用于厌氧或微需氧微生物的液体培养的系统和方法与流程

文档序号:11141492阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种方法,所述方法包括:

在容器中形成含水混合物;所述混合物包括含有厌氧微生物或微需氧微生物的样品,支持厌氧微生物或微需氧微生物的生长的预定体积的介质,以及氧清除体系;

其中所述氧清除体系包含有效量的i)氧化还原酶家族的酶以及ii)所述酶的底物;

其中所述氧清除体系在水合时被激活,从而将所述介质中的溶解氧耗尽到有利于所述厌氧微生物或所述微需氧微生物的生长的浓度;

其中所述酶选自抗坏血酸氧化酶和漆酶;以及

在有利于所述厌氧微生物或微需氧微生物的至少一种细胞分裂的条件下温育所述含水混合物。

2.根据权利要求1所述的方法,其中将所述介质中的溶解氧耗尽到有利于所述厌氧微生物或所述微需氧微生物的所述生长的浓度包括将所述介质中的溶解氧耗尽到约100μM或更低的浓度。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法,所述方法还包括:

检测所述厌氧微生物或所述微需氧微生物的生长。

4.根据权利要求3所述的方法,所述方法还包括:

分析所述厌氧微生物或所述微需氧微生物以使所述厌氧微生物或所述微需氧微生物与由除了其在含氧环境中生长的能力之外的特征表征的微生物的属、种或群相关联。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述酶包括抗坏血酸盐氧化酶,其中所述底物选自:抗坏血酸或其盐、抗坏血酸的衍生物或其盐、对苯二酚、连苯三酚、邻苯二酚,或前述底物的任两种或更多种的混合物。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中所述酶包括漆酶,其中所述底物选自酚、L-酪氨酸、邻联苯酚和对联苯酚、2,6-二甲氧基苯酚,以及前述底物的任两种或更多种的混合物。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述方法促进包含微需氧微生物或厌氧微生物中的至少一种与需氧微生物的混合微生物群体中的厌氧或微需氧微生物的富集。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中在形成所述含水混合物之后,所述酶以至少1000单位/升的浓度存在于所述混合物中。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中在形成所述含水混合物之后,所述底物以约0.1mg/ml至100mg/ml的浓度存在于所述混合物中。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中在形成所述含水混合物之前,所述氧清除体系的至少一部分被配置为溶液、片剂、小袋、设置在所述容器的壳壁的内侧表面上的涂层、或粉末。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法,形成所述含水混合物包括使所述氧清除体系和所述样品的混合物与所述介质接触。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中形成所述含水混合物包括使所述氧清除体系与包含所述样品和所述介质的含水液体混合物接触。

13.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中将所述介质中的溶解氧耗尽到有利于所述生长的浓度包括将所述溶解氧在约60分钟或更短的时间内耗尽到所述浓度。

14.一种用于培养微需氧或厌氧微生物的培养系统,所述培养系统包含:

有效量的i)氧化还原酶家族的酶以及ii)所述酶的底物,其中所述酶选自抗坏血酸氧化酶和漆酶;

容器;以及

支持所述厌氧或微需氧微生物的生长的预定体积的含水介质;

其中所述有效量有效地使所述预定体积中的溶解氧耗尽到有利于微需氧微生物或专性厌氧微生物的生长的浓度。

15.根据权利要求14所述的培养系统,其中所述有效量有效地使所述预定体积中的所述溶解氧耗尽到约100μM或更少。

16.根据权利要求14或权利要求15所述的培养系统,其中所述有效量有效地使所述预定体积中的所述溶解氧在约60分钟或更短的时间内耗尽到有利于所述生长的浓度。

17.一种试剂盒,所述试剂盒包括:

可密封的容器;以及

氧清除体系,所述氧清除体系包括i)氧化还原酶家族的酶以及ii)所述酶的底物,其中所述酶选自抗坏血酸氧化酶和漆酶。

18.根据权利要求17所述的试剂盒,其中所述酶分配在一个或多个第一器皿中,每个第一器皿具有有效地与所述酶底物反应的量的酶,以使预定体积的含水介质中的溶解氧耗尽到有利于厌氧微生物或微需氧微生物的生长的溶解氧浓度。

19.根据权利要求17或权利要求18所述的试剂盒,其中所述底物分配在所述一个或多个第一器皿或者一个或多个第二器皿中,每个第一器皿或第二器皿具有有效地与所述酶反应的量的底物,以使预定体积的含水介质中的溶解氧耗尽到有利于厌氧微生物或微需氧微生物的生长的溶解氧浓度。

20.根据权利要求17至19中任一项所述的试剂盒,其中所述试剂盒还包括pH指示剂。

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