1.一种金线莲茎腐病菌分子检测的PCR引物,其特征在于,引物序列为:
ITS403f:5’-CCCAACCCCTGTGACATAC-3’;
ITS403r:5’-ATTACCAGTAACGAGGGTT-3’;
上述引物ITS403f/ ITS403r可从金线莲茎腐病菌特异性扩增出403bp的产物。
2.利用权利要求1所述PCR引物用于检测金线莲茎腐病菌的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)从所述的金线莲茎腐病菌或被茎腐病菌感染的金线莲植株中提取DNA;
(2)以该DNA为模板用权利要求1所述的引物ITS403f/ ITS403r通过聚合酶链式反应扩增:PCR反应体系25.0 μl,包括2×Taq PCR Master Mix12.5μL,10 μmol/L 的引物ITS403f / ITS403r各0.5 μL,DNA模板25ng,不足部分由dd H2O补足;PCR反应条件为:95℃预变性3min;94℃变性1min,58℃退火30sec,72℃延伸1min,共25个循环;72 ℃延伸10 min;
(3)然后取步骤(2)的PCR扩增产物用琼脂糖凝胶电泳分离,经溴化乙锭染色后于紫外灯下观察,根据扩增产物的大小判定结果,如果能特异性地扩增出403bp的产物,即可判断所述的植株样品中存在金线莲茎腐病菌。
3.如权利要求1所述PCR引物在检测金线莲茎腐病菌中的应用。