具有降低的与抗药物抗体结合的经修饰的单可变结构域抗体的制作方法

技术特征：

1.单免疫球蛋白可变结构域（dAb），其包含选自下述的一种或多种修饰：

（a）C末端延伸，其包含从1个氨基酸至5个氨基酸的氨基酸延伸；或

（b）一个或多个氨基酸构架取代，其中至少一个取代是选自下述的取代：P14A取代、P41A取代和L108A取代；

并且与未经修饰的单免疫球蛋白可变结构域（dAb）相比，其具有降低的与预存ADA的结合。

2.根据权利要求1的单免疫球蛋白可变结构域（dAb），其中所述dAb选自人VH、或人VL dAb或骆驼科VHH。

3.根据权利要求1或2的单免疫球蛋白可变结构域（dAb），其包含从1个氨基酸至4个氨基酸的C末端延伸。

4.根据前述权利要求中任一项的单免疫球蛋白可变结构域（dAb），其中所述C末端延伸包含其为丙氨酸的氨基酸。

5.根据前述权利要求中任一项的单免疫球蛋白可变结构域（dAb），其中（i）当所述单免疫球蛋白可变结构域是人VH或骆驼科VHH时，所述C末端延伸包含选自下述的氨基酸延伸或由其组成：（a）A、（b）AS、（c）AST、（d）ASTK、（e）ASTKG、（f）AAA或（g）T；和（ii）当所述单免疫球蛋白可变结构域是人VL例如Vκ时，所述C末端延伸包含选自下述的氨基酸延伸或由其组成：（a）AAA、（b）A、（c）TV和（d）T。

6.单免疫球蛋白可变结构域（dAb），其与靶抗原单价结合，其包含：

a. 对于所述靶抗原特异性的三个互补性决定（CDR）区；使得所述dAb以在5μM至1pM范围中的KD结合所述抗原

b. 四个构架（FW）区；和

c. 由序列VTVS(S)nX或VEIKpRqX组成的C末端序列；和任选地

d. 与人种系构架序列相比，在第14、41、108、110或112位的一个或多个氨基酸取代

其中：

n代表独立地选自0或1的整数；

p和q各自代表0或1，使得当p代表1时，q可以是0或1，并且使得当p代表0时，q也代表0；

X可以存在或不存在，并且如果存在，则代表1-5个氨基酸残基的氨基酸延伸；

另外的条件是如果X不存在；

i. n是0，和/或以VTVS(S)n结尾的dAb包含所述氨基酸取代中的一个或多个；

ii. p和/或q是0，和/或以VEIKpRq结尾的dAb包含所述氨基酸取代中的一个或多个。

7.根据权利要求6的单免疫球蛋白可变结构域，其具有比等价dAb更低的对于抗药物抗体的结合亲和力和/或亲合力，所述等价dAb具有相同序列，除了在所述等价dAb中X不存在，n、p和q是1，并且不存在氨基酸取代。

8.根据权利要求6的单免疫球蛋白可变结构域，其具有在约10pM或更低至约50nM范围中的KD。

9.根据权利要求1-8中任一项的单免疫球蛋白可变结构域，其选自：人VH dAb、人VL dAb（例如Vκ）和骆驼科VHH。

10.根据权利要求1-9中任一项的单免疫球蛋白可变结构域，其中所述一个或多个氨基酸取代选自：P14A取代、P41A取代、L108A取代、T110A取代和S112A取代。