本发明涉及医药技术领域，具体为一种s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法。
背景技术
s-吲哚啉-2-羧酸为新药—普力的中间体，主要用于治疗心脑血管疾病，用于医药、香料和染料等有机合成的中间体，可用于合成培哚普利和喷托普利，合成(s)-吲哚啉-2-甲酸的工艺研究中，国内主要是以水解酶制备(s)-二氢吲哚-2-羧酸的方法，其水解酶选用白由赛维纳斯，水解蛋白酶，脂肪酶243，蛋白醇，内肽酶。
国内以n-乙酰基-吲哚-2-羧酸为起始原料，经过氢化，水解，拆分，而制得的总收率为21％的(s)-(-)-二氢吲哚-2-羧酸，传统的s-吲哚啉-2-羧酸制备方法步骤颇为复杂，制备环境较为恶劣，使用者在制备s-吲哚啉-2-羧酸时往往十分煎熬，使用者对此颇为苦恼，故而提出一种s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法。
技术实现要素：
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法，具备制备方法简单，制备环境良好等优点，解决了传统的s-吲哚啉-2-羧酸制备方法步骤颇为复杂，制备环境较为恶劣，使用者在制备s-吲哚啉-2-羧酸时往往十分煎熬，使用者对此颇为苦恼的问题。
(二)技术方案
为实现上述制备方法简单，制备环境良好的目的，本发明提供如下技术方案：一种s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法，包括以下步骤：
1)准备亚硫酸氢钠20-30克、l-苯丙氨酸200-300克、吲哚-2-甲酸300-400克、金属催化剂20-30克、蛋白酶50-100克、内肽酶50-80克、三乙胺10-20克、乙酸酐30-50克和盐酸溶液500-1000克；
2)使用者取l-苯丙氨酸200-300克、亚硫酸氢钠20-30克和吲哚-2-甲酸300-400克混合，保持在环境温度150开尔文中使用玻璃棒以300转每分钟的频率搅拌，搅拌五分钟后停止搅拌，静置1-2小时，得到混合物1；
3)将混合物1取出，将金属催化剂20-30克加入混合物1中，以300转每分钟的频率搅拌十五分钟，两者之间发生偶联反应，待反应物反应三十分钟，得到混合物2；
4)取蛋白酶50-100克、内肽酶50-80克、三乙胺10-20克和乙酸酐30-50克，依次加入到混合物2中，保持反应温度200开尔文左右，以500转每分钟的频率搅拌10分钟，逐渐滴入盐酸溶液500-1000克，以500转每分钟的频率搅拌5分钟，静置8-10小时，待混合溶液中析出白色结晶体；
5)将混合溶液经过离心水洗，过滤出白色结晶，脱水烘干，即得所求s-吲哚啉-2-羧酸，存储在玻璃瓶中，存放在干燥通风处。
优选的，所述金属催化剂20-30克中含有铜原子或为铜的金属盐，盐酸溶液500-1000克的浓度为百分之八十左右的盐酸溶液。
优选的，所述内肽酶50-80克、三乙胺10-20克和乙酸酐30-50克的反应摩尔比为1：1.2-1.2：1.15，l-苯丙氨酸200-300克的纯净度为百分之九十五及以上。
优选的，所述蛋白酶50-100克在使用前经过活化处理，吲哚-2-甲酸300-400克与l-苯丙氨酸200-300克的纯净度在百分之九十以上。
优选的，所述亚硫酸氢钠可使用氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵四丙基氢氧化铵、四j基氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾进行替换。
(三)有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法，具备以下有益效果：
该s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法，通过l-苯丙氨酸200-300克和吲哚-2-甲酸300-400克混合，保持在环境温度150开尔文中使用玻璃棒以300转每分钟的频率搅拌，搅拌五分钟后停止搅拌，静置1-2小时，得到混合物1，将金属催化剂20-30克加入混合物1中，以300转每分钟的频率搅拌十五分钟，两者之间发生偶联反应，待反应物反应三十分钟，得到混合物2，在制备的过程中步骤都十分简化，比及传统的s-吲哚啉-2-羧酸制备方法对使用者要友好很多，制备环境较佳，免去了使用者面对恶劣环境的苦恼，方便了使用者的制备。
具体实施方式
下面将结合本发明的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例一：一种s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法，包括以下步骤：
1)准备亚硫酸氢钠20克、l-苯丙氨酸200克、吲哚-2-甲酸300克、金属催化剂20克、蛋白酶50克、内肽酶50克、三乙胺10克、乙酸酐30克和盐酸溶液500克；
2)使用者取l-苯丙氨酸200克、亚硫酸氢钠10克和吲哚-2-甲酸300克混合，保持在环境温度150开尔文中使用玻璃棒以300转每分钟的频率搅拌，搅拌五分钟后停止搅拌，静置1-2小时，得到混合物1；
3)将混合物1取出，将金属催化剂20克加入混合物1中，以300转每分钟的频率搅拌十五分钟，两者之间发生偶联反应，待反应物反应三十分钟，得到混合物2；
4)取蛋白酶50克、内肽酶50克、三乙胺10克和乙酸酐30克，依次加入到混合物2中，保持反应温度200开尔文左右，以500转每分钟的频率搅拌10分钟，逐渐滴入盐酸溶液500克，以500转每分钟的频率搅拌5分钟，静置8-10小时，待混合溶液中析出白色结晶体；
5)将混合溶液经过离心水洗，过滤出白色结晶，脱水烘干，即得所求s-吲哚啉-2-羧酸，存储在玻璃瓶中，存放在干燥通风处。
金属催化剂20克中含有铜原子或为铜的金属盐，盐酸溶液500克的浓度为百分之八十左右的盐酸溶液。
内肽酶50克、三乙胺10克和乙酸酐30克的反应摩尔比为1：1.2-1.2：1.15，l-苯丙氨酸200克的纯净度为百分之九十五及以上。
蛋白酶50克在使用前经过活化处理，吲哚-2-甲酸300克与l-苯丙氨酸200克的纯净度在百分之九十以上。
亚硫酸氢钠可使用氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵四丙基氢氧化铵、四j基氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾进行替换。
可使用氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵四丙基氢氧化铵、四j基氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾进行替换的亚硫酸氢钠使得最终制得的s-吲哚啉-2-羧酸纯净度更高，浓度为百分之八十左右的盐酸溶液可以使得反应的残留物降到最少，在后期的过滤中制得的s-吲哚啉-2-羧酸纯净度更高。
实施例二：一种s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法，包括以下步骤：
1)准备亚硫酸氢钠30克、l-苯丙氨酸300克、吲哚-2-甲酸400克、金属催化剂30克、蛋白酶100克、内肽酶80克、三乙胺20克、乙酸酐50克和盐酸溶液1000克；
2)使用者取l-苯丙氨酸300克、亚硫酸氢钠30克和吲哚-2-甲酸400克混合，保持在环境温度150开尔文中使用玻璃棒以300转每分钟的频率搅拌，搅拌五分钟后停止搅拌，静置1-2小时，得到混合物1；
3)将混合物1取出，将金属催化剂30克加入混合物1中，以300转每分钟的频率搅拌十五分钟，两者之间发生偶联反应，待反应物反应三十分钟，得到混合物2；
4)取蛋白酶100克、内肽酶80克、三乙胺20克和乙酸酐50克，依次加入到混合物2中，保持反应温度200开尔文左右，以500转每分钟的频率搅拌10分钟，逐渐滴入盐酸溶1000克，以500转每分钟的频率搅拌5分钟，静置8-10小时，待混合溶液中析出白色结晶体；
5)将混合溶液经过离心水洗，过滤出白色结晶，脱水烘干，即得所求s-吲哚啉-2-羧酸，存储在玻璃瓶中，存放在干燥通风处。
金属催化剂30克中含有铜原子或为铜的金属盐，盐酸溶液1000克的浓度为百分之八十左右的盐酸溶液。
内肽酶80克、三乙胺20克和乙酸酐50克的反应摩尔比为1：1.2-1.2：1.15，l-苯丙氨酸300克的纯净度为百分之九十五及以上。
蛋白酶100克在使用前经过活化处理，吲哚-2-甲酸400克与l-苯丙氨酸300克的纯净度在百分之九十以上。
亚硫酸氢钠可使用氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵四丙基氢氧化铵、四j基氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾进行替换。
可使用氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵四丙基氢氧化铵、四j基氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾进行替换的亚硫酸氢钠使得反应物之间的反应更加迅速，经过活化处理的蛋白酶100克反应时反应效果更好，使得整个制备过程耗时更短，节约了使用者的时间，增加了制备效率，且经过活化处理的蛋白酶100克反应时几乎没有多余残留物，制得的s-吲哚啉-2-羧酸纯净度更高。
实施例三：一种s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法，包括以下步骤：
1)准备亚硫酸氢钠25克、l-苯丙氨酸250克、吲哚-2-甲酸350克、金属催化剂25克、蛋白酶75克、内肽酶65克、三乙胺15克、乙酸酐40克和盐酸溶液750克；
2)使用者取l-苯丙氨酸250克、亚硫酸氢钠25克和吲哚-2-甲酸350克混合，保持在环境温度150开尔文中使用玻璃棒以300转每分钟的频率搅拌，搅拌五分钟后停止搅拌，静置1-2小时，得到混合物1；
3)将混合物1取出，将金属催化剂25克加入混合物1中，以300转每分钟的频率搅拌十五分钟，两者之间发生偶联反应，待反应物反应三十分钟，得到混合物2；
4)取蛋白酶75克、内肽酶65克、三乙胺15克和乙酸酐40克，依次加入到混合物2中，保持反应温度200开尔文左右，以500转每分钟的频率搅拌10分钟，逐渐滴入盐酸溶液750克，以500转每分钟的频率搅拌5分钟，静置8-10小时，待混合溶液中析出白色结晶体；
5)将混合溶液经过离心水洗，过滤出白色结晶，脱水烘干，即得所求s-吲哚啉-2-羧酸，存储在玻璃瓶中，存放在干燥通风处。
亚硫酸氢钠可使用氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵四丙基氢氧化铵、四j基氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾进行替换。
金属催化剂25克中含有铜原子或为铜的金属盐，盐酸溶液750克的浓度为百分之八十左右的盐酸溶液。
内肽酶65克、三乙胺15克和乙酸酐40克的反应摩尔比为1：1.2-1.2：1.15，l-苯丙氨酸250克的纯净度为百分之九十五及以上。
蛋白酶75克在使用前经过活化处理，吲哚-2-甲酸300-400克与l-苯丙氨酸250克的纯净度在百分之九十以上。
反应摩尔比为1：1.2-1.2：1.15的内肽酶65克、三乙胺15克和乙酸酐40克反应彻底，反应后的残留物少，对于制备材料的使用更加少，最终的制备效率得到了提高，减少了使用者的投入，且反应后期因为杂质较少，制备步骤变得简单，制备环境更佳，可使用氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵四丙基氢氧化铵、四j基氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾进行替换的亚硫酸氢钠，使得制备材料的选择更加多样化。
实验例4：一种s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法，包括以下步骤：
1)准备亚硫酸氢钠10克，l-苯丙氨酸100克、吲哚-2-甲酸150克、金属催化剂10克、蛋白酶25克、内肽酶25克、三乙胺5克、乙酸酐15克和盐酸溶液250克；
2)使用者取l-苯丙氨酸100克、亚硫酸氢钠10克和吲哚-2-甲酸150克混合，保持在环境温度150开尔文中使用玻璃棒以300转每分钟的频率搅拌，搅拌五分钟后停止搅拌，静置1-2小时，得到混合物1；
3)将混合物1取出，将金属催化剂10克加入混合物1中，以300转每分钟的频率搅拌十五分钟，两者之间发生偶联反应，待反应物反应三十分钟，得到混合物2；
4)取蛋白酶25克、内肽酶25克、三乙胺5克和乙酸酐15克，依次加入到混合物2中，保持反应温度200开尔文左右，以500转每分钟的频率搅拌10分钟，逐渐滴入盐酸溶液250克，以500转每分钟的频率搅拌5分钟，静置8-10小时，待混合溶液中析出白色结晶体；
5)将混合溶液经过离心水洗，过滤出白色结晶，脱水烘干，即得所求s-吲哚啉-2-羧酸，存储在玻璃瓶中，存放在干燥通风处。
金属催化剂10克中含有铜原子或为铜的金属盐，盐酸溶液250克的浓度为百分之八十左右的盐酸溶液。
内肽酶25克、三乙胺5克和乙酸酐15克的反应摩尔比为1：1.2-1.2：1.15，l-苯丙氨酸100克的纯净度为百分之九十五及以上。
蛋白酶25克在使用前经过活化处理，吲哚-2-甲酸150克与l-苯丙氨酸100克的纯净度在百分之九十以上。
亚硫酸氢钠可使用氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵四丙基氢氧化铵、四j基氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾进行替换。
使用者取l-苯丙氨酸100克和吲哚-2-甲酸150克混合，保持在环境温度150开尔文中使用玻璃棒以300转每分钟的频率搅拌，搅拌五分钟后停止搅拌，静置1-2小时，步骤二中的搅拌使得反应物之间的反应速度加快，反应物之间的反应更加彻底。
本发明的有益效果是：该s-吲哚啉-2-羧酸的制备方法，通过l-苯丙氨酸200-300克和吲哚-2-甲酸300-400克混合，保持在环境温度150开尔文中使用玻璃棒以300转每分钟的频率搅拌，搅拌五分钟后停止搅拌，静置1-2小时，得到混合物1，将金属催化剂20-30克加入混合物1中，以300转每分钟的频率搅拌十五分钟，两者之间发生偶联反应，待反应物反应三十分钟，得到混合物2，在制备的过程中步骤都十分简化，比及传统的s-吲哚啉-2-羧酸制备方法对使用者要友好很多，制备环境较佳，免去了使用者面对恶劣环境的苦恼，方便了使用者的制备。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。