抗vla1(cd49a)抗体药物组合物的制作方法

抗vla1(cd49a)抗体药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明描述了抗VLA-1抗体的制剂。
【专利说明】抗VLA1 (CD49A)抗体药物组合物
[0001] 相关申请
[0002] 本申请要求2012年2月16日提交的美国临时申请No. 61/599,827的优先权，其 完整内容全部并入本文。
[0003] 序列表
[0004] 本申请含有以ASCII形式经由EFS-Web提交的序列表，其通过提述完整并入本文。 所述ASCII拷贝创建于2013年2月13日，命名为C2095-7004W0_SL. txt且大小为35, 968 字节。
[0005] 发明背景
[0006] 整联蛋白是介导细胞-细胞和细胞-基质粘附的细胞表面受体的超家族。此类异 二聚体蛋白质（由两个非共价连接的多肽链α和β链构成）在发育和组织修复过程中为 细胞生长、迁移和分化提供了固着以及信号。整联蛋白还牵涉免疫和炎性过程，所述过程需 要使细胞外渗出血管，进入组织并且朝向感染位置。
[0007] VLA-U也称为α?β?)属于称为VLA("极晚期抗原"）整联蛋白的一类整联蛋白。 VLA-I结合胶原（I型和IV型）和层粘连蛋白，其牵涉细胞在胶原上的粘着和迁移；胶原基 质的收缩和重组织；和参与细胞外基质重塑的基因的表达调控。
[0008] 已显示VLA-I参与类风湿关节炎、与骨质吸收相关的慢性炎性疾病的形成。患者 的关节炎滑膜中的浸润T细胞表达高水平的VLA-1，利用抗体阻断其显著地减少动物模型 的炎症反应和关节炎的形成。
[0009] 发明概述
[0010] 本发明至少部分基于含有高浓度抗VLA-I抗体的制剂（formulation)的开发。 一些实施方案尤其适用于通过皮下（SC)投递对受试者如人，例如人患者的投递。所述抗 VLA-I抗体可以是例如SAN-300,且所述抗体浓度为约彡lOOmg/mL至约225mg/mL。该制剂 提供针对炎性、免疫性或自身免疫性病症的治疗效果。例如，该制剂能提供针对炎性病症如 类风湿性关节炎（RA)的治疗效果。
[0011] 在一个方面，本发明特征为一种水性药物组合物，如稳定的水性药物组合物，其 含有抗VLA-I抗体，浓度为彡100mg/mL，例如至少约110mg/mL，至少约120mg/mL，至少约 130mg/mL，至少约140mg/mL，至少约150mg/mL，至少约160mg/mL，至少约170mg/mL，至少约 180mg/mL，至少约190mg/mL，或至少约200mg/mL。在一个实施方案中，所述组合物包含浓度 为低于约200mg/mL，低于约205mg/mL，低于约210mg/mL，低于约215mg/mL，低于约220mg/ mL或低于约225mg/mL的抗VLA-I抗体。在另一个实施方案中，所述组合物包含浓度为约 155mg/mL 至约 165mg/mL，约 165mg/mL 至约 175mg/mL，约 175mg/mL 至约 185mg/mL，约 180mg/ mL 至约 190mg/mL，约 185mg/mL 至约 195mg/mL，约 195mg/mL 至约 205mg/mL，约 205mg/mL 至 约215mg/mL或约215mg/mL至约225mg/mL的抗VLA-I抗体。在另一个实施方案中，所述组 合物包含浓度为大于约l〇〇mg/mL至约225mg/mL，如约160mg/mL至约210mg/mL，约175mg/ mL 至约 195mg/mL，或约 180mg/mL 至约 190mg/mL 的抗 VLA-I 抗体。
[0012] 在一个实施方案中，所述包含抗VLA-I抗体的水性药物组合物还包含缓冲剂，如 乙酸盐、组氨酸、琥珀酸盐或磷酸盐缓冲剂。所述缓冲剂可以浓度为约IOmM至约50mM，例如 约20mM至约40mM，如约30mM。例如，所述组合物可以含有浓度为约IOmM至约50mM，例如约 20mM至约40mM，如约30mM的组氨酸缓冲剂。在一个实施方案中，所述组合物含有浓度为约 IOmM至约50mM，例如约20mM至约40mM，如约30mM的乙酸盐缓冲剂。
[0013] 在另一个实施方案中，所述水性药物组合物还包含赋形剂，如山梨糖醇、氯化钠 (NaCl)、蔗糖、海藻糖、或甘露醇。所述组合物可以包含浓度为约IOOmM至约300mM，例如 IlOmM 至约 270mM，约 120mM 至约 230mM，或约 130mM 至约 210mM，约 170mM 至约 200mM，或约 180mM至约200mM的赋形剂。例如，所述组合物可以含有浓度为约180mM至约300mM，例如 约 200mM 至约 300mM，约 200mM 至约 240mM，约 230mM 至约 270mM，或约 240mM 至约 260mM 的 山梨糖醇。在另一个例子中，所述组合物可以含有浓度为约IOOmM至约200mM，例如约IlOmM 至约190mM，约120mM至约180mM，或约130mM至约170mM的NaCl。在另一个例子中，所述 组合物可以含有浓度为约200mM至约240mM，约230mM至约270mM，或约240mM至约260mM 的蔗糖。在另一个例子中，所述组合物可以含有浓度为约200mM至约240mM，约230mM至约 270mM，或约240mM至约260mM的海藻糖。在再一个例子中，所述组合物可以含有浓度为约 200mM至约240mM，约230mM至约270mM，或约240mM至约260mM的甘露醇。
[0014] 在另一个实施方案中，所述水性药物组合物还包含表面活性剂,如聚山梨醇酯,例 如聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。在一个实施方案中，表面活性剂的浓度为约0.001 %至 约0. 5%，约0. 001%至约0. 1%，例如约0. 005%至约0. 05%，如约0. 01%的浓度。
[0015] 如本文中使用的，"表面活性剂"是一种降低液体表面张力的物质，且用于阻止表 面吸附并充当针对蛋白质聚集的稳定剂。适用于本文中的例示性表面活性剂包括，例如聚 山梨醇酯80 (亦称为Tween 80)、聚山梨醇酯20 (亦称为Tween 20)。还可以使用具有类似 强度的其他表面活性剂。
[0016] 在又一个实施方案中，所述水性药物组合物具有约4. 5至约7的pH，例如约5至 约7的pH、约5至约6的pH、约5. 5至约7的pH、或约5. 5至约6. 5的pH。在一个实施方 案中，所述组合物具有约4. 5的pH、约5的pH、约5. 5的pH、约6的pH、约6. 5的pH或约7 的pH。
[0017] 在一个实施方案中,所述水性药物组合物包含缓冲剂、赋形剂和表面活性剂。例如 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含乙酸盐、山梨糖醇和聚山梨醇酯80。在一个实 施方案中，乙酸盐浓度为约20mM至约40mM，山梨糖醇浓度为约180mM至约240mM，聚山梨醇 酯80浓度为约0. 005 %至约0. 05%，且所述组合物具有约4. 5至约6的pH。在另一个实施 方案中，乙酸盐浓度为约20mM至约40mM，山梨糖醇浓度为约200mM至约300mM，聚山梨醇酯 80浓度为约0. 0055 %至约0. 05%，且所述组合物具有约4. 5至约5. 5的pH。在一个实施 方案中，乙酸盐浓度为约30mM，山梨糖醇浓度为约180mM至约250mM，聚山梨醇酯80浓度为 约0. 01 %，且所述制剂具有约5. 5的pH。
[0018] 在另一个实施方案中，所述组合物包含组氨酸、山梨糖醇和聚山梨醇酯20。例如， 组氨酸浓度为约20mM至约40mM，山梨糖醇浓度为约180mM至约270mM，聚山梨醇酯20浓度 为约0. 005 %至0. 05%，且所述组合物具有约6至约7的pH。在一个实施方案中，组氨酸浓 度为约30禮，山梨糖醇浓度为约1801111至约2501111，聚山梨醇酯20浓度为约0.01%且所述 组合物具有约6. 0的pH。
[0019] 在另一个实施方案中，所述水性药物组合物包含乙酸盐、NaCl和聚山梨醇酯80。 在一个实施方案中，乙酸盐浓度为约20mM至约40mM，NaCl浓度为约120mM至约180mM，聚 山梨醇酯80浓度为约0. 005 %至约0. 05%，且所述组合物具有约4. 5至约6的pH。在一个 实施方案中，乙酸盐浓度为约30mM，NaCl浓度为约150mM，聚山梨醇酯80浓度为约0. 01%， 且所述制剂具有约5. 5的pH。
[0020] 在另一个实施方案中，所述组合物包含组氨酸、NaCl和聚山梨醇酯20。例如，组 氨酸浓度为约20mM至约40mM，NaCl浓度为约120mM至约180mM，聚山梨醇酯20浓度为约 0. 005 %至约0. 05%，且所述组合物具有约6至约7的pH。一个实施方案中，组氨酸浓度为 约30mM，NaCl浓度为约150mM，聚山梨醇酯20浓度为约0. 01 %且所述组合物具有约6. 0的 pH〇
[0021] 在另一个实施方案中，所述水性药物组合物中的抗VLA-I抗体是单克隆抗体。在 另一个实施方案中，所述抗VLA-I抗体是CDR嫁接的抗体。在又一个实施方案中，所述抗 VLA-I抗体是人源化抗体。
[0022] 在另一个实施方案中，所述抗VLA-I抗体是人源化的单克隆抗体，如SAN-300。在 另一个实施方案中，所述抗VLA-I抗体是SAN-300的变体。例如在一些实施方案中，所述抗 体的轻链可变区具有与SAN-300的轻链可变区有一个或多个氨基酸残基不同，但不超过2 个氨基酸残基，3个氨基酸残基，4个氨基酸残基，5个氨基酸残基，或6个氨基酸残基不同的 氨基酸序列，和/或重链可变区具有与SAN-300的重链可变区有一个或多个氨基酸残基不 同，但不超过2个氨基酸残基，3个氨基酸残基，4个氨基酸残基，5个氨基酸残基，或6个氨 基酸残基不同的氨基酸序列。在一些实施方案中，一些或所有的不同是保守性变化。
[0023] 在另一个实施方案中，所述抗VLA-I抗体具有以下一种或两者：具有SEQ ID N0:4(图2A)的氨基酸序列的轻链可变区，和具有SEQ ID N0:5(图2B)的氨基酸序列的重 链可变区。在其他实施方案中，所述抗VLA-I抗体是这些抗体之一的变体。例如，在一些实 施方案中，所述轻链可变区具有与SEQ ID NO: 4中的序列有一个或多个氨基酸残基不同，但 不超过2个氨基酸残基，3个氨基酸残基，4个氨基酸残基，5个氨基酸残基，6个氨基酸残 基，7个氨基酸残基，8个氨基酸残基，9个氨基酸残基或10个氨基酸残基不同的氨基酸序 列，和/或重链可变区具有与SEQ ID N0:5限定的序列有一个或多个氨基酸残基不同，但不 超过2个氨基酸残基，3个氨基酸残基，4个氨基酸残基，5个氨基酸残基，6个氨基酸残基，7 个氨基酸残基，8个氨基酸残基，9个氨基酸残基或10个氨基酸残基不同的氨基酸序列。在 其他实施方案中，所述轻链可变区具有与SEQ ID NO:4的序列80%，85%，90%或95%相 同的氨基酸序列，和/或重链可变区具有与SEQ ID NO:5的序列80% ,85% ,90%或95% 相同的氨基酸序列。
[0024] 在再一个实施方案中，所述抗VLA-I抗体具有以下一种或两者：SEQ ID NO: 1 (图 3)的轻链氨基酸序列，和SEQ ID N0:2(图4)的重链氨基酸序列。在其他实施方案中，所述 VLA-I抗体是这些抗体之一的变体。例如，在一些实施方案中，所述抗体的轻链具有与SEQ ID NO: 1的序列有一个或多个氨基酸残基不同，但不超过2个氨基酸残基，3个氨基酸残基， 4个氨基酸残基，5个氨基酸残基，6个氨基酸残基，7个氨基酸残基，8个氨基酸残基，9个氨 基酸残基或10个氨基酸残基不同的氨基酸序列，和/或抗体的重链具有与SEQ ID NO: 2的 序列有一个或多个氨基酸残基不同，但不超过2个氨基酸残基，3个氨基酸残基，4个氨基酸 残基，5个氨基酸残基，6个氨基酸残基，7个氨基酸残基，8个氨基酸残基，9个氨基酸残基 或10个氨基酸残基不同的氨基酸序列。在其他实施方案中，所述抗体的轻链具有与SEQ ID NO:1的序列80%，85%，90%或95%相同的氨基酸序列，和/或抗体的重链具有与SEQ ID NO: 2的序列80 %，85 %，90 %或95 %相同的氨基酸序列。
[0025] 当氨基酸身份不同（例如将上文所指的SEQ ID N0:4或5中的氨基酸取代为不同 的氨基酸）、有缺失或插入时，第一氨基酸序列相比于第二氨基酸序列"不同"或展现"不同 /差异"。不同之处可以在，例如框架区、CDR、铰链或恒定区中。不同之处可以在蛋白质内 部或在序列端。在一些实施方案中，一些或所有的不同相比于所记载的序列是保守性变化。
[0026] 在另一个实施方案中，所述组合物包含低于20mM柠檬酸盐，而在另一个实施方案 中，所述组合物基本上没有柠檬酸盐。例如，柠檬酸盐水平包含低于20mM柠檬酸盐，或柠檬 酸盐水平为当对受试者施用实施方案时对本文中描述的特性如注射部位疼痛没有影响。
[0027] 在另一个实施方案中，所述包含抗VLA-I抗体的水性药物组合物稳定达至少6个 月，至少12个月，至少18个月，至少24个月，至少30个月，或至少36个月或更长（例如至 少1年、至少2年，至少3年或更长）。例如所述组合物可以在约2°C至约8°C (例如约4°C、 约5°C )的温度稳定达至少6个月，至少12个月，至少18个月，至少24个月，至少30个月， 至少36个月或更长（例如至少1年、至少2年，至少3年或更长）。在一个实施方案中，所 述组合物在约2°C至约8°C的温度稳定达至少24个月（至少2年）。在另一个实施方案中， 所述组合物在环境温度（约20°C至约30°C，如约25°C )稳定达至少2天，至少3天，至少 4天，至少5天，至少6天，或至少7天或更长（例如至少1周、至少12天或至少14天或更 长）。
[0028] 在一个实施方案中，抗VLA-I抗体组合物中低于约1%，低于约2%，低于约5%， 低于约10%，或低于约15%的抗体在6个月，12个月，18个月，24个月，30个月，或36个月 或更长的时段后，如1年、2年或3年或更长的时段后聚集。在另一个实施方案中，抗VLA-I 抗体组合物中低于约1%，低于约2%，低于约5%，低于约10%，或低于约15%的抗体在6 个月，12个月，18个月，24个月，30个月，或36个月或更长的时段后，如1年、2年、3年或更 长的时段后碎裂（fragment)。
[0029] 在某些实施方案中，聚集或蛋白质碎裂通过动态光散射（DLS)、大小排阻层 析（SEC)、颜色/澄清度、UV光散射或大小排阻层析来测量。在一个实施方案中，通 过DLS来测量聚集。可通过本领域普通技术人员已知的方法来实施DLS，如记载于例 如 Nobbmann 等,"Dynamic Light Scattering as a Relative Tool for Assessing the Molecular Integrity and Stability of Monoclonal Antibodies"Biotech, and Genetic Engineering Rev. 24:117-128, 2007 中的那些。在另一个实施方案中， 通过SEC来测量聚集。可通过本领域普通技术人员已知的方法来实施SEC，如记载于例 如 Skoog, D. A. !Principles of Instrumental Analysis, 6th ed. ；Thompson Brooks/ Cole:Belmont, CA, 2006, Chapter 28 中的那些。
[0030] 在一个实施方案中，水性药物组合物中低于约I %，低于约2%，低于约5%，低于 约10%，低于约15 %或低于约20%的抗体在6个月，12个月，18个月，24个月，30个月，或 36个月或更长的时段后（例如1年、2年，3年或更长的时段后）经历碎裂。
[0031] 在一个实施方案中，水性药物组合物中低于约1%，低于约2%，低于约5%， 低于约10%，低于约15 %或低于约20%的抗体在6个月，12个月，18个月，24个月， 30个月，或36个月或更长的时段后（例如1年、2年，3年或更长的时段后）经历脱酰 胺。在另一个实施方案中，通过测量蛋白质损失，如通过光谱学，例如UV-Vis( "紫外线 可见（Ultraviolet-visible)"）光谱学来测定脱酰胺。UV-Vis光谱学的使用在例如 Schmid, "Biological Macromolecules:UV-visible spectrophotometry，'Encyclopedia of Life Sciences，pp.l_4(2001 年 4 月 19 日网上发表）中综述。
[0032] 在一个实施方案中，在将制剂存储在封闭的容器中于约2°C至约8°C，如约4°C达 预选定的时间段，如在存储达至少30天，至少60天，至少90天，至少180天，至少1年，至 少1. 5年，至少2年，至少2. 5年，至少3年或更长后，水性药物组合物中的抗VLA-I抗体展 现出低于预选定的聚集水平。在另一个实施方案中，在将制剂存储在封闭的容器中于约2°C 至约8°C，如约4°C达预选定的时间段时，水性药物组合物中的抗VLA-I抗体展现出低于预 选定的蛋白质损失（由于聚集所致）水平。在一个实施方案中，预选定的蛋白质损失水平 为低于约40%，低于约35%，低于约30%，低于约20%，低于约15%，低于约10%，低于约 8%，低于约5%，低于约3%，低于约1%，或低于约0. 5%。在一个实施方案中，在6个月、 1年、2年或3年后，制剂中低于约1%，低于约2%，低于约5%，低于约10%，低于约15%， 低于约20%，低于约30%，低于约35%，或低于约40%的抗体进行聚集。
[0033] 蛋白质损失可例如通过光谱学，如通过UV-Vis光谱学测量。在某些实施方案中， 聚集通过动态光散射（DLS)、颜色/澄清度、UV光散射或大小排阻层析来测量。
[0034] 在另一个实施方案中，当制剂经过预选定的冻融（freeze/thaw)循环数（例如 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8或更多轮冻融循环）时，水性药物组合物中的抗VLA-I抗体展现出低于 预选定的蛋白质损失水平。在一个实施方案中，所述预选定的冻融循环数是5。"冻融循 环"是包含其中样品为冻结的固体的至少一段时间继之以其中样品是液体的一段时间的顺 序，或包含其中样品为液体的至少一段时间继之以其中样品是冻结的固体的一段时间的顺 序。所述时间段可以等于或长于，例如5分钟，10分钟，15分钟，20分钟，30分钟，45分钟， 60分钟，或120分钟，2小时，3小时，4小时，6小时，24小时，48小时，或3天，5天，10天， 或20天。所述液体和固体时间段不需要同样长。固体时间段可以保持于0°C或更低，例 如-10°〇、-201：，-301：、-401：，-601：，或-801：。所述固体时间段可以至少为例如2小时， 3小时，4小时或更长。所述固体时间段可继之以融解，例如在18°C，20°C，23°C或更高，直至 融化。在再次冻结样品以开始另一轮冻融之前可将样品保持融解达20分钟，30分钟，1小 时、或2小时或更长。可将样品以冻融循环之间的冷冻状态或融解状态存储。在一个实施 方案中，在2, 3, 4, 5, 6, 7, 8或更多轮冻融循环后预选定的蛋白质损失水平是，例如低于约 40%，低于约35%，低于约30%，低于约20%，低于约15%，低于约10%，低于约8%，低于 约5%，低于约3%，低于约1 %，或低于约0. 5%。蛋白质损失可通过例如UV-Vis光谱学测 量。
[0035] 在再一个实施方案中，当制剂受到光应激时，如当将组合物存储于封闭的容器中 于2°C至8°C (例如4°C)，并暴露于1.2勒时（lux hour)白光和随后200W/m2UV能量时，水性 药物组合物中的抗VLA-I抗体展现出低于预选定的蛋白质损失水平。在一个实施方案中， 所述预选定的蛋白质损失水平为低于约40%，低于约35%，低于约30%，低于约20%，低于 约15%，低于约10%，低于约8%，低于约5%，低于约3%，低于约1%，或低于约0.5%。蛋 白质损失可通过例如UV-Vis光谱学测量。
[0036] 在另一个实施方案中，当在室温对制剂进行搅拌，例如以550rpm，600rpm，650rpm， 700rpm，750rpm或更快摇动达预选定的时间段（如达1天、2天，3天，4天，5天或更长，例如 24小时，48小时，72小时，96小时，120小时或更长）时，水性药物组合物中的抗VLA-I抗体 展现出低于预选定的蛋白质损失水平。在一个实施方案中，所述预选定的蛋白质损失水平 为低于约40%，低于约35%，低于约30%，低于约20%，低于约15%，低于约10%，低于约 8%，低于约5%，低于约3%，低于约2%，低于约1. 5%，低于约1%，低于约0. 5%，或低于 约0. 25%。蛋白质损失可通过例如UV-Vis光谱学测量。
[0037] 在一个实施方案中，当所述制剂经受预选定的氧化应激水平时，水性药物组合物 中的抗VLA-I抗体展现出低于预选定的蛋白质损失水平。所述预选定的氧化应激水平可由 终浓度为〇. 04% (v/v)的过氧化氢的存在和在37°C温育达预选定的时间段，如2小时，3小 时，4小时，5小时，或6小时或更长来提供。在一个实施方案中，所述预选定的蛋白质损失 水平为低于约35%，低于约30%，低于约25%，低于约20%，低于约15%，或低于约10%。 蛋白质损失可通过例如UV-Vis光谱学测量。
[0038] 在一个实施方案中，当所述制剂经受预选定的脱酰胺应激水平时，水性药物组合 物中的抗VLA-I抗体展现出低于预选定的蛋白质损失水平。所述预选定的脱酰胺水平可通 过将组合物的pH提高至如pH彡9,如在存在Tris (tris (羟甲基）氨基甲烷）缓冲液的情 况下，然后在约25°C温育组合物达预选定的时间段，如2天，3天，4天，5天，6天或更长来提 供。在一个实施方案中，所述预选定的蛋白质损失水平为低于约20%，低于约15%，低于约 10%，低于约5%，低于约3%，或低于约1%。蛋白质损失可通过例如UV-Vis光谱学测量。
[0039] 在一个实施方案中，所述包含抗VLA-I抗体制剂的水性药物组合物用于皮下（SC) 施用。
[0040] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物具有用于患者自身施用于皮下部位的可 注射性（syringeability)。例如,在置于适用于皮下投递的注射器中时,使用足以压低栓 塞（depress the plunger)以用于患者自身施用的压力，可将所述水性组合物排出并由此 注射到患者的皮下部位中。所述压力或"栓塞力（plunger force)"可以例如等于或小于 41bs。在一个实施方案中，该栓塞力将允许在10秒以内投递单位剂量。在另一个实施方 案中，使用不超过预选定量的栓塞力，可将置于具有预选定型号的针头的注射器中的约ImL 水性药物组合物以预选定的速率排出。在另一个实施方案中，使用不超过预选定量的栓塞 力，可将置于具有预选定型号的针头的注射器中的约2mL水性药物组合物以预选定的速率 排出。例如，使用不超过41bs的栓塞力，可将置于具有25号针头、27号针头或30号针头的 注射器中的约ImL水性药物组合物以IOmL/分钟排出。
[0041] 如本文中使用的，"单位剂量"是适用于一次性施用的量。单位剂量能提供有效量 的抗VLA-I抗体，例如减轻炎性病症的一种或多种症状，如关节炎或IBD的一种或多种症状 的抗VLA-I抗体的量。
[0042] 在一个实施方案中，所述包含抗VLA-I抗体的水性药物组合物具有适用于以注射 器皮下投递的粘度，如低于21cP (厘泊），低于18cP，低于15cP，低于14cP，如3rpm，5rpm， 7rpm，或9rpm的粘度。在一个实施方案中，所述组合物具有约IOcP至约20cP，约IOcP至约 15cP，约 IOcP 至约 14cP，或例如 IOcP 至 13cP 的粘度，例如 3rpm，5rpm，7rpm，或 9rpm。
[0043] "粘度"是对由剪切应力或拉伸应力变形的流体的阻力的量度。更厚的物质具有比 更薄的物质更高的阻力，如此具有更高的粘度。
[0044] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物用于由医护专业人员施用。
[0045] 在一个方面，本发明特征在于一种水性药物组合物，其包含抗VLA-I抗体，所述抗 体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO:2的序列的重链；浓度为约IOmM 至约50mM的乙酸盐；浓度为约180mM至约275mM的山梨糖醇；0. 005%至0. 5%的聚山梨醇 酯80 ;约4. 5至约6. 0的pH。在一个实施方案中，抗体浓度为彡100mg/mL至约225mg/mL, 例如约120mg/mL至约210mg/mL,约140mg/mL至约200mg/mL。在另一个实施方案中，抗体 浓度为约 155mg/mL 至约 195mg/mL，约 160mg/mL 至约 190mg/mL，或约 170mg/mL 至约 180mg/ mL。在一些实施方案中，抗体浓度为约160mg/mL，约165mg/mL，约175mg/mL，约180mg/mL或 约 190mg/mL。
[0046] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含浓度为约20mM至约40mM，例如 约30mM的乙酸盐。在另一个实施方案中，所述水性药物组合物含有浓度为约180mM至约 275mM，例如约200mM至约240mM的山梨糖醇。在一个实施方案中，所述水性药物组合物含 有浓度为约250mM的山梨糖醇。在一个实施方案中，所述水性药物组合物含有浓度为约 0. 005%至约0. 05%，如约0. 01 %的聚山梨醇酯80。在又一个实施方案中，所述水性药物组 合物具有约5. 5的pH。
[0047] 在一个实施方案中，所述包含抗VLA-I抗体的水性药物组合物具有约80m0sm/kg 至约 500m0sm/kg，例如约 100m0sm/kg 至约 450m0sm/kg，约 150m0sm/kg 至约 400m0sm/kg，约 200m0sm/kg 至约 350m0sm/kg，例如约 280m0sm/kg 至约 350m0sm/kg，例如约 300m0sm/kg 至 约325m0sm/kg的渗透度（osmolality)。在一个例子中，所述包含抗VLA-I抗体的水性药物 组合物具有低于约500m0sm/kg，低于约455m0sm/kg，低于约405m0sm/kg，低于约355m0sm/ kg，低于约305m0sm/kg，或低于约255m0sm/kg的渗透度。
[0048] 在另一个实施方案中，所述水性药物组合物含有浓度为约170mg/mL至约210mg/ mL的抗VLA-I抗体，该抗体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO: 2的序 列的重链。在一个实施方案中，所述组合物还包含浓度为约25mM至约35mM的乙酸盐，浓度 为约180mM至约275mM的山梨糖醇，浓度为约0. 005 %至约0. 02 %的聚山梨醇酯80,和约 5. 5 的 pH。
[0049] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含浓度为约185mg/mL至约195mg/mL 的抗VLA-I抗体，该抗体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO: 2的序列 的重链；浓度为约30mM的乙酸盐；浓度为约250mM的山梨糖醇；浓度为约0. 01 %的聚山梨 醇酯80 ;和约5. 5的pH。
[0050] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含浓度为约190mg/mL的抗VLA-I抗 体。
[0051] 在一个方面，本发明特征在于一种水性药物组合物，其包含抗VLA-I抗体，所述抗 体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO:2的序列的重链；浓度为约IOmM 至约50禮的乙酸盐；浓度为约1201111至约1801111的似(：1;浓度为约0.005%至约0.05%的 聚山梨醇酯80 ;和约4. 5至约6. 0的pH。在一个实施方案中，所述抗体浓度为彡100mg/mL 至约 225mg/mL，例如约 120mg/mL 至约 210mg/mL，约 140mg/mL 至约 200mg/mL。在另一个实 施方案中，所述抗体浓度为约155mg/mL至约195mg/mL，约160mg/mL至约190mg/mL，或约 170mg/mL至约180mg/mL。在一些实施方案中，所述抗体浓度为约160mg/mL，约165mg/mL, 约 175mg/mL，约 180mg/mL 或约 190mg/mL。
[0052] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含浓度为约20mM至约40mM，例如 约30mM的乙酸盐。在另一个实施方案中，所述水性药物组合物含有浓度为约130mM至约 170mM，例如约HOmM至约160mM的NaCl。在一个实施方案中，所述水性药物组合物含有浓 度为约150mM的NaCl。在一个实施方案中，所述水性药物组合物含有浓度为约0. 005%至 约0. 05%，如约0. 01 %的聚山梨醇酯80。在再一个实施方案中，所述水性药物组合物具有 约5. 5的pH。
[0053] 在一个实施方案中，所述包含抗VLA-I抗体的水性药物组合物具有80m0sm/kg至 350m0sm/kg的渗透度。
[0054] 在另一个实施方案中，所述水性药物组合物含有浓度为约170mg/mL至约210mg/ mL的抗VLA-I抗体，所述抗体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO: 2的 序列的重链。在一个实施方案中，所述组合物还包含浓度为约25mM至约35mM的乙酸盐，浓 度为约120禮至约1801111的似(：1，浓度为约0.005%至约0.02%的聚山梨醇酯80，和约5.5 的pH。
[0055] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物含有浓度为约185mg/mL至约195mg/mL 的抗VLA-I抗体，所述抗体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO: 2的序 列的重链；浓度为约30mM的乙酸盐；浓度为约150mM的NaCl ;约0. 01 %的聚山梨醇酯80 ; 和约5. 5的pH。
[0056] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含浓度为约190mg/mL的抗VLA-I抗 体。
[0057] 在一个方面，本发明特征在于一种水性药物组合物，其包含抗VLA-I抗体，所述 抗体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID N0:2的序列的重链；浓度为约 10禮至约501111的组氨酸；浓度为约1801111至约3001111的山梨糖醇 ；浓度为约0.005%至 约0. 05%的聚山梨醇酯20 ;和约5. 5至约7. 0的pH。在一个实施方案中，所述抗体浓度 为 > lOOmg/mL 至约 225mg/mL，例如约 120mg/mL 至约 210mg/mL，约 140mg/mT,至约 200mg/ mL。在另一个实施方案中，所述抗体浓度为约155mg/mL至约195mg/mL,约160mg/mL至约 190mg/mL，或约170mg/mL至约180mg/mL。在一些实施方案中，所述抗体浓度为约160mg/mL, 约 165mg/mL，约 175mg/mL，约 180mg/mL 或约 190mg/mL。
[0058] 在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为20mM至40mM，如浓度为约30mM的组氨 酸。在另一个实施方案中，所述组合物包含浓度为220mM至280mM，例如240mM至260mM，如 约250mM的山梨糖醇。在另一个实施方案中，所述组合物包含浓度为约0. 005 %至0. 05%， 如约0.01 %的聚山梨醇酯20。在另一个实施方案中，所述组合物具有约6.0的pH，而在再 一个实施方案中，所述组合物具有约280m0sm/kg至约350m0sm/kg的渗透度。
[0059] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含浓度为约160mg/mL至约200mg/mL 的抗VLA-I抗体，所述抗体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO: 2的序 列的重链；浓度为约25mM至约35mM的组氨酸；浓度为约240mM至约260mM的山梨糖醇；浓 度为约0. 005%至约0. 02%的聚山梨醇酯20 ;和约6的pH。
[0060] 在另一个实施方案中，所述组合物包含浓度为约170mg/mL至约180mg/mL的抗 VLA-I抗体，所述抗体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO: 2的序列的重 链；浓度为约30mM的组氨酸；浓度为约250mM的山梨糖醇；浓度为约0. 01 %的聚山梨醇酯 20 ;和约6的pH。
[0061] 在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为约180mg/mL的抗体。
[0062] 在一个方面，本发明特征在于一种水性药物组合物，其包含抗VLA-I抗体，所述抗 体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO:2的序列的重链；浓度为约IOmM 至约50禮的组氨酸；浓度为约1201111至约1801111的似(：1;浓度为约0.005%至约0.05%的 聚山梨醇酯20 ;和约5. 5至约7. 0的pH。在一个实施方案中，所述抗体浓度为彡100mg/mL 至约 225mg/mL，例如约 120mg/mL 至约 210mg/mL，或约 140mg/mL 至约 200mg/mL。在另一个 实施方案中，所述抗体浓度为约155mg/mL至约195mg/mL，约160mg/mL至约190mg/mL，或约 170mg/mL至约180mg/mL。在一些实施方案中，所述抗体浓度为约160mg/mL，约165mg/mL, 约 175mg/mL，约 180mg/mL 或 190mg/mL。
[0063] 在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为约20mM至约40mM，如浓度为约30mM的 组氨酸。在另一个实施方案中，所述组合物包含浓度为约130mM至约170mM，例如约HOmM 至约160mM，如约150mM的NaCl。在另一个实施方案中，所述组合物包含浓度为约0. 005% 至约0. 05%，如约0. 01 %的聚山梨醇酯20。在另一个实施方案中，所述组合物具有约6. 0 的pH,而在再一个实施方案中，所述组合物具有约280m0sm/kg至约350m0sm/kg的渗透度。
[0064] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含浓度为约160mg/mL至约200mg/mL 的抗VLA-I抗体，所述抗体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO: 2的序 列的重链；浓度为约25mM至约35mM的组氨酸；浓度为约HOmM至约160mM的NaCl ;浓度为 约0· 005%至约0· 02%的聚山梨醇酯20 ;和约6的pH。
[0065] 在另一个实施方案中，所述组合物包含浓度为约170mg/mL至约180mg/mL的抗 VLA-I抗体，所述抗体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和具有SEQ ID NO: 2的序列的重 链；浓度为约30mM的组氨酸；浓度为约150mM的NaCl ;约0. 01 %的聚山梨醇酯20 ;和约6 的pH。
[0066] 在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为约180mg/mL的抗体。
[0067] 在一个方面，本发明特征在于一种水性药物组合物，其含有对治疗炎性疾病有效 的抗VLA-I抗体的量；和用于投递适用于皮下投递的制剂中的有效量抗体的工具。
[0068] 在一个方面，本发明特征在于单位剂量形式的本文中所述的水性药物组合物。在 一个实施方案中，所述组合物包含约200mg的抗VLA-I抗体。在另一个实施方案中，所述 组合物包含约155mg至约165mg，约165mg至约175mg，约175mg至约185mg，约185mg至约 195mg，约 195mg 至约 205mg，约 205mg 至约 215mg，或约 215mg 至约 225mg 的抗 VLA-1 抗体。 在一个实施方案中，所述组合物以约160mg至约210mg的抗体，例如约180mg或约190mg包 含抗VLA-I抗体。
[0069] 在一个实施方案中，所述含有抗VLA-I抗体的水性药物组合物在对人施用时将对 人投递约2. Omg抗体每kg体重至约4. Omg抗体每kg体重。
[0070] 在另一个实施方案中，所述水性药物组合物具有约0. 25mL至约I. 5mL，如约 0. 5mL,约0. 75mL,或约I. OmL的体积。在一个实施方案中，单位剂量以约80mg至约315mg， 如约 IOOmg,约 160mg，约 180mg，约 190mg，约 210mg，约 250mg，或约 300mg 投递抗 VLA-I 抗 体。
[0071] 在另一个方面，本发明特征在于单位剂量的抗VLA-I抗体的水性制剂，其中所述 单位剂量的施用将以约〇. 〇3mg每kg体重至约IOmg每kg体重，约0. 03mg每kg体重至约 6mg每kg体重，约0. Img每kg体重至约6mg每kg体重，约0. 3mg每kg体重约6mg每kg体 重，约0. 3mg每kg体重至约3mg每kg体重，约Img每kg体重约3mg每kg体重，约2. Omg 每kg体重至约4. Omg每kg体重投递抗VLA-I抗体。例如，对人施用的单位剂量将以约 2. lmg/kg，约 2. 2mg/kg，约 2. 3mg/kg，约 2. 5mg/kg，约 2. 8mg/kg，约 3. Omg/kg，约 3. lmg/kg, 约 3. 2mg/kg，约 3. 3mg/kg，约 3. 4mg/kg，或约 3. 6mg/kg 投递。
[0072] 在一个方面，本发明特征在于本文中所述水性药物组合物的多种单位剂量形式。 在一个实施方案中，所述多种是两种。
[0073] 在一个实施方案中，所述多种单位剂量形式合起来包含至少约160mg抗VLA-I抗 体，至少约170mg抗VLA-I抗体，至少约180mg抗VLA-I抗体，至少约190mg抗VLA-I抗体， 至少约200mg抗VLA-I抗体，至少约300mg抗VLA-I抗体，至少约400mg抗VLA-I抗体，至 少约500mg抗VLA-I抗体，至少约600mg抗VLA-I抗体，至少约700mg抗VLA-I抗体，至少 约800mg抗VLA-I抗体，至少约900mg抗VLA-I抗体，至少约IOOOmg抗VLA-I抗体。在另 一个实施方案中，所述多种单位剂量形式合起来包含约155mg抗VLA-I抗体至约165mg抗 VLA-I抗体，约165mg抗VLA-1抗体至约175mg抗VLA-1抗体，约175mg抗VLA-1抗体至约 185mg抗VLA-1抗体，约185mg抗VLA-1抗体至约195mg抗VLA-1抗体，约195mg抗VLA-1 抗体至约205mg抗VLA-1抗体,约205mg抗VLA-1抗体至约215mg抗VLA-1抗体,约215mg 抗VLA-I抗体至约225mg抗VLA-I抗体。在又一个实施方案中，所述多种单位剂量形式合 起来包含约160mg抗VLA-I抗体至约210mg抗VLA-I抗体，例如约180mg抗VLA-I抗体，或 约190mg抗VLA-I抗体。
[0074] 在一个实施方案中，所述多种单位剂量形式合起来对人施用时，将投递约0. 03mg 抗VLA-I抗体每kg体重至约10. Omg抗VLA-I抗体每kg体重。
[0075] 在一个实施方案中，所述多种单位剂量形式的每一种具有约0. 25mL至约3mL，例 如约ImL,约I. 5mL，约2mL，或约2. 5mL的体积。
[0076] 在一个实施方案中，每种剂量形式可含有等量的抗体。
[0077] 在一个方面，本发明特征在于一种包含如本文中描述的单位剂量形式的试剂盒。
[0078] 在一个方面，本发明特征在于一种容器，其中置有本文中所述的水性药物组合物。 在一个实施方案中，所述容器其中置有如本文中描述的单位剂量制剂。
[0079] 在一个实施方案中，所述容器是投递装置，如注射器。在另一个实施方案中，所述 容器适用于皮下施用。
[0080] 在一个方面，本发明特征在于一种施用本文中描述的水性药物组合物的方法，其 通过激活投递装置，然后对患者施用置于所述投递装置中的抗VLA-I抗体。
[0081] 在一个实施方案中，激活所述装置包括以下一项或多项：从包装取出装置，从装置 的针头或孔取下盖，或摇动该装置。在另一个实施方案中，激活装置还包括检查装置中沉淀 物、带色材料的存在、或池度、或乳光（opalescence)。
[0082] 在一个实施方案中，患者例如患有炎性病症的患者，实施施用所述组合物的一个 或两个步骤。
[0083] 在一个实施方案中，所述患者患有关节炎，如类风湿性关节炎；炎性肠病；狼疮； 移植排斥；或银屑病。
[0084] 本发明特征在于优化对患者提供抗VLA-I抗体如SAN-300的液体制剂的方法。
[0085] 在一个实施方案中，所述方法允许提供的抗体浓度的逐渐增加。这允许抗体浓度 的上升且能允许监测患者在浓度增加时的耐受性、反应等。例如，所述方法可通过以一或多 种初始或相对较低的浓度对患者提供SAN-300开始，接着以最终、更高的浓度对患者提供 SAN-300。针对起始浓度的例示性制剂将通常具有低于约80 %，低于约70 %，低于约50 %， 低于约30%，低于约20 %或低于约10%的最终更高浓度的抗体浓度。典型的初始浓度可 以为，例如约20mg/mL，约30mg/mL，或约40mg/mL。典型的最终浓度将为，例如约150mg/mL 至约 225mg/mL，例如约 160mg/mL，约 170mg/mL，约 175mg/mL，约 180mg/mL，约 190mg/mL，或 约200mg/mL。在一些实施方案中，患者将以一种或多种初始浓度接受一次或多次施用。例 如，在一个实施方案中，患者将在许多次施用中接受递增浓度。在一些实施方案中，在达到 最终浓度之前，患者将以一种或多种初始浓度接受2, 3, 4, 5, 6, 7或8次施用。例如，患者将 以第一初始浓度接受一次或多次施用，并以第二种更高浓度接受一次或多次施用。在一些 实施方案中，在一次或多次施用后评估患者的症状，包括不良症状。在一些实施方案中，仅 在确定患者对先前的施用不具有不可接受的不良反应后，才对该患者施用具有增加浓度的 SAN-300的制剂。
[0086] 在一个实施方案中，提供包装在容器中的抗VLA-I抗体组合物，所述容器可以是 例如投递装置，如注射器。
[0087] 在另一个方面，本发明特征在于一种指导需要抗VLA-I抗体疗法的患者如何施用 本文中所述制剂的方法。所述方法包括（i)向患者提供至少一个单位剂量的本文中所述的 抗VLA-I抗体制剂；并（ii)指导该患者自己皮下施用至少一个单位剂量。本发明包括的另 一种方法是包括以下的治疗方法：（i)向患者提供至少两个单位剂量的抗VLA-I抗体制剂； 并（ii)指导该患者自己皮下施用所述单位剂量，例如皮下，一次一剂。
[0088] 在一个实施方案中，患者患有炎性、免疫性或自身免疫性病症，如关节炎病症 如类风湿性关节炎、幼年型关节炎（juvenile arthritis)、银屑病关节炎（psoriatic arthritis),或强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis);组织或器官移植排斥或移 植物抗宿主病；急性CNS损伤，如中风或脊髓损伤；慢性肾病；过敏反应，如过敏性哮 喘；1型糖尿病；炎性肠病，如克罗恩病（Crohn' s disease)和溃瘍性结肠炎；重症肌 无力（myasthenia gravis);纤维肌痛（fibromyalgia);炎性/免疫性皮肤病症，如银 屑病、白癜风、皮炎或扁平苔藓（lichen planus);系统性红斑狼疮；斯耶格伦氏综合征 (Sjogren's Syndrome);血液癌，如多发性骨髓瘤、白血病或淋巴瘤；实体瘤，如肉瘤或 癌，如肺、乳腺、前列腺或脑的；或纤维化病症，如肺纤维化、骨髓纤维化、肝硬化、系膜增 生性肾小球肾炎（mesangial proliferative glomerulonephritis)、新月体肾小球肾炎 (crescentic glomerulonephritis)、糖尿病肾病（diabetic nephropathy)或肾间质纤维 化（interstitial fibrosis) 〇
[0089] 在另一个方面，本发明特征在于一种通过对患者施用用于皮下施用的制剂中含 有抗VLA-I抗体的组合物，例如如本文中描述的组合物来治疗患者的方法。在一个实施 方案中，所述患者患有炎性病症，如关节炎例如类风湿性关节炎（RA);炎性肠病；狼疮；移 植排斥；银屑病；纤维化；或克罗恩病。在另一个实施方案中，所述组合物作为治疗方案 (regimen)施用。在另一个实施方案中，所述方法还包括选择适用于用该组合物治疗的患 者。适用于治疗的患者例如显示出指示疾病开始的症候或症状，如指示RA的症候或症状。 在又一个实施方案中，所述方法还包括对患者施用第二治疗剂，如抗炎剂、抗组胺剂、镇痛 剂或皮质甾类。
[0090] 在一个实施方案中，所述患者患有类风湿性关节炎,且在该患者已显示对针对类 风湿性关节炎的在前备选治疗（(prior alternate treatment))的不充分响应的基础上选 择。"在前备选治疗"指除了包含如本文中所述抗VLA-I抗体的治疗以外的任何治疗。针 对类风湿性关节炎的在前备选治疗可以是，例如DMARD(疾病调理性抗风湿药物（Disease Modifying Antirheumatic Drug))或 TNF-α (肿瘤坏死因子-α)抑制剂。DMARD 可以 是，例如甲氨蝶呤、来氟米特（Ieflunomide)、柳氮磺批陡（sulfasalazine)或轻化氯喹 (hydroxychloroquine)。在一个实施方案中，所述TNF- α抑制剂是抗体，如英夫利昔单抗 (infliximab)、阿达木单抗（adalimumab)、培化舍珠单抗（certolizumab pegol)或戈利木 单抗（golimumab);或融合蛋白，如依那西普（etanercept)。在另一个实施方案中，第一治 疗剂是VLA-2的抑制剂，如抗VLA-2抗体例如GBR 500。
[0091] 在一个实施方案中，治疗患者的方法还包括对患者施用第二治疗剂，如皮质甾类、 抗炎剂、抗组胺剂或镇痛剂，如对乙酰氨基酚（acetaminophen)。
[0092] 在另一个实施方案中，所述第二治疗剂是B细胞消耗剂，如抗CD20抗体，例如利 妥昔单抗(rituximab) (Rituxan, Genentech, Inc. , South San Francisco, CA ；and IDEC Pharmaceutical, San Diego, CA)。在再一个实施方案中，所述第二治疗剂是Janus激酶 (JAK)家族成员或脾酪氨酸激酶（SYK)家族成员的抑制剂。JAK家族成员包括JAKUJAK2、 JAK3和TYK2,并且SYK家族成员包括SYK和ZAP-70。在一个实施方案中，第二治疗剂是 JAK3的抑制剂，如小分子抑制剂CP-690, 550(托法替尼（tofacitinib))。在另一个实施方 案中，第二治疗剂是SYK抑制剂，如小分子抑制剂R406或其前药R788。
[0093] 在一个实施方案中，所述患者患有炎性肠病（IBD),且在该患者已显示对针 对IBD的在前备选治疗的不充分响应的基础上选择。针对IBD的在前备选治疗可以 是，例如整联蛋白的抑制剂，例如MAdCAM-I (粘膜血管地址素细胞粘附分子-I (Mucosal Vascular Addressin Cell Adhesion Molecule-1)，α4β7 整联蛋白）。MAdCAM-I 抑 制剂可以是抗-MAdCAM-I抗体，例如维多珠单抗（vedolizumab) (MLN0002, Millennium Pharmaceuticals, Cambridge, ΜΑ)〇
[0094] 在另一个实施方案中，在接受抗VLA-I抗体疗法如抗VLA-I疗法的输注之前， 用一种或多种治疗剂治疗受试者，如以预防或改善对抗VLA-I施用的不良反应，例如 以预防或减轻与抗VLA-I抗体输注有关的不良事件。例如，在一个实施方案中，预处 理/治疗包括施用一种或多种镇痛剂如对乙酰氨基酚、抗组胺剂、或皮质留类如甲强龙 (methylprednisolone) 〇
[0095] 在一个实施方案中，在施用所述抗VLA-I抗体之前，如在抗VLA-I抗体输注之前， 所述预处理/治疗施用15分钟至1小时或更长，例如15分钟，30分钟，45分钟，或1小时 或更长。
[0096] 在一个实施方案中，在施用所述抗VLA-I抗体之前，如在用抗VLA-I抗体输注之 前，对受试者如RA患者施用以下一种或两者：对乙酰氨基酚和抗组胺剂。在一个实施方案 中，在用抗VLA-I抗体治疗之前，对RA患者施用皮质留类（亦称为糖皮质激素），如甲强龙。
[0097] 在一个实施方案中，所述预处理/治疗以约50mg每75kg人至约150mg每75kg人 的剂量施用。例如，所述预处理/治疗如甲强龙施用以约50mg每75kg人，约75mg每75kg 人，约IOOmg每75kg人，约125mg每75kg人，或约150mg每75kg人的剂量投递。
[0098] 在另一个实施方案中，在施用所述抗VLA-I抗体之前，如在抗VLA-I抗体输注之 前，所述预处理/治疗施用15分钟至1小时或更长，例如15分钟，30分钟，45分钟，或1小 时或更长。
[0099] 所述预处理/治疗可通过例如静脉内投递，如通过输注施用。
[0100] 在另一个方面，本发明特征在于一种通过确定患者是否满足预选定的标准来评估 患者的方法，并且如果患者满足预选定的标准，则对该患者批准、提供、处方或施用本文中 描述的抗VLA-I抗体制剂。在一个实施方案中，所述预选定的标准是患者不能适宜地响应 在前的备选治疗处理或方案，如针对RA治疗。在另一个实施方案中，该标准如2011年6月 17日提交的共有申请流水号61/498, 263中描述的，其通过提述完整并入本文。
[0101] 在另一个方面，本发明特征在于一种指导接受者施用SAN-300制剂的方法。该方 法包括指导接受者，如终端用户，应当对患者皮下施用所述药物。在一些实施方案中，所述 终端用户是患者、医师、零售或批发药房、经销商、或医院的药剂科、疗养院临床（nursing home clinic)或 HMO(Health Maintenance Organization)。
[0102] 在一个方面，本发明特征在于一种制备包含约彡lOOmg/mL至约225mg/mL的抗 VLA-I抗体的水性组合物，例如本文所述水性组合物的方法其通过按比例组合抗体、缓冲 齐U、赋形剂和表面活性剂以获得包含彡l〇〇mg/mL至约225mg/mL的抗VLA-I抗体的水性组 合物。
[0103] 如本文中使用的，术语"赋形剂"是一种药理学无活性的物质，其用作药物活性成 分的载体。
[0104] 在一个实施方案中，所述缓冲剂是组氨酸，而在另一个实施方案中，所述缓冲剂是 乙酸盐。在另一个实施方案中，赋形剂是山梨糖醇，而在另一个实施方案中，赋形剂是氯化 钠。在再一个实施方案中，表面活性剂是聚山梨醇酯80,而在另一个实施方案中，表面活性 剂是聚山梨醇酯20。在一个实施方案中，表面活性剂是聚山梨醇酯80,而在另一个实施方 案中，表面活性剂是聚山梨醇酯20。
[0105] 在另一个实施方案中，所述抗VLA-I抗体包含具有SEQ ID NO: 1的序列的轻链和 具有SEQ ID N0:2的序列的重链。
[0106] 在另一个方面，提供一种分配本文所述组合物的方法。所述组合物含有SAN-300 的制剂且适用于皮下施用。该方法包括向接受者如终端用户提供含有足以治疗患者达至少 6个月，至少12个月，至少24个月，或至少36个月的单位剂量药物的包。在一些实施方案 中，所述终端用户是患者、医师、零售或批发药房、经销商、或医院的药剂科、疗养院临床或 HMO0
[0107] 在另一个方面，本发明特征在于一种评估组合物的包装或包装批次的质量的方 法，所述组合物如本文中描述的含有抗VLA-I抗体。该方法包括，例如评估包装是否已过 期。到期日为从预选定的事件如制造、测定或包装起至少6个月，至少12个月，至少18个 月，至少24个月，至少36个月，或至少48个月，例如超过24个月或超过36个月。在一些实 施方案中，将决策或步骤作为分析的结果。例如，根据产品是否已过期，使用或丢弃、分类、 选择、释放或扣留、载运（ship)、移动到新位置、释放到贸易中（released into commerce)、 销售、或供应销售、从贸易退出或不再供应销售包装中的抗体。
[0108] 在另一个方面，本发明特征在于含有至少2剂单位剂量的水性组合物（含有抗 VLA-I抗体）的包装。在一个实施方案中，所有单位剂量含有相同量的抗体，而在其他实施 方案中，单位剂量有两种或更多种强度，或两种或更多种不同的配制。例如，不同的配制可 能有不同的强度或释放特性。在一个实施方案中，至少一个剂量含有约80mg至约315mg，例 如约 lOOmg，约 160mg，约 180mg，约 190mg，约 210mg，约 250mg，约 300mg，约 325mg，约 350mg， 约 360mg，约 400mg，约 450mg，或约 500mg 的抗 VLA-I 抗体。
[0109] 在另一个方面，本发明包括一种指导接受者施用含有抗VLA-I抗体的水性制剂的 方法。该方法包括指导接受者（例如终端用户、患者、医师、零售或批发药房、经销商、或医 院的药剂科、疗养院临床或ΗΜ0)应当在到期日之前对患者施用该抗体。到期日为从从预选 定的事件如制造、测定或包装事件起至少6个月，至少12个月，至少18个月，至少24个月， 至少36个月，或至少48个月，例如超过18个月，超过24个月或超过36个月。在一个实施 方案中，接受者还接受抗体的供应，如抗体单位剂量的供应。
[0110] 在另一个方面，本发明特征在于使用一种方法或系统，其用于分配本文中所述制 齐IJ、监测或追踪本文所述制剂到药房、输注中心或患者的提供、监测一名或多名患者、选择 患者、或汇编或报告关于使用本文所述制剂的数据。
[0111] 在另一个方面，本发明特征在于中分析产品或工艺如制造工艺的方法。该方法 包括提供抗VLA-I抗体组合物的水性制剂，例如通过本文所述工艺制备的制剂，并通过评 估溶液参数来提供对制剂的评估，所述溶液参数如颜色（例如无色到浅黄色，或无色到黄 色）、澄清度（例如清澈到微乳白色或清澈到乳白色）、或粘度（例如在周围环境温度如约 20°C至约30°C，例如约25°C测量时，约5cP至约30cP (例如约IOcP或约20cP))。该评估可 包括对一个或多个溶液参数的评估。任选地，确定溶液参数是否满足预选定的标准，例如确 定预选定的标准是否存在或存在于预选定的范围中，由此分析工艺。
[0112] 在一个实施方案中，本发明包括对抗VLA-I抗体制剂的稳定性的量度。抗体制剂 的稳定性可例如通过聚集形成来测量，聚集形成通过例如如本文中描述的大小排阻高压液 相层析（HPLC)、颜色、澄清度或粘度来测定。如果测定参数中的变化在预设定的时间段内低 于约10%，低于约5%，低于约3%，低于约2%，低于约1%，低于约0. 5%，低于约0.05%， 或低于约0. 005%或更低，且任选地在给定温度，那么可确定制剂是稳定的，因此可接受进 一步加工或分配。在一个实施方案中，液体抗VLA-I抗体制剂在室温如约18°C，约19°C，约 20°C，约21°C，约22°C，约23°C，约24°C，或约25°C稳定达1天，2天，3天，4天，或5天。
[0113] 在一个实施方案中，所述方法还包括将测定的值与参照值比较以由此分析制造工 艺。
[0114] 在一个实施方案中，所述方法还包括至少部分基于分析维持制造工艺。在一个实 施方案中，所述方法还包括基于分析改变制造工艺。
[0115] 在另一个实施方案中，所述方法包括评估由选定工艺制备的抗VLA-I抗体的水性 制剂的工艺，如制造工艺，其包括基于本文所述方法或分析对工艺进行确定。在一个实施方 案中，所述方法还包括至少部分基于方法或分析维持或改变制造工艺。如此，在另一个实施 方案中，进行评估的一方并不实践本文所述方法或分析，而是仅依赖于通过本文所述方法 或分析获得的结果。
[0116] 在另一个实施方案中，所述方法包括在监测或控制批次之间变化的方法中比较两 种或更多种制备物，或将制备物与参照标准比较。
[0117] 在再一个实施方案中，所述方法可进一步包括进行决策，如对于分类、选择、接受 或丢弃、释放或扣留、加工成药物产品、载运、移动到不同位置、配制、贴标签（label)、包装、 释放到贸易中、销售或供应销售制备物的决策，其至少部分基于所述测定。
[0118] 在另一个方面，本发明特征在于一种存储、分配或使用本文中描述的抗VLA-I抗 体制剂，如SAN-300制剂的方法。该方法包括 ：
[0119] 在适宜温度如2°C至8°C存储该制剂；
[0120] 向接受者例如终端用户，如例如患者或医护提供者，提供该制剂；
[0121] 指导接受者在适宜温度如2°C至8°C存储该制剂；并
[0122] 在接受者接受之后，将制剂在适宜温度如2°至8°C存储长达24个月，36个月，或 48个月。
[0123] 在另一个方面，本发明特征在于一种符合法规要求，如管理机构如FDA的批准后 要求（post approval requirement)的方法。该方法包括提供对抗体制剂的溶液参数的评 估，所述溶液参数如颜色（例如无色到浅黄色，或无色到黄色）、澄清度（例如清澈到微乳白 色或清澈到乳白色）、或粘度（例如在环境温度如20°C至30°C测量时约5cP至约30cP)。批 准后要求可包括测量一种或多种上述参数。该方法任选地还包括，测定所观察的溶液参数 是否满足预选定的标准，或者该参数是否在预选定的范围内；任选地，记录（memorialize) 分析的值或结果，或与机构交流，如通过将值或结果传送到该管理机构。
[0124] 在另一个方面，本发明特征在于一种制备一批具有预选定特性的抗VLA-I抗体的 水性制剂的方法，所述特性为例如满足释放规格、标签要求、或药典（compendial)要求，例 如本文中描述的特性。该方法包括提供测试抗体制备物；依照本文所述方法分析测试抗体 制备物；确定测试抗体制备物是否满足预选定的标准，如具有与参照值如本文公开的一个 或多个参照值的预选定的关系，并选择测试抗体制备物以制备一批产品。
[0125] 在另一个方面，本发明特征在于多批次的抗VLA-I抗体的水性制剂，其中每批的 一个或多个溶液参数（例如通过本文所述方法测定的值或溶液参数）从预选定的期望参照 值或标准（例如本文中描述的范围或标准）以低于预选定的范围变化。在一些实施方案中， 测定抗体制剂的一批或多批的一个或多个参数，并且作为测定的结果选择一批或多批。一 些实施方案包括将测定的结果与预选定的值或标准，如参照标准比较。其他实施方案包括 调整要施用的批次的剂量，如基于对值或参数的测定结果。
[0126] 在另一个方面，本发明特征在于以下一项或多项的方法：向报告接受单位提供报 告，评估抗VLA-I抗体的水性制剂的样品与参照标准如FDA要求的依从性，从另一方寻求抗 VLA-I抗体的制备物满足一些预限定要求的指示，或向另一方提交关于抗VLA-I抗体制备 物的信息。例示性的接受单位或其他方包括政府如美国联邦政府，政府机构如FDA。所述方 法包括以下一项或多项（或所有）步骤：在第一个国家如美国制备和/或测试抗VLA-I抗 体的水性制剂；将样品的至少一份等分试样送到第一国家以外的第二国家，例如送到美国 以外；准备或接受报告，其包括关于抗VLA-I抗体的制备物的结构的数据，例如与本文所述 结构和/或链有关的数据，如通过本文所述的一种或多种方法生成的数据；并向报告接受 单位提供所述报告。
[0127] 在一个实施方案中，所述报告接受单位能确定数据是否满足预确定的要求或参照 值，任选地，如抗VLA-I抗体水性制剂的制造商、经销商或销售商接受来自报告接受单位的 响应。在一个实施方案中，在接受来自报告接受单位的批准后，选择、包装抗VLA-I抗体的 制备物或将其置于贸易中。
[0128] 在一个方面，本发明特征在于一种评估本文所述组合物的质量的方法，其中该方 法包括针对预选定的参数对组合物进行评估，并测定该值是否满足预选定的标准。响应该 评估，可将组合物分类、选择、接受或丢弃、释放或扣留、加工成药物产品、载运、移动到不同 位置、配制、贴标签、包装、释放到贸易中、或销售或供应销售。在另一个实施方案中，提供单 位剂量形式的所述评估的组合物。
[0129] 在一个实施方案中，预选定的参数选自聚集、稳定性、颜色、澄清度、粘度或栓塞 力。
[0130] 在一个实施方案中，所述方法包括提供对于参数测定的值与参照值的比较以由此 评估样品。该比较可包括，例如测定测试值是否与参照值具有预选定的关系，例如测定其是 否满足参照值。该值不需要是数值，可以仅仅是受试者方是否存在的指示。
[0131] 在一个实施方案中，所述方法包括测定测试值是否等于或大于参照值，是否低于 或等于参照值，或是否落入范围（包含或排除一个或两个端点）内。
[0132] 在一些实施方案中，可将测试值，或是否满足预选定关系的指示记载到如计算机 可读记录中。
[0133] 在一些实施方案中，根据是否满足预选定关系，进行决策或步骤，例如将样品分 类、选择、接受或丢弃、释放或扣留、加工成药物产品、载运、移动到不同位置、配制、贴标签、 包装、释放到贸易中、或销售或供应销售。例如，基于测定的结果，或基于与参照标准的比 较，可以如刚才描述的处理取样品的那个批次。
[0134] 在一个方面，本发明特征在于一种评估抗VLA-I抗体的水性制剂的方法。该方法 包括关于抗VLA-I抗体的存在或水平接受数据；提供记录，其包括所述数据且任选地包括 一批抗VLA-I抗体的标识符；将所述记录提交到决策制定者，例如政府机构如FDA ;任选地， 从决策制定者接受信息；任选地，基于来自决策制定者的信息决定是否将该批抗VLA-I抗 体释放或上市。在一个实施方案中，所述方法还包括释放样品。
[0135] 例示性制剂包含以下：
[0136] I. SAN-300 浓度为 > 100mg/mL 至约 210mg/mL，或约 180mg/mL 至约 200mg/mL，例如 约 180mg/mL ;
[0137] 组氨酸缓冲液浓度为约ImM至约lOOmM，约5mM至约50mM，或约5mM至约40mM，例 如约30mM ;
[0138] 山梨糖醇浓度为约50mM至约300mM，约IOOmM至约290mM，或约200mM至约280mM， 例如约250mM ;
[0139] 聚山梨糖醇酯20浓度为约0. 001 %至约0. 1 %，约0. 005 %至约0. 08%，或约 0. 008%至约0. 04%，例如约0. 01%，和
[0140] 约 6.0 的 pH;
[0141] 2. SAN-300 浓度为 > 100mg/mL 至约 210mg/mL 或约 180mg/mL 至约 200mg/mL，例如 约 190mg/mL ;
[0142] 乙酸盐缓冲剂浓度为约ImM至约IOOmM,约5mM至约50mM，或约5mM至约40mM，例 如约30mM ;
[0143] 山梨糖醇浓度为约50mM至约300mM，约IOOmM至约280mM，或约200mM至约250mM， 例如约220mM或约250mM ;
[0144] 聚山梨糖醇酯80浓度为约0. 001 %至约0. 1 %，约0. 005 %至约0. 08 %，或约 0. 008%至约0. 04%，例如约0. 01%，和
[0145] 约 5. 5 的 pH ;
[0146] 3.约 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0147] 组氨酸缓冲液浓度为约ImM至约lOOmM，约5mM至约50mM，或约5mM至约40mM，例 如约30mM ;
[0148] 250mM的山梨糖醇；
[0149] 0. 01 %的聚山梨醇酯20,和
[0150] pH 6. 0 ；
[0151] 4. 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0152] 乙酸盐缓冲剂为ImM至100mM，5mM至50mM，或5mM至40mM，例如30mM ;
[0153] 约220mM的山梨糖醇；
[0154] 约0. 01 %的聚山梨醇酯80,和
[0155] pH 5. 5 ；
[0156] 5.约 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0157] 约30mM的组氨酸缓冲剂；
[0158] 山梨糖醇浓度为约50mM至约300mM，约IOOmM至约290mM，或约200mM至约280mM， 例如约250mM ;
[0159] 约0. 01%聚山梨醇酯20 ;和
[0160] pH 6. 0 ；
[0161] 6.约 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0162] 约30mM的乙酸盐缓冲剂；
[0163] 山梨糖醇浓度为约50mM至约300mM，约IOOmM至约280mM，或约200mM至约250mM， 例如约220mM ;
[0164] 约0· 01%的聚山梨醇酯80 ;和
[0165] pH 5. 5 ；
[0166] 7.约 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0167] 约30mM的组氨酸缓冲剂；
[0168] 约250mM的山梨糖醇；
[0169] 聚山梨糖醇酯20浓度为约0. 001 %至约0. 1 %，约0. 005 %至约0. 08%，或约 0. 008%至约0. 04%，例如约0. 01%，和
[0170] pH 6. 0 ；
[0171] 8.约 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0172] 约30mM的乙酸盐缓冲剂；
[0173] 约220mM的山梨糖醇；
[0174] 聚山梨糖醇酯80为约0. 001%至约0. 1%，约0. 005%至约0. 08%，或约0. 008% 至约0. 04%，例如约0. 01%，和
[0175] pH 5. 5 ；
[0176] 9. SAN-300 浓度为约 160mg/mL 至约 210mg/mL，或约 180mg/mL 至约 200mg/mL，例如 约 180mg/mL ;
[0177] 约30mM的组氨酸缓冲剂；
[0178] 约250mM的山梨糖醇；
[0179] 约0. 01 %的聚山梨醇酯20 ;
[0180] pH 6. 0 ；
[0181] 10. SAN-300 浓度为约 160mg/mL 至约 210mg/mL 或约 180mg/mL 至约 200mg/mL，例 如约 190mg/mL ;
[0182] 约30mM的乙酸盐缓冲剂；
[0183] 约220mM的山梨糖醇；
[0184] 约0. 01%的聚山梨醇酯80 ;和
[0185] pH 5. 5 ；
[0186] 11.约 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0187] 约30mM的组氨酸缓冲剂；
[0188] 约250mM的山梨糖醇；
[0189] 约0. 01%的聚山梨醇酯20 ;和
[0190] pH 6. 0 ；
[0191] 12.约 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0192] 约30mM乙酸盐缓冲剂；
[0193] 约220mM山梨糖醇；
[0194] 约0. 01%聚山梨醇酯80 ;和
[0195] pH 5. 5。
[0196] 13. SAN-300 浓度为 > 100mg/mL 至约 210mg/mL，或约 180mg/mL 至约 200mg/mL，例 如约 180mg/mL ;
[0197] 组氨酸缓冲剂为约ImM至约IOOmM,约5mM至约50mM，或约5mM至约40mM，例如约 30mM ；
[0198] NaCl浓度为约50mM至约300mM，约IOOmM至约200mM，或约140mM至约160mM，例 如约150mM ;
[0199] 聚山梨糖醇酯20浓度为约0. 001 %至约0. 1 %，约0. 005 %至约0. 08%，或约 0. 008%至约0. 04%，例如约0. 01%，和
[0200] pH 6. 0 ；
[0201] 14. SAN-300 浓度为 > 100mg/mL 至约 210mg/mL 或约 180mg/mL 至约 200mg/mL，例 如约 190mg/mL ;
[0202] 乙酸盐缓冲剂浓度为约ImM至约lOOmM，约5mM至约50mM，或约5mM至约40mM，例 如约30mM ;
[0203] NaCl浓度为约50mM至约300mM，约IOOmM至约200mM，或约140mM至约160mM，例 如约150mM ;
[0204] 聚山梨糖醇酯80浓度为约0. 001 %至约0. 1 %，约0. 005 %至约0. 08%，或约 0. 008%至约0. 04%，例如约0. 01%，和
[0205] pH 5. 5 ；
[0206] 15.约 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0207] 组氨酸缓冲剂浓度为约ImM至约IOOmM,约5mM至约50mM，或约5mM至约40mM，例 如约30mM ;
[0208] 约 150mM 的 NaCl ;
[0209] 约0· 01%的聚山梨醇酯20,和
[0210] pH 6. 0 ；
[0211] 16.约 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0212] 乙酸盐缓冲剂浓度为约ImM至约IOOmM,约5mM至约50mM，或约5mM至约40mM，例 如约30mM ;
[0213] 约 150mM 的 NaCl;
[0214] 约0· 01 %的聚山梨醇酯80,和
[0215] pH 5. 5 ；
[0216] 17.约 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0217] 约30mM的组氨酸缓冲剂；
[0218] NaCl浓度为约50mM至约300mM，约IOOmM至约200mM，或约HOmM至约160mM，例 如约150mM ;
[0219] 约0. 01%的聚山梨醇酯20 ;和
[0220] pH 6. 0 ；
[0221] 18.约 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0222] 约30mM的乙酸盐缓冲剂；
[0223] NaCl浓度为约50mM至约300mM，约IOOmM至约200mM，或约HOmM至约160mM，例 如约150mM ;
[0224] 约0. 01 %的聚山梨醇酯80 ;和
[0225] pH 5. 5 ；
[0226] 19.约 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0227] 约30mM的组氨酸缓冲剂；
[0228] 约 150mM 的 NaCl ;
[0229] 聚山梨糖醇酯20浓度为约0. 001 %至约0. 1 %，约0. 005 %至约0. 08%，或约 0. 008%至约0. 04%，例如约0. 01%，和
[0230] pH 6.0 ；
[0231] 20.约 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0232] 约30mM的乙酸盐缓冲剂；
[0233] 约 150mM 的 NaCl ;
[0234] 聚山梨糖醇酯80浓度为约0. 001 %至约0. 1 %，约0. 005 %至约0. 08%，或约 0. 008%至约0. 04%，例如约0. 01%，和
[0235] pH 5. 5 ；
[0236] 21. SAN-300 浓度为约 160mg/mL 至约 210mg/mL，或约 180mg/mL 至约 200mg/mL，例 如约 180mg/mL ;
[0237] 约30mM的组氨酸缓冲剂；
[0238] 约 150mM 的 NaCl ;
[0239] 约0. 01%的聚山梨醇酯20 ;
[0240] pH 6. 0 ；
[0241] 22. SAN-300 浓度为约 160mg/mL 至约 210mg/mL 或约 180mg/mL 至约 200mg/mL，例 如约 190mg/mL ;
[0242] 约30mM的乙酸盐缓冲剂；
[0243] 约 150mM 的 NaCl ;
[0244] 约0· 01 %的聚山梨醇酯80 ;和
[0245] pH 5. 5 ；
[0246] 23.约 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0247] 约30mM的组氨酸缓冲剂；
[0248] 约 150mM 的 NaCl ;
[0249] 约0· 01%聚山梨醇酯20 ;和
[0250] pH 6. 0 ；
[0251] 24.约 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0252] 约30mM的乙酸盐缓冲剂；
[0253] 约 150mM 的 NaCl ;
[0254] 约0. 01 %的聚山梨醇酯80 ;和
[0255] pH 5. 5。
[0256] 在一些实施方案中，上述制剂1-24的任一种可以基本上没有氨基酸，如精氨酸。
[0257] 本文中公开的方法和组合物可在混合物中一种或多种结构的存在、分布、或量可 能拥有生物学活性或影响生物学活性的情况下使用。所述方法从结构活性角度（以评估或 确保生物等通性）来看也是有用的。
[0258] 如本文中使用的，"抗VLA-I抗体制剂"指含有抗VLA-I抗体如SAN-300的水性制 齐U，其浓度为 > l〇〇mg/mL 至约 225mg/mL，例如约 110mg/mL，约 120mg/mL，约 130mg/mL，约 140mg/mL，约 150mg/mL，约 160mg/mL，约 170mg/mL，约 180mg/mL，约 190mg/mL，约 200mg/mL， 约 205mg/mL，约 210mg/mL，约 215mg/mL，约 220mg/mL。
[0259] "适用于皮下施用"意指作为例如单位剂量提供的组合物以足以允许来自能通过 皮下注射投递的量（通常从约〇.5mL至约3mL)的治疗效果的浓度提供抗体。它可以没有 导致不想要的注射部位症状如灼伤（burning)或刺痛的组分，如柠檬酸盐。
[0260] 术语"治疗"指以统计学显著的程度或以本领域技术人员可检测的程度有效改善 与病症有关的状况、症状、参数或预防病症的进展的量、方式和/或模式施用疗法。有效量、 方式或模式可随受试者变化，并且可对于受试者定制。
[0261] 抗VLA-I抗体的"稳定"制剂在预确定的时间段内极少或不展现以下任意一项或 多项的迹象：聚集、沉淀、碎裂、脱酰胺、氧化、变性、大小修饰、化学改变、或生物活性的变 化，如结合VLA-I的能力。所述预确定的时间段可以是，例如等于或超过4天，10天，14天， 21天，30天或更长，如达6个月，12个月，24个月，36个月，1年，2年，3年，例如当在适宜条 件下存储时。例示性的适宜条件包括，例如约2°C至约8°C，例如约4°C的温度，在黑暗中， 在封闭的容器中。在一个实施方案中，所述容器与将组合物提供给终端用户的是相同类型。 在另一个实施方案中，稳定的制剂将满足制造商或监管机构（如食品和药物管理局（FDA)， 或FDA在外国的对应机构）释放或包装标签或插页要求，如对于上文提及的时间和状况。 例如在一个实施方案中，低于约1%，低于约2%，低于约5%，低于约10%，或低于约15% 的组合物在预确定的时间段结束时或者在评估稳定性时聚集、碎裂或氧化。可通过已知的 方法来评估聚集、沉淀和/或变性，如视觉检查颜色和/或澄清度，或通过UV光散射，大小 排阻层析，动态光散射（DLS)，或差示扫描量热法（differential scanning calorimetry) (DSC)。可通过检测和量化抗体的化学改变形式来评估蛋白质保留其生物学活性的能力。可 使用例如大小排阻层析、SDS-PAGE和/或基质辅助激光解吸电离（matrix-assisted laser desorption ionization)/飞行时间质谱术（MALDI/TOF MS)、或对经内蛋白酶处理的抗体 的肽映射来评估大小修改，如剪短。化学改变的其他类型包括电荷改变，如可能作为脱酰胺 结果发生的，可通过例如离子交换层析来评估。如果在给定的时间时抗体的生物学活性是 在制备药物制剂时所展现的生物学活性的约1%，约2%，约5%，约10%，或约15%内（如 例如在抗原结合测定法中测定），则称该抗体在该药物制剂中"保留其生物学活性"。
[0262] 如本文中使用的，"聚集"指从完全或部分未折叠的多肽如抗VLA-I抗体形成不溶 性结构。如本文中使用的，"碎裂"指部分降解的蛋白质，如抗VLA-I抗体。"脱酰胺"指从 多肽如抗VLA-I抗体除去酰胺基团。脱酰胺通常发生在谷氨酰基或天冬酰胺酰基氨基酸残 基，且能引起蛋白质中的结构变化，其影响蛋白质功能，如对VLA-I配体的结合亲和力。
[0263] 如本文中使用的，"可注射性"指组合物对于用注射器投递的适宜性。可注射性的 一个组成部分是组合物如抗VLA-I抗体组合物被自己施用的患者或被医护提供者从注射 器排出的能力。患者的自己施用可以是例如通过皮下施用。压力或"栓塞力"可以为例如 使得患者，如年长或虚弱的患者，能自己施用该组合物。在一个实施方案中，栓塞力等于或 低于41bs。
[0264] 在一个实施方案中，栓塞力将允许在10秒以内投递单位剂量。在另一个实施方 案中，使用不超过预选定量的栓塞力，可将置于具有预选定型号的针头的注射器中的约ImL 水性药物组合物以预选定的速率排出。在另一个实施方案中，使用不超过预选定量的栓塞 力，可将置于具有预选定型号的针头的注射器中的约2mL水性药物组合物以预选定的速率 排出。例如，使用不超过41bs的栓塞力，可将置于具有25号针头、27号针头或30号针头的 注射器中的约ImL水性药物组合物以IOmL/分钟排出。
[0265] 在一个实施方案中，适宜的栓塞力，如等于或低于41bs的力，将允许在预选定的 时间段内，如在10秒以内投递单位剂量。
[0266] 可注射性还指蛋白质经得住通过针头而没有超过约1 %，超过约2%，超过约5%， 超过约10 %或超过约15 %碎裂的能力。
[0267] "抗VLA-I抗体"指结合VLA-I整联蛋白的抗体，如结合VLA-I整联蛋白的a 1亚 基，并至少部分抑制VLA-I的活性，特别是VLA-I整联蛋白的结合活性，或信号传导活性， 如转换VLA-I介导的信号的能力。例如，抗VLA-I抗体可以抑制VLA-I对VLA-I的同类 (cognate)配体，例如胞外基质组分，如胶原蛋白例如胶原蛋白I或胶原蛋白IV，或层粘连 蛋白的结合。抗VLA-I抗体可以结合a 1亚基或β 1亚基或两者。在一个实施方案中，该抗 体结合α 1的I域上的表位。抗VLA-I抗体可以以低于约ΚΓ6,低于约ΚΓ7,低于约ΚΓ8,低 于约ΚΓ 9,低于约KT1Q，或低于约KT11M的Kd结合VLA-I。VLA-I亦称为α 1/ β 1和CD49a/ CD29。
[0268] 如本文中使用的，术语"抗体"指包含至少一个免疫球蛋白可变区（如提供免疫球 蛋白可变域或免疫球蛋白可变域序列的氨基酸序列）的蛋白质。例如，抗体可以包含重（H) 链可变区（本文中缩写为VH)，和轻（L)链可变区（本文中缩写为VL)。在另一个例子中， 抗体包含两个重（H)链可变区和两个轻（L)链可变区。术语"抗体"涵盖抗体的抗原结合 片段（如单链抗体、Fab片段片段、F (ab'）2片段、Fd片段、Fv片段、和dAb片段）以及完整 抗体，例如IgA，IgG，IgE，IgD，IgM类（以及其亚型）的完整免疫球蛋白。免疫球蛋白的轻 链可以是κ或λ型。在一个实施方案中，抗体是糖基化的。抗体对于抗体依赖性细胞毒 性和/或补体介导的细胞毒性可能是功能性的，或者可以对于这一种或两种活性是非功能 性的。
[0269] 免疫球蛋白可变域序列是形成免疫球蛋白可变域的结构的氨基酸序列。例如，所 述序列可以包含天然存在可变域的全部或部分氨基酸序列。例如，序列可以缺失一个、两个 或更多个N或C端氨基酸、内部氨基酸，可以包含一个或多个插入或另外的末端氨基酸，或 者可以包含其他改变。在一个实施方案中，包含免疫球蛋白可变域序列的多肽可以与另一 个免疫球蛋白可变域序列联合以形成靶物结合结构（或"抗原结合位点")，例如与VLA-I相 互作用的结构。
[0270] 还可将VH和VL区域细分为高变区（称为"互补决定区""⑶R"）），其间散布有 更保守的区域（称为"构架区"（FR))。FR和⑶R的界限已被精确地界定（参见，Kabat，E. A.等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest,第 5 版，U. S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242;和 Chothia，C.等人，J. Mol. Biol. 196:901-917) 〇在本文中使用Kabat的定义。每一个VH和VL通常由以下列顺 序从氨基末端至羧基末端排列的3个CDR和4个FR组成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、 FR4。
[0271] 抗体的VH或VL链还可包括重链或轻链恒定区的全部或部分，从而分别形成免疫 球蛋白重链或轻链。在一个实施方案中，抗体是两条免疫球蛋白重链和两条免疫球蛋白轻 链的四聚体。免疫球蛋白重链与轻链可通过二硫键连接。重链恒定区通常包括3个恒定结 构域CHI、CH2和CH3。轻链恒定区通常包括CL结构域。重链和轻链的可变区包含与抗原 相互作用的结合结构域。抗体的恒定区通常介导抗体与宿主组织或因子（包括免疫系统的 各种细胞（如效应器细胞）和经典补体系统的第一补体（CIq))的结合。
[0272] 抗体的一个或多个区域可以是人的，有效地人的或人源化的。例如，可变区的一个 或多个可以是人的或有效地人的。例如，一个或多个⑶R，如HCXDRUHC⑶R2、HC⑶R3、LC ⑶RU LC⑶R2和LC⑶R3,可以是人的（HC，重链；IX，轻链）。在一个实施方案中，每个轻 链CDR可以是人的。在一个实施方案中，HC⑶R3是人的。一个或多个框架区，如HC或LC 的FR1、FR2、FR3和/或FR4,可以是人的。在一个实施方案中，全部框架区都是人的，例如 来源于人体细胞，例如产生免疫球蛋白的造血细胞或非造血细胞。在一个实施方案中，人序 列是种系序列，例如由种系核酸编码。恒定区的一个或多个可以是人的，有效地人的或人源 化的。在另一个实施方案中，至少约70%，至少约75%，至少约80%，至少约85%，至少约 90 %，至少约92 %，至少约95 %，或至少约98 %的框架区（例如，总体地FRl、FR2和FR3,或 总体地FR1、FR2、FR3和FR4)或完整抗体可以是人的，有效地人的，或人源化的。例如，FR1、 FR2和FR3总体地可与由人种系区段编码的人序列至少约70%，至少约75%，至少约80%， 至少约85%，至少约90%，至少约92%，至少约95%，至少约98%，或至少约99 %相同。
[0273] 有效地人的免疫球蛋白可变区是这样的免疫球蛋白可变区，其包括充足数量的人 框架氨基酸位置，以便免疫球蛋白可变区不引发正常人的免疫原性反应。"有效地人的"抗 体是这样的抗体，其包括充足数量的人氨基酸位置，以便抗体不引发正常人的免疫原性反 应。
[0274] 人源化的免疫球蛋白可变区是这样的免疫球蛋白可变区，所述可变区经修饰以便 修饰形式在人中引发比非修饰形式更小的免疫反应，例如，人源化的免疫球蛋白可变区可 经修饰以包括充足数量的人框架氨基酸位置以便免疫球蛋白可变区不引发正常人的免疫 原性反应。对人源化免疫球蛋白的描述包括，例如美国专利No. 6, 407, 213和5, 693, 762。在 一些实施方案中，人源化免疫球蛋白包括在一个或多个框架氨基酸位置处的非人氨基酸。
[0275] 整个或部分抗体可由免疫球蛋白基因或其区段编码。例示性的人免疫球蛋白基因 包括 κ、λ、a (IgAl 和 IgA2)、Y (IgGl、IgG2、IgG3、IgG4)、δ、ε 和 μ 恒定区基因，以及 众多免疫球蛋白可变区基因。全长免疫球蛋白"轻链"（约25Kd或214个氨基酸）在ΝΗ2 端（约110个氨基酸）由可变区基因编码，且在COOH端由κ或λ恒定区基因编码。全长 免疫球蛋白"重链"（约50Kd或446个氨基酸）类似地由可变区基因（约116个氨基酸） 和其他前述恒定区基因之一，如Y (编码约330个氨基酸）编码。
[0276] 术语全长抗体的"抗原结合片段"指全长抗体的一个或多个片段，其保留特异性结 合感兴趣靶物如VLA-I的能力。术语全长抗体的抗原结合片段涵盖的结合片段的例子包括 (i)Fab片段，由VL、VH、CL和CHl域组成的单价片段；（ii)F(ab'） 2片段，包含通过二硫键 在铰链区连接的两个Fab片段的二价片段；（iii)Fd片段，由VH和CHl域组成；（iv)Fv片 段，由抗体单臂的VL和VH域组成；（V) dAb片段（Ward等，（1989) Nature 341:544-546)，其 由VH域组成；和（vi)保留功能性的分离的互补性决定区（CDR)。此外，尽管Fv片段的两 个域VL和VH由分别的基因编码，但可使用重组方法，通过合成接头将其连接，该接头使其 能制备为单一蛋白质，其中VL和VH区配对以形成称为单链Fv(ScFv)的单价分子。参见， 例如 Bird 等（1988) Science 242:423-426 ;和 Huston 等（1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883。
[0277] 如下进行对两条序列之间的同源性或序列同一性（该术语在本文中可交换使用） 的计算。将序列比对用于最佳比较目的（例如可在第一和第二氨基酸或核酸序列之一或两 者中引入缺口以最佳比对，并且可无视非同源性序列以用于比较目的）。最佳比对测定为使 用GCG软件包中的GAP程序，用Blossum62打分矩阵和缺口罚分12、缺口延伸罚分4、和移 框缺口罚分5的最佳得分。然后比较在相应氨基酸位置或核苷酸位置处的氨基酸残基或核 苷酸。当第一序列中的位置与第二序列中相应位置处的氨基酸残基或核苷酸被相同的氨基 酸残基或核苷酸占据时，分子在该位置是相同的（如本文中使用的氨基酸或核酸"同一性" 等同于氨基酸或核酸"同源性"）。两条序列之间的百分比同一性是序列所共享的相同位置 数目的函数。
[0278] 实施杂交反应的指导可见于 Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley&Sons，N. Y. (1989)，6. 3. 1-6. 3. 6,其通过提述并入。在该参考文献中记载了水性和非 水性方法，可使用任一种。高严格性杂交条件包括在6X SSC中于约45°C杂交，接着在0.2X SSC，0. 1% SDS中于65°C进行一次或多次清洗，或基本上相似的条件。
[0279] 本发明的实施方案提供了特定的优点。在一些情况中，难以制备高浓度的蛋白质 如抗体的制剂以用于药物组合物。本文中呈现了制备这类制剂的方法。含有高浓度蛋白质 如抗VLA-I抗体的药物组合物对于在较短时间范围内的施用可能是有用的。例如抗VLA-I 抗体的制剂还可通过简单化的方法（例如皮下）施用。
[0280] 在一个方面，本公开提供包含以下的水性药物组合物：
[0281] (a) 150 至 210mg/mL，155 至 205mg/mL，160 至 200mg/mL，或 165 至 190mg/mL 的抗 VLA-I抗体，其具有
[0282] 本文中所述的轻链序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或与SEQ ID NO: 1有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；和
[0283] 本文中所述的重链序列，例如SEQ ID NO:2的序列或与SEQ ID NO:2有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；
[0284] (b) 25至35mM的乙酸盐或25至35mM的组氨酸；
[0285] (c) 170至288mM的山梨糖醇；和
[0286] (d)0. 008至0. 012 %的聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80 ;
[0287] 其中所述水性药物组合物具有5至7的pH。
[0288] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含：
[0289] (a) 150至210mg/mL的抗VLA-I抗体，其具有SEQ ID NO: 1的轻链序列和SEQ ID NO:2的重链序列；
[0290] (b) 25至35mM的乙酸盐或25至35mM的组氨酸；
[0291] (c) 170至288mM的山梨糖醇；和
[0292] (d)0. 008至0. 012 %的聚山梨醇酯，其中所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山 梨醇酯80 ;
[0293] 其中所述水性药物组合物具有5至7的pH。在实施方案中，所述组合物包含组氨 酸且聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20。在实施方案中，所述组合物包含乙酸盐且聚山梨醇酯是 聚山梨醇酯80。
[0294] 在一些实施方案中，所述水性药物组合物具有270m0sm/kg至380m0sm/kg的渗透 度。
[0295] 在实施方案中，所述水性药物组合物具有低于15cP或低于HcP的粘度。在实施 方案中，本文中描述的水性药物组合物具有10至14cP，11至14cP，13至HcP或11至12cP 的粘度。
[0296] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含：
[0297] (a) 165 至 190mg/mL 的抗 VLA-I 抗体，其具有
[0298] 本文中所述的轻链序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或与SEQ ID NO: 1有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；和
[0299] 本文中所述的重链序列，例如SEQ ID NO:2的序列或与SEQ ID NO:2有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；
[0300] (b) 25至35禮组氨酸；
[0301] (c) 170至288mM山梨糖醇；和
[0302] (d)0. 008至0. 012 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20 ;
[0303] 其中所述水性药物组合物具有5至7的pH。
[0304] 在某个实施方案中，所述水性药物组合物包含：
[0305] (a) 180mg/mL 的抗 VLA-I 抗体，其具有
[0306] 本文中所述的轻链序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或与SEQ ID NO: 1有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；和
[0307] 本文中所述的重链序列，例如SEQ ID NO:2的序列或与SEQ ID NO:2有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；
[0308] (b) 30mM 组氨酸；
[0309] (c) 250mM山梨糖醇；和
[0310] (d)0. 01 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20 ;
[0311] 其中所述水性药物组合物具有5至7的pH。
[0312] 在实施方案中，允许在上述实施方案的一种或多种组分的量中的可变性，例如1 至5%，5至10%，10至15%，或15至20%的可变性。在一些这类实施方案中，所述水性药 物组合物包含：
[0313] (a) 180mg/mL±l%，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的抗体；
[0314] (b)30mM±l %，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的组氨酸；
[0315] (c)250mM±l %，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的山梨糖醇；和
[0316] (d)0.01% ±1%，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或20%的聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20 ;
[0317] 其中所述水性药物组合物具有5至7的pH。各组分中允许的可变性是独立选择 的（例如抗体可以浓度为180mg/mL±10%存在，组氨酸浓度为30mM±5%，山梨糖醇浓度为 250mM±7%，而聚山梨醇酯20为0.01% ±2% )。在一些实施方案中，所述水性药物组合 物具有5. 5至6. 5的pH。在一些实施方案中，所述水性药物组合物具有5. 6至6. 4, 5. 7至 6. 3, 5. 8至6. 2,或5. 9至6. 1的pH。在一些实施方案中，所述水性药物组合物具有6. 0的 pH〇
[0318] 在另一个实施方案中，所述水性药物组合物包含：
[0319] (a) 165 至 200mg/mL 的抗 VLA-I 抗体，其具有
[0320] 本文中所述的轻链序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或与SEQ ID NO: 1有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；和
[0321] 本文中所述的重链序列，例如SEQ ID NO:2的序列或与SEQ ID NO:2有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；
[0322] (b) 25 至 35mM 乙酸盐；
[0323] (c) 170至253mM山梨糖醇；和
[0324] (d)0. 008至0. 012 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯80 ;
[0325] 其中所述水性药物组合物具有4. 5至6. 5的pH。
[0326] 在某个实施方案中，所述水性药物组合物包含：
[0327] 190mg/mL的抗VLA-I抗体，其具有
[0328] 本文中所述的轻链序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或与SEQ ID NO: 1有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9,或10个氨基酸残基不同的序列；和
[0329] 本文中所述的重链序列，例如SEQ ID NO:2的序列或与SEQ ID NO:2有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9,或10个氨基酸残基不同的序列；
[0330] (b) 30mM 乙酸盐；
[0331] (c)220mM山梨糖醇；和
[0332] (d)0. 01 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯80 ;
[0333] 其中所述水性药物组合物具有4. 5至6. 5的pH。
[0334] 在实施方案中，允许在上述实施方案的一种或多种组分的量中的变化性，例如1 至5%，5至10%，10至15%，或15至20%的变化。在一些这类实施方案中，所述水性药物 组合物包含：
[0335] (a) 190mg/mL±l%，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的抗体；
[0336] (b)30mM±l %，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的乙酸盐；
[0337] (c)220mM±l %，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的山梨糖醇；和
[0338] (d) 0· 01 % ±1%，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或20%的聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯80 ;
[0339] 其中所述水性药物组合物具有4. 5至6. 5的pH。各组分中允许的变化性是独立选 择的（例如抗体可以浓度为180mg/mL±10%存在，乙酸盐浓度为30mM±5%，山梨糖醇浓度 为220mM±7%，而聚山梨醇酯80为0.01% ±2% )。在一些实施方案中，所述水性药物组 合物具有5. 0至6. 0的pH。在一些实施方案中，所述水性药物组合物具有5. 1至5. 9, 5. 2 至5. 8, 5. 3至5. 7,或5. 4至5. 6的pH。在一些实施方案中，所述水性药物组合物具有5. 5 的pH。
[0340] 在实施方案中，本文中描述的水性药物组合物具有低于15cP或低于14cP的粘度。 在实施方案中，本文中描述的水性药物组合物具有10至HcP的粘度。
[0341] 在实施方案中，本文中描述的水性药物组合物（例如本文中描述的包含组氨酸、 山梨糖醇和聚山梨醇酯（例如聚山梨醇酯20)的水性药物组合物）具有13至14cP的粘度。 在实施方案中，这类水性药物组合物具有低于12cP的粘度。在实施方案中，这类水性药物 组合物具有11至12cP的粘度。
[0342] 在实施方案中，ImL的本文中描述的水性药物组合物具有> 10 μ M的彡6000个颗 粒和/或具有彡25 μ M的< 600个颗粒。
[0343] 在实施方案中，包含在本文所述水性药物组合物中的抗体显示对整联蛋白α II 域的结合，如使用ELISA评估的。在实施方案中，包含在本文所述水性药物组合物中的抗体 显示参照标准（例如来自同一批次（例如生产批次）但不配制在水性药物组合物中的抗 体）的80% -125%的效力。
[0344] 在实施方案中，本文中描述的水性药物组合物通过还原性CE-SDS显示〈15%的杂 质。
[0345] 在实施方案中，本文中描述的水性药物组合物显示< 10%的总聚集，如通过大小 排阻层析评估的。
[0346] 在实施方案中，本文中描述的水性药物组合物具有彡90. OEU/mL的内毒素。
[0347] 在实施方案中，ImL本文中描述的水性药物组合物具有> 10 μ M的彡6000个颗粒。 在实施方案中，ImL本文中描述的水性药物组合物具有> 25 μ M的< 600个颗粒。在实施方 案中，ImL本文中描述的水性药物组合物具有彡10 μ M的彡6000个颗粒和彡25 μ M的彡600 个颗粒。在实施方案中，本文中描述的水性药物组合物符合USP〈71>。
[0348] 在一些实施方案中，本文中描述的水性药物组合物（例如组氨酸制剂）满足表32 中描述的一项或多项标准。
[0349] 在一个实施方案中，所述水性药物组合物包含：
[0350] (a) 165 至 190mg/mL 的抗 VLA-I 抗体，其具有
[0351] 本文中所述的轻链序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或与SEQ ID NO: 1有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；和
[0352] 本文中所述的重链序列，例如SEQ ID NO:2的序列或与SEQ ID NO:2有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；
[0353] (b) 25 至 35mM 组氨酸；
[0354] (c) 170至288mM山梨糖醇；和
[0355] (d)0. 008至0. 012 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20 ;
[0356] 其中所述水性药物组合物具有5至7的pH。
[0357] 在某个实施方案中，所述水性药物组合物包含：
[0358] (a) 180mg/mL 的抗 VLA-I 抗体，其具有
[0359] 本文中所述的轻链序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或与SEQ ID NO: 1有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；和
[0360] 本文中所述的重链序列，例如SEQ ID NO:2的序列或与SEQ ID NO:2有至少一个 但不超过2, 3,4, 5,6, 7,9或10个氨基酸残基不同的序列；
[0361] (b) 3〇mM 组氨酸；
[0362] (c)250mM山梨糖醇；和
[0363] (d)0. 01 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20 ;
[0364] 其中所述水性药物组合物具有5至7的pH。
[0365] 在一些实施方案中，所述水性药物组合物置于具有最终填充体积为ImL的容器 中。在实施方案中，所述容器是2mL USP 1型硼硅酸盐玻璃管形瓶，其具有13_的基于氯 化丁基的塞子，在塞子（plug)上有flourotech涂层，在顶端有B2涂层和铝密封的倒装盖 (aluminum over seal with flip top cap) 〇
[0366] 在一些实施方案中，所述水性药物组合物在生产后立即地或在本文所述条件下存 储后（如本文实施例中记载的，例如在存储长达12个月之后（例如在存储1个月、3个月、 6个月、9个月或12个月之后），例如在-75°C、2至8°C、30°C和65% RH、或在40°C和75% RH存储）满足属性A到M中1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14项的标准（见表32)。 在一些实施方案中，所述水性药物组合物满足对于所有属性A至M的标准。在一些实施方 案中，所述水性药物组合物满足组1至4每组中至少一个属性的标准。在一些实施方案中， 所述水性药物组合物满足组1至4每组中至少两个属性的标准。
[0367] 在一些实施方案中，所述水性药物组合物满足对于属性G和/或H、K、和I和/或 J的标准。在实施方案中，所述水性药物组合物满足对于属性G、K和I ;对于属性H、K和I ; 对于属性G、K和J ;或对于属性H、K和J的标准。在实施方案中，所述水性药物组合物满足 对于属性G、H、K和I ;对于属性G、H、K和J ;对于属性G、K、I和J ;或对于属性Η、K、I和J 的标准。在实施方案中，所述水性药物组合物满足对于属性G、H、K、I和J的标准。
[0368] 表32 :液体制剂（例如组氨酸制剂）的标准
[0369]
[0370]
【权利要求】
1. 一种水性药物组合物，其包含： (a) 150至210mg/mL的抗VLA-1抗体，其具有SEQ ID NO: 1的轻链序列和SEQ ID NO: 2 的重链序列； (b) 25至35mM乙酸盐或25至35mM组氨酸； (c) 170至288mM山梨糖醇；和 (d) 0. 008至0. 012%聚山梨糖醇酯（polysorbate)，其中所述聚山梨糖醇酯是聚山梨 糖醇酯20或聚山梨糖醇酯80 ;且 其中所述水性药物组合物具有4. 5至7的pH。
2. 权利要求1的水性药物组合物，其中所述水性药物组合物包含： (a) 165至190mg/mL的抗VLA-1抗体，其具有SEQ ID NO: 1的轻链序列和SEQ ID NO: 2 的重链序列； (b) 25至35mM组氨酸； (c) 170至288mM山梨糖醇；和 (d) 0. 008至0. 012%聚山梨糖醇酯20 ;且 其中所述水性药物组合物具有5至7的pH。
3. 权利要求2的水性药物组合物，其中所述水性药物组合物包含： (a) 180mg/mL的抗VLA-l抗体，具有SEQIDN0:l的轻链序列和SEQIDN0:2的重链序 列； (b) 30mM组氨酸； (c) 250mM山梨糖醇；和 (d) 0.01 %聚山梨糖醇酯20 ;且 其中所述水性药物组合物具有6. 0的pH。
4. 权利要求1的水性药物组合物，其中所述水性药物组合物包含： (a) 165至200mg/mL的抗VLA-1抗体，其具有SEQ ID NO: 1的轻链序列和SEQ ID NO: 2 的重链序列； (b) 25至35mM乙酸盐； (c) 170至253mM山梨糖醇；和 (d) 0. 008至0. 012%聚山梨糖醇酯80 ;且 其中所述水性药物组合物具有4. 5至6. 5的pH。
5. 权利要求4的水性药物组合物，其中所述水性药物组合物包含： (a) 190mg/mL的抗VLA-1抗体，其具有SEQ ID NO: 1的轻链序列和SEQ ID NO: 2的重链 序列； (b) 30mM乙酸盐； (c) 220mM山梨糖醇；和 (d) 0.01 %聚山梨糖醇酯80 ;且 其中所述水性药物组合物具有5. 5的pH。
6. 权利要求1至5中任一项的水性药物组合物，其中所述水性药物组合物具有 270m0sm/kg 至 380m0sm/kg 的渗透度（osmolality)。
7. 权利要求1至6中任一项的水性药物组合物，其中根据（a)通过使用液体颗粒计数 器对大于10 μ Μ颗粒的累积计数（cumulative count) /mL评估，低于2600个颗粒/mL和/ 或（b)通过使用液体颗粒计数器对大于25 μ Μ颗粒的累积计数/mL评估，低于250个颗粒 /mL的存在指示，所述水性药物组合物在存储于2至8°C达12个月后是稳定的。
8. 权利要求1至7中任一项的水性药物组合物，其中根据使用还原性SDS-PAGE评估的 完整IgG的低于10%相对损失指示，所述水性药物组合物在存储于2至8°C达12个月后是 稳定的。
9. 权利要求1至8中任一项的水性药物组合物，其中根据使用大小排阻层析评估的低 于5%碎裂（fragmentation)指示，所述水性药物组合物在存储于2至8°C达12个月后是 稳定的。
10. 权利要求1至9中任一项的水性药物组合物，其中所述水性药物组合物具有低于 15cP 的粘度（viscosity)。
11. 一种治疗需要抗VLA-1疗法的患者的方法，包括对所述患者施用有效量的权利要 求1至10中任一项的水性药物组合物。
12. 权利要求11的方法，其中所述患者患有选自下组的病症：关节炎、炎性肠病、狼疮、 移植排斥、银屑病、和结节病（sarcoidosis)，且其中所述方法对于治疗所述病症是有效的。
13. 权利要求11的方法，其中所述患者患有类风湿性关节炎且所述方法对于治疗类风 湿性关节炎是有效的。
14. 权利要求11-13中任一项的方法，其中皮下施用所述水性药物组合物。
15. 权利要求11-14中任一项的方法，其中每周施用所述水性药物组合物，且任选其中 施用所述水性药物组合物至少6周。
16. 权利要求11-15中任一项的方法，其中以0. 5mg/kg至6mg/kg的剂量施用所述水性 药物组合物。
17. 权利要求11-16中任一项的方法，其中所述治疗减轻症候（sign)或症状、延缓结构 性损伤的进展或改善躯体功能。
18. 权利要求11-17中任一项的方法，其中所述患者患有类风湿性关节炎且先前进 行过针对类风湿性关节炎的在前备选治疗（prior alternate treatment);任选其中所 述针对类风湿性关节炎的在前备选治疗包括施用选自英夫利昔单抗（infliximab)、阿达 木单抗（adalimumab)、培化舍珠单抗（certolizumab pegol)、戈利木单抗（golimumab)、 依那西普阿巴他塞（etanercept abatacept)、利妥昔单抗（rituximab)、托珠单抗 (tocilizumab)、托法替尼（tofacitinib)、甲氨蝶呤、来氟米特（leflunomide)、柳氮磺批 P定（sulfasalazine)和轻化氯喹（hydroxychloroquine)的药剂；且任选其中所述患者对于 所述在前备选治疗已经具有不充分的响应。
19. 权利要求18的方法，其中如果基于ACR标准评估，例如所述患者在所述在前备选治 疗后没有实现ACR20、ACR50或ACR70,则对所述在前备选治疗的响应是不充分的。
20. -种治疗患有中度到严重活性类风湿性关节炎的成人患者的方法，所述患者对在 前备选治疗，例如使用生物剂的在前备选治疗已经具有不充分的响应，所述方法包括每周 一次地对所述患者皮下施用液体制剂（例如水性药物组合物），所述液体制剂包含： (i) (a) 165至190mg/mL的抗VLA-1抗体，其具有SEQ ID NO: 1的轻链序列和SEQ ID NO: 2 的重链序列； (b) 25至35mM组氨酸； (c) 170至288mM山梨糖醇；和 (d) 0. 008至0. 012%聚山梨糖醇酯20 ; 其中所述液体制剂（例如所述水性药物组合物）具有5至7的pH ; 或 (ii) (a) 165至200mg/mL的抗VLA-1抗体，其具有SEQ ID NO: 1的轻链序列和SEQ ID NO: 2 的重链序列； (b) 25至35mM乙酸盐； (c) 170至253mM山梨糖醇；和 (d) 0. 008至0. 012%聚山梨糖醇酯80 ; 其中所述液体制剂（例如所述水性药物组合物）具有4. 5至6. 5的pH ; 且其中所述方法减轻类风湿性关节炎的症候或症状、延缓与类风湿性关节炎有关的结 构性损伤的进展、或改善躯体功能。
【文档编号】C07K16/28GK104271122SQ201380019988
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2013年2月14日 优先权日:2012年2月16日
【发明者】A.J.福勒, C.M.鲍, W.C.扬特, N.J.科布, T.M.凯利 申请人:桑塔鲁斯股份有限公司