杂芳基雌激素受体调节剂及其用途的制作方法

本申请描述了化合物(包括其药用盐、溶剂化物、代谢物、前药)、包含此类化合物的药物组合物及使用所述化合物与其它治疗剂组合治疗、预防或诊断雌激素敏感性、雌激素受体依赖性或由雌激素受体介导的疾病或病症的方法。

背景技术：

雌激素受体(“er”)是一种通过其与内源性雌激素相互作用而介导对多种生物效应的诱导的由配体活化的转录调节蛋白。内源性雌激素包括17β-雌二醇和雌酮。已发现er具有两种亚型即er-α和er-β。雌激素和雌激素受体参与许多疾病或病症例如乳腺癌、肺癌、卵巢癌、结肠癌、前列腺癌、子宫内膜癌、子宫癌及其它疾病或病症。需要在转移性疾病和获得性耐药的情况下具有活性的新型er-α靶向剂。

技术实现要素：

本申请大体上涉及具有雌激素受体调节活性或功能的具有式i、ii和iii结构的杂芳基化合物及其立体异构体、互变异构体或药用盐：

其中取代基和结构特征如本申请所述。

本申请一个方面为式i化合物、其立体异构体、互变异构体或药用盐且其中取代基和结构特征如本申请所述。

本申请一个方面为式ii化合物、其立体异构体、互变异构体或药用盐且其中取代基和结构特征如本申请所述。

本申请一个方面为式iii化合物、其立体异构体、互变异构体或药用盐且其中取代基和结构特征如本申请所述。

本申请一个方面为式i、ii和iii化合物和药用载体、助流剂、稀释剂或赋形剂的药物组合物。

本申请一个方面为式i化合物和药用载体、助流剂、稀释剂或赋形剂的药物组合物。

本申请一个方面为式ii化合物和药用载体、助流剂、稀释剂或赋形剂的药物组合物。

本申请一个方面为式iii化合物和药用载体、助流剂、稀释剂或赋形剂的药物组合物。

本申请一个方面为制备式i、ii和iii化合物或包含式i、ii和iii化合物的药物组合物的方法。

本申请一个方面为制备式i化合物或包含式i化合物的药物组合物的方法。

本申请一个方面为制备式ii化合物或包含式ii化合物的药物组合物的方法。

本申请一个方面为制备式iii化合物或包含式iii化合物的药物组合物的方法。

本申请一个方面为治疗患者的er相关疾病或病症的方法，其包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的本申请所述药物组合物。

本申请一个方面为治疗患者的er相关疾病或病症的方法，其包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的本申请所述式i、ii和iii化合物。

本申请一个方面为治疗患者的er相关疾病或病症的方法，其包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的本申请所述式i化合物。

本申请一个方面为治疗患者的er相关疾病或病症的方法，其包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的本申请所述式ii化合物。

本申请一个方面为治疗患者的er相关疾病或病症的方法，其包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的本申请所述式iii化合物。

本申请一个方面为选自本申请所述式i、ii和iii的化合物，其用于治疗患者的er相关疾病或病症的方法，所述方法包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的式i、ii和iii化合物。

本申请一个方面为本申请所述式i化合物，其用于治疗患者的er相关疾病或病症的方法，所述方法包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的式i化合物。

本申请一个方面为本申请所述式ii化合物，其用于治疗患者的er相关疾病或病症的方法，所述方法包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的式ii化合物。

本申请一个方面为本申请所述式iii化合物，其用于治疗患者的er相关疾病或病症的方法，所述方法包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的式iii化合物。

本申请一个方面为选自本申请所述式i、ii和iii的化合物在制备用于治疗患者的er相关疾病或病症的药物中的用途。

本申请一个方面为本申请所述式i化合物在制备用于治疗患者的er相关疾病或病症的药物中的用途。

本申请一个方面为本申请所述式ii化合物在制备用于治疗患者的er相关疾病或病症的药物中的用途。

本申请一个方面为本申请所述式iii化合物在制备用于治疗患者的er相关疾病或病症的药物中的用途。

本申请一个方面为选自本申请所述式i、ii和iii的化合物在治疗患者的er相关疾病或病症的方法中的用途，所述方法包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的式i、ii和iii化合物。

本申请一个方面为本申请所述式i化合物在治疗患者的er相关疾病或病症的方法中的用途，所述方法包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的式i化合物。

本申请一个方面为本申请所述式ii化合物在治疗患者的er相关疾病或病症的方法中的用途，所述方法包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的式ii化合物。

本申请一个方面为本申请所述式iii化合物在治疗患者的er相关疾病或病症的方法中的用途，所述方法包括向患有er相关疾病或病症的患者给予治疗有效量的式iii化合物。

本申请一个方面为选自本申请所述式i、ii和iii的化合物，其用作药物。

本申请一个方面为本申请所述式i化合物，其用作药物。

本申请一个方面为本申请所述式ii化合物，其用作药物。

本申请一个方面为本申请所述式iii化合物，其用作药物。

本申请一个方面为用于治疗由雌激素受体介导的病症的试剂盒，其包含：

a)包含式i、ii或iii化合物的药物组合物；和

b)使用说明。

本申请一个方面为用于治疗由雌激素受体介导的病症的试剂盒，其包含：

a)式i、ii或iii化合物；和

b)使用说明。

具体实施方式

现将详细描述本申请某些实施方案，其实施例在所附结构和式中说明。当结合所列实施方案来描述本申请时，应理解所述实施方案不是意在将本申请限于这些实施方案。相反地，本申请意在涵盖可包括在如权利要求书所定义的本申请范围内的所有可选形式、修改形式和等价形式。本领域技术人员将认识到与在此描述的那些方法和物质类似或等价的可用于实施本申请的多种方法和物质。本申请绝不限于所描述的方法和物质。若一篇或多篇所引入的文献、专利和类似材料与本申请不同或矛盾(包括但不限于所定义的术语、术语用法、所描述的技术等)，则以本申请为准。除非另有定义，本申请使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属领域技术人员通常所理解相同的含义。虽然与在此描述的那些方法和物质类似或等价的方法和物质可用于实施或测试本申请，但是以下描述了适当的方法和物质。通过引用的方式将本申请提及的所有出版物、专利申请、专利及其它参考文献全部引入到本申请中。除非另有说明，本申请使用的命名法基于iupac系统命名法。

定义

当指出取代基数目时，术语“一个或多个”是指一个取代基至最大可能数目的取代情况，即用取代基替换一个氢至替换全部氢。术语“取代基”表示对母体分子上的氢原子进行替换的原子或原子团。术语“取代”表示所指定的基团带有一个或多个取代基。当任何基团可带有多个取代基且提供多种可能取代基时，所述取代基是独立选择的且无需相同。术语“未取代”是指所指定的基团不带有任何取代基。术语“任选取代”是指所指定的基团是未取代的或被一个或多个独立选自可能取代基的取代基取代。当指出取代基数目时，术语“一个或多个”是指一个取代基至最大可能数目的取代情况，即用取代基替换一个氢至替换全部氢。

本申请使用的术语“烷基”是指具有1-12个碳原子(c1-c12)的饱和直链或支链一价烃基，其中烷基可任选独立取代有一个或多个下述取代基。在另一个实施方案中，烷基具有1-8个碳原子(c1-c8)或1-6个碳原子(c1-c6)。烷基的实例包括但不限于甲基(me,-ch3)、乙基(et,-ch2ch3)、1-丙基(n-pr,正丙基,-ch2ch2ch3)、2-丙基(i-pr,异丙基,-ch(ch3)2)、1-丁基(n-bu,正丁基,-ch2ch2ch2ch3)、2-甲基-1-丙基(i-bu,异丁基,-ch2ch(ch3)2)、2-丁基(s-bu,仲丁基,-ch(ch3)ch2ch3)、2-甲基-2-丙基(t-bu,叔丁基,-c(ch3)3)、1-戊基(正戊基,-ch2ch2ch2ch2ch3)、2-戊基(-ch(ch3)ch2ch2ch3)、3-戊基(-ch(ch2ch3)2)、2-甲基-2-丁基(-c(ch3)2ch2ch3)、3-甲基-2-丁基(-ch(ch3)ch(ch3)2)、3-甲基-1-丁基(-ch2ch2ch(ch3)2)、2-甲基-1-丁基(-ch2ch(ch3)ch2ch3)、1-己基(-ch2ch2ch2ch2ch2ch3)、2-己基(-ch(ch3)ch2ch2ch2ch3)、3-己基(-ch(ch2ch3)(ch2ch2ch3))、2-甲基-2-戊基(-c(ch3)2ch2ch2ch3)、3-甲基-2-戊基(-ch(ch3)ch(ch3)ch2ch3)、4-甲基-2-戊基(-ch(ch3)ch2ch(ch3)2)、3-甲基-3-戊基(-c(ch3)(ch2ch3)2)、2-甲基-3-戊基(-ch(ch2ch3)ch(ch3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-c(ch3)2ch(ch3)2)、3,3-二甲基-2-丁基(-ch(ch3)c(ch3)3、1-庚基、1-辛基等。

本申请使用的术语“烷二基”是指具有约1-12个碳原子(c1-c12)的饱和直链或支链二价烃基，其中烷二基可任选独立取代有一个或多个下述取代基。在另一个实施方案中，烷二基具有1-8个碳原子(c1-c8)或1-6个碳原子(c1-c6)。烷二基的实例包括但不限于亚甲基(-ch2-)、亚乙基(-ch2ch2-)、亚丙基(-ch2ch2ch2-)等。烷二基也可被称为“亚烷基”。

术语“烯基”是指具有至少一个不饱和位点即碳-碳sp²双键的2-8个碳原子(c2-c8)的直链或支链一价烃基，其中烯基可任选独立取代有一个或多个本申请所述取代基且包括具有“顺式”和“反式”取向或“e”和“z”取向的基团。实例包括但不限于乙烯基(-ch＝ch2)、烯丙基(-ch2ch＝ch2)等。

术语“亚烯基”或“烯二基”是指具有至少一个不饱和位点即碳-碳sp²双键的2-8个碳原子(c2-c8)的直链或支链二价烃基，其中亚烯基可任选独立取代有一个或多个本申请所述取代基且包括具有“顺式”和“反式”取向或“e”和“z”取向的基团。实例包括但不限于亚乙烯基(-ch＝ch-)、亚烯丙基(-ch2ch＝ch-)等。

术语“炔基”是指具有至少一个不饱和位点即碳-碳sp叁键的2-8个碳原子(c2-c8)的直链或支链一价烃基，其中炔基可任选独立取代有一个或多个本申请所述取代基。实例包括但不限于乙炔基(-c≡ch)、丙炔基(炔丙基,-ch2c≡ch)等。

术语“亚炔基”或“炔二基”是指具有至少一个不饱和位点即碳-碳sp叁键的2-8个碳原子(c2-c8)的直链或支链二价烃基，其中亚炔基可任选独立取代有一个或多个本申请所述取代基。实例包括但不限于亚乙炔基(-c≡c-)、亚丙炔基(亚炔丙基,-ch2c≡c-)等。

术语“碳环”、“碳环基”、“碳环”和“环烷基”是指具有3-12个碳原子(c3-c12)呈单环形式或具有7-12个碳原子呈二环形式的一价的非芳族的饱和或部分不饱和的环。具有7-12个原子的二环碳环可排列为例如二环[4,5]系统、二环[5,5]系统、二环[5,6]系统或二环[6,6]系统且具有9或10个环原子的二环碳环可排列为二环[5,6]系统或二环[6,6]系统或排列为桥连系统例如二环[2.2.1]庚烷、二环[2.2.2]辛烷和二环[3.2.2]壬烷。螺碳环基部分也包括在该定义的范围内。螺碳环基部分的实例包括[2.2]戊基、[2.3]己基和[2.4]庚基。单环碳环的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、1-环己-1-烯基、1-环己-2-烯基、1-环己-3-烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基、环十二烷基等。碳环基任选独立取代有一个或多个本申请所述取代基。

术语“碳环二基”是指具有3-12个碳原子(c3-c12)呈单环形式或具有7-12个碳原子呈二环形式的二价的非芳族的饱和或部分不饱和的环。

“芳基”是指具有6-20个碳原子(c6-c20)的一价芳族烃基，其如下衍生：由母体芳族环系的单个碳原子除去一个氢原子。一些芳基在示例性结构中表示为“ar”。芳基包括以下二环基团，其含有与饱和环、部分不饱和环或芳族碳环稠合的芳环。典型的芳基包括但不限于由苯(苯基)、取代的苯、萘、蒽、联苯、茚、茚满、1,2-二氢萘、1,2,3,4-四氢萘等衍生的基团。芳基任选独立取代有一个或多个本申请所述取代基。

术语“亚芳基”或“芳二基”是指具有6-20个碳原子(c6-c20)的二价芳族烃基，其如下衍生：由母体芳族环系的两个碳原子除去两个氢原子。一些芳二基在示例性结构中表示为“ar”。芳二基包括以下二环基团，其含有与饱和环、部分不饱和环或芳族碳环稠合的芳环。典型的芳二基包括但不限于由苯(苯二基)、取代的苯、萘、蒽、联苯、茚、茚满、1,2-二氢萘、1,2,3,4-四氢萘等衍生的基团。芳二基也称为“亚芳基”且任选取代有一个或多个本申请所述取代基。

术语“杂环”、“杂环基”和“杂环”在本申请中可互换使用且是指具有3至约20个环原子的饱和或部分不饱和(即在环中具有一个或多个双键和/或叁键)的碳环基团，其中至少一个环原子为选自氮、氧、磷和硫的杂原子，其余环原子为c，其中一个或多个环原子任选独立取代有一个或多个下述取代基。杂环可为具有3-7个环成员(2-6个碳原子及1-4个选自n、o、p和s的杂原子)的单环或具有7-10个环成员(4-9个碳原子及1-6个选自n、o、p和s的杂原子)的二环(例如二环[4,5]系统、二环[5,5]系统、二环[5,6]系统或二环[6,6]系统)。杂环参见paquette,leoa.；“principlesofmodernheterocyclicchemistry”(w.a.benjamin,newyork,1968)(特别是第1、3、4、6、7和9章)；“thechemistryofheterocycliccompounds,aseriesofmonographs”(johnwiley&sons,newyork,1950年至今)(特别是第13、14、16、19和28卷)；及j.am.chem.soc.(1960)82:5566。“杂环基”还包括以下基团，其中杂环基与饱和环、部分不饱和环、芳族碳环或芳族杂环稠合。杂环的实例包括但不限于吗啉-4-基、哌啶-1-基、哌嗪基、哌嗪-4-基-2-酮、哌嗪-4-基-3-酮、吡咯烷-1-基、硫吗啉-4-基、s,s-二氧代硫吗啉-4-基、氮杂环辛烷-1-基、氮杂环丁烷-1-基、八氢吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基、[1,4]二氮杂环庚烷-1-基、吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫吗啉代、硫氧杂环己基、哌嗪基、高哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂基、二氮杂基、硫氮杂基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2h-吡喃基、4h-吡喃基、二噁烷基、1,3-二氧杂环戊基、吡唑啉基、二硫杂环己基、二硫杂环戊基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂二环[3.1.0]己基、3-氮杂二环[4.1.0]庚基、氮杂二环[2.2.2]己基、3h-吲哚基、喹嗪基和n-吡啶基脲基团。螺杂环基部分也包括在该定义的范围内。螺杂环基部分的实例包括氮杂螺[2.5]辛基和氮杂螺[2.4]庚基。其中2个环原子取代有氧代(＝o)部分的杂环基的实例为嘧啶酮基和1,1-二氧代-硫吗啉基。本申请杂环基任选独立取代有一个或多个本申请所述取代基。

术语“杂环二基”是指具有3至约20个环原子的二价的饱和或部分不饱和(即在环中具有一个或多个双键和/或叁键)的碳环基团，其中至少一个环原子为选自氮、氧、磷和硫的杂原子，其余环原子为c，其中一个或多个环原子任选独立取代有一个或多个本申请所述取代基。

术语“杂芳基”是指呈5、6或7元环形式的一价芳族基团且包括具有5-20个原子的稠合环系(其中至少一个环是芳族的)，所述杂芳基含有一个或多个独立选自氮、氧和硫的杂原子。杂芳基的实例为吡啶基(包括例如2-羟基吡啶基)、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧啶基(包括例如4-羟基嘧啶基)、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁二唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、四氢异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、吲嗪基、酞嗪基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、二氮杂萘基和呋喃并吡啶基。杂芳基任选独立取代有一个或多个本申请所述取代基。

术语“杂芳二基”是指呈5、6或7元环形式的二价芳族基团且包括具有5-20个原子的稠合环系(其中至少一个环是芳族的)，所述杂芳基含有一个或多个独立选自氮、氧和硫的杂原子。

在可能的情况下，杂环或杂芳基可为经碳键合的(经碳连接的)或经氮键合的(经氮连接的)。例如但不限于此，经碳键合的杂环或杂芳基键合在吡啶的2、3、4、5或6位、哒嗪的3、4、5或6位、嘧啶的2、4、5或6位、吡嗪的2、3、5或6位、呋喃、四氢呋喃、噻吩、噻吩、吡咯或四氢吡咯的2、3、4或5位、噁唑、咪唑或噻唑的2、4或5位、异噁唑、吡唑或异噻唑的3、4或5位、氮杂环丙烷的2或3位、氮杂环丁烷的2、3或4位、喹啉的2、3、4、5、6、7或8位或异喹啉的1、3、4、5、6、7或8位。

例如但不限于此，经氮键合的杂环或杂芳基键合在氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、二氢吲哚、1h-吲唑的1位、异吲哚或异二氢吲哚的2位、吗啉的4位和咔唑或β-咔啉的9位。

术语“治疗”和“处置”是指治疗性处置，其中目的是减缓(减轻)不期望的生理变化或障碍例如关节炎或癌症的发展或扩散。就本申请目的而言，有益或期望的临床结果包括但不限于减轻症状、降低疾病程度、稳定疾病状态(即没有恶化)、延迟或减缓疾病进程、改善或缓和疾病状态及缓解(不论是部分还是全部)，不论是可检测到的还是不可检测到的。“治疗”还可指与在不接受治疗的情况下预期的存活相比使存活得以延长。需要治疗的那些人包括患有病症或障碍的那些人。

短语“治疗有效量”是指本申请化合物的以下量，其(i)治疗具体疾病、病症或障碍；(ii)减轻、改善或消除具体疾病、病症或障碍的一种或多种症状；或(iii)预防或延迟本申请所述具体疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作。在癌症的情况下，治疗有效量的药物可减少癌细胞数目；减小肿瘤尺寸；抑制(即在一定程度上减缓且优选停止)癌细胞浸润到周围器官中；抑制(即在一定程度上减缓且优选停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；和/或在一定程度上减轻与癌症相关的一种或多种症状。药物可在一定程度上防止癌细胞生长和/或杀死现有癌细胞，其可为抑制细胞生长和/或细胞毒性的。对于癌症疗法，效力可例如通过评价疾病进展时间(ttp)和/或确定应答率(rr)来测定。

术语“癌症”是指或用于描述哺乳动物中通常以细胞生长失调为特征的生理学状态。“肿瘤”包含一种或多种癌性细胞。癌症的实例包括但不限于癌瘤、淋巴瘤、胚细胞瘤、肉瘤和白血病或淋巴样恶性肿瘤。上述癌症的更具体实例包括鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细胞癌)；肺癌，包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌(“nsclc”)、肺腺癌和肺鳞状细胞癌；腹膜癌；肝细胞癌；胃部癌症或胃癌，包括胃肠癌；胰腺癌；成胶质细胞瘤；宫颈癌；卵巢癌；肝癌；膀胱癌；肝瘤；乳腺癌；结肠癌；直肠癌；结肠直肠癌；子宫内膜癌或子宫癌；唾液腺癌；肾部癌症或肾癌；前列腺癌；外阴癌；甲状腺癌；肝癌瘤；肛门癌；阴茎癌；及头颈癌。

“血液学恶性肿瘤”是影响血液、骨髓和淋巴结的癌症类型。由于这三者通过免疫系统密切相关，因此影响这三者之一的疾病通常也将影响其它两者：虽然淋巴瘤是一种淋巴结疾病，但是它常常扩散到骨髓，从而影响血液。血液学恶性肿瘤是恶性肿瘤(“癌症”)且通常由血液学和/或肿瘤学专家治疗。“血液学/肿瘤学”在一些中心是内科医学下的一个亚专科，而在其它中心被认为是单独的部门(其中也有外科和放射肿瘤学家)。不是所有血液学疾病都是恶性(“癌性”)的；这些其它血液疾病也可由血液学家处置。血液学恶性肿瘤可源于两个主要血细胞谱系：骨髓样和淋巴样细胞系。骨髓样细胞系通常产生粒细胞、红细胞、血小板、巨噬细胞和肥大细胞；淋巴样细胞系产生b细胞、t细胞、nk细胞和浆细胞。淋巴瘤、淋巴细胞性白血病和骨髓瘤来自淋巴样细胞系，而急性和慢性骨髓性白血病、骨髓增生异常综合征和骨髓增生性疾病源于骨髓样细胞。白血病包括急性成淋巴细胞性白血病(all)、急性骨髓性白血病(aml)、慢性淋巴细胞性白血病(cll)、慢性骨髓性白血病(cml)、急性单核细胞性白血病(amol)和小淋巴细胞性淋巴瘤(sll)。淋巴瘤包括霍奇金淋巴瘤(所有四种亚型)和非霍奇金淋巴瘤(nhl,所有亚型)。

“化学治疗剂”为可用于治疗癌症的化合物，无论作用机理如何。化学治疗剂的类别包括但不限于烷化剂、抗代谢物、纺锤体毒性植物生物碱、细胞毒性/抗肿瘤抗生素、拓扑异构酶抑制剂、抗体、光敏剂和激酶抑制剂。化学治疗剂包括在“靶向疗法”和常规化学疗法中使用的化合物。化学治疗剂的实例包括：依鲁替尼(ibrutinib)(imbruvica^tm,apci-32765,pharmacyclicsinc./janssenbiotechinc.；casreg.no.936563-96-1,us7514444)、idelalisib(cal-101,gs1101,gs-1101,gileadsciencesinc.；casreg.no.1146702-54-6)、厄洛替尼(erlotinib)(genentech/osipharm.)、多西他赛(docetaxel)(sanofi-aventis)、5-fu(氟尿嘧啶,5-氟尿嘧啶,casno.51-21-8)、吉西他滨(gemcitabine)(lilly)、pd-0325901(casno.391210-10-9,pfizer)、顺铂(cisplatin)((sp-4-2)-二胺二氯化铂(ii),顺式-二胺二氯化铂(ii),casno.15663-27-1)、卡铂(carboplatin)(casno.41575-94-4)、紫杉醇(paclitaxel)(bristol-myerssquibboncology,princeton,n.j.)、曲妥珠单抗(trastuzumab)(genentech)、替莫唑胺(temozolomide)(4-甲基-5-氧代-2,3,4,6,8-五氮杂二环[4.3.0]壬-2,7,9-三烯-9-甲酰胺,casno.85622-93-1,scheringplough)、他莫昔芬(tamoxifen)((z)-2-[4-(1,2-二苯基丁-1-烯基)苯氧基]-n,n-二甲基乙胺,)、多柔比星(doxorubicin)(casno.23214-92-8)、akti-1/2、hppd和雷帕霉素(rapamycin)。

化学治疗剂包括b细胞受体靶标抑制剂例如btk、bcl-2和jak抑制剂。

化学治疗剂的更多实例包括奥沙利铂(oxaliplatin)(sanofi)、硼替佐米(bortezomib)(millenniumpharm.)、舒尼替尼(sutent)(su11248,pfizer)、来曲唑(letrozole)(novartis)、帕博西尼(pfizer)、甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate)(novartis)、考比替尼(cotellic^tm,xl-518,exelixis,wo2007/044515)、arry-886(mek抑制剂,azd6244,arraybiopharma,astrazeneca)、sf-1126(pi3k抑制剂,semaforepharmaceuticals)、bez-235(pi3k抑制剂,novartis)、xl-147(pi3k抑制剂,exelixis)、ptk787/zk222584(novartis)、氟维司群(fulvestrant)(astrazeneca)、亚叶酸(leucovorin)(folinicacid)、雷帕霉素(西罗莫司(sirolimus),wyeth)、拉帕替尼(lapatinib)(gsk572016,glaxosmithkline)、洛那法尼(lonafarnib)(sarasar^tm,sch66336,scheringplough)、索拉非尼(sorafenib)(bay43-9006,bayerlabs)、吉非替尼(gefitinib)(astrazeneca)、伊立替康(irinotecan)(cpt-11,pfizer)、替吡法尼(tipifarnib)(zarnestra^tm,johnson&johnson)、abraxane^tm(不含有cremophor)、紫杉醇的白蛋白工程化纳米粒制剂(americanpharmaceuticalpartners,schaumberg,il)、凡德他尼(vandetanib)(rinn,zd6474,astrazeneca)、苯丁酸氮芥(chloranmbucil)、ag1478、ag1571(su5271；sugen)、坦西莫司(temsirolimus)(wyeth)、帕唑帕尼(pazopanib)(glaxosmithkline)、canfosfamide(telik)、塞替派(thiotepa)和环磷酰胺(cyclosphosphamide)烷基磺酸酯，例如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶类，例如苯佐替哌(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、美妥替哌(meturedopa)和乌瑞替哌(uredopa)；乙撑亚胺(ethylenimine)类和甲基氨基吖啶(methylamelamine)类，包括六甲密胺(altretamine)、三亚胺嗪(triethylenemelamine)、三亚乙基磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三亚乙基硫化磷酰胺(triethylenethiophosphoramide)和三羟甲蜜胺(trimethylomelamine)；番荔枝内酯(acetogenin)类(尤其是布拉它辛(bullatacin)和布拉它辛酮(bullatacinone))；喜树碱(包括合成性类似物托泊替康(topotecan))；苔藓抑素(bryostatin)；callystatin；cc-1065(包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成性类似物)；cryptophycin类(特别是cryptophycin1和cryptophycin8)；多拉司他汀(dolastatin)；duocarmycin(包括合成性类似物kw-2189和cb1-tm1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；pancratistatin；sarcodictyin；spongistatin；氮芥类，例如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、氯磷酰胺(chlorophosphamide)、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、双氯乙基甲胺(mechlorethamine)、盐酸氧氮芥(mechlorethamineoxidehydrochloride)、美法仑(melphalan)、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)和乌拉莫司汀(uracilmustard)；硝基脲类，例如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫斯汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，例如烯二炔(enediyne)抗生素(例如刺孢霉素(calicheamicin)，包括刺孢霉素γ1i和刺孢霉素ωi1(angewchem.intl.ed.engl.(1994)33:183-186)；dynemicin，包括dynemicina；二膦酸盐，例如氯膦酸盐(clodronate)；埃斯培拉霉素(esperamicin)；及新抑癌蛋白生色团(neocarzinostatinchromophore)和相关色蛋白烯二炔抗生素生色团(relatedchromoproteinenediyneantibioticchromophore)、aclacinomysin类、放线菌素(actinomycin)、authramycin、偶氮丝氨酸(azaserine)、博来霉素(bleomycin)、放线菌素c(cactinomycin)、carabicin、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素(chromomycin)、放线菌素d(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮基-5-氧代-l-正亮氨酸、吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯啉子基-多柔比星、去氧多柔比星(deoxydoxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、奈莫柔比星(nemorubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素(mitomycin)类例如丝裂霉素c(mitomycinc)、麦考酚酸(mycophenolicacid)、诺拉霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(porfiromycin)、嘌罗霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑霉素(streptonigrin)、链佐星(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物，例如甲氨喋呤(methotrexate)和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)(5-fu)；叶酸类似物，例如二甲叶酸(denopterin)、甲氨喋呤、喋罗呤(pteropterin)和三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，例如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯嘌呤(6-mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)和硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物，例如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮杂尿苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、二脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、伊诺他滨(enocitabine)和氟尿苷(floxuridine)；雄激素类，例如卡普睾酮(calusterone)、丙酸甲雄烷酮(dromostanolonepropionate)、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)和睾内酯(testolactone)；抗肾上腺素药(anti-adrenal)，例如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)和曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，例如亚叶酸(frolinicacid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamideglycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinicacid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；伊达曲杀(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elfornithine；依利醋铵(elliptiniumacetate)；埃坡霉素(epothilone)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓(galliumnitrate)；羟基脲(羟基urea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidainine)；美登醇(maytansinoid)类，例如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；mopidanmol；根瘤菌剂(nitraerine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；鬼臼酸(podophyllinicacid)；2-乙基肼；丙卡巴肼(procarbazine)；多糖复合物(polysaccharidecomplex)(jhsnaturalproducts,eugene,or)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；锗螺胺(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonicacid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2’,2”-三氯三乙胺；单端孢霉烯(trichothecene)(尤其是t-2毒素、verracurina、杆孢菌素a(roridina)和anguidine)；乌拉坦(urethan)；长春地辛(vindesine)；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)(“ara-c”)；环磷酰胺；塞替派；6-硫代鸟嘌呤(6-thioguanine)；巯嘌呤(mercaptopurine)；甲氨喋呤；铂类似物，例如顺铂和卡铂；长春碱(vinblastine)；依托泊苷(etoposide)(vp-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌(mitoxantrone)；长春新碱(vincristine)；长春瑞滨(vinorelbine)诺消灵(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；伊达曲杀(edatrexate)；柔红霉素(daunomycin)；氨基喋呤(aminopterin)；卡培他滨(capecitabine)(roche)；伊班膦酸盐(ibandronate)；cpt-11；拓扑异构酶抑制剂rfs2000；二氟甲基鸟氨酸(difluoromethylornithine,dmfo)；类视黄醇(retinoid)类，例如视黄酸(retinoicacid)；及上述任何物质的药用盐、酸和衍生物。

以下物质也包括在“化学治疗剂”的定义中：(i)用于调节或抑制激素对肿瘤作用的抗激素药，例如抗雌激素药和选择性雌激素受体调节剂(serm)，包括例如他莫昔芬(包括枸橼酸他莫昔芬)、雷洛昔芬(raloxifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、雷洛西芬(keoxifene)、ly117018、奥那司酮(onapristone)和(枸橼酸托米芬(toremifinecitrate))和选择性雌激素受体调节剂(serd)例如氟维司群(fulvestrant)(astrazeneca)；(ii)抑制芳香酶(芳香酶在肾上腺中调节雌激素的产生)的芳香酶抑制剂，例如4(5)-咪唑类、氨鲁米特、(醋酸甲地孕酮(megestrolacetate))、(依西美坦(exemestane)；pfizer)、formestanie、法倔唑(fadrozole)、(伏氯唑(vorozole))、(来曲唑；novartis)和(阿那曲唑(anastrozole)；astrazeneca)；(iii)抗雄激素药，例如氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、亮丙瑞林(leuprolide)和戈舍瑞林(goserelin)；及曲沙他滨(troxacitabine)(1,3-二氧杂环戊烷核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白激酶抑制剂，例如mek抑制剂，例如考比替尼(cobimetinib)(wo2007/044515)；(v)脂质激酶抑制剂，例如taselisib(gdc-0032,genentechinc.)；(vi)反义寡核苷酸，特别是抑制异常细胞增殖所涉及的信号传导途径中基因表达的那些反义寡核苷酸，例如pkc-α、ralf和h-ras，例如奥利默森(oblimersen)(gentainc.)；(vii)核酶，例如vegf表达抑制剂(例如)和her2表达抑制剂；(viii)疫苗，例如基因疗法疫苗，例如和ril-2；拓扑异构酶1抑制剂，例如和rmrh；(ix)抗血管生成药，例如贝伐珠单抗(bevacizumab)(genentech)；及上述任何物质的药用盐、酸和衍生物。

治疗性抗体也包括在“化学治疗剂”的定义中，例如阿仑珠单抗(alemtuzumab)(campath)、贝伐珠单抗(bevacizumab)(genentech)、西妥昔单抗(cetuximab)(imclone)、帕木单抗(panitumumab)(amgen)、利妥昔单抗(rituximab)(genentech/biogenidec)、培妥珠单抗(pertuzumab)(perjeta^tm,2c4,genentech)、曲妥珠单抗(trastuzumab)(genentech)、曲妥珠单抗美坦新偶联物(trastuzumabemtansine)(genentechinc.)和托西莫单抗(tositumomab)(bexxar,corixia)。

“代谢物”为通过具体化合物或其盐的体内代谢而产生的产物。化合物的代谢物可使用本领域已知的常规技术来鉴定且它们的活性可使用本申请描述的测试来确定。上述产物可源于例如对所施用的化合物进行的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶法裂解等。因此，本申请包括本申请化合物的代谢物，包括通过以下方法而产生的化合物，所述方法包括使本申请式i、ii和iii化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的一段时间。

术语“包装说明书”是指通常包含在治疗性产品的市售包装中的说明书，其含有涉及使用上述治疗性产品的关于适应症、用法、剂量、施用、禁忌症和/或注意事项的信息。

术语“手性”是指具有镜像配对体不可重叠性的分子，而术语“非手性”是指可与其镜像配对体重叠的分子。

术语“立体异构体”是指具有相同的化学组成但原子或基团的空间排列不同的化合物。

“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心且其分子不互为镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质例如熔点、沸点、光谱性质和反应性。非对映异构体的混合物可通过高分辨率分析操作例如电泳和色谱来分离。

“对映异构体”是指化合物的互为不可重叠镜像的两种立体异构体。

本申请使用的立体化学定义和常识大体上符合s.p.parker,ed.,mcgraw-hilldictionaryofchemicalterms(1984)mcgraw-hillbookcompany,newyork；和eliel,e.andwilen,s.,“stereochemistryoforganiccompounds”,johnwiley&sons,inc.,newyork,1994。本申请化合物可含有不对称中心或手性中心且因此以不同的立体异构形式存在。本申请意在包括本申请化合物的所有立体异构形式，包括但不限于非对映异构体、对映异构体和阻转异构体及它们的混合物例如外消旋混合物，构成本申请一部分。多种有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有使平面偏振光的平面发生旋转的能力。当描述具有光学活性的化合物时，前缀d和l或r和s用于表示分子就其手性中心而言的绝对构型。前缀d和l或(+)和(-)用于指定化合物使平面偏振光发生旋转的符号，其中(-)或l表示化合物是左旋的。前缀为(+)或d的化合物是右旋的。对于所给定的化学结构，这些立体异构体除互为镜像外是相同的。具体的立体异构体也可称为对映异构体且上述异构体的混合物通常称为对映异构体的混合物。对映异构体的50:50混合物称为外消旋混合物或外消旋体，当化学反应或方法不具有立体选择性或立体特异性时，可出现所述外消旋混合物或外消旋体。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”是指两种对映异构物质的等摩尔混合物，其不具有光学活性。对映异构体可通过手性分离方法例如超临界流体色谱(sfc)从外消旋混合物中分离。所分离的对映异构体的手性中心处的构型指定可能是暂定的且出于说明目的而描绘于表1结构中，而立体化学是例如由x射线晶体学数据确定性建立的。

术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指具有不同能量的可通过低能垒互相转化的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子转移互变异构体)包括通过质子的迁移来进行的互相转化，例如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过一些成键电子的重组来进行的互相转化。

术语“药用盐”是指不是在生物学上或在其它方面不期望的盐。药用盐包括酸和碱加成盐。短语“药用”表示物质或组合物必须与制剂包含的其它成分和/或用其治疗的哺乳动物在化学和/或毒理学上是相容的。

术语“药用酸加成盐”是指与无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸及选自脂族、脂环族、芳族、芳基脂族、杂环羧酸和磺酸类有机酸的有机酸例如甲酸、乙酸、丙酸、羟基乙酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、枸橼酸、天冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、扑酸、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸和水杨酸形成的那些药用盐。

术语“药用碱加成盐”是指与有机或无机碱形成的药用盐。可接受的无机碱的实例包括钠盐、钾盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐和铝盐。衍生自药用有机无毒碱的盐包括以下物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺、包括天然存在的取代的胺在内的取代的胺、环状胺和碱性离子交换树脂例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、三甲胺、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、n-乙基哌啶和聚胺树脂。

“溶剂化物”是指一个或多个溶剂分子与本申请化合物的缔合物或络合物。形成溶剂化物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、dmso、乙酸乙酯(etoac)、乙酸(acoh)和乙醇胺。

术语“ec50”是半数最大有效浓度且表示获得最大体内特定效果的50％所需要的特定化合物的血浆浓度。

术语“ki”是抑制常数且表示特定抑制剂与受体的绝对结合亲和力。其使用竞争结合测定法测量且等于在不存在竞争性配体(例如放射性配体)的情况下特定抑制剂占据50％受体时的浓度。ki值可对数换算成pki值(-logki)，其中较高的值以指数方式表示较大的效力。

术语“ic50”是半数最大抑制浓度且表示获得体外生物学过程的50％抑制所需要的特定化合物的浓度。ic50值可对数换算成pic50值(-logic50)，其中较高的值以指数方式表示较大的效力。ic50值不是绝对值，而是取决于实验条件例如所使用的浓度且可使用cheng-prusoff方程(biochem.pharmacol.(1973)22:3099)换算成绝对抑制常数(ki)。可计算其它百分比抑制参数例如ic70、ic90等。

术语“本申请化合物”和“式i、ii和iii化合物”包括式i、ii和iii化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂化物、代谢物、药用盐和前药。

本申请给出的任何式或结构(包括式i、ii和iii化合物)还意在表示所述化合物的水合物、溶剂化物和多晶型物及它们的混合物。

本申请给出的任何式或结构(包括式i、ii和iii化合物)还意在表示所述化合物未经标记的形式及经同位素标记的形式。经同位素标记的化合物具有本申请给出的化学式所描述的结构，但是一个或多个原子被具有所选原子量或质量数的原子代替。可引入到本申请化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素例如但不限于²h(氘,d)、³h(氚)、¹¹c、¹³c、¹⁴c、¹⁵n、¹⁸f、³¹p、³²p、³⁵s、³⁶cl和¹²⁵i。本申请包括各种经同位素标记的本申请化合物例如其中引入有放射性同位素例如³h、¹³c和¹⁴c的那些本申请化合物。上述经同位素标记的化合物可用于代谢研究、反应动力学研究、检测或成像技术例如正电子发射断层扫描术(pet)或单光子发射计算机断层扫描术(spect)，包括药物或底物组织分布测定或对患者进行的放射性治疗。经氘标记或代替的本申请治疗性化合物可具有改善的dmpk(药物代谢和药物动力学)性质，包括吸收、分布、代谢和排泄(adme)。用较重的同位素例如氘进行的代替可由于较好的代谢稳定性而得到一些治疗优点(例如体内半衰期的增加或剂量需要的降低)。经¹⁸f标记的化合物可用于pet或spect研究。经同位素标记的本申请化合物及其前药通常可如下制备：实施下述方案或实施例和制备中公开的操作且用容易得到的经同位素标记的试剂代替未经同位素标记的试剂。另外，用较重的同位素特别是氘(即²h或d)进行的代替可由于较好的代谢稳定性而得到一些治疗优点(例如体内半衰期的增加或剂量需要的降低或治疗指数的改善)。应该理解的是，本申请中的氘被认为是式(i)化合物中的取代基。上述较重的同位素特别是氘的浓度可通过同位素富集因子来定义。在本申请化合物中，未特别指定为具体同位素的任何原子意在表示该原子的任何稳定的同位素。除非另有说明，当某个位置被具体指定为“h”或“氢”时，应该理解的是，所述位置具有浓度为氢的天然丰度同位素组成的氢。因此，在本申请化合物中，具体指定为氘(d)的任何原子意在表示氘。

雌激素受体

雌激素受体α(er-α；nr3a1)和雌激素受体β(er-β；nr3a2)是类固醇激素受体，其为大的核受体超家族的成员。核受体共享共同的模块结构，其最少包括dna结合域(dbd)和配体结合域(lbd)。类固醇激素受体是可溶性细胞内蛋白质，其作为由配体调节的转录因子。脊椎动物含有五种密切相关的类固醇激素受体(雌激素受体、雄激素受体、孕激素受体、糖皮质激素受体、盐皮质激素受体)，其调节广谱的生殖、代谢和发育活动。er的活性通过内源性雌激素(包括17β-雌二醇和雌酮)的结合来控制。

er-α基因位于6q25.1且编码595aa蛋白。er-β基因位于染色体14q23.3上且产生530aa蛋白质。然而，这些基因各自由于交替剪接和翻译起始位点而可产生多种同工型。除dna结合域(称为c结构域)和配体结合域(e结构域)外，这些受体还含有n-末端(a/b)结构域、连接c和e结构域的铰链(d)结构域及c-末端延伸(f结构域)(gronemeyerandlaudet；proteinprofile2:1173-1308,1995)。虽然er-α和er-β的c和e结构域是相当保守的(分别为95％和55％氨基酸同一性)，但是a/b、d和f结构域的保守性是差的(低于30％氨基酸同一性)。两种受体都参与雌性生殖道的调节和发育，但是在中枢神经系统、心血管系统和骨代谢中也发挥多种作用。

类固醇激素受体的配体结合口袋深深地埋在配体结合域中。配体在结合后成为该结构域的疏水性核心的一部分。因此，大多数类固醇激素受体在不存在激素的情况下是不稳定的且需要来自伴侣蛋白例如hsp90的辅助以维持激素结合能力。与hsp90的相互作用也控制这些受体的核易位。配体结合使受体得以稳定且启动序列构象变化，从而释放伴侣蛋白，改变各种受体结构域之间的相互作用且重塑蛋白质相互作用表面，由此允许这些受体易位至细胞核中，结合dna且参与染色质重塑复合物与转录器的相互作用。虽然er可与hsp90相互作用，但是该相互作用不是激素结合所必需的且取决于细胞环境，apo-er既可以是细胞质的，也可以是细胞核的。生物物理研究表明dna结合而不是配体结合有助于受体的稳定性(greenfield等人,biochemistry40:6646-6652,2001)。

er可通过结合称为雌激素响应元件(ere)的特异性dna序列基序(经典途径)直接与dna相互作用或经由蛋白质-蛋白质相互作用(非经典途径)间接与dna相互作用(welboren等人,endocrine-relatedcancer16:1073-1089,2009)。在非经典途径中，已证实er与包括sp-1、ap-1和nf-κb在内的其它转录因子相连。这些相互作用似乎在er调节细胞增殖和分化的能力中发挥关键作用。

两类erdna相互作用都可导致依赖于由相应的er-ere复合物募集的转录辅助调节因子的基因激活或抑制(klinge,steroid65:227-251,2000)。辅助调节因子的募集主要由两种蛋白质相互作用表面即af2和af1介导。af2位于ere结构域中且其构象直接由配体调节(brzozowski等人(1997)nature389:753-758)。完全激动剂似乎促进辅助激活因子的募集，而弱激动剂和拮抗剂则有助于辅助抑制因子的结合。对用af1调节蛋白质了解较少，但是可通过丝氨酸磷酸化来控制(ward和weigel,(2009)biofactors35:528-536)。所涉及的磷酸化位点之一(s118)似乎在拮抗剂例如在乳腺癌的治疗中发挥重要作用的他莫昔芬存在下控制er的转录活性。虽然完全激动剂似乎阻止呈某种构象的er，但是弱激动剂倾向于使er维持在不同构象之间的平衡中，这允许辅助调节因子所有组分的细胞依赖性差异以细胞依赖性方式调节er的活性(tamrazi等人,mol.endocrinol.17:2593-2602,2003)。er与dna的相互作用是动态的且包括但不限于通过蛋白酶体来降解er(reid等人,molcell11:695-707,2003)。用配体降解er为对可用的抗激素治疗具有雌激素敏感性和/或抗性的疾病或病症提供有吸引力的治疗策略。er信号传导就女性生殖器官(包括乳房)的发育和维持、排卵和子宫内膜的增厚而言是至关重要的。er信号传导还在骨量、脂质代谢、癌症等中发挥作用。约70％的乳腺癌表达er-α(er-α阳性)且依赖于雌激素用于生长和存活。据信其它癌症例如卵巢癌和子宫内膜癌也依赖于er-α信号传导用于生长和存活。er-α拮抗剂他莫昔芬已用于治疗绝经前和绝经后妇女的早期和晚期er-α阳性乳腺癌。氟维司群(astrazeneca)即一种基于类固醇的er拮抗剂用于治疗虽然用他莫昔芬进行治疗但仍已进展的妇女的乳腺癌(howella.(2006)endocrrelatcancer,13:689-706；us6774122；us7456160；us8329680；us8466139)。类固醇和非类固醇芳香酶抑制剂也用于治疗人类的癌症。在一些实施方案中，类固醇和非类固醇芳香酶抑制剂在绝经后妇女中阻断由雄烯二酮和睾酮产生雌激素，从而阻断癌症中的er依赖性生长。除这些抗激素剂外，在一些情况下用多种其它化疗剂例如蒽环类、铂类、紫杉烷类治疗进行性er阳性乳腺癌。在一些情况下用单克隆抗体曲妥珠单抗(genentechinc.)或小分子pan-erb-b抑制剂拉帕替尼(glaxosmithklinecorp.)治疗携带erb-b/her2酪氨酸激酶受体的基因扩增的er阳性乳腺癌。虽然具有一系列抗激素、化学治疗和小分子及基于抗体的靶向疗法，但是许多患有er-α阳性乳腺癌的妇女发展出进展性转移性疾病且需要新的疗法。重要地，在现有抗激素及其它疗法后进展的大多数er阳性肿瘤被认为仍然依赖于er-α用于生长和存活。因此，需要在转移性疾病和获得性耐药的情况下具有活性的新型er-α靶向剂。在一个方面，本申请描述了作为选择性雌激素受体调节剂(serm)的化合物。在具体实施方案中，本申请所述serm为选择性雌激素受体降解剂(serd)。在一些实施方案中，本申请所述化合物在基于细胞的测定中导致稳态er-α水平的降低(即er降解)且可用于治疗雌激素敏感性疾病或病症和/或已对抗激素疗法发展出抗性的疾病或病症。

大多数乳腺癌患者用阻断雌激素合成的药物(例如芳香酶抑制剂；ai)或经由竞争性er结合来拮抗雌二醇作用的药物(例如他莫昔芬)治疗(puhallas等人,moloncol2012；6(2):222-236)。虽然这些药物在疾病的多个阶段具有充分记录的治疗效用，但是许多er+乳腺癌复发且患者最终死亡。最近，下一代全基因组和靶向测序已在高达20％的来自在内分泌疗法(主要是芳香酶抑制剂)后进展的晚期乳腺癌患者的肿瘤中鉴定了esr1(雌激素受体α基因)突变(lis等人,cellrep(2013),4(6):1116-1130；merenbakh-lamink等人,cancerres(2013),73(23):6856-6864；robinsondr等人,natgenet(2013),45(12):1446-1451；toyw等人,natgenet(2013),45(12):1439-1445；jeselsohnr等人,clincancerres(2014),20:1757-1767)。这些配体结合域(lbd)突变使apo-受体具有高基础活性，这使它们不依赖于配体且由此在低雌二醇的情况下就具有活性。需要以下靶向er信号传导的疗法，其对ai或他莫昔芬治疗后的进行性疾病(包括携带esr1突变肿瘤的患者亚组)具有强效活性。

在一些实施方案中，本申请公开的式i、ii和iii化合物用于对以在esr1基因中具有突变为特征的患者的激素抗性-雌激素受体(er)阳性乳腺癌进行治疗的方法，所述方法包括施用治疗有效量的式i、ii或iii化合物。在一些实施方案中，esr1基因突变导致在选自以下的位置具有氨基酸取代的er多肽：seqidno:2的6、118、269、311、341、350、380、392、394、433、463、503、534、535、536、537、538和555位氨基酸。在一些实施方案中，突变导致具有选自以下的氨基酸取代的er多肽：h6y、s118p、r269c、t311m、s341l、a350e、e380q、v392i、r394h、s433p、s463p、r503w、v534e、p535h、l536r、l536p、l536q、y537n、y537c、y537s、d538g和r555c。在一些实施方案中，患者在esr1基因中具有两个或更多个突变。

鉴于er-α在乳腺癌的发生和进展中的核心作用，本申请公开的化合物可单独或与其它药物组合用于治疗乳腺癌，所述其它药物可调节乳腺癌中的其它关键途径，包括但不限于靶向igf1r、egfr、cdk4/6、erb-b2和3、pi3k/akt/mtor轴、hsp90、parp或组蛋白脱乙酰酶的那些其它药物。

鉴于er-α在乳腺癌的发生和进展中的核心作用，本申请公开的式i、ii和iii化合物可单独或与其它药物组合用于治疗乳腺癌，所述其它药物包括但不限于芳香酶抑制剂、蒽环类、铂类、氮芥烷化剂、紫杉烷类。用于治疗乳腺癌的示例性药物包括但不限于pi3k抑制剂例如taselisib(gdc-0032,genentechinc.)、brilanestrant(gdc-0810,genentechinc.)、紫杉醇、阿那曲唑、依西美坦、环磷酰胺、表柔比星、氟维司群、来曲唑(novartis,corp.)、吉西他滨、曲妥珠单抗、培非格司亭(pegfilgrastim)、非格司亭(filgrastim)、他莫昔芬、多西紫杉醇、托瑞米芬、长春瑞滨、卡培他滨(roche)、伊沙匹隆及本申请所述其它药物。

er相关疾病或病症包括与癌症(骨癌、乳腺癌、肺癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、前列腺癌、卵巢癌和子宫癌)相关的er-α功能障碍、中枢神经系统(cns)缺陷(酒精中毒、偏头痛)、心血管系统缺陷(主动脉瘤、心肌梗塞易感性、主动脉瓣硬化、心血管疾病、冠状动脉疾病、高血压)、血液系统缺陷(深静脉血栓形成)、免疫和炎症疾病(格雷夫斯病、关节炎、多发性硬化、肝硬化)、感染易感性(乙型肝炎、慢性肝病)、代谢缺陷(骨密度、胆汁郁积、尿道下裂、肥胖、骨关节炎、骨质减少、骨质疏松)、神经缺陷(阿尔茨海默病、帕金森病、偏头痛、眩晕)、精神缺陷(神经性厌食、注意力缺陷多动障碍(adhd)、痴呆、重度抑郁症、精神病)和生殖缺陷(初潮年龄、子宫内膜异位、不育症)。

在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于治疗哺乳动物的雌激素受体依赖性或由雌激素受体介导的疾病或病症。

在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于治疗哺乳动物的癌症。在一些实施方案中，癌症为乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌或子宫癌。在一些实施方案中，癌症为乳腺癌、肺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌或子宫癌。在一些实施方案中，癌症为乳腺癌。在一些实施方案中，癌症为激素依赖性癌症。在一些实施方案中，癌症为雌激素受体依赖性癌症。在一些实施方案中，癌症为雌激素敏感性癌症。在一些实施方案中，癌症对抗激素治疗具有抗性。在一些实施方案中，癌症为对抗激素治疗具有抗性的雌激素敏感性癌症或雌激素受体依赖性癌症。在一些实施方案中，癌症为对抗激素治疗具有抗性的激素敏感性癌症或激素受体依赖性癌症。在一些实施方案中，抗激素治疗包括用至少一种选自以下的药物进行的治疗：他莫昔芬、氟维司群、类固醇芳香酶抑制剂和非类固醇芳香酶抑制剂。

在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于在抗雌激素疗法后具有疾病进展的绝经后妇女中治疗激素受体阳性转移性乳腺癌。

在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于在哺乳动物中治疗乳腺或生殖道的激素依赖性良性或恶性疾病。在一些实施方案中，良性或恶性疾病为乳腺癌。

在一些实施方案中，用于本申请所述任意一种方法的化合物为雌激素受体降解剂；为雌激素受体拮抗剂；具有最小或可忽略的雌激素受体激动剂活性；或其组合。

在一些实施方案中，用本申请所述化合物进行治疗的方法包括以下治疗方案，其包括向哺乳动物施用放射疗法。

在一些实施方案中，用本申请所述化合物进行治疗的方法包括在手术前或在手术后施用所述化合物。

在一些实施方案中，用本申请所述化合物进行治疗的方法包括向哺乳动物施用至少一种额外抗癌剂。

在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于在哺乳动物中治疗癌症，其中所述哺乳动物未经受化学疗法。

在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于在哺乳动物中治疗癌症。在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于在哺乳动物中治疗癌症，其中所述哺乳动物正在用至少一种抗癌剂针对癌症进行治疗。在一个实施方案中，癌症为激素难治性癌症。

在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于在哺乳动物中治疗或预防子宫疾病或病症。在一些实施方案中，子宫疾病或病症为平滑肌瘤、子宫平滑肌瘤、子宫内膜增生或子宫内膜异位。在一些实施方案中，子宫疾病或病症为子宫癌性疾病或病症。在一些其它实施方案中，子宫疾病或病症为子宫非癌性疾病或病症。

在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于在哺乳动物中治疗子宫内膜异位。

在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于在哺乳动物中治疗平滑肌瘤。在一些实施方案中，平滑肌瘤为子宫平滑肌瘤、食管平滑肌瘤、皮肤平滑肌瘤或小肠平滑肌瘤。在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于在哺乳动物中治疗纤维瘤。在一些实施方案中，本申请公开的化合物用于在哺乳动物中治疗子宫纤维瘤。

杂芳基化合物

本申请提供式i、ii和iii杂芳基化合物，包括其亚式化合物及药物制剂，所述化合物可潜在用于治疗由雌激素受体α(erα)调节的疾病、病症和/或障碍。

式i、ii和iii化合物具有以下结构：

及其立体异构体、互变异构体或药用盐，其中

a、b、c和d独立选自cr⁶和n；

y¹为cr^b或n；

y²为-(ch2)-、-(ch2ch2)-或nr^a；

y³为nr^a或c(r^b)2；

其中y¹、y²和y³中的一个为n或nr^a；

r^a选自h、c1-c6烷基、c2-c8烯基、炔丙基、c3-c6环烷基和c3-c6杂环基，其任选取代有一个或多个独立选自以下的基团：f、cl、br、i、cn、oh、och3和so2ch3；

r^b独立选自h、-o(c1-c3烷基)、c1-c6烷基、c2-c8烯基、炔丙基、-(c1-c6烷二基)-(c3-c6环烷基)、c3-c6环烷基和c3-c6杂环基，其任选取代有一个或多个独立选自以下的基团：f、cl、br、i、cn、-ch2f、-chf2、-cf3、-ch2cf3、-ch2chf2、-ch2ch2f、oh、och3和so2ch3；

r^c选自h、c1-c6烷基、烯丙基、炔丙基，其任选取代有一个或多个独立选自以下的基团：f、cl、br、i、cn、oh、och3和so2ch3；

cy选自c6-c20芳二基、c3-c12碳环二基、c2-c20杂环二基和c1-c20杂芳二基；

z¹选自cr^a和n；

z²选自o、s和nr^a；

z³选自o、s、nr^a、c1-c6烷二基、c1-c6氟烷二基、o-(c1-c6烷二基)、o-(c1-c6氟烷二基)、c(o)和键；

r¹、r²、r³、r⁴、r⁸和r⁹独立选自h、f、cl、br、i、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch(ch3)2、-ch2oh、-ch2och3、-ch2ch2oh、-c(ch3)2oh、-ch(oh)ch(ch3)2、-c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2so2ch3、-ch2op(o)(oh)2、-ch2f、-chf2、-ch2nh2、-ch2nhso2ch3、-ch2nhch3、-ch2n(ch3)2、-cf3、-ch2cf3、-ch2chf2、-ch(ch3)cn、-c(ch3)2cn、-ch2cn、-co2h、-coch3、-co2ch3、-co2c(ch3)3、-coch(oh)ch3、-conh2、-conhch3、-conhch2ch3、-conhch(ch3)2、-con(ch3)2、-c(ch3)2conh2、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-nhcoch3、-n(ch3)coch3、-nhs(o)2ch3、-n(ch3)c(ch3)2conh2、-n(ch3)ch2ch2s(o)2ch3、-no2、＝o、-oh、-och3、-och2ch3、-och2ch2och3、-och2ch2oh、-och2ch2n(ch3)2、-op(o)(oh)2、-s(o)2n(ch3)2、-sch3、-s(o)2ch3、-s(o)3h、环丙基、环丙基酰胺、环丁基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、1-甲基氮杂环丁-3-基)氧基、n-甲基-n-氧杂环丁-3-基氨基、氮杂环丁-1-基甲基、苄基氧基苯基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-1-基-甲酮、哌嗪-1-基、吗啉代甲基、吗啉代-甲酮和吗啉代；或r³和r⁸形成4、5、6或7元碳环或杂环；

r⁵选自h、c1-c9烷基、c3-c9环烷基、c3-c9杂环、c6-c9芳基、c6-c9杂芳基、-(c1-c6烷二基)-(c3-c9环烷基)、-(c1-c6烷二基)-(c3-c9杂环)、c(o)r^b、c(o)nr^a、so2r^a和so2nr^a，其任选取代有以下基团中的一个或多个：卤素、cn、or^a、n(r^a)2、c1-c9烷基、c3-c9环烷基、c3-c9杂环、c6-c9芳基、c6-c9杂芳基、c(o)r^b、c(o)nr^a、so2r^a和so2nr^a；或r³和r⁵形成4、5、6或7元杂环；或cy和r⁵形成4、5、6或7元杂环；

r⁶选自h、f、cl、br、i、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch(ch3)2、-ch2oh、-ch2och3、-ch2ch2oh、-c(ch3)2oh、-ch(oh)ch(ch3)2、-c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2so2ch3、-ch2op(o)(oh)2、-ch2f、-chf2、-ch2nh2、-ch2nhso2ch3、-ch2nhch3、-ch2n(ch3)2、-cf3、-ch2cf3、-ch2chf2、-ch2ch2f、-ch(ch3)cn、-c(ch3)2cn、-ch2cn、-co2h、-coch3、-co2ch3、-co2c(ch3)3、-coch(oh)ch3、-conh2、-conhch3、-conhch2ch3、-conhch(ch3)2、-con(ch3)2、-c(ch3)2conh2、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-nhcoch3、-n(ch3)coch3、-nhs(o)2ch3、-n(ch3)c(ch3)2conh2、-n(ch3)ch2ch2s(o)2ch3、-no2、＝o、-oh、-och3、-och2ch3、-och2ch2och3、-och2ch2oh、-och2ch2n(ch3)2、-op(o)(oh)2、-s(o)2n(ch3)2、-sch3、-s(o)2ch3、-s(o)3h、环丙基、环丙基酰胺、环丁基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、1-甲基氮杂环丁-3-基)氧基、n-甲基-n-氧杂环丁-3-基氨基、氮杂环丁-1-基甲基、苄基氧基苯基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-1-基-甲酮、哌嗪-1-基、吗啉代甲基、吗啉代-甲酮和吗啉代；

r⁷选自h、c1-c6烷基、c2-c8烯基和炔丙基；或r⁷和cy形成螺、4、5、6或7元碳环或杂环；且

n选自1和2；

其中烷二基、氟烷二基、芳二基、碳环二基、杂环二基和杂芳二基任选取代有独立选自以下的一个或多个基团：f、cl、br、i、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch(ch3)2、-ch2oh、-ch2och3、-ch2ch2oh、-c(ch3)2oh、-ch(oh)ch(ch3)2、-c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2so2ch3、-ch2op(o)(oh)2、-ch2f、-chf2、-cf3、-ch2cf3、-ch2chf2、-ch2ch2f、-ch(ch3)cn、-c(ch3)2cn、-ch2cn、-ch2nh2、-ch2nhso2ch3、-ch2nhch3、-ch2n(ch3)2、-co2h、-coch3、-co2ch3、-co2c(ch3)3、-coch(oh)ch3、-conh2、-conhch3、-con(ch3)2、-c(ch3)2conh2、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-nhcoch3、-n(ch3)coch3、-nhs(o)2ch3、-n(ch3)c(ch3)2conh2、-n(ch3)ch2ch2s(o)2ch3、-no2、＝o、-oh、-och3、-och2ch3、-och2ch2och3、-och2ch2oh、-och2ch2n(ch3)2、-op(o)(oh)2、-s(o)2n(ch3)2、-sch3、-s(o)2ch3、-s(o)3h、环丙基、环丙基酰胺、环丁基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、1-甲基氮杂环丁-3-基)氧基、n-甲基-n-氧杂环丁-3-基氨基、氮杂环丁-1-基甲基、苄基氧基苯基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-1-基-甲酮、哌嗪-1-基、吗啉代甲基、吗啉代-甲酮和吗啉代；

条件是对于式i化合物，当n为1；a、b、c和d各自为cr⁶；且z²为n时，r⁷不为h。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案包括其中a、b、c和d各自为cr⁶。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案包括其中a、b、c和d中的一个或两个为n。

式i化合物的示例性实施方案包括其中z²为o。

式i化合物的示例性实施方案包括其中z²为s。

式i化合物的示例性实施方案包括其中z²为nr^a。

式ii化合物的示例性实施方案包括其中z¹为cr^a。

式ii化合物的示例性实施方案包括其中z¹为n。

式ii化合物的示例性实施方案包括其中z²为o。

式iii化合物的示例性实施方案包括其中z²为s。

式iii化合物的示例性实施方案包括其中z²为nr^a。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案包括其中cy为苯二基，其取代有一个或多个f。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案包括其中z³为o或nr^a。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案包括其中z³为nh。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案包括其中z³为o-(c1-c6烷二基)，y¹为n，y²为-(ch2)-且y³为c(r^b)2。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案包括其中y³为ch(ch2f)。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案包括其中y¹为cr^b，y²为-(ch2)-且y³为nr^a。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案包括其中y³为nch2ch2ch2f。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案包括其中r⁵为c1-c9烷基，其取代有一个或多个f。

式i、ii和iii化合物的示例性实施方案选自表1。

生物学评价

式i、ii和iii化合物作为酶活性(或其它生物活性)抑制剂的相对效力可如下确定：确定每种化合物将活性抑制至预定程度的浓度，然后比较结果。通常，优选的确定是在生化测定中抑制50％活性的浓度即50％抑制浓度或“ic50”。可使用本领域已知的常规技术确定ic50值。通常，ic50可通过在所研究的一系列浓度的抑制剂存在下测量给定酶的活性来确定。然后将实验获得的酶活性值相对于所使用的抑制剂浓度作图。显示50％酶活性(与不存在任何抑制剂的情况下的活性相比)的抑制剂浓度作为ic50值。类似地，可通过适当的活性确定来定义其它抑制浓度。例如，在一些情况下可需要确定90％抑制浓度即ic90等。

式i、ii和iii化合物的细胞增殖、细胞毒性和细胞存活力可通过发光细胞存活力测定(promegacorp.)进行测量。发光细胞存活力测定是一种基于对存在的atp即代谢活性细胞的指示物进行定量来确定培养物中存活细胞数目的均相方法。测定被设计成用多孔板进行，这使其对于自动化高通量筛选(hts)、细胞增殖和细胞毒性测定来说是理想的。均相测定操作涉及将单一试剂(试剂)直接添加至在补充有血清的培养基中培养的细胞。不需要细胞洗涤、培养基去除或多个移液步骤。添加试剂且混合后，系统在384孔板中以少至每孔15个细胞的程度检测10分钟。

制备表1a和1b中的所有示例性式i、ii和iii化合物且通过其中检测母体离子的lcms[m+h]⁺(液相色谱质谱)进行表征。根据实施例901-907的测定、方案和操作对表1a和1b中的所有示例性式i、ii和iii化合物与erα(雌激素受体α)的结合和生物活性进行测试。表1a和1b中的er-αmcf7hcssinf(％)值通过实施例901的乳腺癌细胞erα高含量荧光成像降解测定来测量。表1a和1b中的er-αmcf7hcsec50(μm)值通过实施例902和903所述体外细胞增殖测定来测量。实施例906和907的大鼠子宫湿重测定允许快速确定化合物拮抗剂在er响应性组织(未成熟大鼠子宫)中的活性同时竞争天然er配体雌二醇即拮抗剂模式(ashby,j.等人(1997)regulatorytoxicologyandpharmacology:rtp,25(3):226-31)。表1a和1b中的示例性式i、ii和iii化合物具有以下结构、相应名称(chembiodraw,12.0.2版,cambridgesoftcorp.,cambridgema)和生物活性。当多于一个名称与式i、ii和iii化合物或中间体相关时，应以化学结构定义化合物。

表1a

表1b

施用式i、ii和iii化合物

本申请化合物可通过适于待治疗的病状的任何途径来施用。合适的途径包括口服、胃肠外(包括皮下、肌内、静脉内、动脉内、皮内、鞘内和硬膜外)、经皮、直肠、经鼻、局部(包括含服和舌下)、阴道、腹膜内、肺内和鼻内。对于局部免疫抑制治疗，所述化合物可通过病灶内施用(包括灌注或在移植前使移植物与抑制剂接触)来施用。应该理解的是，优选的途径可随例如接受者的情况而变化。当所述化合物口服施用时，可将其与药用载体或赋形剂一起配制成丸剂、胶囊剂、片剂等。当所述化合物胃肠外施用时，可如下所述将其与药用胃肠外媒介物一起配制且配制成单位剂量注射形式。

治疗人类患者的剂量可为约10mg至约1000mg式i、ii或iii化合物。典型的剂量可为约100mg至约300mg所述化合物。剂量可每日施用一次(qid)、每日施用两次(bid)或更频繁地施用，这取决于具体化合物的药物动力学性质和药效学性质，包括吸收、分布、代谢和排泄。另外，毒性因素可影响剂量和施用方案。当口服施用时，丸剂、胶囊剂或片剂可每日或以更低的频率服用所指定的一段时间。方案可重复多个治疗周期。

使用式i、ii和iii化合物的治疗方法

本申请式i、ii和iii化合物可用于治疗患有由于与usp7(例如免疫障碍、心血管疾病、病毒感染、炎症、代谢/内分泌障碍或神经障碍)相关的异常细胞生长、功能或行为而引起的疾病或病症例如癌症的人类或动物患者，因此可通过包括对其施用如上定义的本申请化合物的方法来治疗。患有癌症的人类或动物患者也可通过包括对其施用如上定义的本申请化合物的方法来治疗。所述患者的状况可因此得以改善或缓解。

本申请方法还包括治疗癌症，所述癌症选自乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、非小细胞肺癌(nsclc)、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡癌、未分化癌、乳头状癌、精原细胞瘤、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、胰腺癌、骨髓样病症、淋巴瘤、毛细胞癌、口腔癌、鼻咽癌、咽癌、唇癌、舌癌、口癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑癌和中枢神经系统癌症、霍奇金癌、白血病、支气管癌、甲状腺癌、肝癌和肝内胆管癌、肝细胞癌、胃癌、胶质瘤/成胶质细胞瘤、子宫内膜癌、黑色素瘤、肾癌和肾盂癌、膀胱癌、子宫体癌、子宫颈癌、多发性骨髓瘤、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病(cll)、骨髓性白血病，口腔癌和咽癌、非霍奇金淋巴瘤、黑色素瘤和绒毛结肠腺瘤。

药物制剂

为了使用本申请化合物以对哺乳动物(包括人类)进行治疗性处置，通常根据标准药学实践将其配制为药物组合物。本申请该方面提供药物组合物，其包含本申请化合物及药用稀释剂或载体。

典型的制剂通过将本申请化合物与载体、稀释剂或赋形剂混合来制备。合适的载体、稀释剂、添加剂和赋形剂是本领域技术人员已知的且包括例如碳水化合物、蜡、水溶性和/或溶胀性聚合物、亲水性或疏水性物质、明胶、油、溶剂、水等物质。所使用的具体载体、稀释剂或赋形剂将取决于施用本申请化合物的手段和目的。溶剂通常基于本领域技术人员认为就施用哺乳动物而言是安全的溶剂(gras)来选择。通常，安全的溶剂是无毒水性溶剂例如水及其它在水中可溶或可混的无毒溶剂。合适的水性溶剂包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如peg400、peg300)及其混合物。制剂还可包含一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、湿润剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、矫味剂及其它已知添加剂以使药物(即本申请化合物或其药物组合物)具有优质外观或有助于制造药物产品(即药品)。

制剂可使用常规溶解和混合操作来制备。例如，将散装药物物质(即本申请化合物或所述化合物的稳定化形式(例如与环糊精衍生物或其它已知复合剂的复合物))在一种或多种上述赋形剂存在下溶解在合适的溶剂中。将本申请化合物通常配制成药物剂型以提供可容易控制的药物剂量且使患者能够依从所开具的方案。

用于施用的药物组合物(或制剂)可取决于施用药物的方法而以多种方式包装。通常，用于分配的制品包括其中存放有呈合适形式的药物制剂的容器。合适的容器是本领域技术人员已知的且包括例如瓶(塑料和玻璃)、小袋、安瓿、塑料袋、金属筒等材料。容器还可包括防撬装置以阻止不慎取得包装内含物。另外，在容器上具有描述容器内含物的标签。标签还可包括合适的警告信息。

可制备本申请化合物的药物制剂用于各种施用途径和类型。例如，具有所需纯度的式i、ii和iii化合物可任选与药用稀释剂、载体、赋形剂或稳定剂混合成冻干制剂、研磨粉末或水溶液形式(remington’spharmaceuticalsciences(1980)第16版,osol,a.ed.)。配制可如下进行：在环境温度在合适的ph以合适的纯度与生理学上可接受的载体即在所使用的剂量和浓度对接受者是无毒的载体混合。制剂的ph主要取决于具体用途和化合物浓度，但是可为约3至约8。在ph为5的乙酸盐缓冲液中的制剂是合适的实施方案。

所述化合物通常可按固体组合物、冻干制剂或水溶液形式贮存。

本申请药物组合物将以与良好医学实践一致的方式(即施用量、浓度、时间安排、疗程、媒介物和途径)来配制、确定剂量和施用。在该背景下需要考虑的因素包括所治疗的具体病症、所治疗的具体哺乳动物、个体患者的临床情况、病症的原因、递送药物的部位、施用的方法、施用的时间安排和医学实践者已知的其它因素。待施用的化合物的“治疗有效量”将取决于所考虑的上述因素且是改善或治疗过度增殖性病症所需要的最小量。

作为一般性建议，每剂胃肠外施用的初始药物有效量的抑制剂将为每日约0.01-100mg/kg即约0.1-20mg/kg患者体重，所使用的化合物的典型初始范围为0.3至15mg/kg/日。

可接受的稀释剂、载体、赋形剂和稳定剂在所使用的剂量和浓度对接受者是无毒的且包括缓冲剂，例如磷酸盐、枸橼酸盐和其它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和蛋氨酸；防腐剂(例如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯化六甲双铵；苯扎氯铵、苄索氯胺；苯酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇和间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，例如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，例如聚乙烯基吡咯烷酮；氨基酸，例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，例如edta；糖，例如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；成盐抗衡离子，例如钠；金属络合物(例如zn-蛋白质络合物)；和/或非离子型表面活性剂，例如tween^tm、pluronics^tm或聚乙二醇(peg)。活性药物成分也可包埋在通过例如凝聚技术或界面聚合来制备的微囊中，例如分别为羟基甲基纤维素或明胶微囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微囊，在胶体药物递送系统(例如脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米粒和纳米囊)或巨乳液中。上述技术参见remington’spharmaceuticalsciences,第16版,osol,a.编辑(1980)。

可制备式i、ii和iii化合物的持续释放制剂。持续释放制剂的合适实例包括含有式i、ii和iii化合物的固体疏水性聚合物的半渗透性基质，所述基质呈成形物品例如膜或微囊形式。持续释放基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如聚(甲基丙烯酸2-羟基乙基酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯(us3773919)、l-谷氨酸和γ-乙基-l-谷氨酸的共聚物、非降解性乙烯-乙酸乙烯酯、降解性乳酸-羟乙酸共聚物例如luprondepot^tm(由乳酸-羟乙酸共聚物和乙酸亮丙瑞林构成的注射用微球)和聚d-(-)-3-羟基丁酸。

制剂包括适于本申请所述施用途径的那些制剂。制剂可适宜地以单位剂量形式来提供且可通过药学领域已知的任何方法来制备。技术和制剂通常参见remington’spharmaceuticalsciences(mackpublishingco.,easton,pa)。上述方法包括使活性成分与作为一种或多种辅助成分的载体结合的步骤。通常，制剂如下制备：使活性成分与液体载体或微细分散的固体载体或这两者均匀和紧密的结合，然后按需对产品进行成型。

可将适于口服施用的式i、ii和iii化合物的制剂制备为离散的单位例如各自含有预定量的式i、ii和iii化合物的丸剂、胶囊剂、扁囊剂或片剂。压制片可如下制备：在合适的机器中对呈自由流动形式例如粉末或颗粒且任选混合有粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂的活性成分进行压制。模制片可如下制备：在合适的机器中对用惰性液体稀释剂润湿的粉末状活性成分的混合物进行模制。可任选对片剂进行包衣或刻痕并任选进行配制以使活性成分从其中缓慢或受控释放。可制备片剂、含片剂、糖锭剂、水性或油性混悬剂、可分散粉末剂或颗粒剂、乳剂、硬或软胶囊剂例如明胶胶囊剂、糖浆剂或酏剂以供口服。意在口服的式i、ii和iii化合物的制剂可根据制备药物组合物的领域已知的任何方法来制备且上述组合物可含有一种或多种包括甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂在内的物质以提供适口的制剂。含有与适于制备片剂的无毒的生理学上可接受的赋形剂混合的活性成分的片剂是可接受的。这些赋形剂可为例如惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可为未包衣的或可通过包括微囊化在内的已知技术来包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收且由此在较长的时段内提供持续的作用。例如，可使用时间延迟物质例如单独或与蜡组合的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。

对于治疗眼部或其它外部组织例如口和皮肤，制剂可优选以局部用软膏剂或乳膏剂形式来施用，其含有的活性成分的量为例如0.075至20％w/w。当配制成软膏剂时，活性成分可与石蜡性或水混溶性软膏基质一起使用。可选择地，活性成分可与水包油型乳膏基质一起配制成乳膏剂。若需要，则乳膏基质的水相可包含多元醇即具有两个或更多个羟基的醇例如丙二醇、丁-1,3-二醇、甘露醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇(包括peg400)及其混合物。局部用制剂可按需包含使活性成分通过皮肤或其它作用区域的吸收或渗透得以增强的化合物。上述皮肤渗透增强剂的实例包括二甲基亚砜和相关类似物。本申请乳剂的油相可由已知成分以已知方式构成。当所述相可仅包含乳化剂时，其按需包含至少一种乳化剂与脂肪或油或与脂肪和油两者的混合物。优选地，与亲脂性乳化剂一起包含的亲水性乳化剂作为稳定剂。还优选的是包含油和脂肪两者。同时，含有或不含有稳定剂的乳化剂构成所谓的乳化蜡且所述蜡与油和脂肪一起构成所谓的乳化乳膏基质，其形成乳膏剂的油性分散相。适用于本申请制剂的乳化剂和乳化稳定剂包括60、80、鲸蜡硬脂醇、苄醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油酯和月桂基硫酸钠。

式i、ii和iii化合物的水性混悬剂含有活性物质与适于制备水性混悬剂的赋形剂的混合物。上述赋形剂包括助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素、聚维酮、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯基吡咯烷酮、西黄蓍胶和阿拉伯胶；及分散剂或润湿剂，例如天然存在的磷脂(例如卵磷脂)、氧化烯与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物(例如十七亚乙氧基鲸蜡醇)、环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(例如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯)。水性混悬剂还可含有一种或多种防腐剂例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂例如蔗糖或糖精。

式i、ii和iii化合物的药物组合物可呈无菌注射剂例如无菌注射用水性或油性混悬剂形式。该混悬剂可使用上述那些合适的分散剂或润湿剂和助悬剂根据本领域已知方法来配制。无菌注射剂还可为在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射用溶液剂或混悬剂例如在1,3-丁二醇中的溶液剂或被制备为冻干粉末剂。可使用的可接受的媒介物和溶剂包括水、林格溶液和等张氯化钠溶液。另外，无菌不挥发性油通常可用作溶剂或混悬介质。出于该目的，可使用任何温和不挥发性油，包括合成性甘油一酯或甘油二酯。另外，脂肪酸例如油酸也可用于制备注射剂。

可与载体物质组合以制备单一剂量形式的活性成分的量将取决于所治疗的宿主和具体的施用模式而变化。例如，意在对人类口服施用的定时释放制剂可含有约1至1000mg活性物质化合物及合适和适宜量的可占总组合物的约5至约95％(重量:重量)的载体物质。可制备药物组合物以提供可容易测量的施用量。例如，意在静脉内输注的水性溶液剂可含有约3至500μg活性成分/毫升溶液，从而使合适体积的输注能够以约30ml/hr的速率进行。

适于胃肠外施用的制剂包括水性和非水性无菌注射溶液剂，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与预期接受者的血液等张的溶质；及水性和非水性无菌混悬剂，其可包含助悬剂和增稠剂。

适于局部施用至眼部的制剂还包括滴眼剂，其中将活性成分溶于或混悬于合适的载体(尤其是针对活性成分的水性溶剂)中。活性成分在上述制剂中存在的浓度优选为约0.5至20％w/w，例如约0.5至10％w/w，例如约1.5％w/w。

适于在口中局部施用的制剂包括糖锭剂，其包含于矫味基质(通常是蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶)中的活性成分；锭剂，其包含于惰性基质(例如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶)中的活性成分；及漱口剂，其包含于合适液体载体中的活性成分。

适于直肠施用的制剂可呈现为栓剂形式，其具有包含例如可可脂或水杨酸酯的合适基质。

适于肺内或经鼻施用的制剂具有例如0.1至500微米的粒度(包括在0.1和500微米之间且增量为例如0.5、1、30、35微米等的粒度)，其如下施用：快速吸入通过鼻道或吸入通过口以到达肺泡囊。合适的制剂包括活性成分的水性或油性溶液剂。适于气雾或干粉施用的制剂可根据常规方法来制备且可与其它治疗剂例如迄今用于治疗或预防下述病症的化合物一起递送。

适于阴道施用的制剂可呈现为阴道栓剂、塞剂、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾剂形式，其除活性成分外还含有本领域已知的合适载体。

制剂可包装在单位剂量或多剂量容器例如密封的安瓿或小瓶中且可储存在冷冻干燥(冻干)状态下，其仅需要在使用前即刻加入无菌液体载体例如水以供注射。即时注射溶液剂和混悬剂由上述种类的无菌粉末、颗粒和片剂制备。优选的单位剂量制剂是含有本申请上述日剂量或单位日亚剂量或其合适分数的活性成分的那些制剂。

本申请还提供兽用组合物，其由此包含上述至少一种活性成分及兽用载体。兽用载体是可用于施用所述组合物目的的物质且可为固体、液体或气体物质，其在兽医领域中是惰性或可接受的且与活性成分相容。这些兽用组合物可胃肠外、口服或经任何其它所需途径施用。

组合疗法

式i、ii和iii化合物可单独或与用于治疗本申请所述疾病或病症例如炎症或过度增殖性病症(例如癌症)的其它治疗剂联用。在一些实施方案中，将式i、ii和iii化合物与具有抗炎或抗过度增殖性质或可用于治疗炎症、免疫应答障碍或过度增殖性病症(例如癌症)的额外的第二治疗性化合物组合在药物组合制剂或作为组合疗法的施用方案中。额外的治疗剂可为bcl-2抑制剂、jak抑制剂、pi3k抑制剂、mtor抑制剂、抗炎剂、免疫调节剂、化学治疗剂、凋亡增强剂、神经营养因子、心血管疾病治疗剂、肝病治疗剂、抗病毒剂、血液病症治疗剂、糖尿病治疗剂和免疫缺陷障碍治疗剂。第二治疗剂可为nsaid抗炎剂。第二治疗剂可为化学治疗剂。药物组合制剂或施用方案的第二化合物优选具有与式i、ii和iii化合物互补的活性，从而使它们不会相互不利地影响。上述化合物合适地以就所预期的目的而言是有效的量组合存在。在一个实施方案中，本申请组合物包含式i、ii和iii化合物或其立体异构体、互变异构体、溶剂化物、代谢物或药用盐或前药与治疗剂例如nsaid的组合。

组合疗法可按同时或先后方案来施用。当先后施用时，组合可按两次或更多次施用来施用。组合施用包括使用分开的制剂或单一的药物制剂共施用和以任何顺序先后施用，其中优选的是存在两种(或所有)活性剂同时发挥其生物活性的一段时间。

任何上述共施用的药物的合适剂量是目前所使用的那些剂量且可由于新鉴定的药物和其它治疗剂或处置措施的组合作用(协同作用)而降低。

组合疗法可提供“协同作用”且被证实是“协同的”，即当活性成分一起使用时实现的作用大于分别使用所述化合物所实现的作用的总和。当活性成分：(1)在组合单位剂量制剂中共配制且同时施用或递送；(2)以分开的制剂交替或平行递送；或(3)通过一些其它方案来施用时，可实现协同作用。当以交替疗法递送时，当化合物例如通过以不同的注射器分开注射、分开的丸剂或胶囊剂或分开的输注剂而先后施用或递送时，可实现协同作用。通常，在交替疗法期间，将有效剂量的每种活性成分先后即顺次施用，而在组合疗法中，将有效剂量的两种或更多种活性成分一起施用。

在疗法的具体实施方案中，式i、ii和iii化合物或其立体异构体、互变异构体、溶剂化物、代谢物或药用盐或前药可与其它治疗剂、激素药物或抗体药物例如本申请所述那些药物组合及与外科疗法和放射疗法组合。本申请组合疗法由此包括施用至少一种式i、ii和iii化合物或其立体异构体、互变异构体、溶剂化物、代谢物或药用盐或前药及使用至少一种其它癌症治疗方法。式i、ii和iii化合物和其它药物活性治疗剂的量及相关的施用时间安排将被选择，从而实现所期望的组合治疗作用。

在一些实施方案中，式i、ii和iii化合物或其药用盐与芳香酶抑制剂、磷酸肌醇3-激酶(pi3k)/mtor途径抑制剂、cdk4/6抑制剂、her-2抑制剂、egfr抑制剂、pd-1抑制剂、聚adp-核糖聚合酶(parp)抑制剂、组蛋白去乙酰化酶(hdac)抑制剂、hsp90抑制剂、vegfr抑制剂、akt抑制剂、化学疗法或其任何组合联用。

在一些实施方案中，包含式i、ii和iii化合物或其药用盐的药物组合物与选自以下的治疗剂组合给予：紫杉醇、阿那曲唑、依西美坦、环磷酰胺、表柔比星、氟维司群、来曲唑、帕博西尼、吉西他滨、曲妥单抗(genentech)、曲妥单抗-美坦新(genentech)、培非司亭、非格司亭、他莫昔芬、多西他赛、托瑞米芬、长春瑞滨、卡培他滨和伊沙匹隆。

在一些实施方案中，式i、ii和iii化合物或其药用盐与激素阻断疗法、化学疗法、放射疗法、单克隆抗体或其组合联用。

激素阻断疗法包括使用阻断雌激素产生或阻断雌激素受体的药物。在一些实施方案中，激素阻断疗法包括使用雌激素受体调节剂和/芳香酶抑制剂。雌激素受体调节剂包括三苯基乙烯衍生物(例如他莫昔芬、托瑞米芬、屈洛昔芬、3-羟基他莫昔芬、艾多昔芬、tat-59(4-羟基他莫昔芬的磷酸化衍生物)和gw5638(他莫昔芬的羧酸衍生物)；非甾体雌激素受体调节剂(例如雷洛昔芬、ly353381(serm3)和ly357489)；甾体雌激素受体调节剂(例如ici-182,780)。芳香酶抑制剂包括甾体芳香酶抑制剂和非甾体芳香酶抑制剂。甾体芳香酶抑制剂包括但不限于依西美坦。非甾体芳香酶抑制剂包括但不限于阿那曲唑和来曲唑。

在一些实施方案中，式i、ii和iii化合物或其药用盐与cdk4/6抑制剂组合给予。在一些实施方案中，所述cdk4/6抑制剂为帕博西尼(pd-0332991,pfizer)、瑞博西尼(lee011)或ly283519。在一些实施方案中，所述cdk4/6抑制剂为lee011。在一些实施方案中，瑞博西尼(lee011)以约10mg/天至约1000mg/天的剂量给予。在一些实施方案中，lee011以约400mg/天、约500mg/天或约600mg/天的剂量给予。在一些实施方案中，口服给予lee011的每日剂量。在一些实施方案中，每日一次口服给予瑞博西尼(lee011)的每日剂量且持续三周，随后是其中不给予瑞博西尼(lee011)的一周休药期。

在一些实施方案中，式i、ii和iii化合物或其药用盐与磷酸肌醇3-激酶(pi3k)/mtor途径抑制剂组合给予。在一些实施方案中，所述磷酸肌醇3-激酶(pi3k)/mtor途径抑制剂为依维莫司、替西罗莫司、bez235(dactolisib)、byl719(alpelisib)、gdc0032(taselisib)、bkm120(buparlisib)、bgt226、gdc0068(ipatasertib)、gdc-0980(apitolisib)、gdc0941(pictilisib)、ink128(mln0128)、ink1117、osi-027、cc-223、azd8055、sar245408、sar245409、pf04691502、wye125132、gsk2126458、gsk-2636771、bay806946、pf-05212384、sf1126、px866、amg319、zstk474、cal101(idelalisib)、pwt33597、cu-906、azd-2014或cudc-907。在一些实施方案中，所述磷酸肌醇3-激酶(pi3k)/mtor途径抑制剂为依维莫司。在一些实施方案中，依维莫司以约1mg/天至约20mg/天的剂量给予。在一些实施方案中，依维莫司以约2.5mg/天、约5mg/天或约10mg/天的剂量给予。在一些实施方案中，每日一次给予依维莫司的每日剂量。在一些实施方案中，所述磷酸肌醇3-激酶(pi3k)/mtor途径抑制剂为bkm120(buparlisib)。在一些实施方案中，bkm120(buparlisib)以约5mg/天至约500mg/天的剂量给予。在一些实施方案中，bkm120以约50mg/天至约100mg/天的剂量给予。在一些实施方案中，bkm120以约100mg/天的剂量给予。在一些实施方案中，每日一次给予bkm120的每日剂量。在一些实施方案中，所述磷酸肌醇3-激酶(pi3k)/mtor途径抑制剂为byl719。在一些实施方案中，byl719以约25mg/天至约1000mg/天的剂量给予。在一些实施方案中，byl719以约250mg/天或约350mg/天的剂量给予。在一些实施方案中，每日一次给予byl719的每日剂量。

式i、ii和iii化合物的代谢物

本申请所述式i、ii和iii的体内代谢产物也落入本申请范围内。上述产物可源于例如所施用的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶促裂解等。因此，本申请包括式i、ii和iii化合物的代谢物，包括由以下方法产生的化合物，所述方法包括使本申请化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的一段时间。

代谢产物通常如下鉴定：制备本申请化合物的经放射性标记的(例如¹⁴c或³h)同位素，将其以可检测的剂量(例如大于约0.5mg/kg)胃肠外施用至动物例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴或施用至人类，允许足以发生代谢的时间(通常约30秒至30小时)且将其转化产物与尿、血液或其它生物样品分离。这些产物是容易分离的，这是因为它们是经标记的(其它通过使用能够与在代谢物中存活的抗原表位结合的抗体来分离)。代谢物结构以常规方式例如通过ms、lc/ms或nmr分析来确定。通常，对代谢物的分析以与本领域技术人员已知的常规药物代谢研究相同的方式来进行。代谢产物可用于对本申请化合物的治疗剂量进行诊断性测定，只要它们不是在体内另外存在的。

制品

本申请另一个实施方案提供含有可用于治疗上述疾病和病症的物质的制品或“试剂盒”。在一个实施方案中，试剂盒包含含有式i、ii和iii化合物或其立体异构体、互变异构体、溶剂化物、代谢物或药用盐或前药的容器。试剂盒还可包含在容器上或与容器相关的标签或包装说明书。术语“包装说明书”用于指通常包含在治疗产品的市售包装中的说明书，其含有关于使用上述治疗产品所涉及的适应症、用法、剂量、施用、禁忌症和/或注意事项的信息。合适的容器包括例如瓶、小瓶、注射器、泡罩包装等。容器可由多种材料例如玻璃或塑料来形成。容器可容纳可有效治疗病症的式i、ii和iii化合物或其制剂且可具有无菌接口(例如容器可为静脉内溶液袋或具有可被皮下注射针头刺穿的塞子的小瓶)。组合物中的至少一种活性剂是式i、ii和iii化合物。标签或包装说明书指示组合物用于治疗所选择的病症例如癌症。另外，标签或包装说明书可指示待治疗的患者是患有病症例如过度增殖性病症、神经变性、心脏肥大、疼痛、偏头痛或神经创伤性疾病或事件的患者。在一个实施方案中，标签或包装说明书指示包含式i、ii和iii化合物的组合物可用于治疗起因于异常细胞生长的病症。标签或包装说明书还可指示组合物可用于治疗其它病症。可选择或额外地，制品还可包含第二容器，其包含药用缓冲液例如抑菌性注射用水(bwfi)、磷酸盐缓冲盐水、林格溶液和葡萄糖溶液。其还可包含从商业和使用者角度来看所期望的其它物质，包括其它缓冲液、稀释剂、过滤器、针头和注射器。

试剂盒还可包含关于施用式i、ii和iii化合物及第二药物制剂(若存在)的说明。例如，若试剂盒包含含有式i、ii和iii化合物的第一组合物和第二药物制剂，则试剂盒还可包含关于将第一和第二药物组合物同时、先后或分开给予有此需要的患者的说明。

在另一个实施方案中，试剂盒适于递送式i、ii和iii化合物的固体口服形式例如片剂或胶囊剂。上述试剂盒优选包含多个单位剂量。上述试剂盒可包含具有以其所预期的使用顺序而排列的剂量的卡片状物。上述试剂盒的一个实例是“泡罩包装”。泡罩包装在包装工业中是已知的且广泛用于包装药物单位剂量形式。可按需提供记忆辅助装置，其例如呈数字、字母或其它标记形式或具有指出在治疗安排中可进行施用的那些天的日历说明书。

根据一个实施方案，试剂盒可包含(a)在其中含有式i、ii和iii化合物的第一容器；及任选包含(b)在其中含有第二药物制剂的第二容器，其中第二药物制剂包含具有抗过度增殖活性的第二化合物。可选择或额外地，试剂盒还可包含第三容器，其包含药用缓冲液例如抑菌性注射用水(bwfi)、磷酸盐缓冲盐水、林格溶液和葡萄糖溶液。其还可包含从商业和使用者角度来看所期望的其它物质，包括其它缓冲液、稀释剂、过滤器、针头和注射器。

在试剂盒包含式i、ii和iii组合物和第二治疗剂的一些其它实施方案中，试剂盒可包含用于容纳分开的组合物的容器例如分开的瓶或分开的箔包装，然而分开的组合物也可包含在单一的未分开的容器中。典型地，试剂盒包含施用分开的组分的指导。当分开的组分优选以不同的剂量形式(例如口服和胃肠外)或以不同的剂量间隔来施用时或当主治医师需要对所组合的各个组分进行滴定时，试剂盒形式是特别有利的。

式i、ii和iii化合物的制备

式i、ii和iii化合物可通过以下合成途径来合成，所述合成途径包括与化学领域已知且尤其是借鉴本申请说明书的那些方法及针对其它杂环的那些方法类似的方法，针对其它杂环的方法参见：comprehensiveheterocyclicchemistryii,katritzky和rees编辑,elsevier,1997,例如第3卷；liebigsannalenderchemie,(9):1910-16,(1985)；helveticachimicaacta,41:1052-60,(1958)；arzneimittel-forschung,40(12):1328-31,(1990)，将其各自明确地引入作为参考。原料通常可由商业来源例如aldrichchemicals(milwaukee,wi)得到或使用本领域技术人员已知的方法来容易地制备(例如通过在louisf.fieser和maryfieser,reagentsfororganicsynthesis,v.1-23,wiley,n.y.(1967-2006版)或beilsteinshandbuchderorganischenchemie,4,aufl.ed.springer-verlag,berlin(包括增补)(也可由beilstein在线数据库得到)中概述的方法来制备)。

可用于合成式i、ii和iii化合物的合成化学转化和保护基方法学(保护和脱保护)及必要的试剂和中间体是本领域已知的且参见例如r.larock,comprehensiveorganictransformations,vchpublishers(1989)；t.w.greene和p.g.m.wuts,protectivegroupsinorganicsynthesis,第3版,johnwileyandsons(1999)；和l.paquette编辑,encyclopediaofreagentsfororganicsynthesis,johnwileyandsons(1995)及其后续版本。

式i、ii和iii化合物可单独制备或作为包含至少2种例如5-1,000种化合物或10-100种化合物的化合物库制备。式i、ii和iii化合物的库可通过组合性“分-混”法或通过使用溶液相或固相化学的多重平行合成通过本领域技术人员已知的操作来制备。因此，本申请另一个方面提供包含至少2种化合物或其药用盐的化合物库。

实施例提供用于制备式i、ii和iii化合物的示例性方法。本领域技术人员将认识到其它合成途径可用于合成式i、ii和iii化合物。虽然在附图和实施例中描述和讨论了具体原料和试剂，但是可容易地替换为其它原料和试剂以提供多种衍生物和/或反应条件。另外，由所述方法制备的多种示例性化合物可在本公开内容的基础上使用本领域技术人员已知的常规化学方法来进一步修饰。

当制备式i化合物时，可能需要对中间体的远距离官能团(例如伯胺或仲胺)进行保护。对上述保护的需要将随远距离官能团的性质和制备方法的条件而变化。合适的氨基保护基包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧基羰基(boc)、苄基氧基羰基(cbz)和9-芴基亚甲基氧基羰基(fmoc)。对上述保护的需要由本领域技术人员容易地确定。关于保护基及其使用的一般描述参见t.w.greene,protectivegroupsinorganicsynthesis,johnwiley&sons,newyork,1991。

在制备式i、ii和iii化合物的方法中，可能有利的是将反应产物彼此和/或与原料分离。通过本领域常规技术将每步或多步的所需产物分离和/或纯化至所需要的均匀度。通常，上述分离涉及多相萃取、从溶剂或溶剂混合物中结晶、蒸馏、升华或色谱法。色谱法可涉及多种方法，包括例如：反相和正相色谱法；尺寸排阻色谱法；离子交换色谱法；高、中和低压液相色谱法和装置；小规模分析型色谱法；模拟移动床(smb)和制备型薄层或厚层色谱法及小规模薄层和快速色谱法。

另一类分离方法涉及用所选择的试剂对混合物进行处理以与所需产物、未反应的原料、反应副产物等结合或以其它方式使所需产物、未反应的原料、反应副产物等是可分离的。上述试剂包括吸附剂或吸收剂例如活性炭、分子筛、离子交换介质等。可选择地，所述试剂可为酸(在碱性物质的情况下)、碱(在酸性物质的情况下)、结合剂例如抗体、结合蛋白、选择性螯合剂例如冠醚、液/液离子萃取试剂(lix)等。对适当分离方法的选择取决于所涉及的物质的性质例如沸点和分子量(在蒸馏和升华中)、存在或不存在极性官能团(在色谱法中)、物质在酸性和碱性介质中的稳定性(在多相萃取中)等。

非对映异构体混合物可基于其物理化学差异通过本领域技术人员已知的方法例如色谱法和/或分级结晶被分离成其单独的非对映异构体。对映异构体可如下分离：对映异构体混合物通过与具有适当光学活性的化合物(例如手性助剂例如手性醇或mosher’s酰氯)反应而转化为非对映异构体混合物，分离非对映异构体，然后将单独的非对映异构体转化(例如水解)为相应的纯对映异构体。另外，一些本申请化合物可为阻转异构体(例如取代的联芳基化合物)且被认为是本申请一部分。对映异构体还可通过使用手性hplc柱来分离。

基本上不含有其立体异构体的单一立体异构体例如对映异构体可通过对外消旋混合物进行拆分来得到，所述拆分所使用的方法为例如使用具有光学活性的拆分剂来形成非对映异构体(eliel,e.和wilen,s.“stereochemistryoforganiccompounds”,johnwiley&sons,inc.,newyork,1994；lochmuller,c.h.,(1975)j.chromatogr.,113(3):283-302)。本申请手性化合物的外消旋混合物可通过任何合适的方法来分离，所述方法包括：(1)与手性化合物形成离子性非对映异构盐且通过分级结晶或其它方法来分离；(2)与手性衍生试剂形成非对映异构化合物，分离非对映异构体且转化为纯的立体异构体；和(3)在手性条件下直接分离基本上纯的或富集的立体异构体。参见“drugstereochemistry,analyticalmethodsandpharmacology”,irvingw.wainer编辑,marceldekker,inc.,newyork(1993)。

在方法(1)中，非对映异构盐可如下形成：使对映体纯的手性碱(例如番木鳖碱、奎宁、麻黄碱、士的宁、α-甲基-β-苯基乙基胺(安非他命)等)与带有酸性官能团(例如羧酸和磺酸)的不对称化合物进行反应。可通过分级结晶或离子色谱使非对映异构盐得以分离。就分离氨基化合物的光学异构体而言，添加手性羧酸或磺酸例如樟脑磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸可使非对映异构盐得以形成。

可选择地，通过方法(2)，使待拆分的底物与手性化合物的一种对映异构体反应以形成非对映异构体对(e.和wilen,s.“stereochemistryoforganiccompounds”,johnwiley&sons,inc.,1994,第322页)。非对映异构体化合物可通过使不对称化合物与对映体纯的衍生试剂例如薄荷基衍生物反应来形成，然后将非对映异构体分离且水解，得到纯的或富集的对映异构体。确定光学纯度的方法涉及制备外消旋混合物的手性酯例如薄荷基酯例如在碱存在下的(-)氯甲酸薄荷基酯或mosher酯、α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基乙酸酯(jacobiii.j.org.chem.,(1982)47:4165)且通过¹hnmr光谱来分析两种阻转异构的对映异构体或非对映异构体的存在。阻转异构体化合物的稳定非对映异构体可通过先后进行正相或反相色谱和用于分离阻转异构的萘基-异喹啉的方法来分离(wo96/15111)。通过方法(3)，两种对映异构体的外消旋混合物可通过使用手性固定相的色谱来分离(“chiralliquidchromatography”(1989)w.j.lough,ed.,chapmanandhall,newyork；okamoto,j.chromatogr.,(1990)513:375-378)。富集或纯化的对映异构体可通过用于区分具有不对称碳原子的其它手性分子的方法例如旋光度和圆二色散来区分。

式i、ii和iii化合物可通过方案1-8的一般操作来制备，其中r基团如在式i、ii和iii或其前体中所述。

方案1

化合物8的一般合成如方案1所示。甲基酮1通过还原胺化而转化为2。用对碘苯甲醛3对2进行pictet-spengler环化得到环化中间体4。对中间体4中的吲哚nh进行保护，然后与醇6进行ullmann偶联得到7。脱保护，然后进行手性分离得到8。

方案2

化合物14的合成汇总于方案2。使吲哚9与环状α-br酮10反应得到化合物11。进行还原胺化，随后进行pictet-spengler环化得到13。随后进行13与醇6的ullmann偶联得到14。

方案3

方案3汇总了化合物19和23的制备。r-色胺15与环状或非环状酮16进行pictet-spengler环化得到17。17用三氟甲磺酸酯进行n-烷基化得到中间体18。18与醇6的ullmann偶联得到19。

就磺酰胺23而言，合成起始于r-色胺15与苯甲醛20进行pictet-spengler环化。使21与甲磺酰氯反应得到22，其当在碱性条件下用烷基碘处理时转化为23。

方案4

化合物31和32的合成示于方案4。吲哚9用环氧化物24进行n-烷基化得到化合物25。将醇25转化为其甲磺酸酯，随后进行叠氮化物置换得到27。27用三苯基膦进行叠氮化物还原得到胺28，使其与三氟甲磺酸酯反应得到29。29与苯甲醛3的环化得到30。30与醇6的ullman偶联得到31。可选择地，30可通过由pd催化的buchwald偶联反应而转化为32。

方案5

化合物36、38和40的合成汇总于方案5。起始于胺33，与苯甲醛3环化得到34。使34与磺酰氯反应得到35，其与醇6进行ullmann偶联得到36。类似地，使34与酰氯反应得到中间体37，也对其进行ullmann偶联得到38。也可对化合物34进行n-烷基化得到39，然后将其转化为40。

方案6

酰胺47和50的合成汇总于方案6。使苯并呋喃(y＝o)或苯并噻吩(y＝s)进行vilsmeier反应得到醛42。使42与硝基乙烷进行醛醇缩合得到43，将其还原为胺44。44与苯甲醛3的环化得到45。进行酰胺偶联，随后进行ullmann偶联反应得到47。可选择地，胺44可用三氟甲磺酸酯进行n-烷基化得到48。48与苯甲醛3的环化得到49，随后将其转化为50。

方案7

56的合成汇总于方案7。使醛51与硝基乙烷进行醛醇缩合得到中间体52，将其还原得到53。使53与苯甲醛3反应得到54。进行n-烷基化，随后进行ullmann偶联反应得到56。可选择地，胺53可用三氟甲磺酸酯进行n-烷基化。57与苯甲醛3的环化得到55，其随后通过与醇6进行ullman偶联反应而转化为56。

方案8

59的合成示于方案8。在溴化物57与醇6的ullman偶联反应过程中产生化合物59及58。

实施例

实施例1011-((1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2-甲基丙-1-酮101

步骤1：3-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯并呋喃

将苯并呋喃-3-甲醛(0.973g,6.32mmol)和乙酸铵(268mg,3.48mmol)在1-硝基乙烷(19ml)中的混合物在100℃加热3hr。反应结束时，将混合物浓缩且所得残留物用快速柱色谱纯化(0-30％iproac/庚烷)。将产物由环戊基甲基醚和庚烷分两批结晶得到预期产物，其为褐色至棕色粉末(0.814g,收率63％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.19(s,1h),7.89(s,1h),7.71(d,j＝7.6hz,1h),7.57(d,j＝8.0hz,1h),7.46-7.34(m,2h),2.51(s,3h)。

步骤2：1-(苯并呋喃-3-基)丙-2-胺

在0℃(冰浴)向氢化铝锂在thf中的溶液(2.4m,6.7ml,16mmol)中逐滴加入3-[(z)-2-硝基丙-1-烯基]苯并呋喃(0.812g,4.00mmol)在thf(5.0ml)中的溶液。将混合物在室温搅拌20hr。然后反应混合物用冰浴冷却，将混合物小心地用水(0.61ml)、15％naoh(0.61ml)和水(1.8ml)淬灭。将固体滤出且将滤饼用thf(4×)洗涤。将合并的滤液浓缩得到粗产物，其无需进一步纯化即用于下一步。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.57(d,j＝7.6hz,1h),7.50-7.45(m,2h),7.35-7.20(m,2h),3.41-3.23(m,1h),2.80-2.76(m,1h),2.65-2.59(m,1h),1.18(d,j＝6.0hz,3h)。

步骤3：1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶

将1-(苯并呋喃-3-基)丙-2-胺(82.5mg,0.471mmol)、2,6-二氟-4-碘苯甲醛(129mg,0.471mmol)和三氟乙酸(0.0676ml,0.895mmol)在1,2-二氯乙烷(2.82ml,35.8mmol)中的混合物在120℃微波加热0.5hr。反应混合物用dcm稀释且倒入稀na2co3溶液中。将水层用dcm(2×)萃取。将合并的dcm溶液干燥(na2so4)且浓缩。将粗产物用快速柱色谱纯化(0-25％iproac/庚烷+2.5％三乙胺)得到标题产物(119mg,收率59％)。

步骤4：1-(1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2-甲基丙-1-酮

在0℃向1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并噻吩并[2,3-c]吡啶(119mg,0.28mmol)在dcm(1.4ml)中的溶液中加入dipea(0.244ml,1.4mmol)、随后加入异丁酰氯(0.18ml,0.70mmol)。将混合物在室温搅拌2hr且用稀nahco3溶液中和。将水层用dcm(2×)萃取。将合并的dcm溶液干燥(na2so4)且浓缩。将粗产物用快速柱色谱纯化(0-20％iproac/庚烷)得到顺式和反式立体异构体这两者的混合物(81mg,收率58％)。

步骤5：101

将1-[1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基]-2-甲基-丙-1-酮(81mg,0.16mmol)、2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(44mg,0.33mmol)、cui(16mg,0.082mmol)和k2co3(68mg,0.49mmol)在丁腈(0.98ml)中的混合物在氮气下在140℃加热24hr。将反应混合物冷却至室温，用etoac稀释。将反应混合物滤过。将滤液浓缩得到粗产物，将其用hplc纯化，随后进行手性sfc分离(chiralpakox(150×21.2mm)，20％等度0.1％nh4oh/甲醇，70ml/min，uv220nm，温度40℃，循环时间5.5min)得到101，其为4个峰中的第二个洗脱峰(5.1mg,收率6.2％)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.64-7.57(m,1h),7.52-7.46(m,1h),7.30-7.22(m,2h),6.57(d,j＝11.8hz,2h),6.06(s,1h),4.84(s,1h),4.54(d,j＝6.3hz,1h),4.42(d,j＝6.2hz,1h),3.95-3.82(m,2h),3.17-3.09(m,1h),3.08-2.92(m,3h),2.84(d,j＝15.7hz,1h),2.77-2.62(m,3h),1.17(d,j＝6.5hz,3h),1.03-0.91(m,6h)。lcms:501.2[m+h]⁺。

实施例1021-((1,3-反式)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2-甲基丙-1-酮102

步骤1：3-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯并[b]噻吩

将苯并噻吩-3-甲醛(1.00g,6.16mmol)和乙酸铵(261mg,3.39mmol)在1-硝基乙烷(18.5ml)中的混合物在100℃加热3hr。浓缩后，将残留物由环戊基甲基醚和庚烷分两批结晶得到标题化合物，其为黄色至棕色粉末(0.925g,收率68.4％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.35(s,1h),7.94-7.90(m,2h),7.68(s,1h),7.52-7.44(m,2h),2.55(s,3h)。

步骤2：1-(苯并[b]噻吩-3-基)丙-2-胺

在0℃(冰浴)向氢化铝锂在thf中的溶液(2.4m,22ml,52.7mmol)中逐滴加入3-(2-硝基丙-1-烯基)苯并噻吩(2.89g,13.2mmol)在thf(19.8ml)中的溶液。将混合物在油浴中在55℃加热2hr。用冰浴冷却后，将混合物小心地用水(2ml)、15％naoh(2ml)和水(6ml)淬灭。将固体滤出(用thf洗涤4次)。将合并的滤液浓缩得到标题化合物，其为褐色油状物，其无需进一步纯化即用于下一步。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.99(d,j＝7.6hz,1h),7.94(d,j＝7.6hz,1h),7.57(s,1h),7.45-7.36(m,2h),3.46-3.38(m,1h),3.24-3.19(m,1h),2.98-2.93(m,1h),1.15(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤3：1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶

将1-(1-苯并噻吩-3-基)-2-丙胺(0.211g,1.10mmol)、2,6-二氟-4-碘苯甲醛(0.302g,1.10mmol)和三氟乙酸(0.158ml,2.10mmol)在1,2-二氯乙烷(6.62ml)中的混合物在120℃微波加热1h。反应混合物用dcm稀释且倒入稀na2co3水溶液中。将内容物用dcm(2×)萃取。将合并的dcm溶液干燥(na2so4)且浓缩。所得残留物用快速柱色谱纯化(0-20％iproac/庚烷+2.5％三甲胺)得到产物(0.300g,收率61.6％)。

步骤4：1-(1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2-甲基丙-1-酮

在0℃向1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并噻吩并[2,3-c]吡啶(300mg,0.6798mmol)在dcm(3.4ml)中的溶液中加入dipea(0.59ml,3.4mmol)、随后加入异丁酰氯(0.182ml,1.700mmol)。将混合物在室温搅拌2hr。混合物用稀nahco3中和，将水层用dcm(2×)萃取。将合并的dcm溶液干燥(na2so4)且浓缩。将粗产物用快速柱色谱纯化(0-20％iproac/庚烷)得到两种产物(顺式异构体:157mg,收率45％；反式异构体:76mg,收率22％)。

步骤5：102

将1-[(1,3-反式)-1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-苯并噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基]-2-甲基-丙-1-酮(76mg,0.15mmol)、2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(40mg,0.30mmol)、碘化亚铜(14mg,0.074mmol)和碳酸钾(62mg,0.45mmol)在丁腈(0.89ml)中的混合物在氮气下在140℃加热24hr。将反应混合物冷却至室温且用etoac稀释。然后将混合物滤过。将滤液浓缩且所得残留物用hplc纯化得到102(32mg,收率42％)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.91-7.84(m,1h),7.81-7.74(m,1h),7.46-7.38(m,1h),7.38-7.30(m,1h),6.58(d,j＝11.2hz,2h),6.19(s,1h),4.86(s,1h),4.54(d,j＝6.2hz,1h),4.42(d,j＝6.2hz,1h),3.94-3.80(m,2h),3.24-3.14(m,1h),3.10-3.01(m,1h),2.99-2.92(m,2h),2.76-2.60(m,3h),1.13(d,j＝6.5hz,3h),1.05-0.91(m,6h)。lcms:517.2[m+h]⁺。

实施例103(r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚103

步骤1：1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚

将(1h-吲哚-3-基)-1-丙胺(3.00g,17.2mmol)、2,6-二氟-4-碘-苯甲醛(4.61g,17.2mmol)和三氟乙酸(9.82g,86.1mmol)在乙腈(98.4ml)中的混合物在室温搅拌3天。将混合物浓缩且将剩余残留物溶于dcm，用饱和nahco3洗涤。将水层用dcm反萃取两次。合并的有机层用硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗产物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-40％iproac/庚烷)得到预期产物(3.22g,收率44％)，其为黄色固体。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.58-7.48(m,1h),7.42-7.33(m,2h),7.19-7.03(m,4h),5.50(s,1h),3.61-3.42(m,1h),3.25-3.03(m,2h),2.99-2.82(m,1h),2.17-2.04(m,1h),1.95-1.73(m,1h)。lcms:425.0[m+h]⁺。

步骤2：1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚

在氮气下向1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚(200mg,0.4715mmol)和n,n-二异丙基乙胺(3当量,1.414mmol)在1,4-二噁烷(2ml)中的溶液中加入三氟甲磺酸(2-氟-2-甲基-丙基)酯(2当量,0.9430mmol)。将混合物加热至90℃过夜。第二天将混合物在dcm和水之间分配。分离有机层，用硫酸钠干燥且浓缩。粗产物通过硅胶快速柱色谱纯化(用0-20％iproac/庚烷洗脱)得到标题化合物(125mg,收率53％)。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.56-7.50(m,1h),7.39(s,1h),7.26(d,j＝1.9hz,1h),7.24(s,1h),7.20-7.15(m,1h),7.13-7.05(m,2h),5.52(s,1h),3.26-3.17(m,1h),3.05(dd,j＝9.3,5.8hz,2h),2.97(ddd,j＝14.7,6.9,4.5hz,1h),2.81(dd,j＝21.4,14.7hz,1h),2.64(dd,j＝21.4,14.7hz,1h),2.09-1.90(m,2h),1.33(d,j＝2.3hz,3h),1.27(d,j＝2.5hz,3h)。

步骤3：103

将1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚(125mg,0.2509mmol)、2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(2当量,0.5017mmol)、碘化亚铜(0.4当量,0.1003mmol)和碳酸钾(3当量,0.7526mmol)在丁腈(0.15m,19.2mmol)中的溶液在氮气气氛下加热至135℃过夜。第二天将反应混合物滤过且将滤液浓缩。粗产物通过手性sfc纯化(柱:pic100chiral,溶剂a:二氧化碳,溶剂b:0.1％氢氧化铵/甲醇,等度20％乙醇,r.t.0.553min)得到103。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.57(s,1h),7.43(dd,j＝7.2,1.5hz,1h),7.18-7.12(m,1h),7.01-6.89(m,2h),6.66(d,j＝10.8hz,2h),5.44(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.92(t,j＝5.5hz,2h),3.10-2.80(m,8h),2.79-2.54(m,4h),1.89(d,j＝41.3hz,2h),1.29(d,j＝4.9hz,3h),1.24(d,j＝4.9hz,3h)。

实施例104(±)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(甲基磺酰基)-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚104

步骤1：1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-2-(甲基磺酰基)-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚

向1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-1,2,3,4,5,5a,10,10a-八氢氮杂并[3,4-b]吲哚(57mg,0.1337mmol)在氯仿(0.15m,11.11mmol)中的溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(6当量,0.8024mmol)和甲磺酰氯(6当量,0.8024mmol)。将混合物加热至60℃且保持6hr。反应混合物通过加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，用dcm(3×20ml)萃取。合并的有机层用硫酸镁干燥，滤过且浓缩。将粗物质通过硅胶快速柱色谱纯化(用0-50％iproac/庚烷)得到预期产物(51mg,收率76％)。

步骤2：104

向微波小瓶中加入1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-2-甲基磺酰基-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚(50mg,0.09954mmol)、2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(2当量,0.1991mmol)、碘化亚铜(0.4当量,0.03982mmol)、碳酸钾(3当量,0.2986mmol)和丁腈(0.15m,7.61mmol)。混合物用氮气脱气5min，然后密封。将小瓶在135℃加热过夜。第二天将混合物冷却至室温，滤过且浓缩。粗产物通过反相hplc纯化得到104(35mg,收率69％)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.79(s,1h),7.48(dd,j＝7.6,1.2hz,1h),7.22-7.18(m,1h),7.03-6.96(m,2h),6.77(d,j＝10.9hz,2h),6.71(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.96(t,j＝5.4hz,2h),3.89-3.77(m,1h),3.29-3.14(m,4h),3.10-2.94(m,4h),2.85(s,3h),2.83-2.65(m,4h)。lcms:508.6[m+h]⁺。

实施例105(1s,4r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-4-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚105

步骤1：n-(2-(1h-吲哚-3-基)丙基)-2-氟-2-甲基丙-1-胺

向250ml圆底烧瓶中加入2-(1h-吲哚-3-基)丙-1-胺(566mg,3.2484mmol；根据j.med.chem.,2009,52(4),904-907公开的操作制备)、三氟甲磺酸2-氟-2-甲基-丙基酯(874mg,1.2当量,3.8981mmol)、许尼希碱(1.7ml,3当量,9.7452mmol)、1,4-二噁烷(13ml,0.25m)。将反应混合物在80℃搅拌过夜且在第二天用饱和氯化铵水溶液稀释。混合物用etoac萃取。分离有机层，用硫酸镁干燥，滤过且浓缩。将粗物质通过硅胶快速柱色谱纯化(0-100％etoac/己烷)得到标题化合物(225mg,收率28％)。lcms:249.1[m+1]⁺。

步骤2：1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-4-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚

向密封管中加入2-氟-n-[2-(1h-吲哚-3-基)丙基]-2-甲基-丙-1-胺(225mg,0.9062mmol)、2,6-二氟-4-碘-苯甲醛(291mg,1.2当量,1.087mmol)、tfa(0.13ml,2当量,1.812mmol)和dce(6ml,0.15m)。将反应混合物在室温搅拌4天，然后在40℃搅拌3hr，此时全部原料消耗。反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭，然后用dcm萃取。分离有机层，用硫酸镁干燥，滤过且浓缩。粗产物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-100％etoac/己烷)得到标题化合物(200mg,收率44％)。lcms:499.1[m+1]⁺。

步骤3：105、107、108、109

向密封管中加入(1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-4-甲基-1,3,4,9-四氢吡啶并[3,4-b]吲哚(200mg,0.4014mmol)、2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(107mg,2当量)、碘化亚铜(38mg,0.5当量,0.2007mmol)、k2co3(166mg,3当量,1.204mmol)和丁腈(2.7ml,0.15m)。反应混合物用氮气脱气且在135℃搅拌过夜。然后第二天将反应混合物浓缩且通过手性sfc纯化(upc-ad柱,10％etoh)得到随机指定为105、107、108、109的4种非对映异构体。

105:¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.39(s,1h),7.45-7.40(m,1h),7.20-7.13(m,1h),6.95(dtd,j＝17.2,7.1,1.3hz,2h),6.71-6.64(m,2h),4.89(s,1h),4.56(d,j＝6.2hz,1h),4.44(d,j＝6.2hz,1h),3.94(t,j＝5.4hz,2h),3.28(d,j＝7.7hz,2h),3.16(dd,j＝11.6,2.7hz,1h),3.05(dt,j＝6.3,3.4hz,1h),2.99(t,j＝6.5hz,2h),2.84(dd,j＝11.7,3.8hz,1h),2.78-2.58(m,4h),2.47-2.35(m,1h),1.39(d,j＝6.7hz,3h),1.15(dd,j＝21.5,10.9hz,6h)。lcms:504.2[m+1]⁺。

实施例106(r)-1-(1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3,4,5,10-四氢氮杂并[3,4-b]吲哚-2(1h)-基)-2-氟-2-甲基丙-1-酮106

步骤1：1-(1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-3,4,5,10-四氢氮杂并[3,4-b]吲哚-2(1h)-基)-2-氟-2-甲基丙-1-酮

向1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚(84mg,0.1980mmol)在氯仿(0.1m,24.68mmol)中的溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(10当量,1.980mmol)和2-氟-2-甲基-丙酰氯(5当量,0.9901mmol)。在室温搅拌1hr后，将反应混合物浓缩且将粗产物用硅胶快速柱色谱纯化(0-20％iproac/庚烷)得到标题化合物。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.54(ddt,j＝7.0,1.5,0.8hz,1h),7.47(s,1h),7.35-7.30(m,2h),7.24-7.21(m,1h),7.19-7.15(m,1h),7.15-7.08(m,2h),4.25(d,j＝15.2hz,1h),3.54(s,1h),3.04-2.87(m,2h),2.21(ddt,j＝15.9,10.6,5.3hz,1h),1.93(ddd,j＝11.5,9.0,5.8hz,1h),1.66(d,j＝22.3hz,3h),1.59-1.52(m,3h)。

步骤2：106

向1-[1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚-2-基]-2-氟-2-甲基-丙-1-酮(82mg,0.1601mmol)、2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(2当量,0.3201mmol)在丁腈(0.15m,12.2mmol)中的溶液中加入碳酸钾(3当量,0.4802mmol)，随后加入碘化亚铜(0.4当量,0.06402mmol)。将混合物脱气5min，然后加热至135℃过夜。第二天将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土滤过。将滤液浓缩且通过sfc手性分离纯化(柱:pic100chiral,溶剂a:二氧化碳,溶剂b:0.1％氢氧化铵/甲醇,等度20％乙醇,r.t.0.584min)得到106。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.82(s,1h),7.47-7.43(m,1h),7.29(s,1h),7.21(dt,j＝8.1,0.9hz,1h),7.02(ddd,j＝8.1,7.0,1.3hz,1h),6.96(ddd,j＝8.0,7.0,1.2hz,1h),6.71(d,j＝11.3hz,2h),4.50(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),4.24(d,j＝15.2hz,1h),3.95(t,j＝5.4hz,2h),3.31-3.15(m,3h),2.99(dd,j＝7.3,5.9hz,2h),2.84(s,2h),2.79-2.64(m,3h),2.00(d,j＝21.6hz,2h),1.58(d,j＝14.9hz,3h),1.53(d,j＝13.7hz,2h)。

实施例107(1r,4r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-4-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚107

按照实施例105的操作制备107。

107:¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.43(s,1h),7.54(d,j＝7.7hz,1h),7.17(d,j＝7.8hz,1h),7.04-6.88(m,2h),6.74-6.59(m,2h),4.96(s,1h),4.56(d,j＝6.2hz,1h),4.44(d,j＝6.2hz,1h),3.94(t,j＝5.4hz,2h),3.30-3.14(m,4h),2.99(t,j＝6.6hz,2h),2.79-2.57(m,4h),2.45-2.30(m,2h),1.33(d,j＝6.8hz,3h),1.16(d,j＝8.4hz,3h),1.11(d,j＝8.5hz,3h)。lcms:504.2[m+1]⁺。

实施例108(1r,4s)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-4-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚108

按照实施例105的操作制备108。

108:¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.43(s,1h),7.57-7.50(m,1h),7.17(dd,j＝7.5,1.2hz,1h),6.94(dtd,j＝19.4,7.2,1.2hz,2h),6.72-6.61(m,2h),4.96(s,1h),4.56(d,j＝6.2hz,1h),4.44(d,j＝6.2hz,1h),3.94(t,j＝5.4hz,2h),3.39-3.33(m,2h),3.20(dddt,j＝11.6,7.1,4.8,1.9hz,1h),2.99(t,j＝6.5hz,2h),2.82-2.55(m,4h),2.46-2.26(m,2h),1.33(d,j＝6.7hz,3h),1.16(d,j＝8.4hz,3h),1.11(d,j＝8.5hz,3h)。lcms:504.3[m+1]⁺。

实施例109(1s,4s)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-4-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚109

按照实施例105的操作制备109。

109:¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.39(s,1h),7.46-7.39(m,1h),7.21-7.13(m,1h),6.95(dtd,j＝17.3,7.1,1.3hz,2h),6.72-6.62(m,2h),4.89(s,1h),4.56(d,j＝6.2hz,1h),4.44(d,j＝6.2hz,1h),3.94(t,j＝5.4hz,2h),3.16(dd,j＝11.8,2.8hz,1h),3.10-2.95(m,3h),2.94-2.58(m,5h),2.47-2.30(m,1h),1.39(d,j＝6.7hz,3h),1.15(dd,j＝21.5,10.9hz,6h)。lcms:504.3[m+1]⁺。

实施例110(1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚110

步骤1：3-(3,5-二氟-4-((1r,3r)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

向(r)-n-(1-(1h-吲哚-1-基)丙-2-基)-2-氟-2-甲基丙-1-胺(0.4g,1.61mmol)、3-(3,5-二氟-4-甲酰基-苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(0.51g,1.61mmol)在甲苯(6ml)中的混合物中加入acoh(0.18ml,3.22mmol)且将混合物在90℃搅拌12小时。冷却至25℃后，反应混合物用水(30ml)稀释，用etoac(30ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(20％etoac/石油醚)得到标题化合物(0.15g,收率17％)，其为白色固体。lcms:544.1[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.48(d,j＝8.0hz,1h),7.32(d,j＝8.0hz,1h),7.19-7.15(m,1h),7.10-7.08(m,1h),6.25(d,j＝10.0hz,2h),5.95(s,1h),5.41(s,1h),4.83-4.80(m,1h),4.32-4.28(m,3h),4.01-3.98(m,3h),3.86-3.84(m,1h),2.97(t,j＝10.8hz,1h),2.35-2.20(m,1h),1.46(s,9h),1.29-1.13(m,9h)。

步骤2：(1r,3r)-1-(4-(氮杂环丁-3-基氧基)-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚

向3-[3,5-二氟-4-[(1r,3r)-2-异丁基-3-甲基-1,3,4,9-四氢吡啶并[3,4-b]吲哚-1-基]苯氧基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(来自步骤1,150mg,0.29mmol)在dcm(0.6ml)中的混合物中加入tfa(0.32ml,4.28mmol)。将反应混合物在20℃搅拌1小时。真空除去溶剂。将粗残留物直接用于下一步。lcms:444.2[m+h]⁺。

步骤3：110

向(1r,3r)-1-[4-(氮杂环丁-3-基氧基)-2,6-二氟-苯基]-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚(来自步骤2,100mg,0.23mmol)和dipea(0.12ml,0.68mmol)在dmf(2ml)中的混合物中加入1-溴-3-氟丙烷(0.04ml,0.34mmol)。将反应混合物在60℃搅拌12小时。冷却至室温后，将反应溶液用水(20ml)稀释，用dcm(20ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。所得残留物通过反相色谱纯化(乙腈80-100/0.05％nh4oh/水)得到110(3.2mg,收率3％)，其为黄色固体。lcms:504.3[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.39(d,j＝8.0hz,1h),7.33(d,j＝8.0hz,1h),7.11-7.07(m,1h),7.01-6.97(m,1h),6.46(d,j＝10.4hz,2h),5.83(s,1h),5.41(s,1h),4.84-4.82(m,1h),4.53-4.50(m,1h),4.42-4.39(m,1h),4.27-4.23(m,1h),4.13-4.10(m,1h),3.88-3.75(m,3h),3.23-3.20(m,2h),3.01(t,j＝10.8hz,1h),,2.69(t,j＝7.6hz,2h),2.38-2.27(m,1h),1.83-1.70(m,2h),1.22-1.13(m,9h)。

实施例111(1s,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-1,3-二甲基-2-(甲基磺酰基)-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚111

步骤1：(r)-n-(1-(1h-吲哚-3-基)丙-2-基)丙-2-烯-1-胺

在氮气气氛下将(r)-1-(1h-吲哚-3-基)丙-2-胺(1.0g,5.74mmol)、烯丙基溴(0.49ml,5.74mmol)和dipea(2.04ml,11.48mmol)在thf(20ml)中的混合物在20℃搅拌12小时。反应混合物用水(40ml)稀释且混合物用dcm(40ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(5％meoh/dcm)得到标题化合物(620mg,收率50.4％)，其为黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.10(s,1h)7.64(d,j＝8.0hz,1h)7.38(d,j＝8.0hz,1h),7.21(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,1h),7.05(s,1h),5.89-5.81(m,1h),5.12(d,j＝16.8hz,1h)5.05(d,j＝10.4hz,1h),3.38-3.30(m,1h),3.25-3.21(m,1h),3.10-3.00(m,1h),2.93-2.80(m,2h),1.15(d,j＝6.0hz,3h)。

步骤2：3-(4-((1r,3r)-2-烯丙基-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

将(r)-n-(1-(1h-吲哚-3-基)丙-2-基)丙-2-烯-1-胺(来自步骤1,500.0mg,2.33mmol)、3-(3,5-二氟-4-甲酰基-苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(730.95mg,2.33mmol)和乙酸(0.27ml,4.67mmol)在甲苯(2ml)中的混合物在90℃搅拌12小时。冷却至25℃后，反应混合物用水(40ml)稀释，用etoac(100ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(20％etoac/石油醚)得到标题化合物(860mg,收率72.3％)，其为黄色固体。将产物直接用于下一步。

步骤3：(1r,3r)-2-烯丙基-1-(4-(氮杂环丁-3-基氧基)-2,6-二氟苯基)-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚

在氮气下在-15℃向3-(4-((1r,3r)-2-烯丙基-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(来自步骤2,860.0mg,1.69mmol)在二氯甲烷(5ml)中的混合物中逐滴加入tfa(1.89ml,25.31mmol)且将反应混合物避光且温热至0℃且搅拌3小时。反应混合物用dcm(100ml)稀释且加入饱和nahco3溶液(20ml)。将混合物搅拌5分钟且分离两层。有机层用饱和nahco3溶液(20ml)和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，滤过且真空浓缩得到标题化合物(690mg)，其为黄色固体。lcms:[m+h]⁺410.0。

步骤4：(1r,3r)-2-烯丙基-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚

将(1r,3r)-2-烯丙基-1-(4-(氮杂环丁-3-基氧基)-2,6-二氟苯基)-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚(来自步骤3,690.0mg,1.69mmol)、1-溴-3-氟丙烷(0.03ml,1.69mmol)和dipea(0.25ml,5.06mmol)在dmf(5ml)中的混合物在60℃搅拌24小时。反应混合物用水(50ml)稀释，用etoac(100ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(30％etoac/石油醚)得到标题化合物(500mg,收率63.2％)，其为黄色固体。lcms:[m+h]⁺470.2。

步骤5：(1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚

将(1r,3r)-2-烯丙基-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚(来自步骤4,500.0mg,1.06mmol)和氯三(三苯基膦)铑(i)(492.62mg,0.530mmol)在ch3cn(2ml)和水(0.40ml)中的混合物在100℃在氮气气氛下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃。除去溶剂且混合物通过硅胶柱色谱纯化(2％-5％meoh/dcm)得到标题化合物(300mg,收率65.6％)，其为黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.59(s,1h),7.52(d,j＝7.2hz,1h),7.27-7.23(m,1h),7.16-7.09(m,2h),6.32(d,j＝9.6hz,2h),5.60(s,1h),4.80-4.72(m,1h),4.56(t,j＝6.0hz,1h),4.44(t,j＝6.0hz,1h),3.90-3.80(m,2h),3.52-4.98(m,1h),3.16-3.09(m,2h),3.02-2.98(m,1h),2.67(t,j＝7.2hz,2h),2.54-2.50(m,1h),1.85-1.71(m,2h),1.30(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤6：(1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-9(2h)-羧酸叔丁酯

向(1r,3r)-1-[2,6-二氟-4-[1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基]氧基-苯基]-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚(0.7g,1.63mmol)在乙腈(10ml)中的混合物中加入boc2o(0.71g,3.26mmol)、tea(0.91ml,6.52mmol)和dmap(40mg,0.33mmol)。将反应混合物在25℃搅拌2小时，然后浓缩。残留物通过硅胶色谱纯化(0-5％meoh/dcm)得到标题化合物(0.63g,收率73％)，其为浅黄色油状物。lcms:530.1[m+h]⁺。

步骤7：(1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基-2-(甲基磺酰基)-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-9(2h)-羧酸叔丁酯

在25℃向n,n-二异丙基乙胺(0.34ml,1.89mmol)在dcm(6ml)中的混合物中加入(1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-9(2h)-羧酸叔丁酯(来自步骤6,0.5g,0.94mmol)和甲磺酰氯(163mg,1.42mmol)。将反应混合物在40℃搅拌16小时，然后浓缩。残留物通过硅胶色谱纯化(0-4％meoh/dcm)得到标题化合物(140mg,收率24％)，其为浅黄色油状物。lcms:608.1[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.15(d,j＝8.0hz,1h),7.44(d,j＝7.2hz,1h),7.32-7.22(m,2h),6.29-6.24(m,3h),4.74-4.71(m,1h),4.57-4.42(m,2h),3.81-3.77(m,3h),3.14-3.10(m,3h),3.09(s,3h),2.75-2.71(m,1h),2.66-2.63(m,2h),1.82-1.78(m,2h),1.69(d,j＝7.2hz,3h),1.45(s,9h)。

步骤8：(1s,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-1,3-二甲基-2-(甲基磺酰基)-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-9(2h)-羧酸叔丁酯

在0℃向(1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基-2-(甲基磺酰基)-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-9(2h)-羧酸叔丁酯(来自步骤7,140mg,0.23mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(3ml)中的混合物中加入nah(60％在矿物油中,28mg,0.69mmol)。将反应混合物在0℃搅拌30分钟。逐滴加入ch3i(0.1ml,0.23mmol)。将反应混合物在0℃再搅拌一小时。将饱和nh4cl水溶液(10ml)加到反应混合物中且混合物用dcm(10ml×2)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过硅胶色谱纯化(0-50％etoac/石油醚)得到标题化合物(30mg,收率21％)。lcms:622.2[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cdcl3):8.15(d,j＝8.0hz,1h),7.44(d,j＝8.0hz,1h),7.33-7.23(m,2h),6.50-6.47(m,2h),4.57-4.54(m,1h),4.45-4.42(m,2h),3.78-3.72(m,3h),3.15-3.11(m,1h),3.07(m,3h),2.80-2.60(m,3h),2.58-2.51(m,2h),2.32(s,3h),1.88-1.81(m,2h),1.69(d,j＝7.2hz,3h),1.45(s,9h)。

步骤9：111

在25℃向(1s,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-1,3-二甲基-2-(甲基磺酰基)-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-9(2h)-羧酸叔丁酯(来自步骤8,30mg,0.05mmol)在dcm(1ml)中的混合物中加入tfa(83mg,0.72mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时且将混合物倒入饱和nahco3水溶液(10ml)中且用dcm(10ml×2)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过tlc纯化(9％meoh/dcm)得到111(2.5mg,收率10％)，其为浅黄色固体。lcms:522.1[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.62-7.61(m,1h),7.52(d,j＝7.2hz,1h),7.19-7.11(m,2h),6.55-6.52(d,j＝12.0hz,2h),6.28(s,1h),4.59-4.41(m,3h),3.78-3.71(m,3h),3.23-3.20(m,1h),2.88-2.60(m,6h),2.33(s,3h),1.88-1.81(m,2h),1.45(d,j＝6.0hz,3h)。

实施例112(10r,16br)-1,7,7-三氟-3-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)-10-甲基-7,8,10,11,16,16b-六氢-6h-苯并[2’,3’][1,5]氧氮杂环辛并[5’,4’:1,2]吡啶并[3,4-b]吲哚112

步骤1：3-((1r,3r)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-2(9h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇

将(r)-3-((1-(1h-吲哚-3-基)丙-2-基)氨基)-2,2-二氟丙-1-醇(0.7g,2.61mmol)、4-溴-2,6-二氟苯甲醛(0.58g,2.61mmol)和acoh(0.45ml,7.83mmol)在甲苯(10ml)中的混合物在90℃搅拌12小时。冷却至25℃后，反应混合物用水(50ml)稀释，用etoac(50ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(20％石油醚/etoac)得到标题化合物(0.8g,65％)，其为浅黄色固体。lcms:471.0[m+h]⁺。

步骤2：112

将3-((1r,3r)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-2(9h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇(来自步骤1,0.7g,1.49mmol)、2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(0.99g,7.43mmol)、cui(0.28g,1.49mmol)和k2co3(0.62g,4.46mmol)在正丁腈(10ml)中的混合物在135℃在氮气气氛下搅拌12小时。冷却至25℃后，反应混合物用水(50ml)稀释，用dcm(50ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。所得残留物通过反相色谱纯化(乙腈50-80/0.05％nh4oh/水)得到具有以下结构的3-((1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-2(9h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇(59mg,8％)：

及112(41mg,6％)，其均为白色固体。lcms:504.1[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.40(d,j＝7.6hz,1h),7.20(d,j＝7.6hz,1h),7.01-6.96(m,2h),6.67(s,1h),6.52(dd,j＝12.0,2.4hz,1h),5.71(s,1h),4.54-4.42(dd,j＝47.6,5.2hz,2h),4.45-4.38(m,1h),4.17-4.10(m,1h),4.00(t,j＝5.2hz,2h),3.54-3.43(m,3h),3.23-3.19(m,3h),3.01-2.81(m,5h),2.69-2.63(m,1h),1.26(d,j＝6.4hz,3h)。

实施例113(1r,3’r)-2’-(2-氟-2-甲基丙基)-5-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)-3’-甲基-2,2’,3,3’,4’,9’-六氢螺[茚-1,1’-吡啶并[3,4-b]吲哚]113

步骤1：(1r,3’r)-5-碘-3’-甲基-2,2’,3,3’,4’,9’-六氢螺[茚-1,1’-吡啶并[3,4-b]吲哚]

在氩气下向(2r)-1-(1h-吲哚-3-基)丙-2-胺(479mg,2.74mmol)和5-碘-茚满-1-酮(617mg,2.39mmol)的混悬液中加入异丙醇钛(iv)(1.02g,3.58mmol)且将反应混合物在80℃搅拌3h。将反应混合物冷却至rt，加入乙腈(12ml)，随后逐滴加入三氟乙酸(0.58ml,7.65mmol)。将所得混合物进一步在110℃搅拌18h，然后冷却至0℃。混合物用etoac稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤(×3)。有机相进一步用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，滤过且真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(流动相:环己烷/乙酸乙酯,梯度0％至50％)。合并适当的馏分且蒸发得到标题化合物，其为黄色泡沫状物(310mg,收率31％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3):δ7.67(br.s,1h),7.56-7.51(m,2h),7.41(d,j＝7.9hz,1h),7.25-7.08(m,3h),6.68(d,j＝7.8hz,1h),3.35-3.21(m,2h),3.03-2.89(m,2h),2.71-2.45(m,2h),2.37-2.28(m,1h),1.43(s,1h),1.21(d,j＝6.4hz,3h)；lcms:415.1[m+h]⁺。

步骤2：(1r,3’r)-2’-(2-氟-2-甲基丙基)-5-碘-3’-甲基-2,2’,3,3’,4’,9’-六氢螺[茚-1,1’-吡啶并[3,4-b]吲哚]

在氩气下向(1r,3’r)-5-碘-3’-甲基-2,2’,3,3’,4’,9’-六氢螺[茚-1,1’-吡啶并[3,4-b]吲哚]5a(290mg,0.70mmol)在乙腈(2.1ml)中的溶液中加入碳酸钾(773mg,5.6mmol)和三氟甲磺酸2-氟-2-甲基-丙基酯(cas.145349-17-3,1.25g,5.60mmol)。加完后，将混合物在100℃搅拌40h。将反应混合物冷却至rt，在etoac和水之间分配。有机相进一步用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，滤过且真空浓缩。将粗产物吸附于hmn硅藻土(biotage)上且通过硅胶色谱纯化(流动相:环己烷/乙酸乙酯,梯度0％至10％)。合并适当的馏分且蒸发得到标题化合物，其为黄色泡沫状物(104mg,收率30％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3):δ7.64(d,j＝1.1hz,1h),7.53-7.39(m,2h),7.18-7.06(m,3h),6.98(s,1h),6.86-6.82(m,1h),3.97-3.88(m,1h),3.24-2.92(m,4h),2.72-2.60(m,2h),2.25(ddd,j＝5.3,9.0,14.2hz,1h),2.10-1.92(m,1h),1.30-1.08(m,9h)；lcms:489.1[m+h]⁺。

步骤3：113

标题化合物由(1r,3’r)-2’-(2-氟-2-甲基丙基)-5-碘-3’-甲基-2,2’,3,3’,4’,9’-六氢螺[茚-1,1’-吡啶并[3,4-b]吲哚](31mg,0.06mmol)和2-(3-氟甲基-氮杂环丁-1-基)-乙醇(51mg,0.038mmol)按照用于制备实施例101步骤5的操作制备。将粗产物在c18柱上纯化(流动相:10％至95％乙腈/水,25min,0.1％氨水缓冲液)，随后通过手性hplc纯化(chiralpakic,流动相:10％ipa/庚烷,0.1％二乙胺,历时30min)得到113，其为白色固体(3.6mg,收率11％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.53-7.48(m,1h),7.15-7.01(m,4h),6.95(d,j＝9.4hz,1h),6.77-6.74(m,1h),6.68-6.63(m,1h),4.57(d,j＝5.7hz,1h),4.47-4.44(m,1h),3.97-3.92(m,3h),3.53-3.46(m,2h),3.21-2.80(m,8h),2.71-2.61(m,2h),2.31-2.21(m,1h),2.07(dd,j＝14.4,35.0hz,1h),1.25(d,j＝22.5hz,3h),1.16-1.10(m,6h)；lcms:494.4[m+h]⁺。

实施例116(1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚116

步骤1：4-(1h-吲哚-3-基)丁-2-胺

向4-(1h-吲哚-3-基)丁-2-酮(900mg,4.81mmol)在甲醇(0.25m,475mmol)中的溶液中加入乙酸铵(5当量,24.033mmol)和氰基硼氢化钠(2当量,9.6133mmol)。将混合物加热至40℃且保持4h。将反应混合物浓缩除去溶剂。将残留物在乙酸乙酯和水之间分配且加入15％naoh(4ml)以调节ph至10。有机层用硫酸钠干燥，浓缩得到粗标题化合物(1.0g,收率99％)。lcms:189.4[m+h]⁺。

步骤2：1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3-甲基-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚

将4-(1h-吲哚-3-基)丁-2-胺(400mg,2.1246mmol)、2,6-二氟-4-碘-苯甲醛(2.2308mmol,597.86mg)和1,1,1-三氟丙酮(466.31mg,4.0368mmol)在乙腈(0.5m,81.3mmol)中的混合物在室温搅拌过夜。反应混合物用饱和nahco3溶液淬灭，用dcm(3×5ml)萃取。将合并的有机层干燥(na2so4)，滤过且浓缩。粗产物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-30％iproac/庚烷)得到标题化合物(280mg,收率30％)，其为白色固体。lcms:439.2[m+h]⁺。

步骤3：1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3-甲基-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚

在氮气下向1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3-甲基-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚(350mg,0.7987mmol)、n,n-二异丙基乙胺(5当量,3.994mmol)在1,4-二噁烷(1.2ml)中的溶液中加入三氟甲磺酸(2-氟-2-甲基-丙基)酯(5当量,3.994mmol)。将混合物加热至100℃过夜。加入额外的碳酸钾(5当量,3.994mmol)且将反应混合物在100℃加热1周。将反应混合物冷却至室温，在dcm和水之间分配。分离有机层，用硫酸钠干燥且浓缩。粗产物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-10％iproac/庚烷)得到标题化合物(260mg,收率64％)。lcms:513.5[m+h]⁺。

步骤4：116

在氮气气氛下将1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3-甲基-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚(350mg,0.6831mmol)、2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(3当量,2.049mmol)、碘化亚铜(0.4当量,0.2732mmol)和碳酸钾(3当量,2.049mmol)在丁腈(0.15m,52.2mmol)中的溶液加热至135℃过夜。将反应混合物滤过，浓缩至干。粗产物通过手性sfc纯化(柱:pic100chiral,溶剂a:二氧化碳,溶剂b:0.1％氢氧化铵/甲醇,等度20％乙醇,r.t.0.588min)得到116(21mg,收率6％)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.63(s,1h),7.46-7.39(m,1h),7.19-7.13(m,1h),7.00-6.90(m,2h),6.68-6.60(m,2h),5.70(d,j＝3.8hz,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.93(t,j＝5.4hz,2h),3.25-3.17(m,1h),2.99(t,j＝6.3hz,3h),2.81-2.54(m,6h),1.78(q,j＝12.9,11.9hz,1h),1.64(dd,j＝12.2,6.8hz,1h),1.32(d,j＝21.7hz,3h),1.22(d,j＝21.1hz,3h),0.97(d,j＝6.8hz,3h)。lcms:518.6[m+h]⁺。

实施例117(s)-3-((r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3,4,5,10-四氢氮杂并[3,4-b]吲哚-2(1h)-基)-2-氟-2-甲基丙-1-醇117

步骤1：叔丁基-[3-[1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚-2-基]-2-氟-2-甲基-丙氧基]-二苯基-甲硅烷

在氮气下向1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚(600mg,1.414mmol)和n,n-二异丙基乙胺(3当量,4.243mmol)在1,4-二噁烷(3ml)中的溶液中加入三氟甲磺酸[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2-氟-2-甲基-丙基]酯(2当量,2.829mmol)。将混合物加热至90℃且保持2天。将混合物冷却至室温且在dcm和水之间分配。分离有机层，用硫酸钠干燥，然后浓缩至干。粗产物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-5％iproac/庚烷)得到标题化合物(800mg,收率75％)，其为浅黄色泡沫。lcms:753.1[m+h]⁺。

步骤2：3-[1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚-2-基]-2-氟-2-甲基-丙-1-醇

向叔丁基-[3-[1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚-2-基]-2-氟-2-甲基-丙氧基]-二苯基-甲硅烷(800mg,1.063mmol)在四氢呋喃(0.25m,52.2mmol)中的溶液中加入四丁基氟化铵(tbaf)在thf中的溶液(1.0当量,1.063mmol)。将反应混合物在室温搅拌6hr。通过lcms监测反应显示不完全转化。因此，再加入一当量tbaf且将混合物搅拌过夜。第二天将反应混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配。分离有机层，用硫酸钠干燥，然后浓缩至干。粗产物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-30％iproac/庚烷)得到标题化合物(322mg,收率59％)，其为白色固体。lcms:515.0[m+h]⁺。

步骤3：117、118、119

将3-[1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚-2-基]-2-氟-2-甲基-丙-1-醇(322mg,0.6261mmol)、2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(3当量,1.878mmol)、碳酸钾(3当量,1.878mmol)和碘化亚铜(0.4当量,0.2504mmol)在丁腈(0.15m,47.8mmol)中的混合物脱气5min。然后将反应混合物加热至125℃且保持6hr。将反应混合物冷却至室温且滤过。将滤液浓缩且进行手性sfc分离(柱:pic100chiral,溶剂a:二氧化碳,溶剂b:0.1％氢氧化铵/甲醇,等度30％乙醇)得到118(8.7mg,收率2.7％)、117(7.1mg,收率2.2％)和119(7.2mg,收率2.2％)。

117:rt＝0.701min,¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.57(s,1h),7.47-7.38(m,1h),7.17-7.10(m,1h),7.00-6.86(m,2h),6.66(d,j＝10.9hz,2h),5.45(s,1h),4.85(t,j＝5.7hz,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.93(t,j＝5.5hz,2h),3.50(ddd,j＝17.7,11.7,5.7hz,1h),3.40-3.34(m,2h),3.30-3.21(m,3h),3.00-2.95(m,2h),2.94-2.80(m,2h),2.78-2.57(m,4h),2.03-1.78(m,2h),1.22(d,j＝22.0hz,3h)

实施例118(r)-3-((r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3,4,5,10-四氢氮杂并[3,4-b]吲哚-2(1h)-基)-2-氟-2-甲基丙-1-醇118

按照实施例117的操作制备118(8.7mg,收率2.7％)。

118:rt＝1.096min,¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.56(s,1h),7.43(dd,j＝7.4,1.5hz,1h),7.14(dt,j＝8.0,0.9hz,1h),7.00-6.89(m,2h),6.65(d,j＝10.9hz,2h),5.41(s,1h),4.87(t,j＝5.7hz,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.92(t,j＝5.5hz,2h),3.51-3.33(m,2h),3.28(s,1h),3.10-2.81(m,7h),2.78-2.53(m,4h),1.88(d,j＝41.4hz,2h),1.21(d,j＝22.1hz,3h)。

实施例1193-((s)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3,4,5,10-四氢氮杂并[3,4-b]吲哚-2(1h)-基)-2-氟-2-甲基丙-1-醇119

按照实施例117的操作制备119(7.2mg,收率2.2％)。

119:rt＝0.787min,¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.57(s,1h),7.46-7.39(m,1h),7.20-7.09(m,1h),7.01-6.86(m,2h),6.66(d,j＝10.9hz,2h),5.45(s,1h),4.85(t,j＝5.7hz,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.92(t,j＝5.4hz,2h),3.55-3.45(m,2h),3.28-3.25(m,2h),3.13-2.56(m,11h),2.02-1.78(m,2h),1.22(d,j＝22.0hz,3h)。

实施例120(6r,8r)-8-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-6,7,8,9-四氢-5h-吡咯并[2,3-b:5,4-c’]二吡啶120

步骤1：(2-氟-2-甲基-丙基)-[1-甲基-2-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-乙基]-胺

将三乙酰氧基硼氢化钠(4.33g,20.5mmol)分批加到1-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-丙-2-酮(2.36g,13.6mmol)和2-氟-2-甲基-丙基胺盐酸盐(2.25g,17.6mmol)在二氯甲烷(40ml)中的混合物中。加完后，将混合物在rt搅拌18h。混合物用二氯甲烷稀释且用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且蒸发得到标题化合物的外消旋混合物，其为棕色油状物，其在静置时固化(3.1g,收率93％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ9.36(s,1h),8.30(dd,j＝1.6,4.8hz,1h),7.94(dd,j＝1.3,7.9hz,1h),7.17(d,j＝1.9hz,1h),7.07(dd,j＝4.7,7.8hz,1h),3.03-2.97(m,1h),2.90-2.65(m,4h),1.34(d,j＝23.8hz,6h),1.10-1.08(m,3h)；lcms:250.2[m+h]⁺。

步骤2：8-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-6-甲基-6,7,8,9-四氢-5h-二吡啶并[2,3-b；4’,3’-d]吡咯

在氩气下向(2-氟-2-甲基-丙基)-[1-甲基-2-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-乙基]-胺(2.0g,8.0mmol)在甲苯(66ml)中的溶液中加入2,6-二氟-4-碘-苯甲醛(4.36g,16.2mmol)和乙酸(16.4ml)。将混合物在100℃加热48h。将反应混合物冷却至rt且真空浓缩。残留物通过硅胶色谱纯化(流动相:乙酸乙酯/二氯甲烷,梯度0％至20％)得到标题化合物的立体异构体的(6r,8r)-和(6s,8s)-混合物，其为米色固体(2.0g,收率50％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ9.61(s,1h),8.39-8.35(m,1h),8.13-8.10(m,1h),8.03(dd,j＝1.5,4.9hz,1h),7.84-7.81(m,1h),7.70-7.64(m,1h),7.05-7.01(m,1h),5.28-5.27(m,1h),3.67-3.63(m,1h),3.19-3.01(m,1h),2.94-2.81(m,1h),2.64-2.55(m,1h),2.44-2.32(m,1h),1.29-1.15(m,6h),1.10(d,j＝6.5hz,3h)；lcms:500.1[m+h]⁺。

步骤3：8-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-6-甲基-9-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-6,7,8,9-四氢-5h-二吡啶并[2,3-b；4’,3’-d]吡咯和8-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-6-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1h-二吡啶并[2,3-b；4’,3’-d]吡咯

将氢化钠(52mg,1.3mmol,60％在油中的混悬液)加到8-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-6-甲基-6,7,8,9-四氢-5h-二吡啶并[2,3-b；4’,3’-d]吡咯(500mg,1.0mmol)在dmf(10ml)中的溶液中。加完后，将混合物在rt搅拌20min，加入(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(154μl,221mg,1.33mmol)且继续搅拌2h。混合物通过加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，用盐水稀释且用乙酸乙酯萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，滤过且蒸发得到油状物。残留油状物通过反相色谱纯化(15mm,c18puriflash柱,流动相:10-98％乙腈/水(+0.1％甲酸))。收集适当的馏分且蒸发得到两种产物。得到第一个洗脱产物8-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-6-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1h-二吡啶并[2,3-b；4’,3’-d]吡咯，其为橙色油状物(300mg,47％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)8.18-8.14(3h,m),8.06-8.04(1h,m),6.06-6.05(2h,m),5.37(1h,s),5.30-5.30(2h,m),3.68-3.63(3h,m),3.19-3.11(1h,m),2.96-2.88(1h,m),2.66-2.61(1h,m),2.34(1h,dd,j＝15.1,28.0hz),1.26-1.14(6h,m),1.10-1.07(3h,m),0.98-0.93(2h,m),-0.04(s,9h)；lcms:630.2[m+h]⁺。得到第二个洗脱产物8-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-6-甲基-9-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-6,7,8,9-四氢-5h-二吡啶并[2,3-b；4’,3’-d]吡咯，其为无色油状物(144mg,收率23％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.25(dd,j＝1.6,4.8hz,1h),7.79(dd,j＝1.6,7.8hz,1h),7.07(dd,j＝4.8,7.7hz,1h),5.50-5.47(m,2h),5.30(s,2h),5.14(d,j＝10.9hz,1h),3.55-3.50(m,1h),3.30-3.25(m,2h),2.91-2.70(m,2h),2.62-2.45(m,2h),1.35(d,j＝21.4hz,3h),1.25-1.18(m,3h),1.10(d,j＝6.6hz,3h),0.68-0.62(m,2h),-0.11(s,9h)；lcms:630.2[m+h]⁺。

步骤4：8-{2,6-二氟-4-[2-(3-氟甲基-氮杂环丁-1-基)-乙氧基]-苯基}-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-6-甲基-9-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-6,7,8,9-四氢-5h-二吡啶并[2,3-b；4’,3’-d]吡咯

8-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-6-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1h-二吡啶并[2,3-b；4’,3’-d]吡咯(144mg,0.22mmol)、根据wo2013/090836第124页制备的2-(3-氟甲基-氮杂环丁-1-基)-乙醇(160mg,1.20mmol；casno.:1443984-69-7,wo2013/090836)、碘化亚铜(9.5mg,0.05mmol)和碳酸钾(99mg,0.72mmol)在丁腈(2ml)中的混合物用三次真空/氩气循环脱气。将反应混合物在140℃加热24h，冷却至室温且用乙酸乙酯稀释。固体通过滤过从反应混合物中除去且固体用乙酸乙酯洗涤。合并的滤液用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，滤过且减压浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(流动相:0-10％(2n氨/甲醇)/二氯甲烷)。收集适当的馏分且蒸发得到标题化合物的立体异构体的(6r,8r)-和(6s,8s)-混合物，其为橙色油状物(17.2mg,收率21％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.23(dd,j＝1.6,4.8hz,1h),7.79-7.76(m,1h),7.04(dd,j＝4.8,7.8hz,1h),5.61(d,j＝10.8hz,1h),5.43(s,1h),5.29-5.28(m,1h),4.93(d,j＝10.8hz,1h),4.55(d,j＝5.7hz,1h),4.43(d,j＝5.7hz,1h),3.90-3.86(m,2h),3.59-3.43(m,3h),3.35-3.23(m,2h),3.15-3.10(m,2h),2.95-2.75(m,4h),2.60-2.43(m,2h),1.32(d,j＝21.4hz,3h),1.24-1.17(m,3h),1.10-1.07(m,3h),0.82-0.64(m,2h),-0.13(s,9h)；lcms:635.4[m+h]⁺。

步骤5：120和121

在氩气下向8-{2,6-二氟-4-[2-(3-氟甲基-氮杂环丁-1-基)-乙氧基]-苯基}-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-6-甲基-9-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-6,7,8,9-四氢-5h-二吡啶并[2,3-b；4’,3’-d]吡咯(100mg,0.16mmol)在二氯甲烷(1ml)中的混合物中加入tfa(1ml)且将混合物在rt搅拌2h。将反应混合物真空浓缩且所得残留物用饱和碳酸氢钠溶液处理且用二氯甲烷(×2)萃取。合并的有机萃取物用无水硫酸钠干燥，滤过且将滤液蒸发得到黄色油状物。所得油状物通过硅胶色谱纯化(流动相:0-20％(2n氨/甲醇)/二氯甲烷)。合并适当的馏分且蒸发。所得残留物通过反相手性色谱纯化(chiralpakic柱21.2×250mm,c18,15微米,流动相:20％ipa/庚烷,0.1％二乙胺)。合并适当的馏分且蒸发得到两种产物。获得第一个洗脱的反式非对映异构体120，其为白色固体(13mg,收率16％)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6):δ11.11(s,1h),8.08(dd,j＝1.5,4.7hz,1h),7.79(dd,j＝4.6,4.6hz,1h),6.99(dd,j＝4.8,7.8hz,1h),6.62(d,j＝11.1hz,2h),5.14(s,1h),4.55(d,j＝6.2hz,1h),4.44(d,j＝6.2hz,1h),3.93(t,j＝5.4hz,2h),3.51-3.44(m,1h),3.30-3.29(m,1h),2.98(t,j＝6.4hz,2h),2.88-2.64(m,6h),2.59-2.54(m,1h),2.43-2.30(m,1h),1.25-1.11(m,6h),1.05(d,j＝6.5hz,3h)；lcms:505.3[m+h]⁺。

实施例121(6s,8s)-8-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-6,7,8,9-四氢-5h-吡咯并[2,3-b:5,4-c’]二吡啶121

按照实施例120的操作将121分离为第二个洗脱的反式非对映异构体，其为白色固体(13mg,收率16％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.78(s,1h),8.07(dd,j＝1.5,4.8hz,1h),7.77(dd,j＝1.3,7.8hz,1h),7.01(dd,j＝4.7,7.6hz,1h),6.41-6.36(m,2h),5.20(s,1h),4.56(d,j＝5.7hz,1h),4.44(d,j＝5.7hz,1h),3.92-3.87(m,2h),3.73-3.65(m,1h),3.48(t,j＝7.2hz,2h),3.17-3.05(m,3h),2.93-2.79(m,4h),2.62-2.54(m,1h),2.37(dd,j＝14.9,26.8hz,1h),1.25-1.13(m,6h),1.10(d,j＝6.8hz,3h)；lcms:505.3[m+h]⁺。

实施例1223-((1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-2(1h)-基)-2-氟-2-甲基丙-1-醇122

步骤1：(s)-1-(1h-吲哚-1-基)丙-2-醇

在冰浴中向1h-吲哚(5.0g,42.68mmol)在thf(75ml)中的搅拌溶液中加入nah(60％在矿物油中,2.05g,51.22mmol)且将混合物搅拌30分钟。向反应混合物中逐滴加入(s)-2-甲基氧杂环丙烷(4.96g,85.36mmol)且将混合物在20℃搅拌4小时。将水(100ml)加到反应混合物中且混合物用etoac(100ml×2)洗涤。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(20％etoac/石油醚)得到标题化合物(6.5g,收率87％)，其为浅黄色油状物。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.65(d,j＝8.0hz,1h),7.38(d,j＝8.0hz,1h),7.25-7.21(m,1h),7.15-7.11(m,2h),6.54(d,j＝3.2hz,1h),4.22-4.20(m,3h),1.26(d,j＝6.8hz,3h)。

步骤2：甲磺酸(s)-1-(1h-吲哚-1-基)丙-2-基酯

在冰浴中向(s)-1-(1h-吲哚-1-基)丙-2-醇(来自步骤1,6.5g,34.24mmol)和tea(14.32ml,102.72mmol)在dcm(120ml)中的搅拌溶液中逐滴加入甲磺酰氯(5.3ml,68.48mmol)。将反应混合物在20℃搅拌2小时。混合物用dcm(100ml)稀释，用1nhcl(100ml)、饱和nahco3水溶液(100ml)和盐水(100ml)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩得到标题化合物(8g,收率92％)，其为黄色油状物，其直接用于下一步。lcms:253.8[m+h]⁺。

步骤3：(r)-1-(2-叠氮基丙基)-1h-吲哚

向nan3(4.71g,72.45mmol)在dmf(120ml)中的混合物中加入甲磺酸[(1s)-2-吲哚-1-基-1-甲基-乙基]酯(来自步骤2,8g,31.58mmol)且将反应混合物在60℃搅拌2小时。冷却至25℃后，反应混合物用etoac(500ml)稀释，用盐水(500ml×3)洗涤。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩得到粗标题化合物(5.8g,收率92％)，其为黄色油状物，其直接用于下一步。lcms:200.9[m+h]⁺。

步骤4：(r)-1-(1h-吲哚-1-基)丙-2-胺

将(r)-1-(2-叠氮基丙基)-1h-吲哚(来自步骤3,5.8g,28.97mmol)和pph3(11.4g,43.45mmol)在thf(100ml)中的混合物在60℃搅拌1小时。将水(50ml)加到反应混合物中且将混合物在60℃搅拌4小时。冷却至25℃后，反应混合物用水(100ml)稀释，用dcm(100ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化(10％meoh/dcm)得到标题化合物(3.2g,收率63％)，其为黄色油状物。lcms:174.8[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.65(d,j＝8.0hz,1h),7.38(d,j＝8.0hz,1h),7.24-7.20(m,1h),7.14-7.10(m,2h),6.52(d,j＝2.4hz,1h),4.14-4.09(m,1h),3.94-3.90(m,1h),3.48-3.45(m,1h),1.15(d,j＝6.0hz,3h)。

步骤5：n-((r)-1-(1h-吲哚-1-基)丙-2-基)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2-氟-2-甲基丙-1-胺

将三氟甲磺酸[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2-氟-2-甲基-丙基]酯(1.37g,2.87mmol)、dipea(1.02ml,5.74mmol)和(2r)-1-吲哚-1-基丙-2-胺(方案1中间体6,500mg,2.87mmol)在1,4-二噁烷(15ml)中的混合物在90℃搅拌12小时。反应混合物用水(50ml)稀释，用dcm(50ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(25％etoac/石油醚)得到标题化合物(1.1g,收率76％)，其为无色油状物。lcms:503.2[m+h]⁺。

步骤6：3-(4-((1r,3r)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

将n-((r)-1-(1h-吲哚-1-基)丙-2-基)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2-氟-2-甲基丙-1-胺(来自步骤1,1.0g,1.99mmol)、hoac(0.34ml,5.97mmol)和3-(3,5-二氟-4-甲酰基-苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1.21ml,1.99mmol)在甲苯(18ml)中的混合物在110℃搅拌12小时。冷却至25℃后，反应混合物用水(50ml)稀释，用etoac(50ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(20％石油醚/etoac)得到标题化合物(750mg,收率47％)，其为浅黄色固体。lcms:798.2[m+h]⁺。

步骤7：3-(3,5-二氟-4-((1r,3r)-2-(2-氟-3-羟基-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

将3-(4-((1r,3r)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(来自步骤2,0.65g,0.81mmol)和tbaf(1.63ml,1.63mmol)在thf(10ml)中的混合物在25℃搅拌12小时。反应混合物用水(50ml)稀释，用etoac(50ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(60％etoac/石油醚)得到标题化合物(350mg,收率77％)，其为浅黄色油状物。lcms(5-95ab/1.5min):rt＝0.886min,[m+h]⁺560.1。

步骤8：3-((1r,3r)-1-(4-(氮杂环丁-3-基氧基)-2,6-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-2(1h)-基)-2-氟-2-甲基丙-1-醇

在冰浴中向3-(3,5-二氟-4-((1r,3r)-2-(2-氟-3-羟基-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(来自步骤3,350mg,0.63mmol)在1,4-二噁烷(2ml)中的溶液中加入浓硫酸(0.17ml,3.13mmol)。将反应混合物在25℃搅拌0.5小时。将反应混合物倒入饱和na2co3(10ml)中，用dcm(20ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩得到标题化合物(240mg,收率84％)，其为黄色固体。lcms:460.2[m+h]⁺。

步骤9：122

将3-((1r,3r)-1-(4-(氮杂环丁-3-基氧基)-2,6-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-2(1h)-基)-2-氟-2-甲基丙-1-醇(来自步骤4,240mg,0.52mmol)、dipea(0.28ml,1.57mmol)和1-碘-3-氟丙烷(1.21ml,0.52mmol)在dmf(5ml)中的混合物在25℃搅拌2小时。反应混合物用水(20ml)稀释，用etoac(20ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。所得残留物通过反相色谱纯化(乙腈55-85/0.05％nh4oh/水)得到122(32mg,收率12％)，其为浅黄色固体。lcms:520.2[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.38-7.36(d,j＝8.0hz,1h),7.31-7.30(d,j＝8.0hz,1h),7.10(m,1h),6.96(m,1h),6.46-6.41(m,2h),5.82(s,1h),5.40-5.39(m,1h),4.82-4.79(m,1h),4.51-4.49(m,1h),4.39-4.36(m,1h),4.25-4.06(m,2h),3.85-3.75(m,4h),3.39-3.34(m,1h),3.21-3.01(m,3h),2.65(t,j＝7.6hz,2h),2.51-2.42(m,1h),1.78-1.70(m,2h),1.16-1.10(m,6h)。

实施例123(1r,5r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-5-甲基-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚123

步骤1：3-(1h-吲哚-3-基)丁酰胺

向3-(1h-吲哚-3-基)丁酸(0.5g,2mmol)在乙醚(0.5m,40mmol)中的溶液中加入亚硫酰氯(1.1当量,3mmol)。将反应混合物在室温搅拌1hr。在0℃向该混合物中逐滴加入氢氧化铵/h2o(5当量,10mmol,25％v/v)。将混合物搅拌30min，然后用水(25ml)稀释，然后用dcm(2×25ml)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥，然后浓缩得到标题化合物(350mg,收率70％)。lcms:203.1[m+h]⁺。

步骤2：3-(1h-吲哚-3-基)丁-1-胺

在室温在氮气下将3-(1h-吲哚-3-基)丁酰胺(a,350mg,1.7305mmol)在四氢呋喃(0.2m,106mmol)中的溶液加到氢化铝锂(2m)在thf中的溶液(3当量,5.1916mmol)中。然后将反应混合物加热至回流且保持3hr。然后将混合物冷却至0℃，通过先后缓慢加入0.3ml水和0.3ml15％naoh溶液淬灭。混合物通过硅藻土滤过且滤液用硫酸钠干燥。通过旋转蒸发除去溶剂得到粗标题化合物(290mg,收率89％)。lcms:189.1[m+h]⁺。

步骤3：1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-5-甲基-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚

将3-(1h-吲哚-3-基)丁-1-胺(1200mg,6.3738mmol)、2,6-二氟-4-碘-苯甲醛(1793.6mg,6.6925mmol)和三氟乙酸(1380.8mg,12.110mmol)在乙腈(1m,122mmol)中的混合物加热至80℃过夜。将混合物在dcm和饱和nahco3之间分配。分离水层，然后用dcm(3×50ml)萃取。将合并的有机层干燥(na2so4)，滤过且浓缩。粗产物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-50％iproac/庚烷)得到标题化合物(1260mg,收率45％)，其为浅黄色固体。lcms:439.2[m+h]⁺。

步骤4：1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-5-甲基-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚

在氮气下向1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-5-甲基-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚(500mg,1.141mmol)和n,n-二异丙基乙胺(4当量,4.564mmol)在1,4-二噁烷(5ml)中的溶液中加入三氟甲磺酸(2-氟-2-甲基-丙基)酯(4当量,4.564mmol)。当通过lcms监测反应显示不完全转化时，将混合物加热至80℃过夜。因此，引入额外的三氟甲磺酸(2-氟-2-甲基-丙基)酯(4当量,4.564mmol)和n,n-二异丙基乙胺(4当量,4.564mmol)。然后将混合物加热至100℃且保持20hr。将混合物在dcm和水之间分配。分离有机层，用硫酸钠干燥且浓缩至干。粗产物通过快速柱色谱纯化(0-20％iproac/庚烷)得到标题化合物(427mg,收率73％)。

步骤5：123、124、125、126

在氮气气氛下将1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-5-甲基-3,4,5,10-四氢-1h-氮杂并[3,4-b]吲哚(420mg,0.8197mmol)、2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(3当量,2.459mmol)、碘化亚铜(0.4当量,0.3279mmol)和碳酸钾(3当量,2.459mmol)在丁腈(0.15m,62.6mmol)中的溶液加热至135℃过夜。将反应混合物冷却至室温且滤过。将滤液浓缩得到粗产物(300mg,收率71％)。混合物进一步通过sfc纯化(柱:pic100chiral,溶剂a:二氧化碳,溶剂b:0.1％氢氧化铵/甲醇,等度20％乙醇)得到126(24.7mg,收率4.8％)、125(23.2mg,收率4.5％)、124(17.8mg,收率3.4％)和123(18.9mg,收率3.7％)。

123:r.t.0.376min,¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.28(s,1h),7.60-7.52(m,1h),7.22-7.11(m,1h),6.92(dddd,j＝21.3,8.1,7.0,1.2hz,2h),6.74-6.64(m,2h),5.37(s,1h),4.50(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.94(t,j＝5.4hz,2h),3.59(q,j＝6.9hz,1h),3.29(s,2h),3.10-3.01(m,1h),2.99(t,j＝6.6hz,2h),2.92(ddd,j＝14.0,9.2,4.7hz,1h),2.84-2.65(m,4h),2.41(dd,j＝24.4,14.6hz,1h),2.18-2.04(m,1h),1.72(dd,j＝12.8,7.1hz,1h),1.49(d,j＝7.1hz,3h),1.18(dd,j＝21.6,1.9hz,6h)。

实施例124(1s,5s)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-5-甲基-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚124

按照实施例123的操作制备124(24.7mg,收率4.8％)。

124:r.t.0.565min,¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.28(s,1h),7.60-7.50(m,1h),7.16(ddd,j＝8.0,1.3,0.7hz,1h),6.92(dddd,j＝21.3,8.1,7.0,1.2hz,2h),6.74-6.63(m,2h),5.37(s,1h),4.50(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.94(t,j＝5.4hz,2h),3.59(q,j＝6.9hz,1h),3.29(s,2h),3.11-2.87(m,4h),2.85-2.62(m,4h),2.48-2.27(m,1h),2.10(ddd,j＝14.1,9.4,4.8hz,1h),1.72(dd,j＝13.4,7.7hz,1h),1.49(d,j＝7.1hz,3h),1.18(dd,j＝21.5,1.9hz,6h)。

实施例125(1r,5s)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-5-甲基-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚125

按照实施例123的操作制备125(23.2mg,收率4.5％)。

125:r.t.0.588min,¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.37(s,1h),7.49-7.40(m,1h),7.17-7.10(m,1h),7.01-6.87(m,2h),6.65(d,j＝10.9hz,2h),5.41(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.93(t,j＝5.4hz,2h),3.51-3.35(m,1h),3.29-3.20(m,2h),3.02-2.95(m,2h),2.94-2.79(m,2h),2.78-2.52(m,4h),2.42-2.29(m,1h),1.70-1.59(m,1h),1.31(d,j＝7.2hz,3h),1.26(dd,j＝21.4,3.7hz,6h)。

实施例126(1s,5r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-5-甲基-1,2,3,4,5,10-六氢氮杂并[3,4-b]吲哚126

按照实施例123的操作制备126(24.7mg,收率4.8％)。

126:r.t.0.789min,¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.37(s,1h),7.49-7.39(m,1h),7.19-7.09(m,1h),7.01-6.87(m,2h),6.65(d,j＝10.8hz,2h),5.42(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.93(t,j＝5.4hz,2h),3.46-3.41(m,1h),3.26-3.20(m,2h),2.98(dd,j＝7.3,6.0hz,2h),2.94-2.78(m,2h),2.77-2.52(m,4h),2.41-2.28(m,0h),1.63(d,j＝14.1hz,0h),1.31(d,j＝7.2hz,3h),1.26(dd,j＝21.5,3.7hz,6h)。

实施例127n-(3,5-二氟-4-((1r,3r)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺127

步骤1：(r)-n-(1-(1h-吲哚-1-基)丙-2-基)-2-氟-2-甲基丙-1-胺

向(2r)-1-吲哚-1-基丙-2-胺(1.0g,5.74mmol)在1,4-二噁烷(10ml)中的溶液中加入三氟甲磺酸(2-氟-2-甲基-丙基)酯(1.42g,6.31mmol)，随后加入n,n-二异丙基乙胺(2.85ml,17.22mmol)。将反应混合物在80℃搅拌16小时。然后将混合物浓缩且残留物通过硅胶柱色谱纯化(dcm)得到标题化合物(1.1g,77％)，其为浅黄色油状物。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.63(d,j＝8.0hz,1h),7.38(d,j＝8.0hz,1h),7.24-7.17(m,1h),7.16-7.06(m,2h),6.50(d,j＝3.2hz,1h),4.16-3.98(m,2h),3.21-3.11(m,1h),2.82-2.71(m,1h),2.60-2.47(m,1h),1.36-1.26(m,6h),1.08(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤2：(1r,3r)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚

向4-溴-2,6-二氟苯甲醛(1.6g,7.24mmol)和(r)-n-(1-(1h-吲哚-1-基)丙-2-基)-2-氟-2-甲基丙-1-胺(1.8g,7.24mmol)在甲苯(18ml)中的溶液中加入acoh(1.04ml,18.1mmol)。将反应混合物在110℃搅拌16小时。冷却至30℃后，反应混合物用etoac(100ml)稀释，用饱和na2co3(30ml)、水(30ml)和盐水(30ml)洗涤。混合物用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化(0-9％etoac/石油醚)，随后通过制备性tlc纯化(9％etoac/石油醚)得到标题化合物(0.4g,收率12％)，其为浅黄色固体。lcms:451.3[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.50(d,j＝7.6hz,1h),7.33(d,j＝8.0hz,1h),7.22-7.16(m,1h),7.12-7.01(m,3h),5.96(s,1h),5.46(s,1h),4.36-4.32(m,1h),4.07-4.04(m,1h),3.95-3.82(m,1h),3.03(t,j＝14.8hz,1h),2.35-2.18(m,1h),1.27-1.10(m,9h)。

步骤3：3-((3,5-二氟-4-((1r,3r)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

向(1r,3r)-1-(4-溴-2,6-二氟-苯基)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚(0.35g,0.78mmol)和3-氨基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(0.20g,1.2mmol)在甲苯(4ml)中的溶液中加入(r)-(+)-2,2’-二(二苯基膦基)-1,1’-联萘(0.097g,0.16mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(71mg,0.08mmol)和叔丁醇钠(0.22g,2.33mmol)。在氮气气氛下将反应混合物在80℃搅拌16小时。将混合物滤过且浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化(0-50％etoac/石油醚)得到标题化合物(0.40g,收率95％)，其为浅黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.48(d,j＝7.6hz,1h),7.32(d,j＝8.0hz,1h),7.20-7.13(m,1h),7.10-7.04(m,1h),6.00-5.92(m,3h),5.34(s,1h),4.35-4.24(m,4h),4.18-4.09(m,1h),4.03(dd,j＝11.2,3.2hz,1h),3.92-3.82(m,1h),3.73(dd,j＝9.2,4.4hz,2h),2.95(t,j＝14.4hz,1h),2.39-2.24(m,1h),1.45(s,9h),1.26-1.10(m,9h)。

步骤4：n-(3,5-二氟-4-((1r,3r)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯基)氮杂环丁-3-胺

在0℃向3-[3,5-二氟-4-[(1r,3r)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基]苯氨基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(来自步骤2,0.35g,0.65mmol)在1,4-二噁烷(4ml)中的溶液中加入硫酸(0.34ml,6.45mmol)。将混合物在18℃搅拌30分钟。将饱和nahco3水溶液(20ml)加到混合物中且混合物用etoac(40ml×2)萃取。合并的有机层用盐水(20ml×2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化(0-10％meoh(0.5％tea)/dcm)得到标题化合物(0.2g,收率70％)，其为浅黄色固体。lcms:443.2[m+h]⁺。

步骤5：127

向n-[3,5-二氟-4-[(1r,3r)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基]苯基]氮杂环丁-3-胺(0.20g,0.45mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(1.5ml)中的溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(0.22ml,1.36mmol)，随后加入1-碘-3-氟丙烷(85mg,0.45mmol)。将反应混合物在25℃搅拌16小时。将混合物滤过且浓缩。残留物通过反相色谱纯化(乙腈63-93％/0.05％nh4oh/水)得到127(20.2mg,收率9％)，其为浅黄色固体。lcms:503.3[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.38(d,j＝7.6hz,1h),7.31(d,j＝7.6hz,1h),7.11-7.04(m,1h),7.01-6.93(m,1h),6.08(d,j＝11.2hz,2h),5.82(s,1h),5.30(s,1h),4.56-4.35(m,2h),4.22(dd,j＝11.6,4.0hz,1h),4.09(dd,j＝11.2,3.2hz,1h),4.06-4.00(m,1h),3.91-3.83(m,1h),3.82-3.74(m,2h),3.00-2.87(m,3h),2.66(t,j＝7.6hz,2h),2.43-2.27(m,1h),1.83-1.68(m,2h),1.22-1.09(m,9h)。

实施例128(1r,3r)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-1-(4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[3,2-c]吡啶128

如下所述将来自实施例130步骤3的反式异构体转化为最终产物且对映异构体128和129通过手性sfc分离(固定相:ad；流动相:meohw/0.1％nh4oh)。

128:14.5mg；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.92(ddd,j＝7.9,1.3,0.7hz,1h),7.26(ddd,j＝8.0,7.1,1.3hz,1h),7.20(ddd,j＝8.2,7.1,1.2hz,1h),7.10-7.04(m,3h),6.80(d,j＝8.7hz,2h),5.12(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.85(t,j＝5.4hz,2h),3.37-3.25(m,2h),3.24-3.15(m,1h),2.98(brs,2h),2.84-2.64(m,6h),2.44(t,j＝14.7hz,1h),1.43(d,j＝21.8hz,3h),1.28(d,j＝21.6hz,3h),1.03(d,j＝6.7hz,3h)；lcms:485.2[m+h]⁺。

实施例129(1s,3s)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-1-(4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[3,2-c]吡啶129

按照实施例128的操作制备129。

129:9.9mg；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.92(ddd,j＝8.0,1.2,0.7hz,1h),7.69(d,j＝11.8hz,1h),7.29-7.23(m,1h),7.23-7.16(m,1h),7.10-7.05(m,2h),5.12(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.85(t,j＝5.6hz,2h),3.31(s,4h),3.25-3.13(m,1h),2.98(t,j＝6.5hz,2h),2.83-2.54(m,6h),2.48-2.41(m,1h),1.43(d,j＝21.7hz,3h),1.28(d,j＝21.6hz,3h),1.03(d,j＝6.7hz,3h)；lcms:485.2[m+h]⁺。

实施例130(1s,3r)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-1-(4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[3,2-c]吡啶130

步骤1：2-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯并[b]噻吩

将苯并噻吩-2-甲醛(3.80g,24.4mmol)、乙酸铵(1.63g,21.3mmol)在硝基乙烷(20ml)中的混合物在100℃加热5hr。将反应混合物冷却且用乙酸异丙酯(ipac)稀释。溶液用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩。残留物用庚烷/ipac研磨且固体通过滤过收集得到2-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯并[b]噻吩(2.90)，其为橙色固体。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.35(q,j＝1.0hz,1h),7.93-7.82(m,2h),7.66(s,1h),7.52-7.31(m,2h),2.64(d,j＝1.0hz,3h)。

步骤2：1-(苯并[b]噻吩-2-基)丙-2-胺

将2-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯并[b]噻吩(2.90g,23.4mmol)在无水thf(50ml)中的溶液在冰浴中冷却且缓慢加入lah(19.2ml2m在thf中的溶液)且将所得混合物在环境温度搅拌1hr，然后回流2hr且在环境温度搅拌过夜。将所得混悬液在冰浴中冷却且先后用几块方冰和2nnaoh(5ml,2n)淬灭。混悬液通过硅藻土滤过同时用ipac洗涤。滤液用硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过快速色谱纯化(硅胶,0-10％meoh/dcm)得到橙色油状物(1.10g)。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.80-7.74(m,1h),7.72-7.66(m,1h),7.35-7.23(m,2h),7.09-7.02(m,1h),3.34-3.20(m,1h),3.02-2.93(m,1h),2.86-2.77(m,1h),1.18(d,j＝6.3hz,3h)。lcms:192.05[m+h]⁺。

步骤3：顺式和反式-1-(4-碘苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[3,2-c]吡啶

将1-(苯并[b]噻吩-2-基)丙-2-胺(150mg,0.84mmol)、4-碘苯甲醛(182mg,0.84mmol)和tfa(1.07ml)在二氯乙烷(1.5ml)中的混合物在微波反应器中在150℃加热50min。将反应混合物冷却且浓缩。将残留物溶于ipac且与饱和碳酸氢钠一起搅拌。分离有机层，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过快速色谱纯化(硅胶,0-10％meoh/dcm)且分离顺式和反式非对映异构体。

顺式异构体:150mg；¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.74(ddd,j＝8.0,1.1,0.7hz,1h),7.67-7.62(m,2h),7.18(ddd,j＝8.1,7.2,1.2hz,1h),7.10-7.01(m,3h),6.85-6.70(m,1h),5.25-5.13(m,1h),3.31-3.19(m,1h),2.93(ddd,j＝16.1,3.5,2.0hz,1h),2.73(ddd,j＝16.2,10.3,2.9hz,1h),1.30(d,j＝6.3hz,3h)；lcms:405.9[m+h]⁺。

反式异构体:60mg；¹hnmr(400mhz,氯仿-d)¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.80-7.76(m,1h),7.62-7.58(m,2h),7.23(ddd,j＝8.1,7.1,1.4hz,1h),7.16(ddd,j＝8.2,7.1,1.1hz,1h),7.08-7.05(m,1h),6.97-6.92(m,2h),5.28(d,j＝1.5hz,1h),3.19-3.11(m,1h),2.96(dd,j＝16.7,4.0hz,1h),2.66(ddd,j＝16.7,10.0,1.6hz,1h),1.18(d,j＝6.3hz,3h)；lcms:405.9[m+h]⁺。

步骤4：顺式-2-(2-氟-2-甲基丙基)-1-(4-碘苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[3,2-c]吡啶

将来自步骤3的顺式异构体(150mg,0.37mmol)溶于二氯乙烷(2ml)且加入三氟甲磺酸2-氟-2-甲基丙基酯(131mg.0.56mmol)和碳酸钾(102mg,0.74mmol)且将混合物在90℃加热2周。将反应混合物冷却，用ipac稀释，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过快速柱色谱纯化(硅胶,0-30％ipac/庚烷)得到标题化合物(130mg)。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.83(ddd,j＝8.0,1.2,0.7hz,1h),7.54-7.50(m,2h),7.30-7.24(m,1h),7.21(ddd,j＝8.2,7.1,1.2hz,1h),7.16-7.10(m,3h),5.08(s,1h),3.37-3.22(m,2h),2.90(t,j＝15.5hz,1h),2.72-2.54(m,2h),1.53(d,j＝21.3hz,3h),1.34(d,j＝21.4hz,3h),0.88(d,j＝7.0hz,3h)；lcms:480.0[m+h]⁺。

步骤5：(1s,3r)-和(1r,3s)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-1-(4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[3,2-c]吡啶

顺式-2-(2-氟-2-甲基丙基)-1-(4-碘苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[3,2-c]吡啶(130mg,0.27mmol)、2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙-1-醇(74mg,0.56mmol)、碘化亚铜(23mg,0.11mmol)和碳酸钾(102mg,0.74mmol)在丁腈(1ml)中的混合物如下脱气：用氮气净化，随后抽空，如此进行三次。将所得混合物在135℃加热20hr。将反应混合物冷却，用ipac稀释且通过硅藻土滤过。滤液用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩。对映异构体130和131通过手性sfc分离(固定相:ad；流动相:etohw/0.1％nh4oh)。

130:15mg；rt＝0.534；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.93(ddd,j＝8.0,1.2,0.7hz,1h),7.32-7.11(m,4h),7.03(ddd,j＝7.9,1.3,0.7hz,1h),6.80-6.68(m,2h),5.05(d,j＝1.6hz,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.3hz,2h),3.84(t,j＝5.6hz,2h),3.31(s,4h),2.98(dd,j＝7.3,5.8hz,2h),2.87-2.55(m,6h),1.43(d,j＝21.4hz,3h),1.27(d,j＝21.6hz,3h),0.85(d,j＝7.0hz,3h)；lcms:485.2[m+h]⁺。

实施例131(1r,3s)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-1-(4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[3,2-c]吡啶131

按照实施例130的操作制备131。

131:16mg；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.93(ddd,j＝7.9,1.2,0.7hz,1h),7.23(dddd,j＝27.3,8.2,7.1,1.2hz,2h),7.17-7.09(m,2h),7.06-7.00(m,1h),6.80-6.69(m,2h),5.05(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.3hz,2h),3.84(t,j＝5.6hz,2h),3.31(s,4h),2.98(dd,j＝7.2,5.9hz,2h),2.88-2.53(m,6h),1.43(d,j＝21.5hz,3h),1.28(d,j＝21.6hz,3h),0.85(d,j＝7.0hz,3h)；lcms:485.2[m+h]⁺

实施例132(6s,8s)-8-{2,6-二氟-4-[2-(3-氟甲基-氮杂环丁-1-基)-乙氧基]-苯基}-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-6-甲基-6,7,8,9-四氢-5h-二吡啶并[2,3-b；4’,3’-d]吡咯132

按照实施例120和121的操作制备132。

实施例133(6r,8r)-6-{2,6-二氟-4-[2-(3-氟甲基-氮杂环丁-1-基)-乙氧基]-苯基}-7-(2-氟-2-甲基-丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氢-5h-二吡啶并[3,2-b；4’,3’-d]吡咯133

按照实施例120和121的操作制备133。

实施例135(1r,3r)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-1-(4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-1,3-二甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚135

步骤1：(1r,3r)-1-(4-碘苯基)-1,3-二甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚

向三氟乙酸(1.07ml,14.35mmol)和(2r)-1-(1h-吲哚-3-基)丙-2-胺(1.0g,5.74mmol)在1,2-二氯乙烷(3ml)中的溶液中加入1-(4-碘苯基)乙酮(1.41g,5.74mmol)。将混合物在微波小瓶中在150℃搅拌1小时。反应混合物用etoac(40ml)稀释，用饱和na2co3(15ml)、水(15ml)和盐水(15ml)洗涤。溶液用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化(0-25％etoac/石油醚)得到标题化合物(2g,收率87％)，其为浅黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.84(s,1h),7.59(d,j＝8.4hz,2h),7.54(d,j＝8.0hz,1h),7.37(d,j＝8.0hz,1h),7.25-7.12(m,2h),7.02(d,j＝8.4hz,2h),2.89-2.75(m,2h),2.49-2.36(m,1h),1.78(s,3h),1.20(d,j＝6.0hz,3h)。

步骤2：(1r,3r)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-1-(4-碘苯基)-1,3-二甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚

向碳酸钾(1.37g,9.94mmol)在正丁腈(5ml)中的溶液中加入(1r,3r)-1-(4-碘苯基)-1,3-二甲基-2,3,4,9-四氢吡啶并[3,4-b]吲哚(来自步骤1,0.5g,1.24mmol)和三氟甲磺酸(2-氟-2-甲基-丙基)酯(1.39g,6.21mmol)。将混合物在130℃搅拌16小时。冷却至25℃后，将反应混合物滤过且浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化(0-10％etoac/石油醚)得到标题化合物(150mg,收率25％)，其为浅黄色固体。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.84(s,1h),7.61(d,j＝8.4hz,2h),7.40(d,j＝8.0hz,1h),7.29(d,j＝8.0hz,1h),7.17-7.00(m,3h),6.97-6.90(m,1h),2.82-2.50(m,5h),1.67(s,3h),1.38-1.20(m,6h),1.03(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤3：135

向(1r,3r)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-1-(4-碘苯基)-1,3-二甲基-4,9-二氢-3h-吡啶并[3,4-b]吲哚(来自步骤2,0.1g,0.21mmol)和2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇(0.14g,1.05mmol)在正丁腈(2ml)中的溶液中加入碘化亚铜(i)(0.12g,0.63mmol)和碳酸钾(0.15g,1.1mmol)。将反应混合物在130℃在氮气气氛下搅拌3小时。冷却至25℃后，将混合物浓缩至干。残留物通过反相色谱纯化(乙腈70-100％/0.05％nh4oh/水)得到135(13mg,收率13％)，其为浅黄色固体。lcms:482.3[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.41(d,j＝7.6hz,1h),7.30-7.15(m,3h),7.06-6.92(m,2h),6.76(d,j＝8.4hz,2h),4.55-4.38(dd,j＝47.6,5.6hz,2h),4.00(t,j＝4.8hz,2h),3.65-3.43(m,3h),3.24-3.15(m,2h),2.90-2.72(m,5h),2.69-2.53(m,2h),1.75(s,3h),1.34-1.05(m,9h)。

实施例136(1r,3s)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚136

步骤1：1-(1h-吲哚-2-基)丙-2-胺

如实施例37和38步骤1所述将1h-吲哚-2-甲醛(2.0g,13.8mmol)转化为2-(2-硝基丙-1-烯基)-1h-吲哚(2.5g)。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.32(s,1h),8.14-8.07(m,1h),7.73-7.66(m,1h),7.45-7.40(m,1h),7.32(ddd,j＝8.2,7.0,1.2hz,1h),7.21-7.14(m,1h),7.02-6.92(m,1h),2.63(d,j＝1.0hz,3h)。

然后如实施例37和38步骤2所述将2-(2-硝基丙-1-烯基)-1h-吲哚(2.5g,12.4mmol)转化为1-(1h-吲哚-2-基)丙-2-胺(1.50g)。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ9.10(brs,1h),7.59-7.46(m,1h),7.36-7.28(m,1h),7.15-7.03(m,2h),6.31-6.16(m,1h),3.37-3.21(m,1h),2.95-2.75(m,1h),2.73-2.56(m,1h),1.16(d,j＝6.3hz,4h)；lcms:175.1[m+h]⁺。

步骤2：n-(1-(1h-吲哚-2-基)丙-2-基)-2-氟-2-甲基丙-1-胺

将1-(1h-吲哚-2-基)丙-2-胺(1.0g,5.74mmol)、三氟甲磺酸2-氟-2-甲基丙基酯(1.42g,6.31mmol)和dipea(2.0ml,11.5mmol)在1,4-二噁烷(20ml)中的混合物在90℃加热20hr。将反应混合物冷却，用ipac稀释，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-5％meoh/dcm)得到标题化合物(1.2g)。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ9.72(s,1h),7.55-7.50(m,1h),7.30-7.26(m,1h),7.15-7.07(m,1h),7.07-6.99(m,1h),6.22(dd,j＝1.0,2.0hz,1h),3.09-2.99(m,1h),2.99-2.84(m,2h),2.81-2.58(m,2h),1.49(d,j＝21.4hz,3h),1.43(d,j＝21.3hz,3h),1.13(d,j＝6.3hz,3h)；lcms:249.1[m+h]⁺。

步骤3：1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚

将n-(1-(1h-吲哚-2-基)丙-2-基)-2-氟-2-甲基丙-1-胺(0.40g,1.6mmol)、2.6-二氟-4-碘苯甲醛(0.40g,1.61mmol)和乙酸(0.20ml)在甲苯(5ml)中的混合物在90℃加热过夜。将反应混合物冷却，浓缩且通过硅胶快速柱色谱纯化(0-20％ipac/庚烷)得到标题化合物(0.30g)。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.81(s,1h),7.31-7.27(m,1h),7.21-7.15(m,2h),7.05(ddd,j＝8.2,7.1,1.2hz,1h),6.90(ddd,j＝8.0,7.1,1.0hz,1h),6.83-6.77(m,1h),5.24(d,j＝1.7hz,1h),3.82-3.72(m,1h),3.31(ddd,j＝15.6,5.4,2.1hz,1h),2.97(t,j＝15.2hz,1h),2.53(ddd,j＝15.4,2.9,1.4hz,1h),2.33(dd,j＝30.4,14.9hz,1h),1.21(d,j＝20.0hz,3h),1.16(d,j＝20.0hz,3h),1.08(d,j＝6.5hz,3h)；lcms:499.0[m+h]⁺。

步骤4：136和137

按照就实施例101步骤5所述操作进行1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚与2-[3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基]乙醇的ullmann偶联。两种反式对映异构体136和137通过手性sfc分离(固定相:ad,流动相:etohw/0.1％nh4oh)。

136:rt＝0.543；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δδ10.81(s,1h),7.26-7.2(m,1h),6.91(ddd,j＝8.1,7.1,1.2hz,1h),6.73(ddd,j＝8.0,7.0,1.0hz,1h),6.58(d,j＝9.0hz,3h),5.08(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.90(dq,j＝7.7,4.8hz,2h),3.69-3.55(m,1h),3.31-3.25(m,2h),3.17-3.08(m,1h),3.00-2.85(m,3h),2.77-2.65(m,3h),2.56(dd,j＝16.1,2.8hz,1h),2.39-2.23(m,1h),1.14(d,j＝21.4hz,3h),1.11(d,j＝21.4hz,3h),1.03(d,j＝6.5hz,3h)；lcms:504.3[m+h]⁺。

实施例137(1s,3r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚137

按照实施例136的操作制备137。

137:rt＝0.423；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.81(s,1h),7.26-7.22(m,1h),6.91(ddd,j＝8.1,7.0,1.2hz,1h),6.73(ddd,j＝8.0,7.1,1.0hz,1h),6.58(d,j＝9.0hz,3h),5.08(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.90(dq,j＝7.3,4.8hz,2h),3.62(d,j＝8.2hz,1h),3.30-3.27(m,2h),3.17-3.09(m,1h),3.00-2.84(m,3h),2.76-2.64(m,3h),2.56(dd,j＝16.2,2.8hz,1h),2.31(dd,j＝28.7,14.9hz,1h),1.14(d,j＝21.5hz,3h),1.11(d,j＝21.5hz,3h),1.03(d,j＝6.4hz,3h)；lcms:504.3[m+h]⁺。

实施例138(2ar,4r,9cr)-4-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3-(2-氟-2-甲基丙基)-2,2a,3,4,5,9c-六氢-1h-环丁并[5,6]吡啶并[3,4-b]吲哚138

步骤1：2-(1h-吲哚-3-基)-环丁酮

在氩气下向吲哚(casno.:120-72-9,10.8g,92.3mmol)在2,2,2-三氟乙醇(185ml)中的混合物中加入根据wo2014/045156所述操作由环丁酮制备的2-溴环丁酮(casno.:1192-01-4,13.75g,92.3mmol)和碳酸钠(11.74g,110.7mmol)。将所得混合物在rt搅拌18h，通过填料滤过且将滤液真空浓缩。将粗产物吸附于hmn硅藻土(biotage)上且通过硅胶色谱纯化(流动相:环己烷/乙酸乙酯,梯度0％至20％)得到标题化合物，其为无色油状物(3.04g,收率18％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3):δ8.04(br.s,1h),7.57(dd,j＝0.8,7.9hz,1h),7.35-7.38(m,1h),7.21(dt,j＝1.3,7.7hz,1h),7.16-7.10(m,2h),4.78-4.72(m,1h),3.34-3.23(m,1h),3.18-3.09(m,1h),2.67-2.58(m,1h),2.25-2.16(m,1h)；lcms:186.2[m+h]⁺。

步骤2：(2-氟-2-甲基-丙基)-[2-(1h-吲哚-3-基)-环丁基]-胺

将2-(1h-吲哚-3-基)-环丁酮(1.08g,7.76mmol)和2-氟-2-甲基-丙基胺盐酸盐(cas:879121-42-3,926mg,9.71mmol)在meoh(37ml)中的溶液在氩气下搅拌10min。在0℃分两份加入氰基硼氢化钠(casno.:25895-60-7,398mg,8.54mmol)且将反应混合物温热至rt且搅拌72h。将混合物真空浓缩且所得残留物通过硅胶色谱纯化(流动相:dcm/meoh,梯度0％至5％)。收集适当的馏分且蒸发得到标题化合物的对映异构体混合物，其为黄色油状物(1.04g,收率54％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.70(s,1h),7.58-7.56(m,1h),7.48(dd,j＝8.0,23.4hz,2h),7.25-7.21(m,1h),7.16(ddd,j＝0.9,7.1,7.9hz,1h),5.16-5.10(m,1h),4.29-4.22(m,1h),4.10-4.02(m,1h),2.85(dd,j＝13.0,17.3hz,1h),2.61-2.38(m,5h),1.09(d,j＝21.3hz,3h),0.74(d,j＝21.5hz,3h)；lcms:261.3[m+h]⁺。

步骤3：(2ar,4r,9cr)-4-(2,6-二氟-4-碘苯基)-3-(2-氟-2-甲基丙基)-2,2a,3,4,5,9c-六氢-1h-环丁并[5,6]吡啶并[3,4-b]吲哚和(2as,4s,9cs)-4-(2,6-二氟-4-碘苯基)-3-(2-氟-2-甲基丙基)-2,2a,3,4,5,9c-六氢-1h-环丁并[5,6]吡啶并[3,4-b]吲哚

标题化合物由(2-氟-2-甲基-丙基)-[2-(1h-吲哚-3-基)-环丁基]-胺(320mg,1.23mmol)和2,6-二氟-4-碘-苯甲醛(610mg,2.27mmol)按照就实施例112步骤1所述操作制备。粗产物通过硅胶色谱纯化(流动相:环己烷/乙酸乙酯,梯度0％至20％)，随后通过手性hplc纯化(chiralpakic,流动相:10％dcm/庚烷,0.1％二乙胺,历时30min)。收集适当的馏分且蒸发得到两种立体异构体。第一分离产物4a(rt＝8.0min,de>99％)，其为白色固体(130mg,收率21％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.50(d,j＝7.6hz,1h),7.32-7.21(m,4h),7.17-7.07(m,2h),5.17(s,1h),4.27-4.20(m,1h),3.84-3.78(m,1h),2.88(t,j＝14.0hz,1h),2.30-2.01(m,4h),1.70-1.64(m,1h),1.15(dd,j＝21.3,24.7hz,6h)；lcms:511.2[m+h]⁺。第二分离产物4b(rt＝9.0min,de>99％)，其为白色固体(80mg,收率13％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.50(d,j＝7.6hz,1h),7.32-7.21(m,4h),7.17-7.07(m,2h),5.18(s,1h),4.27-4.20(m,1h),3.85-3.79(m,1h),2.88(t,j＝14.0hz,1h),2.30-2.00(m,4h),1.70-1.64(m,1h),1.15(dd,j＝21.4,24.8hz,6h)；lcms:511.2[m+h]⁺。

步骤4：(2ar,4r,9cr)-4-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-3-(2-氟-2-甲基丙基)-2,2a,3,4,5,9c-六氢-1h-环丁并[5,6]吡啶并[3,4-b]吲哚

标题化合物由(2ar,4r,9cr)-4-(2,6-二氟-4-碘苯基)-3-(2-氟-2-甲基丙基)-2,2a,3,4,5,9c-六氢-1h-环丁并[5,6]吡啶并[3,4-b]吲哚4a和2-(3-氟甲基-氮杂环丁-1-基)-乙醇(casno.:1443984-69-7,wo2013090836)按照就实施例101步骤5所述操作制备。粗产物通过硅胶色谱纯化(流动相:二氯甲烷/2n氨/甲醇,梯度0％至3％)。收集适当的馏分且蒸发得到138，其为黄色固体(75mg,收率71％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.49(d,j＝7.6hz,1h),7.31-7.21(m,4h),7.26(s,4h),7.15-7.05(m,2h),6.47-6.40(m,2h),5.11(s,1h),4.57(d,j＝5.6hz,1h),4.45(d,j＝5.6hz,1h),4.29-4.20(m,1h),3.95-3.91(m,2h),3.82(t,j＝7.0hz,1h),3.49(dd,j＝6.8,7.5hz,2h),3.15(t,j＝7.1hz,2h),2.90-2.81(m,4h),2.33-2.03(m,4h),1.14(dd,j＝15.9,21.3hz,6h)；lcms:516.3[m+h]⁺。

实施例139(±)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3,5-二甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚139

步骤1：1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3,5-二甲基-3,4-二氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚

向1-(2,6-二氟-4-碘苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚(300mg,0.60mmol)在dmf(3ml)中的溶液中加入氢化钠(29mg,60％在矿物油中)且将混合物搅拌10min。向所得混合物中加入碘甲烷(171mg,1.30mmol)且将反应混合物在环境温度搅拌20hr。反应混合物用水淬灭且用ipac萃取。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-20％ipac/庚烷)得到标题化合物(115mg)。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.27-7.23(m,1h),7.19-7.13(m,2h),7.08(ddd,j＝8.2,7.0,1.2hz,1h),6.89(ddd,j＝8.0,7.0,1.0hz,1h),6.80(d,j＝7.9hz,1h),5.26(s,1h),3.86-3.74(m,1h),3.66(s,3h),3.24-3.17(m,1h),2.95(t,j＝15.4hz,1h),2.56(ddd,j＝15.6,3.1,1.4hz,1h),2.33(dd,j＝30.1,14.9hz,1h),1.22(d,j＝19.6hz,3h),1.16(d,j＝20.0hz,3h),1.08(d,j＝6.5hz,3h)。

步骤2：139

通过就实施例101步骤5所述ullmann偶联反应将1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3,5-二甲基-3,4-二氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚转化为139。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.37-7.31(m,1h),6.99(ddd,j＝8.2,7.1,1.2hz,1h),6.77(ddd,j＝8.0,7.1,1.0hz,1h),6.63-6.54(m,3h),5.10(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.2hz,2h),3.90(h,j＝5.3,4.9hz,2h),3.61-3.62(m,1h),3.65(s,3h),3.31(s,2h),3.15-2.83(m,4h),2.66(d,j＝16.0hz,4h),2.43-2.21(m,1h),1.16(d,j＝21.5hz,3h),1.12(d,j＝21.5hz,3h),1.04(d,j＝6.5hz,3h)；lcms:518.3[m+h]⁺。

实施例141(1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚141

步骤1：(r)-1-(1h-吲哚-1-基)-n-(2,2,2-三氟乙基)丙-2-胺

将(2r)-1-吲哚-1-基丙-2-胺(方案1中间体6,1.8g,10.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(3.7ml,20.66mmol)和三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙基酯(2.4g,10.33mmol)在1,4-二噁烷(30ml)中的混合物在90℃搅拌12小时。反应混合物用水(50ml)稀释，用dcm(50ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(25％etoac/石油醚)得到(2r)-1-吲哚-1-基-n-(2,2,2-三氟乙基)丙-2-胺(2.3g,收率87％)，其为无色油状物。lcms:256.9[m+h]⁺。

步骤2：3-(3,5-二氟-4-((1r,3r)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

将(2r)-1-吲哚-1-基-n-(2,2,2-三氟乙基)丙-2-胺(来自步骤1,2.0g,7.8mmol)、3-(3,5-二氟-4-甲酰基-苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(2445mg,7.8mmol)和乙酸(4.7g,78.04mmol)在甲苯(40ml)中的混合物在110℃在氮气气氛下搅拌16小时。将反应混合物浓缩且通过硅胶柱色谱纯化(0-20％etoac/石油醚)得到标题化合物(0.35g,收率8％)(含有约20％顺式混合物)，其为浅黄色油状物。lcms:552.0[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.49(d,j＝8.0hz,1h),7.31(d,j＝8.0hz,1h),7.21-7.17(m,1h),7.11-7.07(m,1h),6.31-6.25(d,j＝10.4hz,2h),6.00(s,1h),5.53(s,1h),4.81(m,1h),4.35-4.15(m,3h),4.08-3.95(m,3h),3.75-3.65(m,1h),3.40-3.10(m,1h),2.97-2.94(m,1h),1.45(m,9h),1.21(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤3：(1r,3r)-1-(4-(氮杂环丁-3-基氧基)-2,6-二氟苯基)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚

在25℃向3-(3,5-二氟-4-((1r,3r)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(来自步骤2,100mg,0.18mmol,含有约20％顺式异构体)和2,6-二甲基吡啶(97mg,0.91mmol)在dcm(0.5ml)中的溶液中缓慢加入三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(144mg,0.54mmol)。将反应混合物在25℃搅拌16小时。反应混合物用dcm(5ml)稀释，向混合物中加入饱和nahco3水溶液(2ml)。分离有机相且用硫酸钠干燥，滤过且浓缩至干。残留物通过制备性tlc纯化(5％meoh/dcm)得到标题化合物(50mg,收率61％)(含有约20％顺式异构体)，其为浅黄色固体。lcms:452.2[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.49-7.47(d,j＝7.6hz,1h),7.30(d,j＝8.0hz,1h),7.17(t,j＝7.2hz,1h),7.08(t,j＝7.2hz,1h),6.32-6.25(d,j＝10.0hz,2h),6.00-5.85(m,1h),5.68-5.51(m,1h),4.96-4.93(m,1h),4.36-4.20(m,1h),4.10-3.97(m,3h),3.84(m,2h),3.75-3.71(m,1h),3.27-3.15(m,1h),3.00-2.88(m,1h),1.38-1.20(m,3h)。

步骤4：141

向(1r,3r)-1-(4-(氮杂环丁-3-基氧基)-2,6-二氟苯基)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚(来自步骤3,400mg,0.89mmol)、n,n-二异丙基乙胺(343mg,2.66mmol)在dmf(4ml)中的混合物中加入1-碘-3-氟丙烷(166mg,0.89mmol)。将反应混合物在15℃搅拌16小时。将反应混合物浓缩且通过制备性tlc纯化(50％etoac/dcm)得到粗混合物(反式:顺式＝4:1)。粗产物通过sfc纯化(ad250mm×30mm,10μm,base-ipa,30％)得到141(177mg,收率39％)，其为白色固体。lcms:512.3[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.40(d,j＝8.0hz,1h),7.34(d,j＝8.0hz,1h),7.11(t,j＝8.0hz,1h),7.05-6.96(m,1h),6.47(d,j＝10.8hz,2h),5.90(s,1h),5.55(s,1h),4.86-4.80(m,1h),4.52(t,j＝6.0hz,1h),4.40(t,j＝6.0hz,1h),4.27-4.23(m,1h),4.15-4.10(m,1h),3.84-3.68(m,3h),3.51-3.36(m,1h),3.27-3.17(m,2h),3.03-2.87(m,1h),2.67(t,j＝7.2hz,2h),1.84-1.66(m,2h),1.21(d,j＝6.4hz,3h)。

实施例142(r)-3-(1-(2,6-二氟-4-(1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基氨基)苯基)-4,4-二甲基-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-2(9h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇142

按照与实施例103相同的操作由可商购的2-(1h-吲哚-3-基)-2-甲基丙-1-胺(cas15467-31-9)制备外消旋3-(1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)苯基)-4,4-二甲基-1,3,4,9-四氢-2h-吡啶并[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇且通过手性sfc分离(柱:oj,meohw/0.1％nh4oh)。

142:¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.37(s,1h),7.55(d,j＝7.7hz,1h),7.16(d,j＝7.8hz,1h),6.98-6.87(m,2h),6.77(d,j＝6.8hz,1h),6.14(d,j＝12.5hz,2h),5.26(t,j＝6.1hz,1h),4.91(s,1h),4.46(dt,j＝47.5,6.1hz,2h),4.01-3.88(m,1h),3.74-3.60(m,3h),3.33-3.22(m,1h),2.95(d,j＝11.5hz,1h),2.90-2.66(m,4h),2.62(d,j＝11.4hz,1h),2.46(t,j＝7.0hz,2h),1.65(dp,j＝25.7,6.5hz,2h),1.39(s,3h),1.38(s,3h)；lcms:537.2[m+h]⁺。

实施例143(s)-3-(1-(2,6-二氟-4-(1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基氨基)苯基)-4,4-二甲基-3,4-二氢-1h-吡啶并[3,4-b]吲哚-2(9h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇143

按照实施例142的操作制备143。

143:¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.37(s,1h),7.55(d,j＝7.8hz,1h),7.16(d,j＝7.8hz,1h),6.93(dt,j＝19.4,7.2hz,2h),6.77(d,j＝6.9hz,1h),6.14(d,j＝12.5hz,2h),5.26(t,j＝6.1hz,1h),4.91(s,1h),4.46(dt,j＝47.5,6.0hz,2h),4.01-3.90(m,1h),3.74-3.61(m,3h),3.32-3.22(m,1h),2.95(d,j＝11.5hz,1h),2.90-2.65(m,4h),2.62(d,j＝11.5hz,1h),2.46(t,j＝7.1hz,2h),1.66(dq,j＝25.4,6.6hz,2h),1.39(s,3h),1.38(s,3h)；lcms:537.2[m+h]⁺。

实施例145n-(3,5-二氟-4-((1s,3r)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺145

步骤1：(1r,3r)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚

向(2r)-1-吲哚-1-基-n-(2,2,2-三氟乙基)丙-2-胺(来自实施例141步骤1,2.80g,5.57mmol)、4-溴-2,6-二氟苯甲醛(1.23g,5.57mmol)在甲苯(60ml)中的溶液中加入乙酸(3.33g,55.69mmol)。将溶液在90℃搅拌16小时。冷却至室温后，将反应混合物浓缩至干，然后通过快速柱色谱纯化(0-10％etoac/石油醚)得到标题化合物(1.2g,收率42％,污染有～10％顺式异构体)，其为固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.54-7.47(m,1h),7.36-7.29(m,1h),7.24-7.17(m,1h),7.15-7.05(m,3h),6.02(s,1h),5.59(s,1h),4.38-4.34(m,1h),4.07-4.04(m,1h),3.79-3.69(m,1h),3.38-3.22(m,1h),3.01-2.87(m,1h),1.22(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤2：3-((3,5-二氟-4-((1r,3r)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

向(1r,3r)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚(来自步骤1,1.0g,2.2mmol)、磷酸钾(1.39g,6mmol)、brettphospdg3(0.1g,0.11mmol)和brettphos(0.23g,0.44mmol)在1,4-二噁烷(10ml)中的溶液中加入3-氨基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(0.56g,3.27mmol)。将反应混合物在80℃在氮气下搅拌16小时。反应混合物用etoac(100ml)稀释，用水(30ml×2)洗涤，用无水硫酸钠干燥且真空浓缩。粗产物通过快速柱色谱纯化(0-30％etoac/石油醚)得到标题化合物(1.0g,收率83％,污染有～10％顺式异构体)，其为黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.50(d,j＝7.6hz,1h),7.32(d,j＝8.0hz,1h),7.18(t,j＝7.6hz,1h),7.09(t,j＝7.6hz,1h),6.04-5.95(m,3h),5.48(s,1h),4.39-4.19(m,4h),4.14-4.12(m,1h),4.05-4.01(m,1h),3.79-3.70(m,3h),3.28-3.15(m,1h),3.05-2.92(m,1h),1.45(s,9h),1.21(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤3：(1r,3r)-1-[4-(氮杂环丁-3-基氧基)-2,6-二氟-苯基]-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-β-咔啉

向2,6-二甲基吡啶(0.85ml,7mmol)、3-((3,5-二氟-4-((1r,3r)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(来自步骤2,800mg,1.45mmol,污染有～10％顺式异构体)在二氯甲烷(10ml)中的混合物中加入三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯(0.79ml,4.36mmol)且将反应混合物在15℃在氮气下搅拌16小时。反应混合物用dcm(30ml)稀释且用饱和nahco3水溶液(20ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥且真空浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化(0-10％meoh/dcm)得到标题化合物(0.65g,收率99％,污染有～10％顺式异构体)，其为浅绿色固体。lcms:451.0[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.39(d,j＝8.0hz,1h),7.31(d,j＝8.0hz,1h),7.09(m,1h),7.03-6.95(m,1h),6.07(d,j＝12.0hz,2h),5.88(s,1h),5.44(s,1h),4.34-4.17(m,2h),4.10-4.06(m,1h),3.88-3.78(m,2h),3.77-3.66(m,1h),3.55-3.45(m,2h),3.39-3.33(m,1h),3.04-2.90(m,1h),1.19(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤4：145和146

向n,n-二异丙基乙胺(0.71ml,4mmol)和(1r,3r)-1-[4-(氮杂环丁-3-基氧基)-2,6-二氟-苯基]-2-(2-氟-2-甲基-丙基)-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-β-咔啉(来自步骤3,600mg,1.33mmol,污染有～10％顺式异构体)在n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的搅拌溶液中加入1-碘-3-氟丙烷(0.25g,1.33mmol)。将反应混合物在15℃搅拌16小时。反应混合物用etoac(30ml)稀释，用盐水(10ml×5)洗涤，用无水硫酸钠干燥，真空浓缩，然后通过硅胶快速色谱纯化(0-50％dcm/etoac)得到标题化合物(400mg,58％,污染有～10％顺式异构体)，其为黄色固体。固体进一步通过sfc纯化(ad250mm×30mm,5μm,超临界co2/etoh(0.1％nh3.h2o)＝40％)得到呈白色固体形式的146(0.28g,收率70％)和呈白色固体形式的145(27mg,6％)。

145:¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.38(d,j＝8.0hz,1h),7.32(d,j＝8.4hz,1h),7.12-7.08(m,1h),7.00-6.96(m,1h),6.08(d,j＝11.6hz,2h),5.74(s,1h),5.49(s,1h),4.54-4.41(m,2h),4.30-4.26(m,1h),4.10-4.05(m,1h),3.80-3.75(m,3h),3.47-3.40(m,2h),3.31-3.22(m,1h),3.02-2.95(m,2h),2.66(t,j＝6.8hz,2h),1.78-1.62(m,2h),1.35(d,j＝6.4hz,3h)。sfc(ad-3150×4.6mm,5-40％etoh(0.05％dea)/co2,10min),rt＝4.019min。

实施例146n-(3,5-二氟-4-((1r,3r)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺146

按照实施例145的操作得到146。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.38(d,j＝7.6hz,1h),7.28(d,j＝8.4hz,1h),7.12-7.06(m,1h),7.01-6.95(m,1h),6.08(d,j＝11.2hz,2h),5.88(s,1h),5.44(s,1h),4.51-4.46(m,1h),4.40-4.31(m,1h),4.19-4.15(m,1h),4.03-3.98(m,2h),3.76-3.61(m,3h),3.35-3.22(m,1h),3.02-2.86(m,3h),2.58(t,j＝7.2hz,2h),1.78-1.62(m,2h),1.13(d,j＝6.0hz,3h)。sfc(ad-3150×4.6mm,5-40％etoh(0.05％dea)/co2,10min),rt＝4.722min。

实施例147(1s,3r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚147

步骤1：3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-n-[2-(1h-吲哚-2-基)-1-甲基-乙基]丙-1-胺

使1-(1h-吲哚-2-基)丙-2-胺(0.50g,2.7mmol)与三氟甲磺酸[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]酯(1.40g,3.0mmol)和dipea(0.95ml,5.5mmol)在1,4-二噁烷(5ml)中混合且在90℃加热20hr。将反应混合物冷却，用ipac稀释，用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过柱色谱纯化(硅胶,0-50％ipac/庚烷)得到标题化合物(0.48g)。lcms:507.25[m+h]⁺。

步骤2：叔丁基-[3-[1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3-甲基-1,3,4,5-四氢吡啶并[4,3-b]吲哚-2-基]-2,2-二氟-丙氧基]-二苯基-甲硅烷

将3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-n-[2-(1h-吲哚-2-基)-1-甲基-乙基]丙-1-胺(0.48g,0.95mmol)、2,6-二氟-4-碘苯甲醛(230mg,0.85mmol)和乙酸(0.22ml,3.8mmol)在甲苯(3ml)中的混合物在90℃加热20hr。将反应混合物冷却且浓缩得到油状物。油状物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-20％ipac/庚烷)得到标题化合物(0.51g)。

步骤3：147和148

使叔丁基-[3-[1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3-甲基-1,3,4,5-四氢吡啶并[4,3-b]吲哚-2-基]-2,2-二氟-丙氧基]-二苯基-甲硅烷与2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙-1-醇进行ullmann反应，随后用tbaf处理得到外消旋混合物，其通过手性sfc分离(流动相:ad；流动相:meohw/0.1％nh4oh)得到对映异构体147和148。

147:13.6mg；rt＝0.925min；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.84(s,1h),7.31-7.13(m,1h),6.92(ddd,j＝8.2,7.1,1.2hz,1h),6.74(ddd,j＝8.0,7.1,1.0hz,1h),6.62-6.53(m,3h),5.29-5.19(m,1h),5.14(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.3hz,2h),3.97-3.83(m,2h),3.74-3.51(m,2h),3.30-3.26(m,2h),3.23-3.07(m,2h),3.03-2.90(m,2h),2.77-2.54(m,6h),1.07(d,j＝6.5hz,3h)；lcms:524.2[m+h]⁺。

实施例148(1s,3r)-1-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚148

按照实施例147的操作制备148。

148:18.8mg,rt＝1.118min；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.84(s,1h),7.28-7.15(m,1h),6.92(ddd,j＝8.1,7.1,1.2hz,1h),6.74(ddd,j＝8.0,7.1,1.0hz,1h),6.63-6.53(m,3h),5.23(t,j＝6.1hz,1h),5.14(s,1h),4.49(dd,j＝47.6,6.3hz,2h),3.98-3.82(m,2h),3.72-3.52(m,2h),3.40-3.32(m,2h),3.19-3.04(m,2h),3.01-2.94(m,2h),2.77-2.55(m,6h),1.07(d,j＝6.4hz,3h)；lcms:524.2[m+h]⁺。

实施例1543-((1r,3s)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,5-四氢-2h-吡啶并[4,3-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇154

步骤1：3-(4-(2-(3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

将叔丁基-[3-[1-(2,6-二氟-4-碘-苯基)-3-甲基-1,3,4,5-四氢吡啶并[4,3-b]吲哚-2-基]-2,2-二氟-丙氧基]-二苯基-甲硅烷(200mg,0.26mmol)、3-氨基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(72mg,0.40mmol)、pd2(dba)3(24mg,0.026mmol)、xanthphos(30.6mg,0.053mmol)和碳酸铯(230mg,0.79mmol)在1,4-二噁烷(3ml)中的混合物脱气5min。将所得红色混合物在密封管中在100℃加热20hr。所得混合物用ipac稀释且通过硅藻土滤过。滤液用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-100％ipac/庚烷)得到标题化合物(120mg)。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.77(s,1h),7.66-7.59(m,4h),7.46-7.33(m,5h),7.28-7.25(m,2h),7.03(ddd,j＝8.2,7.0,1.3hz,1h),6.91-6.75(m,2h),5.76(d,j＝11.3hz,2h),5.19(s,1h),4.24-4.16(m,2h),4.04-3.91(m,3h),3.70-3.60(m,3h),3.51(q,j＝12.2hz,1h),3.22-3.07(m,2h),2.84(q,j＝14.8hz,1h),2.49-2.43(m,1h),1.44(s,9h),1.23(d,j＝6.3hz,3h),1.03(s,9h)。lcms:802.5[m+h]⁺。

步骤2：n-(4-(2-(3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁-3-胺

将3-(4-(2-(2,2-二氟-3-羟基丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(120mg,0.15mmol)溶于dcm(2ml)且加入2,6-二甲基吡啶(85mg,0.79mmol)和tbsotf(140mg,0.53mmol)。将混合物搅拌1hr。将所得混合物浓缩且用甲醇/thf(2ml,1:1混合物)稀释且加入2nnaoh(1ml)且搅拌1hr。反应混合物用ipac萃取。有机层用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩得到粗标题化合物。lcms:701.3[m+h]⁺。

步骤3：n-(4-(2-(3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺

向溶于dmf(1ml)的粗n-(4-(2-(3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁-3-胺中加入1-氟-3-碘丙烷(40mg)和dipea(23mg)且将混合物在环境温度搅拌20hr。反应混合物用ipac稀释，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩。粗产物通过快速柱色谱纯化得到标题化合物(70mg)。lcms:761.4[m+h]⁺。

步骤4：154和155

将n-(4-(2-(3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-吡啶并[4,3-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺(70mg)溶于thf(1ml)。加入tbaf(0.12ml,1m)且将混合物在环境温度搅拌2hr。反应混合物用ipac稀释，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-5％meoh/dcm)得到标题化合物，其为外消旋混合物(32mg)，其进一步通过手性sfc分离(柱:cel-1；流动相:meohw/0.1％nh4oh)得到两种纯对映异构体154和155。

154:rt＝0.732min；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.77(s,1h),7.23(d,j＝8.1hz,1h),6.91(ddd,j＝8.1,7.0,1.2hz,1h),6.73(td,j＝7.4,7.0,0.9hz,1h),6.61(dd,j＝17.1,7.3hz,2h),6.05(d,j＝12.3hz,2h),5.19(t,j＝6.2hz,1h),5.04(s,1h),4.44(dt,j＝47.4,6.1hz,2h),3.91(q,j＝6.5hz,1h),3.70-3.51(m,4h),3.31(s,2h),3.17-2.96(m,2h),2.78-2.54(m,4h),2.45(t,j＝7.0hz,1h),1.64(dp,j＝25.7,6.5hz,2h),1.05(d,j＝6.5hz,3h)。lcms:523.2[m+h]⁺。

实施例1553-((1s,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,5-四氢-2h-吡啶并[4,3-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇155

按照实施例154的操作制备155。

155:rt＝1.212min；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.77(s,1h),7.23(d,j＝8.1hz,1h),6.91(ddd,j＝8.1,7.0,1.2hz,1h),6.73(td,j＝7.4,6.9,1.0hz,1h),6.62(dd,j＝14.2,7.3hz,2h),6.06(d,j＝12.3hz,2h),5.19(t,j＝6.2hz,1h),5.04(s,1h),4.45(dt,j＝47.4,6.0hz,2h),3.92(q,j＝6.6hz,1h),3.60(ddd,j＝42.2,12.2,5.9hz,4h),3.31(s,2h),3.13-2.98(m,2h),2.81-2.53(m,4h),2.49(s,1h),1.65(dp,j＝25.7,6.6hz,2h),1.05(d,j＝6.5hz,3h)。lcms:523.2[m+h]⁺。

实施例1563-[(1r,3r)-1-[2,6-二氟-4-[[1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基]氨基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-2-基]-2,2-二氟-丙-1-醇156

步骤1：n-[4-(二乙氧基甲基)-3,5-二氟-苯基]-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺

将1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺(casno.:1538772-53-0)(2.55g,19.3mmol)、5-溴-2-(二乙氧基甲基)-1,3-二氟-苯(casno.:1206630-22-9)(4.96g,16.1mmol)、xantphospdg3(0.40g,0.40mmol)、碳酸铯(13.1g,40.3mmol)和甲苯(25ml)的混合物在氩气下在100℃加热过夜。将反应混合物冷却至rt且用水(15ml)淬灭。分离各层且将有机层蒸发得到粗标题产物(3.69g,收率68％)，其为淡棕色胶状物。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.03-5.98(m,2h),5.59(s,1h),4.56-4.52(m,1h),4.43(t,j＝5.9hz,1h),4.24(d,j＝6.7hz,1h),4.04-3.98(m,1h),3.77-3.67(m,4h),3.58-3.49(m,2h),2.90-2.85(m,2h),2.58(t,j＝7.1hz,2h),1.82-1.66(m,2h),1.24(t,j＝7.1hz,6h)；lcms:347.1[m+h]⁺。

步骤2：3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-n-[(1r)-2-吲哚-1-基-1-甲基-乙基]丙-1-胺

向(2r)-1-吲哚-1-基丙-2-胺(来自步骤4,5.42g,31.1mmol)在1,4-二噁烷(90ml)中的溶液中加入三氟甲磺酸[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]酯(15g,31.09mmol)和n,n-二异丙基乙胺(6.77ml,38.86mmol)。将反应混合物在85℃搅拌16h。将混合物浓缩，将残留物溶于etoac(200ml)且用饱和nahco3水溶液(100ml)、水(100ml)和盐水(100ml)洗涤。将有机层干燥(mgso4)，滤过且浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化(dcm)。合并适当的馏分且蒸发得到标题化合物(13.1g,收率83％)，其为浅黄色油状物。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.66-7.60(m,6h),7.45-7.31(m,6h),7.18(dt,j＝1.1,7.6hz,1h),7.11-7.06(m,2h),6.47(d,j＝2.6hz,1h),4.09(dd,j＝6.5,14.2hz,1h),3.97(dd,j＝6.2,14.2hz,1h),3.84-3.76(m,2h),3.26-2.98(m,3h),1.05-1.04(m,12h)；lcms:507.3[m+h]⁺。

步骤3：4-{(1r,3r)-2-[3-(叔丁基-二苯基-甲硅烷基氧基)-2,2-二氟-丙基]-3-甲基-1,2,3,4-四氢-吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基}-3,5-二氟-苯基)-[1-(3-氟丙基)-氮杂环丁-3-基]-胺

将3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-n-[(1r)-2-吲哚-1-基-1-甲基-乙基]丙-1-胺(来自步骤2,0.88g,1.73mmol)、hoac(0.25ml,4.33mmol)、n-[4-(二乙氧基甲基)-3,5-二氟-苯基]-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺(来自步骤1,0.6g,1.73mmol)和甲苯(12ml)的混合物在110℃搅拌5.75h。将混合物冷却至rt，用etoac稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(0-10％2m氨/甲醇/dcm)且通过反相色谱纯化(c18,洗脱剂为乙腈/水(+0.1％甲酸))。合并适当的馏分且蒸发得到标题化合物(69mg,收率5％)，其为浅黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.65-7.58(m,4h),7.49-7.34(m,6h),7.28(d,j＝8.8hz,2h),7.18-7.04(m,2h),5.96-5.86(m,3h),5.41-5.38(m,1h),4.55(t,j＝5.6hz,1h),4.43(t,j＝5.6hz,1h),4.11-4.04(m,2h),3.96-3.88(m,2h),3.82-3.68(m,3h),3.65-3.44(m,3h),3.20-3.10(m,1h),2.89-2.82(m,3h),2.81-2.79(m,3h),1.92-1.79(m,2h),1.31-1.25(m,1h),1.04-1.02(m,9h)；lcms:761.2[m+h]⁺。

步骤4：156

将4-{(1r,3r)-2-[3-(叔丁基-二苯基-甲硅烷基氧基)-2,2-二氟-丙基]-3-甲基-1,2,3,4-四氢-吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基}-3,5-二氟-苯基)-[1-(3-氟丙基)-氮杂环丁-3-基]-胺(来自步骤3,69mg,0.09mmol)和1mtbaf/thf(0.18ml,0.18mmol)在thf(3ml)中的溶液在25℃搅拌46h。反应混合物用水(50ml)稀释且用etoac萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过sfc纯化(luxcellulose-4,25/75meoh(0.1％dea)/co2,15ml/min,120巴,40c,system190巴,dad250nm)得到156(5mg,收率11％)，其为浅黄色油状物。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.50-7.46(m,1h),7.20-7.15(m,1h),7.10-7.05(m,1h),6.06-5.96(m,3h),5.33(s,1h),4.55(t,j＝5.9hz,1h),4.43(t,j＝5.9hz,1h),4.33-4.22(m,2h),4.10-3.98(m,2h),3.90-3.82(m,1h),3.74-3.63(m,4h),3.18(ddd,j＝6.4,8.5,16.1hz,1h),2.98-2.86(m,4h),2.59(t,j＝7.1hz,2h),1.82-1.68(m,2h),1.22-1.19(m,3h)；lcms:523.4[m+h]⁺。

实施例1573-((1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇157

步骤1：n-(1-(苯并呋喃-3-基)丙-2-基)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙-1-胺

将1-(苯并呋喃-3-基)丙-2-胺(来自实施例57步骤2,2.0g,11.4mmol)、三氟甲磺酸[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]酯(5.5g,11.4mmol)和n,n-二异丙基乙胺(3.8ml,23.0mmol)在1,4-二噁烷(20ml)中的混合物在90℃搅拌3hr。将反应混合物浓缩且通过硅胶快速柱色谱纯化(0-30％etoac/石油醚)得到标题化合物(4.1g,收率71％)，其为无色油状物。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.66(d,j＝7.2hz,4h),7.53-7.47(m,1h),7.46-7.34(m,8h),7.31-7.15(m,2h),3.90-3.76(m,2h),3.29-3.07(m,3h),2.87-2.78(m,1h),2.73-2.62(m,1h),1.11(d,j＝6.0hz,3h),1.04(s,9h)。

步骤2：3-((1-(苯并呋喃-3-基)丙-2-基)氨基)-2,2-二氟丙-1-醇

向n-[2-(苯并呋喃-3-基)-1-甲基-乙基]-3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙-1-胺(3.0g,5.91mmol)在thf(30ml)中的溶液中加入四丁基氟化铵(1m在thf中,8.86ml,8.86mmol)。将反应混合物在20℃搅拌3小时。反应混合物用etoac(80ml)稀释，用1nnaoh水溶液(20ml×5)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，滤过，浓缩且通过硅胶快速柱色谱纯化(0-10％meoh/dcm)得到标题化合物(1.3g,收率82％)，其为浅黄色油状物。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.58-7.43(m,3h),7.34-7.22(m,2h),3.85(t,j＝12.4hz,2h),3.27-3.02(m,3h),2.86-2.68(m,2h),1.15(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤3：3-((1,3-反式)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇

将3-[[2-(苯并呋喃-3-基)-1-甲基-乙基]氨基]-2,2-二氟-丙-1-醇(100mg,0.37mmol)、4-溴-2,6-二氟苯甲醛(82mg,0.37mmol)和三氟乙酸(42mg,0.37mmol)在1,2-二氯乙烷(4ml)中的混合物在微波反应器中在120℃搅拌30分钟。向反应混合物中加入nahco3水溶液(5ml)且混合物用etoac(10ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗产物通过硅胶快速柱色谱纯化(0-30％etoac/石油醚)得到标题化合物(80mg,收率46％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.52-7.46(m,1h),7.39-7.33(m,1h),7.28-7.21(m,2h),7.11(d,j＝8.4hz,2h),5.23(s,1h),3.81-3.58(m,3h),3.34-3.15(m,1h),3.08-2.95(m,1h),2.92-2.73(m,2h),2.66-2.56(m,1h),1.20(d,j＝6.8hz,3h)。

步骤4：3-((4-((1,3-反式)-2-(2,2-二氟-3-羟基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

将3-((1,3-反式)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇(300mg,0.64mmol)、pd2(dba)3(58mg,0.06mmol)、cs2co3(621mg,1.91mmol)、1-boc-3-(氨基)氮杂环丁烷(165mg,0.96mmol)和4,5-二(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(73mg,0.13mmol)在1,4-二噁烷(4ml)中的混合物在80℃在氮气下搅拌2小时。将混合物滤过，浓缩且通过硅胶快速柱色谱纯化(0-50％etoac/己烷)得到标题化合物(262mg,收率73％)，其为浅黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.52-7.43(m,1h),7.37-7.33(m,1h),7.24-7.17(m,2h),6.03(d,j＝11.2hz,2h),5.11(s,1h),4.41-4.39(m,1h),4.32-4.23(m,2h),4.19-4.06(m,1h),3.75-3.70(m,3h),3.40-3.31(m,1h),3.24-3.20(m,1h),3.10-2.84(m,2h),2.60-2.55(m,1h),1.44(s,9h),1.19(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤5：n-(4-((1,3-反式)-2-(2,2-二氟-3-((三甲基甲硅烷基)氧基)丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁-3-胺

在0℃在氮气下向3-((4-((1,3-反式)-2-(2,2-二氟-3-羟基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(350mg,0.62mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.36ml,3.07mmol)在二氯甲烷(15ml)中的溶液中缓慢加入三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯(0.23ml,1.24mmol)。将反应混合物在0℃搅拌10分钟。将饱和nahco3水溶液(10ml)加到反应混合物中且混合物用dcm(50ml)萃取。将有机层浓缩得到粗标题化合物(330mg,收率99％)，其为棕色油状物，其无需纯化即直接用于下一步。

步骤6：3-((1,3-反式)-1-(4-(氮杂环丁-3-基氨基)-2,6-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇

向n-(4-((1,3-反式)-2-(2,2-二氟-3-((三甲基甲硅烷基)氧基)丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁-3-胺(330mg,0.62mmol)在四氢呋喃(4ml)中的溶液中加入四丁基氟化铵(1m在thf中,0.92ml,0.92mmol)。将反应混合物在20℃搅拌10分钟。反应混合物用etoac(100ml)稀释，用1nnaoh水溶液(40ml×3)洗涤。有机层用硫酸钠干燥，滤过，浓缩且通过硅胶快速柱色谱纯化(0-15％meoh(10％tea)/dcm)得到标题化合物(200mg,收率70％)，其为白色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.49-7.42(m,1h),7.38-7.31(m,1h),7.24-7.16(m,2h),6.03(d,j＝11.2hz,2h),5.10(s,1h),4.56-4.54(m,1h),4.35-4.25(m,1h),4.04-3.87(m,2h),3.74-3.58(m,3h),3.55-3.45(m,2h),3.23-3.20(m,1h),3.06-2.88(m,2h),2.85-2.62(m,2h),2.60-2.50(m,1h),1.18(d,j＝6.4hz,3h)。

步骤7：157和158

向3-((1,3-反式)-1-(4-(氮杂环丁-3-基氨基)-2,6-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇(来自步骤6,200mg,0.43mmol)和n,n-二异丙基乙胺(0.23ml,1.29mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(3ml)中的混合物中加入1-碘-3-氟丙烷(81mg,0.43mmol)。将反应混合物在20℃搅拌16hr。反应混合物用etoac(200ml)稀释，用盐水(20ml×5)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，滤过，浓缩且通过制备性tlc纯化(10％meoh/dcm)得到标题化合物(120mg,收率53％)，其为白色固体，其进一步通过手性sfc分离(ad250mm×30mm,5μm,0.1％nh3h2o,co2/etoh＝40％)得到结构任意指定的两种纯对映异构体157和158。

157:分析性sfc柱,第二个峰,rt＝5.385min,¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.53-7.47(m,1h),7.39-7.30(m,1h),7.26-7.18(m,2h),6.12(d,j＝12.0hz,2h),5.12(s,1h),4.58-4.38(m,2h),4.07-4.05(m1h),3.89-3.72(m,3h),3.67-3.59(m,1h),3.55-3.50(m,1h),3.23-3.10(m,1h),3.03-2.89(m,3h),2.82-2.70(m,1h),2.70-2.50(m,3h),1.85-1.70(m,2h),1.19(d,j＝6.8hz,3h)。lcms:524.2[m+h]⁺。

实施例1583-((1s,3s)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并呋喃并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇158

按照实施例157的操作制备158。

158:分析性sfc柱,第一个峰,rt＝4.667min,¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.53-7.47(m,1h),7.39-7.30(m,1h),7.26-7.18(m,2h),6.12(d,j＝12.0hz,2h),5.12(s,1h),4.58-4.38(m,2h),4.07-4.05(m1h),3.89-3.72(m,3h),3.67-3.59(m,1h),3.55-3.50(m,1h),3.23-3.10(m,1h),3.03-2.89(m,3h),2.82-2.70(m,1h),2.70-2.50(m,3h),1.85-1.70(m,2h),1.19(d,j＝6.8hz,3h)。lcms:524.2[m+h]⁺。

实施例1593-((1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇159

步骤1：n-(1-(苯并[b]噻吩-3-基)丙-2-基)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙-1-胺

将1-(苯并噻吩-3-基)丙-2-胺(来自实施例54步骤2,8.0g,41.82mmol)、三氟甲磺酸[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟丙基]酯(20.18g,41.82mmol)和dipea(14.8ml,84.74mmol)在1,4-二噁烷(120ml)中的混合物在90℃搅拌16hr。将反应混合物浓缩且残留物用etoac(150ml)研磨，用盐水(40ml×2)洗涤。然后混合物用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。残留物通过硅胶柱纯化(0-18％etoac/石油醚)得到标题化合物(9.1g,收率42％)，其为黄色浆状物。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.88-7.84(m,1h),7.76-7.72(m,1h),7.68-7.65(m,4h),7.46-7.33(m,8h),7.14(s,1h),3.90-3.80(m,2h),3.25-3.09(m,3h),3.05-2.97(m,1h),2.86-2.80(m,1h),1.11(d,j＝6.0hz,3h),1.05(s,9h)。lcms:524.1[m+h]⁺。

步骤2：(1,3-反式)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶

将n-(1-(苯并[b]噻吩-3-基)丙-2-基)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙-1-胺(2.25g,4.3mmol)、乙酸(0.49ml,8.59mmol)和4-溴-2,6-二氟苯甲醛(0.95g,4.3mmol)在1,2-二氯乙烷(15ml)中的混合物在微波辐射下在120℃搅拌1.5hr。反应混合物用dcm(50ml)稀释，用饱和nahco3水溶液(20ml)洗涤，用硫酸钠干燥，滤过且浓缩。残留物通过硅胶快速色谱纯化(0-6％etoac/石油醚)得到标题化合物(1.84g,收率59％)，其为浅黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.75-7.70(m,1h),7.67-7.58(m,5h),7.48-7.35(m,7h),7.33-7.26(m,1h),6.93(d,j＝8.4hz,2h),5.37(s,1h),3.98-3.87(m,1h),3.73-3.54(m,2h),3.32-3.18(m,1h),3.02-2.97(m,1h),2.84-2.72(m,1h),2.68-2.63(m,1h),1.15(d,j＝6.4hz,3h),1.04(s,9h)。lcms:726.0[m+h]⁺。

步骤3：3-((4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

将(1,3-反式)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶(500.0mg,0.69mmol)、1-boc-3-(氨基)氮杂环丁烷(177.73mg,1.03mmol)、cs2co3(672.5mg,2.06mmol)、xantphos(79.62mg,0.14mmol)和pd2(dba)3(63.0mg,0.07mmol)在1,4-二噁烷(15ml)中的混合物在110℃在氮气气氛下搅拌3hr。反应混合物用etoac(60ml)稀释，滤过且滤饼用etoac(40ml)洗涤。将滤液浓缩且残留物通过硅胶快速色谱纯化(0～25％etoac/石油醚)得到标题化合物(378mg,收率65％)，其为浅黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.75-7.70(m,1h),7.66-7.59(m,5h),7.44-7.30(m,7h),7.29-7.25(m,1h),5.83(d,j＝10.8hz,2h),5.26(s,1h),4.27-4.19(m,2h),4.04-3.92(m,2h),3.72-3.64(m,3h),3.58-3.50(m,1h),3.25-3.15(m,1h),3.00-2.94(m,1h),2.85-2.75(m,1h),2.65-2.55(m,1h),1.44(s,9h),1.14(d,j＝6.4hz,3h),1.04(s,9h)。lcms:818.3[m+h]⁺。

步骤4：n-(4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁-3-胺

在5℃向3-((4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(375.0mg,0.46mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.27ml,2.29mmol)在dcm(20ml)中的溶液中缓慢加入三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯(0.25ml,1.38mmol)。将反应混合物在5℃搅拌10分钟。反应混合物用dcm(30ml)稀释且向混合物中加入nahco3水溶液(20ml)且分离两层。有机相用盐水(10ml)洗涤，用硫酸钠干燥，滤过且浓缩。残留物通过硅胶快速色谱纯化(meoh/dcm(0.1％net3))得到标题化合物(286mg,收率85％)，其为浅黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.75-7.69(m,1h),7.67-7.58(m,5h),7.46-7.33(m,7h),7.28-7.24(m,1h),5.85(d,j＝10.8hz,2h),5.25(s,1h),4.28-4.23(m,1h),4.21-4.14(m,1h),4.04-3.93(m,1h),3.89-3.80(m,2h),3.73-3.65(m,1h),3.63-3.54(m,1h),3.48-3.43(m,2h),3.25-3.10(m,1h),3.01-2.93(m,1h),2.64-2.59(m,1h),1.14(d,j＝6.4hz,3h),1.04(s,9h)。lcms:718.2[m+h]⁺。

步骤5：n-(4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺

将n-(4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁-3-胺(285.0mg,0.40mmol)、1-碘-3-氟丙烷(75.0mg,0.40mmol)和dipea(0.22ml,1.24mmol)在dmf(5ml)中的混合物在25℃搅拌4小时。反应混合物用etoac(40ml)稀释，用盐水(20ml×6)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，滤过，浓缩。残留物通过硅胶快速色谱纯化(0-6％meoh/dcm)得到标题化合物(250mg,收率76％)，其为浅黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.75-7.70(m,1h),7.65-7.58(m,5h),7.44-7.33(m,7h),7.28-7.24(m,1h),5.85(d,j＝11.2hz,2h),5.25(s,1h),4.60-4.40(m,2h),4.15-4.08(m,1h),4.03-3.85(m,2h),3.71-3.64(m,3h),3.58-3.50(m,1h),3.25-3.10(m,1h),2.86-2.78(m,3h),2.65-2.55(m,3h),1.80-1.65(m,2h),1.13(d,j＝6.4hz,3h),1.04(s,9h)。lcms:778.3[m+h]⁺。

步骤6：159和160

向n-(4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺(250.0mg,0.32mmol)在thf(5ml)中的溶液中加入tbaf(1m在thf中,0.48ml,0.48mmol)。将反应混合物在15℃搅拌2小时。将反应混合物浓缩且将残留物溶于etoac(20ml)且用盐水(10ml×5)洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩且通过硅胶快速柱色谱纯化(0-6％meoh/dcm)得到标题化合物(140mg,76％)，其为浅黄色固体。对外消旋反式混合物进行手性sfc分离(oj(250mm×30mm,10μm),0.1％nh4oh/etoh,80ml/min)得到两种对映异构体159和160:

159:55mg,收率40％,分析性sfc柱,第二个峰,rt＝6.547min,¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.71(d,j＝7.6hz,1h),7.61(d,j＝7.6hz,1h),7.40-7.33(m,1h),7.31-7.26(m,1h),6.04(d,j＝11.2hz,2h),5.19(s,1h),4.60-4.40(m,3h),4.08-4.00(m1h),3.82-3.61(m,5h),3.26-3.18(m,1h),3.16-3.08(m,1h),2.99-2.86(m,3h),2.75-2.68(m,1h),2.63-2.55(m,2h),1.83-1.70(m,2h),1.17(d,j＝6.4hz,3h)。lcms:540.1[m+h]⁺。

实施例1603-((1s,3s)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-c]吡啶-2(1h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇160

按照实施例159的操作制备160。

160:50mg,收率37％,分析性sfc柱,第一个峰,rt＝4.240min,¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.71(d,j＝7.6hz,1h),7.61(d,j＝7.6hz,1h),7.40-7.33(m,1h),7.31-7.26(m,1h),6.04(d,j＝11.2hz,2h),5.19(s,1h),4.60-4.40(m,3h),4.08-4.00(m1h),3.82-3.61(m,5h),3.26-3.18(m,1h),3.16-3.08(m,1h),2.99-2.86(m,3h),2.75-2.68(m,1h),2.63-2.55(m,2h),1.83-1.70(m,2h),1.17(d,j＝6.4hz,3h)。lcms:540.1[m+h]⁺。

实施例1613-((1r,3r)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)苯基)-6-甲氧基-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡咯并[2,3-c:5,4-c’]二吡啶-2(9h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇161

按照实施例162的操作制备161:rt＝4.09min,¹hnmr(400mhz,cd3od)δ8.05(s,1h),6.80(s,1h),6.14(d,j＝12.0hz,2h),5.17(s,1h),4.57-4.42(m,2h),4.21-4.04(m,3h),3.89(s,3h),3.82-3.71(m,1h),3.63-3.59(m,1h),3.51-3.35(m,3h),3.16-3.09(m,1h),2.97-2.93(m,3h),2.76-2.56(m,2h),1.90-1.78(m,2h),1.14(d,j＝6.4hz,3h)。lcms:554.2[m+h]⁺。

实施例1623-((1s,3s)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)苯基)-6-甲氧基-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡咯并[2,3-c:5,4-c’]二吡啶-2(9h)-基)-2,2-二氟丙-1-醇162

步骤1：(e)-2-(2-甲氧基-5-硝基-4-吡啶基)-n,n-二甲基-乙胺

将2-甲氧基-4-甲基-5-硝基-吡啶(20.0g,119mmol)在dmf-dma(300ml)中的混合物在120℃搅拌36小时。真空除去溶剂。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(30％etoac/石油醚)得到标题化合物(14.5g,收率55％)，其为棕色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.78(s,1h),7.17(d,j＝13.2hz,1h),6.58(s,1h),5.92(d,j＝13.2hz,1h),3.94(s,3h),2.97(s,6h)。

步骤2：5-甲氧基-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶

将(e)-2-(2-甲氧基-5-硝基-4-吡啶基)-n,n-二甲基-乙胺(来自步骤1,14.5g,65mmol)和10wt％pd/炭(3.46g)在乙醇(300ml)中的混合物在20℃在h2(15psi)下搅拌3小时。反应混合物通过硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(60％etoac/石油醚)得到标题化合物(8.8g,91％)，其为浅黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.97(s,1h),8.42(s,1h),7.38(d,j＝3.2hz,1h),6.95(s,1h),6.46(d,j＝3.2hz,1h),3.98(s,3h)。

步骤3：5-甲氧基-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶-3-甲醛

将5-甲氧基-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶(来自步骤2,12.5g,84.37mmol)和六亚甲基四胺(17.74g,126.55mmol)在hoac(200ml)中的混合物在100℃搅拌4小时。将水(300ml)加到反应混合物中且溶液用etoac(300ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥且浓缩。残留物通过硅胶色谱纯化(0-4％meoh/dcm)得到标题化合物(12.6g,收率85％)，其为白色固体。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ9.89(s,1h),8.37(s,1h),8.26(s,1h),7.45(s,1h),3.93(s,3h)。

步骤4：5-甲氧基-3-[2-硝基丙-1-烯基]-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶

将5-甲氧基-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶-3-甲醛(来自步骤3,12.6g,71.52mmol)和nh4oac(2.75g,35.76mmol)在硝基乙烷(150ml)中的混合物在80℃搅拌3小时。真空除去溶剂且加入水(300ml)。将混合物滤过，用水(100ml×2)洗涤且将滤饼干燥得到标题化合物(12.1g,收率73％)，其为黄色固体。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ8.44(s,1h),8.41(s,1h),8.03(s,1h),7.16(s,1h),3.98(s,3h),2.55(s,3h)。

步骤5：1-(5-甲氧基-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶-3-基)丙-2-胺

在冰浴中向5-甲氧基-3-[2-硝基丙-1-烯基]-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶(来自步骤4,12.1g,51.88mmol)在thf(180ml)中的搅拌溶液中加入lialh4(9.8g,259.41mmol)。将反应混合物加热至70℃且搅拌3小时。将反应混合物冷却至0℃且向混合物中加入h2o(10ml)，随后加入15％naoh水溶液(10ml)和水(30ml)。混合物用无水硫酸镁干燥且滤过。将滤液浓缩至干得到标题化合物(10.8g,定量收率)，其为黄色固体。lcms:206.1[m+h]⁺。

步骤6：3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-n-[2-(5-甲氧基-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶-3-基)-1-甲基-乙基]丙-1-胺

将三氟甲磺酸[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]酯(25.39g,52.62mmol)、dipea(24.52ml,157.85mmol)和1-(5-甲氧基-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶-3-基)丙-2-胺(来自步骤5,10.8g,52.62mmol)在二噁烷(200ml)中的混合物在90℃搅拌16小时。将反应混合物在水(200ml)中稀释且用etoac(200ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(20％etoac/石油醚)得到标题化合物(12.4g,收率44％)，其为浅黄色固体。lcms:538.1[m+h]⁺。

步骤7：(1,3-反式)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-6-甲氧基-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡咯并[2,3-c:5,4-c’]二吡啶

将3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-n-[2-(5-甲氧基-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶-3-基)-1-甲基-乙基]丙-1-胺(来自步骤6,12.4g,23.06mmol)、4-溴-2,6-二氟苯甲醛(5.1g,23.06mmol)和hoac(6.66ml,115.3mmol)在甲苯(200ml)中的混合物在110℃搅拌48小时。将反应混合物在水(200ml)中稀释，用etoac(300ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(30％etoac/石油醚)得到标题化合物(3.5g,收率21％)，其为黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.18(s,1h),7.71-7.59(m,5h),7.50-7.37(m,6h),6.93(d,j＝9.2hz,2h),6.77(s,1h),5.26(s,1h),3.93-3.89(m,4h),3.68-3.57(m,2h),3.28-3.21(m,1h),2.90-2.85(m,1h),2.78-2.72(m,1h),2.51-2.47(m,1h),1.14(d,j＝6.4hz,3h),1.04(s,9h)。

步骤8：3-((4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-6-甲氧基-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡咯并[2,3-c:5,4-c’]二吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

将(1,3-反式)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-6-甲氧基-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡咯并[2,3-c:5,4-c’]二吡啶(来自步骤7,700mg,0.95mmol)、1-boc-3-(氨基)氮杂环丁烷(326mg,1.89mmol)、cs2co3(924mg,2.84mmol)、pd2(dba)3(87mg,0.09mmol)和xantphos(109mg,0.19mmol)在二噁烷(14ml)中的混合物在110℃在氮气气氛下搅拌3小时。冷却至25℃后，将反应混合物在水(100ml)中稀释，用etoac(100ml×2)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(50％etoac/石油醚)得到标题化合物(380mg,收率48％)，其为浅黄色固体。lcms:832.3[m+h]⁺。

步骤9：n-(4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-6-甲氧基-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡咯并[2,3-c:5,4-c’]二吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁-3-胺

在冰浴中向3-((4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-6-甲氧基-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡咯并[2,3-c:5,4-c’]二吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(来自步骤8,380mg,0.46mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.27ml,2.28mmol)在dcm(4ml)中的搅拌溶液中加入tmsotf(0.25ml,1.37mmol)。将反应混合物在0℃搅拌10min。将反应混合物在饱和nahco3水溶液(50ml)中稀释，用dcm(50ml×3)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(10％meoh/dcm)得到标题化合物(240mg,收率72％)，其为浅黄色固体。lcms:732.3[m+h]⁺。

步骤10：n-(4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-6-甲氧基-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡咯并[2,3-c:5,4-c’]二吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺

将n-(4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-6-甲氧基-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡咯并[2,3-c:5,4-c’]二吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁-3-胺(来自步骤9,240mg,0.33mmol)、1-碘-3-氟丙烷(62mg,0.33mmol)和dipea(0.15ml,0.98mmol)在dmf(4ml)中的混合物在25℃搅拌16小时。将反应混合物在etoac(30ml)中稀释，用盐水(30ml×2)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(5％meoh/dcm)得到标题化合物(150mg,收率58％)，其为浅黄色固体。lcms:792.3[m+h]⁺。

步骤11：161和162

向n-(4-((1,3-反式)-2-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,2-二氟丙基)-6-甲氧基-3-甲基-2,3,4,9-四氢-1h-吡咯并[2,3-c:5,4-c’]二吡啶-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-胺(来自步骤10,150mg,0.19mmol)在thf(3ml)中的混合物中加入tbaf(1.0m在thf中,0.57ml,0.57mmol)。将反应混合物在25℃搅拌1小时。将反应混合物在饱和nahco3水溶液(20ml)中稀释，用etoac(20ml×3)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，滤过且浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(10％meoh/dcm)得到外消旋产物(40mg,收率38％)，其通过手性sfc纯化(ad250mm×30mm,10μm；超临界co2/etoh(0.1％nh3h2o)＝40/40,80ml/min)得到161(8mg,收率20％)和162(8mg,收率20％)，其均为白色固体。

162:rt＝5.20min,¹hnmr(400mhz,cd3od)δ8.04(s,1h),6.78(s,1h),6.11(d,j＝12.0hz,2h),5.15(s,1h),4.52-4.38(m,2h),4.05-4.02(m,1h),3.88(s,3h),3.79-3.72(m,3h),3.63-3.40(m,2h),3.15-3.09(m,1h),2.96-2.93(m,3h),2.77-2.55(m,4h),1.81-1.68(m,2h),1.13(d,j＝6.4hz,3h)。lcms:554.2[m+h]⁺。

实施例1633-[(1r,3r)-1-[2,6-二氟-4-[(s)-[1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基]-羟基-甲基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-2-基]-2,2-二氟-丙-1-醇163

按照实施例164的操作制备163，其为第一个洗脱峰(rt＝10.5min,de>99％)，其为白色固体(10mg,27％):¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.48(d,j＝7.6hz,1h),7.21-7.16(m,1h),7.11-7.06(m,1h),6.92(d,j＝10.5hz,2h),5.96(s,1h),5.50(s,1h),4.88(d,j＝5.0hz,1h),4.53(t,j＝5.7hz,1h),4.41(t,j＝6.0hz,1h),4.29(dd,j＝4.0,11.6hz,1h),4.14-4.05(m,1h),3.87-3.80(m,1h),3.63(t,j＝12.5hz,2h),3.33-3.08(m,6h),2.93-2.78(m,2h),2.65-2.53(m,4h),1.78-1.67(m,2h),1.22-1.19(m,3h)；lcms:538.2[m+h]⁺。

实施例1643-[(1r,3r)-1-[2,6-二氟-4-[(r)-[1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基]-羟基-甲基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-2-基]-2,2-二氟-丙-1-醇164

步骤1：3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-n-[(1r)-2-吲哚-1-基-1-甲基-乙基]丙-1-胺

历时5min将三氟甲磺酸[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]酯(16.7g,34.61mmol)加到(2r)-1-吲哚-1-基丙-2-胺(5.97g,34.26mmol)和n,n-二异丙基乙胺(7.46ml,42.83mmol)在1,4-二噁烷(95ml)中的溶液中。将反应混合物在90℃搅拌4h，冷却至rt，真空浓缩。将残留物溶于etoac且用饱和nahco3溶液、水和盐水洗涤。将有机层干燥(na2so4)，滤过且真空浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化(0-80％dcm/环己烷)得到标题化合物(15.1g,收率87％)，其为无色胶状物。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.67-7.61(m,6h),7.52-7.31(m,6h),7.18(t,j＝7.6hz,1h),7.12-7.07(m,2h),6.48(d,j＝3.2hz,1h),4.10(dd,j＝6.6,14.3hz,1h),3.98(dd,j＝6.2,14.3hz,1h),3.84-3.76(m,2h),3.26-2.96(m,3h),1.05-1.04(m,12h)

步骤2：3-[[4-[(1r,3r)-2-[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基]-3,5-二氟-苯基]-羟基-甲基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

将3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-n-[(1r)-2-吲哚-1-基-1-甲基-乙基]丙-1-胺(1.05g,2.07mmol)、3-[(3,5-二氟-4-甲酰基-苯基)-羟基-甲基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(747.mg,2.28mmol)和乙酸(297μl,5.19mmol)在甲苯(2.7ml)中的脱气混合物在干燥密封微波小瓶中在加热块上在120℃搅拌4h。将混合物冷却至rt且用etoac(200ml)稀释。有机层用饱和nahco3(30ml)、水(30ml)和盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，滤过且真空浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化(0-10％etoac/环己烷)，随后在kp-nh柱上纯化(0-80％etoac/环己烷)且通过硅胶柱色谱纯化(15μm柱,0-70％tbme/环己烷)得到标题化合物的非对映异构体混合物(110mg,收率6.5％)，其为黄色油状物。lcms:817.3[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.65-7.05(m,14h),6.83-6.67(m,2h),5.95(s,1h),5.54(s,1h),4.64-4.58(m,1h),4.18-4.09(m,1h),3.97-3.51(m,11h),3.21-2.54(m,4h),1.47-1.37(m,9h),1.21-1.13(m,3h),1.10-1.00(m,9h)。

步骤3：氮杂环丁-3-基-[4-[(1r,3r)-2-[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基]-3,5-二氟-苯基]甲醇

在氩气下将tfa(123μl,1.59mmol)逐滴加到3-[[4-[(1r,3r)-2-[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基]-3,5-二氟-苯基]-羟基-甲基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(52mg,0.06mmol)在dcm(300μl)中的冷却(-10℃)溶液中。将反应混合物在0℃搅拌1.75h，加入etoac(50ml)和饱和nahco3(8ml)且搅拌5min，萃取。有机层进一步用饱和nahco3(8ml)、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，滤过且真空浓缩得到标题化合物的非对映异构体混合物，其为淡黄色油状物(48mg,收率105％)。粗残留物直接用于下一步。lcms:716.2[m+h]⁺。

步骤4：[4-[(1r,3r)-2-[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基]-3,5-二氟-苯基]-[1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基]甲醇

将氮杂环丁-3-基-[4-[(1r,3r)-2-[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基]-3,5-二氟-苯基]甲醇(114.5mg,0.16mmol)、碳酸钾(110.6mg,0.80mmol)和1-氟-3-碘-丙烷(16.54μl,0.18mmol)在乙腈(3.7ml)中的混合物在rt搅拌18h。固体通过填料滤过除去，滤饼用乙腈淋洗且将滤液真空浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱纯化(15μmsi柱,0至10％2n氨/meoh/dcm)得到标题化合物(47mg,收率38％)，其为黄色泡沫。lcms:777.5[m+h]⁺。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.65-7.59(m,4h),7.50-7.23(m,8h),7.20-6.99(m,2h),6.83-6.73(m,2h),5.96(d,j＝2.9hz,1h),5.55(d,j＝3.4hz,1h),4.82-4.76(m,1h),4.54-4.50(m,1h),4.43-4.38(m,1h),4.15-4.10(m,1h),3.98-3.88(m,2h),3.75-3.73(m,2h),3.62-3.52(m,1h),3.28-3.13(m,4h),3.01(q,j＝7.3hz,1h),2.84-2.72(m,1h),2.53-2.47(m,3h),1.38-1.28(m,1h),1.16(d,j＝6.6hz,3h),1.05-1.03(m,9h)。

步骤5：标题化合物由[4-[(1r,3r)-2-[3-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,2-二氟-丙基]-3-甲基-3,4-二氢-1h-吡嗪并[1,2-a]吲哚-1-基]-3,5-二氟-苯基]-[1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基]甲醇(来自步骤4,40.0mg,0.05mmol)和1.0m四丁基氟化铵在thf中的溶液(56.7μl,0.06mmol)按照就制备实施例117步骤2所述操作制备。粗产物通过硅胶色谱纯化(流动相:二氯甲烷/2n氨/甲醇,梯度0％至5％)，随后通过手性hplc纯化(chiralpakic,流动相:7％etoh/庚烷,0.1％二乙胺,16min运行,多次注射)。收集适当的馏分得到两种立体异构体。

第一个洗脱峰163(rt＝10.5min,de>99％)，其为白色固体(10mg,27％)。

第二个洗脱峰164(rt＝16min,de>99％)，其为白色固体(10mg,27％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.48(d,j＝7.6hz,1h),7.21-7.16(m,1h),7.11-7.06(m,1h),6.92(d,j＝10.5hz,2h),5.96(s,1h),5.50(s,1h),4.88(d,j＝5.0hz,1h),4.53(t,j＝5.7hz,1h),4.41(t,j＝6.0hz,1h),4.29(dd,j＝4.0,11.6hz,1h),4.14-4.05(m,1h),3.87-3.80(m,1h),3.63(t,j＝12.5hz,2h),3.33-3.08(m,6h),2.93-2.78(m,2h),2.65-2.53(m,4h),1.78-1.67(m,2h),1.22-1.19(m,3h)；lcms:538.2[m+h]⁺。

实施例901乳腺癌细胞erα高含量荧光成像降解测定

mcf7乳腺癌细胞在第1天以每孔10,000个细胞的密度接种在384孔经聚赖氨酸涂布的组织培养板(greiner#t-3101-4)中，50μl/孔rpmi(不含酚红)，10％fbs(经活性炭处理的)，含有l-谷氨酰胺。化合物在第2天以2个化合物源浓度准备：100μm和1μm(最终得到2条重叠的滴定曲线)，在labcyte低死体积板中，10μl/孔且10μldmso在指定的孔中用于回填和5μm氟维司群(对照化合物)在指定的孔中。使用labcyteecho声学分配器对化合物和对照品进行分配以分配具有预定系列稀释度(1.8×,10点,一式两份)的化合物、适当的回填液和对照化合物(所转移的最终总体积为417.5nl且化合物分配体积范围为2.5nl至417.5nl；最终0.84％dmso(v/v))，最终得到0.05nm至835nm的浓度范围。将细胞板在37℃孵育4小时。如下使用biotekel406洗板器和分配器进行固定和透化。细胞通过在biotekel406上使用蠕动泵5μl盒直接向每个孔中的50μl细胞培养基中添加15μl16％多聚甲醛(electronmicroscopysciences#15710-s)来固定(甲醛的最终浓度为3.7％w/v)。将样品孵育30分钟。将孔内容物吸出且向每个孔中添加50μl/孔含有0.5％w/v牛血清白蛋白、0.5％v/vtritonx-100(抗体稀释缓冲液)的磷酸盐缓冲盐水(pbs)。将样品孵育30分钟。将孔内容物吸出且用100μl/孔pbs洗涤3次。如下使用biotekel406洗板器和分配器对雌激素受体α(esr1)进行免疫荧光染色。从孔中吸出孔上清液且分配25μl/孔以1:1000稀释在抗体稀释缓冲液中的抗esr1mab(f10)(santacruzsc-8002)。将样品在室温孵育2小时。样品用100μl/孔pbs洗涤4次。将25μl(微升)/孔第二抗体溶液(在抗体稀释缓冲液中以1:1000稀释的alexafluor488缀合物抗小鼠igg(lifetechnologies#a21202)和以1μg/ml稀释的hoechst33342)分配到每个孔中。将样品在室温孵育2小时。使用biotekel406以100μl/孔pbs将样品洗涤3次。使用cellomicsarrayscanv(thermo)对esr1进行定量荧光成像。样品的荧光图像(通道1：xf53hoechst(dna染色)；通道2：xf53fitc(esr1染色))如下获得：使用cellomicsvtiarrayscan，使用生物应用“隔室分析”，使用自动暴露(基于dmso对照孔)，将两个通道的“峰值靶标百分比”设置为25％靶标饱和度。通道1(dna染色)用于定义核区域(circ)。在每个细胞基础上测量“mean_circavgintch2”的测量值(其为核区域中的alexafluor488荧光强度(esr1))且对所有测量的细胞进行平均。使用genedatascreener软件进行数据分析，其中经dmso和5nm氟维司群处理的样品用于定义esr1的0％和100％变化。“robustfit”方法用于定义曲线的拐点(ec50)和最大效果的平台值(sinf)。将示例性式i、ii和iii化合物的降解数据报道为表1中的er-αmcf7hcssinf(％)值。

实施例902体外细胞增殖测定

雌激素受体调节剂化合物和化疗化合物的效力通过使用以下方案的细胞增殖测定来测量(mendoza等人(2002)cancerres.62:5485-5488)。

发光细胞存活力测定是一种基于对存在的atp(其指示代谢活性细胞的存在)进行定量来确定培养物中存活细胞数目的均相方法。测定被设计成用多孔板进行，这使其对于自动化高通量筛选(hts)、细胞增殖和细胞毒性测定来说是理想的。均相测定操作涉及将单一试剂(试剂)直接添加至在补充有血清的培养基中培养的细胞。不需要细胞洗涤、培养基去除或多个移液步骤。发光细胞存活力测定(包括试剂和方案)是可商购的(promegacorp.,madison,wi,technicalbulletintb288)。

该测定对化合物进入细胞和抑制细胞增殖的能力进行评估。测定原理基于通过在均相测定中对存在的atp进行定量来确定存在的存活细胞数目，其中试剂的添加导致细胞裂解且通过荧光素酶反应产生发光信号。发光信号与存在的atp量成比例。

操作：第1天—接种细胞板(来自falcon#353962的384孔黑色透明底微透明有盖tc板)，收集细胞，以1000个细胞/54μl/孔将细胞接种到384孔细胞板中用于3天测定。细胞培养基：rpmi或dmem高葡萄糖、10％胎牛血清、2mml-谷氨酰胺、p/s。在37℃和5％co2孵育o/n(过夜)。

第2天—将药物添加至细胞，稀释化合物，dmso板(以1:2连续9个点)。在96孔板的第二列中加入20μl浓度为10mm的化合物。使用来自nunc(目录号249946)的precisionmediaplates96孔圆锥底聚丙烯板在整块板中以1:2(10μl+20μl100％dmso)连续稀释总计9个点(1:50稀释)。向所有孔中添加147μl培养基。使用(caliper,perkin-elmerco.)由dmso板中的每个孔将3μldmso+化合物转移至培养基板上的每个相应孔中。对于2种药物组合研究，使用rapidplate由dmso板中的每个孔将一种药物1.5μldmso+化合物转移至培养基板上的每个相应孔中。然后将另一种药物1.5μl转移至培养基板中。

将药物添加至细胞，细胞板(1:10稀释)：将6μl培养基+化合物直接添加至细胞(在细胞上已有54μl培养基)。在不会经常打开的培养箱中在37℃和5％co2孵育3天。

第5天—使板显影，在室温解冻celltiterglo缓冲液：由37℃取出细胞板且历时约30分钟平衡至室温。将缓冲液添加至底物(瓶到瓶)。将30μl试剂(promega目录号g7572)添加至每个孔的细胞。在板振荡器上放置约30分钟。在analystht读板器上读取发光(每孔半秒)。

细胞存活力测定和组合测定：将细胞以1000-2000个细胞/孔接种在384孔板中且保持16小时。第二天在96孔板中在dmso中制备9个以1:2连续稀释的化合物稀释液。使用自动化设备(zymarkcorp.,hopkinton,ma)将化合物进一步稀释至生长培养基中。然后将稀释的化合物一式四份地添加至384孔细胞板的孔中且在37℃和5％co2孵育。4天后，根据制造商说明书使用(promega)通过发光对存活细胞的相对数目进行测量且在wallacmultilabel(perkinelmer,fostercity)上读取。ec50值使用软件(graphpad,sandiego)来计算。组合测定中的药物以4×ec50浓度开始给药。若药物的ec50>2.5μm，则所用最高浓度为10μm。雌激素受体调节剂化合物和化学治疗剂在所有测定中同时或间隔4小时(逐一)添加。

另一种示例性体外细胞增殖测定包括以下步骤：

1.将在培养基中含有约10⁴个细胞(细胞系和肿瘤类型参见表3)的100μl细胞培养物等分试样沉积在384孔不透明壁板的每个孔中。

2.准备含有培养基和无细胞的对照孔。

3.将化合物添加至实验孔中且孵育3-5天。

4.将板平衡至室温约30分钟。

5.添加体积与每个孔中存在的细胞培养基体积相等的试剂。

6.将内容物在定轨振荡器上混合2分钟以诱导细胞裂解。

7.将板在室温孵育10分钟以使发光信号得以稳定。

8.记录发光且在图中报道为rlu＝相对发光单位。

9.使用chou和talalay组合方法和用软件(biosoft,cambridge,uk)的剂量-效果分析进行分析以得到组合指数。

可选择地，将细胞以最佳密度接种在96孔板中且在测试化合物存在下孵育4天。随后将alamarblue^tm添加至测定培养基中且将细胞孵育6小时，然后在激发波长为544nm且发射波长为590nm的情况下读取。ec50值使用s形剂量响应曲线拟合来计算。

可选择地，在48小时药物处理后使用试剂(promegainc.,madison,wi)对增殖/存活力进行分析。dmso处理在所有存活力测定中用作对照。ic50值使用xl拟合软件(idbs,alameda,ca)来计算。

细胞系获自atcc(americantypeculturecollection,manassas,va)或dsmz(deutschesammlungvonmikroorganismenundzellkulturengmbh,braunschweig,de)。将细胞在补充有10％胎牛血清、100单位/ml青霉素、2mml-谷氨酰胺和100mg/ml链霉素(lifetechnology,grandisland,ny)的rpmi1640培养基中在37℃在5％co2下培养。

实施例903mcf7体外细胞增殖测定

mcf7细胞用pbs洗涤且在经聚赖氨酸涂布的384孔组织培养板(greiner)中以25,000个细胞/ml和40μl/孔铺板于rpmi1640(gibco11835-030[-苯酚+谷氨酰胺])和10％经活性炭处理的fbs(gibco12676-029)中且孵育过夜。化合物如下准备：使用biomek-fx以500倍最终所需浓度在dmso中连续稀释且在rpmi1640中稀释50倍。对照化合物氟维司群和阴性对照二甲基亚砜也以类似的方式准备。将5μl每种化合物浓度和每种对照化合物转移至细胞板中。向对照孔中添加氟维司群(最终浓度为100nm)。向阴性对照孔中添加dmso(0.2％v/v)。将5微升(5μl)1nm雌二醇(在不含酚红的rpmi1640(gibco11835-030)中)添加至细胞板的每个孔中(除不含雌二醇的对照孔外)。将细胞孵育72小时，然后使用40μl/孔celltiterglo试剂(promega#g7572)进行裂解且在envision(perkinelmer)读板器上测量发光。使用genedatascreener软件对数据进行分析，经dmso和氟维司群处理的样品用于定义0％和100％抑制且ec50值使用robust方法使用曲线拟合来计算。

实施例904erα共激活物肽拮抗剂测定

在dmso中以1mm准备测试化合物且使用biomekfx在384孔透明v形底聚丙烯板(greiner目录号781280)中以12点1至3倍滴定进行连续稀释。3×化合物中间稀释液如下制备：将1ml每种浓度的化合物系列稀释液与32.3mltr-fret共调节蛋白缓冲液e(lifetechnologiespv4540)混合。使用biomekfx将2ml3×化合物中间稀释液转移至1536孔板(aurorabiotechnologiesmako1536黑色板,#00028905)中。bioraptr(beckmancoulter)用于分配：2ml/孔“3×erα溶液”：22nmerα(人雌激素受体α,经gst标签的esr1配体结合域,跨越残基s282-v595,野生型序列或含有突变y537s或d538g)在含有7.5mm二硫苏糖醇(dtt)的tr-fret共调节蛋白缓冲液e中；和2ml3×测定混合物(750nm荧光素-pgc1a肽序列；lifetechnologiespv4421)、12nm雌二醇、15nm抗gst经tb标记的抗体在tr-fret共调节蛋白缓冲液e(含7.5mmdtt)中。“无受体”对照孔接受不含gst-erα蛋白的缓冲液。将板在v-spin离心机中以1800rpm离心20秒且在室温在盖好板的情况下孵育2小时。使用perkinelmerenvision荧光读数器使用tr-fret设置进行测量(上镜：perkinelmerlance/delfia双重发射(pe#2100-4160)；激发滤波器：perkinelmeruv(tfr)340nm(pe#2100-5010)；发射滤波器：色度495nm/10nm和520nm/25nm(chroma#pv003滤波器用于lanthascreen,25mm直径用于envision)；激发光：100％；延迟：100μs；窗口时间：200；连续窗口数目：1；闪光之间的时间：2000μs；闪光次数：100；闪光次数(第二检测器)：100)。相对于无化合物(仅dmso)对照和“无erα对照”计算百分比抑制值。使用genedatascreener软件进行曲线拟合和ic50计算。

实施例905体内小鼠肿瘤异种移植物效力

小鼠：雌性重度组合性免疫缺陷小鼠(foxchasec.b-17/icrhsd,harlan)或裸鼠(taconicfarms,harlan)为8至9周龄且在研究的第0天具有范围为15.1至21.4克的体重。动物随意饮水(反渗透,1ppmcl)和进食由18.0％粗蛋白、5.0％粗脂肪和5.0％粗纤维构成的nih31经改良和辐照的实验室在光照循环为12小时、温度为21-22℃(70-72°f)且湿度为40-60％的静态小型隔离器中将小鼠安置在经辐照的实验室动物垫料上。prc特别遵守“实验室动物护理和使用指南”关于约束、饲养、手术操作、饲料和流体管制及兽医护理的建议。prc的动物护理和使用计划由国际实验室动物护理评估和认证协会(aaalac)认证，这确保了遵守关于实验室动物护理和使用的公认标准。

肿瘤植入：用癌细胞启动异种移植。将细胞在补充有10％胎牛血清、2mm谷氨酰胺、100单位/ml青霉素、100μg/ml硫酸链霉素和25μg/ml庆大霉素的rpmi1640培养基中培养。细胞在指数生长期间收集且根据细胞系的倍增时间以5×10⁶或10×10⁶个细胞/ml的浓度重新混悬于磷酸盐缓冲盐水(pbs)中。将肿瘤细胞皮下植入右胁腹且当平均大小接近100至150mm³的目标范围时监测肿瘤生长。在肿瘤植入后21天(指定为研究的第0天)将小鼠分成四组，每组由个体肿瘤体积为75-172mm³且组平均肿瘤体积为120-121mm³的10只小鼠构成(参见附录a)。体积使用下式计算：

肿瘤体积(mm³)＝(w²×l)/2，其中w＝肿瘤宽度且l＝肿瘤长度(以mm为单位)。肿瘤重量可在假设1mg等同于1mm³肿瘤体积的情况下进行估计。

治疗剂：雌激素受体调节剂化合物和化学治疗剂通常由储存在室温且免受光照的干粉准备。药物剂量每周在0.5％甲基纤维素:0.2％吐温80的去离子水(“媒介物”)溶液中准备且储存在4℃。媒介物(+)为含0.1mg/kg炔雌醇(ee2)的溶剂/缓冲液。媒介物(-)为不含炔雌醇的溶剂/缓冲液。化合物的剂量在给药的每天通过用无菌盐水(0.9％nacl)稀释储备液的等分试样来准备。配制所有剂量以使所描述的mg/kg剂量以0.2ml体积/20克体重(10ml/kg)递送。

治疗：将所有剂量与个体动物的体重成比例地调整且通过所示途径提供。

终末点：肿瘤体积以2个维度(长度和宽度)使用ultracaliv卡尺(5410111型；fredv.fowlercompany)如下测量：肿瘤体积(mm³)＝(长度×宽度²)×0.5且使用excel11.2版(microsoftcorporation)进行分析。线性混合性效果(lme)建模方法用于对来自相同动物的肿瘤体积随时间的重复测量进行分析(pinheiroj等人,nlme:linearandnonlinearmixedeffectsmodels.rpackageversion3.192.2009；tann等人,clin.cancerres.2011,17(6):1394-1404)。该方法解决了重复测量和由于在研究结束前动物的任何非治疗相关死亡所导致的适度退出。三次回归样条用于在每个剂量水平将非线性分布拟合成log2肿瘤体积的时程。然后将这些非线性分布关联于混合性模型中的剂量。使用下式将作为相对于媒介物对照的百分比的肿瘤生长抑制(％tgi)计算为相应剂量组/天的拟合曲线下面积(auc)相对于媒介物的百分比：％tgi＝100×(1-auc剂量/auc媒介物)。使用该式，tgi值为100％表示肿瘤停滞，tgi值>1％但<100％表示肿瘤生长延迟且tgi值>100％表示肿瘤消退。将动物的部分响应(pr)定义为肿瘤消退>50％但<100％起始肿瘤体积。将完全响应(cr)定义为在研究过程的任何一天100％肿瘤消退(即无可测量的肿瘤)。

毒性：动物在研究的前五天每天称重，然后每周称重两次。动物体重使用adventurerav812量表(ohauscorporation)来测量。重量变化百分比如下计算：体重变化(％)＝[(重量新的一天-重量第0天)/重量第0天]×100。频繁观察小鼠任何不良的与治疗相关的副作用的明显体征且在观察时记录毒性的临床体征。将可接受的毒性定义为在研究期间小于20％的组平均体重(bw)降低且在10只所治疗的动物中有不超过一只发生治疗相关(tr)死亡。导致较大毒性的任何给药方案被认为高于最大耐受剂量(mtd)。若可归因于如临床体征和/或尸检所证实的治疗副作用，则将死亡归类为tr或若归因于给药期间或最后一次给药的10天内的未知原因，则也可将死亡归类为tr。若没有证据表明死亡与治疗副作用相关，则将死亡归类为ntr。

体内异种移植乳腺癌模型(mcf-7；他莫昔芬敏感性)：将含有0.72mg17β-雌二醇的时间释放丸剂皮下植入nu/nu小鼠。使mcf-7细胞在含有10％fbs的rpmi中在5％co2和37℃生长。使经胰蛋白酶消化的细胞沉淀且以1×10⁷个细胞/ml重新悬浮于50％rpmi(无血清)和50％matrigel中。在植入丸剂后2-3天在右胁腹皮下注射mcf-7细胞(100μl/动物)。每两周一次监测肿瘤体积(长度×宽度²/2)。当肿瘤达到约200mm³的平均体积时，将动物随机化且开始治疗。动物每天用媒介物或化合物治疗4周。在整个研究期间每两周一次监测肿瘤体积和体重。

体内异种移植乳腺癌模型(他莫昔芬抗性模型)：带有mcf-7肿瘤(平均肿瘤体积为200mm³)的雌性nu/nu小鼠(具有补充性17β-雌二醇丸剂；0.72mg；60天缓慢释放)通过经口管饲用他莫昔芬(枸橼酸盐)治疗。每周两次监测肿瘤体积(长度×宽度²/2)和体重。其中肿瘤体积保持静止的显著抗肿瘤应答后，在治疗约100天时首次观察到明显的肿瘤生长。在治疗120天时增加他莫昔芬剂量。快速生长的肿瘤被认为是他莫昔芬抗性的且被选择用于体内传代到新的宿主动物中。将来自他莫昔芬抗性肿瘤的肿瘤片段(约100mm³/动物)皮下植入雌性nu/nu小鼠(具有17β-雌二醇丸剂(0.72mg；60天缓慢释放))的右侧胁腹。在不变的他莫昔芬选择下维持所传代的肿瘤且每周一次监测肿瘤体积(长度×宽度²/2)。当肿瘤体积达到约150-250mm³时，将动物随机分入治疗组(平均肿瘤体积为200mm³)且终止他莫昔芬治疗。动物每天用媒介物或化合物治疗4周。在研究期间每周两次监测肿瘤体积和体重。

实施例906未成熟子宫湿重测定

将雌性未成熟cd-igs大鼠(抵达后21日龄)治疗三天。每天向动物给药且持续三天。对于拮抗剂模式，媒介物或测试化合物在口服给药0.1mg/kg炔雌醇后15分钟通过管饲口服施用。对于激动剂模式，媒介物或测试化合物通过管饲口服施用。在第四天给药后24小时收集血浆用于药物动力学分析。在收集血浆后立即对动物实施安乐死且将子宫取出且称重。

将来自每组2只动物的子宫和卵巢固定在10％中性缓冲福尔马林中且包埋在石蜡中，切片且针对h&e(sdpath)进行染色。染色的组织由经委员会认证的病理学家进行分析和读取。将来自每组4只动物的子宫和卵巢在液氮中快速冷冻用于转录分析，检查由雌激素受体调节的所选一组基因。

实施例907成熟子宫湿重10天测定

购买雌性cd-igs大鼠(69日龄,charlesriverlaboratories)且分组。第1组在供应商(charlesriverlaboratories)处在60日龄时切除卵巢且研究在手术后2周开始，而第2-8组保持完整。媒介物或测试化合物口服施用10天。在第10次和最后一次给药后两小时进行心脏穿刺且收集血清用于药物动力学和雌二醇分析。在收集血清后立即对动物实施安乐死且将子宫和卵巢取出且称重。

虽然出于清楚理解的目的已通过说明和实施例的方式相当详细地描述了前述发明，但是描述和实施例不应被解释为限制本申请范围。通过引用的方式将本申请引用的所有专利和科学文献的全部公开内容明确地并入本申请。