一种^99mTcO核标记的苯丁酸氮芥类配合物、其制备分离纯化方法及其用途的制作方法

专利名称：一种^99mTcO核标记的苯丁酸氮芥类配合物、其制备分离纯化方法及其用途的制作方法
技术领域：
一种99mTcO核标 记的苯丁酸氮芥类配合物、其制备分离纯化方法及其用途，属于放射性药物制备及应用领域。
背景技术：
恶性肿瘤是严重威胁人类健康和生命的常见病和多发病，已成为人类死亡的第二位原因，仅次于心脑血管疾病，有些地方已上升为第一位原因(郑虎等.药物化学.[M]，北京人民卫生出版社，2001，第四版)。据统计，发达国家中约有三分之一的人会在他们生命历程的不同阶段患上癌症，其中近四分之一的患者最终死于癌症。它对人类构成了巨大的威胁，是人类最难对付的顽症之一。氮芥衍生物抗肿瘤作用的发现被认为是肿瘤化疗发展的里程碑之一(Pratt W. B. , The Anticancer Drugs. Oxford University Press, 1979)。其后，为了寻找副作用小，选择性高的类似物，先后合成了 3000余种衍生物，但临床常用的只有10余种。苯丁酸氮芥便是其中之一。氮芥衍生物作用原理的研究表明，氮芥的烷化作用是由于它在生理温度及PH为中性或碱性条件下环化成乙烯亚胺的结果，后者与核酸组份的亲核基团烷化而发挥其生物学作用。前期的研究证明苯丁酸氮芥有抗肿瘤作用，预计它在肿瘤细胞中被选择性的活化，并证明具有较低的毒性和较高的活性而成为后来临床上应用较多的一种烷化药物。将苯丁酸氮芥和其他的活性基团相连接，可以降低苯丁酸氮芥本身的毒性，而且特异性也会增强。于是人们设想把两种药物结合在一个分子中可能会取得较好的活性。 如2005年Beatrece Coggila等合成的苯丁酸氮芥衍生物的生理活性较两种药物混合使用好(Coggiola B. , Pagliai F. , et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. , 2005, 15:3551)。 2005年Parker L. L.等合成了环状大分子多功能烷化剂，生理活性测试表明它与DNA交联接能力是苯丁酸氮芥的IO4倍，是美法仑的2000倍，它的细胞毒性和临床药物相当(Parker L. L. , Anderson F. Μ. , et al. Bioorg. Med. Chem., 2005，13:2389)。2006年Su Τ· L等人将DNA嵌入剂和氮芥相连后生物学活性得到不同程度提高(Su Τ. L.，Lin Y. W. et al. J. Med. Chem. 2006, 49 3710)。本专利中我们将苯丁酸氮芥和双功能螯合剂N2S2通过酰胺化反应连接，希望得到对肿瘤作用灵敏度高、特异性强的标记前体，进而与99mTc完成标记后通过乙酸乙酯萃取分离纯化，标记物的最终放化纯达到99%以上。目前，如何提前检测癌症的发生，是有效的提高癌病患者的生活质量着重解决的问题。但是很多癌症患者在发病前期并不能察觉自己的症状，耽误了最佳的治疗时间，也为后期的治疗带来了很多困难。所以寻找一种灵敏度高、特异性强诊断癌症患者的药物也成为了一种必然趋势。放射性核素在医学上主要有两方面的应用一是核医学成像，用于疾病诊断；二是肿瘤的放射治疗。核医学就是利用核技术来诊断、治疗和研究疾病的一门新兴学科。而核医学成像作为近代临床医学影像诊断中重要组成部分也得到迅速的发展，和CT、核磁共振、超声技术等相互补充，彼此印证，极大的提高了对疾病的诊疗和研究水平。其中放射性核素99mTc在显像中应用的非常广泛，首先，99mTc的γ射线能量适中(140 KeV)，半衰期较短 (6.02 h)，适合于显像；其次，99mTc在血液中的清除较快，并且该核素由反应堆生产，价格便宜，便于推广使用。苯丁酸氮芥本身作为一种抗肿瘤药物已经得到广泛应用，与99mTc标记后可作为一种具有潜在应用前景的肿瘤显像剂。99fflTcO-N2S2-CLB是我们 设计的一种新型肿瘤单光子发射计算机断层成像 (Single-Photon Emission Computed Tomography, SPECT)显像剂，在 CA 上没有登记号，而且国内外也没有相关报道。期望通过苯丁酸氮芥中引入双功能螯合剂N2S2并与同位素99mTc 形成稳定的配合物，为进一步的生物学性质研究和肿瘤(恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、卵巢癌、乳腺癌等)SPECT显像奠定基础。

发明内容
本发明的目的是提供一种99mTcO核标记的苯丁酸氮芥配合物，将其应用于后期生物学性质的研究和核医学诊断显像，并提供了其制备和分离纯化方法。为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案 一种结构式5所示的99mTcO核标记的苯丁酸氮芥配合物
M7 YrOOCH2CH2CH2 「9%< 1
L4、J Q
τ °凡.
CIH2CH2C CH2CH2CI
5将含N2S2-LCB 70-200ug 的 N2S2-LCB 的乙醇溶液 0. 1 mL,含 EDTA_2Na 1. 50-3. 50 mg 的 EDTA-2Na 水溶液 250 uL，10-30 mg GH 固体以及含 0. 1-0. 6 mg SnCl2WSnCl2 ·2Η20 盐酸溶液0. 1 mL加入到反应容器中，再加入37-55. 5 MBq新鲜的"mTc04_淋洗液，用磷酸盐缓冲液调至PH为5-7，并控制总反应体积为1.5-2 mL，充分震荡混勻，80-100 °C反应30 min-1. 5 h，即得标记率大于81%的99mTcO标记的苯丁酸氮芥配合物。所述磷酸盐缓冲液pH 约等于 6，由 0. 2 mol/L 的 NaH2PO4 (如 87. 7 mL)与 0. 2 mol/L 的 Na2HPO4 (如 12. 3 mL) 混合而成，并调至PH为5-7。上述标记率大于81% 99mTcO标记的苯丁酸氮芥配合物的分离纯化方法是 将上述所得标记液冷却，加入乙酸乙酯萃取，上层为含标记物99mTcO-N2S2-CLB的乙酸乙
酯有机层，分离出乙酸乙酯有机层，再通氮气去除乙酸乙酯溶剂，加入体积比为1:1的生理盐水和乙醇溶解即可99mTcO标记的苯丁酸氮芥配合物，HPLC放化纯大于99%。99mTcO核标记的苯丁酸氮芥配合物在核医学肿瘤诊断显像制剂制备中的应用。本发明的有益效果=99mTcO-N2S2-CLB是我们设计的一种新型肿瘤SPECT显像剂，在 CA上没有登记号，而且国内外也没有相关报道。我们成功地在抗肿瘤药物苯丁酸氮芥中引入N2S2螯合剂，并与放射性核素99mTc形成稳定的配合物。通过一种简易的纯化方法将放化纯由81%提升为99%，足以满足临床对放射性药物的要求(放化纯大于90%)。为进一步的生物学性质研究和肿瘤(恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、卵巢癌、乳腺癌等)显像应用奠定了基石出。


附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中
图1是实施例1的所得化合物2的质谱图； 图2是实施例1的所得化合物3的质谱图3是实施例1的所得99mTcO-N2S2-CLB放化纯的HPLC测定图谱，a为游离锝的HPLC图谱，b为标记物纯化前水相HPLC图谱，c为标记物乙酸乙酯萃取纯化后的HPLC图谱。
具体实施例方式以下结合附图对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。)制备 99mTcO-N2S2-CLB 实施例1
合成路线如下
权利要求
1.一种结构式5所示的99mTcO核标记的苯丁酸氮芥配合物 (/ ^nXOCH2CH2CH2
2.权利要求1所述的99mTcO核标记的苯丁酸氮芥配合物的合成方法，其特征在于将含 N2S2-LCB 70-200 Ug 的 N2S2-LCB 的乙醇溶液 0. 1 mL,含 EDTA_2Na 1. 50-3. 50 mg 的 EDTA-2Na 水溶液 250 uL, 10-30 mg GH 固体以及含 0. 1-0. 6 mg SnCl2 的 SnCl2 · 2H20 盐酸溶液0.1 mL加入到反应容器中，再加入37-55. 5 MBq新鲜的99mTc04_淋洗液，用磷酸盐缓冲溶液，并控制总反应体积为1.5-2 mL，充分震荡混勻，80-100 °C反应30 min-1. 5 h，即得标记率大于81 %的99mTcO标记的苯丁酸氮芥配合物。
3.根据权利要求2所述的99mTcO核标记的苯丁酸氮芥配合物的合成方法，其特征在于 所述标记率大于81% 99mTcO标记的苯丁酸氮芥配合物的分离纯化方法是，将权利要求2所得标记液冷却，加入乙酸乙酯萃取，上层为含标记物99mTcO-N2S2-CLB的乙酸乙酯有机层，分离出乙酸乙酯有机层，再通氮气去除乙酸乙酯溶剂，加入体积比为1:1的生理盐水和乙醇溶解即可99mTcO标记的苯丁酸氮芥配合物，HPLC放化纯大于99%。
4.权利要求1-3所述的99mTcO核标记的苯丁酸氮芥配合物在核医学肿瘤诊断显像制剂制备中的应用。
全文摘要
一种99mTcO核标记的苯丁酸氮芥类配合物、其制备分离纯化方法及其用途，属于放射性药物标记合成及应用领域。其配合物的制备方法是，将配体N2S2-CLB、还原剂、EDTA、GH、磷酸缓冲液和高锝酸钠(Na99mTcO4)溶液混合反应，即得到99mTcO核标记的苯丁酸氮芥配合物。标记物用乙酸乙酯萃取纯化，HPLC测其放化纯可达到99%以上。本发明99mTcO核标记的苯丁酸氮芥配合物制备方法简单易操作、条件温和，通过分离纯化后放化纯高，其为后续的核医学肿瘤显像的研究奠定了优秀的基础。
文档编号C07F13/00GK102311458SQ20111014542
公开日2012年1月11日 申请日期2011年5月31日 优先权日2011年5月31日
发明者林建国, 程文, 罗世能, 薛丽, 邱玲 申请人:江苏省原子医学研究所