一种截短侧耳素的提取方法与流程

文档序号:11210587阅读:1858来源:国知局

本发明属于抗生素提取技术领域,具体涉及一种截短侧耳素的提取方法。



背景技术:

截短侧耳素,别名为泰妙菌素,是由侧耳菌产生的一类广谱的二萜烯类抗生素,1951年被首次分离并报道其活性。截短侧耳素类是一大类具有较好抗菌活性的抗生素家族。它通过作用于细菌核糖体50s亚基,抑制蛋白质合成,导致菌体死亡,能够有效抑制大部分革兰氏阳性菌以及部分革兰氏阴性菌。截短侧耳素的用途有:作为添加剂添加到动物饲料里,可有效预防许多传染病;以原料形式用于生产其衍生物如泰妙菌素、沃尼妙林等,泰妙菌素、沃尼妙林是以上市的兽药;用于合成人用抗生素retapamulin等。

目前,国内厂家提取截短侧耳素工艺,普遍采用的有机溶剂为4-甲基-2-戊酮(mibk)、丙酮、甲醇、醋酸丁酯、乙酸乙酯、乙醇等单一有机溶剂浸提截短侧耳素菌,但是这些方法的收率及产品的纯度不高,收率一般在80%左右,产品纯度在80%左右。其中,虽然有的有机溶剂提取能力强,但是也会提取出一些其他杂质,导致产品纯度不高,例如甲醇;有的提取的截短侧耳素含有杂质较少,但是提取能力不强,并且成本高,例如乙酸乙酯。

有鉴于此,有必要提出一种产率高、提出的截短侧耳素纯度高的截短侧耳素提取方法。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种截短侧耳素的提取方法,该提取方法产率高,得到的产品纯度高。

为了实现上述目的,所采用的技术方案为:

一种截短侧耳素的提取方法,包括以下步骤:

(1)制备截短侧耳素粗品:

在室温下,用甲醇重复浸提截短侧耳素干菌丝,浸提至甲醇中截短侧耳素的质量百分数小于1%,每次浸提完后压滤,得浸提液;合并多次浸提液,得总浸提液;所述每次用甲醇浸提提截短侧耳素干菌丝中,截短侧耳素干菌丝和甲醇的质量比为1:1~2,浸提时间为1.5~2.5小时;

将总浸提液减压浓缩,浓缩至截短侧耳素的质量百分数大于10%,得截短侧耳素粗品浓缩浸提液;所述减压浓缩的压力为-0.08~-0.07mpa,温度为60~70℃;

搅拌55~65℃的截短侧耳素粗品浓缩浸提液至析出结晶,冷却至室温后,离心,得截短侧耳素粗品湿体;

干燥截短侧耳素粗品湿体至干燥失重小于0.5%,得截短侧耳素粗品;

(2)制备截短侧耳素:

用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,再压滤,得截短侧耳素粗品浸提液;所述用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品中,截短侧耳素粗品和乙酸乙酯的质量比为1:1~2,浸提时间为2~3小时;

将截短侧耳素粗品浸提液减压浓缩1.5~2.5小时,得截短侧耳素浓缩浸提液;所述减压浓缩的压力为-0.08~-0.07mpa,温度为60~70℃;

搅拌55~65℃的截短侧耳素浓缩浸提液至析出结晶,冷却至室温后,离心,得截短侧耳素湿体;

干燥截短侧耳素湿体至干燥失重小于0.5%,得所述截短侧耳素。

进一步的,所述步骤(1)中,所述压滤的压力为0.1~0.15mpa;

所述搅拌时的压力为-0.08~-0.07mpa;

所述干燥温度为40~50℃;

所述步骤(2)中,所述压滤的压力为0.1~0.15mpa;

所述搅拌时的压力为-0.08~-0.07mpa;

所述干燥温度为40~50℃。

再进一步的,所述步骤(1)中,离心的转速为1800~2200rpm;

所述步骤(2)中,离心的转速为1800~2200rpm。

再进一步的,所述步骤(1)中,所述每次用甲醇浸提提截短侧耳素干菌丝中,截短侧耳素干菌丝和甲醇的质量比为1:1.5,浸提时间为2小时;

所述步骤(2)中,所述用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品中,截短侧耳素粗品和乙酸乙酯的质量比为1:1.5。

再进一步的,所述步骤(1)中,所述搅拌时,截短侧耳素粗品浓缩浸提液的温度为60℃;

所述离心的转速为2000rpm;

所述步骤(2)中,所述减压浓缩的时间为2小时;

所述搅拌时,截短侧耳素浓缩浸提液的温度为60℃;

所述离心的转速为2000rpm。

与现有技术相比,本发明的有益之处在于:

本发明所述的一种截短侧耳素的提取方法,该方法先使用甲醇浸提截短侧耳素菌,得到截短侧耳素粗品,可以较大程度的提取出截短侧耳素,并且甲醇成本较低;再用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,得到截短侧耳素精品,可以将截短侧耳素粗品中的杂质去掉,提高截短侧耳素的纯度;该提取方法产率高,可以达到85%以上,成本不高,得到的产品纯度高,可以达到85%以上。

具体实施方式

为了进一步阐述本发明一种截短侧耳素的提取方法,达到预期发明目的,以下结合较佳实施例,对依据本发明提出的一种截短侧耳素的提取方法,其具体实施方式、结构、特征及其功效,详细说明如后。在下述说明中,不同的“一实施例”或“实施例”指的不一定是同一实施例。此外,一或多个实施例中的特定特征、结构或特点可由任何合适形式组合。

在详细阐述本发明一种截短侧耳素的提取方法之前,有必要对本发明中提及的原料和方法等做进一步说明,以达到更好的效果。

实施例中未注明具体技术或条件的,按照本领域内的文献所描述的技术或条件进行。实施例中所用原料或设备未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。

甲醇(methanol,ch3oh)是结构最为简单的饱和一元醇,cas号为67-56-1或170082-17-4,分子量为32.04,无色透明液体,有刺激性气味,熔点为-97.8℃,沸点64.7℃,相对密度(水=1)为0.79,溶于水,可混溶于醇类、乙醚等多数有机溶剂。因在干馏木材中首次发现,故又称“木醇”或“木精”。是无色有酒精气味易挥发的液体。甲醇用于制造甲醛和农药等,并用作有机物的萃取剂和酒精的变性剂等。

乙酸乙酯,别名有醋酸乙酯、甜菜糖蜜滓,分子式为c2h4o2,是无色透明液体,低毒性,有甜味,浓度较高时有刺激性气味,易挥发,对空气敏感,能吸水分,使其缓慢水解而呈酸性反应;相对密度为0.902,熔点为-83℃,沸点为77℃,折光率为1.3719,闪点为7.2℃(开杯),能微溶于水,溶于醇、酮、醚、氯仿等多数有机溶剂;能溶解某些金属盐类(如氯化锂、氯化钴、氯化锌、氯化铁等)反应。乙酸乙酯是一种用途广泛的精细化工产品,具有优异的溶解性、快干性,用途广泛,是一种非常重要的有机化工原料和极好的工业溶剂,被广泛用于醋酸纤维、乙基纤维、氯化橡胶、乙烯树脂、乙酸纤维树酯、合成橡胶、涂料及油漆等的生产过程中。

减压浓缩,是使用抽真空的方式降低溶剂的沸腾温度使溶剂蒸发。

在本发明中,质量分数(massfraction)指溶液中溶质质量与溶液质量的百分比。

干燥失重,指待测物品在一定的条件下,经干燥至恒重后所减少的重量,通常以百分率表示。

在了解了上述原料和方法等之后,下面将对本发明一种截短侧耳素的提取方法做进一步的详细介绍:

实施例1.

(1)制备截短侧耳素粗品:

a浸提:室温下,在浸提罐中用甲醇重复浸提截短侧耳素干菌丝3次,每次浸提中,截短侧耳素干菌丝和甲醇的质量比为1:2,浸提时间为2.5小时,第3次浸提完后甲醇中截短侧耳素的质量百分数小于1%;每次浸提完后压滤,压滤的压力为0.15mpa,得浸提液;合并多次浸提液,得总浸提液;

b浓缩:将总浸提液减压浓缩,减压浓缩的压力为-0.08mpa,温度为60℃,浓缩至截短侧耳素的质量百分数大于10%,得截短侧耳素粗品浓缩浸提液;

c结晶:搅拌55℃的截短侧耳素粗品浓缩浸提液至析出大量结晶,搅拌过程中的压力为-0.07mpa;用降温水冷却容器,使结晶了的截短侧耳素粗品浓缩浸提液冷却至室温后,在1800rpm的转速下离心,固液分离,得截短侧耳素粗品湿体;

d干燥:在40℃下干燥截短侧耳素粗品湿体至干燥失重小于0.5%,得截短侧耳素粗品;

(2)制备截短侧耳素:

e浸提:用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,截短侧耳素粗品和乙酸乙酯的质量比为1:2,浸提时间为2小时;再压滤,压滤的压力为0.1mpa,得截短侧耳素粗品浸提液;

f浓缩:将截短侧耳素粗品浸提液减压浓缩2.5小时,减压浓缩的压力为-0.08mpa,温度为60℃,得截短侧耳素浓缩浸提液;

g结晶:搅拌65℃的截短侧耳素浓缩浸提液至析出大量结晶,搅拌过程中的压力为-0.08mpa;将结晶了的截短侧耳素浓缩浸提液冷却至室温后,在2200rpm的转速下离心,固液分离,得截短侧耳素湿体;

h干燥:在50℃下干燥截短侧耳素湿体至干燥失重小于0.5%,得所述截短侧耳素。

实施例1所述的一种截短侧耳素的提取方法,收率为85%,截短侧耳素的纯度为88%。

本发明实施例所述的一种截短侧耳素的提取方法,该方法先使用甲醇浸提截短侧耳素菌,得到截短侧耳素粗品,可以较大程度的提取出截短侧耳素,并且甲醇成本较低;再用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,得到截短侧耳素精品,可以将截短侧耳素粗品中的杂质去掉,提高截短侧耳素的纯度;该提取方法产率高,成本不高,得到的产品纯度高。

实施例2.

(1)制备截短侧耳素粗品:

a浸提:室温下,在浸提罐中用甲醇重复浸提截短侧耳素干菌丝5次,每次浸提中,截短侧耳素干菌丝和甲醇的质量比为1:1,浸提时间为1.5小时,第5次浸提完后甲醇中截短侧耳素的质量百分数为0.7%;每次浸提完后压滤,压滤的压力为0.1mpa,得浸提液;合并多次浸提液,得总浸提液;

b浓缩:将总浸提液减压浓缩,减压浓缩的压力为-0.07mpa,温度为70℃,浓缩至截短侧耳素的质量百分数为12%,得截短侧耳素粗品浓缩浸提液;

c结晶:搅拌65℃的截短侧耳素粗品浓缩浸提液至析出大量结晶,搅拌过程中的压力为-0.08mpa;用降温水冷却容器,使结晶了的截短侧耳素粗品浓缩浸提液冷却至室温后,在2200rpm的转速下离心,固液分离,得截短侧耳素粗品湿体;

d干燥:在50℃下干燥截短侧耳素粗品湿体至干燥失重小于0.5%,得截短侧耳素粗品;

(2)制备截短侧耳素:

e浸提:用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,截短侧耳素粗品和乙酸乙酯的质量比为1:1,浸提时间为3小时;再压滤,压滤的压力为0.15mpa,得截短侧耳素粗品浸提液;

f浓缩:将截短侧耳素粗品浸提液减压浓缩1.5小时,减压浓缩的压力为-0.07mpa,温度为70℃,得截短侧耳素浓缩浸提液;

g结晶:搅拌55℃的截短侧耳素浓缩浸提液至析出大量结晶,搅拌过程中的压力为-0.07mpa;将结晶了的截短侧耳素浓缩浸提液冷却至室温后,在1800rpm的转速下离心,固液分离,得截短侧耳素湿体;

h干燥:在40℃下干燥截短侧耳素湿体至干燥失重小于0.5%,得所述截短侧耳素。

实施例2所述的一种截短侧耳素的提取方法,收率为88%,截短侧耳素的纯度为87%。

本发明实施例所述的一种截短侧耳素的提取方法,该方法先使用甲醇浸提截短侧耳素菌,得到截短侧耳素粗品,可以较大程度的提取出截短侧耳素,并且甲醇成本较低;再用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,得到截短侧耳素精品,可以将截短侧耳素粗品中的杂质去掉,提高截短侧耳素的纯度;该提取方法产率高,成本不高,得到的产品纯度高。

实施例3.

(1)制备截短侧耳素粗品:

a浸提:室温下,在浸提罐中用甲醇重复浸提截短侧耳素干菌丝4次,每次浸提中,截短侧耳素干菌丝和甲醇的质量比为1:1.5,浸提时间为2小时,第4次浸提完后甲醇中截短侧耳素的质量百分数为0.9%;每次浸提完后压滤,压滤的压力为0.12mpa,得浸提液;合并多次浸提液,得总浸提液;

b浓缩:将总浸提液减压浓缩,减压浓缩的压力为-0.075mpa,温度为65℃,浓缩至截短侧耳素的质量百分数为13%,得截短侧耳素粗品浓缩浸提液;

c结晶:搅拌60℃的截短侧耳素粗品浓缩浸提液至析出大量结晶,搅拌过程中的压力为-0.075mpa;用降温水冷却容器,使结晶了的截短侧耳素粗品浓缩浸提液冷却至室温后,在2000rpm的转速下离心,固液分离,得截短侧耳素粗品湿体;

d干燥:在45℃下干燥截短侧耳素粗品湿体至干燥失重小于0.5%,得截短侧耳素粗品;

(2)制备截短侧耳素:

e浸提:用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,截短侧耳素粗品和乙酸乙酯的质量比为1:1.5,浸提时间为2.5小时;再压滤,压滤的压力为0.12mpa,得截短侧耳素粗品浸提液;

f浓缩:将截短侧耳素粗品浸提液减压浓缩2小时,减压浓缩的压力为-0.075mpa,温度为65℃,得截短侧耳素浓缩浸提液;

g结晶:搅拌60℃的截短侧耳素浓缩浸提液至析出大量结晶,搅拌过程中的压力为-0.075mpa;将结晶了的截短侧耳素浓缩浸提液冷却至室温后,在2000rpm的转速下离心,固液分离,得截短侧耳素湿体;

h干燥:在45℃下干燥截短侧耳素湿体至干燥失重小于0.5%,得所述截短侧耳素。

实施例3所述的一种截短侧耳素的提取方法,收率为88%,截短侧耳素的纯度为89%。

本发明实施例所述的一种截短侧耳素的提取方法,该方法先使用甲醇浸提截短侧耳素菌,得到截短侧耳素粗品,可以较大程度的提取出截短侧耳素,并且甲醇成本较低;再用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,得到截短侧耳素精品,可以将截短侧耳素粗品中的杂质去掉,提高截短侧耳素的纯度;该提取方法产率高,成本不高,得到的产品纯度高。

实施例4.

(1)制备截短侧耳素粗品:

a浸提:室温下,在浸提罐中用甲醇重复浸提截短侧耳素干菌丝3次,每次浸提中,截短侧耳素干菌丝和甲醇的质量比为1:1.8,浸提时间为2小时,第3次浸提完后甲醇中截短侧耳素的质量百分数小于1%;每次浸提完后压滤,压滤的压力为0.11mpa,得浸提液;合并多次浸提液,得总浸提液;

b浓缩:将总浸提液减压浓缩,减压浓缩的压力为-0.08mpa,温度为62℃,浓缩至截短侧耳素的质量百分数为14%,得截短侧耳素粗品浓缩浸提液;

c结晶:搅拌58℃的截短侧耳素粗品浓缩浸提液至析出大量结晶,搅拌过程中的压力为-0.075mpa;用降温水冷却容器,使结晶了的截短侧耳素粗品浓缩浸提液冷却至室温后,在1900rpm的转速下离心,固液分离,得截短侧耳素粗品湿体;

d干燥:在43℃下干燥截短侧耳素粗品湿体至干燥失重小于0.5%,得截短侧耳素粗品;

(2)制备截短侧耳素:

e浸提:用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,截短侧耳素粗品和乙酸乙酯的质量比为1:1.3,浸提时间为2.5小时;再压滤,压滤的压力为0.12mpa,得截短侧耳素粗品浸提液;

f浓缩:将截短侧耳素粗品浸提液减压浓缩2.5小时,减压浓缩的压力为-0.07mpa,温度为64℃,得截短侧耳素浓缩浸提液;

g结晶:搅拌57℃的截短侧耳素浓缩浸提液至析出大量结晶,搅拌过程中的压力为-0.07mpa;将结晶了的截短侧耳素浓缩浸提液冷却至室温后,在1900rpm的转速下离心,固液分离,得截短侧耳素湿体;

h干燥:在44℃下干燥截短侧耳素湿体至干燥失重小于0.5%,得所述截短侧耳素。

实施例4所述的一种截短侧耳素的提取方法,收率为87%,截短侧耳素的纯度为86%。

本发明实施例所述的一种截短侧耳素的提取方法,该方法先使用甲醇浸提截短侧耳素菌,得到截短侧耳素粗品,可以较大程度的提取出截短侧耳素,并且甲醇成本较低;再用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,得到截短侧耳素精品,可以将截短侧耳素粗品中的杂质去掉,提高截短侧耳素的纯度;该提取方法产率高,成本不高,得到的产品纯度高。

实施例5.

(1)制备截短侧耳素粗品:

a浸提:室温下,在浸提罐中用甲醇重复浸提截短侧耳素干菌丝4次,每次浸提中,截短侧耳素干菌丝和甲醇的质量比为1:1.3,浸提时间为2小时,第4次浸提完后甲醇中截短侧耳素的质量百分数为0.9%;每次浸提完后压滤,压滤的压力为0.14mpa,得浸提液;合并多次浸提液,得总浸提液;

b浓缩:将总浸提液减压浓缩,减压浓缩的压力为-0.07mpa,温度为68℃,浓缩至截短侧耳素的质量百分数为12%,得截短侧耳素粗品浓缩浸提液;

c结晶:搅拌62℃的截短侧耳素粗品浓缩浸提液至析出大量结晶,搅拌过程中的压力为-0.08mpa;用降温水冷却容器,使结晶了的截短侧耳素粗品浓缩浸提液冷却至室温后,在2100rpm的转速下离心,固液分离,得截短侧耳素粗品湿体;

d干燥:在48℃下干燥截短侧耳素粗品湿体至干燥失重小于0.5%,得截短侧耳素粗品;

(2)制备截短侧耳素:

e浸提:用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,截短侧耳素粗品和乙酸乙酯的质量比为1:1.8,浸提时间为2.5小时;再压滤,压滤的压力为0.13mpa,得截短侧耳素粗品浸提液;

f浓缩:将截短侧耳素粗品浸提液减压浓缩2小时,减压浓缩的压力为-0.08mpa,温度为67℃,得截短侧耳素浓缩浸提液;

g结晶:搅拌62℃的截短侧耳素浓缩浸提液至析出大量结晶,搅拌过程中的压力为-0.08mpa;将结晶了的截短侧耳素浓缩浸提液冷却至室温后,在2100rpm的转速下离心,固液分离,得截短侧耳素湿体;

h干燥:在48℃下干燥截短侧耳素湿体至干燥失重小于0.5%,得所述截短侧耳素。

实施例5所述的一种截短侧耳素的提取方法,收率为86%,截短侧耳素的纯度为87%。

本发明实施例所述的一种截短侧耳素的提取方法,该方法先使用甲醇浸提截短侧耳素菌,得到截短侧耳素粗品,可以较大程度的提取出截短侧耳素,并且甲醇成本较低;再用乙酸乙酯浸提截短侧耳素粗品,得到截短侧耳素精品,可以将截短侧耳素粗品中的杂质去掉,提高截短侧耳素的纯度;该提取方法产率高,成本不高,得到的产品纯度高。

以上所述,仅是本发明实施例的较佳实施例而已,并非对本发明实施例作任何形式上的限制,依据本发明实施例的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰,均仍属于本发明实施例技术方案的范围内。

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