一种化合物及其制备方法以及美登素dm1的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种化合物的制备方法，尤其设及美登素 DM1的制备方法W及制备美 登素 DM1的中间体化合物的制备方法。
【背景技术】 阳00引 Kackyla(ad〇-trastuzumabemtansine，（I))，是罗氏制药开发的抗体药物偶联物， 由曲妥珠单抗和小分子微管抑制剂美登素 DM1 (II)偶联而成，用于治疗肥R-2阳性晚期转 移性乳腺癌。
[0003]
[0004] US6333410公开了一种W安斯菌素 P3(简称AP3)为起始原料制备美登素 DM1的方 法。该方法第一步通过还原化水解反应得到美登醇；第二步经由美登醇与双琉基基N-甲基 丙氨酸发生醋化反应得到100%差向异构化的双琉基基中间体；第Ξ步为柱层析得到C3为 S构型的双琉基中间体；第四步再进行还原得到美登素 DM1。步骤一中W安斯菌素 P3还原 水解得到美登醇，最优选的反应条件需要在氮气保护下，-37°C到-45°C之间控溫Ξ小时W 上，运对于中试合成造成很大的不便，提升了生产成本，限制了该方法在生产上的应用。 阳0化]
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种反应条件溫和的美登素 DM1的制备方法w及美登素 DM1 的中间体化合物及其制备方法。
[0007] 一种化合物，其化学结构式如下：
[0008]
[0009] 其中R选自乙基、叔下基、甲氧基酷基甲基、-(邸2)。地(11 = 1，2,3,4)中的任意一 种。
[0010] 一种制备化合物的方法，其W AP3为原料，W LiAl (t-Bu)3H为还原剂制得美登醇， 然后美登醇与谷氨酸5-节醋N-簇基环内酸酢（NCA)发生醋化反应，在缩合剂存在条件下 与化合物C00H(CH2)2SSR反应制得下述化合物1，其中R选自乙基、叔下基、甲氧基酷基甲 基、-(邸2)。地(11 = 1，2,3,4)中的任意一种，其反应式为：
[0011]
[0012] 一种美登素 DM1的制备方法，由下述化合物1经还原反应制得，
[0013]
[0014] 其中R选自乙基、叔下基、甲氧基酷基甲基、-(CH2)n〇H(n = 1，2,3,4)的任意一种。 阳〇1引本发明的制备美登素 DM1的方法中，W AP3为原料，W LiAl(t-Bu)3H为还原剂制 得美登醇，使得生成美登醇的反应过程更加溫和，美登素 DM1的产率高达91 %。
【具体实施方式】
[0016] 下面结和【具体实施方式】对本发明的美登素 DM1的制备方法W及美登素 DM1的中间 体化合物及其制备方法作进一步详细说明。
[0017] 下述【具体实施方式】中，核磁共振由化址er AMX-400型和INV0A-600型核磁共振仪 测定，其中W TMS为内标，化学位移单位为ppm ;柱层析用青岛海洋化工厂生产的200-300 目硅胶；TLC硅胶板为烟台化工厂生产的服GF-254型薄层层析预制板；石油酸沸程为60 - 90 °C。
[0018] 一种用于制备美登素 DM1的方法，其包括W下步骤：
[0019] 步骤一 ：WAP3为原料制备美登醇。向配有溫度计和滴液漏斗的反应瓶中加入 lOOg AP3,然后将500ml无水四氨巧喃加入到反应瓶中，在-10°c到10°C氮气保护下，滴加 浓°(：为Imol/L的LiAl (t-Bu)3H四氨巧喃溶液。待LiAl (t-Bu)3H四氨巧喃溶液滴加完毕， 反应液控制在-l〇°C到10°C，揽拌2到5小时，反应液进一步冷却到0°C到4°C，滴加150ml 水。水滴加完后，反应液在-l〇°C到10°C的溫度条件下，揽拌30分钟，然后加入200ml含有 质量分数为1 %甲酸的乙酸乙醋溶液，待充分反应后，经过滤除去白色沉淀物，将滤液浓缩 得白色泡沫固体，然后在甲醇/二氯甲烧1%到4%梯度下进行柱层析，得到白色固体状的 66g美登醇，产率为87%。
[0020]
[0021] 步骤二：制备美登素中间体化合物1。美登醇与NCA发生醋化反应，在缩合剂存在 条件下与化合物R取代的3-双琉基丙酸（反应得到化合物I，其中R选自乙基、叔下基、甲 氧基酷基甲基、-(CH2)n〇H(n = 1，2,3,4)，其反应式为：
[0022]
[0023] 具体地，将由步骤一的方法制得的120g美登醇溶解在120ml无水四氨巧喃和6mL 无水DMF中，然后再加入22mlN，N-二异丙基乙胺值IPEA)，14gNCA和200g Ξ氣甲横酸锋。 上述混合物在室溫、氮气保护的条件下揽拌15到40小时，然后加入1L乙酸乙醋和1L饱 和的Na肥〇3水溶液；分液；用饱和化C1溶液洗涂W去除乙酸乙醋，然后再用无水MgS〇4干 燥，浓缩得150g粗产品；将39g3-(叔下基二琉基）丙酸溶解在600mL无水DMF中，将上述 150g粗产品和25g缩合剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐巧DCI)加入上 述600mL无水DMF溶液中，反应液在室溫下揽拌2到4小时，加入适量乙酸乙醋和水进行分 液，有机层用饱和NaHC03溶液洗涂，再用10%的巧樣酸水溶液和饱和化C1水溶液洗涂，拉 干，粗产品在甲醇/二氯甲烧0%到4%梯度下进行柱层析纯化，得到27g结构式如下式化 合物1巧=叔下基）的白色固体产物。该白色固体产物为美登素中间体化合物，其核磁数 据为：
[0024] 1H 醒R (400MHz, CHL0R0F0RM-d)d ppmO. 81 (s，3H) 1.22 (s，9H) 1.26-1. 35 (m，7H )1. 43-1. 52 (m, IH) 1. 56 (d, J = 13. 45Hz, IH) 1. 65 (s, 3H) 2. 14-2. 22 (m, IH) 2. 57-2. 70 (m ，2H) 2. 72-3. 00 (m, 6H) 3. 01-3. 14 (m, 2H) 3. 26 (s, 3H) 3. 37 (s, 3H) 3. 45 化rs, IH) 3. 41-3. 54(m，lH)3. 68(d，J = 12. 72Hz，lH)3. 99(s，3H)4. 28(t，J = 10. 51Hz，lH)4. 78(dd，J = 11. 98, 2. 93Hz, IH) 5. 43 (d, J = 6. 85Hz, IH) 5. 66 (dd, J = 15. 28, 8. 93Hz, IH) 6. 36 (s, IH) 6. 4 4 (dd, J = 15. 28, 11. 13Hz, IH) 6. 65 (s, IH) 6. 75 (d, J = 11. OOHz, IH) 6. 79-6. 87 (m, IH)。 阳0巧]
阳0%] 具体地，将步骤二中的缩合剂邸Cl改为N，N-二环己基碳二亚胺值CC)，将3-(叔 下基二琉基）丙酸改为3-(甲氧基酷基甲基二琉基）丙酸进行缩合，得到结构为下式的化 合物1的美登素中间体化合物，其核磁数据为： 阳0八]1H NMR(400MHz，CHLOROFORM-d) d ppmO. 81 (S, 3H) 1. 28-1. 35 (m, 10H) 1. 44-1. 52 ( m，lH)1.58(d，J = 13. 20Hz，lH)1.66(s3H)2. 20(dd，J = 14. 55,3. 0細z，lH)2. 80-3. 07(m ，lOH) 3. 25 (s, 2H) 3. 34-3. 43 (m, 4H) 3. 50 (s, 3H) 3. 61-3. 78 (m, 2H) 4. 0 (s, 3H) 4. 13-4. 22 (m ，2H) 4. 25-4. 34 (m, m) 4. 73-4. 89 (m, IH) 5. 38-5. 50 (m, IH) 5. 61-5. 72 (m, IH) 6. 44 (dd, J = 15. 41，11. 25Hz, IH) 6. 56-6. 78 (m, 3H) 6. 84 (s, IH)。
[0028]
[0029] 另外，在不改变缩合剂邸Cl的条件下，将3-(叔下基二琉基）丙酸改成3-(乙基 二琉基）丙酸可制得R为乙基的化合物1，将3-(叔下基二琉基）丙酸改成3-(径甲基二琉 基）丙酸可制得R为径甲基的化合物1，相应地可W制得R为畑2)。地的化合物1。
[0030] 步骤S :将8. 6g Tris [2-簇乙基]盐酸麟灯CEP巧印溶解在50血的0. 1M/L的 憐酸钟缓冲溶液中（pH = 7. 4)，将上一步得到的50g化合物1巧=叔下基）溶解在150mL Ξ氣乙醇中，加入上述憐酸钟缓冲溶液，反应液揽拌15到45分钟，然后浓缩掉大部分Ξ氣 乙醇溶液，剩余反应液加入200mL乙酸乙醋，再用饱和化C1溶液洗涂，有机层用无水硫酸钢 干燥，拉干，得白色固体，在甲醇/二氯甲烧0%到4%梯度下柱层析纯化，得到42g美登素 DM1，美登素 DM1产率为91%。
[0031]
[0032] 本发明W AP3为原料，W LiAl(t-Bu)3H为还原剂制得美登醇，使得生成美登醇的 反应过程更加溫和，美登素 DM1的产率高达91 %。
[0033] W上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详 细说明，所应理解的是，W上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡 在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保 护范围之内。
【主权项】
1. 一种化合物，其化学结构式如下：其中R选自乙基、叔下基、甲氧基酷基甲基、-(邸2)。地(11 = 1，2,3,4)中的任意一种。2. -种制备化合物的方法，其W AP3为原料，W LiAl (t-Bu) 3H为还原剂制得美登醇， 然后美登醇与谷氨酸5-节醋N-簇基环内酸酢（NCA)发生醋化反应，在缩合剂存在条件下 与化合物COOH (邸2) 2SSR反应制得下述化合物1，其中R选自乙基、叔下基、甲氧基酷基甲 基、_(CH2)n〇H(n = n = 1，2,3,4)中的任意一种，其反应式为：3. 如权利要求2所述的化合物的制备方法，其特征在于：滴加 LiAl (t-Bu) 3H的过程中， 反应溫度为-l〇°C到10°C。4. 如权利要求2所述的化合物的制备方法，其特征在于：所述缩合剂为1-乙基-(3-二 甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐巧DCI)，其中R选自乙基、叔下基、-(邸2)。地(11 = 1，2,3， 4)中的任意一种。5. 如权利要求2所述的化合物的制备方法，其特征在于：所述缩合剂为N，N-二环己基 碳二亚胺值CC)，其中R选自乙基、叔下基、-(邸2)。地(11 = 1，2,3,4)中的任意一种。6. -种美登素 DMl的制备方法，由下述化合物1经还原反应制得，其中R选自乙基、叔下基、甲氧基酷基甲基、-(邸2)。地(11 = n = 1，2,3,4)的任意一种。7. 如权利要求6所述的美登素 DMl的制备方法，其特征在于：W AP3为原料，W LiAl (t-Bu)3H 为还原剂制得美登醇，然后美登醇与（S)-3, 4-dimeth}doxazolidine-2, 5-di one (NCA)发生醋化反应，在缩合剂存在条件下与化合物COOH (邸2) 2SSR反应制得下述化合 物1，其中R选自乙基、叔下基、甲氧基酷基甲基、-畑2)。地(11= 1，2,3,4)中的任意一种，其 反应式为：8. 如权利要求7所述的美登素 DMl的制备方法，其特征在于：所述缩合剂为所述缩 合剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（邸Cl)，其中R选自乙基、叔下 基、-(CH2)n〇H(n = 1，2,3,4)中的任意一种。9. 如权利要求7所述的美登素 DMl的制备方法，其特征与：所述缩合剂为N，N-二环己 基碳二亚胺值CC)，R为甲氧基酷基甲基。10. 如权利要求7所述的美登素 DMl的制备方法，其特征在于：滴加 LiAl (t-Bu) sH的过 程中，反应溫度为-l〇°C到10°C。
【专利摘要】本发明涉及一种化合物，其化学结构式如下：其中R选自乙基、叔丁基、甲氧基酰基甲基、-(CH2)nOH(n＝1，2，3，4)中的任意一种。本发明还涉及该化合物的制备方法及以该化合物为中间体制备美登素DM1的方法。本发明的方法反应条件温和，美登素DM1产率高达91％。
【IPC分类】C07D498/18
【公开号】CN105585579
【申请号】CN201410579898
【发明人】徐俊, 张彬彬, 吴胜星, 李海泓
【申请人】南京联宁生物制药有限公司
【公开日】2016年5月18日
【申请日】2014年10月24日
【公告号】WO2016061718A1