专利名称：：一种霞水母来源的寡肽胶原及其制备工艺的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种霞水母来源的寡肽胶原及其制备工艺，属天然生物活性物质及其制备
技术领域：
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背景技术：
：霞水母(Qwiefl朋zaAiT)，俗称麻蜇，是一种大型海洋浮游生物，属剌胞动物门(PhylumCnidaria),钵水母纲(ClassScyphomedusae),旗口水母目(OrderPhylumcnidaria),霞水母科(FamilyCyanea)。我国沿海已发现的有白色霞水母(C""ea"MflA/^sA/加"")、发形霞水母(C,neflca/w7toto)、棕色霞水母(Qwie"/e/T"giViefl五w;Aw^o/ft),和紫色霞水母(Qwieapw77;"/"ea《isWrtowj;e)4个种，其中以白色霞水母数量最多、分布范围最广。霞水母通常以小型浮游动物为饵，其生殖腺发达，繁殖能力强，生长速度极快，目前我国霞水母的年产量已经高达千万吨，构成了一种新的天然海洋生物资源。霞水母的传统加工方法是将新鲜捕捞的霞水母经过切丝、脱水处理，使霞水母体内的大部体液流出，使霞水母的内容物得到浓縮，然后对霞水母进行三矾腌制，得到经过腌制的霞水母制品，即为市场上出售的劣质海蜇。在此加工过程中形成的大量的霞水母体液则被就近直接排放到了附近的河塘里，成为霞水母产地(如江苏的吕四港)霞水母捕捞加工季节中的一大污染源。以加工过程中渗出的霞水母体液为原料，从中分离提取制备寡肽胶原的研究国内外尚未见任何报道。
发明内容本发明发明了一种霞水母来源的寡肽胶原及其制备工艺。较为独特的是，它以霞水母(C"股a/w:flM)在传统加工过程中形成的污染源-霞水母体液作为寡肽胶原的制备原料进行加工，实现了变害为利，变废为宝，运用环境经济的理念消除环境污染的目的。按照本发明进行操作，能够以可观的产率获得高纯度寡肽胶原产品。这对于霞水母这一天然海洋生物资源的综合利用而言是至关重要的。本发明发明的霞水母寡肽胶原经初步的研究确认，完全无毒，将作为新型的生物活性材料和保健食品原料被广泛应用于食品工业和医药工业。具体来说，首先，我们发现霞水母体液中含有一定量的胶原类成分，基本不含脂肪和糖类，因而非常适合于用膜分离技术对其进行浓縮和脱盐。其中所含的寡肽胶原对膜分离浓缩和脱盐处理是稳定的，在我们所采取的膜分离操作工艺条件下，既不会因降解、流失而损失，也不会因堵膜而是膜分离操作无法连续进行，即霞水母体液可已经连续的膜分离处理被有效的浓缩和脱盐。由此奠定了以霞水母为原料运用膜分离技术加工制备高纯度高生物活性寡肽胶原的基础。其次，在经过离子交换与膜分离浓縮和脱盐处理后所得到的产物进行了系统的分析测试后，我们发现，霞水母体液中所含有的寡肽胶原其分子量在邻0800之间，羟脯氨酸的含量在7%以上，为霞水母体内天然形成的寡肽胶原。我们发现，在操作pH、压力、温度等工艺参数中，操作温度对于得率而言是最为重要的。操作温度应当在-30-2柳。C范围内，最好是在0-60。C的范围内。液体的干燥方式，可以是冷冻干燥，也可以是喷雾干燥。具体实施方式下面的实例将具体说明本发明的操作方法，但不能作为对本发明的限定。实例一取M0kg霞水母体液，在室温下以截留分子量为1000的膜分离装置进行不经离子交换的直接浓缩，得到8倍浓縮了的霞水母液体浓縮液。然后向浓縮液中添加去离子水，用同一膜分离装置进行脱盐处理。共添加8个浓縮液体积的水，使其中的盐分含量(以氯化钠计)低于1.5ppm(氯离子检测呈阴性)，即为寡肽胶原液；寡肽胶原液经冷冻干燥，得到lg纯度达到90。/。以上的寡肽胶原粉固体。实例二取1000kg霞水母体液，在室温下用Cl性阴离子交换柱和Na型阳离子交换柱对其进行离子交换处理，至其中的二价阳离子检测呈阴性。然后以截留分子量为500的膜分离装置进行浓缩，得到8倍浓缩了的霞水母液体浓缩液。向浓缩液中添加去离子水，用同一膜分离装置进行脱盐处理。共添加8个浓縮液体积的水，使其中的盐分含量(以氯化钠计)低于1.5ppm(氯离子检测呈阴性)，即为寡肽胶原液；寡肽胶原液经喷雾干燥(进风温度185°C,出风温度85。C)，得到8g纯度达到90。/。以上的寡肽胶原粉固体。实例三对一份寡肽胶原粉样品进行了蛋白含量的测定，总糖含量的测定，氨基酸组成的测定以及单糖组成的测定。测定结果表明，该样品中含93%的蛋白质，2%的糖，平均分子量为580。所含单糖以葡萄糖为主，所含氨基酸的组成见表l。表l供试样品的氨基酸组成<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>实例四以健康昆明种小白鼠(雌雄各半，4周龄，体重18-22g,由无锡市惠山江南实验动物场提供批准号:SCXK(苏)2002-0006)为实验动物，对所得到的寡肽胶原粉进行急性毒性试验，所得结果如下表2供试样品对小鼠体重的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>表3急性毒性实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>通过观察，给药后lh内小鼠活动均减少，4h后逐渐恢复正常活动。试验组7d内进食量逐渐增加，且小鼠食欲、精神、毛色均正常；7d后，脱颈处死，肉眼尸检未见心、肝、脾、肺、肾等主要脏器病变和中毒现象。观察期7d内每天称重，试验组小鼠的体重不断增加。研究结果表明，在供试样品大剂量灌胃的情况下，未出现小鼠死亡，也未有明显毒性反应。说明其无毒性或毒性很小，其最大安全剂量在7500mg/Kg以上。权利要求1.一种霞水母来源的寡肽胶原。2.如权利要求l所述的寡肽胶原的制备工艺。该工艺由下列步骤组成(1)收集新鲜捕捞的霞水母在切丝，脱水等加工处理过程中渗出的水母体液。(2)对收集到的水母体液进行离子交换处理，得到一无色或淡黄色的液体。(3)对所得到的液体，进行浓缩、脱盐处理，得到一无盐浓缩液。(4)对无盐浓縮液进行(或不进行)离心、脱色处理，然后进行干燥，得到一白色-浅黄色的粉末，即为寡肽胶原。所宣称的霞水母，俗称麻蜇，系指霞水母科海洋生物白色霞水母(Owz^"MflAZiTisWAW"j;e)、发形霞水母(Qwteaca/7/ato)、棕色霞水母(Qwjea/e/r"g/"eaiwAwAWft)或紫色霞水母(Qwiefli&Af'flowe)的新鲜捕捞品。所宣称的水母体液，系指霞水母在切丝，脱水等加工处理过程中自霞水母体内自然渗出的液体。所宣称的离子交换处理，系指运用离子交换技术去除霞水母体液中所含有的部分或全部阴、阳离子的加工过程。所宣称的浓縮、脱盐处理，系指运用膜分离技术去除霞水母体液中所含有的部分或全部水分及阴、阳离子，使其中所含有的寡肽胶原的浓度得到提高的加工过程。所宣称的干燥系指使溶液脱除水分，得到固体的加工过程。所宣称的寡肽胶原为自霞水母体液中浓縮提取得到的一种产物。它是一种白色或淡黄色粉末，有强烈的海腥味，略带苦味，其中含有85—0%的蛋白质，5~10%的糖，平均分子量在500800之间。该寡肽胶原无毒。3.权利要求2中宣称的离子交换处理，可以运用离子交换柱实施，也可以运用电渗析装置实施。当用离子交换柱实施时，所用阴离子交换柱可以是Cl'型的，也可以是Off型的，所用阳离子交换柱可以是Na+型的，也可以是H+型的。4.权利要求2中宣称的离子交换处理，在pH=0.5-14.0的条件下进行，其操作压力为0.0001-0.5MPa，操作温度为-30-200°C。5.权利要求2中宣称的浓縮、脱盐处理所运用的装置，为超滤装置，纳滤装置，反渗透装置或它们的组合。膜的分子截留量为150-1000。6.权利要求2中宣称的浓縮、脱盐处理,在pH=S.5-7.S的条件下进行,其操作压力为0.0001-0.5MPa,操作温度为-30-200°C。7.权利要求2中宣称的干燥，可以是冷冻干燥，也可以是喷雾干燥。全文摘要本发明涉及一种霞水母来源的寡肽胶原及其制备工艺，属天然生物活性物质及其制备
技术领域：
。它提供了一种新型的天然海洋生物活性寡肽胶原。按照本发明进行操作，能够获得0.5％的纯度达到90％以上的寡肽胶原。这种新型寡肽胶原分子量在500～800之间，完全没有毒副作用。文档编号C07K1/34GK101235077SQ20071017118公开日2008年8月6日申请日期2007年11月28日优先权日2007年11月28日发明者姜瑞霞,张本田,宁汤,汤鲁宏申请人:张丽丽;江南大学