一种高密度培养粪产碱杆菌及其制备方法及用途与流程

文档序号:12248343阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种高密度培养粪产碱杆菌的方法,其特征在于:所述制备方法以生物碳作为吸附载体,以粪产碱杆菌作为出发菌株,依次经过试管斜面培养、液体摇瓶培养、种子罐扩大培养、液体发酵培养、喷雾干燥和包装工艺制备。

2.根据权利要求1所述的一种高密度培养粪产碱杆菌的方法,其特征在于:所使用的生物碳是污泥、动物粪便、动物骨头、植物根茎和木屑中的任意一种;所使用的粪产碱杆菌菌种是任意一种粪产碱杆菌。

3.根据权利要求1所述的一种高密度培养粪产碱杆菌的方法,其特征在于:其制备方法包括如下步骤:

A1试管扩大培养:将粪产碱杆菌斜面菌种接种于粪产碱杆菌试管斜面培养基中进行培养,制得粪产碱杆菌试管斜面菌种;

A2液体摇瓶培养:将步骤A1所制得的粪产碱杆菌试管斜面菌种接种到装有含所述生物碳的液体摇瓶培养基的摇瓶中,进行培养,制得粪产碱杆菌液体摇瓶菌种;

A3种子罐扩大培养:将步骤A2所制得的粪产碱杆菌液体摇瓶菌种接种到含所述生物碳的种子罐培养基中进行培养,制成粪产碱杆菌菌种;

A4液体发酵培养:将步骤A3所制得的粪产碱杆菌菌种接种到含所述生物碳的液体发酵培养基中,并混合均匀,进行发酵培养,制得粪产碱杆菌发酵液;

A5包装:粪产碱杆菌发酵液经过离心、喷雾干燥、包装制得粪产碱杆菌干粉。

4.根据权利要求3所述的一种高密度培养粪产碱杆菌的方法,其特征在于:所述制备方法具体如下:

B1试管扩大培养:接种一环粪产碱杆菌斜面菌种到粪产碱杆菌试管斜面培养基中,25~40℃培养2~10天,制得试管斜面菌种,该试管斜面4℃保存备用;

B2液体摇瓶培养:接种一环步骤B1所制得的试管斜面菌种接种于装有20~150mL含所述生物碳的液体摇瓶培养基的三角瓶中,三角瓶在转速为10~160r/min,温度25~40℃的条件下,摇床培养18-86h,制成粪产碱杆菌液体摇瓶菌种;

B3种子罐扩大培养:将步骤B2所制得的液体摇瓶菌种接种到含所述生物碳的种子罐扩大培养基中,且所述液体摇瓶菌种与种子罐扩大培养基按体积比为0.2~10%的接种量接种,在温度为25~40℃,搅拌转速为10~120r/min,在每分钟通入气体的体积与种子罐扩大培养基体积比为0.2~1.8:1的通气量条件下,培养18~96h,制成粪产碱杆菌菌种;

B4液体发酵培养:将步骤B3所制得的粪产碱杆菌种按体积比为0.2~10%接种量接入到含所述生物碳的液体发酵培养基中,在温度25~40℃,搅拌转速为10~120r/min,在每分钟通入气体的体积与种子罐扩大培养基体积比为0.2~1.8:1的通气量条件下,培养48~96小时,制得粪产碱杆菌发酵液,该发酵液菌体浓度为1013~1015cfu/mL;

B5将步骤B4所制得的粪产碱杆菌发酵液4000~10000r/min离心10~30min,调节菌体浓度1014~1016cfu/mL,进风温度110-120℃,进样速度600~800mL/h,雾化压力0.08~0.2MPa,热风流量20~20~40M3/h;在此条件下,喷雾干燥后产物活菌量达1015~1017cfu/g。

5.根据权利要求4所述的一种利用生物碳吸附性高密度培养粪产碱杆菌的方法,其特征在于:所述步骤B2中所述液体摇瓶培养基是在100~130℃条件下灭菌10~60min制得,且每升液体摇瓶培养基中含有蔗糖5~20g,蛋白胨1~10g,麸皮2~20g,牛肉浸膏1~10g,生物碳3~30g。

6.根据权利要求4所述的一种高密度培养粪产碱杆菌的方法,其特征在于:所述步骤B3中所述种子罐扩大培养基是在100~130℃条件下灭菌10~60min制得,且每升种子罐培养基中含有蔗糖5~20g,蛋白胨1~10g,麸皮2~20g,牛肉浸膏1~10g,生物碳3~30g。

7.根据权利要求4所述的一种高密度培养粪产碱杆菌的方法,其特征在于:所述步骤B4中所述发酵培养基是在100~130℃条件下灭菌10~60min制得,且每升发酵培养基中含有蔗糖10~50g,蛋白胨1~10g,麸皮2~20g,酵母浸膏3~20,植物油2~8g,生物碳5~50g。

8.一种高密度培养粪产碱杆菌,其特征在于:所述高密度培养粪产碱杆菌是由权利要求1-7任一项所述高密度培养粪产碱杆菌的方法所制得。

9.一种如权利要求8所述的高密度培养粪产碱杆菌的应用,其特征在于:所述高密度培养粪产碱杆菌用作生物肥料的活菌剂或与其他菌种共同作为生物肥料的活菌剂。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1