专利名称：三七总甙的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种以中药材三七为原料制备三七总甙的方法。
三七(Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen ex C.Y.Wu et K.M.Feng)，又名田七、人参三七、田三七、山漆、金不换和血参等，为五加科(Araliaceae)人参属(Panax Linn)植物，主要栽培于云南文山地区，是我国著名的珍贵药材，也是“云南白药”的主要成分之一。味甘微苦，性温，能散瘀止血，消肿止痛，用于治疗咯血、吐血、外伤出血、崩漏、跌打肿痛、胸腹刺痛。三七中含有与人参(Panax ginseng C.A.Meyer)相似的化学成分，包括皂甙、黄酮、氨基酸、多糖、脂肪酸、脂肪族炔烃类及肽类化合物等。其中，达玛烷型四环三萜类皂甙被认为是三七、人参、西洋参等的主要生理活性成分。三七根中含有丰富的这类化合物，是人参属植物中含量最高者，特别是人参皂甙Rg1和Rb1的含量比人参和西洋参高得多。因此，三七在药品和天然保健品方面均有重要的开发价值。对三七中皂甙成分的提取传统上多用正丁醇萃取的方法，该方法使用正丁醇等有机溶剂，毒性大、操作烦琐、得率较低、成本高。
本发明的目的是提供一种三七总甙制备新方法，以树脂柱层析固相萃取代替正丁醇萃取，具有自动化程度高、成本低、无污染的优点，以克服现有技术上述不足之处。
为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案三七总甙的制备方法，包括三七原料的提取、澄清、脱色、脱糖、喷雾干燥步骤，三七根粉碎后，在封闭式连续提取装置中以70％的酒精连续热回流提取4-5小时，浓缩酒精提取液，加入澄清剂静止4小时后离心，清液加入大孔吸附树脂柱上，以20倍柱体积的去离子蒸馏水洗脱糖类和鞣质部分，再以5倍柱体积的70-90％酒精洗脱三七皂甙，酒精洗脱液通过由离子交换树脂组成的脱色柱，并以1倍柱体积70-90％酒精洗脱，洗脱液浓缩后，喷雾干燥得到三七总甙。
为了更好的理解本发明，下面用本发明的发明原理以及产品性能检测结果来说明本发明比现有技术优异之处。
1、本发明的原理基于树脂吸附、交换分离法具有提取效率高、工艺设备简单和生产成本低等优点，在天然药物的提取中，吸附树脂不仅具有良好的选择性，还具有浓缩作用(一般可使浓度提高约10倍)。大孔吸附树脂(macro-reticular resins)是一种新型的材料，为吸附性和分子筛原理结合的分离材料，其本身由苯乙烯、二苯乙烯或a-甲基丙烯酸酯等聚合而成的高分子网状孔穴结构，在水溶液中吸附力较强且具有良好的吸附选择性。其柱层析以固相萃取的方法，在吸附三七皂甙类的同时将植物中无效成分糖类等分离，并在保证三七原料药材中皂甙类成分的含量的前提下，选择性地去除鞣质和糖类，能有效的富集三七总甙。离子交换树脂(Ion exchange resins)是一种具有网状结构的固体球形高分子化合物，主要为聚苯乙烯型(由二乙烯苯铰链而成)。在这些高分子树脂的网状结构上，连接有各种不同酸碱性基团，天然药物提取液中存在的酸碱性化合物在一定条件下，可与这些酸碱性基团发生交换而结合在树脂上，当采用一定碱度或酸度的溶液通过吸附有样品分子的交换树脂时，样品分子即可被置换下来，故此可达到与非交换性化合物的分离。而色素与三七皂甙的酸碱性不同，三七皂甙为中性属于非交换性化合物，天然色素多为酸性成分属于可交换性化合物，但三七提取液在中性条件下通过离子交换树脂柱层析时，色素被树脂吸附而三七皂甙不被吸附随流动相洗脱，使色素与三七皂甙分离，故具有较好脱色作用。因此，本发明应用吸附交换树脂法于三七有效成份----三七总甙的提取分离不仅能降低能耗、缩短提取时间、提高药效和降低成本，而且还会改变中药的传统剂型，在中药现代化的进程中发挥重要作用。
2、以本发明的方法对5批三七进行了中试生产，测试了产品颜色、得率、皂甙含量及主要单体皂甙含量，结果如表1所示总皂甙含量测定方法应用人参皂甙Rg1做为对照标准品，香草醛-高氯酸显色，采用分光光度法于波长560nm处，测定不同浓度标准品的吸收度，根据吸收度与浓度(mg/ml)间的关系，绘制出标准曲线。以乙醇溶解三七总甙，定容，香草醛-高氯酸比色测定吸收度。根据所得吸收度便可由标准曲线上查出人参皂甙Rg1的含量，并计算出三七总甙的标示含量。
主要单体皂甙含量测定法以中成药部颁标准三七总皂甙含量测定项，以高效液相色谱法测定人参皂甙Rg1、人参皂甙Rb1和三七皂甙R1的含量。
表1三七总皂甙含量及主要单体皂甙含量
从表1可以得出结论本发明的方法生产出的三七总甙颜色浅、皂甙含量高、达到中成药部颁标准所规定的三七总皂甙的标准，同时具有得率高、生产成本低、工艺规范等优点。
为了更好地理解本发明，下面结合本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但本发明的内容并不局限于此。
实施例1三七根10kg粉碎后，在封闭式连续提取装置中以70％的酒精连续热回流提取5小时，浓缩酒精提取液，加入澄清剂静止4小时后离心，清液加入大孔吸附树脂柱上，以40升的去离子蒸馏水洗脱糖类和鞣质等无效部分后以10升的75％酒精洗脱三七皂甙，75％酒精洗脱液通过由离子交换树脂组成的脱色柱，并续以2升75％酒精洗脱，洗脱液浓缩后，喷雾干燥得到白色三七总甙成品1.14kg，得率11.4％。
实施例2三七根10kg粉碎后，在封闭式连续提取装置中以70％的酒精连续热回流提取5小时，浓缩酒精提取液，加入澄清剂静止4小时后离心，清液加入大孔吸附树脂柱上，以40升的去离子蒸馏水洗脱糖类和鞣质等无效部分后以10升的80％酒精洗脱三七皂甙，80％酒精洗脱液通过由离子交换树脂组成的脱色柱，并续以2升80％酒精洗脱，洗脱液浓缩后，喷雾干燥得到白色三七总甙成品1.18kg，得率11.8％。
实施例3三七根10kg粉碎后，在封闭式连续提取装置中以80％的酒精连续热回流提取5小时，浓缩酒精提取液，加入澄清剂静止4小时后离心，清液加入大孔吸附树脂柱上，以40升的去离子蒸馏水洗脱糖类和鞣质等无效部分后以10升的90％酒精洗脱三七皂甙，90％酒精洗脱液通过由离子交换树脂组成的脱色柱，并续以2升90％酒精洗脱，洗脱液浓缩后，喷雾干燥得到白色三总甙成品1.08kg，得率10.8％。
权利要求
1.三七总甙的制备方法，包括三七原料的提取、澄清、脱色、脱糖、喷雾干燥步骤，其特征是三七根粉碎后，在封闭式连续提取装置中以70％的酒精连续热回流提取4-5小时，浓缩酒精提取液，加入澄清剂静止4小时后离心，清液加入大孔吸附树脂柱上，以20倍柱体积的去离子蒸馏水洗脱糖类和鞣质部分，再以5倍柱体积的70-90％酒精洗脱三七皂甙酒精洗脱液通过由离子交换树脂组成的脱色柱，并以1倍柱体积70-90％酒精洗脱，洗脱液浓缩后，喷雾干燥得到三七总甙。
全文摘要
本发明提供一种三七总甙的制备方法。该方法步骤为:三七原料→粉碎→浸提→浓缩→澄清→脱糖→脱色→浓缩→干燥→成品。以本方法制成的三七总甙完整的保留了三七中各组单体皂甙,且纯度可达95%以上,具有自动化程度高、成本低、无污染的优点,可以生产出疗效好、成本低的特效药。
文档编号C07H1/08GK1334267SQ0110859
公开日2002年2月6日 申请日期2001年6月28日 优先权日2001年6月28日
发明者杨崇仁, 李海舟, 黎福南 申请人:中国科学院昆明植物研究所