耐盐菌的分离纯化方法及分离得到的耐盐碱菌株及其应用与流程

文档序号:12248495阅读:3269来源:国知局

本发明涉及微生物领域,具体而言,涉及一种耐盐菌的分离纯化方法及分离得到的耐盐碱菌株及其应用。



背景技术:

土壤盐碱化问题是目前全球最严重的环境问题之一,包括人口膨胀等各方面的因素,不断使人类开发利用大面积土地生产新的次生盐碱化,加速土壤盐碱化的进程。

盐碱土因含有过量的盐分、有毒物质、碱度过大及不良的土壤物理性状,对植物生长产生抑制作用,导致区域生态恶化。在当今提倡生态效益为重的前提下,生物改良措施已成为研究的热点,而微生物对盐碱地的改良作用不可小视。微生物多少是地力或盐碱地的一个指标,盐碱地微生物数量极少,是由于微生物有益菌群在碱性条件下不易生存繁衍。主要原因是盐碱环境下不利于微生物生存,没有微生物就转换不了有机质,从而生不成植物需要的生物蛋白质和氨基酸。单凭生物肥是改良不了盐碱地的,必须实施“改良盐碱地系统改造工程”,以改良盐碱地配套的多个产品和相应的技术,才能改良盐碱地,激活有机质,增加微生物数量。土壤中的有机质愈多,有益菌群微生物愈多,土壤地力愈好。

在土壤,水,空气及动、植物体中,不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起,当我们希望获得某一种微生物时,就必须从混杂的微生物类群中分理它,以得到只含有这一种微生物的纯培养,这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。为了获得某种微生物的纯培养,一般是根据该微生物对营养,酸碱度,氧等条件的要求不同,而供给它适宜的培养条件,或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长而抑制其他菌生长的环境,从而淘汰其他一些不需要的微生物,再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或平板划线分离法等分离纯化微生物,直至得到纯菌株。

若想要增加盐碱地中微生物的数量,对其土壤中耐盐微生物的分离与纯化是行之有效的一个重要手段。内蒙古河套平原地区的盐碱地以硫酸盐、氯化物为主,多为中度和重度盐碱地,土壤中微生物菌群种类数量相对较少,想要分离出目的菌种不容易实现,尤其是能够耐受高浓度氯化钠的菌株。现有技术中还没有针对盐碱地微生物分离与纯化的有效技术。

有鉴于此,特提出本发明。



技术实现要素:

基于现有技术中,针对内蒙古河套平原地区的盐碱地中耐盐碱微生物数量相对较少的问题,本发明的第一目的在于提供一株能够抗高盐胁迫的微生物,进而有效地进行盐碱地土壤改良。

本发明的第二目的在于提供一种所述的耐盐菌的分离纯化方法,上述抗高盐胁迫的微生物即通过该方法分离得到。

本发明的第三目的在于提供一种所述的耐盐菌的分离纯化方法在鉴定盐碱地土样中与否存在耐盐芽孢杆菌及判断盐碱化程度的应用。

为了实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案:

一株耐盐菌菌株,所述菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC13060;保藏时间为:2016年09月29日。

该菌种来源于内蒙古河套平原盐碱地中。

经过鉴定,该解淀粉芽孢杆菌属于细菌门芽孢杆菌亚目枯草芽孢杆菌属细菌,其具有广泛的能量代谢机制,在光照条件下能光合作用,好氧生长;可在盐浓度高达120g/L的培养基中仍能较好的生长,有很好的改良盐碱地土壤的应用价值。由于该菌株由内蒙古河套平原进行分离,因而其尤其适合于改良内蒙古河套平原的盐碱地土壤。

液体培养物为浅黄色,瓶底和瓶壁出现少量的絮状沉淀物,在固体培养基上形成2~3mm的点状菌落、边缘不整齐、表面不光滑,中间突出。

如上所述的耐盐菌菌株在用作土壤调理剂中的应用。

优选的,所述土壤调理剂主要由以下组份制成:

矿物质材料、活化剂A、微生物菌剂、用于为所述微生物菌剂提供营养的活化剂B;

所述矿物质材料包括凹凸棒土、海泡石、沸石;

所述活化剂A的主要成分为有机酸;

所述微生物菌剂中含有的细菌菌株为本发明提供的解淀粉芽孢杆菌。

一种耐盐菌的分离纯化方法,包括以下步骤:

1)、将供试盐碱地土样经稀释后接种于营养肉汤增菌培养基中,有氧恒温摇床培养后得到混合菌液;

2)、将所述混合菌液接种到营养肉汤琼脂平板上划线培养,从中挑取符合芽孢杆菌形态的菌落;

3)、重复步骤2)直至得到形态单一菌落;

4)、将所述形态单一菌落进行增菌培养;

5)、将步骤4)培养得到的菌接种于斜面培养基上进行培养并低温保存;

6)、将步骤5)分离得到的微生物在含有氯化钠的抗性筛选培养基中进行筛选培养,得到耐盐菌。

土壤中微生物的种类主要细菌,放线菌,光合细菌,真菌等。从菌种的数量上看,主要是细菌占优势,而且根据文献资料报道,耐盐菌株大多数为细菌中的芽孢杆菌,因此本发明把增菌培养基的基本类型定为营养肉汤培养基。

此外,在本发明的实施例中可以明确得知,利用本发明提供的筛选方法,在特定的土壤中(内蒙古河套平原盐碱地)进行筛选,都可以得到一类耐盐碱的芽孢杆菌,只是其各自耐盐能力不同。

优选的,如上所述的耐盐菌的分离纯化方法,在步骤6)中,所述筛选培养的具体过程为:

将微生物样本于含有氯化钠的抗性筛选培养基中培养1~9次,当培养次数大于1次时,在每相邻两次培养所用抗性筛选培养基中,后一次培养的氯化钠浓度均不低于前一次,且后一次培养的菌种来源于前一次培养中存活下来的微生物菌种。

用此方法可筛选到针对不同浓度氯化钠敏感的菌种,亦即该体系能够快速筛选出不同程度的耐盐菌株。

进一步优选的,在步骤6)中,在相邻浓度梯度的抗性筛选培养基中,后一次培养所用培养基中的氯化钠浓度是前一次的1.5~5倍。

具体的抗性筛选培养基的氯化钠浓度梯度可设置为10g/L,30g/L,50g/L,70g/L,100g/L,150g/L,200g/L,等等。

根据发明人在土壤改良中的实践,一般认为筛选到的菌株耐盐程度在100g/L则具有较好的应用价值。

优选的,如上所述的耐盐菌的分离纯化方法,在步骤6)中,所述含有氯化钠的抗性筛选培养基包括以下组份:

蛋白胨8g/L~12g/L、牛肉膏2g/L~4g/L、氯化钠5g/L~200g/L、酵母粉2g/L~4g/L、柠檬酸钠2g/L~4g/L;溶剂为水。

抗性筛选培养基可为固体培养基(再添加10g/L~20g/L的琼脂),也可以用液体培养基。

优选的,如上所述的耐盐菌的分离纯化方法,在步骤2)中,所述营养肉汤琼脂平板中的培养基包括以下组份:

蛋白胨8g/L~12g/L、牛肉膏2g/L~4g/L、氯化钠4g/L~6g/L、琼脂10g/L~20g/L、制霉菌素40mg/L~60mg/L;溶剂为水。

制霉菌素具有共轭多烯大环内酯结构,能抑制真菌和皮藓菌的活性,对细菌无抑制作用。

优选的,如上所述的耐盐菌的分离纯化方法,在步骤1)中,所述营养肉汤增菌培养基包括以下组份:

蛋白胨8g/L~12g/L、牛肉膏2g/L~4g/L、氯化钠4g/L~6g/L;溶剂为水;

在步骤4)中,所述增菌培养所用的培养基包括以下组份:

蛋白胨8g/L~12g/L、牛肉膏2g/L~4g/L、氯化钠4g/L~6g/L、酵母粉2g/L~4g/L、柠檬酸钠2g/L~4g/L;溶剂为水;

在步骤5)中,所述斜面培养基包括以下组份:

蛋白胨8g/L~12g/L、牛肉膏2g/L~4g/L、氯化钠4g/L~6g/L、琼脂10g/L~20g/L;溶剂为水。

优选的,如上所述的耐盐菌的分离纯化方法,在步骤4)中,所述增菌培养的培养终点为所培养菌的芽孢率达到90%以上则终止培养。

优选的,如上所述的耐盐菌的分离纯化方法,其特征在于,步骤5)具体包括:

将步骤4)增菌培养后的菌种划线于斜面培养基上,28℃~32℃培养2~3天,结束培养后置于4℃冰箱保存。

如上所述的耐盐菌的分离纯化方法在鉴定盐碱地土样中与否存在耐盐芽孢杆菌及判断盐碱化程度的应用。

如果样品中存在目标微生物,则可以按照本发明提供的筛选方法获得相应的微生物;如果样品中不存在目标微生物,同样也可以重复筛选检定的过程,以确定是否具有目标微生物以及该微生物耐盐的能力,若耐盐能力越强,则说明土壤样品来源地的盐碱化程度较高,且生境恶劣,不适合农作物生长,这同样可以达到降低成本的目的。因此,所属技术领域的技术人员可以重复本发明提供的技术方案,并能够解决申请所要解决的技术问题,达到该技术方案的效果。

与现有技术相比,本发明的有益效果为:

1)、本发明所选用的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是在河套地区盐碱地土壤中提取筛选出来的具有显著抗盐碱作用的微生物,具有优秀的改善河套地区土壤活力的能力。

2)、本发明提供的这种筛选方法,采用了富集分离的培养方式从供试土样中筛选了出具有高耐盐性能的微生物,具有针对性强,筛选结果理想的效果,以期为周期短、见效快的盐碱地土壤修复提供保障。

本申请提供的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;保藏时间为:2016年09月29日,保藏编号CGMCC NO.13060。经保藏中心于2016年09月29日检测为存活菌株。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。

实施例1

本实施例提供了一种微生物筛选方法,该方法包括如下步骤:

1)、将供试盐碱地土样1:1000稀释后接种于营养肉汤增菌培养基中,在30℃条件下,进行有氧恒温培养摇床培养,转速200rpm,培养3天,得到混合菌液;

所述营养肉汤增菌培养基包括以下组份:蛋白胨8g/L、牛肉膏4g/L、氯化钠4g/L;溶剂为水;

2)、将所述混合菌液接种到营养肉汤琼脂平板上划线培养,从中挑取符合芽孢杆菌形态的菌落;

芽孢杆菌单菌落的形态一般为白色,周边不整齐,中间突出,革兰氏阳性,显微镜观察会看到透明的芽孢出现。

所述营养肉汤琼脂平板中的培养基包括以下组份:蛋白胨12g/L、牛肉膏2g/L、氯化钠6g/L、琼脂10g/L~20g/L、制霉菌素60mg/L;溶剂为水。

3)、重复步骤2)直至得到形态单一菌落;30℃恒温培养,每次培养2~4天;

4)、将所述形态单一菌落进行增菌培养;30℃恒温培养,培养菌的芽孢率达到90%以上则终止培养;

所述增菌培养所用的培养基包括以下组份:蛋白胨8g/L、牛肉膏4g/L、氯化钠6g/L、酵母粉2g/L、柠檬酸钠2g/L;溶剂为水;

5)、将步骤4)增菌培养后的菌种划线于斜面培养基上,28℃~32℃培养2~3天,结束培养后置于4℃冰箱保存;

所述斜面培养基包括以下组份:蛋白胨12g/L、牛肉膏4g/L、氯化钠4g/L、琼脂10g/L;溶剂为水。

6)、将步骤5)分离得到的微生物在含有氯化钠的抗性筛选培养基中进行筛选培养:

所述含有氯化钠的抗性筛选培养基包括以下组份:蛋白胨8g/L、牛肉膏2g/L、氯化钠Xg/L、酵母粉2g/L、柠檬酸钠4g/L;溶剂为水;

上述抗性筛选培养基中氯化钠X设置为不同的浓度梯度,具体的,具体的浓度梯度设计为5g/L,10g/L,30g/L,50g/L,70g/L,100g/L,逐级筛选耐盐菌株。选取在10%盐离子下生长良好的菌株。

吸取增菌培养基中活化好的单菌株菌液0.1ml,涂布在以上不同浓度的盐培养基上,30度培养3天,选取在100g/L盐浓度生长良好的菌落,经反复活化后,4度保存在营养肉汤琼脂斜面上备用。

实施例2

本实施例提供了一种微生物筛选方法,该方法包括如下步骤:

1)、将供试盐碱地土样1:1000稀释后接种于营养肉汤增菌培养基中,在30℃条件下,进行有氧恒温培养摇床培养,转速200rpm,培养3天,得到混合菌液;

所述营养肉汤增菌培养基包括以下组份:蛋白胨12g/L、牛肉膏2g/L、氯化钠6g/L;溶剂为水;

2)、将所述混合菌液接种到营养肉汤琼脂平板上划线培养,从中挑取符合芽孢杆菌形态的菌落;

芽孢杆菌单菌落的形态一般为白色,周边不整齐,中间突出,革兰氏阳性,显微镜观察会看到透明的芽孢出现。

所述营养肉汤琼脂平板中的培养基包括以下组份:蛋白胨8g/L、牛肉膏4g/L、氯化钠4g/L、琼脂20g/L、制霉菌素40mg/L;溶剂为水。

3)、重复步骤2)直至得到形态单一菌落;30℃恒温培养,每次培养2~4天;

4)、将所述形态单一菌落进行增菌培养;30℃恒温培养,培养菌的芽孢率达到90%以上则终止培养;

所述增菌培养所用的培养基包括以下组份:蛋白胨12g/L、牛肉膏2g/L、氯化钠4g/L、酵母粉4g/L、柠檬酸钠4g/L;溶剂为水;

5)、将步骤4)增菌培养后的菌种划线于斜面培养基上,28℃~32℃培养2~3天,结束培养后置于4℃冰箱保存;

所述斜面培养基包括以下组份:蛋白胨8g/L、牛肉膏2g/L、氯化钠6g/L、琼脂20g/L;溶剂为水。

6)、将步骤5)分离得到的微生物在含有氯化钠的抗性筛选培养基中进行筛选培养:

所述含有氯化钠的抗性筛选培养基包括以下组份:蛋白胨12g/L、牛肉膏4g/L、氯化钠Xg/L、酵母粉4g/L、柠檬酸钠2g/L;溶剂为水;

上述抗性筛选培养基中氯化钠X设置为不同的浓度梯度,具体的,具体的浓度梯度设计为5g/L,10g/L,15g/L,30g/L,50g/L,70g/L,100g/L,150g/L,逐级筛选耐盐菌株。选取在10%盐离子下生长良好的菌株。

吸取增菌培养基中活化好的单菌株菌液0.1ml,涂布在以上不同浓度的盐培养基上,30度培养3天,选取在100g/L盐浓度生长良好的菌落,经反复活化后,4度保存在营养肉汤琼脂斜面上备用。

实施例3

本实施例提供了一种微生物筛选方法,该方法包括如下步骤:

1)、将供试盐碱地土样1:1000稀释后接种于营养肉汤增菌培养基中,在30℃条件下,进行有氧恒温培养摇床培养,转速200rpm,培养3天,得到混合菌液;

所述营养肉汤增菌培养基包括以下组份:蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、氯化钠5g/L;溶剂为水;

2)、将所述混合菌液接种到营养肉汤琼脂平板上划线培养,从中挑取符合芽孢杆菌形态的菌落;

芽孢杆菌单菌落的形态一般为白色,周边不整齐,中间突出,革兰氏阳性,显微镜观察会看到透明的芽孢出现。

所述营养肉汤琼脂平板中的培养基包括以下组份:蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、氯化钠5g/L、琼脂15g/L、制霉菌素50mg/L;溶剂为水。

3)、重复步骤2)直至得到形态单一菌落;30℃恒温培养,每次培养2~4天;

4)、将所述形态单一菌落进行增菌培养;30℃恒温培养,培养菌的芽孢率达到90%以上则终止培养;

所述增菌培养所用的培养基包括以下组份:蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、氯化钠5g/L、酵母粉3g/L、柠檬酸钠3g/L;溶剂为水;

5)、将步骤4)增菌培养后的菌种划线于斜面培养基上,28℃~32℃培养2~3天,结束培养后置于4℃冰箱保存;

所述斜面培养基包括以下组份:蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、氯化钠5g/L、琼脂15g/L;溶剂为水。

6)、将步骤5)分离得到的微生物在含有氯化钠的抗性筛选培养基中进行筛选培养:

所述含有氯化钠的抗性筛选培养基包括以下组份:蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、氯化钠Xg/L、酵母粉3g/L、柠檬酸钠3g/L;溶剂为水;

上述抗性筛选培养基中氯化钠X设置为不同的浓度梯度,具体的,具体的浓度梯度设计为5g/L,10g/L,30g/L,50g/L,70g/L,100g/L,120g/L,200g/L,逐级筛选耐盐菌株。选取在10%盐离子下生长良好的菌株。

吸取增菌培养基中活化好的单菌株菌液0.1ml,涂布在以上不同浓度的盐培养基上,30度培养3天,选取在100g/L盐浓度生长良好的菌落,经反复活化后,4度保存在营养肉汤琼脂斜面上备用。

实验例4

根据实施例1~3的培养以能耐100g/L的盐浓度为标准,共筛选出5株耐盐芽孢杆菌。分别标记为b1,b2,b3,b4,b5。其中,b2和b3来自实施例1,b4来自实施例2,b1和b5来自实施例3。

耐盐程度验证结果

表1 5株芽孢杆菌的耐盐程度验证

注:“+”表示代表待测菌株在含盐平板上能正常生长,“-”表示待测菌株在含盐平板上不能生长。

不同的“+”表示耐盐能力的强弱。

4.结论

筛选出来的5株耐盐芽孢杆菌在100g/L氯化钠浓度下都能生长,其中只有b1和b5能在120g/L浓度下生长,且b1生长比b5良好;以上5株菌在浓度200g/L浓度均不能生长;以上5株菌b2/b3的最适生长盐浓度为1%~5%,b1,b5的最适生长盐浓度为1%,在5%~10%之间没有明显的生长差异。综合来看,b1是本次试验选重的耐盐能力最强的菌株,经过生理生化鉴定,鉴定为地衣芽孢杆菌。

应用例1

根据实施例1~3的培养,统计出含有不同浓度氯化钠的抗性筛选培养基中微生物的存活率,见表2。

存活率的统计方法为斜面菌种接种到不同盐离子浓度的100ml的液体培养基中,30℃,200rpm恒温培养48h,每4小时取一次菌液,通过检测菌液吸光度和平板计数,确定菌株的存活数,跟0小时初始的菌量进行比较,得出存活率;

48h后将存活的菌株接种到下一盐离子浓度的培养基中,重复上述操作。

表2 5株芽孢杆菌的存活率验证

从上表可知实施例3中耐盐菌的含量最高,因而其对应土样的盐碱化程度最高(主要看10g/L的耐盐能力)。

应用例2

将实施例4中筛选得到的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)制成菌剂。

1)、菌种活化

将低温保存的解淀粉芽孢杆菌菌株接种于LB液体培养基中,30℃下震荡培养20h~24h,得到的发酵液作为接种液;

2)、种子液的制备

按照体积百分比2%~5%的比例向LB液体培养基中接入步骤1)制备的接种液,在30℃下震荡培养12h~16h,得种子液。

3)、发酵培养

将步骤2)所得种子液与发酵培养基按照体积百分比1%~2%比例接入含有发酵培养基的发酵罐中进行发酵,得到解淀粉芽孢杆菌的液体菌剂。

其中:所述的发酵培养基的组成成分及其质量百分比为葡萄糖0.5%,玉米粉2%,黄豆饼粉0.5%,硫酸镁0.01%,磷酸二氢钾0.15%,碳酸钙0.15%,硫酸锰0.0001%,余者为水;

所述发酵罐发酵条件为培养温度为28℃~32℃,通气量为1:(0.5~1.6),搅拌速度为200rpm~400rpm,培养时间为24h~36h;

上述制得的菌剂为液体菌剂,离心后添加适量的基质混合即得固体粉剂。所述微生物菌剂中解淀粉芽孢杆菌的芽孢数为1×109~10CFU/ml,通常在2×109CFU/ml左右。

一种土壤调理剂及其制备方法,该土壤调理剂包括以下成分:

矿物质材料、活化剂A、活化剂B、上述微生物菌剂;

所述矿物质材料包括100~200目的凹凸棒土、海泡石、沸石;所述凹凸棒土、海泡石、沸石的质量比为1:0.5:1;

所述活化剂A的成份为质量比为1:0.02的柠檬酸和氨基乙腈硫酸氢盐的混合物;

所述活化剂B包括酵母浸提液、蛋白胨和氨基酸;所述酵母浸提液、蛋白胨和氨基酸的质量比为1:2:1;

该土壤调理剂制备方法包括以下步骤:

1)、将矿物质材料与活化剂A按1:0.02的质量比混匀,180℃在反应釜中反应3h,得到第一反应物;

2)、将微生物菌剂与活化剂B按1:1.5的质量比混匀,于30℃在发酵罐中培养12h得到第二反应物;

3)、将所述第一反应物与所述第二反应物按1:0.03的质量比混匀、造粒,即得所述土壤调理剂。

验证本发明提供的土壤调理剂对河套地区盐碱土的改良效果。

试验材料和方法

试验地点:试验于2015年5月至2015年10月在内蒙古巴彦淖尔市进行。

试验材料:

氮磷钾三元复合肥,土壤调理剂(凹凸棒土、海泡石、沸石、抗盐碱菌剂、活化剂);向日葵种子(品种590)。

试验设计:

试验地面积一亩,共设置四个处理,分别是:

处理一:常规施氮磷钾肥(NPK组);

处理二:NPK+施用凹凸棒土、海泡石、沸石,三者配比同本应用例提供的土壤调理剂的配比(BN1组);

处理三:NPK+通过本应用例方法制备的土壤调理剂(BN2组);

试验步骤:

试验共设四个处理,将一亩地平均划分为四个小区,每个小区按试验设计进行施肥,氮磷钾肥三元复合肥作为基肥一次性施入,每亩60~80公斤。处理二、三、四分别在苗期和蕾期进行调理剂追施,苗期每亩追施30公斤,蕾期每亩追施20公斤(可采用叶面喷施)。

试验收获时,每小区单打单收,进行向日葵百粒重和产量检测,每小区收获后进行土壤PH、有机质、电导率、交换性钠、碱化度数据监测。

三、试验结果及分析

调理剂对向日葵产量的影响:

通过对比分析各处理的试验数据,将各组与本应用例提供的土壤调理剂(BN2组)进行对比,结果显示:BN2处理的作物百粒重比NPK、BN1处理分别提高了21.15%、17.96%;BN2处理的向日葵产量比NPK、BN1、BN2处理分别提高了22.93%、18.36%。

调理剂对土壤理化性状的影响:

向日葵收获后,对土壤五项指标进行检测,检测数据显示:BN2处理的土壤PH比NPK、BN1处理分别降低了15.94%、11.44%;BN2处理的土壤全盐比NPK、BN1处理分别降低了27.6%、23.0%;BN2处理的土壤交换性钠与NPK、BN1处理相比分别下降了57.6%、33.6%;NPK、BN1、BN2、三个处理的土壤碱化度分别是25.46%、20.32%、8.87%,BN2处理的土壤阳离子交换量与NPK、BN1处理相比分别增加了32.5%、25.3%。

表3 调理剂对土壤理化性状的影响

四、试验结论

在常规施肥基础上追施土壤调理剂产品最高能使向日葵增产15.85%,其中凹凸棒土、海泡石、沸石、抗盐碱菌剂和活化剂联合作用的效果最好,由此可见本农河套地区土壤调理剂可以显著改良盐碱地土壤,培肥地力,增产创收。

尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明,然而应意识到,在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此,这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。

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