340345350LysAlaAspAspPheGlyThrMetValArgThrAsnGlyGlyLysGln355360365PheAspAspMetSerIleGluLeuAsnGlyIleGluAlaAsnHisGly370375380LysPheAlaLeuValLysSerAspSerAspAspLeuLysLeuAlaThr385390395400GlyAsnIleAlaMetThrAspValLysHisAlaTyrAspLysThrGln405410415AlaSerThrGlnHisThrGluLeu420此蛋白或多肽是酸性的,富含甘氨酸,不含半胱氨酸,并且缺乏芳香族氨基酸。编码此源自丁香假单孢菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽的DNA分子含有相应于SEQ.IDNO.10所示的核苷酸序列,SEQ.IDNO.10所示核苷酸序列如下tccacttcgctgattttgaaattggcagattcatagaaacgttcaggtgtggaaatcagg60ctgagtgcgcagatttcgttgataagggtgtggtactggtcattgttggtcatttcaagg120cctctgagtgcggtgcggagcaataccagtcttcctgctggcgtgtgcacactgagtcgc180aggcataggcatttcagttccttgcgttggttgggcatataaaaaaaggaacttttaaaa240acagtgcaatgagatgccggcaaaacgggaaccggtcgctgcgctttgccactcacttcg300agcaagctcaaccccaaacatccacatccctatcgaacggacagcgatacggccacttgc360tctggtaaaccctggagctggcgtcggtccaattgcccacttagcgaggtaacgcagcat420gagcatcggcatcacaccccggccgcaacagaccaccacgccactcgatttttcggcgct480aagcggcaagagtcctcaaccaaacacgttcggcgagcagaacactcagcaagcgatcga540cccgagtgcactgttgttcggcagcgacacacagaaagacgtcaacttcggcacgcccga600cagcaccgtccagaatccgcaggacgccagcaagcccaacgacagccagtccaacatcgc660taaattgatcagtgcattgatcatgtcgttgctgcagatgctcaccaactccaataaaaa720gcaggacaccaatcaggaacagcctgatagccaggctcctttccagaacaacggcgggct780cggtacaccgtcggccgatagcgggggcggcggtacaccggatgcgacaggtggcggcgg840cggtgatacgccaagcgcaacaggcggtggcggcggtgatactccgaccgcaacaggcgg900tggcggcagcggtggcggcggcacacccactgcaacaggtggcggcagcggtggcacacc960cactgcaacaggcggtggcgagggtggcgtaacaccgcaaatcactccgcagttggccaa1020ccctaaccgtacctcaggtactggctcggtgtcggacaccgcaggttctaccgagcaagc1080cggcaagatcaatgtggtgaaagacaccatcaaggtcggcgctggcgaagtctttgacgg1140ccacggcgcaaccttcactgccgacaaatctatgggtaacggagaccagggcgaaaatca1200gaagcccatgttcgagctggctgaaggcgctacgttgaagaatgtgaacctgggtgagaa1260cgaggtcgatggcatccacgtgaaagccaaaaacgctcaggaagtcaccattgacaacgt1320gcatgcccagaacgtcggtgaagacctgattacggtcaaaggcgagggaggcgcagcggt1380cactaatctgaacatcaagaacagcagtgccaaaggtgcagacgacaaggttgtccagct1440caacgccaacactcacttgaaaatcgacaacttcaaggccgacgatttcggcacgatggt1500tcgcaccaacggtggcaagcagtttgatgacatgagcatcgagctgaacggcatcgaagc1560taaccacggcaagttcgccctggtgaaaagcgacagtgacgatctgaagctggcaacggg1620caacatcgccatgaccgacgtcaaacacgcctacgataaaacccaggcatcgacccaaca1680caccgagctttgaatccagacaagtagcttgaaaaaagggggtggactc1729上述核苷酸和氨基酸序列是已经公开的,并在Collmer等的美国专利申请NO.09/120,817中有进一步的描述,此处全文引用作为参考。源于青枯假单胞菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽含有相应于SEQ.IDNO.11的氨基酸序列,如下所示MetSerValGlyAsnIleGlnSerProSerAsnLeuProGlyLeuGln151015AsnLeuAsnLeuAsnThrAsnThrAsnSerGlnGlnSerGlyGlnSer202530ValGlnAspLeuIleLysGlnValGluLysAspIleLeuAsnIleIle354045AlaAlaLeuValGlnLysAlaAlaGlnSerAlaGlyGlyAsnThrGly505560AsnThrGlyAsnAlaProAlaLysAspGlyAsnAlaAsnAlaGlyAla65707580AsnAspProSerLysAsnAspProSerLysSerGlnAlaProGlnSer859095AlaAsnLysThrGlyAsnValAspAspAlaAsnAsnGlnAspProMet100105110GlnAlaLeuMetGlnLeuLeuGluAspLeuValLysLeuLeuLysAla115120125AlaLeuHisMetGlnGlnProGlyGlyAsnAspLysGlyAsnGlyVal130135140GlyGlyAlaAsnGlyAlaLysGlyAlaGlyGlyGlnGlyGlyLeuAla145150155160GluAlaLeuGlnGluIleGluGlnIleLeuAlaGlnLeuGlyGlyGly165170175GlyAlaGlyAlaGlyGlyAlaGlyGlyGlyValGlyGlyAlaGlyGly180185190AlaAspGlyGlySerGlyAlaGlyGlyAlaGlyGlyAlaAsnGlyAla195200205AspGlyGlyAsnGlyValAsnGlyAsnGlnAlaAsnGlyProGlnAsn210215220AlaGlyAspValAsnGlyAlaAsnGlyAlaAspAspGlySerGluAsp225230235240GlnGlyGlyLeuThrGlyValLeuGlnLysLeuMetLysIleLeuAsn245250255AlaLeuValGlnMetMetGlnGlnGlyGlyLeuGlyGlyGlyAsnGln260265270AlaGlnGlyGlySerLysGlyAlaGlyAsnAlaSerProAlaSerGly275280285AlaAsnProGlyAlaAsnGlnProGlySerAlaAspAspGlnSerSer290295300GlyGlnAsnAsnLeuGlnSerGlnIleMetAspValValLysGluVal305310315320ValGlnIleLeuGlnGlnMetLeuAlaAlaGlnAsnGlyGlySerGln325330335GlnSerThrSerThrGlnProMet340在Arlat,M.,etal.,“PopAl,aProteinwhichInducesaHypersensifive-likeResponseinSpecificPetuniaGenotypes,isSecretedviatheHrpPathwayofPseudomonassolanacearum,”EMBOJ.13543-533(1994)中对这个源自青枯假单胞菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽有进一步的描述,此处全文引用作为参考。它是由源自青枯假单胞菌、并含有相应于SEQ.IDNO.12所示的核苷酸序列的DNA分子编码的,SEQ.IDNO.12所示核苷酸序列如下atgtcagtcggaaacatccagagcccgtcgaacctcccgggtctgcagaacctgaacctc60aacaccaacaccaacagccagcaatcgggccagtccgtgcaagacctgatcaagcaggtc120gagaaggacatcctcaacatcatcgcagccctcgtgcagaaggccgcacagtcggcgggc180ggcaacaccggtaacaccggcaacgcgccggcgaaggacggcaatgccaacgcgggcgcc240aacgacccgagcaagaacgacccgagcaagagccaggctccgcagtcggccaacaagacc300ggcaacgtcgacgacgccaacaaccaggatccgatgcaagcgctgatgcagctgctggaa360gacctggtgaagctgctgaaggcggccctgcacatgcagcagcccggcggcaatgacaag420ggcaacggcgtgggcggtgccaacggcgccaagggtgccggcggccagggcggcctggcc480gaagcgctgcaggagatcgagcagatcctcgcccagctcggcggcggcggtgctggcgcc540ggcggcgcgggtggcggtgtcggcggtgctggtggcgcggatggcggctccggtgcgggt600ggcgcaggcggtgcgaacggcgccgacggcggcaatggcgtgaacggcaaccaggcgaac660ggcccgcagaacgcaggcgatgtcaacggtgccaacggcgcggatgacggcagcgaagac720cagggcggcctcaccggcgtgctgcaaaagctgatgaagatcctgaacgcgctggtgcag780atgatgcagcaaggcggcctcggcggcggcaaccaggcgcagggcggctcgaagggtgcc840ggcaacgcctcgccggcttccggcgcgaacccgggcgcgaaccagcccggttcggcggat900gatcaatcgtccggccagaacaatctgcaatcccagatcatggatgtggtgaaggaggtc960gtccagatcctgcagcagatgctggcggcgcagaacggcggcagccagcagtccacctcg1020acgcagccgatgtaa1035上述核苷酸和氨基酸序列是已经公开的,并在Wei等的美国专利NO.5,776,889中有进一步的描述,此处全文引用作为参考。本发明的其他实施方案包括,但并不局限于源自胡萝卜欧文氏菌和斯氏欧文氏菌的过敏反应诱导子蛋白或多肽的用途。在Cui,etal.,“TheRsmAMutantsofErwiniacarotovorasubsp.carotovoraStrainEcc71OverexpresshrpNEccandElicitaHypersensitiveReaction-likeResponseinTobaccoLeaves,”MPMI,9(7)565-73(1996)中对胡萝卜欧文氏菌过敏反应诱导子蛋白或多肽的分离有描述,此处全文引用作为参考。在Ahmad,etal.,“HarpinisNotNecessaryforthePathogenicityofErwiniastewartiionMaize,”8thInt’l.Cong.Molec.Plant-MicrobeInteract.,July14-19,1996和Ahmad,etal.,“HarpinisNotNecessaryforthePathogenicityofErwiniastewartiionMaize,”Ann.Mtg.Am.Phytopath.Soc.July27-31,1996中提出了斯氏欧文氏菌过敏反应诱导子蛋白或多肽,此处全文引用作为参考。源自多种疫霉物种的过敏反应诱导子蛋白或多肽描述于,Kaman,etal.,“ExtracellularProteinElicitorsfromPhytophthoraMostSpecificityandInductionofResistancetoBacterialandFungalPhytopathogens,”Molec.Plant-MicrobeInteract.,6(1)15-25(1993);Ricci,etal.,“StructureandActivityofProteinsfromPathogenicFungiPhytophthoraElicitingNecrosisandAcquiredResistanceinTobacco,”Eur.J.Biochem.,183555-63(1989);Ricci,etal.,“DifferentialProductionofParasiticein,andElicitorofNecrosisandResistanceinTobacco,byIsolatesofPhytophthoraparasitica,”PlantPath.41298-307(1992);Baillreul,etal.,“ANewElicitoroftheHypersensitiveResponseinTobaccoAFungalGlycoproteinElicitsCellDeath,ExpressionofDefenseGenes,ProductionofSalicylicAcid,andInductionofSystemicAcquiredResistance,”PlantJ.,8(4)551-60(1995),和Bonnet,etal.,“AcquiredResistanceTriggeredbyElicitorsinTobaccoandOtherPlants,”Eur.J.PlantPath.,102181-92(1996),此处全文引用作为参考。按照本发明,另一可利用的过敏反应诱导子蛋白或多肽来源于源密执安棍状杆菌坏腐亚种,并在美国专利申请序号NO.09/136,625中有描述,此处全文引用作为参考。按照本发明,也可对上述过敏反应诱导子蛋白或多肽的片段以及源自其他病原体的全长诱导子的片段进行利用。可利用多种方法来获得合适的片段。采用亚克隆基因片段的常规分子遗传学操作,就可获得编码已知诱导子蛋白的基因的亚克隆,这些操作在Sambrooketal.,MolecularCloningALaboratoryManual,ColdSpringsLaboratory,ColdSpringsHarbor,NewYork(1989),和Ausubeletal.(ed.),CurrentProtocolsinMolecularBiology,JohnWiley&Sons(NewYork,NY)(1999andprecedingeditions)中有描述,此处全文引用作为参考。然后,在细菌细胞的体内或体外对这些亚克隆进行表达来生产更小的蛋白或多肽,以便用于检测诱导子的活性,例如,可选用Wei,Z-M等,Science25785-88(1992)中提出的方法,此文章在此处全文引用作为参考。在另一种方法中,在蛋白的一级结构基础之上,结合利用PCR技术和选来代表蛋白特定部分的特定引物组可以合成诱导子蛋白基因片段。Erlich,H.A.,etal.,“RecentAdvancesinthePolymeraseChainReaction,”Science2521643-51(1991),此文在此处全文引用作为参考。随后,如上文所述,将这些基因片段克隆到适当载体中,以便在细菌细胞中表达截短的蛋白或多肽。作为一种替代方法,可利用蛋白水解酶如糜蛋白酶或葡萄球菌蛋白酶A或胰蛋白酶来消化全长蛋白,从而得到诱导子蛋白的片段。在诱导子蛋白的氨基酸序列基础之上,不同的蛋白分解酶就可能在不同的位点切割诱导子蛋白。通过蛋白水解得到的许多片段有可能是有活性的抗性诱导子。也可利用化学合成来制备合适的片段。这样的合成是利用待制备的诱导子的已知氨基酸序来完成的。另外,将全长诱导子置于高温和压力下也会得到其片段。然后,利用传统的方法(如色谱,SDS-PAGE)对这些片段进行分离。能够引起过敏反应的过敏反应诱导子的合适片段的一个实例是SEQIDNO.3表示的、解淀粉欧文氏菌过敏反应诱导子蛋白或多肽片段。此片段可为SEQIDNO.3所示氨基酸序列的C-端片段、SEQIDNO.3所示氨基酸序列的N-端片段或SEQIDNO.3所示氨基酸序列的内部片段。SEQIDNO.3所示氨基酸序列的C-端片段可包括SEQIDNO.3的105-403位氨基酸。SEQIDNO.3所示氨基酸序列的N-端片段可包括SEQIDNO.3的1-98、1-104、1-122、1-168、1-218、1-266、1-342、1-321、和1-372位氨基酸。SEQIDNO.3所示氨基酸序列的内部片段可包括SEQIDNO.3的76-209、105-209、99-209、137-204、137-200、109-204、109-200、137-180及105-180位氨基酸。编码这些片段的DNA分子也能用于本发明的嵌合基因中。也可(或替代性的)通过,如去除或添加对多肽的特性、二级结构和亲水性产生很小影响的氨基酸来对变体进行修饰。例如,可将多肽连接到蛋白N-末端的信号(或前导)序列上,而此蛋白可以共翻译方式或在翻译后指导蛋白的转移。也可将多肽连接到接头或其他序列上来辅助合成、纯化或鉴定这些多肽。本发明的过敏反应诱导子蛋白或多肽优选利用传统技术、以纯化形式(优选至少80%,更优选90%的纯度)制备得到。一般来讲,本发明中的蛋白或多肽是分泌到重组宿主细胞的生长培养基(下文有讨论)中的。另一种选择是制备得到了本发明中的蛋白或多肽但并不分泌到生长培养基中。在这些情况下,为了对蛋白进行分离,就要繁殖携带有重组质粒的宿主细胞(如大肠杆菌),通过超声作用、热或化学处理来使宿主细胞裂解,然后对匀浆进行离心以除去细菌碎片。随后将上清液进行连续的硫酸铵沉淀。在适当大小的葡聚糖或聚丙烯酰胺柱中对含有有益过敏反应诱导子蛋白或多肽的部分进行凝胶过滤来分离蛋白。如果有必要,此蛋白级分还可通过HPLC进行进一步纯化。通过对假定候选蛋白或多肽进行分离并检测他们的诱导子活性就能对其他过敏反应诱导子进行迅速鉴定,如Weietal.,“Harpin,ElicitorofHypersensitiveResponseProducedbythePlantPathogenErwiniaamylovora”Science25785-88(1992)中所描述的那样,此文在此处全文引用作为参考。通过利用它们浸润适当的植物组织就可对培养上清液中的无细胞制剂进行诱导子活性(即局部坏死)检测。鉴定后,就可利用那些本领域中的熟练技术人员已知的标准技术对编码过敏反应诱导子的DNA分子进行分离。通过确定这些DNA分子能否在严格条件下与含有SEQIDNO.2、4、6、8、10或12所示核苷酸序列的DNA分子进行杂交,也能对编码其他过敏反应诱导子蛋白或多肽的DNA分子进行鉴定。合适的严格条件的实例是在大约37℃下、利用含有0.9M柠檬酸钠(“SSC”)缓冲液的杂交培养基进行杂交,随后在37℃下利用0.2×SSC缓冲液进行洗涤。更高的严格性可很容易的通过提高杂交或洗涤条件的温度、或提高杂交或洗涤培养基中钠的浓度来实现。利用多种已知方法中的任一种,如利用含有蛋白的溶液来封闭膜、向杂交缓冲液中添加异源RNA、DNA和SDS以及用RNA酶来处理等也可控制非特异性结合。洗涤一般是在严格条件或比严格低一些的条件下进行的。示范性的高严格条件包括在含有1MNaCl、50mMTris-HCl、pH7.4、10mMEDTA、0.1%十二烷基硫酸钠(SDS)、0.2%ficoll、0.2%聚乙烯吡咯烷酮、0.2%牛血清白蛋白及50μg/ml大肠杆菌DNA的杂交培养基中、在大约42-65℃下进行最长达约20小时的杂交,随后在约42-65℃下的0.2×SSC缓冲液中洗涤。利用传统的重组DNA技术可将编码过敏反应诱导子多肽或蛋白的DNA分子掺入细胞中。一般来说,这包括将DNA分子插入到一表达系统中,而对此表达系统来讲,此DNA分子是异源的(也即不是正常存在的)。以适当的有义方向和正确的读码框架将异源DNA分子插入表达系统或载体中。此载体含有插入的蛋白编码序列转录和翻译必须的元件。Cohen和Boyer的美国专利NO.4,237,224描述了利用限制性酶切割和利用DNA连接酶连接来制备以重组质粒形式存在的表达系统,此专利在此处全文引用作为参考。随后,利用转化方式将这些重组质粒导入含有在组织培养物中生长的原核生物和真核细胞等单细胞培养物中,并在其中进行复制。也可将重组基因导入病毒中,例如疫苗病毒。将质粒转染入病毒感染过的细胞中就可得到重组病毒。合适的载体包括,但并不局限于下列病毒载体如λ载体系统gt11、gtWES.tB、Charon4,及质粒载体如pBR322、pBR325、pACYC177、pACYC1084、pUC8、pUC9、pUC18、pUC19、pLG339、pR290、pKC37、pKC101、SV40、pBluescriptIISK+/-(见Stratagene的“stratagene克隆系统”目录(1993),LaJolla,Calif,此处全文引用作为参考)、pQE、pIH821、pGEX、pET系列F.W.Studieret.al.,“UseofT7RNAPolymerasetoDirectExpressionofClonedGenes,”GeneExpressionTechnologyvol.185(1990),此处全文引用作为参考),以及其衍生物。可通过转化,尤其是转导、接合、转移或电穿孔将重组分子导入细胞中。利用本领域中的标准克隆方法,如Sambrooketal.,MolecularCloningALaboratoryManual,ColdSpringsLaboratory,ColdSpringsHarbor,NewYork(1989)中所描述,将DNA序列克隆到载体中,此文在此处全文引用作为参考。多种宿主载体系统可用于表达蛋白编码序列。主要的是载体系统必须能与所用的宿主细胞相容。宿主载体系统包括但并不局限于下列系统利用噬菌体DNA转化的细菌、质粒DNA、或粘粒DNA;微生物如含有酵母菌载体的酵母菌;病毒(如痘苗病毒、腺病毒等)感染过的哺乳动物细胞系统;病毒(如杆状病毒)感染过的昆虫细胞系统;以及细菌感染过的植物细胞。这些载体的表达元件在强度和特异性上有所不同。依赖于所用宿主载体系统的不同,可选用众多合适的转录和翻译元件中的任何一种。不同的遗传信号和加工事件控制着基因表达的多个水平(如DNA转录和信使RNA(mRNA)翻译)。DNA转录依赖启动子的存在,而启动子是一指导RNA聚合酶结合从而促进mRNA合成的DNA序列。真核启动子的DNA序列与原核启动子的DNA序列不同。此外,真核启动子和其伴随的遗传信号可能不为原核系统识别或不能在原核系统中发挥作用,此外,原核启动子不为真核细胞所识别,不能在真核细胞中发挥作用。类似的,mRNA在原核生物中的翻译依赖于与适当的、与真核信号不同的原核信号的存在。原核生物中,mRNA的有效翻译要求在mRNA上具有称为Shine-Dalgarno(SD)序列的核糖体结合位点。此序列是位于起始密码子,一般为AUG前的mRNA的一个短核苷酸序列,编码蛋白氨基端的蛋氨酸。SD序列与16sRNA(核糖体RNA)的3′末端互补,并可能通过与rRNA形成双链体来保证核糖体的正确定位,从而促进mRNA与核糖体的结合。对最大化基因表达的综述参见RobertsandLauer,MethodsinEnzymology,68473(1979),此处全文引用作为参考。启动子在它们的“强度”(也即它们促进转录的能力)上有所不同。对于表达一个克隆的基因来讲,为了获得高水平的转录从而对基因进行表达,就需要利用强启动子。依赖于所用的宿主细胞系统,可以选用多种合适的启动子中的任一种。例如,当在大肠杆菌、其噬菌体或质粒中克隆时,启动子如大肠杆菌噬菌体λ的T7噬菌体启动子、lac启动子、trp启动子、recA启动子、核糖体RNA启动子、PR和PL启动子,以及其他包括但不局限于lacUV5、ompF、bla、1pp等在内的其他启动子可用于指导相邻DNA节段的高水平转录。此外,利用重组DNA或其他合成DNA技术制得的杂交trp-lavUV5(tac)启动子或其他大肠杆菌启动子可用于提供插入基因的转录。除非在特异性诱导条件下,可选择细菌宿主细胞菌株和表达载体来抑制启动子的作用。在特定操作中,添加特定诱导因子对于插入DNA的有效转录来说是必须的。例如,lac操纵子是通过添加乳糖或IPTG(异丙基硫代-β-半乳糖苷)来进行诱导的。其他多种操纵子,如trp、pro等是在不同的控制之下的。原核细胞中,有效基因转录和翻译也要求特异性起始信号。这些转录和翻译起始信号可能在强度上有所不同,强度是分别以基因特异性信使RNA和合成的蛋白的量为指标来测定的。含有启动子的DNA表达载体也可能含有多种“强”转录和/或翻译起始信号的任意组合。例如,大肠杆菌中的有效翻译要求在起始密码子(“ATG”)5′端大约7-9碱基的SD序列提供核糖体结合位点。因此,宿主细胞核糖体可利用的任何SD-ATG组合都可进行应用。这样的组合包括但不局限于来自大肠杆菌噬菌体λ的cro基因或N基因的SD-AUG组合、或来自大肠杆菌的色氨酸E、D、C、B或A基因的SD-AUG组合。此外,可应用任何通过重组DNA技术或其他涉及合成核苷酸掺入的技术制得的SD-AUG组合。一旦将分离的、编码过敏反应诱导子多肽或蛋白的DNA分子克隆到表达系统内,这些DNA分子就将会容易掺入宿主细胞。这样的掺入可通过上文指出的多种转化方式来进行,这要依赖于载体/宿主细胞系统。合适的宿主细胞包括,但并不局限于细菌、病毒、酵母菌、哺乳动物细胞、昆虫、植物等。因为能分泌过敏反应诱导子蛋白或多肽的重组宿主细胞是需要的,所以也优选利用III型分泌系统来转化宿主细胞,这是根据Hametal.,“AClonedErwiniachrysanthemiHrp(TypeIIIProteinSecretion)SystemFunctionsinEscherichiacolitoDeliverPseudomonassyringaeAvrSignalstoPlantCellsandSecreteAvrProteinsinCulture,”Microbiol.9510206-10211(1998)来进行的,此处全文引用作为参考。可按照上文所述从宿主细胞或生长培养基中分离过敏反应诱导子蛋白或多肽。本发明中的方法可用于在收获前或收获后对水果或蔬菜进行处理。适当的收获前应用方法包括,但并不局限于对整个植物和水果进行高压或低压喷药。适当的收获后应用方法包括,但并不局限于低压或高压喷药、包被或浸润。本领域中的熟练技术人员能想象到其他合适的应用方法(收获前或收获后),只要它们能够实现过敏反应诱导子多肽或蛋白与水果或蔬菜的接触。一旦对水果和蔬菜进行处理,就可利用传统方法对这些水果或蔬菜进行处理、包装、运输和加工,以便将这些农产品运输到加工厂或最终消费者手中。按照本发明,过敏反应诱导子多肽或蛋白可单独或以与其他物质混合的形式用于水果或蔬菜。另外,过敏反应诱导子多肽或蛋白可在不同时间、独立于其他物质用于水果或蔬菜。按照本发明中的实施方案,一种适用于处理水果或蔬菜的组合物含有包含在载体中的、分离的过敏反应诱导子蛋白或多肽。适当的载体包括水、水溶液、浆液或干粉。虽然过敏反应诱导子多肽或蛋白适用量的多少依赖于组合物的应用频率以及不同过敏反应诱导子蛋白或多肽的效力,但组合物优选含有大于约500nM的过敏反应诱导子多肽或蛋白。虽然没有要求,但组合物可含有额外的添加剂,这些添加剂包括肥料、杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂以及他们的混合物。适当的肥料包括(NH4)2NO3。适当的杀昆虫剂的一个实施例是马拉硫磷。有用的杀真菌剂包括克菌丹。其他适当的添加剂包括缓冲剂、润湿剂、涂布剂以及催熟剂。这些物质可用于加快本发明的作用过程或对抑制收获后疾病或脱水提供附加的益处。正如上文所示,本发明的一个实施方案涉及利用分离的过敏反应诱导子蛋白或多肽来处理水果或蔬菜。可从天然来源(如解淀粉欧文氏菌,丁香假单孢菌,等)或编码蛋白或多肽的DAN分子转化过的重组来源中分离过敏反应诱导子蛋白或多肽。本发明的另一方面涉及DNA构建体和宿主细胞、表达系统及含有异源DNA构建体的转基因植物。DNA构建体包括编码过敏反应诱导子蛋白或多肽的DNA分子、可操作性偶连到DNA分子5′端并可有效转录水果或蔬菜组织中的DNA分子的植物表达启动子、以及可操作性偶连到DNA分子3′端的调节区域。DNA分子在水果或蔬菜中的表达给予了水果或蔬菜对收获后疾病或脱水的抗性。这些异源DNA分子的表达需要可在植物组织中操作的适当启动子的存在。在本发明的一些实施方案中,如果不是在全部组织中,异源DNA分子在多种组织中表达是需要的。在它们的调控下,这些启动子产生了编码序列的组成型表达。示范性的组成启动子包括,但并不局限于胭脂碱合成酶启动子(Fraleyetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA804803-4807(1983),此处全文引用作为参考)和菜花花叶病毒35S启动子(O’Delletal.,“IdentificationofDNASequencesRequiredforActivityoftheCauliflowerMosaicVirus35SPromoter,″Nature,313(6005)810-812(1985),此处全文引用作为参考)。一般来讲,虽然组成型表达适于表达DNA分子,但时间或组织调节的表达也是有需要的,在这种情况下可选用任何被调节的启动子来获得所要的表达,这对本领域中的熟练技术人员来说是很清楚的。通常情况下,时间或组织调节表达启动子是与仅仅在特定发育阶段或仅仅在特定组织中表达的DNA分子结合适用的。在本发明的另一实施方案中,是以组织特异性方式或环境调节方式(即诱导型启动子)来指导异源DNA分子的表达的。发育控制下的组织特异性启动子包括仅仅在特定组织中起始转录的启动子。例如,番茄的E4和E8启动子可用于指导转基因番茄中异源DNA序列的水果特异性表达(Cordesetal.,PlantCell11025-1034(1989);Deikmanetal.,EMBOJ.73315-3320(1988);andDellaPennaetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA836420-6424(1986),此处全文引用作为参考)。另一水果特异性启动子是PG启动子(Birdetal.,PlantMolec.Biol.11651-662(1988),此处全文引用作为参考)。另一组织特异性启动子是来源于胚珠特异性BEL1基因启动子的AP2启动子,这在Reiseretal.,Cell83735-742(1995)中有描述,此处全文引用作为参考。可有效用于种子组织中的表达的启动子包括,但并不局限于来自编码种子贮存蛋白,如napin、cruciferin、菜豆蛋白等的基因的启动子(见Kridl等的美国专利NO.5,420,034,此处全文引用作为参考)。其他的适当启动子包括那些来自编码真核生物贮存蛋白基因的启动子。可有效用于叶组织中的表达的启动子包括核酮糖二磷酸羧化酶小亚基启动子。可有效用于块茎,尤其是马铃薯块茎中的表达的启动子包括patatin启动子。通过诱导型启动子影响转录的环境条件的例子包括厌氧条件、升高的温度或光的存在。在一些植物中,对那些病原体侵入或压力产生应答的启动子的利用也是需要的。例如,作为对植物特定病原体感染的应答,可能需要限制蛋白或多肽的表达。病原体诱导的启动子的一个实例是马铃薯的gstl启动子,这在Strittmayer等的美国专利NO.5,750,874和5,723,760中有描述,此处全文引用作为参考。分离植物细胞或组织或整个植物中DNA分子的表达也利用mRNA的适当的转录终止和聚腺苷酸化作用。可将在植物细胞或组织中适用的3′调节区可操作性连接到第一和第二个DNA分子上。已知在植物中可对多种3′调节区域进行操作。示范性3′调节区域包括,但并不局限于胭脂碱合成酶3′调节区域(Fraley,etal.,“ExpressionofBacterialGenesinPlantCells,”Proc.Nat’l.Acad.Sci.USA,804803-4807(1983),此处全文引用作为参考)和菜花花叶病毒3′调节区域(Odell,etal.,“IdentificationofDNASequencesRequiredforActivityoftheCauliflowerMosaicVirus35SPromoter,”Nature,313(6005)810-812(1985)此处全文引用作为参考)。利用已知的分子克隆技术,可以很容易的将启动子和3′调节区域连接到DNA分子上,这些技术在Sambrooketal.,MolecularCloningALaboratoryManual,ColdSpringsLaboratory,ColdSpringsHarbor,NewYork(1989)中有描述,此处全文引用作为参考。利用本发明中的DNA分子来转化植物细胞的方法之一是对宿主细胞进行粒子轰击(称为biolistic转化)。这可通过多种方法来实现。第一个方法就包括向细胞中推进惰性或生物活性粒子。这在Sanford等的美国专利NO.4,945,050、5,036,006和5,100,792中有公开,此处全文引用作为参考。一般来讲,本方法包括在有效刺穿细胞外表面及掺入其内部的条件下向细胞推进惰性或生物活性粒子。在选用惰性粒子的情况下,可通过用含有异源DNA的载体包被粒子将载体导入细胞中。另外,利用载体来包围靶细胞,这样就可通过粒子的觉醒将载体导入细胞内。也可将生物活性粒子(如含有载体及异源DNA的干细菌细胞)推动到植物细胞内。粒子轰击的其他变化,不管是现在已知的还是将来开发的,都可选用。将DNA分子导入植物细胞的另一个方法是与其他实体,如小细胞、细胞、溶酶体或其他含有DNA分子的可融合的脂质表面体,进行原生质体融合。Fraley,etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,791859-63(1982),此处全文引用作为参考。也可通过电穿孔将DNA分子导入植物细胞中。Fromm,etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,825824(1985),此处全文引用作为参考。在此技术中,在含有DNA分子的质粒存在的条件下,对植物原生质体进行电穿孔。高场强的电脉冲可逆地渗透生物膜,从而将质粒导入细胞中。电穿孔后的植物原生质体对细胞壁进行改造,使其分裂并再生。将DNA分子导入植物细胞的另一方法是利用已经用DNA分子转化过的根癌土壤杆菌或发根土壤杆菌感染植物细胞。在本领域中已知的适当条件下,培养转化过的植物细胞来形成根或茎,并进一步发育成植株。一般来讲,此方法要包括利用细菌悬液来接种植物组织及在25-28℃下、在不含抗生素的再生培养基中对组织进行48-72小时的培养。土壤杆菌属是革兰氏阴性根瘤菌科的代表属。其各个种可引起根癌(根癌土壤杆菌)和发根病(发根土壤杆菌)。根癌肿瘤和发根病植物细胞可诱导来产生氨基酸衍生物冠瘿碱,而此冠瘿碱只能由细菌来分解代谢掉。负责冠瘿碱表达的细菌基因是嵌合表达盒控制元件的便利来源。此外,对冠瘿碱进行检测可用来鉴定转化过的组织。利用发根土壤杆菌的Ri质粒或根癌土壤杆菌的Ti质粒可将异源遗传序列如过敏反应诱导子蛋白或多肽的编码DNA分子导入适当的植物细胞中。利用土壤杆菌、经由感染方式可将Ti或Ri质粒转送到植物细胞中,并稳定整合到植物基因组中。Schell,J.,Science,2371176-83(1987),此处全文引用作为参考。适合于转化的植物组织包括叶组织、根组织、分生组织、合子和体细胞胚,以及花药。转化后,对转化过的植物细胞进行筛选和再生。优选的,首先要利用,如与本发明中的DNA分子同步导入的选择性标记来签定转化后的细胞。适当的选择标记包括,但并不局限于编码抗生素抗性的标记,如编码卡那霉素抗性的标记(Fraley,etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,804803-4807(1983),此处全文引用作为参考)。已知在本领域中有多种抗生素抗性标记,并且还在继续鉴定其他的抗生素抗性标记。按照本发明,任何已知的抗生素抗性标记都可用于转化和筛选转化后的宿主细胞。在含有抗生素的选择性培养基上培养细胞或组织,这样一般只有那些表达抗生素抗性标记的转化体才能继续生长。一旦获得了重组植物细胞或组织,就可以利用它来再生成熟的植株。因此,本发明的另一方面涉及包含有编码过敏反应诱导子蛋白或多肽的异源DAN分子的转基因植物,其中的异源DNA分子是在能诱导水果或蔬菜组织DAN分子转录的启动子的控制之下的。优选的,将DNA分子插入到本发明中的转基因植物的基因组中。利用培养的原生质体进行植株再生在Evans,etal.,HandbookofPlantCellCultures,Vol.1(MacMillanPublishingCo.,NewYork,1983);andVasilI.R.(ed.),CellCultureandSomaticCellGeneticsofPlants,Acad.Press,Orlando,Vol.I,1984,andVol.III(1986)中有描述,此处全文引用作为参考。实际上,已知所有的植物,包括单子叶植物和双子叶植物,都可从培养的细胞或组织再生得到。再生方法因植物种的不同而不同,但一般来讲,首先要提供转化后的原生质体悬液或含有转化后的外植体的培养皿。形成愈伤组织并从愈伤组织诱导茎,随后生根。另外,可以从愈组织来诱导形成胚。这些胚象天然胚一样发芽,然后形成植株。培养基一般含有多种氨基酸和激素,如生长素和促细胞分裂素。向培养基中添加谷氨酸和脯氨酸,尤其是对一些种如玉米和苜蓿来说也是有益的。有效的再生要依赖于培养基、基因型及培养史。如果控制了这三个影响因素,一般来说再生是能繁殖和可重复的。将编码过敏反应诱导子蛋白或多肽的DNA分子稳定掺入转基因植物中后,就可通过有性杂交或通过制备栽培品种来转移到其他植物中。对于有性杂交来讲,可以选用多种标准的培育技术来进行,这要依赖于待杂交的植物种的不同。可利用本领域中的熟练技术人员已知的普通农业方法对栽培品种进行繁殖。对于可给予收获后疾病抗性的过敏反应诱导子蛋白或多肽来讲,虽然不能给予对感染的绝对免疫,但疾病的严重程度可以减轻,并且症状的出现也会延迟。病变数目、病变大小、真菌病原体的芽孢形成都有所减少。此控制收获后疾病的方法具有能控制以前不能治疗的疾病并避免使用感染性药物或对环境有危害的物质的潜力。对于脱水来讲,虽然不能对脱水给予完全保护,但可降低脱水的严重程度。脱水保护不可避免的要依赖于,至少在一定程度上依赖于其他的条件,如贮存温度、光照等。然而,此控制脱水的方法具有减少其他多种处理(如利用石蜡包被)的潜力,这样就可降低成本,至少基本上不增加成本。本发明的方法可用于控制多种病原体引起的多种收获后疾病。按照本发明,可进行处理的收获后疾病和致病因素包括,但不局限于青霉(如指状青霉)、葡萄孢(如灰色葡萄孢)、疫霉(如柑橘褐腐病疫霉)以及欧文氏菌(如胡萝卜欧文氏菌)。本发明进一步涉及提高水果或蔬菜成熟寿命的方法。按照一个实施方案,本发明的这一方面是通过在可有效延长水果或蔬菜成熟寿命的条件下,利用过敏反应诱导子蛋白或多肽对水果或蔬菜进行处理来完成的。优选的,如上文指出的,过敏反应诱导子蛋白或多肽是以分离形式存在的。利用上述的技术,可在水果或蔬菜收获前或收获后对其进行处理。按照另一实施方案,本发明的这一方面是在有效延长从转基因植物收获的水果或蔬菜成熟寿命的条件下,提供利用编码过敏反应诱导子多肽或蛋白的DNA分子转化过的转基因植物或植物种子,并种植这些转基因植物或从转基因植物种子得到的转基因植物来完成的。本发明的这一方面可进一步包括将过敏反应诱导子多肽或蛋白应用到水果或蔬菜上来提高水果或蔬菜的成熟寿命。利用上述的技术,可在水果或蔬菜收获前或收获后对其进行处理。本发明中的方法可用来处理多种水果和蔬菜,从而控制收获后疾病或脱水,并提高水果或蔬菜的成熟寿命。可接受处理的水果或蔬菜包括任何可食用的植物产品,尤其是传统的农业植物,如种子、根、块茎、干、叶、花及果实。可接受处理的示范性转基因植物或水果包括,但并不局限于苹果、梨、桃、蜜桃、杏、李子、橄榄、甜瓜、柑橘、葡萄、草莓、覆盆子、蓝莓、醋栗果、菠萝、番木瓜、番石榴、香蕉或猕猴桃。可接受处理的示范性转基因蔬菜植物或蔬菜包括,但并不局限于芦笋、马铃薯、红薯、蚕豆、豌豆、菊苣、莴苣、欧芹、罗勒、苣荬菜、卷心菜、芽橄榄、甜菜、欧洲防风根、大头菜、菜花、绿花椰菜、菠菜、洋葱、大蒜、茄子、辣椒、芹菜、韭菜、小萝卜、胡萝卜、倭瓜、南瓜、西葫芦、黄瓜、大豆、烟草、番茄、高粱、大黄和甘蔗。可按受处理的示范性转基因植物和谷类作物包括,但并不局限于苜蓿、水稻、小麦、大麦、玉米和黑麦。实施例下列实施例是用来举例说明本发明的实施方案的,但没有限制本发明涉及的范围的意图。正如在下列实施例中所用到的,Messenger_指购自EdenBioscienceCorporation(Bothell,Washington)的产品,其中含有重量比为3%的活性成分harpinEa和重量比为97%的惰性成分。harpinEa是一种源自解淀粉欧文氏菌的过敏反应诱导子蛋白,此处是利用SEQ.ID.NO.3来表示的。实施例1---用Messenger_处理柑橘对收获后贮存的影响第0天,在22℃的温室中,对水果表面喷洒Messenger_溶液(约15μg/ml)或缓冲溶液(5mMKPO4,pH6.8)来处理Fall-GLO柑橘。随后,将柑橘表面的Messenger_或缓冲溶液风干,对处理过的柑橘进行标记,与其他柑橘混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L,SteriliteCorporation制造)。然后将盛有处理过的柑橘的容器置于18℃的生长室中贮存。在第7天的时候,通过喷洒105cfu/ml悬液的方式在柑橘表面接种指状青霉和灰色葡萄孢。上述步骤的实施对象是每处理组的40个柑橘。Messenger_或缓冲溶液处理后的第20、24和26天对疾病进行测定。0-5级表示不同的疾病分级----0级没有症状;1级1/5的水果具有疾病症状;2级2/5的水果具有疾病症状;3级3/5的水果具有疾病症状;4级4/5的水果具有疾病症状;5级所有水果都具有疾病症状。处理结果如下表1所示。表1柑橘疾病指数的降低分级T-检验处理后天数样品012345指数效力p<0.05p<0.01Messenger_2033310210.0958.14%是是缓冲液2023802610.22n/a--Messenger_2425264120.2045.21%是是缓冲液2416733470.37n/a--Messenger_2619464520.2936.96%是是缓冲液26163307110.46n/a--上表1所示数据表明在对水果进行喷洒处理以降低灰色葡萄孢和灰色葡萄孢的疾病指数并提供更长的贮存期方面,Messenger_要比缓冲溶液更有效。在18℃贮存的条件下,在Messenger_喷洒处理后第21天的时候可减少约58.14%的柑橘疾病、在25天的时候可减少约45.12%的柑橘、在27天的时候可减少约36.97%的柑橘疾病。T-检验表明,Messenger_和缓冲溶液处理结果在95%和99%置信水平上具有统计学上的显著差异。实施例2---用Messenger_处理番茄(HotHouse)对收获后贮存的影响第0天,在22℃的温室中,对水果表面喷洒Messenger_溶液(15μg/ml)或缓冲溶液(5mMKPO4,pH6.8)来处理HotHouse番茄。随后,将番茄表面的Messenger_或缓冲溶液风干,对处理过的番茄进行标记,与其他番茄混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L,SteriliteCorporation制造)。然后将盛有处理过的番茄的容器置于18℃的生长室中贮存。在第7天的时候,以喷洒105cfu/ml悬液的方式在番茄表面接种指状青霉和灰色葡萄孢。上述步骤的实施对象是每处理组的15个番茄。Messenger_或缓冲溶液处理后的第21和27天对疾病进行测定。按照实施例1中的标准进行分级。处理结果如下表2所示。表2番茄疾病指数的降低分级T-检验处理后天数样品012345指数效力p<0.05p<0.01Messenger_217223100.2558.70%是是缓冲液213121260.61n/a--Messenger_272243220.4930.19%是是缓冲液271122360.71n/a--上表2所示数据表明在对水果进行喷洒处理以降低指状青霉和灰色葡萄孢的疾病指数并提供更长的贮存期方面,Messenger_要比缓冲溶液更有效。在18℃贮存的条件下,在Messenger_喷洒处理后第21天的时候可减少约58.70%的番茄疾病、在27天的时候可减少约30.19%的番茄疾病。T-检验表明,Messenger_和缓冲溶液处理结果在95%和99%置信水平上具有统计学上的显著差异。实施例3---用Messenger_处理葡萄对收获后贮存的影响第0天,在22℃的温室中,对水果表面喷洒Messenger_溶液(约15μg/ml)或缓冲溶液(5mMKPO4,pH6.8)来处理RedG葡萄。随后,将葡萄表面的Messenger_或缓冲溶液风干,对处理过的葡萄进行标记,与其他葡萄混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L,SteriliteCorporation制造)。然后将盛有处理过的葡萄的容器置于18℃的生长室中贮存。在第7天的时候,以喷洒105cfu/ml悬液的方式在葡萄表面接种指状青霉和灰色葡萄孢。上述步骤的实施对象是每处理组约3700g葡萄。Messenger_或缓冲溶液处理后的第14和21天对疾病进行测定。按照实施例1中的标准进行分级。处理结果如下表3所示。表3葡萄疾病指数的降低分级T-检验处理后天数样品012345指数效力p<0.05p<0.01Messenger_1422599423921130.2045.65%是是缓冲液1498130915238480.38n/a--Messenger_2166831269839270.4239.35%是是缓冲液21183664721191370.69n/a--上表3所示数据表明在对水果进行喷洒处理以降低指状青霉和灰色葡萄孢的疾病指数并提供更长的贮存寿命方面,Messenger_要比缓冲溶液更有效。在18℃贮存的条件下,在Messenger_喷洒处理后第14天的可减少约45.65%的葡萄疾病、在21天的时候可减少约39.35%的葡萄疾病。T-检验表明,Messenger_和缓冲溶液处理结果在95%和99%置信水平上具有统计学上的显著差异。实施例4---用Messenger_处理葡萄柚对收获后贮存的影响第0天,在22℃的温室中,对水果表面喷洒Messenger_溶液(约15μg/ml)或缓冲溶液(5mMKPO4,pH6.8)来处理FL33935葡萄柚。随后,将葡萄柚表面的Messenger_或缓冲溶液风干,对处理过的葡萄柚进行标记,与其他葡萄柚混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L,SteriliteCorporation制造)。然后将盛有处理过的葡萄柚的容器置于18℃的生长室中贮存。在第7天的时候,以喷洒105cfu/ml悬液的方式在葡萄柚表面按种柑橘褐腐病疫霉。上述步骤的实施对象是每处理组约6个葡萄柚。在Messenger_或缓冲溶液处理后的第87、97、103和111天对疾病进行测定。按照实施例1中的标准进行分级。处理结果如下表4所示。表4葡萄柚疾病指数的降低分级T-检验处理后天数样品012345指数效力p<0.05p<0.01Messenger_875100000.0375.00%是是缓冲液874101000.13n/a--Messenger_975001000.1050.00%是是缓冲液974010100.20n/a--Messenger_1034100100.1728.57%是是缓冲液1033200010.23n/a--Messenger_1114100010.2033.33%是是缓冲液1113101010.30n/a--上表4所示数据表明在对水果进行喷洒处理以降低柑橘褐腐病疫霉的疾病指数并提供更长的贮存寿命方面,Messenger_要比缓冲溶液更有效。在18℃贮存的条件下,在Messenger_喷洒处理后第87天的可减少约75.00%的葡萄柚疾病、在97天的时候可减少约50.00%的葡萄柚疾病、在103天的时候可减少约28.57%的葡萄柚疾、在111天的时候可减少约33.33%的葡萄柚疾。T-检验表明,Messenger_和缓冲溶液处理结果在95%和99%置信水平上具有统计学上的显著差异。实施例5---用Messenger_处理苹果(Fuji)对收获后贮存的影响第0天,在22℃的温室中,对水果表面喷洒Messenger_溶液(约15μg/ml)或缓冲溶液(5mMKPO4,pH6.8)来处理Fuji苹果。随后,将苹果表面的Messenger_或缓冲溶液风干,对处理过的苹果进行标记,与其他苹果混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L,SteriliteCorporation制造)。然后将盛有处理过的苹果的容器置于18℃的生长室中贮存。在第7天的时候,以喷洒105cfu/ml悬液的方式在苹果表面接种指状青霉和柑橘褐腐病疫霉。上述步骤的实施对象是每处理组约20个苹果。在Messenger_或缓冲溶液处理后的第50、61、70、78和85天对疾病进行测定。按照实施例1中的标准进行分级。处理结果如下表5所示。表5苹果疾病指数的降低分级T-检验处理后天数样品012345指数效力p<0.05p<0.01Messenger_5020000000.00100.00%是是缓冲液5018110000.03n/a--Messenger_6119100000.0188.89%是是缓冲液6116210010.09n/a--Messenger_7018020000.0471.43%是是缓冲液7014221010.14n/a--Messenger_7815230000.0857.89%是是缓冲液7813221020.19n/a--Messenger_8513311200.1640.74%是是缓冲液8510500320.27n/a--上表5所示数据表明在对水果进行喷洒处理以降低指状青霉和柑橘褐腐病疫霉的疾病指数并提供更长的贮存寿命方面,Messenger_要比缓冲溶液更有效。在18℃贮存的条件下,在Messenger_喷洒处理后第51天的可减少约100.00%的苹果疾病、在61天的时候可减少约88.89%的苹果疾病、在70天的时候可减少约71.43%的苹果疾病、在78天的时候可减少约57.89%的苹果疾病、在85天的时候可减少约40.74%的苹果疾病。T-检验表明,Messenger_和缓冲溶液处理结果在95%和99%置信水平上具有统计学上的显著差异。实施例6---用Messenger_处理苹果(GrannySmith)对收获后贮存的影响第0天,在22℃的温室中,对水果表面喷洒Messenger_溶液(约15μg/ml)或缓冲溶液(5mMKPO4,pH6.8)来处理GrannySmith苹果。随后,将苹果表面的Messenger_或缓冲溶液风干,对处理过的苹果进行标记,与其他苹果混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L,SteriliteCorporation制造)。然后将盛有处理过的苹果的容器置于18℃的生长室中贮存。在第7天的时候,以喷洒105cfu/ml悬液的方式在苹果表面接种指状青霉和柑橘褐腐病疫霉。上述步骤的实施对象是每处理组20个苹果。在Messenger_或缓冲溶液处理后的第50、61、70、78和85天对疾病进行测定。按照实施例1中的标准进行分级。处理结果如下表6所示。表6苹果疾病指数的降低分级T-检验处理后天数样品012345指数效力p<0.05p<0.01Messenger_50200000000.00100.00%是是缓冲液5019100000.01n/a--Messenger_6113520000.0950.00%是是缓冲液617931000.18n/a--Messenger_7071030000.1636.00%是是缓冲液7021251000.25n/a--Messenger_7861031000.1932.14%是是缓冲液7821151100.28n/a--Messenger_857921100.2023.08是是缓冲液854104101n/a--上表6所示数据表明在对水果进行喷洒处理以降低指状青霉和柑橘褐腐病疫霉的疾病指数并提供更长的贮存寿命方面,Messenger_要比缓冲溶液更有效。在18℃贮存的条件下,在Messenger_喷洒处理后第51天的可减少约100.00%的苹果疾病、在61天的时候可减少约50.00%的苹果疾病、在70天的时候可减少约36.00%的苹果疾病、在78天的时候可减少约32.14%的苹果疾病、在85天的时候可减少约23.08%的苹果疾病。T-检验表明,Messenger_和缓冲溶液处理结果在95%和99%置信水平上具有统计学上的显著差异。实施例7---用Messenger_处理番茄对收获后贮存的影响第0天,在22℃的温室中,对水果表面喷洒Messenger_溶液(约15μg/ml)或缓冲溶液(5mMKPO4,pH6.8)来处理番茄。随后,将番茄表面的Messenger_或缓冲溶液风干,对处理过的番茄进行标记,与其他番茄混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L,SteriliteCorporation制造)。然后将盛有处理过的番茄的容器置于18℃的生长室中贮存。在第7天的时候,以喷洒105cfu/ml悬液的方式在番茄表面接种指状青霉和灰色葡萄孢。上述步骤的实施对象是每处理组44个番茄。在Messenger_或缓冲溶液处理后的第18、27、35和42天对疾病进行测定。按照实施例1中的标准进行分级。处理结果如下表7所示。表7番茄疾病指数的降低分级T-检验样品处理后天数012345指数效力p<0.05p<0.01Messenger_18211850000.1337.78%是是缓冲液181121120000.20n/a--Messenger_27161891000.1825.00%是是缓冲液2782484000.24n/a--Messenger_357141310000.3216.67%是是缓冲液351161510200.38n/a--Messenger_42110912930.5212.88%是是缓冲液420315101150.60n/a--上表7所示数据表明在对水果进行喷洒处理以降低指状青霉和灰色葡萄孢的疾病指数并提供更长的贮存寿命方面,Messenger_要比缓冲溶液更有效。在18℃贮存的条件下,在Messenger_喷洒处理后第18天的可降低约37.78%的番茄疾病、在27天的时候可降低约25.00%的番茄疾病、在35天的时候可降低约16.67%的番茄疾病、在42天的时候可降低约12.88%的番茄疾病。T-检验表明,Messenger_和缓冲溶液处理结果在95%和99%置信水平上具有统计学上的显著差异。实施例8-收获前和收获后Messenger_处理番茄(Sanibel)对收获后贮存的影响在番茄生长季节内,在标准条件或完全的Messenger_处理下种植红色Sanibel番茄和绿色Sanibel番茄。标准条件,也称作栽培者的标准,包括在番茄移植后每隔7天对其进行杀真菌剂喷洒处理,选用的杀真菌剂主要是含有基于铜的活性成分的杀真菌剂。Messenger_处理包括进行6次每英亩2.2oz.该产品的喷洒处理。从利用Messenger_处理和栽培者标准田里收获红番茄和绿番茄。需要指出的是从经过栽培者标准处理田里收获的绿番茄比从Messenger_处理过的植物收获的绿番茄要小(也即欠成熟)。对收获后的水果进行如下处理(1)对从Messenger_处理过的田里收获的番茄进一步用Messenger_处理;(2)对从标准田里收获的番茄用Messenger_处理;(3)对从Messenger_处理过的田里收获的番茄不进行任何额外处理;(4)对从标准田里收获的番茄不进行任何额外处理。组(1)和组(2)中的水果的收获后处理是通过利用backback喷雾器以大约30p.s.i采用20ppmharpinEa的浓度喷洒Messenger_来完成的。在喷洒过程中要转动番茄以保证喷雾剂覆盖完全。风干已接受了收获后处理的番茄,然后对组(1)-(4)的番茄进行标记,与其他番茄混合,单层排放进行贮存。贮存温度为18-32℃,光照和黑暗间隔,各约为12小时。每天对番茄的腐烂和脱水情况进行检查,直至收获后31天。结果如下表8所示。表8收获前和收获后处理对腐烂和脱水的影响收获后的天数脱水的可销售的成熟度水果数组14192122232531数目百分比(1)收获前/后用红50001112060%Messenger_绿400000000100%(2)仅收获的用红50000000420%Messenger_绿40000000175%(3)仅收获的用红50000002060%Messenger_绿500000000100%(4)不用Messenger_红5131555500%绿50000000180%在第21天时,组(4)中的红番茄全部腐烂掉。相反,接受Messenger_处理的所有红番茄表现出降低的腐败和腐烂比率。在实验接近结束时,可以观察到很多番茄脱水,表皮皱缩但没有腐烂。这样的情况也包括在不适于销售的情况之内。这些结果表明,在收获前或收获后Messenger_处理都能降低腐烂和脱水的程度,从而延长了新鲜水果或蔬菜的贮存时间。实施例9-Messenger_处理对环境温度下贮存的番茄收获后成熟和腐烂的影响在番茄生长季节内(如实施例8),在标准条件(同实施例8)或完全的Messenger_处理下种植番茄,随后在商业有利的收获时间对他们进行手工采摘。收集整个田中相同大小(5/6)的成熟绿番茄,分成4组,每组25个,将他们直接放入水果袋中并运输到实验设备中以进行收获后处理和/或分析。对下列三种处理方法进行检验(1)对从Messenger_处理过的田里收获的番茄不进行任何收获后处理;(2)对从标准田里收获的番茄进一步用Messenger_进行收获后处理;(3)对从标准田里收获的番茄不进行任何收获后处理。组(2)的收获后处理是通过将番茄浸入Messenger_溶液(20ppmharpinEa)来完成的。风干已接受了收获后处理的番茄,然后对组(1)-(3)中的番茄进行标记,与其他番茄混合,放入番茄篓中贮存。贮存温度为23-26℃(75-80)。然后,随着时间推移,利用下列分级标准对番茄颜色变化和腐烂程度进行分级。级别说明1成熟的绿色将番茄切为两半,没有切到籽;整个番茄为绿色,无杂色;2粉红色在番茄的某些部位可以看到开始有杂色的迹象,这些部位通常为粉红色;3粉红色/红色中等成熟番茄没有完全变红;仍然有一些粉红色;4红色番茄完全变红;5腐烂由于腐烂,番茄一些部分开始分解检测结果总结在下表9中。表9收获前和收获后处理对成熟和腐烂的影响分级T-检验处理后天数样品12345指数效力p<0.05p<0.0111011687500.697.28%是是21057117700.723.81%是是3105368610.75N/AN/AN/A1144558600.752.61%是是2142658700.751.57%是是3142448910.77N/AN/AN/A1170039250.803.37%是是21701482130.812.16%是是31700182170.83N/AN/AN/A12000089110.822.61%是是22000080200.840.47%是是32000176230.84N/AN/AN/A本实验获得的数据表明,相对于栽培者标准,对番茄进行的Messenger_处理,不管是通过田间喷洒还是收获后浸泡完成的,都会造成番茄提前成熟变红。此外,虽然观察到提前成熟现象,但相对于栽培者标准,Messenger_处理可维持更长时间的红熟状态并可延迟番茄的分解和腐烂。实施例10-Messenger_处理对冷藏条件下番茄的收获后成熟与腐烂的影响在番茄生长季节内(如实施例8),在标准条件(同实施例8)或完全的Messenger_处理下种植番茄,随后在商业有利的收获时间对他们进行手工采摘。收集整个田中相同大小(5/6)的成熟绿番茄,分成4组,每组25个,将他们直接放入水果袋中并运输到实验设备中以进行收获后处理和/或分析。对下列四种不同的处理方法进行检验(1)对从Messenger_处理过的田里收获的番茄不进行任何收获后处理;(2)对从Messenger_处理过的田里收获的番茄进一步进行收获后Messenger_处理;(3)对从标准田里收获的番茄进一步进行收获后Messenger_处理;(4)对从标准田里收获的番茄不进行任何额外的收获后处理。组(2)和(3)的收获后处理是通过将番茄浸入Messenger_溶液(20ppmharpinEa)来完成的。风干已接受了收获后处理的番茄,然后对组(1)-(4)中的番茄进行标记,与其他番茄混合,放入番茄篓中,在11℃(52)下的CustomPackingHouse冷却器中贮存。然后,随着时间推移,利用实施例8中描述的分级标准对番茄颜色变化和腐烂程度进行分级。表10收获前和收获后处理对成熟和腐烂的影响分级T-检验处理后天数样品12345指数效力p<0.05p<0.011766340000.270.00%是是2767330000.270.75%是是3776240000.277.46%是是4768302000.27N/A是是11059318000.307.53%是是210602812000.305.00%是是31065350000.2715.63%是是41049429000.32N/AN/AN/A1171935281800.497.20%是是2172038281400.4710.61%是是3171928391400.506.06%是是4171727312500.53N/AN/AN/A1211128293200.566.62%N/AN/A2211526372200.5311.92%是是3211033352200.5410.93%是是4211018324000.60N/AN/AN/A126315235900.68-2.26%是是226919254160.634.39%是是326323314300.635.00%是是426219235010.66N/AN/AN/A132315235900.68-2.26%是是232919254160.634.39%是是332323314300.635.00%是是432219235010.66N/AN/AN/A表10续分级T-检验处理后天数样品12345指数效力p<0.05p<0.0113804108420.770.26%是是238110156590.743.64%是是33815147820.752.60%是是43803138040.77N/AN/AN/A145031174120.792.95%是是245141269140.783.93%是是34501118170.793.19%是是445001073170.81N/AN/AN/A150031063230.823.55%是是250041158270.823.55%是是35000878140.814.02%是是45000371260.85N/AN/AN/A15500073270.851.84%是是25500068320.860.69%是是35500280180.834.37%是是45500065350.87N/AN/AN/A16000065350.872.47%是是26000063370.872.02%是是36000074260.854.48%是是46000054460.89N/AN/AN/A16500053470.891.76%是是26500058420.882.86%是是36500065350.874.40%是是46500045550.91N/AN/AN/A在前面的实验中,在环境温度(75-80)下,利用田地喷洒Messenger_和/或在Messenger_溶液中进行收获后浸泡方式处理时,番茄发育成红熟要比利用栽培者标准处理情况下快。虽然观察到了成熟提前,但这些成熟的果实腐烂的并不比经栽培者标准处理过的番茄早。在本研究中,番茄是在番茄加工厂设备中的商业用冷藏室中保存的,冷藏温度为52。正如我们所预期的,这样低的温度似乎会延缓番茄成熟的过程,在前30天内,Messenger_处理并没有加快番茄红熟的速度。然而,相对于栽培者标准,Messenger_处理确实使番茄维持了更长时间没有分解和腐烂的红熟状态。实施例11-Messenger_处理对番茄收获后成熟与腐烂的影响在番茄生长季节内(如实施例8),在标准条件(同实施例8)或完全的Messenger_处理下种植番茄,随后在商业有利的收获时间对他们进行手工采摘。收集整个田中相同大小(5/6)的成熟绿番茄,分成4组,每组25个,将他们直接放入水果袋中并运输到实验设备中以进行收获后处理和/或分析。对下列四种不同的处理方法进行检验(1)对从Messenger_处理过的田里收获的番茄不进行任何收获后处理;(2)对从Messenger_处理过的田里收获的番茄进一步进行收获后Messenger_处理;(3)对从标准田里收获的番茄进一步进行收获后Messenger_处理;(4)对从标准田里收获的番茄不进行任何额外的收获后处理。组(2)和(3)的收获后处理是通过将番茄浸入Messenger_溶液(20ppmharpinEa)来完成的。风干已接受了收获后处理的番茄,然后对组(1)-(4)中的番茄进行标记,与其他番茄混合,放入番茄篓中贮存。贮存温度为23-26℃(75-80)。然后,随着时间推移,利用FloridaTomatoCommittee的商业用分级标准对番茄颜色变化和腐烂程度进行分级,颜色指南如下所示。级别说明1绿色将番茄切为两半,没有切到籽;整个番茄是绿色的,无杂色;2出现杂色番茄小于等于10%部分开始有杂色迹象;这些区域一般是粉红色;3转变番茄表面有10-30%的粉红或红色区域;4粉红色番茄表面有30-60%的粉红或红色区域;5浅红色番茄表面有大于60%的粉红和不超过90%的红色区域6红色番茄完全为红色;7腐烂番茄一些部分开始腐败分解处理结果如下表11。表11收获前和收获后处理对番茄成熟和腐烂的影响分级T-检验处理后天数样品1234567指数效力p<0.05p<0.01138018200000.170.00%否否237317910000.20-13.11%是是337819300000.18-2.46%是是438018200000.17N/A否否17362322125200.333.72%是否27372317194000.334.96%是否37401715189100.350.00%是否47352219158100.35N/A否否1142588136500.748.02%是是214235987210.774.44%是是3144478176000.739.41%是是4140065137240.80N/A否否117002368900.832.51%是是217111078820.832.35%是是317120098800.833.18%是是417000078940.85N/A否否121000009730.861.31%是是2210000097310.861.31%是是321000039520.861.96%是是4210000187120.87N/A否否1280000085150.882.84%是是228000009190.873.79%是是3280000081190.882.21%是是4280000067330.90N/A否否1320000022780.972.16%是是2320000016840.981.30%是是3320000055450.926.93%是是432000007930.99N/A否否表11续分级T-检验处理后天数样品1234567指数效力p<0.05p<0.011370000014860.981.15%是是237000007930.000.14%是是337000009910.990.43%是是437000006940.99N/A否否1420000012880.981.01%是是242000007930.990.29%是是342000008920.990.43%是是442000005950.99N/A否否145000008920.990.57%否否245000004960.990.00%否否345000004960.990.00%否否445000004960.99N/A否否150000007930.990.43%否否250000004960.990.00%否否350000004960.990.00%否否450000004960.99N/A否否在前面的实验中,相对于栽培者标准,利用田地喷洒Messoenger_和/或在Messenger_溶液中进行收获后浸泡处理使得番茄发育成红熟变快,并延缓了其腐烂。实验获得的数据支持了这一观测结果。到收获后21天为止,与经栽培者标准处理过的番茄有87%红熟相比,Messeonger_处理过的番茄有97%已经完全红熟。虽然我们可假定成熟较快的番茄开始分解的也比较快,但令人惊讶的是,本实施例却证明这些早熟的番茄的腐败实际上要比利用栽培者标准番茄延缓15%。这一现象应该对番茄市场的几个部分有重要的影响。栽培者就能减少乙烯气站时间,而零售市场也能显著减少库存。虽然为了例证本发明,我们已经对本发明进行了详细的描述,但我们应该明白,这些详细的描述仅仅是为了例证本发明这个目的而作的,因而在这一点上,本领域中的熟练技术人员在不偏离下述权利要求限定的发明精神和范围的情况下可对本发明进行多种变更。序列表<110>伊登生物科学有限公司<120>抑制水果或蔬菜收获后疾病或脱水的过敏反应诱导子<130>21829/192<140><141><150>60/198,359<151>2000-04-19<160>12<170>PatentInVer.2.1<210>1<211>338<212>PRT<213>菊欧文氏菌(Erwiniachrysanthemi)<400>1MetGlnIleThrIleLysAlaHisIleGlyGlyAspLeuGlyValSer151015GlyLeuGlyAlaGlnGlyLeuLysGlyLeuAsnSerAlaAlaSerSer202530LeuGlySerSerValAspLysLeuSerSerThrIleAspLysLeuThr354045SerAlaLeuThrSerMetMetPheGlyGlyAlaLeuAlaGlnGlyLeu505560GlyAlaSerSerLysGlyLeuGlyMetSerAsnGlnLeuGlyGlnSer65707580PheGlyAsnGlyAlaGlnGlyAlaSerAsnLeuLeuSerValProLys859095SerGlyGlyAspAlaLeuSerLysMetPheAspLysAlaLeuAspAsp100105110LeuLeuGlyHisAspThrValThrLysLeuThrAsnGlnSerAsnGln115120125LeuAlaAsnSerMetLeuAsnAlaSerGlnMetThrGlnGlyAsnMet130135140AsnAlaPheGlySerGlyValAsnAsnAlaLeuSerSerIleLeuGly145150155160AsnGlyLeuGlyGlnSerMetSerGlyPheSerGlnProSerLeuGly165170175AlaGlyGlyLeuGlnGlyLeuSerGlyAlaGlyAlaPheAsnGlnLeu180185190GlyAsnAlaIleGlyMetGlyValGlyGlnAsnAlaAlaLeuSerAla195200205LeuSerAsnValSerThrHisValAspGlyAsnAsnArgHisPheVal210215220AspLysGluAspArgGlyMetAlaLysGluIleGlyGlnPheMetAsp225230235240GlnTyrProGluIlePheGlyLysProGluTyrGlnLysAspGlyTrp245250255SerSerProLysThrAspAspLysSerTrpAlaLysAlaLeuSerLys260265270ProAspAspAspGlyMetThrGlyAlaSerMetAspLysPheArgGln275280285AlaMetGlyMetIleLysSerAlaValAlaGlyAspThrGlyAsnThr290295300AsnLeuAsnLeuArgGlyAlaGlyGlyAlaSerLeuGlyIleAspAla305310315320AlaValValGlyAspLysIleAlaAsnMetSerLeuGlyLysLeuAla325330335AsnAla<210>2<211>2141<212>DNA<213>菊欧文氏菌(Erwiniachrysanthemi)<400>2cgattttacccgggtgaacgtgctatgaccgacagcatcacggtattcgacaccgttacg60gcgtttatggccgcgatgaaccggcatcaggcggcgcgctggtcgccgcaatccggcgtc120gatctggtatttcagtttggggacaccgggcgtgaactcatgatgcagattcagccgggg180cagcaatatcccggcatgttgcgcacgctgctcgctcgtcgttatcagcaggcggcagag240tgcgatggctgccatctgtgcctgaacggcagcgatgtattgatcctctggtggccgctg300ccgtcggatcccggcagttatccgcaggtgatcgaacgtttgtttgaactggcgggaatg360acgttgccgtcgctatccatagcaccgacggcgcgtccgcagacagggaacggacgcgcc420cgatcattaagataaaggcggctttttttattgcaaaacggtaacggtgaggaaccgttt480caccgtcggcgtcactcagtaacaagtatccatcatgatgcctacatcgggatcggcgtg540ggcatccgttgcagatacttttgcgaacacctgacatgaatgaggaaacgaaattatgca600aattacgatcaaagcgcacatcggcggtgatttgggcgtctccggtctggggctgggtgc660tcagggactgaaaggactgaattccgcggcttcatcgctgggttccagcgtggataaact720gagcagcaccatcgataagttgacctccgcgctgacttcgatgatgtttggcggcgcgct780ggcgcaggggctgggcgccagctcgaaggggctggggatgagcaatcaactgggccagtc840tttcggcaatggcgcgcagggtgcgagcaacctgctatccgtaccgaaatccggcggcga900tgcgttgtcaaaaatgtttgataaagcgctggacgatctgctgggtcatgacaccgtgac960caagctgactaaccagagcaaccaactggctaattcaatgctgaacgccagccagatgac1020ccagggtaatatgaatgcgttcggcagcggtgtgaacaacgcactgtcgtccattctcgg1080caacggtctcggccagtcgatgagtggcttctctcagccttctctgggggcaggcggctt1140gcagggcctgagcggcgcgggtgcattcaaccagttgggtaatgccatcggcatgggcgt1200ggggcagaatgctgcgctgagtgcgttgagtaacgtcagcacccacgtagacggtaacaa1260ccgccactttgtagataaagaagatcgcggcatggcgaaagagatcggccagtttatgga1320tcagtatccggaaatattcggtaaaccggaataccagaaagatggctggagttcgccgaa1380gacggacgacaaatcctgggctaaagcgctgagtaaaccggatgatgacggtatgaccgg1440cgccagcatggacaaattccgtcaggcgatgggtatgatcaaaagcgcggtggcgggtga1500taccggcaataccaacctgaacctgcgtggcgcgggcggtgcatcgctgggtatcgatgc1560ggctgtcgtcggcgataaaatagccaacatgtcgctgggtaagctggccaacgcctgata1620atctgtgctggcctgataaagcggaaacgaaaaaagagacggggaagcctgtctcttttc1680ttattatgcggtttatgcggttacctggaccggttaatcatcgtcatcgatctggtacaa1740acgcacattttcccgttcattcgcgtcgttacgcgccacaatcgcgatggcatcttcctc1800gtcgctcagattgcgcggctgatggggaacgccgggtggaatatagagaaactcgccggc1860cagatggagacacgtctgcgataaatctgtgccgtaacgtgtttctatccgcccctttag1920cagatagattgcggtttcgtaatcaacatggtaatgcggttccgcctgtgcgccggccgg1980gatcaccacaatattcatagaaagctgtcttgcacctaccgtatcgcgggagataccgac2040aaaatagggcagtttttgcgtggtatccgtggggtgttccggcctgacaatcttgagttg2100gttcgtcatcatctttctccatctgggcgacctgatcggtt2141<210>3<211>403<212>PRT<213>解淀粉欧文氏菌(Erwiniaamylovora)<400>3MetSerLeuAsnThrSerGlyLeuGlyAlaSerThrMetGlnIleSer151015IleGlyGlyAlaGlyGlyAsnAsnGlyLeuLeuGlyThrSerArgGln202530AsnAlaGlyLeuGlyGlyAsnSerAlaLeuGlyLeuGlyGlyGlyAsn354045GlnAsnAspThrValAsnGlnLeuAlaGlyLeuLeuThrGlyMetMet505560MetMetMetSerMetMetGlyGlyGlyGlyLeuMetGlyGlyGlyLeu65707580GlyGlyGlyLeuGlyAsnGlyLeuGlyGlySerGlyGlyLeuGlyGlu859095GlyLeuSerAsnAlaLeuAsnAspMetLeuGlyGlySerLeuAsnThr100105110LeuGlySerLysGlyGlyAsnAsnThrThrSerThrThrAsnSerPro115120125LeuAspGlnAlaLeuGlyIleAsnSerThrSerGlnAsnAspAspSer130135140ThrSerGlyThrAspSerThrSerAspSerSerAspProMetGlnGln145150155160LeuLeuLysMetPheSerGluIleMetGlnSerLeuPheGlyAspGly165170175GlnAspGlyThrGlnGlySerSerSerGlyGlyLysGlnProThrGlu180185190GlyGluGlnAsnAlaTyrLysLysGlyValThrAspAlaLeuSerGly195200205LeuMetGlyAsnGlyLeuSerGlnLeuLeuGlyAsnGlyGlyLeuGly210215220GlyGlyGlnGlyGlyAsnAlaGlyThrGlyLeuAspGlySerSerLeu225230235240GlyGlyLysGlyLeuGlnAsnLeuSerGlyProValAspTyrGlnGln245250255LeuGlyAsnAlaValGlyThrGlyIleGlyMetLysAlaGlyIleGln260265270AlaLeuAsnAspIleGlyThrHisArgHisSerSerThrArgSerPhe275280285ValAsnLysGlyAspArgAlaMetAlaLysGluIleGlyGlnPheMet290295300AspGlnTyrProGluValPheGlyLysProGlnTyrGlnLysGlyPro305310315320GlyGlnGluValLysThrAspAspLysSerTrpAlaLysAlaLeuSer325330335LysProAspAspAspGlyMetThrProAlaSerMetGluGlnPheAsn340345350LysAlaLysGlyMetIleLysArgProMetAlaGlyAspThrGlyAsn355360365GlyAsnLeuGlnAlaArgGlyAlaGlyGlySerSerLeuGlyIleAsp370375380AlaMetMetAlaGlyAspAlaIleAsnAsnMetAlaLeuGlyLysLeu385390395400GlyAlaAla<210>4<211>1288<212>DNA<213>解淀粉欧文氏菌(Erwiniaamylovora)<400>4aagcttcggcatggcacgtttgaccgttgggtcggcagggtacgtttgaattattcataa60gaggaatacgttatgagtctgaatacaagtgggctgggagcgtcaacgatgcaaatttct120atcggcggtgcgggcggaaataacgggttgctgggtaccagtcgccagaatgctgggttg180ggtggcaattctgcactggggctgggcggcggtaatcaaaatgataccgtcaatcagctg240gctggcttactcaccggcatgatgatgatgatgagcatgatgggcggtggtgggctgatg300ggcggtggcttaggcggtggcttaggtaatggcttgggtggctcaggtggcctgggcgaa360ggactgtcgaacgcgctgaacgatatgttaggcggttcgctgaacacgctgggctcgaaa420ggcggcaacaataccacttcaacaacaaattccccgctggaccaggcgctgggtattaac480tcaacgtcccaaaacgacgattccacctccggcacagattccacctcagactccagcgac540ccgatgcagcagctgctgaagatgttcagcgagataatgcaaagcctgtttggtgatggg600caagatggcacccagggcagttcctctgggggcaagcagccgaccgaaggcgagcagaac660gcctataaaaaaggagtcactgatgcgctgtcgggcctgatgggtaatggtctgagccag720ctccttggcaacgggggactgggaggtggtcagggcggtaatgctggcacgggtcttgac780ggttcgtcgctgggcggcaaagggctgcaaaacctgagcgggccggtggactaccagcag840ttaggtaacgccgtgggtaccggtatcggtatgaaagcgggcattcaggcgctgaatgat900atcggtacgcacaggcacagttcaacccgttctttcgtcaataaaggcgatcgggcgatg960gcgaaggaaatcggtcagttcatggaccagtatcctgaggtgtttggcaagccgcagtac1020cagaaaggcccgggtcaggaggtgaaaaccgatgacaaatcatgggcaaaagcactgagc1080aagccagatgacgacgg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