一种从山莓叶中分离对羟基肉桂酸乙酯的方法及用途
【专利摘要】本发明提供一种从山莓叶中分离对羟基肉桂酸乙酯的方法，是将山莓叶用乙醇60℃水浴加热旋转提取3~5次，合并提取液，真空浓缩得提取物浸膏；将提取物浸膏加水溶解，用乙酸乙酯萃取，萃取液进行硅胶柱色谱分离，先用中压柱层析分离，洗脱剂选用石油醚与乙酸乙酯，乙酸乙酯与甲醇进行梯度洗脱，进行家兔离体肠运动实验，筛选出其抗腹泻活性强的组分；将该组份进行低压硅胶柱层析分离纯化，用氯仿与甲醇进行梯度洗脱，合并相同组分，再将进行家兔离体肠运动实验筛选出其抑制作用最强的组分用反相ODS填料开放柱进行柱色谱分离，用甲醇-水洗脱，得到该化合物。该化合物首次从山莓叶中获得，其具有抑制肠蠕动、抗腹泻作用，可用于制备新的天然抗腹泻药物。
【专利说明】一种从山莓叶中分离对羟基肉桂酸乙酯的方法及用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及医药【技术领域】，具体地说，是涉及一种山莓叶具有抑制肠蠕动、抗腹泻作用的化合物对羟基肉桂酸乙酯的分离方法以及该化合物的用途。
【背景技术】
[0002]山莓(Rubus corchorifolius L.f)是蔷薇科悬钩子属植物,在我国除东北、甘肃、新疆、西藏外，全国均有分布，野生资源蕴藏量相当大。山莓是湘西、鄂西北等地区少数民族长期使用的传统中草药，在湘西地区群众常将嫩叶捣碎饲喂动物治疗腹泻，效果良好，是民间公认的安全、有效的抗腹泻秘方。朱深海及本实验室前期研究表明:山莓叶提取物对家兔离体十二指肠、空肠、回肠、结肠的运动均有抑制作用，这一研究有提示我们继续研究山莓叶中抑制肠蠕动的活性成分。但目前对于山莓叶中具有抑制肠蠕动的化合物没有报道。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于提供一种从山莓叶中分离化合物对羟基肉桂酸乙酯的方法，该化合物具有抑制肠蠕动活性。
[0004]本发明提供的从山莓叶中分离的化合物，化学名为:对羟基肉桂酸乙酯，结构式如式(I)所示:
【权利要求】
1.一种从山莓叶中分离对羟基肉桂酸乙酯的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)将山莓叶用浓度为80~100%乙醇60°C水浴加热旋转提取3-5次，山莓叶与乙醇质量体积比为1g: 15~20mL，每次2h，合并提取液，真空浓缩回收溶剂，得提取物浸膏； (2)将提取物浸膏加水溶解，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别得到石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取液，减压回收溶剂，得各提取部位粉末；以抗家兔离体肠运动实验为活性跟踪模型，得出其活性段主要集中在乙酸乙酯层； (3)将乙酸乙酯层萃取物进行硅胶柱色谱分离，先用中压柱层析分离，洗脱剂选用石油醚与乙酸乙酯，乙酸乙酯与甲醇进行梯度洗脱，洗脱的流速为15 mL/min，柱层析的检测波长分别为220 nm、265 nm，同时每管收集的流份量为20 mL ;进行家兔离体肠运动实验，筛选出其抗腹泻活性强的组分； (4)将抗腹泻活性强的组份进行低压硅胶柱层析分离纯化，用氯仿与甲醇进行梯度洗脱，每20 mL收集一瓶，通过薄层层析法分析，将含有相同组分的流份合并，并进行家兔离体肠运动实验，筛选出其抑制作用最强的组分，将该组分用反相ODS填料开放柱进行柱色谱分离，用甲醇-水洗脱，得到该化合物。
2.根据权利要求1所述的从山莓叶中分离对羟基肉桂酸乙酯的方法，其特征在于，步骤(I)中，加热旋转提取3次，山莓叶与乙醇质量体积比分别为lg:7mL, lg:4mL, lg:4mL。
3.根据权利要求1所述的从山莓叶中分离对羟基肉桂酸乙酯的方法，其特征在于，步骤(3)中，用石油醚与乙酸乙酯进行梯度洗脱时，石油醚和乙酸乙酯的体积配比依次为100:0、50:50、20:80，乙酸乙酯与甲醇进行梯度洗脱时，乙酸乙酯和甲醇的体积配比依次为100:0、80:1、40:1、20:1、10:1、5:1、1:1、0:1。
4.根据权利要求1所述的从山莓叶中分离对羟基肉桂酸乙酯的方法，其特征在于，步骤(4)中，用氯仿与甲醇进行梯度洗脱洗脱时，氯仿和甲醇的体积配比依次为25:1，20:1，15:1 ,10:1 ,5:1ο
5.从山莓叶中分离的对羟基肉桂酸乙酯在制备抗腹泻药物方面的用途。
【文档编号】C07C67/48GK103922935SQ201410124854
【公开日】2014年7月16日 申请日期:2014年3月31日 优先权日:2014年3月31日
【发明者】常云佩, 刘晓娟, 曹庸, 刘欣, 周丽萍 申请人:曹庸