专利名称：脂肪酶法酪蛋白的生产方法
技术领域：
本发明涉及生物化学酶水解领域，具体地说是一种以分离酥油后的牛奶粗蛋白
(藏族牧民称"曲拉")为原料用脂肪酶水解酪蛋白中残留的脂肪从而达到纯化酪蛋白的生 产方法。
背景技术：
目前，国内酪蛋白系列产品研究领域或生产厂家均以机械分离法(碟式分离机 采用比重差的原理)进行脱脂、分离、纯化生产酪蛋白(商品名干酪素)，机械分离法所生 产的酪蛋白一般脂肪含量在2. 0 2. 5%之间，由于受原料中脂肪高等因素的限制，酪蛋白 产品中的脂肪含量很难通过机械分离法将其降到1.0%以下。脂肪含量高低直接影响到酪 蛋白系列产品质量等级，其具体工艺过程为粗酪蛋白(曲拉)一粉碎一溶解(固液= 1 : 10)+10XNa0H溶液调pH值9 ll，温度50 65。C —过滤一碟式分离机脱脂一酸化 (15% HCL溶液调pH值4.6)—脱水一造粒一干燥一产品一检验包装。这样的生产工艺由 于原料中脂肪含量高低不同，生产出的产品脂肪含量也高低不同，致使产品在市场上缺乏 竞争力。
发明内容
本发明的目的在于为了解决上述机械分离法生产酪蛋白工艺的不足，提供一种脂 肪酶水解酪蛋白中残留的脂肪，从而彻底解决酪蛋白系列产品受原料中脂肪含量高低不 同、机械分离法生产限制导致酪蛋白系列产品中脂肪含量高低不一致，而提供一种脂肪酶 法酪蛋白的生产方法。 发明的技术方案是是一种脂肪酶法酪蛋白的生产方法，主要以粗酪蛋白(曲拉) 为原料，脂肪含量高低直接影响到产品质量等级，因此采用脂肪酶在酪蛋白含量为10 15% 、温度20 50°C 、pH值6 11的溶液中，加入酶剂量为2 5KLU/g脂肪的Lipozyme TL IOOL(诺维信脂肪酶TL 100L)，时间0. 5 1. 5小时将脂肪水解，然后加入氯化钙(CaCl2) 或硫酸镁(MgS04)沉淀后用排渣式分离机分离，酸化、脱水、造粒、干燥后从而得到脂肪含量 《0.5%的酪蛋白产品。 所述的脂肪酶法酪蛋白的生产方法，其特征是生产方法步骤如下
(a)、溶解 准确称取1份粗酪蛋白(曲拉)加入到一定体积的容器中，然后依次加入水10 15份边搅拌边升温35 45°C ，再加入1 5份10 50% NaOH溶液调pH值9 11持续 搅拌30 50min，使其完全溶解，然后加入1 5KLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶 (KLU :千克脂肪酶单位)，边搅拌边升温，最高温度达到50°C时，持续恒温搅拌水解0. 5 1. 5hr，待脂肪水解彻底后加入含10 50% CaCl2或含10 50% MgS04的溶液1 10份； 搅拌均匀后静置10 15min，准备过滤；
(b)、过滤
3
将(a)步水解好的溶液用80 120目尼龙网过滤备用，回收残杂；
(c)、分离将上述过滤液分次加入到离心管中，在3000 6000r/min下进行离心分离10 15min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物；
(d)、酸化将上述离心分离好的溶液预热到38 5(TC之间，加入1 3份4 12mol/L的盐 酸搅拌酸化，调pH值至酪蛋白等电点4. 6为终点，静置10 15min ;
(e)、清洗 过滤上述酸化蛋白中的酸性溶液，加入等体积38 5(TC之间的热水，浸泡10 15min，准备过滤；
(f)、过滤
(f)、过滤 将上述清洗好的蛋白与清洗液用80 120目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分 含量降到55 60%，准备造粒；
(h)、造粒、干燥 上述过滤好的含水率55 60%酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超 过30目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12%。
本发明的优点和效果是
产品指标
1、理化指标 感观乳白或淡黄色小颗粒状或粉末； 气味无特殊气味； 含氮量^14. 5% 水分《12. 0% 灰分《2. 0% pH值5. 5 6. 0 脂肪《0. 5% 2、微生物指标 细菌总数《30cfu/g 大肠菌群MPN/100g 《40 致病菌 不得检出 3、重金属指标 砷(以As计)《0. 0002% 铅(以Pb计)《0. 002% 本发明解决了机械分离法生产酪蛋白产品中脂肪含量高的问题，该工艺简单、可 操作性强，可将脂肪含量降低到0.5%以下、可工厂规模化生产，不论从溶解时间、能耗、产 品质量、生产成本均优于传统工艺。
附图为本发明的生产工艺流程图。 以下结合附图和实施例对本发明作进一步详细说明。
具体实施方式
实施例1
1、水解 准确称取1份粗酪蛋白加入到一定体积的容器中，然后依次加入水10份边搅拌边 升温35°C ，再加入1份50% NaOH溶液调pH值9. 0，安装上冷凝管、电动搅拌、电热套，边搅 拌边升温，当温度达到5(TC时溶液整体持续恒温搅拌50min待粗酪蛋白完全溶解，然后加 入lKLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶(KLU :千克脂肪酶单位)，持续恒温搅拌水解 1. 5hr，待脂肪水解彻底后加入含10% CaCl2的溶液10份；搅拌均匀后静置lOmin，准备过滤。
2、过滤 将第1步水解好的酪蛋白溶液用80目尼龙网过滤，回收残杂。
3、离心分离 将上述过滤好的酪蛋白溶液分次加入到离心管中，在3600r/min下进行离心 15min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物。
4、酸4t 将上述离心分离好的溶液预热到38°C ，加入1份12mol/L的盐酸搅拌酸化，调pH 值至酪蛋白等电点4. 6为终点，静置10min。
5、清洗 过滤上述酸化液中的酸性溶液，加入等体积38t:的热水，浸泡15min，准备过滤。
6、过滤 将上述清洗好的蛋白与清洗液用80目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分含量
降到55%，准备造粒。 7、造粒、干燥 上述过滤好的含水率55%酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超过30 目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12%。
实施例2
1、水解 准确称取1份粗酪蛋白加入到一定体积的容器中，然后依次加入水15份边搅拌边 升温45t:，再加入10份50% NaOH溶液调pH值11. 0，安装上冷凝管、电动搅拌、电热套，边 搅拌边升温，当温度达到5(TC时溶液整体持续恒温搅拌30min待粗酪蛋白完全溶解，然后 加入5KLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶(KLU :千克脂肪酶单位)，持续恒温搅拌水解 0. 5hr，待脂肪水解彻底后加入含50XCaCL2的溶液l份；搅拌均匀后静置15min，准备过滤。
2、过滤 将第1步水解好的酪蛋白溶液用120目尼龙网过滤，回收残杂。
3、离心分离 将上述过滤好的酪蛋白溶液分次加入到离心管中，在6000r/min下进行离心
510min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物。
4、酸化 将上述离心分离好的溶液预热到38°C ，加入3份4mol/L的盐酸搅拌酸化，调pH值 至酪蛋白等电点4. 6为终点，静置15min。
5、清洗 过滤上述酸化液中的酸性溶液，加入等体积50°C的热水，浸泡10min，准备过滤。
6、过滤 将上述清洗好的蛋白与清洗液用120目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分含量
降到55%，准备造粒。 7、造粒、干燥 上述过滤好的含水率60%酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超过30 目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12%。
实施例3
1、水解 准确称取1份粗酪蛋白加入到一定体积的容器中，然后依次加入水10份边搅拌边 升温35°C ，再加入1份50% NaOH溶液调pH值9. 0，安装上冷凝管、电动搅拌、电热套，边搅 拌边升温，当温度达到5(TC时溶液整体持续恒温搅拌50min待粗酪蛋白完全溶解，然后加 入lKLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶(KLU :千克脂肪酶单位)，持续恒温搅拌水解 1. 5hr，待脂肪水解彻底后加入含10% MgS04的溶液10份；搅拌均匀后静置10min，准备过 滤。 2、过滤 将第1步水解好的酪蛋白溶液用80目尼龙网过滤，回收残杂。
3、离心分离 将上述过滤好的酪蛋白溶液分次加入到离心管中，在3600r/min下进行离心 15min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物。
4、酸化 将上述离心分离好的溶液预热到38°C ，加入1份12mol/L的盐酸搅拌酸化，调pH 值至酪蛋白等电点4. 6为终点，静置10min。
5、清洗 过滤上述酸化液中的酸性溶液，加入等体积38t:的热水，浸泡15min，准备过滤。
6、过滤 将上述清洗好的蛋白与清洗液用80目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分含量
降到55%，准备造粒。 7、造粒、干燥 上述过滤好的含水率55%酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超过30 目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12%。
实施例4
1、水解 准确称取1份粗酪蛋白加入到一定体积的容器中，然后依次加入水15份边搅拌边升温45t:，再加入10份50% NaOH溶液调pH值11. 0，安装上冷凝管、电动搅拌、电热套，边 搅拌边升温，当温度达到5(TC时溶液整体持续恒温搅拌30min待粗酪蛋白完全溶解，然后 加入5KLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶(KLU :千克脂肪酶单位)，持续恒温搅拌水解 0. 5hr，待脂肪水解彻底后加入含50% MgS04的溶液1份；搅拌均匀后静置15min，准备过滤。
2、过滤 将第1步水解好的酪蛋白溶液用120目尼龙网过滤，回收残杂。
3、离心分离 将上述过滤好的酪蛋白溶液分次加入到离心管中，在6000r/min下进行离心 10min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物。
4、酸化 将上述离心分离好的溶液预热到38°C ，加入3份4mol/L的盐酸搅拌酸化，调pH值 至酪蛋白等电点4. 6为终点，静置15min。
5、清洗 过滤上述酸化液中的酸性溶液，加入等体积50°C的热水，浸泡10min，准备过滤。
6、过滤 将上述清洗好的蛋白与清洗液用120目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分含量
降到55%，准备造粒。 7、造粒、干燥 上述过滤好的含水率60%酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超过30 目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12%。
权利要求
一种脂肪酶法酪蛋白的生产方法，其特征在于该方法是主要以粗酪蛋白(曲拉)为原料，采用脂肪酶在酪蛋白含量为10～15％、温度20～50℃、pH值6～11的溶液中，加入酶剂量为2～5KLU/g脂肪的Lipozyme TL 100L(诺维信脂肪酶TL 100L)，时间0.5～1.5小时将脂肪水解，然后加入氯化钙(CaCl2)或硫酸镁(MgSO4)沉淀后用排渣式分离机分离，酸化、脱水、造粒、干燥后从而得到脂肪含量≤0.5％的酪蛋白产品。
2. 根据权利1所述的一种脂肪酶法酪蛋白的生产方法，其特征是生产方法步骤如下(a) 、溶解准确称取1份粗酪蛋白(曲拉)加入到一定体积的容器中，然后依次加入水10 15份 边搅拌边升温35 45°C ，再加入1 5份10 50% NaOH溶液调pH值9 11持续搅拌 30 50min，使其完全溶解，然后加入1 5KLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶(KLU : 千克脂肪酶单位)，边搅拌边升温，最高温度达到5(TC时，持续恒温搅拌水解0. 5 1. 5hr， 待脂肪水解彻底后加入含10 50% CaCl2或含10 50% MgS04的溶液1 10份；搅拌均 匀后静置10 15min，准备过滤；(b) 、过滤将(a)步水解好的溶液用80 120目尼龙网过滤备用，回收残杂；(c) 、分离将上述过滤液分次加入到离心管中，在3000 6000r/min下进行离心分离10 15min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物；(d) 、酸化将上述离心分离好的溶液预热到38 5(TC之间，加入1 3份4 12mol/L的盐酸搅 拌酸化，调pH值至酪蛋白等电点4.6为终点，静置10 15min;(e) 、清洗过滤上述酸化蛋白中的酸性溶液，加入等体积38 5(TC之间的热水，浸泡10 15min，准备过滤；(f) 、过滤将上述清洗好的蛋白与清洗液用80 120目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分含量 降到55 60%，准备造粒； (h)、造粒、干燥上述过滤好的含水率55 60 %酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超过30 目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12%。
全文摘要
本发明公开了一种脂肪酶法酪蛋白的生产方法，主要以粗酪蛋白(曲拉)为原料，采用脂肪酶在酪蛋白含量为10～15％、温度20～50℃、pH值6～11的溶液中，加入酶剂量为2～5KLU/g脂肪的Lipozyme TL 100L(诺维信脂肪酶TL100L)，时间0.5～1.5小时将脂肪水解，然后加入氯化钙(CaCL2)或硫酸镁(MgSO4)沉淀后用排渣式分离机分离，酸化、脱水、造粒、干燥后从而得到脂肪含量≤0.5％的酪蛋白产品。本发明解决了机械分离法生产酪蛋白产品中脂肪含量高的问题，该工艺简单、可操作性强，可将脂肪含量降低到0.5％以下、可工厂规模化生产，不论从溶解时间、能耗、产品质量、生产成本均优于传统工艺。
文档编号C07K1/30GK101775426SQ201010108940
公开日2010年7月14日 申请日期2010年2月9日 优先权日2010年2月9日
发明者赵德, 赵礼 申请人:青海青海湖生物科技发展有限公司