本发明涉及生殖医学领域，具体涉及一种用于评价卵母细胞质量的组合物及试剂盒。
背景技术：
1.不孕症与辅助生殖技术
我国不孕症患者目前已经占到育龄人口的12.5％，人数已经超过4000万，并呈现出快速增长的趋势。辅助生殖技术(assistedreproductivetechnology,art)为不孕症患者带来了诞生新生命体的希望，然而在体外受精(invitrofertilization,ivf)中，近80％的胚胎着床失败，为提高成功率，各生殖中心进行多胚胎移植，由此多胎妊娠随之增加，而多胎妊娠出生的新生儿早产、死产、低出生体重、出生缺陷及母亲高血压等并发症均较自然受孕高。因此，准确预测卵母细胞的发育潜能，挑选出优质卵母细胞进行ivf，进而选出单个胚胎进行移植对提高ivf妊娠结局、孕育健康子代具有重大意义。
2.卵母细胞质量评估方法
目前形态学方法是评估卵母细胞发育潜能最常用的方法，主要采取卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocytecomplexes,cocs)形态、第一极体形态、卵周隙大小、胞质形态、纺锤体形态学等判断卵母细胞质量。形态学方法无创、方便，但缺乏最合适的统一标准，不能准确反映卵母细胞的功能状态，且受观察者主观影响较大，观察者间的主观性使卵母细胞与胚胎发育的关联显示出差异性。因此，寻找一种更为客观、精准的卵母细胞质量评估方法迫在眉睫。
技术实现要素：
卵泡液构成卵母细胞生长、发育的微环境，卵母细胞在卵泡中的时间占据从生长到成熟时程的99％以上。发明人发现，卵泡液内含有生物活性代谢物和蛋白质等，可能影响卵泡生长、卵母细胞质量与受精以及胚胎的发育，因此卵泡液生物标志物能够间接反映卵母细胞的质量。
临床上通过art取得卵母细胞后，卵泡液的一半作为废弃物而丢弃，这部分卵泡液可以作为用于评估所收集的卵母细胞质量优劣的丰富的资源。
发明人利用组学技术研究卵泡液内含物，目的在于筛选出与卵母细胞质量密切相关的特征标志物，从而为建立一种客观、精准、无创性的卵母细胞质量评估方法奠定基础。
本发明通过检测质量低下与正常的卵母细胞样本中卵泡液的成分及含量，经过统计学方法分析，发现某些特定组分及其含量与卵母细胞的质量成正相关，因此可以作为卵母细胞质量评价的标志物，用以筛选高质量的卵母细胞进行辅助生殖。
本发明提供一种组合物，包括n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸。根据本发明，所述组合物用作卵母细胞质量评价系统中的标准品。
根据本发明，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。根据本发明，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。
本发明还提供一种组合物，包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸。根据本发明，所述组合物用作卵母细胞质量评价系统中的标准品。
根据本发明，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。根据本发明，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。
本发明还提供一种组合物，包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素。根据本发明，所述组合物用作卵母细胞质量评价系统中的标准品。
根据本发明，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。根据本发明，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。
本发明还提供一种组合物，包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素。根据本发明，所述组合物用作卵母细胞质量评价系统中的标准品。
根据本发明，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。根据本发明，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。
本发明还提供一种组合物，包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素。根据本发明，所述组合物用作卵母细胞质量评价系统中的标准品。
根据本发明，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。根据本发明，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。
本发明还提供一种组合物在卵母细胞质量评价中的应用，所述组合物包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素。
根据本发明，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。根据本发明，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。
本发明还提供一种卵母细胞质量评价试剂盒，所述试剂盒含有标准品组合物，所述标准品组合物包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素。
本发明提到的“所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本”是指采集受试者的卵母细胞样本，通过分离手段得到卵母细胞和卵泡液，因此所述卵泡液构成所述卵母细胞在受试者体内的生长、发育环境，因而能够反映卵母细胞的质量。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明进一步详细说明。通过这些说明，本发明的特点和优点将变得更为清楚明确。
根据本发明的一个实施方式，提供一种组合物，所述组合物包括n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸。根据一个实施方式，所述组合物用作卵母细胞质量评价系统中的标准品。
在根据本发明的上述实施方式中，所述组合物中n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸的含量或配比与正常人类卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸的含量或配比大致相等。在一个实施方式中，所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸组成。在另一个实施方式中，所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和适当的溶剂组成。
在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸组成的实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸的质量比为3:1-0.2:1。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸的质量比为3:1-0.4:1。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸的质量比为3:1-0.6:1。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸的质量比为3:1-0.8:1。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸的质量比为3:1-1:1。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸的质量比为2.5:1-0.2:1。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸的质量比为2:1-0.2:1。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸的质量比为1.5:1-0.2:1。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸的质量比为1:3-0.2:1。
在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和适当的溶剂组成的实施方式中，所述适当的溶剂为能够溶解n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸且不与二者发生化学反应的任何溶剂，可以是甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、二氯甲烷等等。在一个实施方式中，所述组合物含有0.5-6ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.5-5ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.5-4ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.5-3ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.5-2ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.7-6ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.9-6ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.1-6ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.3-6ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.5-6ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.7-6ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.7-5ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.9-4ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.1-3ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.3-2ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.5-2ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.7-2ng/mln-乙酰-d-色氨酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-6ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-5ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-4ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-3ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-2ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.6-6ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.8-6ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1-6ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.2-6ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.4-6ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.6-6ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.6-5ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.8-4ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1-3ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.2-2ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.4-2ng/ml亚牛磺酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.6-1.8ng/ml亚牛磺酸。
在根据本发明的上述实施方式中，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。在一个实施方式中，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少30％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少40％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少50％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸和亚牛磺酸的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少60％，则卵母细胞质量低。
根据本发明的另一实施方式，提供一种组合物，所述组合物包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸。根据一个实施方式，所述组合物用作卵母细胞质量评价系统中的标准品。
在根据本发明的上述实施方式中，所述组合物中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸的含量或配比与正常人类卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸的含量或配比大致相等。在一个实施方式中，所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸组成。在另一个实施方式中，所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸和适当的溶剂组成。
在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸组成的实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸的质量比为(0.5-4)：(0.2-4)：(0.2-4)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸的质量比为(0.7-3.5)：(0.5-3.5)：(0.5-3.5)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸的质量比为(0.9-3)：(0.7-3)：(0.7-3)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸的质量比为(1.1-2.5)：(0.9-2.5)：(0.9-2.5)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸的质量比为(1.3-2)：(1.1-2)：(1.1-2)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸的质量比为(1.5-2)：(1.3-2)：(1.3-2)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸的质量比为(1.7-2)：(1.5-1.8)：(1.5-1.9)。
在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸和适当的溶剂组成的实施方式中，所述适当的溶剂为能够溶解n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸且不与三者发生化学反应的任何溶剂，可以是甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、二氯甲烷等等。上文在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和适当的溶剂组成的实施方式中列举的关于n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸含量的实施方式同样适用于所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸和适当的溶剂组成的实施方式。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-6ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-5ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-4ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-3ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-2ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.6-6ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.8-6ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1-6ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.2-6ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.4-6ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.6-6ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.6-5ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有0.8-4ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1-3ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.2-2ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.4-2ng/ml哌啶酸。在一个实施方式中，所述组合物含有1.6-1.9ng/ml哌啶酸。
在根据本发明的上述实施方式中，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。在一个实施方式中，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少30％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少40％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少50％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和哌啶酸的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少60％，则卵母细胞质量低。
根据本发明的另一实施方式，提供一种组合物，所述组合物包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素。根据一个实施方式，所述组合物用作卵母细胞质量评价系统中的标准品。
在根据本发明的上述实施方式中，所述组合物中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素的含量或配比与正常人类卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素的含量或配比大致相等。在一个实施方式中，所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素组成。在另一个实施方式中，所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、尿素和适当的溶剂组成。
在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素组成的实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、尿素的质量比为(0.5-4)：(0.2-4)：(0.1-3)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、尿素的质量比为(0.7-3.5)：(0.5-3.5)：(0.3-2.5)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、尿素的质量比为(0.9-3)：(0.7-3)：(0.5-2)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、尿素的质量比为(1.1-2.5)：(0.9-2.5)：(0.7-1.5)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、尿素的质量比为(1.3-2)：(1.1-2)：(0.7-1)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、尿素的质量比为(1.5-2)：(1.3-2)：(0.7-0.9)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、尿素的质量比为(1.7-2)：(1.5-1.8)：(0.7-0.9)。
在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、尿素和适当的溶剂组成的实施方式中，所述适当的溶剂为能够溶解n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素且不与三者发生化学反应的任何溶剂，可以是甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、二氯甲烷等等。上文在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和适当的溶剂组成的实施方式中列举的关于n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸含量的实施方式同样适用于所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、尿素和适当的溶剂组成的实施方式。在一个实施方式中，所述组合物含有0.1-3ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.1-2.5ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.1-2ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.1-1.5ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.1-1ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.3-3ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.5-3ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.7-3ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.3-2.5ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.5-2ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.7-1.5ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.7-1ng/ml尿素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.7-0.9ng/ml尿素。
在根据本发明的上述实施方式中，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。在一个实施方式中，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少30％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少40％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少50％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和尿素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少60％，则卵母细胞质量低。
根据本发明的另一实施方式，提供一种组合物，所述组合物包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素。根据一个实施方式，所述组合物用作卵母细胞质量评价系统中的标准品。
在根据本发明的上述实施方式中，所述组合物中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素的含量或配比与正常人类卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素的含量或配比大致相等。在一个实施方式中，所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素组成。在另一个实施方式中，所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、肾上腺素和适当的溶剂组成。
在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素组成的实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、肾上腺素的质量比为(0.5-4)：(0.2-4)：(0.1-3)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、肾上腺素的质量比为(0.7-3.5)：(0.5-3.5)：(0.3-2.5)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、肾上腺素的质量比为(0.9-3)：(0.7-3)：(0.5-2)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、肾上腺素的质量比为(1.1-2.5)：(0.9-2.5)：(0.5-1.5)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、肾上腺素的质量比为(1.3-2)：(1.1-2)：(0.5-1)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、肾上腺素的质量比为(1.5-2)：(1.3-2)：(0.5-0.8)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、肾上腺素的质量比为(1.7-2)：(1.5-1.8)：(0.5-0.7)。
在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、肾上腺素和适当的溶剂组成的实施方式中，所述适当的溶剂为能够溶解n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素且不与三者发生化学反应的任何溶剂，可以是甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、二氯甲烷等等。上文在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和适当的溶剂组成的实施方式中列举的关于n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸含量的实施方式同样适用于所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、肾上腺素和适当的溶剂组成的实施方式。在一个实施方式中，所述组合物含有0.1-3ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.1-2.5ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.1-2ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.1-1.5ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.1-1ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.2-3ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.3-3ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-3ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.5-3ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.2-2.5ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.3-2ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.4-1.5ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.5-1ng/ml肾上腺素。在一个实施方式中，所述组合物含有0.5-0.7ng/ml肾上腺素。
在根据本发明的上述实施方式中，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。在一个实施方式中，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少30％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少40％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少50％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸和肾上腺素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少60％，则卵母细胞质量低。
根据本发明的另一实施方式，提供一种组合物，所述组合物包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素。根据一个实施方式，所述组合物用作卵母细胞质量评价系统中的标准品。
在根据本发明的上述实施方式中，所述组合物中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素的含量或配比与正常人类卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素的含量或配比大致相等。在一个实施方式中，所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素组成。在另一个实施方式中，所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素和适当的溶剂组成。
在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素组成的实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素的质量比为(0.5-4)：(0.2-4)：(0.2-4)：(0.1-3)：(0.1-3)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素的质量比为(0.7-3.5)：(0.5-3.5)：(0.5-3.5)：(0.3-2.5)：(0.2-2.5)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素的质量比为(0.9-3)：(0.7-3)：(0.7-3)：(0.5-2)：(0.3-2)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素的质量比为(1.1-2.5)：(0.9-2.5)：(0.9-2.5)：(0.7-1.5)：(0.4-1.5)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素的质量比为(1.3-2)：(1.1-2)：(1.1-2)：(0.7-1)：(0.5-1)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素的质量比为(1.5-2)：(1.3-2)：(1.3-2)：(0.7-0.9)：(0.5-0.7)。在一个实施方式中，n-乙酰-d-色氨酸与亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素的质量比为(1.7-2)：(1.5-1.8)：(1.5-1.9)：(0.7-0.9)：(0.5-0.7)。
在所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素和适当的溶剂组成的实施方式中，所述适当的溶剂为能够溶解n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素且不与五者发生化学反应的任何溶剂，可以是甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、二氯甲烷等等。上文在其他实施方式中列举的关于n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素含量的实施方式同样适用于所述组合物由n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素、肾上腺素和适当的溶剂组成的实施方式。
在根据本发明的上述实施方式中，通过比较卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素与所述组合物中相应组分的含量来评价卵母细胞的质量。在一个实施方式中，所述卵泡液与所述卵母细胞来自同一受试者的同一样本。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少30％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少40％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少50％，则卵母细胞质量低。在一个实施方式中，若卵泡液中n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素的含量均比所述组合物中相应组分的含量降低至少60％，则卵母细胞质量低。
根据本发明的另一实施方式，提供一种卵母细胞质量评价试剂盒。在根据本发明的上述实施方式中，所述试剂盒含有标准品组合物，所述标准品组合物包括n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素。上文在其他实施方式中列举的关于n-乙酰-d-色氨酸、亚牛磺酸、哌啶酸、尿素和肾上腺素含量、配比、应用、效果的实施方式同样适用于所述卵母细胞质量评价试剂盒中标准品组合物的实施方式。
本发明以卵泡液代谢物为基础，筛选出能够表示卵母细胞质量的标志组合物，通过比较标志组合物在受试者卵泡液与该组合物中的含量来评估卵母细胞的质量，可以此为依据为ivf-et技术挑选优质的卵母细胞，获得较高质量的胚胎进行移植，从而增加妊娠率，降低流产率，对孕育健康子代具有重大意义。相对于现有的形态学评价方法，利用本发明所述组合物及试剂盒能够实现无创、客观、便捷的卵母细胞质量评价。
上述说明示出并描述了本发明的一些实例，但如前所述，应当理解本发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本发明的精神和范围，则都应在本发明所附加权利要求的保护范围内。
以上结合优选实施方式和范例性实例对本发明进行了详细说明。不过需要声明的是，这些具体实施方式仅是对本发明的阐述性解释，并不对本发明的保护范围构成任何限制。在不超出本发明精神和保护范围的情况下，可以对本发明技术内容及其实施方式进行各种改进、等价替换或修饰，这些均落入本发明的保护范围内。本发明的保护范围以所附权利要求为准。