一种试剂及其在二价铜离子检测中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种检测二价铜离子(Cu2+)的试剂，它是吡哆醛肼。此试剂由吡哆醛和水合肼在乙醇中回流8小时制得，反应只需一步进行，且反应条件简单，易于生产。本发明提供了二价铜离子的定量检测方法，是基于吡哆醛肼，在甲醇/HEPES(pH7.4)的混合溶液中定量地检测二价铜离子的含量。该检测方法，对二价铜离子显示了高的灵敏性和选择性，检测过程简便、灵敏、快速，检测结果准确。
【专利说明】一种试剂及其在二价铜离子检测中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及二价铜离子的检测技术，具体涉及一种试剂及其合成方法，以及这种试剂在检测二价铜离子中的应用。
【背景技术】
[0002]化学传感器近年来由于其测定的简单性和效果的明显性被广泛用于目标分子的检测。我们知道，铜在环境，生物和化学系统中具有举足轻重的作用是必不可少的软过渡金属离子。铜的化合物也用于植物病害处理、自来水处理，以及用作木材和皮革的防腐剂。虽然生物体对少量铜的摄取是不可缺少的，但高剂量的铜对生物体是有害的，甚至有毒。铜中毒引起氧化应激及相关症状，这可能导致糖尿病和许多神经退行性疾病如老年痴呆症，帕金森，Menke综合症,威尔逊。由于其显者的生理意义和相关生物的影响，闻选择性和闻灵敏的铜传感器引起了极大的兴趣。
[0003]吡哆醛是比色或荧光化学传感器在特定重金属和过渡金属离子发展的理想平台。我们合成了吡哆醛肼的化学探针，此探针能在准水相中对铜离子进行快速、高选择性和高灵敏性检测，此探针还能用于细胞成像。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种选择性高、能定量检测Cu2+的新的试剂，该试剂合成方法简单，检测方法便于 操作，该试剂还能用于细胞成像。
[0005]本发明提供的快速检测Cu2+的试剂和方法，是基于一种吡哆醛肼，在pH为7.4的HEPES溶液和甲醇混合溶液中定量地检测Cu2+的含量。该检测方法，对Cu2+显示了高的灵敏性和选择性，检测过程简便、灵敏、快速，检测结果准确。
[0006]该试剂的结构是:
[0007]
【权利要求】
1.一种试剂:它是吡哆醛肼，其特征在于结构式为:
2.如权利要求1所述的一种试剂的合成方法，其特征在于步骤为:吡哆醛盐酸和过量的水合肼在乙醇中回流8小时，冷却后过滤，再用乙醇和水重结晶得到白色的固体。
3.—种检测二价铜离子的方法:其特征在于，步骤为: (1)、配制pH= 7.4、浓度为IOmM的HEPES缓冲溶液，配制2mM的吡哆醛肼甲醇溶液； (2)、按体积比5:5:1，将HEPES缓冲溶液、甲醇溶液和吡哆醛肼的甲醇溶液加到干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着待测样的加入，455nm的荧光强度逐渐减弱； (3)、用蒸馏水配制2mM的Cu2+溶液，把ImL的HEPES缓冲溶液、ImL的甲醇溶液、200μ L的吡哆醛甲醇溶液加到另一个荧光比色皿中，分别在加入二价铜离子溶液的体积为10、20、.30、40、50、60、70、80 μ L时，在荧光分光光度仪上测定455nm对应的荧光强度F为177、153、.131、110、88、63、42、17，以Cu2+浓度为横坐标，以相对荧光强度F。一 F为纵坐标绘制图，F。=.201，得到Cu2+浓度的工作曲线；线性回归方程为=Ftl — F = 3.28+2.23c, c的单位为μΜ ; (4)、将HEPES缓冲溶液lOOOuL、甲醇溶液1000uL和吡哆醛肼甲醇溶液200uL加到干净的荧光比色皿中，用微量进样器吸取VyL待测样品溶液，加入到此干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，将测得的荧光强度代入步骤(3)的线性回归方程，得到浓度C，待测样品C待测样=(2200+V待测样)u LXcX 10 /Vu L,即可求得Cu的浓度。
【文档编号】C07D213/66GK103980189SQ201410194130
【公开日】2014年8月13日 申请日期:2014年5月8日 优先权日:2014年5月8日
【发明者】阴彩霞, 霍方俊 申请人:山西大学