专利名称：一种毛蕊花甙的提取方法
技术领域：
本发明涉及一种从天然产物中提取某种糖甙方法，更确切讲是从玄参科植物(Scrophulariaceae)中提取毛蕊花甙的方法。
从玄参科植物中提取的毛蕊花甙因其所具有的某些特殊的药理作用而受到人们的重视，但其提取方法却鲜有披露。
本发明是提供一种从玄参科植物提取毛蕊花甙的方法，而且根据本发明的方法可以提取到更为纯净的毛蕊花甙。
本发明的方法是先将玄参科植物全草粉碎，用乙醇充分浸泡，再将浸泡液蒸馏得乙醇浸膏，将乙醇浸膏用水溶解，滤去不溶物后依次用石油醚，乙酸乙酯和正丁醇萃取，将用正丁醇萃取物用甲醇溶解，在溶解液中加入硅胶拌匀后放置一段时间后再将溶液烘干，将烘干物上柱，用体积比为12比1至3比1的氯仿-甲醇溶剂洗脱层析，将洗脱层析物再上硅胶柱，再用乙酸乙酯-乙醇溶剂再洗脱，最终得到毛蕊花甙。
本发明还可以用以下所述的方法提取在将玄参科植物粉碎、用乙醇浸泡并蒸馏得乙醇浸膏后，先用温度为40～70℃的热水溶解乙醇浸膏，再用60～90℃的石油醚进行萃取，然后再用乙酸乙酯萃取，所得萃取物再用正丁醇萃取，萃取物用减压蒸馏的方法进行蒸馏。
在本发明中最好将所得的正丁醇浸膏用甲醇溶解并加入硅胶后采用间接加热方式烘干，烘干物置于2000克的200～300目硅胶柱上进行层析。
在本发明中在将正丁醇浸膏干法上柱后，依次用氯仿-甲醇体积比为(A)12比1；(B)10比1；(C)8比1；(D)6比1；(E)4比1；(F)3比1的溶剂顺序进行层析洗脱，取经F组份的层析液洗脱的层析物再上硅胶柱，再用乙酸乙酯-乙醇溶剂进行层析。
在本发明中对用F组份的层析液洗脱的层析物进行再层析时，所用层析液中乙酸乙酯-乙醇的比例应为3比1为最好。
本发明可以从玄参科植物中提取毛蕊花甙，并且通过本发明的最佳实施例可以提取出极纯的毛蕊花甙。
以下结合本发明的实施例进行解说
实施例1取玄参科马先蒿属(Pedicularis)的马先蒿全草3．5公斤进行粉碎，用乙醇充分浸泡使其中有效成份充分浸出后滤出浸液，采用蒸馏方法蒸去乙醇得乙醇浸膏约510克。将所得乙醇浸膏用1000毫升水溶解，待乙醇浸膏完全溶解后进行过滤，滤除不溶物，再对乙醇浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得石油醚萃取物约60克，乙酸乙酯萃取物约40克左右，正丁醇浸膏约190至200克。再将正丁醇浸膏用少量甲醇溶解，在溶解液中加入硅胶拌匀后放置一段时间后再将溶液用间接加热的方式烘干，将烘干物上200～300目的2000克硅胶柱，用体积比为3比1的氯仿-甲醇溶剂洗脱层析，将所得层析物再上硅胶柱，再用乙酸乙酯-乙醇溶剂再次洗脱，得到色泽较深，不足1克的含有毛蕊花甙的混合物。
当采用的前期方法(注指层析前的处理方法)与上基本相同，但在层析时用体积比较大的氯仿-甲醇溶剂进行层析(其中洗脱液中氯仿与甲醇的重量比可以从12比1到3比1)，也同样可以获得含毛蕊花甙的混合物，而且在一定范围内随使用的层析液中氯仿份量的增多，所得混合物数量也增多，这些即可构成本发明的不同实施例，但经测定这些混合物中毛蕊花甙的含量却随氯仿-甲醇体系洗脱液中氯仿用量的增大呈现减少的趋势。
实施例2取马先蒿全草3．5公斤进行粉碎，再用乙醇浸泡充分浸泡后滤出浸液，再将经浸泡后的马先蒿再次用乙醇浸泡后滤出浸液，如此重复三次，合并三次乙醇提取液。采用减压蒸馏方法蒸去乙醇得约570克乙醇浸膏。将所得乙醇浸膏用1000毫升热水溶解，待乙醇浸膏完全溶解后置于室温下冷却，然后将水溶液过滤，滤除约200克的水不溶物，再对乙醇浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得石油醚萃取物约75克，乙酸乙酯萃取物约50克左右，正丁醇部分浸膏约230克。再将正丁醇浸膏用少量甲醇溶解，在溶解液中加入硅胶拌匀后放置一段时间后再将溶液置红外灯下烘干，将烘干物上200～300目的2000克硅胶柱，依次用不同体积比的氯仿-甲醇溶剂洗脱层析，其中各次洗脱液中氯仿-甲醇体积比分别为(A)12比1；(B)10比1；(C)8比1；(D)6比1；(E)4比1；(F)3比1，的溶剂进行层析洗脱，取F组份的洗脱液所洗脱的部分再上硅胶柱，再用重量比为3比1的乙酸乙酯-乙醇溶剂再次洗脱，即得到白色粉未的毛蕊花甙约重100毫克，经实测得Rf=0．67。对所得毛蕊花甙进行有关检测结果如下
分子式为C29O15H36，分子量为624，其结构的物理常数为比旋光[α]D20]]>-68(C=0．4，MeOH)紫外UVλmaxMeOH]]>(nm)208(lgε4．30)，217(lgε4．45)292(lgε4．10)，329(lgε4．25)红外IRvmaxKBr(cm-1)]]>3400(OH)，2932(C-H)，1700(共轭酯基)，1631(C-C)，1604，1521(芳环)。
氢谱1HNMR(400MHz，DMSO-d6，TMS)δppm0．97(d，J=6．0Hz，3H，鼠李糖的甲基)，2．70(t，J=7．0Hz，2H，Ar-CH2-CH2)，4．36(d，J=7．2Hz，1H，葡萄糖的H-1)，4．72(t，J=9．6Hz，1H，葡萄糖的H-4)，5．03(d，J=1．1Hz，1H，鼠李糖的H-1)，6．21(d，J=15．8Hz，1H，Ar-CH=CH)，6．49-7．01(6H，芳环H)，7．47(d，J=15．8Hz，1H，Ar-CH=CH)，8．69，8．75，9．19，9．62(4×OH)。
碳 谱13CNMR(100MHz，DMSO-d6，TMS)δppm129．1(C-1)，116．3(C-2)， 145．0(C-3)，143．5(C-4)，115．8(C-5)，119．5(C-6)，70．2(C-α)，35．0(C-β)，125．5(C-1’)，114．7(C-2’)，145．5(C-3’)，148．4(C-4’)，113．6(C-5’)，121．4(C-6’)，115．5(C-α’)，145．5(C-β’)，165．7(C=O)。葡萄糖102．3(C-1)，74．5(C-2)，79．1(C-3)，69．1(C-4)，74．5(C-5)，60．7(C-6)。鼠李糖101．2(C-1)，70．5(C-2)，70．4(C-3)，71．7(C-4)，68．7(C-5)，18．1(C-6)。
质谱FABMS(m／s)631[M+Li]+，64．7[M+Na]+。
其分子结构如下
权利要求
1.毛蕊花甙的提取方法，用玄参科植物全草粉碎、浸取制得，其特征在于将玄参科植物全草粉碎后先用乙醇浸泡，再将浸泡液蒸馏得乙醇浸膏，将乙醇浸膏用水溶解，滤去不溶物后再依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，所得正丁醇浸膏用甲醇溶解，在溶解液中加入硅胶拌匀后放置一段时间后再将溶液烘干，将烘干物上柱，用体积比为12比1至3比1的氯仿-甲醇溶剂洗脱层析，将洗脱层析物再上硅胶柱，用乙酸乙酯-乙醇溶剂再洗脱，得到毛蕊花甙。
2.根据权利要求1所述的毛蕊花甙提取方法，其特征在于用温度为40～70℃热水溶解乙醇浸膏，再用60～90℃的石油醚进行萃取，然后再用乙酸乙酯萃取，再用正丁醇萃取，然后用减压蒸馏的方法进行蒸馏。
3.根据权利要求2所述毛蕊花甙的提取方法，其特征在于正丁醇浸膏用甲醇溶解并加入硅胶后采用间接加热方式烘干，烘干物置于2000克的200～300目硅胶柱上进行层析。
4.根据权利要求3所述毛蕊花甙的提取方法，其特征在于正丁醇浸膏干法上柱后依次用氯仿-甲醇体积比为(A)12比1；(B)10比1；(C)8比1；(D)6比1；(E)4比1；(F)3比1的溶剂进行层析洗脱，取F组份的层析物再上硅胶柱并再用乙酸乙酯-乙醇溶剂进行层析。
5.根据权利要求4所述毛蕊花甙的提取方法，其特征在于对F组份的层析物进行再层析时层析液乙酸乙酯-乙醇的重量比为3比1。
全文摘要
本发明涉及一种从天然产物中提取某种糖甙方法,更确切讲是从玄参科植物中提取毛蕊花甙的方法。本发明的方法是:将粉碎的玄参科植物全草用乙醇浸泡蒸馏后得乙醇浸膏,将乙醇浸膏用水溶解后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,所得正丁醇浸膏用甲醇溶解,在溶解液中加入硅胶搅匀后放置一段时间,将溶液烘干,将烘干物上柱,用重量比为12比1至3比1的氯仿－甲醇溶剂洗脱层析,将洗脱层析物再上硅胶柱,再用乙酸乙酯－乙醇溶剂再洗脱,得到毛蕊花甙。
文档编号C07H1/08GK1291613SQ9912301
公开日2001年4月18日 申请日期1999年10月12日 优先权日1999年10月12日
发明者贾忠建, 郑荣梁 申请人:兰州大学