专利名称：高纯度红景天甙的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种从天然植物红景天中分离制备高纯度的红景天甙(Salidroside)的方法。
(2)红景天甙的初步纯化将红景天粗提取物用高速逆流色谱分离法进行初步分离。收集含红景天甙的组分，蒸干溶剂。
(3)红景天甙的精制再将(2)所得组分用高速逆流色谱分离法制得纯度高于98％的红景天甙高纯品。
高速逆流色谱法对红景天甙进行初步纯化，可选用的溶剂体系主要有三个。均以上相为固定相，下相为流动相。一号溶剂体系由三个组分构成，A组分可选用乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸异丙酯、乙酸正丁酯等脂肪酯类，B组分可选用正丁醇、异丁醇、叔丁醇等脂肪醇，C组分为水，优选乙酸乙酯-正丁醇-水体系，A、B、C的体积比为0.5-2∶2-10∶2-10。二号溶剂体系由四个组分构成，A组分可选自乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸异丙酯、乙酸正丁酯等脂肪酯类，B、C组分可选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、正丁醇、异丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，D组分为水，优选乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-水体系，A、B、C、D的体积比为0.5-5∶10-100∶0.5-5∶10-100。三号溶剂体系由两个组分构成，A组分可选自正丁醇、异丁醇、叔丁醇等脂肪醇，B组分为水，优选正丁醇和水，其体积比为1-100∶1-100。
高速逆流色谱法对红景天甙精制溶剂体系主要有三个。均以上相为固定相，下相为流动相。一号溶剂体系由三个组分构成，A组分可选自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等卤代烃，B组分可选自甲醇、乙醇、丙醇、丙酮等脂肪醇或脂肪酮，C组分为水，优选氯仿-甲醇-水体系，A、B、C的体积比为2-15∶2-25∶1-15。二号溶剂体系由四个组分构成，A组分可选自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等卤代烃，B、C组分可选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、正丁醇、异丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，D组分为水，优选氯仿-异丙醇-甲醇-水体系，A、B、C、D的体积比为2-10∶0.5-5∶2-10∶1-10。三号溶剂体系由五个组分构成，A、C组分可选自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等卤代烃，B、D组分可选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、正丁醇、异丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，E组分为水，优选二氯甲烷-异丙醇-氯仿-甲醇-水体系，A、B、C、D、E的体积比为0.5-2∶0.5-2∶1-10∶2-10∶1-10。
实验适合于在室温为15℃-30℃下进行。
用本法制备的红景天甙纯度可达到98％以上。本法适用于以各种含红景天甙的天然植物、天然植物的提取物为原料制备高纯度的红景天甙。适用于采用各种型号的逆流色谱仪分离制备红景天甙，用高速逆流色谱法制备红景天甙可连续，高效、快速的液液分配色谱分离，具有分离量大、样品无损失、回收率高、分离环境缓和、节约溶剂等特点。
采用乙酸乙酯-异丁醇-丙酮-水和氯仿-甲醇-水两溶剂体系制备纯度高于98％的红景天甙使用半制备型高速逆流色谱仪，配有NS-1007泵，20ml进样阀，聚四氟乙烯柱，柱容积为240ml，8823A-UV紫外检测器，Yokogawa 3057便携式记录仪。进样前，先用固定相充满整个柱子，调整主机转速为800rpm，以2.0ml/min的流速将流动相泵入柱内，待整个体系建立动态平衡后，由进样阀进样，然后根据检测器紫外谱图，接收目标成分。红景天甙的制备分两步进行(1)将体积比为5∶40∶1∶60的乙酸乙酯-异丁醇-丙酮-水混溶于分液漏斗中，摇匀后静置分层，取其上层溶液(上相)为固定相，下层溶液(下相)为流动相。用1∶1的上相和下相混合液20ml溶解取得的粗提取物200mg进行分离，收集含红景天甙的组分，蒸干。(2)将体积比为7∶13∶8的氯仿-甲醇-水混溶于分液漏斗中，摇匀后静置分层，取其上层溶液(上相)为固定相，下层溶液(下相)为流动相。用1∶1的上相和下相混合液2ml溶解(1)中所得样品进行分离，收集红景天甙的组分峰，冷冻干燥。得到白色红景天甙固体，经HPLC分析，其纯度达到98.23％。
权利要求
1.一种高纯度红景天甙的制备方法，其特征在于它是采用高速逆流色谱法制备的，其基本工艺路线是(1)用70％丙酮-水溶液浸提红景天，浸提液蒸去丙酮后，得到粗提取物；(2)红景天甙的初步纯化将粗提取物用高速逆流色谱分离法进行初步分离，收集含红景天甙的组分，蒸干溶剂；(3)红景天甙的精制再将(2)所得组分用高速逆流色谱分离法制得高纯度的红景天甙纯品。
2.根据权利要求1所述的一种高纯度红景天甙的制备方法，其特征在于高速逆流色谱法对红景天甙进行初步纯化，可选用的溶剂体系由三个组分构成，A组分可选用乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸异丙酯、乙酸正丁酯等脂肪酯类，B组分可选用正丁醇、异丁醇、叔丁醇等脂肪醇，C组分为水，优选乙酸乙酯-正丁醇-水体系，A、B、C的体积比为0.5-2∶2-10∶2-10。
3.根据权利要求1所述的一种高纯度红景天甙的制备方法，其特征在于高速逆流色谱法对红景天甙进行初步纯化，溶剂体系由四个组分构成，A组分可选自乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸异丙酯、乙酸正丁酯等脂肪酯类，B、C组分可选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、正丁醇、异丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，D组分为水，优选乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-水体系，A、B、C、D的体积比为0.5-5∶10-100∶0.5-5∶10-100。
4.根据权利要求1所述的一种高纯度红景天甙的制备方法，其特征在于高速逆流色谱法对红景天甙进行初步纯化，溶剂体系由两个组分构成，A组分可选自正丁醇、异丁醇、叔丁醇等脂肪醇，B组分为水，优选正丁醇和水，其体积比为1-100∶1-100。
5.根据权利要求1所述的一种高纯度红景天甙的制备方法，其特征在于高速逆流色谱法对红景天甙精制溶剂体系由三个组分构成，A组分可选自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等卤代烃，B组分可选自甲醇、乙醇、丙醇、丙酮等脂肪醇或脂肪酮，C组分为水，优选氯仿-甲醇-水体系，A、B、C的体积比为2-15∶2-25∶1-15。
6.根据权利要求1所述的一种高纯度红景天甙的制备方法，其特征在于高速逆流色谱法对红景天甙精制溶剂体系由四个组分构成，A组分可选自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等卤代烃，B、C组分可选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、正丁醇、异丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，D组分为水，优选氯仿-异丙醇-甲醇-水体系，A、B、C、D的体积比为2-10∶0.5-5∶2-10∶1-10。
7.根据权利要求1所述的一种高纯度红景天甙的制备方法，其特征在于高速逆流色谱法对红景天甙精制溶剂体系由五个组分构成，A、C组分可选自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等卤代烃，B、D组分可选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、正丁醇、异丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，E组分为水，优选二氯甲烷-异丙醇-氯仿-甲醇-水体系，A、B、C、D、E的体积比为0.5-2∶0.5-2∶1-10∶2-10∶1-10。
全文摘要
本发明涉及的是一种采用高速逆流色谱法从天然植物红景天中分离制备高纯度的红景天甙的方法,其特点是:采用高速逆流色谱法从天然植物红景天浸提液中经过两次纯化得到98%纯度的红景天甙,本法适用于以各种含红景天甙的天然植物、天然植物的提取物为原料制备高纯度的红景天甙,适用于采用各种型号的逆流色谱仪分离制备红景天甙,用高速逆流色谱法制备红景天甙可连续,高效、快速的液液分配色谱分离,具有分离量大、样品无损失、回收率高、分离环境缓和、节约溶剂等特点。
文档编号C07H1/08GK1365980SQ02100489
公开日2002年8月28日 申请日期2002年2月6日 优先权日2002年2月6日
发明者韩笑, 张天佑 申请人:北京天纯维通生物技术有限公司