用于蛋白纯化的层析柱的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种用于蛋白纯化的层析柱,属于生物纯化器械领域。本发明提供的层析柱,柱体上设置刻度,方便操作人员对填料高度和进样量的掌握;柱体顶端设置U型筛网,便于缓冲液、样品液、洗脱液等液体从柱体的四壁流下,避免引起飞溅。本发明结构简单,操作方便,蛋白的纯化效果好。
【专利说明】用于蛋白纯化的层析柱
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明属于生物纯化器械,具体涉及一种用于蛋白纯化的层析柱。
【背景技术】
[0003]目前,多种化合物的组合物、天然产物及中药的分离纯化,主要是采用柱色谱,使用层析柱,通过柱层析过程来实现。传统的柱色谱是将混合化合物放置在玻璃柱柱床的顶端,使混合溶剂组成的洗脱剂(流动相)在重力作用下,通过装有吸附性介质材料(固定相)的垂直玻璃柱,分离得到各个较纯的产品(纯品),其原理是:由于混合化合物中各组分对色谱柱中固定相和流动相的亲和力不同,故根据混合化合物的性质选择合适的固定相和流动相,可以达到将其中各组分尽可能分离的目的,分离的产品在柱子出口分别被收集到各个收集瓶中,然后,鉴定各个收集瓶中的收集到的层析液,根据鉴定结果合并和浓缩各相同层析液,得到各个纯品。
[0004]常见层析柱根据压力不同可分为常压柱、中压柱和高压柱。常压柱在实际中用得最多,常常是自己根据需要采用不同材料的层析柱、装填不同的填料来实现目标物质的分离纯化。玻璃层析柱又尤其常用,常包括柱体、活塞,有的还包括位于柱体上端的用于固定加液球的倒钩等。目前常见的玻璃层析柱存在如下不足:一方面,在玻璃层析柱的填料装填和被分离物质样品装填中,常常根据不同填料和不同物质采用不同的填料,样品比例,以利于在达到最佳分离效果的同时节约填料,而填料.样品的比例通常参照其体积比,但是目前常用玻璃柱没有刻度,常常需要操作人员凭经验目测或用其他度量工具进行测量,非常麻烦;另一方面,在层析过程中,常常需要掌握样品在分离介质即填料中的迁移速度,然后根据迁移速度进行流出液的速度调节,以利于在达到最佳分离效果的同时节约层析时间,但是目前的层析柱没有刻度,常常是在不同时间点对某个层析色带的位置用记号笔标记,这样的做法不够准确,同时标`记笔所标记的记号可能会因为添加洗脱剂时的泄漏而被冲刷掉,需要再次标记,很不方便。
[0005]此外,目前的层析柱在进样时,样品溶液从层析柱顶端的中部直接流进柱体,容易造成柱体内填料飞溅至层析柱的内壁上。由于层析用的填料常常是比较昂贵的,飞溅至内壁上的填料没有在层析中得到充分的利用,影响层析效果。
【发明内容】
[0006]为解决上述问题,本发明提供一种用于蛋白纯化的层析柱,采用如下技术方案: 一种用于蛋白纯化的层析柱,包括柱头和柱体,所述柱头与柱体为螺纹连接,其特征在
于,所述柱头的顶部设有供硅胶软管通过的通孔;所述柱体采用透明的玻璃材质,所述柱体上沿柱体轴向设置有均匀的刻度;所述柱体的顶部设置可拆卸的U型筛网,所述U型筛网为上端开口、下端封闭的喇叭形状,所述U型筛网的侧壁含有通孔;所述U型筛网的上部放置中速定性滤纸滤膜,所述滤膜的表面积大于或者等于U型筛网的表面积;所述柱体的底部为锥形出口 ;所述锥形出口的上部设置筛板,所述的筛板的孔径为0.2^0.4 μ m。
[0007]优选地,所述柱头和柱体的连接处设有密封圈,所述的密封圈为硅胶材质。
[0008]本发明具有如下有益效果:
1.本发明提供的层析柱,其柱体采用透明的玻璃材质,并且在柱体上设置均匀的刻度,如此设置,有利于在层析柱的填料装填和样品上样时方便准确地把握填料样品比例,通过观察某个色带在不同时间点所在的刻度位置,从而方便掌握被分离物质在层析柱中的迁移速率,使整个层析过程更方便,提高分离效率和整个工作效率。
[0009]2.本发明提供的层析柱,在柱体的顶部设置可拆卸的U型筛网,所述U型筛网为为上端开口、下端封闭的喇叭形状,并且U型筛网的侧壁含有通孔,如此设置,有利于缓冲液、样品液、洗脱液从柱体顶部进入时,是沿着柱体的四壁流下的,不会造成柱体内液体的飞溅,引起填料飞溅在柱体的四壁上,影响填料高度,从而影响蛋白的纯化效果。
[0010]3.本发明提供的层析柱,在锥形出口的上部设置筛板,并限定筛板的孔径为
0.2、.4μπι,如此这样便可以达到蛋白纯化时的填料不会随着缓冲液、样品液、洗脱液一起,从锥形出口流失,但又不会影响缓冲液、样品液和洗脱液从锥形出口的流出效果。
[0011]4.本发明提供的层析柱,U型筛网的上部放置中速定性滤纸滤膜,可以对待分离的样品液进行初步分离,拦截粒径比较大的未处理完全的菌体等杂质。
[0012]5.本发明提供的层析柱,在柱头和柱体的连接处设有密封圈,便于柱头和柱体的密闭,避免缓冲液、样品液、洗脱液从两者的缝隙处流出,造成浪费。
[0013]6 .本发明提供的层析柱,结构简单,操作方便,蛋白的纯化效果好。
【专利附图】
【附图说明】
[0014]图1为本发明的结构示意图;其中,I表示柱头;2表示硅胶软管;3表示锥形出口 ;4表刻度;5表筛板;6表不U型筛网;7表柱体。
【具体实施方式】
[0015]下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。除下述实施方式外,本发明还可以有其他实施方式,凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案,均落在本发明要求的保护范围内。
[0016]如图1所示,一种用于蛋白纯化的层析柱,包括柱头I和柱体7,所述柱头I与柱体7为螺纹连接,其特征在于,所述柱头I的顶部设有供硅胶软管2通过的通孔;所述柱体7采用透明的玻璃材质,所述柱体7上沿柱体轴向设置有均匀的刻度4 ;所述柱体7的顶部设置可拆卸的U型筛网6,所述U型筛网6为上端开口、下端封闭的喇叭形状,所述U型筛网6的侧壁含有通孔;所述U型筛网6的上部放置中速定性滤纸滤膜(在图中并没有标示出来,其设置在筛网的上部,但是不超过柱体顶部的水平位置),所述滤膜的表面积大于或者等于U型筛网6的表面积;所述柱体7的底部为锥形出口 3 ;所述锥形出口 3的上部设置筛板5,所述的筛板5的孔径为0.2^0.4 μ m。
[0017]作为优选,在柱头I和柱体7的连接处设有密封圈(在图中并没有标注出来),用于密封作用,所述的密封圈为硅胶材质,密封效果更佳。
【权利要求】
1.一种用于蛋白纯化的层析柱,包括柱头(I)和柱体(7),所述柱头(I)与柱体(7)为螺纹连接,其特征在于,所述柱头(I)的顶部设有供硅胶软管(2)通过的通孔;所述柱体(7)采用透明的玻璃材质,所述柱体(7)上沿柱体轴向设置有均匀的刻度(4);所述柱体(7)的顶部设置可拆卸的U型筛网(6),所述U型筛网(6)为上端开口、下端封闭的喇叭形状,所述U型筛网(6)的侧壁含有通孔;所述U型筛网(6)的上部放置中速定性滤纸滤膜,所述滤膜的表面积大于或者等于U型筛网(6)的表面积;所述柱体(7)的底部为锥形出口(3);所述锥形出口(3)的上部设置筛板(5),所述的筛板(5)的孔径为0.2^0.4 μ m0
2.根据权利要求1所述的用于蛋白纯化的层析柱,其特征在于,所述柱头(I)和柱体(7)的连接处设有密封`圈,所述的密封圈为硅胶材质。
【文档编号】C07K1/16GK103691153SQ201310644005
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月5日 优先权日:2013年12月5日
【发明者】朱辉, 邓涛 申请人:成都雅途生物技术有限公司