一种截短侧耳素类化合物、制备方法、多晶型及多晶型的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种截短侧耳素类化合物、制备方法、多晶型及多晶型的制备方法，属 于药物合成领域。
【背景技术】
[0002] 抗生素的发现在人类历史上起了重要的作用。但是，抗生素的滥用导致许多细菌 产生了严重的耐药性。耐药菌尤其是葡萄球菌、肺炎链球菌、结核分枝杆菌等，每年引起 二百多万人的死亡，严重威胁了人类的健康。因此，研制新的抗耐药菌类药物显得尤为重 要。
[0003] 截短侧耳素(化学结构见式i)是上世纪50年代首次从高等真菌狀 multilus (Fr. ) Sacc.你 Pleurotus Passecke- rianusPilat^^^^萬飞一种具有抗菌活性 的双萜类化合物。该化合物由一个含有8个手性中心的5-6-8三元环骨架和一个乙醇酸酯 的侧链组成。研究表明，截短侧耳素及其衍生物是在核糖体水平上抑制细菌蛋白质的合成， 该类化合物作用于细菌核糖体50S亚基的23SRNA上，结合位点在肽基转移酶（PTC)的V结 构域。其三元母核结合于A位点的活性口袋中，而侧链部分覆盖了 tRNA与核糖体结合的P 位点，通过抑制细菌蛋白质的合成而达到抑菌目的。正是由于这种特殊的作用机制，截短侧 耳素及其衍生物在体内和体外均有着良好的抗阳性耐药菌的活性，以及较好的药代动力学 性质和较低的耐药性。
式i截短侧耳素分子结构式。
[0005] 截短侧耳素 C14的酯基结构侧链是进行化学修饰的主要位点，国内外对截短侧耳 素 C14的侧链的结构修饰研究一般是在保留酯基结构的前提下，在C22位进行改造，这样能 够大大提高其抑菌活性和生物利用度。构效关系表明，C-14位侧链连接一个碱性中心的硫 醚基侧链，其衍生物活性就会发生决定性的改进。最近的研究表明，除了硫醚基外，侧链中 含有杂环也能极大的提高该类化合物的抑菌活性。
[0006] 截短侧耳素及其衍生物主要是通过抑制肽基转移酶的活性而使蛋白质合成受阻， 从而达到抑菌作用。由于该类化合物与目前市场上普遍使用的抗菌药物作用靶点不同，因 此，这类药物和其他药物之间不会出现交叉耐药性，尤其对耐药的金黄色葡萄球菌、肺炎链 球菌和结核分枝杆菌等有良好的抑制作用。
【发明内容】
[0007] 本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供了一种截短侧耳素类化合物、 制备方法、多晶型及多晶型的制备方法。
[0008] 为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案： 本发明的一个目的是提供一种截短侧耳素类化合物，包括结构式（i)所示的 14-0-[ (4-氨基-6-羟基-嘧啶-2-基）巯乙酰基]姆体林，和/或其另一构象即结构式 (ii )所示的14-0-[ (4-氨基-6-酮-嘧啶-2-基）巯乙酰基]姆体林
[0009] 经体外抑菌活性研究表明，该化合物具有显著的抑制耐甲氧西林的金黄色葡萄 球菌（methicillin-resistant ayrei/AMRSA)、耐甲氧西林的表皮球菌 (methici 11 in-resistant Staphylococcus epidermidis (MRSE) IMI {Bacillus cereiAs, B. cereiA?)、大肠杆菌（E. coli)、支原体、以及临床中分离的肺炎链球菌等。在体 内能有效保护感染了 MRSA的小白鼠，ED5QS 2. 35mg/kg，而泰妙菌素在该模型下的ED5QS 5. 95mg/kg。另外，该化合物的急性毒性较低，LD5。达到3320. 3 mg/kg。以上研究表明，该化 合物极有可能开发成一种新的抗耐药菌药物。
[0010] 本发明的另一个目的是提供所述的截短侧耳素类化合物的制备方法，将截短侧 耳素的C-22羟基经对甲苯磺酰氯活化，生成磺化截短侧耳素，不需要分离直接与4-氨 基-6-羟基-2-巯基嘧啶的钠盐在碱性条件下经亲核反应制得所述截短侧耳素类化合物， 具体的反应路线如下：
[0011] 在上述方案中优选的是，经对甲苯磺酰氯活化反应的反应温度为50-65°C，反应时 间为 0. 5-1. 5 h。
[0012] 在上述任一方案中优选的是，亲核反应的反应温度为50_65°C，反应时间为5-6 h。
[0013] 在上述任一方案中优选的是，4-氨基-6-羟基-2-巯基嘧啶的钠盐的制备方法为 将NaOH溶解到甲醇中，滴加4-氨基-6-羟基-2-巯基嘧啶，搅拌即得，搅拌的时间优选为 30min。采用此方法制备的4-氨基-6-羟基-2-巯基嘧啶的钠盐，可使产物的收率更高。
[0014] 本发明制备该化合物工艺有以下几个优点：1)合成工艺简单：采用一锅法，从原 来的两步反应在一个反应器中反应，中间不需要更换反应溶剂。只需要加入反应原料和另 一种溶剂；2)后处理方法简单：反应后，仅仅蒸干反应溶剂，加入一定量的水和有机溶剂洗 涤掉杂质，经布式漏斗过滤、干燥、粉碎即可；3)反应条件温和：亲核反应温度为50_65°C， 反应时间为5-6 h，不需要高压和无氧条件；4)反应收率高：反应收率达90%以上，获得的 14-0-[ (4-氨基-6-羟基-嘧啶-2-基）巯乙酰基]姆体林含量达到98%以上。
[0015] 本发明的再一个目的是提供所述的截短侧耳素类化合物的多种晶型，和各晶型的 制备方法。
[0016] 本发明提供的所述截短侧耳素类化合物的第一种晶型，该晶型命名为I晶型， 所述I晶型使用Cu-κα的X-射线衍射方法，以度表示的2 Θ角在约8. 3526、9. 7560、 13. 1360、13. 4535、19. 522U25. 1412 处有明显的特征吸收峰。
[0017] 在上述任一方案中优选的是，所述I晶型的X射线衍射图如图1所示。
[0018] 本发明提供的所述截短侧耳素类化合物的I晶型的制备方法：取lg上述的截短 侧耳素类化合物（14-0-[(4_氨基-6-羟基-嘧啶-2-基）巯乙酰基]姆体林及其另一 构象)，加入20-30 ml乙酸乙酯中，过滤，滤液加入相同体积的饱和碳酸氢钠，搅拌混匀，静 置2-3 h后，在两相之间出现白色针状晶体，过滤即得。
[0019] 本发明提供的所述截短侧耳素类化合物的第二种晶型，该晶型命名为II晶型， 所述II晶型使用Cu-Ka的X-射线衍射方法，以度表示的2Θ角在约4.9419、8. 7925、 10. 1075、13· 2779、14· 3767、15· 8227、16· 5973、17· 5199、20· 2718、21· 8264、26· 5106 处有明 显的特征吸收峰。
[0020] 在上述任一方案中优选的是，所述II晶型的X射线衍射图如图2所示。
[0021] 本发明提供的所述截短侧耳素类化合物的II晶型的制备方法：取lg上述的截短 侧耳素类化合物（14-0-[(4_氨基-6-羟基-嘧啶-2-基）巯乙酰基]姆体林及其另一 构象)，加入20 -30ml二氯甲烷中，过滤，溶剂自然挥发，即获得晶II型的白色粉末。
[0022] 本发明提供的所述截短侧耳素类化合物的第三种晶型，该晶型命名为III晶型， 所述III晶型使用Cu-Ka的X-射线衍射方法，以度表示的2 Θ角在约6. 6028、8. 3183、 10. 0373、12. 1114、13. 0598、13. 2175、13. 5046、16. 5052、21· 8365 处有明显的特征吸收峰。
[0023] 在上述任一方案中优选的是，所述III晶型的X射线衍射图如图3所示。
[0024] 本发明提供的所述截短侧耳素类化合物的III晶型的制备方法：取lg上述的截短 侧耳素类化合物（14-0-[(4_氨基-6-羟基-嘧啶-2-基）巯乙酰基]姆体林及其另一 构象)，加入20-30 ml乙酸乙酯中，过滤，自然挥发，即获得III晶型的白色粉末。
[0025] 本发明提供的所述截短侧耳素类化合物的无定型态，所述无定型态的X射线衍射 图如图4所示。
[0026] 本发明提供的所述截短侧耳素类化合物的无定型态的制备方法：取lg上述的截 短侧耳素类化合物（14-0-[(4_氨基-6-羟基-嘧啶-2-基）巯乙酰基]姆体林及其另 一构象)，加入10 -25ml乙醇中，过滤，自然挥发，即获得无定型的白色粉末。
[0027] 本发明的截短侧耳素化合物对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌和表皮球菌，以及大 肠杆菌和无乳链球菌有抑制作用。
[0028] 本发明的截短侧耳素化合物在制备抗菌药物，尤其是抗耐药菌药物中应用。
[0029] 本发明的有益效果：本发明的新型截短侧耳素化合物对多种耐药菌如耐甲氧西林 的金黄色葡萄球菌和表皮球菌，以及兽医临床中常见的致病菌如