本发明涉及水产品精深加工领域。更具体地，涉及一种利用复合蛋白酶水解海洋来源蛋白，工艺上去除芳香族氨基酸制备高f值寡肽的方法。
背景技术：
高f值寡肽具有很好营养作用，呈有一定生物活性。选用海洋优质的蛋白源作为制备高f值寡肽原料，如鱼、虾、海参、螺旋藻等制备寡肽具有较高的活性与生物效价。高f寡肽具有消除或减轻肝性脑病症状、改善肝功能和改善多种病人蛋白质营养失常及抗疲劳等功能，除可制作肝类疾病药品外，还可广泛用作保肝、护肝功能性食品，烧伤、外科手术、脓毒血症及消化酶缺乏患者蛋白营养食品和肠道营养剂，高强度劳动者和运动员食品营养强化剂等。
技术实现要素：
本发明的目的在于开发一种海洋来源蛋白制备丰富支链氨基酸的寡肽的制备方法。
为达到上述目的，本发明提供一种利用海洋来源蛋白制备高f值寡肽的方法，具体步骤如下：
s1、原料预处理：取新鲜海洋来源蛋白粉碎、制浆，得到蛋白浆液。
s2、向步骤s1制得的蛋白浆液中加入所述浆液2~8倍质量的水，升温至40~55℃后，加入2.5mol/l的naoh溶液调节ph至9.0-10.0，预处理20-40min。
s3、向步骤s2所述的蛋白浆液中加入占所述浆液总质量0.1~0.3%的复合蛋白酶，搅拌酶解3~6h后，升温至80~95℃灭酶10~25min，得到酶解液；将所述酶解液离心分离，收集液相；
所述复合蛋白酶的质量配比为：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：风味蛋白酶=2~4:3~5:3~5；
s4、将步骤s3得到的液相采用切割分子量2000~8000da的纳滤膜分离，收集透过液；
s5、将步骤s4收集的透过液加入β环状糊精和活性炭，加入2.5mol/l的盐酸矫正所述透过液ph至5~7，升温至50~80℃，反应30~45min进行精制后，经板框压滤机过滤脱碳，收集液相，即为精制液；
所述β环状糊精的加入量为所述透过液质量的0.01~0.05%，所述活性炭的加入量为所述透过液质量的0.1~1.0%；
s6、将步骤s5制得的精制液通过膜浓缩设备浓缩至可溶性固形物含量占浓缩液总质量20~40%，喷雾干燥，得到牡蛎低聚肽粉。
优选方式下，步骤s1具体为：取新鲜海洋来源蛋白源，利用绞肉机或粉碎机将所述蛋白源绞碎10~20min，得到蛋白浆液。
优选方式下，步骤s3所述离心分离的条件为：采用摇摆型管式分离机，转速为10000~16000r/min。
优选方式下，步骤s5所述膜浓缩的操作条件为：采用切割分子量为10~100da的纳滤级、中空纤维膜，操作压力为1.5~1.8mpa。
优选方式下，步骤s5所述喷雾干燥的条件为：进风温度140℃，出风温度85℃。
本发明相比于现有技术的有益效果在于：
1、本发明方法使用复合蛋白酶适合大部分海洋生物蛋白，且蛋白收率均高于60%。
2、本发明方法制得的产品分子量小于1000da的寡肽含量较高，能够被人体完全吸收。
3、本发明方法制得的寡肽粉无苦味、腥味，f值可以打到20左右，可作为蛋白营养补充剂直接食用。
综上，本发明利用海洋优质蛋白源制备高f值寡肽的方法提高了海洋生物附加值，所得产品中寡肽含量高，分子量在1000da以下，支链氨基酸含量丰富，能够被人体完全吸收，对推动我国海洋产业的迅速发展具有极其重要的现实意义。
具体实施方式
以下实例是对本发明的进一步说明。
实施例1
已牡蛎为原料
（1）将牡蛎鲜肉1000kg用绞肉机粉碎15min，绞碎后进入胶体磨磨浆得浆液。
（2）将浆液导入5m3酶解罐，所述5m3酶解罐为夹层式加热反应釜，加入3倍牡蛎浆液质量的纯水，调整体系温度50℃，用2.5mol/l的naoh溶液调ph至9.6，预处理25min。用2.5mol/l的hcl溶液调ph至8.5，加入所述牡蛎浆液总质量0.15%的复合蛋白酶；复合蛋白酶的质量配比为：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：风味蛋白酶=3:4:4，搅拌酶解4h，升温80℃灭酶20min，采用管式离心机16000rpm离心进行固液分离，收集离心清液，导入5m3清液储罐。
（3）5m3分离液储罐与膜分离装置相连，将所得清液经切割分子量5000da纳滤膜分离装置分离得透过液；
（4）步骤（3）中透过液加入5m3精制罐为夹层式加热反应釜，精制的条件为：加透过液质量0.02%的β环状糊精、加透过液质量的0.8%活性炭，用2.5mol/l的hcl矫正分离液ph至6，加温到65℃，反应40min。
（5）所述5m3精制罐与板框压滤机相连，经板框压滤机脱碳，得到精制液。
（6）所述板框压滤机与膜浓缩设备相连，将精制液经切割分子量50da纳滤膜浓缩浓缩，使用1.6mpa压力，浓缩至可溶性固含量占浓缩液质量30%，导入浓缩储罐。
（7）所述浓缩储罐，设置有出料口，将浓缩料液从出料口取出后导入喷雾干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥时进风温度维持在140℃，出风温度维持在85℃，得牡蛎低聚肽粉。
本实施例制得的牡蛎低聚肽粉59.1千克，颜色为乳白色，f值测定为支链氨基酸含量/总氨基酸含量=20.15，分子量小于1000da肽占总肽含量为98%，属于优质高f值寡肽。
实施例2
已螺旋藻为原料
（1）将螺旋藻粉1000kg用粉碎机粉碎15min，粉碎后进入胶体磨磨浆得海藻料液。
（2）将料液导入5m3酶解罐，所述5m3酶解罐为夹层式加热反应釜，加入3倍料液质量的纯水，调整体系温度50℃，用2.5mol/l的naoh溶液调ph至9.6，预处理25min。用2.5mol/l的hcl溶液调ph至8.5，加入所述螺旋藻料液总质量0.15%的复合蛋白酶；复合蛋白酶的质量配比为：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：风味蛋白酶=4:4:2，搅拌酶解4h，升温80℃灭酶20min，采用管式离心机16000rpm离心进行固液分离，收集离心清液，导入5m3清液储罐。
（3）5m3分离液储罐与膜分离装置相连，将所得清液经切割分子量5000da纳滤膜分离装置分离得透过液；
（4）步骤（3）中透过液加入5m3精制罐为夹层式加热反应釜，精制的条件为：加透过液质量0.02%的β环状糊精、加透过液质量的0.8%活性炭，用2.5mol/l的hcl矫正分离液ph至6，加温到65℃，反应40min。
（5）所述5m3精制罐与板框压滤机相连，经板框压滤机脱碳，得到精制液。
（6）所述板框压滤机与膜浓缩设备相连，将精制液经切割分子量50da纳滤膜浓缩浓缩，使用1.6mpa压力，浓缩至可溶性固含量占浓缩液质量30%，导入浓缩储罐。
（7）所述浓缩储罐，设置有出料口，将浓缩料液从出料口取出后导入喷雾干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥时进风温度维持在140℃，出风温度维持在85℃，得螺旋藻低聚肽粉。
本实施例制得的螺旋藻低聚肽粉65.5千克，颜色为淡绿色，f值测定为支链氨基酸含量/总氨基酸含量=22.32，分子量小于1000da肽占总肽含量为96%，属于优质高f值寡肽。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。