一种高活性低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法与流程

本发明公开了一种具有抗癌、清脂、保肝作用的高活性低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法，尤其是一种利用从人参属植物中提取的总皂苷和水解酶、不需要分离拆分总皂苷为原二醇类皂苷ppd(rb1、rb2、rb3、rc、rd)和原三醇类皂苷ppt(re、rg1、rf、r1)，而直接酶转化多糖基人参总皂苷制备低糖基人参次苷的方法。

背景技术：

人参是我国传统名贵中草药，具有百草之王之称，产自东北的长白山人参、产自山东的西洋参和产自云南的三七参是三大主要品种。现代植物化学及药理学研究表明，其最重要的活性成分是人参皂苷。根据人参皂苷配糖体的不同和糖基连接在配糖体上位置的区别，可分为原人参二醇类皂苷、原人参三醇类皂苷和齐墩果酸型皂苷三大类，其中以二醇类和三醇类为主，齐墩果酸型皂苷仅有ro一种。

天然的人参皂苷含有较多的糖基，而含糖基较少的低糖基皂苷在天然人参中微乎其微。人参属植物各部位的皂苷含量及组成如下：

天然的人参皂苷以rb1、rb2、rc、rd、re、rg1等为主，这些主要皂苷带有三个以上的糖基，占人参总皂苷的90％以上。如：人参根总皂苷含量4％左右，主要为rb1、rb2、rc、rd、re、rg1；西洋参根总皂苷含量4％左右，主要为rb1、re、rc、rd、rg1，其中re、rb1含量占总皂苷的40～50％；三七参根总皂苷含量10％左右，主要为rg1、rb1、r1、占总皂苷的80％，r1占总量的9～10％；人参须皂苷含量7％，西洋参须皂苷含量10％，三七参须皂苷含量1％，皂苷组成和比例接近根部；人参茎叶含皂苷5-7％，主要为re、rg1、rd；西洋参茎叶含皂苷5-7％，主要为rb3，rd；三七参茎叶含皂苷5-7％，主要为rb3，rc。

而含有二糖基的人参皂苷有20(s)-rg2、20(r)-rg2、20(s)-rg3、20(r)-rg3、rg4、rg6、rk1、rk5，含有单糖基的人参皂苷20(s)-rh1、20(r)-rh1、20(s)-rh2、20(r)-rh2、rh3、rh4、rk2、rk3，不含有糖基的皂苷元等含量极低。如：人参皂苷rh2在天然人参中含量仅为十万分之一，苷元在天然人参中是不存在的。

中草药天然成分和化学药不同，化学药口服后直接吸收起药效；中草药天然成分，多为前体药物，本身无药效或药效较低，需要经过肠道微生物、唾液酶系、肠道酶、胃液的共同作用，转化为另一种结构再起药效。

人参属植物中含量较高的皂苷rb1、rb2、rc、rd等，必须在人体内转化为二糖基的人参皂苷20(s)-rg2、20(r)-rg2、20(s)-rg3、20(r)-rg3、rg4、rg6、rk1、rk5，或单糖基的人参皂苷20(s)-rh1、20(r)-rh1、20(s)-rh2、20(r)-rh2、rh3、rh4、rk2、rk3，或不含有糖基的皂苷元等再起药效。但是人体的这种转化率极低，个体差异较大。直接口服多糖基皂苷rb1、rb2、rc、rd等，人体平均吸收率不足5％，其中rb1吸收率仅为1.4％，其余部分随粪便排出体外而白白浪费。

而直接口服低糖基人参次苷群及其苷元或其制品，吸收率高、药效强、药效明确，口服后人体吸收率可达95％以上。

例如人参皂苷rg3具有抑制肿瘤细胞增殖的作用[论文，wang，chong-zhi，plantamedica2007，73(7)，669-674.]，也具有抗癌细胞浸润的作用[论文，shinkaikiyoko，japanesejournalofcancerresearch1996，87(4)，357-62.]

rh2具有显著的抗癌功能[论文，wangwei，cancerchemotherapyandpharmacology2007，59(5)，589-601.]。例如，抗乳腺癌[论文，leehyoung-cheol，internationaljournalofmolecularsciences2008，9(8)，1379-1392.]、抗白血病[论文，zhangyou-wei，plantamedica2001，67(5)，417-422.]，抗卵巢癌[论文，kimdongseon，phytochemistry1997，1998，47(3)，397-399.]，抗前列腺癌[论文，song，xiaoming，vaccine2009，27(17)，2306-2311.]，同时具有降血脂功效[论文，trinhhien-trung，journalofmicrobiologyandbiotechnology2007，17(7)，1127-1133.]。

rg2具有抗紫外线引发的癌症[论文，jeongsejin，internationaljournaloftoxicology2007，26(2)，151-158.]、保护神经[论文，choiseok，europeanjournalofpharmacology2002，442(1-2)，37-45.]、治疗阿兹海默症[论文，lina，journalofethnopharmacology2007，111(3)，458-463.]等功效。

rh1具有抗癌[论文，dongsijun，foodchemistry2009，113(2)，672-678.]、保肝[论文，park，eun-jeon，plantamedica2006，72(13)，1250-1253.]、保护红细胞[论文，samukawakeiichi，biorheology2008，45(6)，689-700.]、抗敏抗炎、[论文，kimmisoon，foodscienceandbiotechnology2008，17(4)，805-808.，shinyoung-wook，journalofginsengresearch2006，30(3)，95-99.]、治疗心脑血管疾病[论文，wangjing，journalofseparationscience2008，31(6-7)，1173-1180.]、抗癌细胞转移[论文，wakabayashichisato，wakaniyakugakuzasshi1997，14(3)，180-185.]等功效。

但是低糖基人参次苷，如：c-k、c-y、皂苷元等单体皂苷，rg2组(由20(s)-rg2、20(r)-rg2、rg4、rg6组成)、rh1组(由20(s)-rh1、20(r)-rh1、rh4、rk3组成)、rg3组(由20(s)-rg3、20(r)-rg3、rg5、rk1组成)、rh2组(由20(s)-rh2、20(r)-rh2、rh3、rk2组成)等组皂苷，水溶性极低，在水溶液和生理盐水中几乎不溶解。由于稳定性差、容易析出，很难应用到实际产品中，特别是注射剂、口服液、膏滋等产品中。

而由二糖基的人参皂苷20(s)-rg2、20(r)-rg2、20(s)-rg3、20(r)-rg3、rg4、rg6、rk1、rk5，单糖基的人参皂苷20(s)-rh1、20(r)-rh1、20(s)-rh2、20(r)-rh2、rh3、rh4、rk2、rk3，不含糖基的皂苷元和微量其他皂苷组成的次生皂苷群，由于协同促溶作用，大大提高产物水溶性、药理活性，药效更加。同时，由于不改变原有人参中二醇类皂苷和三醇类皂苷的摩尔比例，产品的功效更加平衡、全面，对人体更安全。但是，酶转化制造次生皂苷群难度较大，至今未见报道。

由于人参皂苷的结构很复杂，采用有机合成的方法几乎是不可能的，因此以天然皂苷为原料通过切断糖苷键的方法是目前的主要解决方案。主要有酸碱水解法和酶转化法两大类：

传统的制备次生皂苷的方法是酸碱水解法切断糖苷键，例如用硫酸、盐酸等强酸或氢氧化钠等强碱在高温下转化天然皂苷生产次级皂苷(论文，chenyingjie，chemical&pharmaceuticalbulletin1987，35(4)，1653-5)。现在仍然有相关制备方法的报道(发明专利cn105218613a)，但是酸碱法对环境造成严重污染、副产物较多、耗能也很大，与现代工业发展方向相违背，不适于工业化生产。

微生物酶是人参皂苷糖苷酶的一个重要来源，现已在霉菌、细菌等微生物中发现了人参皂苷糖苷酶，但是产酶的微生物培养条件复杂，产酶量低，后处理复杂，生产成本极其高昂，因此也很难实现工业化。另外，底物特异性很强，产物较单一，很难制备同时含有多种低糖基稀有皂苷的产品。

发明专利《一种稀有人参皂苷rh2的生产方法》(公开号cn201610815471.7)，公开的方法是以原人参二醇ppd为底物，利用糖基转移酶制备人参皂苷单糖基皂苷rh2；

发明专利《一种酶催化二醇组人参皂苷大规模生产稀有人参皂苷的方法》(公开号cn106480156a)，是以二醇类皂苷ppd为底物，以离子液体为反应媒介、采用酶转化法生产rg3、rh2、ck及苷元；

发明专利《一种酶催化三醇组人参皂苷大规模生产稀有人参皂苷的方法》(公开号cn106480157a)同样以离子液体为媒介，酶法转化三醇类皂苷ppt生产rh1、f1和苷元。

此类方法，由于微生物培养条件复杂、产酶量低，酶制剂的获得成本极其高昂；同时，受到微生物酶专一性的限制，又必须首先拆分总皂苷制备二醇类皂苷ppd(rb1、rb2、rc、rd)和三醇类皂苷ppt(re、rg1、rf、r1)。而这种拆分，由于工艺路径较长、工艺繁琐、大量使用乙醇等有机溶剂，拆分成本也极其高昂；原料拆分二醇类皂苷和三醇类皂苷，导致产物液必须是单一的二醇类皂苷或三醇类皂苷，破坏了原有人参皂苷的摩尔比例，使产品功效失衡。所以，很难应用到工业化生产中。

发明专利《红参皂苷rg3组和rh2组混合皂苷的制备方法》(申请公布号cn102352402a)，公开了一种制备rg3组、rh2组皂苷的方法：先从人参根中提取总皂苷，再对总皂苷进行分离，得到二醇类皂苷。然后用水对提取过皂苷后的滤渣中的自身酶进行提取。用人参根中提取的不含皂苷、含有人参自身皂苷酶和其他水溶性物质的提取物，与原人参二醇类皂苷rb1、rb2、rc、rd反应，制备20(s)-rg3、20(r)-rg3、rk1和rk5的混合皂苷；或与f2单体反应，制备20(s)-rh2、20(r)-rh2、rk2和rh3的混合皂苷。

发明专利《红参皂苷rg2组和rh1组、制备方法及在制备抗皮肤老化化妆品中的应用》(申请公布号cn102302420a)公开了一种制备rg2组和rh1组的方法，首先要先提取人参总皂苷，再对总皂苷拆分，分离得到三醇类皂苷，主要包含re和rg1。然后对不含有人参皂苷的渣进行水提，得到人参自身酶，利用此人参自身酶对re进行转化，制备rg2组；还可以对rg1进行转化，制备rh1组。

此类方法的优点是，避免了繁琐的微生物培养过程。但是，仍需要对总皂苷进行拆分，得到二醇类皂苷和三醇类皂苷。而这种拆分，由于大量使用高浓度的乙醇溶液，在给生产安全带来巨大隐患的同时，也大幅度的提高了生产成本。特别是单体皂苷f2、rg1等，拆分成本极其高昂，甚至每公斤原料成本既达到几十万元，很难应用到实际的生产中。同时，产物中的rg3组、rh2组、rg2组或rh1组，改变了原有人参中的二醇类皂苷、三醇类皂苷的摩尔比例，药效不平衡，溶解度也极低。

发明专利《人参稀有皂苷c-k、f1及四种异构体人参皂苷元的制备方法》(申请公布号cn105648021a)公开了一种制备c-k、f1及苷元的方法，先分离提取二醇类总皂苷和三醇类总皂苷，通过培养微生物得到微生物酶，再利用微生物酶对两类皂苷进行水解转化，分别制得ck和f1。接下来用水提取人参自身酶，对ck和f1进行转化制备苷元。此方法对底物原料要求极高，需要先制备ck或f1，而这两种皂苷是很难获得的，市场售价甚至达到每公斤百万元人民币，大大提高了生产成本，很难应用于实际生产。

综上所述，由于酶法对底物的高度选择性，目前所有的关于低糖基次生人参皂苷的生产方法都是以二醇或者三醇为底物，单一制备某一种人参次生皂苷、二醇类次生皂苷或者是三醇类次生皂苷，这就要求原料要对二醇、三醇进行拆分。而其中的很多报道甚至是需要以单一皂苷为底物，而制备单一皂苷底物，加大了生产成本和周期，期间反复大量的使用醇类溶剂，也造成了安全隐患；并且，这些方法制备的次生苷种类少，改变了二三醇类的摩尔比例，且水溶性很差，不利于将药效发挥到最大。

而同时将多糖基的天然二醇、三醇类人参皂苷降解生产高活性低糖基人参次苷群及其苷元混合物，具有生产成本低、生产周期短、不改变二三醇皂苷摩尔比例、水溶性高、药效更平衡更突出等优点。因此，直接以人参总皂苷为底物，生产同时包含二醇类和三醇类多种低糖基次生皂苷具有重要意义。但是由于生产难度很大，转化途径复杂。

有鉴于此特提出本发明。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题在于克服现有技术的不足，提供一种高活性低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法，本方法工艺简单、生产路径短、生产成本低。另外，在把不易吸收、活性低的多糖基人参皂苷，酶转化为易吸收、高活性的低糖基人参次苷的同时，又不改变原有人参中二醇类皂苷和三醇类皂苷的摩尔比例，产品的功效更加平衡、全面，对人体更安全；二醇类、三醇类低糖基皂苷及其苷元的协同促溶促效，大大提高产物水溶性、药理活性，药效更加突出。

为解决上述技术问题，本发明采用技术方案的基本构思是：

一种高活性低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法：包括以下步骤：

s1：人参总皂苷的制备：以人参属植物的植株组织为原料，用低级醇提取多糖基原人参总皂苷，提取次数控制在1-3次，然后将提取液合并，然后将提取液进行减压压缩，得到不含有低级醇的浓缩液，浓缩液经环己烷或有机醚脱脂后，即得多糖基原人参总皂苷的提取液，对多糖基原人参总皂苷的提取液进行干燥得到易于保存的人参总皂苷干粉；

s2：人参皂苷水解酶的制备：在s1中提取多糖基原人参总皂苷后的滤渣中加入提取自有酶的缓冲液，进行提取，提取次数控制在1-2次，得到含有水解酶且不含皂苷的水溶性成分，然后将水溶性成分减压浓缩，得到浓缩物，浓缩物即为含有人参水解酶的提取物；

s3：制备人参次苷群及其苷元的混合物：将多糖基原人参总皂苷提取液或将人参总皂苷干粉配制成溶液和含有人参水解酶的提取物混合均匀，得到混合液，然后对混合液进行加热，混合液在加热条件下进行反应，在反应过程中添加有机酸调节溶液酸度，反应结束后，分离纯化酶解产物，即得高活性低糖基人参次苷群及其苷元的混合物。

本发明中，s1中人参属植物为三七参、西洋参、人参、珠子参和竹节参中的一种或者几种，s1中人参属植物的植株组织为根、茎、叶、种子、花和果实中的一种或者几种，s1中低级醇为甲醇或乙醇中的至少一种。

本发明中，s1中低级醇的添加量为人参属植物组织的4～12倍体积。

本发明中，s1中用低级醇提取多糖基原人参总皂苷过程中控制温度为室温或50～95℃，s1中用低级醇提取多糖基原人参总皂苷过程中每次提取时间为2～48小时。

本发明中，s1中减压浓缩时温度控制在30～75℃，压强控制在-0.01mpa～-1mpa。浓缩过程中可加入适量水。

本发明中，s2中提取自有酶的缓冲液为柠檬酸–柠檬酸钠、磷酸盐缓冲液或乙酸-乙酸钠缓冲液中的一种，s2中提取自有酶的缓冲液的ph为4～8，s2中提取自有酶的缓冲液的浓度为0.005～0.2mol/l，s2中提取自有酶的缓冲液的添加量为滤渣的4～12倍体积，s2中提取温度控制在65～95℃，s2中减压压缩时温度在45～70℃，压强控制在-0.01mpa～-1mpa，s2中减压浓缩后得到浓缩物为固形物为40brix以上的浓缩液。

本发明中，s3中多糖基原人参总皂苷提取液或将人参总皂苷干粉配制成的溶液和含有人参水解酶的提取物混合过程中控制多糖基原人参总皂苷提取液或人参总皂苷溶液和含有人参水解酶的提取物的质量比为1：0.01～100，s3中多糖基原人参总皂苷提取液的底物浓度为0.01～50％，s3中加热条件下进行反应时温度控制在70～95℃，s3中加热条件下进行反应的时间控制在1～24小时，s3中有机酸为甲酸、醋酸、柠檬酸、乳酸或苹果酸中的一种，s3中有机酸的添加量占反应体系总体积的0.5～50％。

本发明中，s3中生成的高活性低糖基人参次苷群及其苷元的混合物包括不含糖基的二醇和三醇皂苷元(aglycone)；单糖基的人参皂苷20(s)-rh1、20(r)-rh1、20(s)-rh2、20(r)-rh2、rh3、rh4、rk2、rk3；二糖基的人参皂苷rg1、20(s)-rg2、20(r)-rg2、20(s)-rg3、20(r)-rg3、rg4、rg6、rk1、rk5，和微量其他苷类和非苷类杂质的混合物，产物中同时含有二醇类和三醇类稀有人参次苷。

本发明中，s3中生成的高活性低糖基人参次苷群及其苷元的混合物可以利用萃取法、结晶法、大孔吸附树脂法、制备型液相色谱法、硅胶柱层析法，对低糖基人参次苷群及其苷元的混合物进行分离纯化，制备某几种皂苷的混合物或单体皂苷及苷元，制备的某几种皂苷的混合物或单体皂苷及苷元，既可直接制成成品也可以作为食品、药品和化妆品的原料。

采用上述技术方案后，本发明与现有技术相比具有以下有益效果。

本发明利用从人参属植物中提取的总皂苷和水解酶、不需要分离拆分总皂苷为原二醇类皂苷ppd(rb1、rb2、rb3、rc、rd)和原三醇类皂苷ppt(re、rg1、rf、r1)，而直接酶转化多糖基人参总皂苷制备低糖基人参次苷的方法。产物人参次苷中，包含二糖基的人参皂苷20(s)-rg2、20(r)-rg2、20(s)-rg3、20(r)-rg3、rg4、rg6、rk1、rk5，单糖基的人参皂苷20(s)-rh1、20(r)-rh1、20(s)-rh2、20(r)-rh2、rh3、rh4、rk2、rk3，不含糖基的皂苷元和微量其他皂苷。

本方法工艺简单，产品功效更平衡、水溶性好，属于人参制品、功能食品、保健品、药品、化妆品领域。

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的描述。

附图说明

附图作为本申请的一部分，用来提供对本发明的进一步的理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，但不构成对本发明的不当限定。显然，下面描述中的附图仅仅是一些实施例，对于本领域普通技术人员来说，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。在附图中：

图1是人参根总皂苷hplc色谱图；

图2是总皂苷转化后hplc色谱图；

图3是总皂苷转化后hplc色谱图；

图4是转化后的hplc色谱图；

图5是rg3组皂苷和苷元的hplc色谱图。

需要说明的是，这些附图和文字描述并不旨在以任何方式限制本发明的构思范围，而是通过参考特定实施例为本领域技术人员说明本发明的概念。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

在本发明的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。

在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

实施例1

以人参中的白参为原料，制备一种具有抗癌、清脂、保肝作用的高活性低糖基人参次苷群及其苷元的混合物。此混合物含有人参皂苷元、单糖基和二糖基次生人参皂苷混合物。

s1、人参皂苷的提取：取1kg白参，用10l95％的乙醇于50～60℃提取人参总皂苷3次，每次3小时。混合三次提取的醇溶液，于45℃、-0.04mpa浓缩至不含有醇，环己烷脱脂，干燥可得总皂苷45g。hplc色谱图如图1所示。

s2、含有自有酶系的提取物的制备：将上步提取的人参渣加入8lph6.00.01m磷酸缓冲液提取2次。每次提取过程中，先在75℃下提取5小时后，然后在2小时以内将温度缓慢升至85℃，保持1小时。将三次的提取液混合过滤，55～60℃，-0.05mpa减压浓缩至45brix以上。得300ml～600ml含有人参自有酶系等水溶性成分的提取物。

s3、将20g总皂苷溶于440ml水中，加入40g含有人参自有酶系的水提物，混合搅拌均匀。于80℃反应12小时，然后95℃反应2小时。反应液中加入水饱和正丁醇400ml萃取，重复2～3次，合并正丁醇部分，用700ml去离子水洗涤，重复2～3次，将正丁醇层减压浓缩、干燥，即得反应产物。反应总产物hplc检测图谱见图2。产物中包含二糖基的稀有人参皂苷20(s)-rg2、20(r)-rg2、20(s)-rg3、20(r)-rg3、rg4、rg6、rk1、rk5，单糖基的人参皂苷20(s)-rh1、20(r)-rh1、20(s)-rh2、20(r)-rh2、rh3、rh4、rk2、rk3、ck以及不含糖基的皂苷元，含量约占70％。水溶液部分可回收继续用于转化反应。

多次实验证明，以人参、西洋参、三七参、珠子参和竹节参的干参及鲜参以及茎叶、花、种子、果实等为原料均可取得类似结果。

实施例2

利用含有人参自有酶系的水提物转化人参总皂苷时，在反应体系中加入有机酸调节酸度，可以提高酶活力，提高转化率。

将实施例1中制备的20g人参总皂苷溶于400ml水中，加入实施例1中制备的40g含有人参自有酶系的提取物，混合搅拌均匀，加入冰乙酸40ml。于70℃反应3小时，然后75℃反应2小时。然后110℃加热1小时使蛋白质变性，加入1.5l水稀释后，上400mlab-8大孔吸附树脂，至全部皂苷被吸附后，用1.5～2l水洗涤，除去未被树脂吸附的杂质。然后用90％的乙醇洗脱。hplc色谱图如图3所示。产物中含有稀有人参皂苷20(s)-rg2、20(r)-rg2、20(s)-rg3、20(r)-rg3、rg4、rg6、rk1、rk5、20(s)-rh1、20(r)-rh1、20(s)-rh2、20(r)-rh2、rh3、rh4、rk2、rk3、ck及皂苷元，含量约占80％。

实施例3

也可以利用萃取法、结晶法、离心法、大孔吸附树脂法、制备型液相色谱法或硅胶柱层析法，对低糖基人参次苷群及其苷元的混合物进行分离纯化、制备某几种皂苷组成的的混合物或单体皂苷及苷元。例如：制备高纯度rg3组和苷元的混合物。

取500g西洋参根和500g三七茎叶粉碎，按实施例1中的方法提取总皂苷，得总皂苷61g。然后用8l0.01mph5.8的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液对提取过总皂苷后的渣进行提取，先在75℃下提取5小时后，然后在2小时以内将温度缓慢升至85℃，保持1小时。将三次的提取液混合过滤，55～60℃，-0.05mpa减压浓缩至45brix。得305g含有人参自有酶系等水溶性成分的提取物。将a步得到的20g总皂苷溶于400ml水中，加入40gb步得到的含有人参自有酶系的提取物，混合搅拌均匀，并加入柠檬酸40g调节酸度。于80℃反应2小时，然后85℃反应1小时。反应结束后，加入1.5l水稀释后，上200mlab-8大孔吸附树脂，至全部皂苷被吸附后，用1.5～2l水洗涤，除去未被树脂吸附的杂质。然后用85％的乙醇洗脱，洗脱出来的乙醇溶液直接上d-296柱子脱色，hplc色谱图如图4所示。脱色后的皂苷乙醇溶液，再于45℃、-0.04mpa减压浓缩。待有浑浊物析出后，在16000～20000转/分钟，条件下离心，分别收集清夜和离心物。上清液继续浓缩，重复上序操作，直至不再有固体物质析出。合并离心物，干燥后，即得高纯度rg3组和苷元混合物2.73g。经hplc检测，结果如图5所示，产物中只含有20(s)-rg3、20(r)-rg3、rk1、rk5和苷元。

实施例4

可以利用酶解产物，即高活性低糖基人参次苷群及其苷元，制备具有保肝、清脂、抗癌功效的功能食品、保健食品、药品等。例如：一种养生酒的制备方法。

精确称取上述实施例中的任意一种酶解产物1000g，缓慢加入到10kg，温度为50℃、酒精度为53度的白酒中。充分搅拌、溶解后，在16000转/分的条件下离心，收集上清液。上清液，加入到10吨的优质白酒中，充分混合后，静置3d。灌装后，即得具有保肝、清血脂、抗癌功效的养生酒。

以上所述仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专利的技术人员在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述提示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明方案的范围内。