一种制备广藿香烯酮的方法与流程

本发明属于化学领域，涉及一种制备广藿香烯酮的方法。

背景技术：

广藿香烯酮、香附薁酮、香附子烯-2,5,8-三醇是存在于莎草中的化合物，化学结构如下。

目前制备广藿香烯酮、香附薁酮、香附子烯-2,5,8-三醇的方法比较复杂，需要借助液液萃取、反复硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析等手段，难以规模化运用。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种制备广藿香烯酮的方法。

本发明上述目的通过如下技术方案实现：

一种制备广藿香烯酮的方法，包括：

步骤1、乙醇总提物的制备

将莎草的干燥根茎粉碎，用无水乙醇提取，提取液过滤，浓缩干燥得到乙醇总提物；

步骤2、mci微孔树脂富集

将乙醇总提物加水搅拌、超声溶解，过滤，上样于mci微孔树脂柱内，上样的溶液体积为1.5bv，上样流速为1.5bv/h，上样结束后关闭树脂柱阀门，静置吸附0.5h；洗脱时，先用40％乙醇以3bv/h流速洗脱1.5h，再用70％乙醇以3bv/h流速洗脱，收集5～6bv的70％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物；

步骤3、制备液相色谱分离纯化

将富集物用体积百分浓度为20％的乙醇水溶液溶解配制成进样溶液，过滤，注入制备液相色谱仪进行分离纯化，制备液相色谱参数如下：

色谱柱为ultimatexb-c8(10μm，10mm×250mm)，流速为2.5ml/min，柱温25℃，紫外检测波长为225nm，进样量0.5ml；梯度洗脱：流动相a为水:甲酸＝100:3，流动相b为乙腈，洗脱程序：0～10min，b为20％；10～25min，b为20％～65％；25～40min，b为65％～100％；

根据色谱图收集广藿香烯酮色谱峰对应的洗脱流份，浓缩干燥即得到广藿香烯酮。

优选地，步骤1用无水乙醇冷浸提取3次，每次24h；提取液过滤，合并，浓缩干燥得到乙醇总提物。

优选地，步骤2将乙醇总提物加水搅拌、超声溶解，配制成浓度为1g/ml的溶液。

优选地，步骤2中mci微孔树脂柱的长径比为6:1。

优选地，步骤3中将富集物用体积百分浓度为20％的乙醇水溶液溶解配制成浓度为10mg/ml的进样溶液。

有益效果：

本发明仅通过mci微孔树脂和反相制备液相色谱即可制备得到纯度在95％以上的广藿香烯酮、香附薁酮、香附子烯-2,5,8-三醇，易于规模化制备。

附图说明

图1为制备液相色谱图；

图2为香附子烯-2,5,8-三醇供试品溶液和对照品溶液色谱图；

图3为广藿香烯酮供试品溶液和对照品溶液色谱图；

图4为香附薁酮供试品溶液和对照品溶液色谱图。

具体实施方式

下面结合实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。

一、实验材料

莎草科植物莎草cyperusrotundusl.的干燥根茎即香附购自安徽亳州中药材市场。

mci柱层析用chp-20p(75～150μm)为三菱化学公司产品。

半制备液相色谱仪为agilent1200，制备柱为ultimatexb-c8(10μm，10mm×250mm)，分析柱为agilentzorbaxsbc18(4.6mm×250mm，5μm)。

二、实验方法和结果

1、乙醇总提物的制备

将莎草cyperusrotundusl.的干燥根茎粉碎，用无水乙醇冷浸提取3次，每次24h；提取液过滤，合并，浓缩干燥得到乙醇总提物。

2、mci微孔树脂富集

将乙醇总提物加水搅拌、超声溶解，配制成浓度为1g/ml的溶液，过滤，上样于长径比为6:1的mci微孔树脂柱内，上样的溶液体积为1.5bv，上样流速为1.5bv/h，上样结束后关闭树脂柱阀门，静置吸附0.5h；洗脱时，先用40％乙醇以3bv/h流速洗脱1.5h，再用70％乙醇以3bv/h流速洗脱，收集5～6bv的70％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物。

3、制备液相色谱分离纯化

将富集物用体积百分浓度为20％的乙醇水溶液溶解配制成浓度为10mg/ml的进样溶液，过滤，注入制备液相色谱仪进行分离纯化，制备液相色谱参数如下：

色谱柱为ultimatexb-c8(10μm，10mm×250mm)，流速为2.5ml/min，柱温25℃，紫外检测波长为225nm，进样量0.5ml；梯度洗脱：流动相a为水:甲酸＝100:3，流动相b为乙腈，洗脱程序：0～10min，b为20％；10～25min，b为20％～65％；25～40min，b为65％～100％；

根据色谱图(图1)收集香附子烯-2,5,8-三醇、广藿香烯酮、香附薁酮色谱峰对应的洗脱流份，浓缩干燥即得到香附子烯-2,5,8-三醇、广藿香烯酮、香附薁酮。

4、纯度检测

将上述制备得到的香附子烯-2,5,8-三醇、广藿香烯酮、香附薁酮分别用体积百分浓度为20％的乙腈水溶液溶解配制成浓度为1mg/ml的供试品溶液，同时配制浓度为0.1mg/ml的对照品溶液，分别注入液相色谱仪检测，色谱参数如下：

色谱柱为agilentzorbaxsb-c18(4.6mm×250mm，5μm)，流速为1ml/min，柱温25℃，紫外检测波长225nm，进样量10μl；梯度洗脱：流动相a为水:乙酸＝100:1；流动相b为甲醇:乙腈:乙酸＝70:30:1。洗脱程序：0～10min，b为20％；10～40min，b为20％～100％。

香附子烯-2,5,8-三醇、广藿香烯酮、香附薁酮供试品溶液和对照品溶液色谱图如图2～4。

实验结果表明，本发明提供的方法可以制备得到纯度不低于95％的香附子烯-2,5,8-三醇、广藿香烯酮、香附薁酮，方法简易可行，易于规模化制备。

上述实施例用于介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种制备广藿香烯酮的方法，包括：乙醇总提物的制备、MCI微孔树脂富集和制备液相色谱分离纯化。本发明仅通过MCI微孔树脂和反相制备液相色谱即可制备得到纯度在95％以上的广藿香烯酮、香附薁酮、香附子烯‑2,5,8‑三醇，易于规模化制备。

技术研发人员：张长林;杨佳
受保护的技术使用者：淮安培元基因科技有限公司
技术研发日：2018.09.25
技术公布日：2019.02.12