专利名称：一种从仙草全草中提取分离槲皮素的方法
技术领域：
本发明公开了一种从植物仙草中提取分离槲皮素的方法。
背景技术：
仙草，又名凉粉草，仙人草，仙人冻，薪草等，为唇形科仙草属一年生草本植物。仙草全草干样含有约70％碳水化合物，少量蛋白质、脂肪、色素等，还含有较多的矿物元素。在仙草所含功能性成分中，熊果酸既能降血脂，也能降肝脂，是具有开发潜力的降脂护肝药物，还是美容产品中主要的美白成分；槲皮素具有较好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用，此外还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉，增加冠脉血流量等作用，用于治疗慢性支气管炎，对冠心病及高血压患者也有辅助治疗作用；香精素有镇静、清凉解毒利水的功效；微量元素具有抑制自由基形成、抗衰老、抗癌的作用；维生素能调节和增强生理机能等。
仙草性寒、甘、淡、凉，药用广泛，有清热利湿、凉血解暑作用。用于急性风湿性关节炎、中暑、热毒、消渴、高血压、肾脏病、糖尿病、关节肌肉疼痛、酒风、淋病等。
目前以仙草为原料开发的系列产品有即食仙草冻粉、仙草保健茶、仙草可乐型饮料、速溶仙草、仙人板等，这些产品主要是以水为溶剂提取的仙草胶为原料制成的产品。由于不能溶于水，具有较好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用的槲皮素存在于提取仙草胶后的仙草渣中被当作废物丢弃，造成巨大的资源浪费。目前对从仙草提取槲皮素缺乏系统的研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种简单、低成本、高产率、适合工业生产的一种从仙草全草中提取分离槲皮素的方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现。
一种从仙草全草中提取分离槲皮素的方法，其特征在于该方法如下 1)提取 ①取仙草全草若干，加约20倍量水，煮沸提取，在搅拌下缓慢加入石灰水至pH为8～9，然后加3％的硼酸，在此pH条件下煮20～30分钟； ②趁热过滤，残渣反复减压过滤3次，合并滤液，在60～70摄氏度条件下，用浓盐酸将合并液调至pH为5，酸水液放置24小时，抽滤； ③用水将沉淀物洗至中性，60度干燥得芦丁粗品，用沸水重结晶，70～80摄氏度干燥后的芦丁纯品； ④精制芦丁以1∶80加2％H2SO4，再火加热2h，冷却抽滤； ⑤残杂水洗至中性，然后95％乙醇重结晶、葡聚糖凝胶柱色谱分离(SphadexLH20)，用甲醇做洗脱剂； ⑥因芦丁不能被洗脱，从而得到槲皮素黄绿色纯品； 2)鉴别 ①采用薄层色谱法鉴定黄酮醇化合物中的槲皮素，硅胶G板，用甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)展开；3％三氯化铝乙醇液检验，紫外灯(365nm)观察；经展开、显色，显示槲皮素的斑点，Rf值＝0.58，精制槲皮素与标准品在相应的位置分别显黄色斑点； ②采用高效液相色谱仪法鉴别测定黄酮醇化合物中槲皮素的含量，色谱柱Ultimate XB-C18(5um，4.6mm×250mm)，流动相乙腈-0.4％磷酸(45∶55)，流速1.0ml·min-1，检测波长360nm，柱温25℃；结果提取物结晶在11.58分钟出现与标准槲皮素相似的色谱峰，证明所得晶体为槲皮素；经制定标准品曲线，测得提取物结晶的槲皮素含量为96.8％。
本发明与现有技术相比具有以下优点。
本发明所用原料廉价易得，对环境基本不产生污染，工艺简单易行、快捷，所获得的槲皮素成本较低、纯度高，所以适合工业规模化生产。
具体实施例方式 下面对本发明作进一步详细描述。
本发明所述的从仙草全草中提取分离槲皮素的方法的具体步骤为 一种从仙草全草中提取分离槲皮素的方法，其特征在于该方法如下 1)提取 ①取仙草全草若干，加约20倍量水，煮沸提取，在搅拌下缓慢加入石灰水至pH为8～9，然后加3％的硼酸，在此pH条件下煮20～30分钟； ②趁热过滤，残渣反复减压过滤3次，合并滤液，在60～70摄氏度条件下，用浓盐酸将合并液调至pH为5，酸水液放置24小时，抽滤； ③用水将沉淀物洗至中性，60度干燥得芦丁粗品，用沸水重结晶，70～80摄氏度干燥后的芦丁纯品； ④精制芦丁以1∶80加2％H2SO4，再火加热2h，冷却抽滤； ⑤残杂水洗至中性，然后用95％乙醇重结晶、葡聚糖凝胶柱色谱分离(SphadexLH20)，用甲醇做洗脱剂； ⑥因芦丁不能被洗脱，从而得到槲皮素黄绿色纯品； 2)鉴别 ①采用薄层色谱法鉴定黄酮醇化合物中的槲皮素，硅胶G板，用甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)展开；3％三氯化铝乙醇液检验，紫外灯(365nm)观察；经展开、显色，显示槲皮素的斑点，Rf值＝0.58，精制槲皮素与标准品在相应的位置分别显黄色斑点； ②采用高效液相色谱仪法鉴别测定黄酮醇化合物中槲皮素的含量，色谱柱Ultimate XB-C18(5um，4.6mm×250mm)，流动相乙腈-0.4％磷酸(45∶55)，流速1.0ml·min-1，检测波长360nm，柱温25℃；结果提取物结晶在11.58分钟出现与标准槲皮素相似的色谱峰，证明所得晶体为槲皮素；经制定标准品曲线，测得提取物结晶的槲皮素含量为96.8％。
权利要求
1.一种从仙草全草中提取分离槲皮素的方法，其特征在于该方法如下
1)提取
①取仙草全草若干，加约20倍量水，煮沸提取，在搅拌下缓慢加入石灰水至pH为8～9，然后加3％的硼酸，在此pH条件下煮20～30分钟；
②趁热过滤，残渣反复减压过滤3次，合并滤液，在60～70摄氏度条件下，用浓盐酸将合并液调至pH为5，酸水液放置24小时，抽滤；
③用水将沉淀物洗至中性，60度干燥得芦丁粗品，用沸水重结晶，70～80摄氏度干燥后得芦丁纯品；
④精制芦丁以1∶80加2％H2SO4，再火加热2h，冷却抽滤；
⑤残杂水洗至中性，然后95％乙醇重结晶、葡聚糖凝胶柱色谱分离(SphadexLH20)，用甲醇做洗脱剂；
⑥因芦丁不能被洗脱，从而得到槲皮素黄绿色纯品；
2)鉴别
①采用薄层色谱法鉴定黄酮醇化合物中的槲皮素，硅胶G板，用甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)展开；3％三氯化铝乙醇液检验，紫外灯(365nm)观察；经展开、显色，显示槲皮素的斑点，Rf值＝0.58，精制槲皮素与标准品在相应的位置分别显黄色斑点；
②采用高效液相色谱仪法鉴别测定黄酮醇化合物中槲皮素的含量，色谱柱Ultimate XB-C18(5um，4.6mm×250mm)，流动相乙腈-0.4％磷酸(45∶55)，流速1.0ml·min-1，检测波长360nm，柱温25℃；结果提取物结晶在11.58分钟出现与标准槲皮素相似的色谱峰，证明所得晶体为槲皮素；经制定标准品曲线，测得提取物结晶的槲皮素含量为96.8％。
全文摘要
本发明公开了一种从仙草全草中提取分离槲皮素的方法，该方法如下①取仙草全草若干，加约20倍量水，煮沸提取，在搅拌下缓慢加入石灰水至pH为8～9，然后加3％的硼酸，在此pH条件下煮20～30分钟；②趁热过滤，残渣反复减压过滤3次，合并滤液，在60～70摄氏度条件下，用浓盐酸将合并液调至pH为5，酸水液放置24小时，抽滤；③用水将沉淀物洗至中性，60度干燥得芦丁粗品，用沸水重结晶，70～80摄氏度干燥后的芦丁纯品；④精制芦丁以1∶80加2％H2SO4，再火加热2h，冷却抽滤；⑤残杂水洗至中性，然后95％乙醇重结晶、葡聚糖凝胶柱色谱分离(SphadexLH20)，用甲醇做洗脱剂；⑥因芦丁不能被洗脱，从而得到槲皮素黄绿色纯品。本发明具有简单、低成本、高产率、适合工业生产的优点。
文档编号C07D311/30GK101220013SQ20081002582
公开日2008年7月16日 申请日期2008年1月10日 优先权日2008年1月10日
发明者刘富来, 冯翠兰, 吴伟萍, 刘嫒姬, 建 张, 姚映如, 潘燕飞 申请人:刘富来