一种具有荧光性质的apn抑制剂及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种具有荧光性质的APN抑制剂，其结构通式为(Ⅰ)或(Ⅱ)。其中：R1为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯甲基、2-氨基乙基、2,2-N,N-二甲基乙基或羟基；R2为氢、卤素或者亲水性基团，R为甲基或者乙基。所述抑制剂可作为氨肽酶N抑制剂，检测氨肽酶N的组织分布和肿瘤细胞及组织成像，作为抗实体瘤药物，检测氨肽酶N异常表达疾病诊断。
【专利说明】一种具有荧光性质的APN抑制剂及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物【技术领域】，具体涉及一种具有荧光性质的APN抑制剂及其应用。
【背景技术】
[0002] 氨肽酶N(APN，⑶13)广泛表达于人体正常组织的各个器官，能够从蛋白质的N末 端降解释放氨基酸。与正常组织细胞相比，该酶在肿瘤细胞表面过度表达，对肿瘤的侵袭、 血管生成具有重要作用。另外，该蛋白酶作为许多病毒的受体参与相应的生理反应。它还表 达于抗原递呈细胞表面，通过降解多种免疫活性物质，削弱巨噬细胞和NK细胞（自然杀伤 细胞）对肿瘤细胞的识别和杀伤能力[Zhang，X.P. ;Xu，W.F.Aminopeptidase N(APN/Q)13) as a target for anti-cancer agent design. Curr Med Chem 2008, 15, 2850-2865]〇
[0003] 上世纪70年代，日本学者Umezawa等人从网状橄榄链霉菌（Streptomyces olivoreticuli)培养液中发现了一种小分子二肽化合物N-[(2S, 3R)-3-氨基-2-轻 基-4-苯丁酰]-L-亮氨酸（Bestatin)，它具有抗菌作用、免疫增强作用和抗肿瘤活性作用 [Umezawa, H. ；Aoyagi, T. ；Suda, Η. ；Hamada, Μ. ；Takeuchi, Τ. Bestatin, an inhibitor of aminopeptidase B, produced by actinomycetes. J Antibiot(Tokyo) 1976, 29, 97-99. ]〇 Bestatin能够抑制多种氨肽酶的活性，如氨肽酶N (APN)、氨肽酶B(APB)、氨肽酶P (APP)、亮 氨酸氨肽酶（LAP)、蛋氨酸氨肽酶（MetAP)等。Bestatin于1987年在日本上市，通用名为 Ubenimex,商品名为Bestatin。1998年在国内上市，通用名为乌苯美司，商品名为百士欣。 自Bestatin被发现以来，药物化学工作者们在APN的抑制剂发现上投入了大量的精力，数 以千计的APN抑制剂先后被报道，但是大部分抑制剂（包括Bestatin)的半抑制率IC 5tl均 在微摩尔级别。
[0004] 将抑制剂与荧光团相连接可以得到荧光抑制剂（荧光探针），通过抑制剂与蛋白 的结合可以实现对靶蛋白的荧光标记，从而可以用来进行检测靶点的组织分布。Harbut，M. B. ；Velmourougane, G. ；Reiss, G. ；Chandramohanadas, R. ；Greenbaum, D. C. , Development of bestatin-based activity-based probes for metallo-aminopeptidases. Bioorg Med Chem Lett, 2008, 18，（22) ,5932-5936 ;和 Hahnenkamp, A. ;Schafers，M. ;Bremer，C.; Holtke, C. Design and synthesis of small-moIecuIe fluorescent photoprobes targeted to aminopeptdase N(APN/CDI3)for optical imaging of angiogenesis. Bioconjug Chem 2013,24, 1027-1038,报道了APN靶点的荧光抑制剂，但是已报道的荧光抑 制剂的IC5tl均在微摩尔级别，并且由于上述荧光探针中荧光团影响抑制剂与酶的结合，使 得抑制剂与APN活性中心的结合都不强。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是克服上述现有技术的不足，提供一种具有荧光性质的APN抑制剂 及其应用。
[0006] 为实现上述技术目的，本发明采用下述技术方案：
[0007] 具有荧光性质的APN抑制剂，其结构通式为（I )或（II )。
[0008?
【权利要求】
1. 一种具有荧光性质的APN抑制剂，其特征在于，其结构通式为（I)或（II)。
其中=R1为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯甲基、2-氨基乙基、2, 2-N，N-二甲 基乙基或轻基；R2为氧、齒素或者未水性基团，R为甲基或者乙基。
2. 如权利要求1所述的APN抑制剂，其特征在于，所述卤素为F、Cl、Br。
3. 如权利要求1所述的APN抑制剂，其特征在于，所述亲水性基团为氨基。
4. 如权利要求1所述的APN抑制剂，其特征在于，其结构式为： Ll-Il：
R1=氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯甲基、2-氨基乙基、2, 2-N，N-二甲基乙基 或羟基； L12-22 ：
R1=氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯甲基、2-氨基乙基、2, 2-N，N-二甲基乙基 或羟基； L23-33 ：
R1=氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯甲基、2-氨基乙基、2, 2-N，N-二甲基乙基 或羟基； L34-44 ：
R1=氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯甲基、2-氨基乙基、2, 2-N，N-二甲基乙基 或羟基； L45-55 ：
R1=氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯甲基、2-氨基乙基、2, 2-N，N-二甲基乙基 或羟基； L56-57 ：
R=甲基或乙基。
5. 如权利要求1所述的APN抑制剂，其特征在于，其结构式为：
6. 如权利要求1-5任一所述的APN抑制剂，其特征在于，所述抑制剂作为氨肽酶N抑制 剂的应用。
7. 如权利要求1-5任一所述的APN抑制剂，其特征在于，所述抑制剂在检测氨肽酶N的 组织分布和肿瘤细胞及组织成像的应用。
8. 如权利要求1-5任一所述的APN抑制剂，其特征在于，所述抑制剂作为抗实体瘤药物 的应用。
9. 如权利要求1-5任一所述的APN抑制剂，其特征在于，所述抑制剂在氨肽酶N异常表 达疾病诊断中的应用。
【文档编号】C07D265/34GK104311488SQ201410510446
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2014年9月28日 优先权日:2014年9月28日
【发明者】李敏勇, 杜吕佩, 陈来中 申请人:山东大学