用于治疗肝炎的抗体构建体-药物缀合物的制作方法

交叉引用本申请要求于2017年12月15日提交的美国临时申请第62/599,636号、于2018年3月19日提交的美国临时申请第62/645,054号和于2018年9月12日提交的美国临时申请第62/730,473号的利益，所述申请中的每一个通过引用以其整体并入本文。背景全世界有数百万人受到诸如乙型肝炎(hbv)或丙型肝炎(hcv)的肝脏病毒感染的影响。这些感染可能是慢性的，导致肝硬化和严重的肝脏损害。在2015年，有130万个体死于hbv和hcv感染。尽管可以使用抗病毒药物治疗这些感染，但治疗并不总是有效的。这部分是因为诸如hbv的病毒可以达到免疫忽视或耐受，并避免通过先天免疫系统的检测。因此，需要替代策略来治疗肝脏的病毒感染。通过引用并入本说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请都以相同的程度通过引用并入本文，就如同每个单独的出版物、专利或专利申请都被明确地并单独地指出通过引用并入一样。概要在各个方面，缀合物包含：a)抗体构建体，所述抗体构建体包含i)靶抗原结合结构域，其能特异性结合肝细胞上的第一抗原，其中第一抗原是肝脏细胞抗原或来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原；和ii)fc结合结构域，其共价连接至靶抗原结合结构域；b)髓样细胞激动剂，其选自tlr7激动剂或tlr8激动剂，如选自类别a或类别b的化合物；和c)接头，其共价连接至髓样细胞激动剂和抗体构建体。在一些方面，缀合物由式(i)表示：其中：a是抗体构建体；l是接头；dx是髓样细胞激动剂；n选自1至20；并且z选自1至20。在一些方面，第一抗原是肝脏细胞抗原。在一些方面，肝脏细胞抗原在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞或其任何组合上表达。在一些方面，肝脏细胞抗原是肝细胞抗原。在一些方面，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在一些方面，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2和trf2。在一些方面，肝脏细胞抗原在感染了选自hbv和hcv的病毒的肝细胞上表达。在一些方面，第一抗原是来自选自hbv和hcv的病毒的病毒抗原。在一些方面，病毒抗原是hbv抗原。在一些方面，病毒抗原是hbsag、hbcag或hbeag。在一些方面，病毒抗原是hbsag。在一些方面，抗体构建体还包含能特异性结合肝脏细胞上的第二抗原的第二抗原结合结构域，其中第二抗原是第二肝脏细胞抗原或来自感染肝细胞的病毒的第二病毒抗原。在一些方面，第二抗原结合能特异性结合来自感染肝脏细胞的病毒的第二病毒抗原。在一些方面，第二抗原结合结构域在fc结合结构域的c-末端处共价连接至抗体构建体。在一些方面，第二抗原结合结构域共价连接至抗体构建体的轻链的c-末端。在一些方面，第二肝脏抗原在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞或其组合上表达。在一些方面，第二肝脏抗原是肝细胞抗原。在一些方面，第二肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在一些方面，第二肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2和trf2。在一些方面，第二病毒抗原来自选自hbv和hcv的病毒。在一些方面，病毒抗原是hbv抗原。在一些方面，病毒抗原是hbsag、hbcag或hbeag。在一些方面，病毒抗原是hbsag。在一些方面，第二抗原结合结构域能特异性结合第一肝脏细胞抗原或第一病毒抗原。在一些方面，第一抗原不同于第二抗原。在一些方面，髓样细胞激动剂是tlr7激动剂。在一些方面，tlr7激动剂选自：咪唑并喹啉胺、咪唑并喹啉胺、噻唑并喹啉(thiazoquinoline)、鸟苷类似物、腺苷类似物、胸苷同聚物、ssrna、cpg-a、polyg10和polyg3。在一些方面，tlr7选自类别b化合物。在一些方面，tlr7激动剂选自：嘎德莫特、咪喹莫特、雷西莫特、gs-9620和咪唑并喹啉852a。在一些情况下，免疫刺激性缀合物包含tlr7激动剂。在某些实施方案中，tlr7激动剂选自咪唑并喹啉、咪唑并喹啉胺、噻唑并喹啉、氨基喹啉、氨基喹唑啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺、嘧啶-2,4-二胺、2-氨基咪唑、1-烷基-1h-苯并咪唑-2-胺、四氢吡啶并嘧啶、heteroarothiadiazide-2,2-二氧化物、苯并萘啶、鸟苷类似物、腺苷类似物、胸苷同聚物、ssrna、cpg-a、polyg10和polyg3。在一些方面，tlr7激动剂选自咪唑并喹啉、咪唑并喹啉胺、噻唑并喹啉、氨基喹啉、氨基喹唑啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺、嘧啶-2,4-二胺、2-氨基咪唑、1-烷基-1h-苯并咪唑-2-胺、四氢吡啶并嘧啶、heteroarothiadiazide-2,2-二氧化物或苯并萘啶，但不是鸟苷类似物、腺苷类似物、胸苷同聚物、ssrna、cpg-a、polyg10和polyg3。在一些实施方案中，tlr7激动剂是非天然存在的化合物。在一些方面，通过测量tnfα或ifnα产生的pbmc测定，tlr7激动剂的ec50值为100nm或更小。在一些方面，通过测量tnfα或ifnα产生的pbmc测定，tlr7激动剂的ec50值为50nm或更小。在一些实施方案中，通过测量tnfα或ifnα产生的pbmc测定，tlr7激动剂的ec50值为10nm或更小。在一些方面，髓样细胞激动剂是tlr8激动剂。在一些方面，tlr8激动剂选自：苯并氮杂、ssrna、咪唑并喹啉、氨基喹啉和噻唑并喹诺酮。在一些方面，tlr8选自类别a化合物。在一些方面，tlr8激动剂选自：vtx-2337、vtx-294、雷西莫特和化合物1.1-1.67。在一些方面，tlr8激动剂是苯并氮杂、咪唑并喹啉、噻唑并喹啉、氨基喹啉、氨基喹唑啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺、嘧啶-2,4-二胺、2-氨基咪唑、1-烷基-1h-苯并咪唑-2-胺、四氢吡啶并嘧啶或ssrna。在一些方面，tlr8激动剂选自：苯并氮杂、咪唑并喹啉、噻唑并喹啉、氨基喹啉、氨基喹唑啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺、嘧啶-2,4-二胺、2-氨基咪唑、1-烷基-1h-苯并咪唑-2-胺、四氢吡啶并嘧啶并且是其他的ssrna。在一些方面，tlr8激动剂是非天然存在的化合物。在一些方面，通过测量tnfα产生的pbmc测定，tlr8激动剂的ec50值为500nm或更小。在一些方面，通过测量tnfα产生的pbmc测定，tlr8激动剂的ec50值为100nm或更小。在一些方面，通过测量tnfα产生的pbmc测定，tlr8激动剂的ec50值为50nm或更小。在一些方面，通过测量tnfα产生的pbmc测定，tlr8激动剂的ec50值为10nm或更小。在一些情况下，免疫刺激性缀合物包含两种不同的激动剂，即tlr7髓样细胞激动剂和tlr8髓样细胞激动剂，在本文中也被称为混合的tlr7/tlr8激动剂缀合物或双重有效负载tlr7/tlr8缀合物。tlr7和tlr8激动剂可为本文所述的激动剂中的任一种。在一些方面，fc结合结构域是igg区。在一些方面，fc结合结构域是igg1fc区。在一些方面，fc结合结构域是fc结合结构域变体，与野生型igg区的氨基酸序列相比，所述fc结合结构域变体在igg区中包含一个或多个氨基酸取代。在一些方面，与野生型igg区相比，fc结合结构域变体对一种或多种fcγ受体具有增加的亲和力。在一些方面，fc结合结构域是非抗体支架。在一些方面，靶抗原结合结构域包含免疫球蛋白重链可变区或其抗原结合片段以及免疫球蛋白轻链可变区或其抗原结合片段。在一些方面，靶抗原结合结构域包含单链可变区片段(scfv)。在一些方面，第二抗原结合结构域包含免疫球蛋白重链可变区或其抗原结合片段以及免疫球蛋白轻链可变区或其抗原结合片段。在一些方面，第二抗原结合结构域包含单链可变区片段(scfv)。在一些方面，a)fc结合结构域共价连接至靶向结构域成为fc结合结构域-靶向结合结构域融合蛋白；或b)fc结合结构域通过经由第二接头的缀合共价连接至靶向结构域。在一些方面，抗体构建体具有在髓样细胞激动剂存在下fc结合结构域与fc受体的结合的kd，并且其中在髓样细胞激动剂存在下fc结合结构域与fc受体的结合的kd不大于在髓样细胞激动剂不存在下fc结合结构域与fc受体的结合的kd的约100倍。在各个方面，药物组合物包含任何前述实施方案的缀合物和药学上可接受的载体。在各个方面，治疗具有肝脏病毒感染的对象的方法包括向对象施用有效剂量的任何前述实施方案的缀合物或任何前述实施方案的药物组合物。在一些方面，对象具有乙型肝炎感染。在一些方面，对象不患有癌症。在一些方面，全身施用所述缀合物。在一些方面，在病毒感染部位处静脉内、经皮、皮下施用或注射所述缀合物。在各个方面，试剂盒包含药学上可接受的剂量单位的药学上有效量的任何前述实施方案的缀合物或任何前述实施方案的药物组合物。附图简述在所附权利要求中具体阐述了本公开内容的新颖特征。通过参考阐述了说明性方面(在其中利用了本公开内容的原理)的以下详述和附图，可以获得对本公开内容的特征和优点的更好理解，在附图中：图1示出了在asgr1-阳性和asgr1-阴性对照细胞存在下，pbmc-肝细胞共培养测定中asgr1-tlr8激动剂缀合物的活性。图2显示了asgr1-tlr8激动剂缀合物在pbmc和表达asgr1的hepg2细胞存在下是有活性的，如通过tnfα产生所测量的。图3显示了asgr1-tlr8激动剂半胱氨酸工程化的缀合物在pbmc和表达asgr1的hepg2存在下是有活性的，如通过tnfα产生所测量的。图4显示了具有变化的接头的asgr1-tlr8激动剂缀合物在pbmc和表达asgr1的hepg2存在下是有活性的，如通过tnfα产生所测量的。图5显示了混合的tlr8-tlr7激动剂缀合物在pbmc和表达asgr1的hepg2存在下是有活性的，如通过tnfα产生所测量的。图6a-图6c显示了在pbmc和表达asgr1的hepg2存在下，tlr8和tlr7激动剂在混合的tlr8-tlr7激动剂缀合物中均是有活性的，如通过细胞因子产生所测量的。图6a显示了ifnα产生；图6b显示了il-12产生，并且图6c显示了tnfα产生。图7显示了由asgr1tlr8缀合物激动的pbmc进行的tnfα产生是fc依赖性的。图8显示了小分子tlr7和tlr8化合物诱导旱獭(marmota)tnfα表达。图9显示了asgr1-tlr8激动剂缀合物有条件地活化旱獭pbmc。定义根据以下详述，本公开内容的另外方面和优势对于本领域技术人员将变得显而易见，其中显示并描述了本公开内容的说明性方面。应当理解，本公开内容能够具有其他和不同方面，并且其若干细节能够在各个方面进行修改，而所有这些都不脱离本公开内容。因此，该描述本质上应被认为是说明性的，而不是限制性的。如本文所用，“相同的”或“同一性”是指dna、rna、核苷酸、氨基酸或蛋白质序列与另一dna、rna、核苷酸、氨基酸或蛋白质序列之间的相似性。可以用第一序列与第二序列的序列同一性百分比来表示同一性。相对于参考dna序列的序列同一性百分比(％)可以是在对齐序列之后候选序列中的与参考dna序列中的dna核苷酸相同的dna核苷酸的百分比。相对于参考氨基酸序列的序列同一性百分比(％)可以是在对齐序列并引入空位(如果有必要)以实现最大序列同一性百分比之后并且不考虑将任何保守性取代作为序列同一性的一部分，候选序列中的与参考氨基酸序列中的氨基酸残基相同的氨基酸残基的百分比。如本文所用，术语“抗体”是指能特异性结合特定抗原或对特定抗原有免疫反应性的免疫球蛋白分子。术语抗体可包括例如多克隆、单克隆、经遗传工程化的，及其抗原结合片段。抗体可为例如，鼠的、嵌合的、人源化的、异源缀合物、双特异性的、双抗体、三抗体或四抗体。抗原结合片段可包括例如fab′、f(ab′)2、fab、fv、rigg、scfv、hcab(重链抗体)、单域抗体、vhh、vnar、sdab或纳米抗体。如本文所用，“识别”是指抗原结合结构域和抗原之间的特异性缔合或特异性结合。如本文所用，“特异性结合”等是指与抗原结合结构域和不同抗原的相互作用(即，非特异性结合)相比，抗原结合结构域和抗原之间的特异性缔合或特异性结合。在一些实施方案中，识别或特异性结合抗原的抗原结合结构域的解离常数(kd)为<<100nm、<10nm、<1nm、<0.1nm、<0.01nm或<0.001nm(如10-8m或更小，如10-8m至10-13m，如10-9m至10-13m)。如本文所用，“抗原”是指可在宿主中引发免疫应答的抗原物质。抗原可以是可以被免疫细胞如t细胞或b细胞识别的蛋白质、多糖、脂质或糖脂。免疫细胞暴露于这些抗原中的一种或多种可以引发快速的细胞分裂和分化响应，从而导致暴露的t细胞和b细胞克隆形成。b细胞可以分化为浆细胞，而浆细胞继而可以产生与抗原选择性结合的抗体。如本文所用，“肝脏细胞抗原”是指在肝脏细胞上表达的抗原性物质，其能被抗体或结合结构域识别，并且与来自其他组织的细胞相比优先在非癌性肝脏细胞上表达。如本文所用，“病毒抗原”是指与病毒、病毒感染或其组合相关的抗原性物质。“来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原”是指与感染或已经感染肝脏细胞并且可在宿主中触发免疫应答的病毒相关的抗原性物质。如本文所用，“抗体构建体”是指含有抗原结合结构域和fc结合结构域的构建体。如本文所用，“抗原结合结构域”是指来自抗体或来自非抗体的能特异性结合抗原的结合结构域。当给定缀合物或抗体构建体中存在多于一个抗原结合结构域(如，第一抗原结合结构域、第二抗原结合结构域、第三抗原结合结构域等)时，可以对抗原结合结构域进行编号。相同的缀合物或构建体中的不同抗原结合结构域可靶向相同抗原(如，第一抗原结合结构域和第二抗原能特异性结合缀合物或构建体的相同肝脏细胞抗原)或不同抗原(如，第一抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原和第二抗原结合结构域能特异性结合缀合物或构建体的来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原)。如本文所用，“fc结合结构域”是指来自抗体的fc部分的结构域或来自能结合fc受体如fcγ受体或fcrn的非抗体分子的结构域。如本文所用，“靶抗原结合结构域”是指缀合物或构建体的能特异性结合抗原的抗原结合结构域。如本文所用，“髓样细胞激动剂”是指激动toll样受体7(tlr7)、toll样受体8(tlr8)或其组合的化合物。如本文所用，“缀合物”是指经由接头连接至至少一种髓样细胞激动剂的抗体构建体。如本文所用，“双特异性抗体构建体”是指还由第二抗原结合结构域组成的抗体构建体。如本文所用，“双特异性抗体缀合物”是指还由第二抗原结合结构域组成且经由接头连接至至少一种髓样细胞激动剂的抗体构建体。如本文所用，“肝脏细胞”是指与正常肝脏组织相关的任何细胞类型。例如，肝脏细胞可以是小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、肝窦内皮细胞或星状细胞。如本文所用，“免疫细胞”是指t细胞、b细胞、nk细胞、nkt细胞或抗原呈递细胞。在一些实施方案中，免疫细胞是t细胞、b细胞、nk细胞或nkt细胞。在一些实施方案中，免疫细胞是抗原呈递细胞。在一些实施方案中，免疫细胞不是抗原呈递细胞。如本文所用，天然l-对映体氨基酸的缩写是常规的并且可以如下：丙氨酸(a,ala)；精氨酸(r,arg)；天冬酰胺(n,asn)；天冬氨酸(d,asp)；半胱氨酸(c,cys)；谷氨酸(e,glu)；谷氨酰胺(q,gln)；甘氨酸(g,gly)；组氨酸(h,his)；异亮氨酸(i,ile)；亮氨酸(l,leu)；赖氨酸(k,lys)；甲硫氨酸(m,met)；苯丙氨酸(f,phe)；脯氨酸(p,pro)；丝氨酸(s,ser)；苏氨酸(t,thr)；色氨酸(w,trp)；酪氨酸(y,tyr)；缬氨酸(v,val)。除非另外指定，否则x可指示任何氨基酸。在一些方面，x可以是天冬酰胺(n)、谷氨酰胺(q)、组氨酸(h)、赖氨酸(k)或精氨酸(r)。术语“盐”或“药学上可接受的盐”是指来源于本领域熟知的多种有机和无机抗衡离子的盐。可以用无机酸和有机酸形成药学上可接受的酸加成盐。可以衍生出盐的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。可以衍生出盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。可以用无机碱和有机碱形成药学上可接受的碱加成盐。可以衍生出盐的无机碱包括例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝等。可以衍生出盐的有机碱包括，例如伯胺、仲胺和叔胺、取代胺(包括天然存在的取代的胺)、环胺、碱性离子交换树脂等，具体地如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺和乙醇胺。在一些实施方案中，药学上可接受的碱加成盐选自铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。术语“cx-y”当与化学部分，如烷基、烯基或炔基结合使用时，意在包括在链中含有x至y个碳的基团。例如，术语“c1-6烷基”是指含有1至6个碳原子的取代或未取代的饱和烃基团，包括直链烷基和支链烷基。术语–cx-y亚烷基-是指在亚烷基链中含有x至y个碳的取代或未取代的亚烷基链。例如，–c1-6亚烷基-可以选自亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基和亚己基，其中的任一个是任选取代的。术语“cx-y烯基”和“cx-y炔基”是指在长度和可能取代上类似于上述烷基但分别含有至少一个双键或三键的取代或未取代的不饱和脂肪族基团。术语–cx-y亚烯基-是指在亚烯基链中含有x至y个碳的取代或未取代的亚烯基链。例如，–c2-6亚烯基-可以选自亚乙烯基、亚丙烯基、亚丁烯基、亚戊烯基和亚己烯基，其中的任一个是任选取代的。亚烯基链可在亚烯基链中具有一个双键或多于一个双键。术语–cx-y亚炔基-是指在亚烯基链中具有x至y个碳的取代或未取代的亚炔基链。例如，–c2-6亚烯基-可以选自乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基和己炔基，其中的任一个是任选取代的。亚炔基链可在亚炔基链中具有一个三键或多于一个三键。“亚烷基”是指将分子的其余部分连接至自由基基团、仅由碳和氢组成、不含不饱和度并且优选具有一至十二个碳原子的二价烃链，例如，亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基等。亚烷基链通过单键连接至分子的其余部分，并通过单键连接至自由基基团。亚烷基链与分子的其余部分和与自由基基团的连接点分别通过末端碳进行。在其他实施方案中，亚烷基包含一至五个碳原子(即，c1-c5亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含一至四个碳原子(即，c1-c4亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含一至三个碳原子(即，c1-c3亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含一至两个碳原子(即，c1-c2亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含一个碳原子(即，c1亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含五至八个碳原子(即，c5-c8亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含二至五个碳原子(即，c2-c5亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含三至五个碳原子(即，c3-c5亚烷基)。除非在说明书中另外特别说明，否则亚烷基链任选地被一个或多个取代基如本文所述的那些取代基取代。“亚烯基”是指将分子的其余部分连接至自由基基团、仅由碳和氢组成、含有至少一个碳-碳二键并且优选具有二至十二个碳原子的二价烃链。亚烯基链通过单键连接至分子的其余部分，并通过单键连接至自由基基团。亚烯基链与分子的其余部分和与自由基基团的连接点分别通过末端碳进行。在其他实施方案中，亚烯基包含二至五个碳原子(即，c2-c5亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含二至四个碳原子(即，c2-c4亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含二至三个碳原子(即，c2-c3亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含两个原子(即，c2亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含五至八个碳原子(即，c5-c8亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含三至五个碳原子(即，c3-c5亚烯基)。除非在说明书中另外特别说明，否则亚烯基链任选地被一个或多个取代基如本文所述的那些取代基取代。“亚炔基”是指将分子的其余部分连接至自由基基团、仅由碳和氢组成、含有至少一个碳-碳三键并且优选具有二至十二个碳原子的二价烃链。亚炔基链通过单键连接至分子的其余部分，并通过单键连接至自由基基团。亚炔基链与分子的其余部分和与自由基基团的连接点分别通过末端碳进行。在其他实施方案中，亚炔基包含二至五个碳原子(即，c2-c5亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含二至四个碳原子(即，c2-c4亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含二至三个碳原子(即，c2-c3亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含两个碳原子(即，c2亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含五至八个碳原子(即，c5-c8亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含三至八个碳原子(即，c3-c5亚炔基)。除非在说明书中另外特别说明，否则亚炔基链任选地被一个或多个取代基如本文所述的那些取代基取代。“亚杂烷基”是指在链中包含至少一个杂原子、不含不饱和度并且优选具有一至十二个碳原子和1至6个杂原子(如，-o-、-nh-、-s-)的二价烃链。亚杂烷基链通过单键连接至分子的其余部分，并通过单键连接至自由基基团。亚杂烷基链与分子的其余部分和与自由基基团的连接点通过链的末端原子进行。在其他实施方案中，亚杂烷基包含一至五个碳原子和一至三个杂原子。在其他实施方案中，亚杂烷基包含一至四个碳原子和一至三个杂原子。在其他实施方案中，亚杂烷基包含和一至三个碳原子和一至二个杂原子。在其他实施方案中，亚杂烷基包含一至二个碳原子和一至二个杂原子。在其他实施方案中，亚杂烷基包含一个碳原子和一至二个杂原子。在其他实施方案中，亚杂烷基包含五至八个碳原子和一至四个杂原子。在其他实施方案中，亚杂烷基包含两至五个碳原子和一至三个杂原子。在其他实施方案中，亚杂烷基包含三至五个碳原子和一至三个杂原子。除非在说明书中另外特别说明，否则亚杂烷基链任选地被一个或多个取代基如本文所述的那些取代基取代。如本文所用，术语“碳环”是指其中环中的每个原子是碳的饱和环、不饱和环或芳族环。碳环包括3至10元单环、6至12元双环和6至12元桥接环。双环碳环的每个环可以选自饱和环、不饱和环和芳族环。在示例性实施方案中，芳族环，如，苯基可稠合至饱和环或不饱和环，如环己烷、环戊烷或环己烯。化合价允许时，双环碳环包括饱和双环、不饱和双环和芳族双环的任何组合。双环碳环包括环大小的任何组合，如4-5稠合环系、5-5稠合环系、5-6稠合环系、6-6稠合环系、5-7稠合环系、6-7稠合环系、5-8稠合环系和6-8稠合环系。示例性碳环包括环戊基、环己基、环己烯基、金刚烷基、苯基、茚满基和萘基。术语“不饱和碳环”是指具有至少一个不饱和度并且不包括芳族碳环的碳环。不饱和碳环的实例包括环己二烯、环己烯和环戊烯。如本文所用，术语“杂环”是指包含一个或多个杂原子的饱和环、不饱和环或芳族环。示例性杂原子包括n、o、si、p、b和s原子。杂环包括3至10元单环、6至12元双环和6至12元桥接环。化合价允许时，双环杂环包括饱和双环、不饱和双环和芳族双环的任何组合。在示例性实施方案中，芳族环，如吡啶基可稠合至饱和环或不饱和环，如环己烷、环戊烷、吗啉、哌啶或环己烯。双环杂环包括环大小的任何组合，如4-5稠合环系、5-5稠合环系、5-6稠合环系、6-6稠合环系、5-7稠合环系、6-7稠合环系、5-8稠合环系和6-8稠合环系。术语“不饱和杂环”是指具有至少一个不饱和度且不包括芳族杂环的杂环。不饱和杂环的实例包括二氢吡咯、二氢呋喃、噁唑啉、吡唑啉和二氢吡啶。术语“杂芳基”包括芳族单环结构，优选5至7元环，更优选5至6元环，其环结构包括至少一个杂原子，优选一至四个杂原子，更优选一个或两个杂原子。术语“杂芳基”还包括具有两个或更多个环的多环环系，其中两个或更多个碳原子与两个相邻的环共有，其中至少一个环是杂芳族的，如，另一个环可以是芳族或非芳族碳环或杂环。杂芳基包括例如吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、吡唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶等。术语“取代的”是指具有取代基的部分，所述取代基替代结构中的一个或多个碳或者可取代的杂原子如-nh-上的氢。应当理解，“取代”或“被……取代”包括隐含的条件，即此类取代符合取代的原子和取代基的允许化合价，并且该取代产生稳定的化合物，即，不自发经历诸如通过重排、环化、消除等进行的转化的化合物。在某些实施方案中，“取代的”是指具有取代基的部分，所述取代基替代同一碳原子上的两个氢原子，如用氧代、亚氨基或硫代基团取代单个碳上的两个氢原子。如本文所用，术语“取代的”预期包括有机化合物的所有可允许的取代基。在广义上，可允许的取代基包括有机化合物的非环状和环状、支链和未分支、碳环和杂环、芳族和非芳族的取代基。对于适当的有机化合物，可允许的取代基可以是一个或多个，并且可以相同或不同。为了本公开内容的目的，诸如氮的杂原子可以具有满足杂原子化合价的本文所述的有机化合物的氢取代基和/或任何可允许的取代基。在一些实施方案中，取代基可包括本文所述的任何取代基，例如：卤素、羟基、氧代(＝o)、硫代(＝s)、氰基(-cn)、硝基(-no2)、亚氨基(＝n-h)、肟基(＝n-oh)、肼基(＝n-nh2)、-rb-ora、-rb-oc(o)-ra、-rb-oc(o)-ora、-rb-oc(o)-n(ra)2、-rb-n(ra)2、-rb-c(o)ra、-rb-c(o)ora、-rb-c(o)n(ra)2、-rb-o-rc-c(o)n(ra)2、-rb-n(ra)c(o)ora、-rb-n(ra)c(o)ra、-rb-n(ra)s(o)tra(其中t是1或2)、-rb-s(o)tra(其中t是1或2)、-rb-s(o)tora(其中t是1或2)和-rb-s(o)tn(ra)2(其中t是1或2)；以及烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基和杂芳基烷基，其中的任一个可任选地被烷基、烯基、炔基、卤素、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、氧代(＝o)、硫代(＝s)、氰基(-cn)、硝基(-no2)、亚氨基(＝n-h)、肟基(＝n-oh)、肼(＝n-nh2)、-rb-ora、-rb-oc(o)-ra、-rb-oc(o)-ora、-rb-oc(o)-n(ra)2、-rb-n(ra)2、-rb-c(o)ra、-rb-c(o)ora、-rb-c(o)n(ra)2、-rb-o-rc-c(o)n(ra)2、-rb-n(ra)c(o)ora、-rb-n(ra)c(o)ra、-rb-n(ra)s(o)tra(其中t是1或2)、-rb-s(o)tra(其中t是1或2)、-rb-s(o)tora(其中t是1或2)和-rb-s(o)tn(ra)2(其中t是1或2)取代；其中每个ra独立地选自氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基，其中每个ra在化合价允许时可任选地被烷基、烯基、炔基、卤素、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、氧代(＝o)、硫代(＝s)、氰基(-cn)、硝基(-no2)、亚氨基(＝n-h)、肟基(＝n-oh)、肼(＝n-nh2)、-rb-ora、-rb-oc(o)-ra、-rb-oc(o)-ora、-rb-oc(o)-n(ra)2、-rb-n(ra)2、-rb-c(o)ra、-rb-c(o)ora、-rb-c(o)n(ra)2、-rb-o-rc-c(o)n(ra)2、-rb-n(ra)c(o)ora、-rb-n(ra)c(o)ra、-rb-n(ra)s(o)tra(其中t是1或2)、-rb-s(o)tra(其中t是1或2)、-rb-s(o)tora(其中t是1或2)和-rb-s(o)tn(ra)2(其中t是1或2)取代；以及其中每个rb独立地选自直连键或者直链或支链亚烷基、亚烯基或亚炔基链，并且每个rc是直链或支链亚烷基、亚烯基或亚炔基链。本领域技术人员将理解，如果适当的话，取代基本身可以被取代。除非特别说明为“未取代的”，否则本文中提及的化学部分应理解为包括取代的变体。例如，提及“杂芳基”基团或部分隐含包括取代和未取代的变体两者。具有碳-碳双键或碳-氮双键的化学实体可以以z形式或e形式(或者顺式形式或反式形式)存在。此外，一些化学实体可以以各种互变异构形式存在。除非另外指定，否则本文所述的化学实体也意在包括所有z形式、e形式和互变异构形式。“互变异构体”是指这样的分子，其中质子可以从分子的一个原子转移到同一分子的另一个原子。在某些实施方案中，本文提出的化合物以互变异构体存在。在可能有互变异构的情况下，将存在互变异构体的化学平衡。互变异构体的确切比率取决于几个因素，包括物理状态、温度、溶剂和ph。互变异构平衡的一些实例包括：如本文所用，短语“肠胃外施用(parenteraladministration)”和“肠胃外施用(administeredparenterally)”意指除肠和局部施用(通常通过注射)以外的施用模式，并且包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心脏内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内和胸骨内注射和输注。短语“药学上可接受的”在本文中用于指在可靠的医学判断范围内，适用于与人和动物的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理的益处/风险比相当的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。如本文所用，短语“药学上可接受的赋形剂”或“药学上可接受的载体”意指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或封装材料。在与制剂的其它成分相容并且对患者无害的意义上，每种载体必须是“可接受的”。可以用作药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：(1)糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；(4)黄芪胶粉；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石粉；(8)赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；(9)油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二醇，如丙二醇；(11)多元醇，如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；(12)酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲液，如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏液(ringer'ssolution)；(19)乙醇；(20)磷酸盐缓冲液；以及(21)药物制剂中使用的其他无毒相容性物质。详述病毒性肝脏疾病，如乙型肝炎和丙型肝炎是由病毒(分别是乙型肝炎病毒(hbv)和丙型肝炎(hcv))引起的传染病。全世界数百万人受到这些类型的肝脏病毒感染的影响，其中可能导致肝硬化、肝损伤和肝衰竭。hbv属于肝病毒科(hepadnaviridae)病毒家族，并且是一种有包膜的双链dna病毒。hcv属于黄病毒科病毒家族，并且是一种小型的、有包膜的正义单链rna病毒。尽管抗病毒药物可用于治疗感染，但它们并不总是有效的。因此，需要替代策略来治疗hbv和hcv及其他病毒性肝脏感染。此外，免疫刺激性分子基序，如病原体相关分子模式分子(pamp)可由先天免疫系统的受体(如toll样受体(tlr)、nod样受体、c型凝集素和rig-i样受体)识别。这些受体可以是跨膜蛋白和内膜内蛋白，它们可以响应于诸如病毒的致病原而引发免疫系统的活化。像其他蛋白质家族一样，有许多不同的tlr，包括tlr7和tlr8。然而，因为pamp信号传导途径的系统活化可能具有由于细胞因子综合征诱导的或细胞因子风暴诱导的中毒性休克综合征而引起的威胁生命的结果，所以pamp或其他干预机制的治疗性使用可能会受到限制。因此，需要治疗性、临床相关的靶向递送pamp和damp激动剂作为增强针对病毒的免疫应答的有效策略。本文所述的缀合物可用于增强针对引起肝脏疾病，如乙型肝炎和丙型肝炎的病毒的肝脏局部的免疫应答。如本文所述的缀合物包含经由接头与至少一种髓样细胞激动剂连接的抗体构建体。在一些实施方案中，缀合物的抗体构建体可包含能特异性结合肝细胞抗原的靶抗原结合结构域。在其他实施方案中，缀合物的抗体构建体可包含能特异性结合来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原的靶抗原结合结构域。在另外的实施方案中，除了靶抗原结合结构域之外，缀合物的抗体构建体还包含第二抗原结合结构域。第二抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原或来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原。髓样细胞激动剂可为toll样受体7(tlr7)激动剂、toll样受体8(tlr8)激动剂或其组合。抗体构建体如本文所述的缀合物包含抗体构建体。抗体构建体包含一个或多个抗原结合结构域和fc结合结构域。在一些实施方案中，抗体构建体包含能特异性结合抗原的抗原结合结构域和fc结合结构域。抗体构建体可包含能特异性结合第一抗原的第一抗原结合结构域、能特异性结合第二抗原的第二抗原结合结构域和fc结构域。抗体构建体可包含能特异性结合第一抗原的靶抗原结合结构域和fc结构域。抗体构建体可包含能特异性结合第一抗原的靶抗原结合结构域和能特异性结合第二抗原的第二抗原结合结构域及fc结构域。抗体构建体可包含抗体，其中抗体包含能特异性结合抗原的抗原结合结构域和fc结合结构域。抗体构建体可包含双特异性抗体，其中双特异性抗体包含能特异性结合第一抗原的第一抗原结合结构域、能特异性结合第二抗原的第二抗原结合结构域和fc结构域。抗体构建体可包含双特异性抗体，其中双特异性抗体包含能特异性结合第一抗原的靶抗原结合结构域、能特异性结合第二抗原的第二抗原结合结构域和fc结构域。抗原结合结构域抗原结合结构域可为抗体或抗体片段的抗原结合部分。抗原结合结构域可为抗体的可保留特异性结合抗原的能力的一个或多个片段。抗原结合结构域可为任何抗原结合片段。抗原结合结构域通常识别单一抗原。抗体构建体通常包含例如一个或两个抗原结合结构域，尽管更多个可包含在抗体构建体中。抗体构建体可包含两个抗原结合结构域，其中每个抗原结合结构域识别相同的抗原。抗体构建体可包含两个抗原结合结构域，其中每个抗原结合结构域识别抗原上的相同表位。抗体构建体可包含两个抗原结合结构域，其中每个抗原结合结构域识别相同抗原上的不同表位。抗体构建体可包含两个抗原结合结构域，其中每个抗原结合结构域可识别不同抗原。抗体构建体可包含三个抗原结合结构域，其中每个抗原结合结构域可识别不同抗原。抗体构建体可包含三个抗原结合结构域，其中抗原结合结构域中的两个可识别相同抗原。抗原结合结构域可在支架中，其中支架是抗原结合结构域的支持框架。抗原结合结构域可在非抗体支架中。抗原结合结构域可在抗体支架或抗体样支架中。抗体构建体可包含支架中的抗原结合结构域。抗体构建体的抗原结合结构域可以选自能特异性结合抗原的任何结构域，其包括但不限于抗体或非抗体分子。在一些实施方案中，抗原结合结构域可以选自抗体的能特异性结合抗原的任何结构域，包括但不限于来自单克隆抗体、多克隆抗体、重组抗体或其功能性片段，例如重链可变结构域(vh)和轻链可变结构域(vl)、fab′、f(ab′)2、fab、fv、rigg、scfv、hcab(重链抗体)、单域抗体、vhh、vnar、sdab或纳米抗体。在一些实施方案中，抗原结合结构域可以选自非抗体分子的能特异性结合抗原的任何结构域，包括但不限于非抗体支架，如darpin、affimer、亲合体(avimer)、打结素(knottin)、单抗体(monobody)、脂钙蛋白、anticalin、‘t-体’、亲和体(affibody)、肽体(peptibody)、亲和力钳、胞外域、受体胞外域、受体、配体或centryin。抗体构建体的抗原结合结构域，例如来自单克隆抗体的抗原结合结构域，可包含轻链和重链。在一方面，单克隆抗体能特异性结合肝脏细胞表面上存在的抗原，并包含抗肝脏细胞抗原抗体的轻链和抗肝脏细胞抗原抗体的重链，其形成能特异性结合肝脏细胞抗原的抗原结合结构域。抗体构建体的抗原结合结构域可为能特异性结合第一抗原，如肝脏细胞抗原或在肝脏细胞上表达的病毒抗原的靶抗原结合结构域。在一些实施方案中，第一抗原可由肝脏细胞表达。例如，第一抗原可为肝脏细胞抗原，与来自其他正常组织的细胞相比，分子标志物优选在肝脏细胞上表达。例如，肝脏细胞抗原可在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、星状细胞或其组合上表达。肝脏细胞抗原可为肝脏细胞表面受体。肝脏细胞抗原可为肝细胞抗原。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原可包括但不限于脱唾液酸糖蛋白受体1(asgr1)、脱唾液酸糖蛋白受体2(asgr2)、转铁蛋白受体2(trf2)、udp葡萄糖醛酸转移酶1家族、多肽a1(ugt1a1)、溶质载体家族22成员7(slc22a7)、溶质载体家族13成员5(slc13a5)、溶质载体家族22成员1(slc22a1)和补体成分9(c9)。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5和slc22a1。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2和trf2。脱唾液酸糖蛋白受体1(asgr1)可具有登录np_001184145.1或np_001662.1所示的氨基酸序列。脱唾液酸糖蛋白受体2(asgr2)可具有登录np_001172.1、np_001188281.1、np_550434.1、np_550435.1或np_550436.1中所示的氨基酸序列。转铁蛋白受体2(trf2)可具有登录np_001193784.1或np_003218.1中所示的氨基酸序列。udp葡萄糖醛酸转移酶1家族、多肽a1(ugt1a1)可具有登录np_000454.1中所示的氨基酸序列。溶质载体家族22成员7(slc22a7)可具有登录np_006663.2或np_696961.2中所示的氨基酸序列。溶质载体家族13成员5(slc13a5)可具有登录np_001137310.1、np_001271438.1、np_001271439.1或np_808218.1中所示的氨基酸序列。溶质载体家族22成员1(slc22a1)可具有登录np_003048.1或np_694857.1中所示的氨基酸序列。补体成分9(c9)可具有登录np_001728.1中所示的氨基酸序列。靶抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自由以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。靶抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5和slc22a1。靶抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2和trf2。靶抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。靶抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5和slc22a1。靶抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2和trf2。脱唾液酸糖蛋白受体1(asgr1)可具有与登录np_001184145.1或np_001662.1中所示的氨基酸序列90％相同的氨基酸序列。脱唾液酸糖蛋白受体2(asgr2)可具有与登录np_001172.1、np_001188281.1、np_550434.1、np_550435.1或np_550436.1中所示的氨基酸序列90％相同的氨基酸序列。转铁蛋白受体2(trf2)可具有与登录np_001193784.1或np_003218.1中所示的氨基酸序列90％相同的氨基酸序列。udp葡萄糖醛酸转移酶1家族、多肽a1(ugt1a1)可具有与登录np_000454.1中所示的氨基酸序列90％相同的氨基酸序列。溶质载体家族22成员7(slc22a7)可具有与登录np_006663.2或np_696961.2中所示的氨基酸序列90％相同的氨基酸序列。溶质载体家族13成员5(slc13a5)可具有与登录np_001137310.1、np_001271438.1、np_001271439.1或np_808218.1中所示的氨基酸序列90％相同的氨基酸序列。溶质载体家族22成员1(slc22a1)可具有与登录np_003048.1或np_694857.1中所示的氨基酸序列90％相同的氨基酸序列。补体成分9(c9)可具有与登录np_001728.1中所示的氨基酸序列90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原可在被病毒感染的细胞上表达。病毒可为肝炎病毒，如hbv或hcv。在一些实施方案中，病毒是hbv而非hcv。在一些实施方案中，病毒是hcv。在其他实施方案中，第一抗原可为来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原。病毒抗原可为病毒的分子标志物，其在肝脏细胞被病毒感染时在肝脏细胞上表达。例如，在被病毒感染时，病毒抗原可在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、星状细胞或其组合上表达。病毒可为肝炎病毒。病毒可为hbv。病毒可为hcv。病毒抗原可在被病毒感染的非癌性肝脏细胞上表达。病毒抗原可包括但不限于hbv的组分(如hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶或hbx)和hcv的组分(如核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a或ns5b)。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag、hbcag或hbeag。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag。hbaag可具有登录q773s4_hbv中所示的氨基酸序列。hbcag可具有登录q2i360_hbv中所示的氨基酸序列。hbeag可具有登录p0c573、p0c625、q05495、p0c767、p0c6h2、p0c699、p0c6g9或p0c692中所示的氨基酸序列。靶抗原结合结构域能特异性结合来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原，其中病毒抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag、hbcag或hbeag。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag。靶抗原结合结构域能特异性结合感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原，其中病毒抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。抗体构建体可具有第二抗原结合结构域。第二抗原结合结构域能特异性结合第一抗原。第二抗原结合结构域能特异性结合第二抗原。第二抗原可由肝脏细胞表达。例如，第二抗原可为肝脏细胞抗原。肝脏细胞抗原可为分子标志物，与来自其他正常组织的细胞相比，所述标志物优先在肝脏细胞上表达。例如，肝脏细胞抗原可在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、星状细胞或其组合上表达。肝脏细胞抗原可为肝脏细胞表面受体。肝脏细胞抗原可为肝细胞抗原。肝脏细胞抗原可在非癌性肝脏细胞上表达。肝脏细胞抗原可在被病毒感染的细胞上表达。病毒可为肝脏病毒。病毒可为肝炎病毒。病毒可为hbv。病毒可为hcv。肝脏细胞抗原可包括但不限于asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5和slc22a1。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2和trf2。脱唾液酸糖蛋白受体1(asgr1)可具有登录np_001184145.1或np_001662.1中所示的氨基酸序列。脱唾液酸糖蛋白受体2(asgr2)可具有登录np_001172.1、np_001188281.1、np_550434.1、np_550435.1或np_550436.1中所示的氨基酸序列。转铁蛋白受体2(trf2)可具有登录np_001193784.1或np_003218.1中所示的氨基酸序列。udp葡萄糖醛酸转移酶1家族、多肽a1(ugt1a1)可具有登录np_000454.1中所示的氨基酸序列。溶质载体家族22成员7(slc22a7)可具有登录np_006663.2或np_696961.2中所示的氨基酸序列。溶质载体家族13成员5(slc13a5)可具有登录np_001137310.1、np_001271438.1、np_001271439.1或np_808218.1中所示的氨基酸序列。溶质载体家族22成员1(slc22a1)可具有登录np_003048.1或np_694857.1中所示的氨基酸序列。补体成分9(c9)可具有登录np_001728.1中所示的氨基酸序列。第二抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。第二抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5和slc22a1。第二抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2和trf2。第二抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。第二抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5和slc22a1。第二抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2和trf2。在其他实施方案中，第二抗原可为来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原。病毒抗原可为病毒的分子标志物，其在肝脏细胞被病毒感染时在肝脏细胞上表达。例如，在被病毒感染时，病毒抗原可在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、星状细胞或其组合上表达。病毒可为肝脏病毒。病毒可为肝炎病毒。病毒可为hbv。病毒可为hcv。病毒抗原可在被病毒感染的非癌性肝脏细胞上表达。病毒抗原可包括但不限于hbv的组分(如hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶或hbx)和hcv的组分(如核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a或ns5b)。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag、hbcag或hbeag。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag。第二抗原结合结构域能特异性结合来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原，其中病毒抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。第二抗原结合结构域能特异性结合感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原，其中病毒抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。fc结合结构域抗体构建体包含fc结合结构域。fc结合结构域是能结合一种或多种fc受体(fcr)的结构。fcr能结合抗体的fc结合结构域。fcr能结合与抗原结合的抗体的fc结合结构域。根据fcr识别的抗体类别，fcr分为类别(如，伽马(γ)、阿尔法(α)和艾普斯龙(ε))。fcαr类结合iga，并且包括几种同种型，fcαri(cd89)和fcαμr。fcγr类结合igg并包括几种同种型，fcγri(cd64)、fcγriia(cd32a)、fcγriib(cd32b)、fcγriiia(cd16a)和fcγriiib(cd16b)。fcγriiia(cd16a)可以是fcγriiia(cd16a)f158变体或v158变体。每个fcγr同种型在与igg抗体的fc结合结构域的结合亲和力上可以不同。例如，fcγri可以以比fcγrii或fcγriii更大的亲和力与igg结合。特定fcγr同种型对igg的亲和力可以部分地由igg抗体的位置ch284.4处的聚糖(如，寡糖)控制。例如，含有ch284.4聚糖的岩藻糖可以降低对fcγriiia的igg亲和力。此外，由于缺少半乳糖和末端glcnac部分，g0葡聚糖可对fcγriiia具有增加的亲和力。fc结合结构域与fcr的结合可以增强免疫应答。可由fc结合结构域结合fcr造成的fcr介导的信号传导可导致免疫细胞成熟。可由fc结合结构域结合fcr造成的fcr介导的信号传导可导致树突细胞(dc)成熟。可由fc结合结构域结合fcr造成的fcr介导的信号传导可导致抗体依赖性细胞细胞毒性。可由fc结合结构域结合fcr造成的fcr介导的信号传导可导致更有效的免疫细胞抗原摄取和加工。可由fc结合结构域结合fcr造成的fcr介导的信号传导可促进t细胞的扩增和活化。可由fc结合结构域结合fcr造成的fcr介导的信号传导可促进cd8+t细胞的扩增和活化。可由fc结合结构域结合fcr造成的fcr介导的信号传导可影响t细胞应答的免疫细胞调控。可由fc结合结构域结合fcr造成的fcr介导的信号传导可影响t细胞应答的免疫细胞调控。可由fc结合结构域结合fcr造成的fcr介导的信号传导可影响t细胞应答的树突细胞调控。可由fc结合结构域结合fcr造成的fcr介导的信号传导可影响t细胞的功能性极化(如，极化可以朝向th1细胞应答)。fcr在dc上的分布可影响刺激时dc应答的能力。例如，大多数dc可以表达cd32a和cd32b两者，其可以对igg介导的dc成熟和功能发挥相反的作用：与cd32b相比，igg与cd32a的结合可以成熟并活化dc，而cd32b在cd32b结合igg之后可以由于免疫受体酪氨酸基抑制基序(immunoreceptortyrosine-basedinhibitionmotif，itim)的磷酸化来介导抑制。因此，这两种受体的活性可以建立dc活化的阈值。此外，这些受体对igg的功能性亲合力的差异可以改变它们的功能性平衡。因此，改变fc结合结构域结合fcr也可以改变它们的功能性平衡，从而允许dc免疫应答的操纵(增强的活性或增强的抑制)。fc结合结构域的氨基酸序列中的修饰可以改变fcr对fc结合结构域的识别。然而，此类修饰仍可允许fcr介导的信号传导。修饰可以是将在fc结合结构域的残基处的氨基酸(如，野生型)取代为在此残基处的不同的氨基酸。修饰可允许fcr与fc结合结构域上的位点的结合，否则fcr可能不结合该位点。修饰可增加fcr与fc结合结构域的结合亲和力。修饰可降低fcr与fc结合结构域上的位点的结合亲和力，fcr可对该位点具有增加的结合亲和力。在fc结合结构域结合fcr之后，修饰可以增加随后的fcr介导的信号传导。fc结合结构域可为天然存在的或天然存在的fc结合结构域的变体并且与野生型fc结合结构域的序列相比，可包含至少一个氨基酸变化。fc结合结构域中的氨基酸变化可允许抗体构建体或缀合物以与野生型fc结合结构域相比更高的亲和力结合至少一种fc受体。相对于天然或原始的氨基酸序列，fc结合结构域变体可包含具有至少一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个或十个修饰的氨基酸序列，但不超过40个、35个、30个、25个、20个、15个或10个修饰的氨基酸序列。fc结合结构域变体可包含已从野生型igg1序列进行修饰以增加fc受体结合的igg1同种型的序列。修饰可以包括fc结合结构域的一个或多于一个氨基酸残基处，如在5个不同的氨基酸残基处的取代，包括l235v/f243l/r292p/y300l/p396l(igg1vlpll)。本文所述的氨基酸残基的编号根据eu索引。该修饰可以位于抗体构建体的可以包括fc结合结构域的一部分中，并且特别地可位于fc结合结构域的可以结合fc受体的一部分中。修饰可以包括在fc结合结构域的一个或多个氨基酸残基处，如在2个不同氨基酸残基处的取代，包括s239d/i332e(igg1de)。该修饰可以位于抗体序列的包含抗体的fc结合结构域的一部分中，并且特别地位于fc结合结构域的可以结合fc受体的一部分中。修饰可以包括在fc结合结构域的一个或多个氨基酸残基处，如在3个不同氨基酸残基处的取代，包括s298a/e333a/k334a(igg1aaa)。修饰可以位于抗体序列的包含抗体的fc结合结构域的一部分中，并且特别地可以位于fc结合结构域的可以结合fc受体的一部分中。fc受体与fc结合结构域的结合可受氨基酸取代影响。例如，与野生型相比，可由于l235v/f243l/r292p/y300l/p396l氨基酸修饰而增强一些fc受体与包含igg1vlpll修饰的fc结合结构域变体的结合。然而，与野生型相比，可通过l235v/f243l/r292p/y300l/p396l氨基酸修饰降低其他fc受体与包含igg1vlpll修饰的fc结合结构域变体的结合。例如，与野生型相比，可增强包含igg1vlpll修饰的fc结合结构域变体与fcγriiia和与fcγriia的结合亲和力，而与野生型相比，可降低包含igg1vlpll修饰的fc结合结构域变体与fcγriib的结合亲和力。与野生型相比，可由于s239d/i332e氨基酸修饰而增强fc受体与包含igg1de修饰的fc结合结构域变体的结合。然而，与野生型相比，可通过s239d/i332e氨基酸修饰降低一些fc受体与包含igg1de修饰的fc结合结构域变体的结合。例如，与野生型相比，可增强包含igg1de修饰的fc结合结构域变体与fcγriiia和与fcγriib的结合亲和力。与野生型相比，可由于s298a/e333a/k334a氨基酸修饰而增强fc受体与包含igg1aaa修饰的fc结合结构域变体的结合。然而，与野生型相比，可通过s298a/e333a/k334a氨基酸修饰降低一些fc受体与包含igg1aaa修饰的fc结合结构域变体的结合。与野生型相比，可增强包含igg1aaa修饰的fc结合结构域变体与fcγriiia的结合亲和力，而与野生型相比，可降低包含igg1aaa修饰的fc结合结构域变体与fcγriib的结合亲和力。在一些实施方案中，人igg2抗体的重链可在位置127、232或233处的半胱氨酸突变。在一些实施方案中，人igg2抗体的轻链可在位置214处的半胱氨酸突变。人igg2抗体的重链和轻链中的突变可从半胱氨酸残基到丝氨酸残基。尽管抗体构建体可包含含编码fc结合结构域的野生型或修饰的氨基酸序列的第一结合结构域和第二结合结构域，但来自野生型序列的fc结合结构域的修饰可能不会显著改变fc结合结构域或抗原结合结构域的结合和/或亲和力。例如，与野生型序列相比，通过fc结合结构域氨基酸序列的修饰，包含第一结合结构域和第二结合结构域(或，在一些情况下，第三结合结构域)并具有igg1vlpll、igg1de或igg1aaa的fc结合结构域修饰的抗体构建体的结合和/或亲和力可能不会显著改变。来自野生型序列的fc结合结构域的修饰可能不改变结合例如肝脏细胞抗原或来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原的第一结合结构域或靶结合结构域的结合和/或亲和力。另外，本文所述的结合结构域，例如第一结合结构域、第二结合结构域(或，在一些情况下，第三结合结构域)及选自igg1vlpll、igg1de和igg1aaa的fc结合结构域变体的结合和/或亲和力可以与野生型抗体的结合和/或亲和力相当。fc结合结构域可来自抗体。fc结合结构域可来自igg抗体。fc结合结构域可来自igg1、igg2或igg4抗体。fc结合结构域可与来自抗体的fc结合结构域是至少80％相同的。fc结合结构域可以是抗体的fc结合结构域的一部分。抗体构建体可包含抗体中的fc结合结构域。抗体构建体可包含支架中的fc结合结构域。抗体构建体可包含抗体支架中的fc结合结构域。抗体构建体可包含非抗体支架中的fc结合结构域。抗体构建体可包含共价连接至抗原结合结构域的fc结合结构域。抗体构建体可包含抗原结合结构域和fc结合结构域，其中fc结合结构域可共价连接至抗原结合结构域。抗体构建体可包含靶抗原结合结构域和fc结合结构域，其中fc结合结构域可共价连接至靶抗原结合结构域。抗体构建体可包含抗原结合结构域和fc结合结构域，其中fc结合结构域共价连接至抗原结合结构域，成为fc结合结构域-抗原结合结构域融合蛋白。抗体构建体可包含抗原结合结构域和fc结合结构域，其中fc结合结构域通过接头共价连接至抗原结合结构域。抗体构建体可包含靶抗原结合结构域和fc结合结构域，其中fc结合结构域共价连接至靶抗原结合结构域，成为fc结合结构域-靶抗原结合结构域融合蛋白。抗体构建体可包含靶抗原结合结构域和fc结合结构域，其中fc结合结构域经由接头共价连接至靶抗原结合结构域。抗体抗体构建体可包含抗体，所述抗体可包含抗原结合结构域和fc结合结构域。抗体分子可由两条相同的轻蛋白链(轻链)和两条相同的重蛋白链(重链)组成，其全部通过精确定位的二硫键共价连接在一起。轻链和重链的n末端区一起可以形成每个抗体的抗原识别位点。从结构上讲，抗体的各种功能可以限制在离散的蛋白质结构域(即，区域)。可以识别并能结合抗原的位点由三个互补决定区(cdr)组成，它们可位于两条重链和两条轻链的n-末端处的可变重链区和可变轻链区内。恒定结构域可以提供抗体的一般框架，并且可能不直接参与抗体与抗原的结合，但可以参与各种效应子功能，如抗体参与抗体依赖性细胞毒性(adcc)。天然轻链可变区和重链可变区的结构域可以具有相同的一般结构，并且每个结构域可以包含由三个高变区或cdr连接的四个框架区，其序列在某种程度上可以是保守的。四个框架区可主要采用β-折叠构象，并且cdr可形成环连接，并且在一些方面形成β-折叠结构的一部分。每条链中的cdr可以通过框架区保持紧密靠近，并且与来自另一条链的cdr一起，可以促进抗原结合位点的形成。抗体构建体的抗体可包括任何类型的抗体，其可指定至不同类别的免疫球蛋白，如iga、igd、ige、igg和igm。几种不同的类别可进一步分为同种型，如igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2。抗体还可以包含轻链和重链，通常多于一条链。对应于不同类别的免疫球蛋白的重链恒定区(fc)可以分别为α、δ、ε、γ和μ。基于恒定结构域的氨基酸序列，轻链可以是卡帕或κ和拉姆达或λ中的一种。fc区可包含fc结合结构域。fc受体可结合fc结合结构域。缀合物还可包含任何片段或其重组形式，包括但不限于scfv、fab、可变fc片段、结构域抗体及其能特异性结合抗原的任何其他片段。抗体可包含抗原结合结构域，其是指抗体的包含抗原识别部分的一部分，即抗体的足以赋予抗原识别部分识别和特异性结合靶标(如抗原，即，在表位处)的抗原决定可变区。抗体结合结构域的实例可包括但不限于fab、可变fv片段和其他片段，本领域普通技术人员已知或应知的片段或片段类型的组合。抗体的抗原结合结构域可包含一条或多条轻链(lc)cdr(lcdr)和一条或多条重链(hc)cdr(hcdr)、一条或多条lcdr或者一条或多条hcdr。例如，抗体的抗体结合结构域可包含以下中的一种或多种：轻链互补决定区1(lcdr1)、轻链互补决定区2(lcdr2)或轻链互补决定区3(lcdr3)。对于另一个实例，抗体结合结构域可包含以下中的一种或多种：重链互补决定区1(hcdr1)、重链互补决定区2(hcdr2)或重链互补决定区3(hcdr3)。在一些实施方案中，抗体结合结构域包含以下中的全部：轻链互补决定区1(lcdr1)、轻链互补决定区2(lcdr2)、轻链互补决定区3(lcdr3)、重链互补决定区1(hcdr1)、重链互补决定区2(hcdr2)和重链互补决定区3(hcdr3)。除非另有说明，否则本文描述的cdr可以根据imgt(国际immunogenetics信息系统)定义。抗原结合结构域可仅包含抗体的重链(如，不包含抗体的任何其他部分)。抗原结合结构域可仅包含抗体的重链的可变结构域。可选地，抗原结合结构域可仅包含抗体的轻链。抗原结合结构域可仅包含抗体的可变轻链。抗体构建体可包含抗体片段，如fab、fab’、f(ab')2或fv片段。本文所用的抗体可为“人源化”的。非人(如，鼠)抗体的人源化形式可以是完整的(全长)嵌合性免疫球蛋白、免疫球蛋白链或其抗原结合片段(如抗体的fv、fab、fab'、f(ab')2或其他靶结合子结构域)，其可含有来源于非人免疫球蛋白的序列。通常，人源化抗体可包含基本上所有的至少一个、通常两个可变结构域，其中所有或基本上所有的cdr区对应于非人免疫球蛋白的那些cdr区，并且所有或基本上所有的框架(fr)区是人免疫球蛋白序列的那些框架区。人源化抗体还可包含免疫球蛋白恒定区(fc)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白共有序列的至少一部分。本文所述的抗体可以是人抗体。如本文所用，“人抗体”可包括具有例如人免疫球蛋白的氨基酸序列的抗体，并且包括分离自人免疫球蛋白文库或转基因一种或多种人免疫球蛋白且通常不表达内源性免疫球蛋白的动物的抗体。可以使用不能表达功能性内源性免疫球蛋白但可以表达人免疫球蛋白基因的转基因小鼠产生人抗体。可以使用引导选择来生成识别选定表位的完全人抗体。在这种方法中，使用选定的非人单克隆抗体(如，小鼠抗体)来指导识别相同表位的完全人抗体的选择。本文所述的抗体可为双特异性抗体或双重可变结构域抗体(dvd)。双特异性和dvd抗体是单克隆的，通常是对至少两种不同抗原具有结合特异性的人或人源化抗体。本文所述的抗体可以是衍生的或以其他方式修饰的。例如，衍生的抗体可通过糖基化、乙酰化、聚乙二醇化、磷酸化、酰胺化、通过已知的保护/封闭基团进行的衍生化、蛋白水解切割等进行修饰。本文所述的抗体能特异性结合在肝脏细胞上表达的抗原。例如，抗体能特异性结合肝脏细胞抗原。肝脏细胞抗原可在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、星状细胞或其他肝脏细胞类型或其组合上表达。肝脏细胞抗原可为肝脏细胞表面受体。肝脏细胞抗原可为肝细胞抗原。肝脏细胞抗原可在非癌性肝脏细胞上表达。肝脏细胞抗原可在被病毒感染的细胞上表达。病毒可为肝炎病毒，如hbv或hcv。病毒可为hbv。病毒可为hcv。肝脏细胞抗原可包括但不限于脱唾液酸糖蛋白受体1(asgr1)、脱唾液酸糖蛋白受体2(asgr2)、转铁蛋白受体2(trf2)、udp葡萄糖醛酸转移酶1家族，多肽a1(ugt1a1)、溶质载体家族22成员7(slc22a7)、溶质载体家族13成员5(slc13a5)、溶质载体家族22成员1(slc22a1)和补体成分9(c9)。在其他实施方案中，抗体可结合来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原。当被病毒感染时，病毒抗原可在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、星状细胞或其他肝脏细胞类型或其组合上表达。病毒可为肝炎病毒，如hbv或hcv。病毒可为hbv。病毒可为hcv。病毒抗原可在被病毒感染的非癌性肝脏细胞上表达。病毒抗原可包括但不限于hbv的组分(如hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶或hbx)和hcv的组分(如核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a或ns5b)。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag、hbcag或hbeag。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag。抗体构建体可包含在至少一个氨基酸残基处发生修饰的抗体。修饰可为取代、添加、突变、缺失等。抗体修饰可为非天然氨基酸的插入。抗体构建体可包含氨基酸序列的轻链，相对于天然或原始的氨基酸序列，所述氨基酸序列具有至少一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个或十个修饰但不超过40个、35个、30个、25个、20个、15个或10个修饰的氨基酸序列。缀合物或抗体构建体可包含氨基酸序列的重链，相对于天然或原始的氨基酸序列，所述氨基酸序列具有至少一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个或十个修饰但不超过40个、35个、30个、25个、20个、15个或10个修饰的氨基酸序列。抗体构建体可包含igg1同种型的fc结构域。抗体构建体可包含igg2同种型的fc结合结构域。抗体构建体可包含igg3同种型的fc结合结构域。抗体构建体可包含igg4同种型的fc结构域。抗体构建体可具有包含来自两种或更多种同种型的恒定区的杂合同种型。本文所述的抗体可具有这样的序列，相对于相应的野生型序列，所述序列已被修饰以改变至少一种恒定区介导的生物效应子功能。例如，在一些实施方案中，相对于未修饰的抗体，抗体可经修饰以增加或减少至少一种恒定区介导的生物效应子功能，如增加与fc受体(fcr)的结合。可以例如通过在fcr相互作用所必需的特定区域处突变抗体的免疫球蛋白恒定区区段来减少或增加fcr结合。相对于未修饰的抗体，本文所述的抗体可经修饰以获取或改善至少一种恒定区介导的生物效应子功能，如以增强fcγr相互作用。例如，可以根据本文所述的方法产生具有恒定区的抗体，所述恒定区以比相应的野生型恒定区更高亲和力结合fcγriia、fcγriib和/或fcγriiia。抗体构建体可包含第一结合结构域、第二结合结构域和fc结构域，其中第一结合结构域连接至fc结构域。缀合物或抗体构建体可包含第一结合结构域、第二结合结构域和fc结构域，其中第二结合结构域连接至fc结构域。第一结合结构域可连接至fc结构域，成为融合蛋白。第二结合结构域可连接至fc结构域，成为融合蛋白。第一结合结构域可经由接头连接至fc结构域。第二结合结构域可经由接头连接至fc结构域。融合蛋白第一抗原结合结构域和第二抗原结合结构域(如果存在)可连接至fc结构域，成为融合蛋白。第一抗原结合结构域可在fc结合结构域的n-末端处连接至fc结合结构域，其中第二抗原结合结构域可在c-末端处连接至fc结合结构域。第一抗原结合结构域可在fc结合结构域的n-末端处连接至fc结合结构域，其中第二抗原结合结构域可在c-末端处经由多肽接头连接至fc结合结构域。在一些实施方案中，多肽接头范围为10至25个氨基酸，并且可例如包含序列[g4s]n，其中n＝2至5。可选地，第一抗原结合结构域可在fc结合结构域的c-末端处连接至fc结合结构域，其中第二抗原结合结构域可在n-末端处连接至fc结合结构域。第二抗原结合结构域和fc结合结构域可包含抗体并且第一结合结构域可包含单链可变片段(scfv)。单链可变片段可包含抗体的重链可变结构域和轻链可变结构域。融合蛋白的第一抗原结合结构域可在第一抗原结合结构域的单链可变片段的重链可变结构域处连接至第二抗原结合结构域(hl方向)。可选地，融合蛋白的第一抗原结合结构域可在第一结合结构域的单链可变片段的轻链可变结构域处连接至第二抗原结合结构域(lh方向)。在任一方向上，第一抗原结合结构域和第二抗原结合结构域可经由多肽接头连接。在一些实施方案中，多肽接头可在15至25个氨基酸长度变化，并可例如包含序列[g4s]n，其中n＝3至5。可选地，第一抗原结合结构域和fc结合结构域可包含抗体并且第二抗原结合结构域可包含单链可变片段(scfv)。融合蛋白的第二抗原结合结构域可在第一抗原结合结构域的单链可变片段的重链可变结构域处连接至第一抗原结合结构域(hl方向)。可选地，融合蛋白的第二抗原结合结构域可在第一抗原结合结构域的单链可变片段的轻链可变结构域处连接至第一抗原结合结构域(lh方向)。抗体构建体可包含第一抗原结合结构域和第二抗原结合结构域，其中第二抗原结合结构域可连接至第一抗原结合结构域。抗体构建体可包含含有轻链和重链的抗体。第一抗原结合结构域可包含轻链和重链的fab片段。第二抗原结合结构域可在轻链的c-端或c-末端处连接至轻链，成为融合蛋白。第二抗原结合结构域可包含单链可变片段(scfv)。抗体构建体可包含第一抗原结合结构域、第二抗原结合结构域和fc结合结构域，其中第一抗原结合结构域和第二抗原结合结构域连接至fc结合结构域，成为融合蛋白。融合蛋白的第二抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞上的第二抗原，其中第二抗原是第二肝脏细胞抗原或来自感染肝脏细胞的病毒的第二病毒抗原。在一些实施方案中，融合蛋白的第二抗原结合结构域能特异性结合选自以下的抗原：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、scl22a7、scl12a5、slc22a1、c9。融合蛋白的第二抗原结合结构域能特异性结合选自以下的抗原：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、scl22a7、scl12a5和slc22a1。融合蛋白的第二抗原结合结构域能特异性结合选自以下的抗原：asgr1、asgr2和trf2。第二肝脏细胞抗原可为asgr1。第二肝脏细胞抗原可为asgr2。第二肝脏细胞抗原可为trf2。融合蛋白的第二抗原结合结构域能特异性结合具有包含与选自以下的抗原至少80％同一性的氨基酸序列的抗原：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、scl22a7、scl12a5、slc22a1和c9。在一些实施方案中，融合蛋白的第二抗原结合结构域能特异性结合选自以下的病毒抗原：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。在一些实施方案中，融合蛋白的第二抗原结合结构域能特异性结合hbsag、hbcag或hbeag。在一些实施方案中，融合蛋白的第二抗原结合结构域能特异性结合hbsag。融合蛋白的第一结合结构域能特异性结合第一抗原，其中第一抗原是肝脏细胞抗原或来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原。在一些实施方案中，融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合选自以下的肝脏细胞抗原：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、scl22a7、scl12a5、slc22a1和c9。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合选自以下的肝脏细胞抗原：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、scl22a7、scl12a5和slc22a1。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合选自以下的肝脏细胞抗原：asgr1、asgr2和trf2。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合asgr1。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合asgr2。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合trf2。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合具有包含与选自以下的抗原至少80％同一性的氨基酸序列的肝脏细胞抗原：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、scl22a7、scl12a5、slc22a1和c9。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合选自以下的病毒抗原：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合hbsag、hbcag或hbeag。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合hbsag。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合hbcag。融合蛋白的第一抗原结合结构域能特异性结合具有包含与选自以下的抗原至少80％同一性的氨基酸序列的病毒抗原：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。第一抗原结合结构域和第二抗原结合结构域各自能特异性结合不同抗原。第一抗原结合结构域和第二抗原结合结构域各自能特异性结合相同抗原的不同表位。抗体构建体可包含第一抗原结合结构域、第二抗原结合结构域和fc结合结构域，其中第二抗原结合结构域可连接至第一抗原结合结构域。第二抗原结合结构域可在第一抗原结合结构域的c-末端处连接，成为融合蛋白。第一抗原结合结构域可包含含有轻链的fab片段，其中第二抗原结合结构域可在轻链的c-末端处连接，成为融合蛋白。融合蛋白的第二抗原结合结构域可包含单链可变片段(scfv)。融合蛋白的第二抗原结合结构域可在第一结合结构域的单链可变片段的重链可变结构域处连接至第一抗原结合结构域(hl方向)。可选地，融合蛋白的第二抗原结合结构域可在第一结合结构域的单链可变片段的轻链可变结构域处连接至第一抗原结合结构域(lh方向)。所有包含scfv序列的融合序列都呈hl方向，除非另外指定(如，序列名称叙述“(lh)”，指示轻重方向)。抗体构建体可包含靶向肝脏细胞抗原的第一抗原结合结构域和靶向来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原的第二抗原结合结构域。可选地，抗体构建体可包含靶向来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原的第一抗原结合结构域和靶向肝脏细胞抗原的第二抗原结合结构域。第一抗原结合结构域和第二抗原结合结构域可连接至fc结合结构域。第一抗原结合结构域可在fc结合结构域的n-末端处连接至fc结合结构域，其中第二抗原结合结构域在fc结合结构域的c-末端处连接至fc结合结构域。可选地，第二抗原结合结构域可在fc结合结构域的n-末端处连接至fc结合结构域，其中第一抗原结合结构域在fc结合结构域的c-末端处连接至fc结合结构域。另外，如本文所述的抗体构建体对第一抗原结合结构域的抗原可具有小于10nm的解离常数(kd)。抗体构建体对第二抗原结合结构域的抗原可具有小于10nm的解离常数(kd)。抗体构建体对第一抗原结合结构域的抗原可具有小于1nm、小于100pm、小于10pm、小于1pm或小于0.1pm的解离常数(kd)。抗体构建体对第二抗原结合结构域的抗原可具有小于1nm、小于100pm、小于10pm、小于1pm或小于0.1pm的解离常数(kd)。本文公开的抗体构建体可以是非天然的、经设计的和/或经工程化的。本文公开的抗体构建体可以是包含抗原结合结构域的非天然的、经设计的和/或经工程化的支架。本文公开的抗体构建体可以是非天然的、经设计的和/或经工程化的抗体。抗体构建体可包括单克隆抗体。抗体构建体可包含人抗体。抗体构建体可包含人源化抗体。抗体构建体可包含单克隆人源化抗体。缀合物和抗体构建体可包含重组抗体。髓样细胞激动剂本文所述的抗体构建体连接至髓样细胞激动剂以形成缀合物。髓样细胞激动剂可以提供直接或间接作用。在某些实施方案中，髓样细胞激动剂可偶联至抗体构建体，如偶联至抗体构建体的fc结合结构域。髓样细胞激动剂可以是直接或间接刺激抗病毒响应的任何化合物。例如，髓样细胞激动剂可通过引起髓样细胞释放细胞因子来直接刺激抗病毒响应，这导致免疫细胞活化。作为另一个实例，髓样细胞激动剂可以通过抑制髓样细胞产生和分泌il-10和通过抑制调节性t细胞的活性来间接刺激免疫应答，从而导致免疫细胞的抗病毒响应增加。可以通过上调促炎性细胞因子和/或增加免疫细胞活化来测量髓样细胞激动剂对免疫应答的刺激。可以在体外通过将免疫细胞与缀合物靶向的肝脏细胞共培养并测量细胞因子释放、趋化因子释放、免疫细胞增殖、免疫细胞活化标志物的上调和/或adcc来测量这种作用。可以通过测定在施用缀合物之后与肝脏细胞、髓样细胞和其他免疫细胞的共培养物中剩余的病毒或感染细胞的百分比来测量adcc。在某些实施方案中，髓样细胞激动剂是tlr7激动剂和/或tlr8激动剂。在某些实施方案中，髓样细胞激动剂可为tlr7激动剂。在一些实施方案中，髓样激动剂选择性地激动tlr7而非tlr8。在其他实施方案中，髓样激动剂选择性地激动tlr8而非tlr7。在某些实施方案中，tlr7激动剂选自咪唑并喹啉、咪唑并喹啉胺、噻唑并喹啉、鸟苷类似物、腺苷类似物、胸苷同聚物、ssrna、cpg-a、polyg10和polyg3。在一些实施方案中，tlr7激动剂选自以下：嘎德莫特、咪喹莫特、雷西莫特、gs-9620或咪唑并喹啉852a。在某些实施方案中，tlr7激动剂选自咪唑并喹啉、咪唑并喹啉胺、噻唑并喹啉、氨基喹啉、氨基喹唑啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺、嘧啶-2,4-二胺、2-氨基咪唑、1-烷基-1h-苯并咪唑-2-胺、四氢吡啶并嘧啶、heteroarothiadiazide-2,2-二氧化物、苯并萘啶、鸟苷类似物、腺苷类似物、胸苷同聚物、ssrna、cpg-a、polyg10和polyg3。在某些实施方案中，tlr7激动剂选自咪唑并喹啉、咪唑并喹啉胺、噻唑并喹啉、氨基喹啉、氨基喹唑啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺、嘧啶-2,4-二胺、2-氨基咪唑、1-烷基-1h-苯并咪唑-2-胺、四氢吡啶并嘧啶、heteroarothiadiazide-2,2-二氧化物或苯并萘啶，但不是鸟苷类似物、腺苷类似物、胸苷同聚物、ssrna、cpg-a、polyg10和polyg3。在一些实施方案中，tlr7激动剂是非天然存在的化合物。tlr7调节剂的实例包括gs-9620、gsk-2245035、咪喹莫特、雷西莫特、dsr-6434、dsp-3025、imo-4200、mct-465、medi-9197、3m-051、sb-9922、3m-052、limtop、tmx-30x、tmx-202、rg-7863、rg-7795及us20160168164(janssen)、us20150299194(roche)、us20110098248(gileadsciences)、us20100143301(gileadsciences)和us20090047249(gileadsciences)中公开的化合物。在一些实施方案中，通过测量tnfα或ifnα产生的pbmc测定，tlr7激动剂具有500nm或更小的ec50值。在一些实施方案中，通过测量tnfα或ifnα产生的pbmc测定，tlr7激动剂具有100nm或更小的ec50值。在一些实施方案中，通过测量tnfα或ifnα产生的pbmc测定，tlr7激动剂具有50nm或更小的ec50值。在一些实施方案中，通过测量tnfα或ifnα产生的pbmc测定，tlr7激动剂具有10nm或更小的ec50值。在某些实施方案中，髓样细胞激动剂可以是tlr8激动剂。在某些实施方案中，tlr8激动剂选自苯并氮杂、ssrna、咪唑并喹啉、噻唑并喹诺酮和氨基喹啉。在某些实施方案中，tlr8激动剂选自vtx-2337、vtx-294和雷西莫特。在某些实施方案中，tlr8激动剂是苯并氮杂、咪唑并喹啉、噻唑并喹啉、氨基喹啉、氨基喹唑啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺、嘧啶-2,4-二胺、2-氨基咪唑、1-烷基-1h-苯并咪唑-2-胺、四氢吡啶并嘧啶或ssrna。在某些实施方案中，tlr8激动剂选自苯并氮杂、咪唑并喹啉、噻唑并喹啉、氨基喹啉、氨基喹唑啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺、嘧啶-2,4-二胺、2-氨基咪唑、1-烷基-1h-苯并咪唑-2-胺、四氢吡啶并嘧啶并且不是ssrna。在一些实施方案中，tlr8激动剂是非天然存在的化合物。tlr8激动剂的实例包括莫托莫德(motolimod)、雷西莫特、3m-051、3m-052、mct-465、imo-4200、vtx-763、vtx-1463。在一些实施方案中，通过测量tnfα产生的pbmc测定，tlr8激动剂具有500nm或更小的ec50值。在一些实施方案中，通过测量tnfα产生的pbmc测定，tlr8激动剂具有100nm或更小的ec50值。在一些实施方案中，通过测量tnfα产生的pbmc测定，tlr8激动剂具有50nm或更小的ec50值。在一些实施方案中，通过测量tnfα产生的pbmc测定，tlr8激动剂具有10nm或更小的ec50值。在一些实施方案中，tlr8激动剂是如实施例所示的化合物1.1-1.2、1.4-1.20、1.23-1.27、1.29-1.46、1.48和1.50-1.67的任一种。其他tlr7和tlr8激动剂公开于例如出于所有目的通过引用并入本文的wo2016142250、wo2017046112、wo2007024612、wo2011022508、wo2011022509、wo2012045090、wo2012097173、wo2012097177、wo2017079283、us20160008374、us20160194350、us20160289229、美国专利第6043238号、us20180086755(gilead)、wo2017216054(roche)、wo2017190669(shanghaidenovopharmatech)、wo2017202704(roche)、wo2017202703(roche)、wo20170071944(gilead)、us20140045849(janssen)、us20140073642(janssen)、wo2014056953(janssen)、wo2014076221(janssen)、wo2014128189(janssen)、us20140350031(janssen)、wo2014023813(janssen)、us20080234251(arraybiopharma)、us20080306050(arraybiopharma)、us20100029585(ventirxpharma)、us20110092485(ventirxpharma)、us20110118235(ventirxpharma)、us20120082658(ventirxpharma)、us20120219615(ventirxpharma)、us20140066432(ventirxpharma)、us20140088085(ventirxpharma)、us20140275167(noviratherapeutics)和us20130251673(noviratherapeutics)中。在某些方面，tlr8激动剂和tlr7激动剂分别选自类别a或类别b。类别a的化合物(tlr8激动剂)的变量和式在标题为类别a的化合物部分中进行了描述，并且类别b的化合物(tlr7激动剂)的变量和式在标题为类别b的化合物的随后部分中进行了描述。类别a的化合物与类别b的化合物的式和变量可以在命名中重叠，如，对于类别a和类别b的化合物，均为式ia；然而变量和式的描述不意在在类别之间互换。类别a的化合物，tlr8激动剂在一些方面，本公开内容提供了由式(iia)的结构表示的tlr8激动剂：或其药学上可接受的盐，其中：表示任选的双键；l10是-x10-；l2选自-x2-、-x2-c1-6亚烷基-x2-、-x2-c2-6亚烯基-x2-和-x2-c2-6亚炔基-x2-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被一个或多个r12取代；x10选自-c(o)-和-c(o)n(r10)-*，其中*表示x10结合r5的地方；x2在每次出现时独立地选自键、-o-、-s-、-n(r10)-、-c(o)-、-c(o)o-、-oc(o)-、-oc(o)o-、-c(o)n(r10)-、-c(o)n(r10)c(o)-、-c(o)n(r10)c(o)n(r10)、-n(r10)c(o)-、-n(r10)c(o)n(r10)-、-n(r10)c(o)o-、-oc(o)n(r10)-、-c(nr10)-、-n(r10)c(nr10)-、-c(nr10)n(r10)-、-n(r10)c(nr10)n(r10)-、-s(o)2-、-os(o)-、-s(o)o-、-s(o)、-os(o)2-、-s(o)2o、-n(r10)s(o)2-、-s(o)2n(r10)-、-n(r10)s(o)-、-s(o)n(r10)-、-n(r10)s(o)2n(r10)-和-n(r10)s(o)n(r10)-；r1和r2独立地选自氢；以及c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；r4选自：-or10、-n(r10)2、-c(o)n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-s(o)r10和-s(o)2r10；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中r4中的每个c3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基；r5选自不饱和c4-8碳环；双环碳环；和稠合5-5、稠合5-6和稠合6-6双环杂环，其中r5是任选取代的，并且其中取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中r5中的每个c3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基；r10在每次出现时独立地选自氢、-nh2、-c(o)och2c6h5；以及c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c(o)och2c6h5、-nhc(o)och2c6h5、c1-10烷基、-c1-10卤代烷基、-o-c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；r12在每次出现时独立地选自卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-10碳环和3至10元杂环；以及c3-10碳环和3至10元杂环，其中r12中的每个c3-10碳环和3至10元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基；和其中苯并氮杂核上的任何可取代的碳任选地被独立地选自r12的取代基取代或单个碳原子上的两个取代基结合以形成3至7元碳环。在一些实施方案中，式(iia)的化合物由式(iib)或其药学上可接受的盐表示：其中：r20、r21、r22和r23独立地选自氢、卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基；和r24和r25独立地选自氢、卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基；或r24和r25在一起形成任选取代的饱和c3-7碳环。在一些实施方案中，r20、r21、r22和r23独立地选自氢、卤素、-oh、-or10、-no2、-cn和c1-10烷基。r20、r21、r22和r23可各自为氢。在某些实施方案中，r21是卤素。在某些实施方案中，r21是氢。在某些实施方案中，r21是-or10。例如，r21可为–och3。在一些实施方案中，r24和r25独立地选自氢、卤素、-oh、-no2、-cn和c1-10烷基，或r24和r25在一起形成任选取代的饱和c3-7碳环。在某些实施方案中，r24和r25各自为氢。在其他实施方案中，r24和r25在一起形成任选取代的饱和c3-5碳环，其中取代基选自卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；以及c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个独立地任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环。在一些实施方案中，r1是氢。在一些实施方案中，r2是氢。在一些实施方案中，r2是–c(o)-。在一些实施方案中，l10选自-c(o)n(r10)-*。在某些实施方案中，-c(o)n(r10)-*中的r10选自氢和c1-6烷基。例如，l10可为-c(o)nh-*。在一些实施方案中，r5是任选取代的双环碳环。在某些实施方案中，r5是任选取代的8至12元双环碳环。r5可为被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的任选取代的8至12元双环碳环：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基。在某些实施方案中，r5是被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的任选取代的8至12元双环碳环：-or10、-n(r10)2和＝o。在一些实施方案中，r5是任选取代的茚满和任选取代的四氢萘。r5可以选自：其中的任一个是任选取代的。例如，r5选自：在一些实施方案中，r5是任选取代的不饱和c4-8碳环。在某些实施方案中，r5是任选取代的不饱和c4-6碳环。在某些实施方案中，r5是具有独立地选自任选取代的c3-12碳环和任选取代的3至12元杂环的一个或多个取代基的任选取代的不饱和c4-6碳环。r5可为具有独立地选自以下的一个或多个取代基的任选取代的不饱和c4-6碳环：任选取代的苯基、任选取代的3至12杂环、任选取代的c1-10烷基、任选取代的c2-10烯基和卤素。在一些实施方案中，r5选自任选取代的稠合5-5、稠合5-6和稠合6-6双环杂环。在某些实施方案中，r5是具有独立地选自-c(o)or10、-n(r10)2、-or10和任选取代的c1-10烷基的一个或多个取代基的任选取代的稠合5-5、稠合5-6和稠合6-6双环杂环。在某些实施方案中，r5是被-c(o)or10取代的任选取代的稠合5-5、稠合5-6和稠合6-6双环杂环。在某些实施方案中，r5是任选取代的稠合6-6双环杂环。例如，稠合6-6双环杂环可为任选取代的吡啶-哌啶。在一些实施方案中，l10结合至稠合吡啶-哌啶的吡啶的碳原子。在某些实施方案中，r5选自四氢喹啉、四氢异喹啉、四氢萘啶、环戊吡啶和二氢苯并硼唑，其中的任一个是任选取代的。r5可为任选取代的四氢萘啶。在一些实施方案中，r5选自：在一些实施方案中，当r5被取代时，r5上的取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基。在某些实施方案中，r5上的取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环。在某些实施方案中，r5上的取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o和-cn；以及任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-10烷基：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-no2、＝o和–cn。在一些实施方案中，r5未被取代。在一些实施方案中，l2选自-c(o)-和-c(o)nr10-。在一些实施方案中，l2是-c(o)-。在一些实施方案中，l2选自-c(o)nr10-。-c(o)nr10-中的r10可以选自氢和c1-6烷基。例如，l2可以是-c(o)nh-。在一些实施方案中，r4选自：-or10、-n(r10)2、-c(o)n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-s(o)r10和-s(o)2r10；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基。在一些实施方案中，r4选自：-or10和-n(r10)2；以及c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基。在某些实施方案中，r4是-n(r10)2。-n(r10)2中的r10可在每次出现时独立地选自任选取代的c1-6烷基。在某些实施方案中，-n(r10)2中的r10在每次出现时独立地选自甲基、乙基、丙基和丙基，其中的每一个是任选取代的。例如，r4可以是在某些实施方案中，-l2-r4是在一些实施方案中，r12在每次出现时独立地选自卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-10碳环和3至10元杂环；和c3-10碳环和3至10元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基。在某些实施方案中，r12在每次出现时独立地选自卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；以及c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-10碳环和3至10元杂环。在一些实施方案中，化合物选自：及其任一种的盐。在一些方面，本公开内容提供了由式(iiia)的结构表示的化合物：或其药学上可接受的盐，其中：表示任选的双键；l11是-x11-；l2选自-x2-、-x2-c1-6亚烷基-x2-、-x2-c2-6亚烯基-x2-和-x2-c2-6亚炔基-x2-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被一个或多个r12取代；x11选自-c(o)-和-c(o)n(r10)-*，其中*表示x11结合r6的地方；x2在每次出现时独立地选自键、-o-、-s-、-n(r10)-、-c(o)-、-c(o)o-、-oc(o)-、-oc(o)o-、-c(o)n(r10)-、-c(o)n(r10)c(o)-、-c(o)n(r10)c(o)n(r10)-、-n(r10)c(o)-、-n(r10)c(o)n(r10)-、-n(r10)c(o)o-、-oc(o)n(r10)-、-c(nr10)-、-n(r10)c(nr10)-、-c(nr10)n(r10)-、-n(r10)c(nr10)n(r10)-、-s(o)2-、-os(o)-、-s(o)o-、-s(o)-、-os(o)2-、-s(o)2o-、-n(r10)s(o)2-、-s(o)2n(r10)-、-n(r10)s(o)-、-s(o)n(r10)-、-n(r10)s(o)2n(r10)-和-n(r10)s(o)n(r10)-；r1和r2独立地选自氢；c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；r4选自：-or10、-n(r10)2、-c(o)n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-s(o)r10和-s(o)2r10；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中r4中的每个c3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基；r6选自苯基和5或6元杂芳基，其中的任一个被独立地选自r7的一个或多个取代基取代，并且r6还任选地被独立地选自r12的一个或多个另外的取代基取代；r7选自-c(o)nhnh2、-c(o)nh-c1-3亚烷基-nh(r10)、-c(o)ch3、-c1-3亚烷基-nhc(o)or11、-c1-3亚烷基-nhc(o)r10、-c1-3亚烷基-nhc(o)nhr10、-c1-3亚烷基-nhc(o)-c1-3亚烷基-r10和任选地被独立地选自r12的一个或多个取代基取代的3至12元杂环；r10在每次出现时独立地选自氢、-nh2、-c(o)och2c6h5；以及c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c(o)och2c6h5、-nhc(o)och2c6h5、-c1-10烷基、-c1-10卤代烷基、-o-c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环和3至12元杂环；r11选自c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自r12的一个或多个取代基取代；r12在每次出现时独立地选自卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-10碳环和3至10元杂环；以及c3-10碳环和3至10元杂环，其中r12中的每个c3-10碳环和3至10元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基；和其中苯并氮杂核上的任何可取代的碳任选地被独立地选自r12的取代基取代，或单个碳原子上的两个取代基结合以形成3至7元碳环。在一些实施方案中，式(iiia)的化合物由式(iiib)或其药学上可接受的盐表示：其中：r20、r21、r22和r23独立地选自氢、卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基；和r24和r25独立地选自氢、卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基；或r24和r25在一起形成任选取代的饱和c3-7碳环。在一些实施方案中，r20、r21、r22和r23独立地选自氢、卤素、-oh、-no2、-cn和c1-10烷基。在某些实施方案中，r20、r21、r22和r23各自是氢。在一些实施方案中，r24和r25独立地选自氢、卤素、-oh、-no2、-cn和c1-10烷基，或r24和r25在一起形成任选取代的饱和c3-7碳环。在某些实施方案中，r24和r25各自是氢。在某些实施方案中，r24和r25在一起形成任选取代的饱和c3-5碳环。在一些实施方案中，r1是氢。在一些实施方案中，r2是氢。在一些实施方案中，l11选自–c(o)n(r10)-*。在一些实施方案中，-c(o)n(r10)-*中的r10选自氢和c1-6烷基。例如，l11可为–c(o)nh-*。在一些实施方案中，r6是被r7取代的苯基并且r6还任选地被独立地选自r12的一个或多个另外的取代基取代。在一些实施方案中，r6选自被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的苯基：-c(o)nhnh2、-c(o)nh-c1-3亚烷基-nh(r10)、-c1-3亚烷基-nhc(o)r10和-c(o)ch3；和3至12元杂环，其任选地被选自以下的一个或多个取代基取代：–oh、-n(r10)2、–nhc(o)(r10)、–nhc(o)o(r10)、–nhc(o)n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-c(o)2r10和-c1-3亚烷基-(r10)，并且r6还任选地被独立地选自r12的一个或多个另外的取代基取代。例如，r6可以选自：在一些实施方案中，r6选自被独立地选自r7的一个或多个取代基取代的5和6元杂芳基，并且r6还任选地被选自r12的一个或多个另外的取代基取代。在某些实施方案中，r6选自被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的5和6元杂芳基：-c(o)ch3、-c1-3亚烷基-nhc(o)or10、-c1-3亚烷基-nhc(o)r10、-c1-3亚烷基-nhc(o)nhr10和-c1-3亚烷基-nhc(o)-c1-3亚烷基-(r10)；以及3至12元杂环，其任选地被选自以下的一个或多个取代基取代：–oh、-n(r10)2、–nhc(o)(r10)、–nhc(o)o(r10)、–nhc(o)n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-c(o)2r10和-c1-3亚烷基-(r10)，并且r6还任选地被独立地选自r12的一个或多个另外的取代基取代。r6可以选自取代的吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、呋喃、吡喃、噁唑、噻唑、咪唑、吡唑、噁二唑、噁噻唑和三唑，并且r6还任选地被独立地选自r12的一个或多个另外的取代基取代。在一些实施方案中，r6是取代的吡啶，并且r6还任选地被独立地选自r12的一个或多个另外的取代基取代。r6可如下表示：在一些实施方案中，r6是取代的吡啶，并且其中r7是-c1-3亚烷基-nhc(o)-c1-3亚烷基-r10。在某些实施方案中，r7是-c1亚烷基-nhc(o)-c1亚烷基-r10。在某些实施方案中，r7是-c1亚烷基-nhc(o)-c1亚烷基-nh2。在一些实施方案中，r6选自：在某些实施方案中，r6是在一些实施方案中，l2选自-c(o)-和-c(o)nr10-。在一些实施方案中，l2选自-c(o)nr10-。-c(o)nr10-中的r10可以选自氢和c1-6烷基。例如，l2可为-c(o)nh-。在一些实施方案中，l2是-c(o)-。在一些实施方案中，r4选自：-or10、-n(r10)2、-c(o)n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-s(o)r10和-s(o)2r10；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基。在一些实施方案中，r4选自：-or10和-n(r10)2；以及c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个在每次出现时独立地任选地被选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基。在某些实施方案中，r4是-n(r10)2。-n(r10)2中的r10可以在每次出现时独立地选自任选取代的c1-6烷基。在一些实施方案中，-n(r10)2中的r10在每次出现时独立地选自甲基、乙基、丙基和丁基，其中的任一个是任选取代的。例如，r4可为在一些实施方案中，-l2-r4是在一些实施方案中，r12在每次出现时独立地选自卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个在每次出现时独立地任选地被选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-10碳环和3至10元杂环；以及c3-10碳环和3至10元杂环，其中的每一个在每次出现时独立地任选地被选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基。在某些实施方案中，r12在每次出现时独立地选自卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个在每次出现时独立地任选地被选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-10碳环和3至10元杂环。在一些实施方案中，化合物选自：及其任一种的盐。在一些方面，本公开内容提供了由式(ia)的结构表示的化合物：或其药学上可接受的盐，其中：表示任选的双键；l1选自-x1-、-x2-c1-6亚烷基-x2-c1-6亚烷基-、-x2-c2-6亚烯基-x2-和-x2-c2-6亚炔基-x2-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被一个或多个r12取代；l2选自-x2-、-x2-c1-6亚烷基-x2-、-x2-c2-6亚烯基-x2-和-x2-c2-6亚炔基-x2-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被一个或多个r12取代；x1选自-s-*、-n(r10)-*、-c(o)o-*、-oc(o)-*、-oc(o)o-*、-c(o)n(r10)c(o)-*、-c(o)n(r10)c(o)n(r10)*、-n(r10)c(o)-*、-cr102n(r10)c(o)-*、-n(r10)c(o)n(r10)-*、-n(r10)c(o)o-*、-oc(o)n(r10)-*、-c(nr10)-*、-n(r10)c(nr10)-*、-c(nr10)n(r10)-*、-n(r10)c(nr10)n(r10)-*、-s(o)2-*、-os(o)-*、-s(o)o-*、-s(o)、-os(o)2-*、-s(o)2o*、-n(r10)s(o)2-*、-s(o)2n(r10)-*、-n(r10)s(o)-*、-s(o)n(r10)-*、-n(r10)s(o)2n(r10)-*和-n(r10)s(o)n(r10)-*，其中*表示其中x1结合r3的地方；x2在每次出现时独立地选自-o-、-s-、-n(r10)-、-c(o)-、-c(o)o-、-oc(o)-、-oc(o)o-、-c(o)n(r10)-、-c(o)n(r10)c(o)-、-c(o)n(r10)c(o)n(r10)、-n(r10)c(o)-、-n(r10)c(o)n(r10)-、-n(r10)c(o)o-、-oc(o)n(r10)-、-c(nr10)-、-n(r10)c(nr10)-、-c(nr10)n(r10)-、-n(r10)c(nr10)n(r10)-、-s(o)2-、-os(o)-、-s(o)o-、-s(o)、-os(o)2-、-s(o)2o、-n(r10)s(o)2-、-s(o)2n(r10)-、-n(r10)s(o)-、-s(o)n(r10)-、-n(r10)s(o)2n(r10)-和-n(r10)s(o)n(r10)-；r1和r2独立地选自氢；c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；r3选自任选取代的c3-12碳环和任选取代的3至12元杂环，其中r3上的取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中r3中的每个c3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基；r4选自：-or10、-n(r10)2、-c(o)n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-s(o)r10和-s(o)2r10；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中r4中的每个c3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基；r10在每次出现时独立地选自：氢、-nh2、-c(o)och2c6h5；以及c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c(o)och2c6h5、-nhc(o)och2c6h5、c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；r12在每次出现时独立地选自卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-10碳环和3至10元杂环；以及c3-10碳环和3至10元杂环，其中r12中的每个c3-10碳环和3至10元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基；和其中苯并氮杂核上的任何可取代的碳任选地被独立地选自r12的取代基取代，或单个碳原子上的两个取代基结合以形成3至7元碳环。在一些实施方案中，式(ia)的化合物由式(ib)或其药学上可接受的盐表示：其中：r20、r21、r22和r23独立地选自氢、卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基；和r24和r25独立地选自氢、卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基；或r24和r25在一起形成任选取代的饱和c3-7碳环。在一些实施方案中，r20、r21、r22和r23独立地选自氢、卤素、-oh、-no2、-cn和c1-10烷基。在某些实施方案中，r20、r21、r22和r23各自为氢。在一些实施方案中，r24和r25独立地选自氢、卤素、-oh、-no2、-cn和c1-10烷基，或r24和r25在一起形成任选取代的饱和c3-7碳环。在一些实施方案中，r24和r25各自为氢。在一些实施方案中，r24和r25在一起形成任选取代的饱和c3-5碳环。在一些实施方案中，r1是氢。在一些实施方案中，r2是氢。在一些实施方案中，l1选自-n(r10)c(o)-*、-s(o)2n(r10)-*、-cr102n(r10)c(o)-*和-x2-c1-6亚烷基-x2-c1-6亚烷基-。在一些实施方案中，l1选自-n(r10)c(o)-*。在某些实施方案中，-n(r10)c(o)-*中的r10选自氢和c1-6烷基。例如，l1可为-nhc(o)-*。在一些实施方案中，l1选自-s(o)2n(r10)-*。在某些实施方案中，-s(o)2n(r10)-*中的r10选自氢和c1-6烷基。例如，l1是-s(o)2nh-*。在一些实施方案中，l1是-cr102n(r10)c(o)-*。在某些实施方案中，l1选自-ch2n(h)c(o)-*和–ch(ch3)n(h)c(o)-*。在一些实施方案中，r3选自任选取代的c3-12碳环和任选取代的3至12元杂环，其中r3上的取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基。在某些实施方案中，r3选自任选取代的c3-12碳环和任选取代的3至12元杂环，其中r3上的取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环。在一些实施方案中，r3选自任选取代的芳基和任选取代的杂芳基。在一些实施方案中，r3是任选取代的杂芳基。r3可为被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的任选取代的杂芳基：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基。在某些实施方案中，r3选自任选取代的6元杂芳基。例如，r3可为任选取代的吡啶。在一些实施方案中，r3是任选取代的芳基。在某些实施方案中，r3是被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的任选取代的芳基：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基。r3可为任选取代的苯基。在某些实施方案中，r3选自吡啶、苯基、四氢萘、四氢喹啉、四氢异喹啉、茚满、环丙基苯、环戊吡啶和二氢苯并硼唑，其中的任一个是任选取代的。r3可以选自：其中的任一个是任选取代的。例如，r3可以选自：在一些实施方案中，l2选自-c(o)-和-c(o)nr10-。在某些实施方案中，l2是-c(o)-。在某些实施方案中，l2选自-c(o)nr10-。-c(o)nr10-中的r10可以选自氢和c1-6烷基。例如，l2可为-c(o)nh-。在一些实施方案中，r4选自：-or10、-n(r10)2、-c(o)n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-s(o)r10和-s(o)2r10；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基。在一些实施方案中，r4选自：-or10、-n(r10)2、-c(o)n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-s(o)r10和-s(o)2r10；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环。在一些实施方案中，r4选自：-or10和-n(r10)2；以及c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基。在某些实施方案中，r4是-n(r10)2。-n(r10)2中的r10可在每次出现时独立地选自任选取代的c1-6烷基。在某些实施方案中，-n(r10)2中的r10在每次出现时独立地选自甲基、乙基、丙基和丁基，其中的任一个是任选取代的。例如，r4可为在某些实施方案中，l2-r4是在一些实施方案中，r12在每次出现时独立地选自卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-10碳环和3至10元杂环；以及c3-10碳环和3至10元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基。在一些实施方案中，r12在每次出现时独立地选自卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-10碳环和3至10元杂环。在一些实施方案中，化合物选自：及其任一种的盐。在一些方面，本公开内容提供了由式(iva)的结构表示的化合物：或其药学上可接受的盐，其中：表示任选的双键；l12选自-x3-、-x3-c1-6亚烷基-x3-、-x3-c2-6亚烯基-x3-和-x3-c2-6亚炔基-x3-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被独立地选自r12的一个或多个取代基取代；l22独立地选自-x4-、-x4-c1-6亚烷基-x4-、-x4-c2-6亚烯基-x4-和-x4-c2-6亚炔基-x4-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被独立地选自r10的一个或多个取代基取代；x3和x4在每次出现时独立地选自键、-o-、-s-、-n(r10)-、-c(o)-、-c(o)o-、-oc(o)-、-oc(o)o-、-c(o)n(r10)-、-c(o)n(r10)c(o)-、-c(o)n(r10)c(o)n(r10)-、-n(r10)c(o)-、-n(r10)c(o)n(r10)-、-n(r10)c(o)o-、-oc(o)n(r10)-、-c(nr10)-、-n(r10)c(nr10)-、-c(nr10)n(r10)-、-n(r10)c(nr10)n(r10)-、-s(o)2-、-os(o)-、-s(o)o-、-s(o)-、-os(o)2-、-s(o)2o-、-n(r10)s(o)2-、-s(o)2n(r10)-、-n(r10)s(o)-、-s(o)n(r10)-、-n(r10)s(o)2n(r10)-和-n(r10)s(o)n(r10)-；r1和r2独立地选自l3和氢；以及c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：l3、卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；r4和r8独立地选自：-or10、-n(r10)2、-c(o)n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-s(o)r10和-s(o)2r10；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：l3、卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中r4和r8中的每个c3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：l3、卤素、-or10、-sr10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-n(r10)c(o)n(r10)2、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基；r10在每次出现时独立地选自l3、氢、-nh2、-c(o)och2c6h5；以及c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c(o)och2c6h5、-nhc(o)och2c6h5、c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；l3是接头部分，其中r1、r2和r10中的至少一个是l3或选自r1、r2、r4、r8、x3和x4的基团上的至少一个取代基是l3；和r12在每次出现时独立地选自卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)和-cn；c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c3-10碳环和3至10元杂环；以及c3-10碳环和3至10元杂环，其中r12中的每个c3-10碳环和3至10元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-c(o)r10、-c(o)n(r10)2、-n(r10)c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-s(o)r10、-s(o)2r10、-p(o)(or10)2、-op(o)(or10)2、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基；和其中苯并氮杂核上的任何可取代的碳任选地被独立地选自r12的取代基取代，或者单个碳原子上的两个取代基结合以形成3至7元碳环。在一些实施方案中，式(iva)的化合物由式(ivb)或其药学上可接受的盐表示：其中：r20、r21、r22和r23独立地选自氢、卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基；和r24和r25独立地选自氢、卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基；或r24和r25在一起形成任选取代的饱和c3-7碳环。在一些实施方案中，r1是l3。在一些实施方案中，r2是l3。在一些实施方案中，l12是–c(o)n(r10)-。在一些实施方案中，-c(o)n(r10)-中的r10选自氢、c1-6烷基和l3。例如，l12可为–c(o)nh-。在一些实施方案中，r8是任选取代的5元或6元杂芳基。r8可为被l3取代的任选取代的5元或6元杂芳基。在一些实施方案中，r8是被l3取代的任选取代的吡啶。在一些实施方案中，l22选自-c(o)-和-c(o)nr10-。在某些实施方案中，l22是-c(o)-。在某些实施方案中，l22是-c(o)nr10-。-c(o)nr10-中的r10可以选自氢、c1-6烷基和–l3。例如，l22可为-c(o)nh-。在一些实施方案中，r4选自：-or10和-n(r10)2；以及c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基、c3-12碳环、3至12元杂环、芳基和杂芳基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：l3、卤素、-or10、-sr10、-n(r10)2、-s(o)r10、-s(o)2r10、-c(o)r10、-c(o)or10、-oc(o)r10、-no2、＝o、＝s、＝n(r10)、-cn、c1-10烷基、c2-10烯基和c2-10炔基。在一些实施方案中，r4是-n(r10)2并且-n(r10)2中的r10选自l3和氢，以及其中-n(r10)2中的至少一个r10是l3。在一些实施方案中，化合物还共价结合至接头l3。在一些实施方案中，l3是不可切割的接头。在一些实施方案中，l3是可切割的接头。l3可通过溶酶体酶切割。在一些实施方案中，化合物共价连接至抗体构建体。在一些实施方案中，化合物任选通过接头共价连接至靶向部分。在一些实施方案中，靶向部分或抗体构建体特异性结合肿瘤抗原。在一些实施方案中，抗体构建体或靶向部分还包含靶结合结构域。在一些实施方案中，l3由下式表示：其中：l4表示肽的c-末端并且l5选自键、亚烷基和亚杂烷基，其中l5任选地被独立地选自r32的一个或多个基团取代，并且rx是反应性部分；和r32在每次出现时独立地选自卤素、-oh、-cn、-o-烷基、-sh、＝o、＝s、-nh2、-no2；和c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-o-烷基、-sh、＝o、＝s、-nh2、-no2。在一些实施方案中，rx包含离去基团。在一些实施方案中，rx包含马来酰亚胺。在一些实施方案中，l3还共价结合至抗体构建体。在一些实施方案中，抗体构建体针对肿瘤抗原。在一些实施方案中，抗体构建体还包含靶结合结构域。在一些实施方案中，l3由下式表示：其中l4表示肽的c-末端并且l5选自键、亚烷基和亚杂烷基，其中l5任选地被独立地选自r32的一个或多个基团取代；rx*包含结合至抗体构建体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，其中rx*上的表示至抗体构建体的残基的连接点；和r32在每次出现时独立地选自卤素、-oh、-cn、-o-烷基、-sh、＝o、＝s、-nh2、-no2；和c1-10烷基、c2-10烯基、c2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-o-烷基、-sh、＝o、＝s、-nh2、-no2。在一些实施方案中，l3的肽包含val—cit或val—ala。在一些方面，本公开内容提供了选自以下的化合物或盐：其任一种的盐。在一些方面，本公开内容提供了选自以下的化合物或盐：及其任一种的盐，其中rx*是结合至抗体构建体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，其中rx*上的表示至抗体构建体的残基的连接点。在一些实施方案中，l3由下式表示：其中rx包含反应性部分，并且n＝0-9。在一些实施方案中，rx包含离去基团。在一些实施方案中，rx包含马来酰亚胺。在一些实施方案中，l3如下表示：其中rx*包含结合至抗体构建体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，其中rx*上的表示至抗体构建体的残基的连接点，并且n＝0-9。在一些方面，本公开内容提供了选自以下的化合物或盐：及其任一种的盐。在一些方面，本公开内容提供了选自以下的化合物或盐：及其任一种的盐，其中rx*包含结合至抗体构建体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，其中rx*上的表示至抗体构建体的残基的连接点。在一些实施方案中，rx*包含琥珀酰胺部分并且结合至抗体构建体的半胱氨酸残基。在一些实施方案中，rx*包含水解的琥珀酰胺部分并且结合至抗体构建体的半胱氨酸残基。在一些方面，本公开内容提供了由下式表示的缀合物：其中抗体是抗体构建体，d是本文公开的类别a的化合物或盐，并且l3是接头部分。在一些方面，本公开内容提供了由下式表示的缀合物:其中抗体是抗体构建体并且d-l3是本文公开的类别a的化合物或盐。在一些方面，本公开内容提供了药物组合物，其包含本文公开的缀合物和至少一种药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，缀合物的平均dar是约2至约8，或约1至约3，或约3至约5。类别b的化合物，tlr7激动剂在一些方面，本公开内容提供了由式(ia)的结构表示的化合物：或其盐，其中：r1、r2、r3、r4和r5独立地选自氢；以及c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和-cn；或r3和r11在一起形成任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的5至10元杂环：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和–cn；r6选自卤素、-or20、-n(r20)2、-c(o)n(r20)2、-c(o)r20、-c(o)or20、-s(o)r20和-s(o)2r20；以及c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和-cn；r7、r8、r9和r10在每次出现时独立地选自氢和卤素；以及c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自卤素的一个或多个取代基取代；r11和r12独立地选自氢、卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2和–cn；以及c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；或r11和r12在一起形成任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c3-6碳环：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和-cn；r13和r14在每次出现时独立地选自氢、卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2和–cn；c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基；r15在每次出现时独立地选自卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c1-6烷基、-c1-6卤代烷基、-o-c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环；r16选自氢；以及c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、c1-6烷基、-c1-6卤代烷基、-o-c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环；r20在每次出现时独立地选自氢；以及c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c(o)och2c6h5、-nhc(o)och2c6h5、c1-6烷基、-c1-6卤代烷基、-o-c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环；x1是o、s或nr16；x2是c(o)或s(o)2；n是1、2或3；x是1、2或3；w是0、1、2、3或4；和z是0、1或2。在某些实施方案中，对于式(ia)的化合物，其中x1是o。在某些实施方案中，对于式(ia)的化合物，n是2。在某些实施方案中，对于式(ia)的化合物，x是2。在某些实施方案中，对于式(ia)的化合物，z是0。在某些实施方案中，对于式(ia)的化合物，z是1。在某些实施方案中，式(ia)的化合物由式(ib)或其盐表示：其中：r7’、r7”、r8’、r8”、r9’、r9”、r10’和r10”在每次出现时独立地选自氢和卤素；以及c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自卤素的一个或多个取代基取代。在某些实施方案中，式(ia)的化合物由式(ic)或其盐表示：其中：r7’、r7”、r8’、r8”、r9’、r9”、r10’和r10”在每次出现时独立地选自氢和卤素；以及c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自卤素的一个或多个取代基取代。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r1、r2、r3、r4和r5独立地选自氢和任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和–cn。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r1和r2独立地选自氢和c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r1和r2各自为氢。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r3选自氢和任选地被一个或多个卤素取代的c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r3是氢。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r4选自氢和任选地被一个或多个卤素取代的c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r4是氢。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r5选自氢和任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和–cn。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r5是氢。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r6选自卤素、-or20和-n(r20)2；和c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和–cn；以及r20在每次出现时独立地选自氢；以及c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c(o)och2c6h5、-nhc(o)och2c6h5、c1-6烷基、-c1-6卤代烷基、-o-c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r6是任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20；和r20在每次出现时独立地选自氢；c1-6烷基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c(o)och2c6h5、-nhc(o)och2c6h5、c1-6烷基、-c1-6卤代烷基、-o-c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r6是被-or20取代的c1-6烷基，和r20选自氢和任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-oh和-nh2。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r7’、r7”、r8’、r8”、r9’、r9”、r10’和r10”在每次出现时独立地选自氢和卤素；和任选地被独立地选自卤素的一个或多个取代基取代的c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，其中r7’和r8’各自为氢。在某些实施方案中，对于式(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，其中r7”和r8”各自为c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r7”和r8”各自为甲基。在某些实施方案中，对于式(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r9’、r9”、r10’和r10”在每次出现时独立地选自氢和c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r9’、r9”、r10’和r10”各自为氢。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r11和r12独立地选自氢、卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20；和任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、c3-12碳环和3至12元杂环。在某些实施方案中，对于式(ia)或(ic)中任一种的化合物或盐，r13和r14独立地选自氢、卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20；和任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、c3-12碳环和3至12元杂环。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r3和r11在一起形成任选取代的5至6元杂环。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，r11和r12在一起形成任选取代的c3-6碳环。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，x2是c(o)。在某些实施方案中，化合物由或者其任一种的盐表示。在某些方面，本公开内容提供了式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或盐，化合物或盐还共价结合至接头l3。在某些方面，本公开内容提供了由式(iia)表示的化合物：或其盐，其中：r2和r4独立地选自氢；以及c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和-cn；r21、r23和r25独立地选自氢；c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和-cn；以及l3；或r23和r11在一起形成任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的5至10元杂环：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和–cn；以及其中r21、r23和r25中的一个是l3；r6选自卤素、-or20、-n(r20)2、-c(o)n(r20)2、-c(o)r20、-c(o)or20、-s(o)r20和-s(o)2r20；以及c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和-cn；r7、r8、r9和r10在每次出现时独立地选自氢和卤素；以及c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自卤素的一个或多个取代基取代；r11和r12独立地选自氢、卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2和–cn；以及c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；或r11和r12在一起形成任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c3-6碳环：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和-cn；r13和r14在每次出现时独立地选自氢、卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)、-cn、c3-12碳环和3至12元杂环；以及c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基；r15在每次出现时独立地选自卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)、-cn、c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c1-6烷基、-c1-6卤代烷基、-o-c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环；r16选自氢；以及c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、c1-6烷基、-c1-6卤代烷基、-o-c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环；r20在每次出现时独立地选自氢；c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c(o)och2c6h5、-nhc(o)och2c6h5、c1-6烷基、-c1-6卤代烷基、-o-c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环；l3是接头；x1是o、s或nr16；x2是c(o)或s(o)2；n是1、2或3；x是1、2或3；w是0、1、2、3或4；和z是0、1或2。在某些实施方案中，对于式(iia)的化合物或盐，x1是o。在某些实施方案中，对于式(iia)的化合物或盐，n是2。在某些实施方案中，对于式(iia)的化合物或盐，x是2。在某些实施方案中，对于式(iia)的化合物或盐，z是0。在某些实施方案中，对于式(iia)的化合物或盐，z是1。在某些实施方案中，式(iia)的化合物由(iib)或(iic)或其盐表示：其中：r7’、r7”、r8’、r8”、r9’、r9”、r10’和r10”在每次出现时独立地选自氢和卤素；以及c1-6烷基、c2-6烯基和c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自卤素的一个或多个取代基取代。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r2和r4独立地选自氢和任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和–cn。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r2和r4独立地选自氢和c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r2和r4各自为氢。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r23选自氢和任选地被一个或多个卤素取代的c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r23是氢。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r21选自氢和任选地被一个或多个卤素取代的c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r21是氢。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r21是l3。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r25选自氢和任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和–cn。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r25是氢。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r25是l3。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r6选自卤素、-or20和-n(r20)2；以及c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、-no2、＝o、＝s、＝n(r20)和–cn；和r20在每次出现时独立地选自氢；以及c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c(o)och2c6h5、-nhc(o)och2c6h5、c1-6烷基、-c1-6卤代烷基、-o-c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r6是任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-s(o)r20、-s(o)2r20、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20；和r20在每次出现时独立地选自氢、-nh2、-c(o)och2c6h5；c1-6烷基、c3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-no2、-nh2、＝o、＝s、-c(o)och2c6h5、-nhc(o)och2c6h5、c1-6烷基、-c1-6卤代烷基、-o-c1-6烷基、c2-6烯基、c2-6炔基、c3-12碳环和3至12元杂环。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r6是被-or20取代的c1-6烷基，和r20选自氢和任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-oh和-nh2。在某些实施方案中，对于式(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r7’、r7”、r8’、r8”、r9’、r9”、r10’和r10”在每次出现时独立地选自氢和卤素；以及任选地被独立地选自卤素的一个或多个取代基取代的c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r7’和r8’是氢。在某些实施方案中，对于式(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r7”和r8”是c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r7”和r8”是甲基。在某些实施方案中，对于式(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r9’、r9”、r10’和r10”在每次出现时独立地选自氢和c1-6烷基。在某些实施方案中，对于式(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r9’、r9”、r10’和r10”各自为氢。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r11和r12独立地选自氢、卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-c(o)r20、-c(o)or20和-oc(o)r20；以及任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、c3-12碳环和3至12元杂环。在某些实施方案中，对于式(iia)或(iic)中任一种的化合物或盐，r13和r14独立地选自氢、卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-c(o)r20、-c(o)or20和-oc(o)r20；以及任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的c1-6烷基：卤素、-or20、-sr20、-c(o)n(r20)2、-n(r20)2、-c(o)r20、-c(o)or20、-oc(o)r20、c3-12碳环和3至12元杂环。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r23和r11在一起形成任选取代的5至6元杂环。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，r11和r12在一起形成任选取代的c3-6碳环。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，x2是c(o)。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，l3是可切割的接头。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，l3可由溶酶体酶切割。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，l3由下式表示：其中：l4表示肽的c-末端并且l5选自键、亚烷基和亚杂烷基，其中l5任选地被独立地选自r30的一个或多个基团取代，并且rx是反应性部分；和r30在每次出现时独立地选自卤素、-oh、-cn、-o-烷基、-sh、＝o、＝s、-nh2、-no2；以及c1-c10烷基、c2-c10烯基和c2-c10炔基，其中的每一个在每次出现时独立地任选地被选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-o-烷基、-sh、＝o、＝s、-nh2和-no2。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，rx包含离去基团。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，rx是马来酰亚胺或α-卤代羰基。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，l3的肽包含val-cit或val-ala。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，l3由下式表示：其中：rx包含反应性部分；和n是0-9。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，rx包含离去基团。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，rx是马来酰亚胺或α-卤代羰基。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，l3还共价结合至抗体构建体以形成缀合物。在某些实施方案中，本公开内容提供了由下式表示的缀合物：其中：抗体是抗体构建体；n是1至20；d是式(ia)、(ib)或(ic)的类别b化合物中任一种的化合物或盐；和l3是接头部分；或d-l3是式(iia)、(iib)或(iic)的类别b化合物中任一种的化合物或盐。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)、(ic)、(iia)、(iib)和(iic)中任一种的化合物或盐的缀合物，n选自1至8。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)、(ic)、(iia)、(iib)和(iic)中任一种的化合物或盐的缀合物，n选自2至5。在某些实施方案中，对于式(ia)、(ib)、(ic)、(iia)、(iib)和(iic)中任一种的化合物或盐的缀合物，n是2。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)和(iic)中任一种的化合物或盐，-l3由下式表示：其中：l4表示肽的c-末端并且l5选自键、亚烷基和亚杂烷基，其中l5任选地被独立地选自r30的一个或多个基团取代；rx*是结合至抗体构建体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，其中rx*上的表示至抗体构建体的残基的连接点；和r30在每次出现时独立地选自卤素、-oh、-cn、-o-烷基、-sh、＝o、＝s、-nh2、-no2；以及c1-c10烷基、c2-c10烯基和c2-c10炔基，其中的每一个在每次出现时独立地任选地被选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-oh、-cn、-o-烷基、-sh、＝o、＝s、-nh2和-no2。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)或(iic)中任一种的化合物或盐，rx*是琥珀酰胺部分、水解的琥珀酰胺部分或其混合物并且结合至抗体构建体的半胱氨酸残基。在某些实施方案中，对于式(iia)、(iib)和(iic)的化合物，-l3由下式表示：其中：rx*是结合至抗体构建体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，其中rx*上的表示至抗体构建体的残基的连接点；和n是0-9。类别a和类别b缀合物在某些实施方案中，本公开内容提供了药物组合物，其包含类别a式(ia)、(ib)、(iia)、(iib)、(iiia)和(iiib)中任一种的化合物的缀合物和药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，本公开内容提供了药物组合物，其包含类别b式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物的缀合物和药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，药物组合物的平均药物抗体比(dar)选自1至8。在某些实施方案中，本公开内容提供了用于治疗hbv或hcv病毒感染的方法，其包括向有需要的对象施用有效量的类别a式(ia)、(ib)、(iia)、(iib)、(iiia)和(iiib)中任一种的化合物的缀合物或其药物组合物。在某些实施方案中，本公开内容提供了用于治疗hbv或hcv病毒感染的方法，其包括向有需要的对象施用有效量的类别b式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物的缀合物或其药物组合物。在某些实施方案中，本公开内容提供了用于在体内杀死hbv或hcv感染的肝脏细胞的方法，其包括使hbv或hcv感染的肝脏细胞与类别a式(ia)、(ib)、(iia)、(iib)、(iiia)和(iiib)中任一种的化合物的缀合物或其药物组合物接触。在某些实施方案中，本公开内容提供了用于在体内杀死hbv或hcv感染的肝脏细胞的方法，其包括使hbv或hcv感染的肝脏细胞与b式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物的缀合物或其药物组合物接触。在某些实施方案中，本公开内容提供了用于治疗的方法，其包括向对象施用类别a式(ia)、(ib)、(iia)、(iib)、(iiia)和(iiib)中任一种的化合物的缀合物或其药物组合物。在某些实施方案中，本公开内容提供了用于治疗的方法，其包括向对象施用类别b式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物的缀合物或其药物组合物。在某些实施方案中，本公开内容提供了用于治疗hbv或hcv感染的方法，其包括向有需要的对象施用类别a式(ia)、(ib)、(iia)、(iib)、(iiia)和(iiib)中任一种的化合物的缀合物或其药物组合物。在某些实施方案中，本公开内容提供了用于治疗hbv或hcv感染的方法，其包括向有需要的对象施用类别b式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物的缀合物或其药物组合物。本公开内容提供了类别a式(ia)、(ib)、(iia)、(iib)、(iiia)和(iiib)中任一种的化合物的缀合物或其药物组合物，其用于治疗病毒感染，如本文所述的hbv或hcv的方法中。本公开内容提供了类别b式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物的缀合物或其药物组合物，其用于治疗病毒感染，如本文所述的hbv或hcv的方法中。本公开内容提供了制备下式的抗体缀合物的方法，其包括使d-l3与抗体构建体接触：其中：抗体是抗体构建体；n选自1至20；l3是接头；和d选自类别a式(ia)、(ib)、(iia)、(iib)、(iiia)和(iiib)及类别b式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物或化合物的盐。本公开内容提供了制备下式的抗体缀合物的方法，其包括使l3与抗体构建体接触以形成l3-抗体并使l3-抗体与d接触以形成缀合物：其中：抗体是抗体构建体；n选自1至20；l3是接头；和d选自类别a式(ia)、(ib)、(iia)、(iib)、(iiia)和(iiib)及类别b式(ia)、(ib)或(ic)中任一种的化合物。在一些实施方案中，本文公开的化合物以不同的富集同位素形式使用，例如，以2h、3h、11c、13c和/或14c的内含物富集。在一个特定的实施方案中，化合物在至少一个位置中氘化。此类氘化形式可通过美国专利第5,846,514号和第6,334,997号中所述的程序来制备。如美国专利第5,846,514号和第6,334,997号中所述，氘化可提高代谢稳定性和或功效，从而增加药物作用的持续时间。除非另有说明，否则本文描述的结构旨在包括仅在一个或多个同位素富集的原子存在下不同的化合物。例如，具有除了用氘或氚替换氢或用富13c或14c的碳替换碳的当前结构的化合物在本公开内容的范围内。本公开内容的化合物任选地在构成此类化合物的一个或多个原子处含有非天然比例的原子同位素。例如，化合物可用诸如例如氘(2h)、氚(3h)、碘-125(125i)或碳-14(14c)的同位素标记。用2h、11c、13c、14c、15c、12n、13n、15n、16n、16o、17o、14f、15f、16f、17f、18f、33s、34s、35s、36s、35cl、37cl、79br、81br、125i进行的同位素取代全都考虑在内。本发明化合物的所有同位素变体，无论是否具有放射性，均涵盖在本发明的范围内。在某些实施方案中，本文公开的化合物使一些或所有的1h原子被2h原子替代。合成含氘化合物的方法是本领域中已知的，并且仅作为非限制性实例，包括以下合成方法。氘取代的化合物使用诸如以下中所述的各种方法合成：dean,dennisc.；editor.recentadvancesinthesynthesisandapplicationsofradiolabeledcompoundsfordrugdiscoveryanddevelopment.[in:curr.,pharm.des.,2000；6(10)]2000,110pp；georgew.；varma,rajenders.thesynthesisofradiolabeledcompoundsviaorganometallicintermediates,tetrahedron,1989,45(21),6601-21；和evans,e.anthony.synthesisofradiolabeledcompounds,j.radioanal.chem.,1981,64(1-2),9-32。氘代原材料是容易获得的，并且进行本文所述的合成方法以提供含氘化合物的合成。大量的含氘试剂和结构单元可从化学供应商如aldrichchemicalco商购获得。本发明的化合物还包括那些化合物的结晶形式和无定形形式，药学上可接受的盐以及具有相同类型活性的这些化合物的活性代谢物，包括例如化合物的多晶型物、假多晶型物(pseudopolymorphs)、溶剂化物、水合物、未溶剂化的多晶型物(包括无水物(anhydrates))、构象多晶型物和无定形形式，以及它们的混合物。本公开内容包括了本文所述化合物的盐，特别是药学上可接受的盐。具有足够酸性、足够碱性或两种官能团的本公开内容的化合物可与多种无机碱及无机酸和有机酸中任一种反应以形成盐。可选地，固有带电的化合物，如具有季氮的那些，可与适当的抗衡离子(如，卤化物，如溴化物、氯化物或氟化物)形成盐。本文所述的化合物可在一些情况下作为非对映体、对映体或其他立体异构体形式存在。本文提出的化合物包括所有非对映体形式、对映体形式和差向异构体形式以及它们的适当混合物。立体异构体的分离可通过色谱法进行或通过形成非对映体以及通过重结晶或色谱法分离进行、或其任何组合进行。(jeanjacques,andrecollet,samuelh.wilen,“enantiomers,racematesandresolutions”,johnwileyandsons,inc.,1981，对于本公开内容，将其通过引用并入本文)。还可通过立体选择性合成获得立体异构体。本文所述的方法和组合物包括使用无定形形式以及结晶形式(也被称为多晶型物)。本文所述的化合物可以呈药学上可接受的盐的形式。同样，这些具有相同活性类型的化合物的活性代谢物也包括在本公开内容的范围内。此外，本文所述的化合物可以以非溶剂化形式以及含药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等)的溶剂化形式存在。本文提出的化合物的溶剂化形式也被认为是本文公开的。在某些实施方案中，本文所述的化合物或化合物的盐可为连接至抗体构建体以形成缀合物的前药。术语“前药”旨在涵盖在生理条件下转化为活性化合物(如tlr8或tlr7激动剂)的化合物。用于制备前药的一种方法是包括一个或多个选择的部分，所述部分在生理条件下被水解或以其他方式切割以显示所需的分子。在其他实施方案中，前药通过宿主动物如宿主动物体内特定靶细胞的酶促活性转化。本文所述的化合物的前药形式被包括在权利要求的范围内，其中该前药在体内被代谢以产生本文所述的化合物。在一些情况下，一些本文所述的化合物可为另一种衍生物或活性化合物的前药。在某些实施方案中，化合物如tlr8激动剂或tlr7激动剂被修饰为具有掩蔽基团的前药，使得tlr8激动剂或tlr7激动剂具有有限的活性或无活性直至其到达去除掩蔽基团以显示活性化合物的环境。例如，tlr8激动剂或tlr7激动剂在参与结合tlr8受体的活性位点的胺处被共价修饰，使得化合物不能以其修饰(前药)形式结合受体的活性位点。在此类实例中，掩蔽基团可以在如靶细胞相邻的胞内或胞外的递送位点特异性的生理条件下，如在酶促或酸性条件下被去除。由于溶酶体蛋白酶如组织蛋白酶和纤溶酶的作用，可以从本文所述的化合物或盐的胺中去除掩蔽基团。这些蛋白酶可以在某些肿瘤组织中以升高的水平存在。可以通过溶酶体酶去除掩蔽基团。溶酶体酶可以是例如组织蛋白酶b、组织蛋白酶s、β-葡糖醛酸酶或β-半乳糖苷酶。在某些实施方案中，胺掩蔽基团抑制化合物的胺基团与tlr8受体的残基的结合。胺掩蔽基团可以在生理条件下在细胞内去除，但仍与细胞外的胺共价结合。可用于抑制或减弱化合物的胺基团与tlr8受体的残基的结合的掩蔽基团包括，例如，肽和氨基甲酸酯(盐)。可用于合成本文所述化合物的合成化学转化和方法是本领域已知的，并且包括例如以下中所述的那些：r.larock,comprehensiveorganictransformations(1989)；t.w.greene和p.g.m.wuts,protectivegroupsinorganicsynthesis,第2版(1991)；l.fieser和m.fieser,fieserandfieser'sreagentsfororganicsynthesis(1994)；和l.paquette,编辑,encyclopediaofreagentsfororganicsynthesis(1995)。接头缀合物包含将抗体构建体连接至至少一种髓样激动剂的接头。接头可以是例如可切割或不可切割的接头。本文所述的缀合物的接头和方法可以不影响缀合物的活性部分(如，抗原结合结构域和fc结合结构域)与靶标或fc受体的结合。缀合物可包含多个接头。这些接头可以是相同接头或不同接头。如本领域技术人员将理解的，接头通过在一个位置处形成与髓样细胞激动剂的共价键并在另一个位置处形成与缀合物的抗体构建体的共价键来将髓样细胞激动剂连接至缀合物的抗体构建体。共价键可通过接头上的官能团与髓样细胞激动剂和抗体构建体上的官能团之间的反应形成。如本文所用，表述“接头”可包括(i)未缀合形式的接头，其可包含能够将接头与髓样细胞激动剂共价连接的官能团和能够将接头与抗体构建体共价连接的官能团；(ii)部分缀合形式的接头，其可包含能够将接头与缀合物的抗体构建体共价连接的官能团，并可共价连接至髓样细胞激动剂，或反之亦然；和(iii)完全缀合形式的接头，其可共价连接至髓样细胞激动剂和抗体构建体两者。在一些特定的实施方案中，本文所述的缀合物，接头上的官能团和在接头和缀合物的抗体构建体之间形成的共价键可以分别具体地表示为rx和lk。一个实施方案涉及通过使特异性结合一种或多种肝脏抗原、在肝脏细胞上表达的一种或多种病毒抗原或两者的抗体构建体与本文所述的接头在接头共价连接至抗体构建体的条件下接触形成的缀合物。一个实施方案涉及制备缀合物的方法，所述缀合物是通过使本文所述的接头在接头共价连接至抗体构建体的条件下接触而形成的。经由接头的连接可包括在缀合物的各部分之间掺入接头。接头可以是短的、柔性的、刚性的、可切割的、不可切割的、亲水的或疏水的。接头可以含有具有不同特性的区段，如柔性区段或刚性区段。接头可以对胞外环境化学稳定，例如在血流中化学稳定，或者可以包括不稳定的连键。接头可以包含被设计成在细胞内特异性地或非特异性地切割和/或消耗(immolate)或以其他方式分解的连键。可切割接头可对特定位点处的酶敏感(即，可被酶切割)。可切割接头可被诸如蛋白酶的酶切割。可切割接头可以是缬氨酸-瓜氨酸肽或缬氨酸-丙氨酸肽。含缬氨酸-瓜氨酸或缬氨酸-丙氨酸的接头可含有五氟苯基。含缬氨酸-瓜氨酸或缬氨酸-丙氨酸的接头可含有琥珀酰亚胺或马来酰亚胺基团。含缬氨酸-瓜氨酸或缬氨酸-丙氨酸的接头可含有对氨基苯甲酸(paba)基团。含缬氨酸-瓜氨酸或缬氨酸-丙氨酸的接头可含有paba基团和五氟苯基。含缬氨酸-瓜氨酸或缬氨酸-丙氨酸的接头可含有paba基团和琥珀酰亚胺基团。含缬氨酸-瓜氨酸或缬氨酸-丙氨酸的接头可含paba基团和马来酰亚胺基团。不可切割的接头可为蛋白酶不敏感的(即，不可切割的)。不可切割的接头可含有马来酰亚胺基团。不可切割的接头可含有琥珀酰亚胺基团。不可切割的接头可为马来酰亚氨基己酰基接头。马来酰亚氨基己酰基接头可包含n-马来酰亚氨基甲基环己烷-1-羧酸酯(盐)。马来酰亚氨基己酰基接头可含有琥珀酰亚胺基团。马来酰亚氨基己酰基接头可含有五氟苯基。接头可为马来酰亚氨基己酰基基团和一个或多个聚乙二醇分子的组合。接头可为马来酰亚胺-peg4接头。接头可为含有琥珀酰亚胺基团的马来酰亚氨基己酰基接头和一个或多个聚乙二醇分子的组合。接头可为含有五氟苯基的马来酰亚氨基己酰基接头和一个或多个聚乙二醇分子的组合。接头可含有连接至聚乙二醇分子的马来酰亚胺，其中聚乙二醇可允许更多的接头柔性或可用于加长接头。接头可为(马来酰亚氨基己酰基)-(缬氨酸-瓜氨酸)-(对氨基苄氧基羰基)接头。接头还可为亚烷基、亚烯基、亚炔基、聚醚、聚酯、聚酰胺、聚氨基酸、多肽、可切割肽或氨基苄基氨基甲酸酯(盐)。接头可在一端含有马来酰亚胺并在另一端含有n-羟基琥珀酰亚胺酯。接头可含有n-末端胺被乙酰化的赖氨酸和缬氨酸-瓜氨酸切割位点。接头可以是由微生物转谷氨酰胺酶产生的连接，其中可以由酶催化谷氨酰胺侧链的酰基基团与赖氨酸链的伯胺之间的键形成而在含胺部分和经工程化以含有谷氨酰胺的部分之间产生该连接。接头可含有反应性伯胺。接头可以是分选酶a接头。分选酶a接头可由将lxptg识别基序(seqidno:1)融合至n-末端ggg基序以再生天然酰胺键的分选酶a酶来产生。所产生的接头可因此将连接至lxptg识别基序(seqidno:1)的部分与连接至n-末端ggg基序的部分连接。接头可以是一个部分上的非天然氨基酸与肟键之间反应产生的连接，所述肟键是通过用另一部分上的烷氧基胺修饰酮基团而形成的。部分可以是缀合物的一部分。部分可以是抗体构建体的一部分，如抗体。部分可以是髓样细胞激动剂的一部分。部分可以是结合结构域的一部分。接头可以是未取代的，或例如被取代基取代的。取代基可包括例如，羟基基团、氨基基团、硝基基团、氰基基团、叠氮基基团、羧基基团、甲醛基团、亚胺基团、烷基基团、烯基基团、炔基基团、烷氧基基团、酰基基团、酰氧基基团、酰胺基团和酯基团。在如本文所述的缀合物中，髓样细胞激动剂通过接头的方式连接至缀合物的抗体构建体。将髓样细胞激动剂连接至缀合物的抗体构建体的接头可以是短的、长的、疏水的、亲水的、柔性的或刚性的，或者可以由区段组成，所述区段每个独立地具有一种或多种上述性质，使得接头可包括具有不同性质的区段。接头可以是多价的，使得它将多于一种的髓样细胞激动剂共价连接至抗体构建体上的单个位点，或者是单价的，使得它将单一髓样细胞激动剂共价连接至缀合物的抗体构建体上的单个位点。描述了可用于将许多髓样细胞激动剂连接至缀合物的抗体构建体的示例性多价接头。例如，接头技术具有实现具有良好的物理化学性质的高-dar缀合物的潜力。如下所示，接头技术基于经由一系列的酯键将药物分子掺入可溶解的聚缩醛主链中。该方法提供了高负荷的缀合物(dar高达20)，同时保持良好的物理化学性质。如以下的方案所示，该方法可与髓样细胞激动剂一起使用。为了利用上述方案中描绘的接头技术，可以存在脂肪醇或将脂肪醇引入至髓样细胞激动剂中。然后将醇部分缀合至丙氨酸部分，然后将其通过合成掺入接头中。缀合物的体外脂质体加工释放出母体含醇的药物。作为实例而非限制，以下描述了可包含在本文所述的缀合物中的一些可切割和不可切割的接头。可切割的接头可在体外和在体内切割。可切割的接头可以包括化学上或酶促上不稳定或可降解的连键。可切割的接头可以依靠细胞内的过程来释放髓样激动剂，如细胞质减少、暴露于溶酶体中的酸性条件或被细胞内的特定蛋白酶或其他酶切割。可切割的接头可以掺入化学上或酶促上可切割的一个或多个化学键，而接头的其余部分可以是不可切割的。接头可以含有化学上不稳定的基团，如腙和/或二硫化物基团。包含化学上不稳定基团的接头可以利用血浆和一些细胞质隔室之间的差异性质。可以促进髓样细胞激动剂释放含腙接头的胞内条件可以是内含体和溶酶体的酸性环境，而含二硫化物的接头可在可含有高硫醇浓度如谷胱甘肽的胞质溶胶中被还原。可以通过在化学不稳定的基团附近使用取代基引入空间位阻来增加含有化学不稳定基团的接头的血浆稳定性。酸不稳定基团如腙可以在血液的中性ph环境(ph7.3-7.5)内的全身循环过程中保持完整，并且一旦缀合物被内化到细胞的弱酸性胞内体(ph5.0-6.5)和溶酶体(ph4.5-5.0)隔室中，就可经历水解并可释放出髓样细胞激动剂。这种ph依赖性释放机制可能与药物的非特异性释放有关。为了增加接头的腙基团的稳定性，可以通过化学修饰(如，取代)来改变接头，从而允许调节以在溶酶体中实现更有效的释放，并使循环损失最小化。含腙的接头可以含有另外的切割位点，如另外的酸不稳定的切割位点和/或酶促不稳定的切割位点。包含示例性含腙接头的缀合物可以包括例如以下结构：其中d和ab分别表示髓样细胞激动剂和抗体构建体，并且n表示连接至抗体构建体的髓样细胞激动剂-接头的数目。在某些接头如接头(ig)中，接头可包含两个可切割基团–二硫化物和腙部分。对于此类接头，未修饰的游离髓样细胞激动剂的有效释放可需要酸性ph或二硫化物还原和酸性ph。接头如(ih)和(ii)可在单个腙切割位点的情况下有效。可以包含在接头中的其他酸不稳定基团包括含顺式乌头酰基的接头。顺式乌头酰基化学成分可使用与酰胺键并置的羧酸来加速酸性条件下的酰胺水解。可切割的接头也可以包含二硫化物基团。二硫化物可以在生理ph值下为热力学稳定的，并且可以被设计成在细胞内部被内化后释放出髓样细胞激动剂，其中与胞外环境相比，胞质溶胶可以提供显著更有还原性的环境。切断二硫键可能需要存在胞质硫醇辅因子，如(还原的)谷胱甘肽(gsh)，使得含二硫化物的接头可以在循环中相当稳定，从而在细胞溶胶中选择性地释放髓样细胞激动剂。胞内酶蛋白质二硫化物异构酶或类似的能够切割二硫键的酶，也可以促进细胞内二硫键的优先切割。与显著更低浓度的gsh或半胱氨酸(最丰富的低分子量硫醇，在循环中为约5μm)相比，gsh可以以0.5-10mm的浓度范围存在于细胞中。其中不规则血流可导致缺氧状态的肿瘤细胞可导致还原酶活性增强，并因此导致甚至更高的谷胱甘肽浓度。含二硫化物的接头的体内稳定性可以通过对接头进行化学修饰来增强，如使用与二硫键相邻的空间位阻。包含示例性含二硫化物的接头的缀合物可以包括以下结构：其中d和ab分别表示髓样细胞激动剂和抗体构建体，n表示连接至抗体构建体的髓样细胞激动剂-接头的数目，并且r在每次出现时独立地选自例如氢或烷基。增加与二硫键相邻的空间位阻可增加接头的稳定性。当一个或多个r基团选自低级烷基如甲基时，诸如(ij)和(il)的结构可以显示出增加的体内稳定性。可以使用的另一类接头是被酶特异性切割的接头。例如，接头可以被溶酶体酶切割。此类接头可以是肽基的，或者可以包括可以充当酶底物的肽区域。与化学上不稳定的接头相比，肽基接头在血浆和胞外环境中更稳定。肽键可以具有良好的血清稳定性，因为与溶酶体相比，溶酶体蛋白水解酶由于内源性抑制剂和血液的不利地高ph值而在血液中具有非常低的活性。由于溶酶体蛋白酶(如，组织蛋白酶和/或纤溶酶)的作用，可能会发生髓样细胞激动剂从缀合物释放。这些蛋白酶可以在某些肿瘤组织中以升高的水平存在。接头可被溶酶体酶切割。溶酶体酶可为例如组织蛋白酶b、β-葡糖醛酸酶或β-半乳糖苷酶。在接头中，可切割的肽可以选自四肽如gly-phe-leu-gly、ala-leu-ala-leu或二肽如val-cit、val-ala和phe-lys。与更长的肽相比，二肽可以具有更低的疏水性，这具体取决于肽的组成。多种基于二肽的可切割接头可用于本文所述的缀合物中。酶促可切割的接头可以包括自消耗间隔子(self-immolativespacer)，以在空间上将髓样细胞激动剂与酶促切割位点分开。髓样细胞激动剂直接连接至肽接头可导致髓样细胞激动剂的氨基酸加合物的蛋白水解释放，从而削弱其活性。自消耗间隔子的使用可以允许消除酰胺键水解时的具有完全活性的化学未修饰的髓样细胞激动剂。一个自消耗间隔子可以是双功能的对氨基苄醇基团，其可以通过氨基基团与肽连接，从而形成酰胺键，而含胺的髓样细胞激动剂可以通过氨基甲酸酯官能团与接头的苄基羟基基团连接(以得到对酰氨基苄基氨基甲酸酯，pabc)。可将所得的前髓样(pro-myeloid)细胞激动剂在蛋白酶介导的切割时被活化，从而导致1,6-消除反应，释放未修饰的髓样细胞激动剂、二氧化碳和连接基团的残留物。以下方案描绘了对酰氨基苄基氨基甲酸酯的片段化和髓样细胞激动剂的释放：其中x-d表示未修饰的髓样细胞激动剂。酶促可切割的接头可以是基于β-葡糖醛酸的接头。可以通过溶酶体酶β-葡糖醛酸酶切割β-葡糖苷酸糖苷键来实现对髓样细胞激动剂的轻松释放。该酶可以大量存在于溶酶体中，并且在某些肿瘤类型中可过表达，而细胞外的酶活性可能较低。基于β-葡糖醛酸的接头可用于避免缀合物由于β-葡糖苷酸的亲水性质经历聚集的趋势。在某些实施方案中，基于β-葡糖醛酸的接头可以将抗体构建体与疏水性髓样细胞激动剂连接。以下方案描绘了从含有基于β-葡糖醛酸的接头的缀合物(ab)的抗体构建体中释放髓样细胞激动剂(d)：已经描述了用于将药物(如瑞奥西汀(auristatins)、喜树碱和多柔比星类似物)、cbi小沟结合剂和psymberin与抗体连接的多种可切割的基于β-葡糖醛酸的接头。所有这些基于β-葡糖醛酸的接头可用于包含本文所述的髓样细胞激动剂的缀合物中。在某些实施方案中，酶促可切割的接头是基于β-半乳糖苷的接头。β-半乳糖苷大量存在于溶酶体内，而细胞外的酶活性较低。另外，含有酚基团的髓样细胞激动剂可通过酚氧共价键合至接头。一种此类接头依赖于这样的方法，其中将二氨基-乙烷“空间连接(spacelink)”与传统的基于“pabo”的自消耗基团结合使用以递送酚类。含有芳族或脂族羟基基团的髓样细胞激动剂可使用依赖于氨基甲酸亚甲酯连键的方法(如wo2015/095755中所述)通过羟基基团共价键合至接头。可切割接头可包含不可切割部分或区段，和/或可切割区段或部分可以包含在以其它方式不可切割接头中以使其可切割。仅作为实例，聚乙二醇(peg)和相关聚合物可在聚合物主链中包含可切割基团。例如，聚乙二醇或聚合物接头可以包含一个或多个可切割基团，如二硫化物、腙或二肽。可以包含在接头中的其他可降解的连键可以包括由peg羧酸或活化的peg羧酸与髓样细胞激动剂上的醇基反应形成的酯键，其中此类酯基可以在生理条件下水解，以释放髓样细胞激动剂。可水解降解的连键可包括但不限于碳酸酯(盐)连键；胺和醛的反应产生的亚胺连键；醇与磷酸基团反应形成的磷酸酯连键；作为醛和醇的反应产物的缩醛连键；作为甲酸盐(酯)和醇的反应产物的原酸酯连键；以及由亚磷酰胺基团形成的寡核苷酸连键，包括但不限于在聚合物的末端和寡核苷酸的5'羟基基团处。接头可包含酶促可切割的肽部分，例如接头包含结构式(iva)、(ivb)、(ivc)或(ivd)：或其盐，其中：肽表示可由溶酶体酶切割的肽(例示为n→c，其中肽包含氨基和羧基“末端”)；t表示包含一个或多个乙二醇单元或亚烷基链或其组合的聚合物；ra选自氢、烷基、磺酸酯(盐)和磺酸甲酯；ry是氢或c1-4烷基-(o)r-(c1-4亚烷基)s-g1或c1-4烷基-(n)-[(c1-4亚烷基)-g1]2；rz是c1-4烷基-(o)r-(c1-4亚烷基)s-g2；g1是so3h、co2h、peg4-32或糖部分；g2是so3h、co2h或peg4-32部分；r是0或1；s是0或1；p是范围为0至5的整数；q是0或1；x是0或1；y是0或1；表示接头至髓样细胞激动剂的连接点；和*表示至接头剩余部分的连接点。在某些实施方案中，肽可以选自三肽或二肽。在具体的实施方案中，二肽可以选自：val-cit；cit-val；ala-ala；ala-cit；cit-ala；asn-cit；cit-asn；cit-cit；val-glu；glu-val；ser-cit；cit-ser；lys-cit；cit-lys；asp-cit；cit-asp；ala-val；val-ala；phe-lys；lys-phe；val-lys；lys-val；ala-lys；lys-ala；phe-cit；cit-phe；leu-cit；cit-leu；ile-cit；cit-ile；phe-arg；arg-phe；cit-trp；和trp-cit，或其盐。可以包含在本文所述的缀合物中的根据结构式(iva)的接头的示例性实施方案可以包括以下所示的接头(如所示，接头包含适用于共价连接缀合物中接头的基团，并且波浪线或未连接的键表示针对髓样细胞激动剂的连接点)：可以包含在本文所述的缀合物中的根据结构式(ivb)、(ivc)或(ivd)的接头的示例性实施方案可以包括以下所示的接头(如所示，接头可包含适用于将接头共价连接至缀合物的基团，并且波浪线表示针对髓样细胞激动剂的连接点)：接头可含有酶促可切割的糖部分，例如接头包含结构式(va)、或其盐，其中：q是0或1；r是0或1；x1是ch2、o或nh；表示接头至髓样细胞激动剂的连接点；并且*表示至接头的剩余部分的连接点。可以包含在本文所述的缀合物中的根据结构式(va)的接头的示例性实施方案可以包括以下所示的接头(如所示，接头包含适用于共价连接缀合物中接头的基团，并且波浪线表示针对髓样细胞激动剂的连接点)：可以包含在本文所述的缀合物中的根据结构式(vb)的接头的示例性实施方案可以包括以下所示的接头(如所示，接头包含适用于共价连接缀合物中接头的基团，并且波浪线表示针对髓样细胞激动剂的连接点)：可以包含在本文所述的缀合物中的根据结构式(vc)的接头的示例性实施方案包括以下所示的接头(如所示，接头包含适用于共价连接缀合物中接头的基团，并且波浪线表示针对髓样细胞激动剂的连接点)：可以包含在本文所述的缀合物中的根据结构式(vd)的接头的示例性实施方案包括以下所示的接头(如所示，接头包含适用于共价连接缀合物中接头的基团，并且波浪线表示针对髓样细胞激动剂的连接点)：可以包含在本文所述的缀合物中的根据结构式(ve)的接头的示例性实施方案包括以下所示的接头(如所示，接头包含适用于共价连接缀合物中接头的基团，并且波浪线表示针对髓样细胞激动剂的连接点)：尽管可切割接头可以提供某些优点，但是包含本文所述的缀合物的接头不需要是可切割的。对于不可切割接头，髓样细胞激动剂释放可能不取决于血浆与一些细胞质隔室之间的差异性质。在经由抗原介导的胞吞作用和递送至溶酶体隔室使缀合物内化之后，可以发生髓样细胞激动剂的释放，其中缀合物可以通过胞内蛋白水解降解被降解至氨基酸水平。这个过程可以释放出活性形式的髓样细胞激动剂(衍生物)，它是由髓样细胞激动剂、接头或其一部分以及在一些情况下接头共价连接的氨基酸残基形成。与含可切割接头的缀合物相比，来自含不可切割接头的缀合物的髓样细胞激动剂衍生物可以更具亲水性和更低的膜渗透性，这可导致更少的旁观者效应(bystandereffects)和更少的非特异性毒性。与含可切割接头的缀合物相比，含不可切割接头的缀合物可以在循环中具有更佳的稳定性。不可切割接头可以是亚烷基链，或可以是聚合的，诸如例如，基于聚亚烷基二醇的聚合物、酰胺聚合物或可包括亚烷基链、聚亚烷基二醇和/或酰胺聚合物的区段。接头可含有具有1至6个乙二醇单元的聚乙二醇区段。接头可以是体内不可切割的，例如，根据以下式或其盐的接头：其中：ra选自氢、烷基、磺酸酯(盐)和磺酸甲酯；rx是包含能够将接头共价连接至缀合物的抗体构建体的官能团的部分；并且表示接头至髓样细胞激动剂的连接点。可以包含在本文所述的缀合物中的根据结构式(via)-(vid)的接头的示例性实施方案包括以下所示的接头(如所示，接头包含适用于共价连接缀合物中接头的基团，并且表示缀合物中的连接点)：用于连接缀合物中接头的连接基团在性质上可以是亲电子的，并且包括例如马来酰亚胺基团、活化的二硫化物、活性酯如nhs酯和hobt酯、卤代甲酸酯、酰基卤、烷基卤和苄基卤(如卤代乙酰胺)。还存在可以根据本公开内容使用的与“自稳定”马来酰亚胺和“桥接二硫化物”有关的新兴技术。在缀合条件下自发水解以产生具有改善的稳定性的缀合物物质的“自稳定”马来酰亚胺基团的一个实例描述在以下示意图中。因此，使马来酰亚胺连接基团与抗体构建体的巯基反应以得到中间体琥珀酰亚胺环。连接接团的水解(开环)形式在存在血浆蛋白的情况下对去缀合有抗性。已经公开了用于桥接来源于天然铰链二硫键还原的一对巯基基团的方法，并在以下示意图中对其进行了描述。该方法的优点可以是能够通过完全还原igg(产生4对巯基)，然后与4当量的烷基化剂反应来合成同源的dar4缀合物。含有“桥接的二硫化物”的缀合物还可以具有增加的稳定性。类似地，如下所述，已经开发出可以桥接一对巯基基团的马来酰亚胺衍生物。连接部分可以含有以下结构式(viia)、(viib)或(viic)：或其盐，其中：rq是h或–o-(ch2ch2o)11-ch3；x是0或1；y是0或1；g2是–ch2ch2ch2so3h或–ch2ch2o-(ch2ch2o)11-ch3；rw是–o-ch2ch2so3h或–nh(co)-ch2ch2o-(ch2ch2o)12-ch3；以及*表示至接头的剩余部分的连接点。可以包含在本文所述的缀合物中的根据结构式(viia)和(viib)的接头的示例性实施方案可包括以下所示的接头(如所示，接头可包含适用于共价连接缀合物中接头的基团，并且波浪线或未连接的键表示针对髓样细胞激动剂的连接点)：可以包含在本文所述的缀合物中的根据结构式(viic)的接头的示例性实施方案可包括以下所示的接头(如所示，接头可包含适用于共价连接缀合物中接头的基团)：髓样细胞激动剂-接头的示例性合成可以在连接至抗体构建体以形成如本文所述的缀合物之前，通过各种方法合成髓样细胞激动剂-接头化合物。例如，可以如方案b1所示合成a。方案b1：可以将已被活化用于酰胺键形成的聚乙二醇化羧酸(i)与适当取代的含胺髓样细胞激动剂反应，得到中间体酰胺。活化酯(ii)的形成可通过在偶联剂如二异丙基碳二亚胺(dic)存在下，使用诸如n-羟基琥珀酰亚胺或五氟苯酚的试剂使含中间体酰胺的羧酸反应以提供化合物(ii)来实现。作为另一个实例，可以如方案b2中所示合成髓样细胞激动剂-接头。方案b2：可以使活化的碳酸酯如(i)与适当取代的含胺的髓样细胞激动剂反应以得到氨基甲酸酯(ii)，可以使用基于r3酯基团性质的标准方法对其进行去保护。然后可以将所得的羧酸(iii)与活化剂(如n-羟基琥珀酰亚胺或或五氟苯酚)偶联，以提供化合物(iv)。作为另外的实例，可以如方案b3中所示合成髓样细胞激动剂-接头。方案b3：可以使活化的羧酸酯如(i-a)与适当取代的含胺的髓样细胞激动剂反应以得到酰胺(ii)。可选地，可以在酰胺键形成剂(如二环己基碳二亚胺(dcc)存在下，将(i-b)型羧酸与适当取代的含胺的髓样细胞激动剂偶联，以提供所需的髓样细胞激动剂-接头。作为另外的实例，可以如方案b4中所示合成髓样细胞激动剂-接头。方案b4：可以使活化的碳酸酯如(i)与适当取代的含胺的髓样细胞激动剂反应以得到氨基甲酸酯(ii)作为目标髓样细胞激动剂。作为另外的实例，可以如方案b5中所示合成髓样细胞激动剂-接头。方案b5：可以使活化的羧酸如(i-a、i-b、i-c)与适当取代的含胺的髓样细胞激动剂反应以得到酰胺(ii-a、ii-b、ii-c)作为目标髓样细胞激动剂。这些髓样细胞激动剂-接头可以通过各种方法来制备。应当理解，本领域技术人员可以通过类似方法或通过组合本领域技术人员已知的其他方法来制备这些化合物。还应理解，本领域技术人员将能够以与本文所述类似的方式通过使用适当的原材料并根据需要修改合成途径来进行制备。原材料和试剂可从商业供应商获得或根据本领域技术人员已知的来源合成或如本文所述制备。缀合物如本文所述的缀合物包含抗体构建体和与至少一种髓样细胞激动剂连接的至少一种接头。在一些方面，本公开内容提供了由式i表示的缀合物：其中：a是抗体构建体，l是接头；dx是髓样细胞激动剂；n选自1至20；和z选自1至20。在其他方面，本公开内容提供了包含至少一种髓样细胞激动剂(如，化合物或其盐)、抗体构建体和至少一种接头的缀合物，其中每种髓样细胞激动剂通过接头连接，即，共价结合至抗体构建体。接头可以选自可切割接头或不可切割接头。在一些实施方案中，接头是可切割的。在替代的实施方案中，接头是不可切割的。在本申请的前面部分中进一步描述了接头，其中的任一个可用于将抗体连接至本文所述的化合物。在缀合物中，载药量由变量z表示。变量z表示每个抗体构建体的髓样细胞激动剂-接头分子的数量，或者，当变量n等于1时，表示每个抗体构建体的髓样细胞激动剂的数量。根据上下文，z可以表示每个抗体构建体的髓样细胞激动剂(-接头)分子的平均数量，还被称为平均载药量。变量z的范围可以是1-20、1-50或1-100。在一些缀合物中，z优选为1至8。在一些优选的实施方案中，当p表示平均载药量时，z的范围为约2至约5。在一些实施方案中，z是约2、约3、约4或约5。制剂中每个抗体构建体的髓样细胞激动剂的平均数量可以通过常规手段如质谱、hic、elisa测定和hplc来表征。缀合物可包含抗体构建体、髓样细胞激动剂和接头。缀合物可包含抗体构建体、tlr7激动剂和接头。缀合物可包含抗体构建体、tlr8激动剂和接头。缀合物可包含抗体构建体、tlr7/8激动剂和接头。缀合物可包含抗体构建体、苯并氮杂tlr7和/或tlr8激动剂和接头。缀合物可包含抗体构建体、ssrnatlr7和/或tlr8激动剂和接头。缀合物可包含抗体构建体、咪唑并喹啉tlr7和/或tlr8激动剂和接头。缀合物可包含抗体构建体、噻唑并喹诺酮tlr7和/或tlr8激动剂和接头。在这些实例中的任一种，提及激动剂和接头包括多种激动剂和/或接头。在一些实施方案中，髓样激动剂是选自化合物1.1-1.2、1.4-1.20、1.23-1.27、1.29-1.46、1.48和1.50-1.67(实施例)的tlr8激动剂。在一些实施方案中，髓样激动剂-接头化合物(接头-有效负载)选自接头-有效负载2.1-2.17或接头-有效负载2.20-2.39(实施例)中的任一种。在一些实施方案中，髓样细胞激动剂是分别选自类别a式(ia)、(ib)、(iia)、(iib)、(iiia)和(iiib)和类别b式(ia)、(ib)或(ic)的tlr8或tlr7激动剂。缀合物可包含含野生型fc结合结构域的抗体构建体。缀合物可包含含fc结合结构域变体的抗体构建体。缀合物可包含含增加fc结合结构域与fc受体的结合的fc结合结构域变体的抗体构建体。与野生型igg1fc结合结构域相比，fc结合结构域变体可在多于一个氨基酸残基处，如在5个不同的氨基酸残基处(包括l235v/f243l/r292p/y300l/p396l)，如在2个不同的氨基酸残基处(包括s239d/i332e)，或如在3个不同氨基酸残基处(包括s298a/e333a/k334a)包含取代。本文所述的氨基酸残基的编号根据eu索引。接头可为本文所述的接头中的一种。接头可为可切割的、不可切割的、亲水的或疏水的。可切割接头可对酶敏感。可切割接头可由诸如蛋白酶的酶切割。可切割接头可为含缬氨酸-瓜氨酸或缬氨酸-丙氨酸肽的接头。含缬氨酸-瓜氨酸-或缬氨酸-丙氨酸-的接头可含有五氟苯基。含缬氨酸-瓜氨酸-或缬氨酸-丙氨酸-的接头可含有琥珀酰亚胺基团或马来酰亚胺基团。含缬氨酸-瓜氨酸或缬氨酸-丙氨酸的接头可含有paba基团。含缬氨酸-瓜氨酸或缬氨酸-丙氨酸的接头可含有paba基团和五氟苯基。含缬氨酸-瓜氨酸-或含缬氨酸-丙氨酸-的接头可含有paba基团和马来酰亚胺基团。含缬氨酸-瓜氨酸-或含缬氨酸-丙氨酸-的接头可含有paba基团和琥珀酰亚胺基团。不可切割接头可为蛋白酶不敏感的。不可切割接头可含有马来酰亚胺基团。不可切割接头可为马来酰亚氨基己酰基接头。马来酰亚氨基己酰基接头可包含n-马来酰亚氨基甲基环己烷-1-羧酸酯。马来酰亚氨基己酰基接头可含有琥珀酰亚胺基团。马来酰亚氨基己酰基接头可含有五氟苯基。接头可为马来酰亚胺基团和一个或多个聚乙二醇分子的组合。接头可为马来酰亚氨基己酰基基团和一个或多个聚乙二醇分子的组合。接头可为马来酰亚胺-peg4接头。接头可为含琥珀酰亚胺基团的马来酰亚氨基己酰基接头和一个或多个聚乙二醇分子的组合。接头可为含五氟苯基的马来酰亚氨基己酰基接头和一个或多个聚乙二醇分子的组合。接头可含有连接至聚乙二醇分子的马来酰亚胺，其中聚乙二醇可允许更多的接头柔性或可用于加长接头。接头可为(马来酰亚氨基己酰基)-(缬氨酸-瓜氨酸)-(对氨基苄氧基羰基)接头。接头还可包含亚烷基、亚烯基、亚炔基、聚酯、聚酯、聚酰胺、聚氨基酸、多肽、可切割肽和/或氨基苄基氨基甲酸酯(盐)基团。接头可在一端含有马来酰亚胺和在另一端含有n-羟基琥珀酰亚胺酯。接头可含有n-末端胺被乙酰化的赖氨酸，和缬氨酸-瓜氨酸切割位点。接头可具有通过微生物转谷氨酰胺酶产生的连键，其中由于酶催化谷氨酰胺侧链的酰基基团与赖氨酸链的伯胺之间的键形成而在含胺部分和经工程化以含有谷氨酰胺的部分之间产生连接。接头可含有反应性伯胺。接头可以是分选酶a接头。分选酶a接头可由将lxptg识别基序(seqidno:1)融合至n-末端ggg基序以再生天然酰胺键的分选酶a酶连接。所产生的接头可因此将连接至lxptg识别基序(seqidno:1)的部分与连接至n-末端ggg基序的部分连接。接头可以是一个部分上的非天然氨基酸与肟键之间反应产生的连接，所述肟键是通过用另一部分上的烷氧基胺修饰酮基团而形成的。部分可为抗体构建体。部分可为结合结构域。部分可为抗体。部分可为髓样细胞激动剂。缀合物可包含含靶抗原结合结构域和fc结合结构域的抗体构建体。靶抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞上的第一抗原，其中抗原是肝脏细胞抗原。第一抗原可由肝脏细胞表达。例如，第一抗原可为肝脏细胞抗原。肝脏细胞抗原可为分子标志物，与来自其他正常组织的细胞相比，其优先在肝脏细胞上表达。例如，肝脏细胞抗原可在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、星状细胞或其他肝脏细胞类型或其组合上表达。肝脏细胞抗原可为肝脏细胞表面受体。肝脏细胞抗原可为肝细胞抗原。肝脏细胞抗原可在非癌性肝脏细胞上表达。肝脏细胞抗原可在被病毒感染的细胞上表达。病毒可为肝脏病毒。病毒可为肝炎病毒。病毒可为hbv。病毒可为hcv。肝脏细胞抗原可包括但不限于asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5和slc22a1。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2和trf2。在一些实施方案中，靶抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。靶抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在其他实施方案中，第一抗原是来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原。病毒抗原可为病毒的分子标志物，在肝脏细胞被病毒感染时，其在肝脏细胞上表达。例如，病毒抗原可在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、星状细胞或其他肝脏细胞类型或其组合上表达。病毒可为肝炎病毒，如hbv或hcv。病毒可为hbv。病毒可为hcv。病毒抗原可在被病毒感染的非癌性肝脏细胞上表达。病毒抗原可包括但不限于hbv的组分(如hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶或hbx)和hcv的组分(如核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a或ns5b)。在一些实施方案中，病毒抗原选自：hbv组分(如hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶或hbx)和hcv的组分(如核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a或ns5b)。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag、hbcag或hbeag。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag。在一些实施方案中，靶抗原结合结构域能特异性结合来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原，其中病毒抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。靶抗原结合结构域能特异性结合感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原，其中病毒抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。在髓样细胞激动剂存在下缀合物的第一抗原结合结构域与第一抗原的结合的kd可以是在髓样细胞激动剂不存在下缀合物的第一抗原结合结构域与第一抗原的结合的kd的约2倍、约3倍、约4倍、约5倍、约6倍、约7倍、约8倍、约9倍、约10倍、约15倍、约20倍、约25倍、约30倍、约35倍、约40倍、约45倍、约50倍、约60倍、约70倍、约80倍、约90倍、约100倍、约110倍或约120倍。在髓样细胞激动剂存在下缀合物的第一抗原结合结构域与第一抗原的结合的kd可小于10nm。在髓样细胞激动剂存在下缀合物的第一抗原结合结构域与第一抗原的结合的kd可小于100nm、小于50nm、小于20nm、小于5nm、小于1nm或小于0.1nm。缀合物可以能够特异性结合单一抗原。缀合物可以能够特异性结合两种或更多种抗原。缀合物可包含含有第二抗原结合结构域的抗体构建体。第二抗原结合结构域能特异性结合第二抗原。第二抗原可由肝脏细胞表达。例如，第二抗原可为肝脏细胞抗原。肝脏细胞抗原可为分子标志物，与来自其他正常组织的细胞相比，其优先在肝脏细胞上表达。例如，肝脏细胞抗原可在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、星状细胞或其组合上表达。肝脏细胞抗原可为肝脏细胞表面受体。肝脏细胞抗原可为肝细胞抗原。肝脏细胞抗原可在非癌性肝脏细胞上表达。肝脏细胞抗原可在被病毒感染的细胞上表达。病毒可为肝炎病毒，如hbv或hcv。病毒可为hbv。病毒可为hcv。肝脏细胞抗原可包括但不限于asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5和slc22a1。在一些实施方案中，肝脏细胞抗原选自：asgr1、asgr2和trf2。第二抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。第二抗原结合结构域能特异性结合肝脏细胞抗原，其中肝脏细胞抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：asgr1、asgr2、trf2、ugt1a1、slc22a7、slc13a5、slc22a1和c9。在其他实施方案中，第二抗原可为来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原。病毒抗原可为病毒的分子标志物，在肝脏细胞被病毒感染时，其在肝脏细胞上表达。例如，在被病毒感染时，病毒抗原可在小管细胞、库普弗细胞、肝细胞、星状细胞或其组合上表达。病毒可为肝炎病毒，如hbv或hcv。病毒可为hbv。病毒可为hcv。病毒抗原可在被病毒感染的非癌性肝脏细胞上表达。病毒抗原可包括但不限于hbv的组分(如hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶或hbx)和hcv的组分(如核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a或ns5b)。在一些实施方案中，病毒抗原选自：hbv的组分(如hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶或hbx)和hcv的组分(如核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a或ns5b)。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag、hbcag或hbeag。在一些实施方案中，病毒抗原是hbsag。在一些实施方案中，第二抗原结合结构域能特异性结合来自感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原，其中病毒抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少80％同一性的氨基酸序列：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。第二抗原结合结构域能特异性结合感染肝脏细胞的病毒的病毒抗原，其中病毒抗原具有包含与选自以下的抗原的氨基酸序列至少85％、90％、95％、98％或100％同一性的氨基酸序列：hbsag、hbcag、hbeag、乙型肝炎病毒dna聚合酶、hbx、核心蛋白、e1和e2、ns2、ns3、ns4a、ns4b、ns5a和ns5b。在髓样细胞激动剂存在下缀合物的第二抗原结合结构域与第二抗原的结合的kd可以是在髓样细胞激动剂不存在下缀合物的第二抗原结合结构域与第二抗原的结合的kd的约2倍、约3倍、约4倍、约5倍、约6倍、约7倍、约8倍、约9倍、约10倍、约15倍、约20倍、约25倍、约30倍、约35倍、约40倍、约45倍、约50倍、约60倍、约70倍、约80倍、约90倍、约100倍、约110倍或约120倍。在髓样细胞激动剂存在下缀合物的第二抗原结合结构域与第二抗原的结合的kd可以小于10nm。在髓样细胞激动剂存在下缀合物的第二抗原结合结构域与第二抗原的结合的kd可以小于100nm、小于50nm、小于20nm、小于5nm、小于1nm或小于0.1nm。相比之下，当第一抗原结合结构域结合至第一抗原结合结构域的抗原时，在髓样细胞激动剂存在下缀合物的第二抗原结合结构域与第二抗原的结合的kd可以大于100nm。当第一结合结构域结合至第一抗原结合结构域的抗原时，在髓样细胞激动剂存在下缀合物的第二抗原结合结构域与第二抗原的结合kd可以大于100nm、大于200nm、大于300nm、大于400nm、大于500nm或大于1000nm。当连接至髓样细胞激动剂时，缀合物可包含含有能结合fcr的fc结合结构域的抗体构建体。当连接至髓样细胞激动剂时，缀合物可包含能结合fcr的fc结合结构域以开始fcr介导的信号传导。当连接至髓样细胞激动剂时，缀合物能结合其抗原。当连接至髓样细胞激动剂时，缀合物能结合其抗原，并且当连接至髓样细胞激动剂时，缀合物的fc结合结构域能结合fcr。当连接至髓样细胞激动剂时，缀合物能结合其抗原，并且当连接至髓样细胞激动剂时，缀合物的fc结合结构域能结合fcr以开始fcr介导的信号传导。连接至髓样细胞激动剂的fc结合结构域可以是fc结合结构域变体。fc结合结构域变体可在多于一个氨基酸残基处，如在5个不同的氨基酸残基处(包括l235v/f243l/r292p/y300l/p396l)，如在2个不同的氨基酸残基处(包括s239d/i332e)，或如在3个不同的氨基酸残基处(包括s298a/e333a/k334a)包含取代。当fc结合结构域连接至髓样细胞激动剂时fc结合结构域与fc受体的结合的kd可以是在连接至髓样细胞激动剂不存在下fc结合结构域与fc受体的结合的kd的约2倍、约3倍、约4倍、约5倍、约6倍、约7倍、约8倍、约9倍、约10倍、约15倍、约20倍、约25倍、约30倍、约35倍、约40倍、约45倍、约50倍、约60倍、约70倍、约80倍、约90倍、约100倍、约110倍或约120倍。当结合至髓样细胞激动剂时fc结合结构域与fc受体的结合的kd可以小于10nm。当连接至髓样细胞激动剂时fc结合结构域与fc受体的结合的kd可小于100nm、小于50nm、小于20nm、小于5nm、小于1nm或小于0.1nm。相比之下，当连接至髓样细胞激动剂时且当第一结合结构域结合至其抗原时，fc结合结构域与fc受体的结合的kd可大于100nm。当连接至髓样细胞激动剂时且当第一结合结构域结合至其抗原时，fc结合结构域与fc受体的结合的kd可大于100nm、大于200nm、大于300nm、大于400nm、大于500nm或大于1000nm。缀合物的髓样细胞激动剂可为trl7激动剂和/或tlr8激动剂。在一些实施方案中，髓样细胞激动剂是tlr7激动剂。在一些实施方案中，髓样细胞激动剂是tlr8激动剂。接头可通过抗体构建体、髓样细胞激动剂和接头之间的直连键连接至缀合物的抗体构建体和髓样细胞激动剂。直连键是共价键。接头可在任何适合的位点处，诸如例如在氨基酸序列的末端处或者在半胱氨酸残基、经工程化的半胱氨酸残基、赖氨酸残基、丝氨酸残基、苏氨酸残基、酪氨酸残基、天冬氨酸残基、谷氨酸残基、谷氨酰胺残基、经工程化的谷氨酰胺残基、硒代半胱氨酸残基或非天然氨基酸的侧链处，连接至抗体构建体。非天然氨基酸可包括对叠氮基甲基-l-苯丙氨酸(pamf)。连接位点也可以位于含肟键的残基处，所述肟键通过是用另一部分上的烷氧基胺以及反应性伯胺(如在蛋白或肽的c-末端处的反应性伯胺)修饰酮基团而形成的，如通过使用可通过将lxptg识别基序(seqidno:1)融合至n-末端ggg基序以再生天然酰胺键的分选酶a酶产生的分选酶a接头。所产生的接头可因此将连接至lxptg识别基序(seqidno:1)的部分与连接至n-末端ggg基序的部分连接。连接可以经由任何不同类型的键进行，例如但不限于酰胺键、酯键、醚键、碳-氮键、碳-碳单键、双键或三键、二硫键或硫醚键。接头可以具有至少一个官能团，该官能团可以连接至抗体构建体(如，抗体)。官能团的非限制性实例可包括形成酰胺键、酯键、醚键、碳酸酯键、氨基甲酸酯键或硫醚键的那些官能团，此类官能团可以是例如氨基基团；羧基基团；醛基团；叠氮基团；炔烃和烯烃基团；酮；碳酸酯(盐)；羰基官能团，其键合至离去基团，如氰基和琥珀酰亚胺基及羟基基团。接头可在抗体fc区或结构域的铰链半胱氨酸处连接至抗体构建体。接头可在轻链恒定结构域赖氨酸处连接至抗体构建体。接头可在轻链中的工程化的半胱氨酸处连接至抗体构建体。接头可在工程化的轻链谷氨酰胺处连接至抗体构建体。接头可在工程化至轻链中的非天然氨基酸处连接至抗体构建体。接头可在重链恒定结构域赖氨酸处连接至抗体构建体。接头可在重链中的工程化的半胱氨酸处连接至抗体构建体。接头可在工程化的重链谷氨酰胺处连接至抗体构建体。接头可在工程化至重链中的非天然氨基酸处连接至抗体构建体。例如，氨基酸可被工程化至如本文所述的抗体构建体的氨基酸序列中，并且可连接至缀合物的接头。可将工程化的氨基酸添加至现有氨基酸的序列中。工程化的氨基酸可以取代氨基酸序列中的一个或多个现有氨基酸。接头可以经由巯基基团缀合至抗体构建体。接头可以经由伯胺缀合至抗体构建体。接头可以是抗体构建体上的非天然氨基酸与肟键之间反应产生的连接，所述肟键是通过用髓样细胞激动剂上的烷氧基胺修饰酮基团而形成的。当接头在本文所述的位点处连接至抗体构建体时，缀合物的fc结构域可结合fc受体。当接头在本文所述的位点处连接至抗体构建体时，缀合物的抗原结合结构域可以结合其抗原。当接头在本文所述的位点处连接至抗体构建体时，缀合物的结合结构域可以结合其抗原。含工程化的反应性半胱氨酸残基的抗体可用于将结合结构域连接至抗体。接头可经由分选酶a接头将抗体构建体连接至结合结构域。分选酶a接头可由将lxptg识别基序(seqidno:1)融合至n-末端ggg基序以再生天然酰胺键的分选酶a酶来产生。所产生的接头可因此将连接至lxptg识别基序(seqidno:1)的抗体构建体与连接至n-末端ggg基序的结合结构域连接。结合结构域可通过直连键连接至接头。直连键是共价键。例如，接头可连接至结合结构域的氨基酸序列的末端，或者可连接至结合结构域的侧链修饰，如半胱氨酸残基、工程化的半胱氨酸残基、赖氨酸残基、丝氨酸残基、苏氨酸残基、酪氨酸残基、天冬氨酸残基、谷氨酸残基、谷氨酰胺残基、工程化的谷氨酰胺残基、硒代半胱氨酸残基或非天然氨基酸的侧链。非天然氨基酸可包括对叠氮基甲基-l-苯丙氨酸(pamf)。连接也可以位于含肟键的残基处，所述肟键是通过用另一部分上的烷氧基胺以及反应性伯胺(如在蛋白或肽的c-末端处的反应性伯胺)修饰酮基团而形成的。连接可以经由多种键中的任一种进行，例如但不限于酰胺键、酯键、醚键、碳-氮键、碳-碳单键、双键或三键、二硫键或硫醚键。接头可具有至少一个可连接至结合结构域的官能团。官能团的非限制性实例可包括形成酰胺键、酯键、醚键、碳酸酯键、氨基甲酸酯键或硫醚键的那些官能团，此类官能团可以是例如氨基基团；羧基基团；醛基团；叠氮基团；炔烃和烯烃基团；酮；碳酸酯(盐)；羰基官能团，其键合至离去基团，如氰基和琥珀酰亚胺基及羟基基团。氨基酸可以被工程化至结合结构域的氨基酸序列中。可将工程化的氨基酸添加至现有的氨基酸序列中。工程化的氨基酸可以取代氨基酸序列中的一个或多个现有氨基酸。接头可经由巯基基团缀合至结合结构域。接头可经由伯胺缀合至结合结构域。结合结构域可缀合至缀合物的fc结构域的c-末端。含工程化的反应性半胱氨酸残基的抗体或抗体构建体可用于将髓样细胞激动剂连接至抗体构建体。接头可经由接头将抗体构建体连接至髓样细胞激动剂。接头可经由分选酶a接头将抗体构建体连接至髓样细胞激动剂。分选酶a接头可由将lxptg识别基序(seqidno:1)融合至n-末端ggg基序以再生天然酰胺键的分选酶a酶而产生的。所产生的接头可因此将连接至lxptg识别基序(seqidno:1)的抗体与连接至n-末端ggg基序的髓样细胞激动剂连接。接头可以是抗体的非天然氨基酸与肟键之间反应产生的连接，所述肟键是通过用髓样细胞激动剂上的烷氧基胺修饰酮基团而形成的。髓样细胞激动剂可包含选自碳环和杂环的一个或多个环。髓样细胞激动剂可通过至髓样细胞激动剂上的环外碳或氮原子的键共价结合至接头。接头可经由髓样细胞激动剂的环外氮或碳原子缀合至髓样细胞激动剂。接头激动剂复合物可以在生理条件下解离以产生有活性的激动剂。接头可以通过髓样细胞激动剂和接头之间的直连键而连接至髓样细胞激动剂。接头可以通过tlr8激动剂和接头之间的直连键而连接至tlr8激动剂。接头可以通过tlr7和接头之间的直连键而连接至tlr7激动剂。直连键可以是共价键。例如，接头可连接至抗体构建体的氨基酸序列的末端，或者可连接至抗体构建体的侧链修饰，如在半胱氨酸残基、工程化的半胱氨酸残基、赖氨酸残基、丝氨酸残基、苏氨酸残基、酪氨酸残基、天冬氨酸残基、谷氨酸残基、谷氨酰胺残基、工程化的谷氨酰胺残基、硒代半胱氨酸残基或非天然氨基酸的侧链处的实例。非天然氨基酸可包括对叠氮基甲基-l-苯丙氨酸(pamf)。连接也可以位于含肟键的残基处，所述肟键是通过用另一部分上的烷氧基胺以及反应性伯胺(如在蛋白或肽的c-末端处的反应性伯胺)修饰酮基团而形成的，如通过使用可通过将lxptg识别基序(seqidno:1)融合至n-末端ggg基序以再生天然酰胺键的分选酶a酶产生的分选酶a接头。所产生的接头可因此将连接至lxptg识别基序(seqidno:1)的部分与连接至n-末端ggg基序的部分连接。连接可以经由多种键中的任一种进行，例如但不限于酰胺键、酯键、醚键、碳-氮键、碳-碳单键、双键或三键、二硫键或硫醚键。接头可具有至少一个官能团，其可连接至抗体构建体。官能团的非限制性实例可包括形成酰胺键、酯键、醚键、碳酸酯键、氨基甲酸根酯键或硫醚键的那些官能团，此类官能团可以是例如氨基基团；羧基基团；醛基团；叠氮基团；炔烃和烯烃基团；酮；碳酸酯(盐)；羰基官能团，其键合至离去基团，如氰基和琥珀酰亚胺基及羟基基团。在一些实施方案中，可通过使含琥珀酰亚胺基团的不可切割的马来酰亚胺-peg4接头与髓样细胞激动剂-接头缀合来形成髓样细胞激动剂-接头。缀合物的抗体构建体可包含抗asgr1抗体。缀合物的抗体构建体可包含抗asgr2抗体。缀合物的抗体构建体可包含抗trf2抗体。缀合物的抗体构建体可包含抗ugt1a1抗体。缀合物的抗体构建体可包含抗slc22a7抗体。缀合物的抗体构建体可包含抗slc13a5抗体。缀合物的抗体构建体可包含抗slc22a1抗体。缀合物的抗体构建体可包含抗c9抗体。缀合物的抗体构建体可包含抗hbv抗原抗体。缀合物的抗体构建体可包含抗hcv抗原抗体。在缀合物中，抗体构建体可以以一定方式连接至髓样细胞激动剂，使得抗体构建体仍可以与其抗原结合，并且抗体构建体的fc结合结构域仍可以与fcr结合，导致fcr介导的信号传导。在缀合物中，抗体构建体可以以一定方式连接至髓样细胞激动剂，使得该连接不干扰抗体构建体的抗原结合结构域与其抗原结合的能力、抗体构建体的fc结合结构域与fcr结合的能力，或由抗体构建体的fc结合结构域与fcr结合产生的fcr介导的信号传导。在缀合物中，髓样细胞激动剂可以以一定方式连接至抗体构建体，使得该连接不干扰髓样细胞激动剂与其受体结合的能力。与单独的缀合物的组分相比，缀合物可产生更强的免疫刺激和更佳的治疗窗口。抗原结合结构域对本文公开的缀合物的抗原的特异性可受髓样细胞激动剂的存在的影响。缀合物的抗原结合结构域可以以在髓样细胞激动剂不存在下抗原结合结构域对抗原的特异性的至少约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约85％、约90％、约95％或约100％结合其抗原。fc结合结构域对本文公开的缀合物的fc受体的特异性可受髓样细胞激动剂的存在的影响。缀合物的fc结合结构域可以以在髓样细胞激动剂不存在下fc结合结构域对fc受体的特异性的至少约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约85％、约90％、约95％或约100％结合fc受体。抗原结合结构域对本文公开的缀合物的抗原的亲和力可受髓样细胞激动剂存在的影响。缀合物的抗原结合结构域可以以在髓样细胞激动剂不存在下抗原结合结构域对抗原的亲和力的至少约1％、约5％、约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约85％、约90％、约95％或约100％结合抗原。fc结合结构域对本文公开的缀合物的fc受体的亲和力可受髓样细胞激动剂存在的影响。缀合物的fc结合结构域可以以在髓样细胞激动剂不存在下fc结合结构域对fc受体的亲和力的至少约1％、约5％、约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约85％、约90％、约95％或约100％结合fc受体。在髓样细胞激动剂存在下抗原结合结构域与其抗原的结合的kd可以是在髓样细胞激动剂不存在下抗原结合结构域与抗原的结合的kd的约2倍、约3倍、约4倍、约5倍、约6倍、约7倍、约8倍、约9倍、约10倍、约15倍、约20倍、约25倍、约30倍、约35倍、约40倍、约45倍、约50倍、约60倍、约70倍、约80倍、约90倍、约100倍、约110倍或约120倍。在髓样细胞激动剂存在下fc结合结构域与fc受体的结合的kd可以是在髓样细胞激动剂不存在下fc结合结构域与fc受体结合的kd的约2倍、约3倍、约4倍、约5倍、约6倍、约7倍、约8倍、约9倍、约10倍、约15倍、约20倍、约25倍、约30倍、约35倍、约40倍、约45倍、约50倍、约60倍、约70倍、约80倍、约90倍、约100倍、约110倍或约120倍。亲和力可以是分子(例如，抗体)的单个结合位点与分子的结合伴侣(例如，抗原)之间的非共价相互作用的总和的强度。亲和力还可以测量抗体或抗体构建体的fc结合结构域与fc受体之间相互作用的强度。除非另有说明，否则如本文所用，“结合亲和力”可以是指内在结合亲和力，其反映了结合对成员(如，抗体和抗原或fc结合结构域和fc受体)之间1:1相互作用。分子x对于其伴侣y的亲和力通常可以用解离常数(kd)表示。亲和力可以通过本领域已知的常见方法来测量，包括本文所述的那些方法。以下描述了用于测量结合亲和力的具体说明性和示例性实施方案。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗体构建体可具有约1μm、约100nm、约10nm、约5nm、约2nm、约1nm、约0.5nm、约0.1nm、约0.05nm、约0.01nm或约0.001nm或更小(如，10-8m或更小，如10-8m至10-13m，如10-9m至10-13m)的解离常数(kd)。与亲本抗体相比，亲和力成熟的抗体可以是一个或多个互补决定区(cdr)中具有一个或多个改变的抗体，所述亲本抗体可不具有此类改变，此类改变导致抗体对抗原的亲和力得到改善。这些抗体可以以约5×10-9m、约2×10-9m、约1×10-9m、约5×10-1m、约2×10-9m、约1×10-10m、约5×10-11m、约1×10-11m、约5×10-12m、约1×10-12m或更小的kd结合其抗原。在一些实施方案中，与在一个或多个互补决定区中不含改变的缀合物相比，缀合物可具有至少1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、4倍、5倍、10倍、20倍或更大的增加的亲和力。kd可通过任何适合的测定来测量。例如，kd可通过放射性标记的抗原结合测定(ria)来测量。例如，kd可使用表面等离子体共振测定(如，使用-2000或-3000)来测量。缀合物的摩尔比是指在缀合物制备中与抗体构建体缀合的髓样细胞激动剂的平均数。摩尔比可以通过例如液相色谱/质谱(lc/ms)来测定，其中可以直接确定与抗体构建体缀合的髓样细胞激动剂的数目。另外，作为非限制性实例，摩尔比可以基于疏水性相互作用色谱(hic)峰面积，通过与电喷雾离子化质谱法(lc-esi-ms)耦合的液相色谱、通过紫外/可见光谱法、通过反相hplc(rp-hplc)或通过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms)来测定。在一些实施方案中，髓样细胞激动剂与抗体构建体的摩尔比可小于8。在其他实施方案中，髓样细胞激动剂与抗体构建体的摩尔比可为8、7、6、5、4、3、2或1。这些缀合物可以通过各种方法来制备。应当理解，本领域技术人员可以能够通过类似方法或通过组合本领域技术人员已知的其他方法来制备这些化合物。还应理解，本领域技术人员将能够以与本文所述类似的方式通过使用适当的原材料并根据需要修改合成途径来进行制备。原材料和试剂可从商业供应商获得或根据本领域技术人员已知的来源合成或如本文所述制备。药物制剂本文所述的缀合物可用作施用至有需要的对象的药物组合物。药物组合物可以包含本文所述的缀合物和一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂、稳定剂、分散剂、助悬剂和/或增稠剂。药物组合物可包含本文所述的任何缀合物。药物组合物还可包含缓冲液、抗生素、类固醇、碳水化合物、药物(如，化疗药物)、放射、多肽、螯合剂、佐剂和/或防腐剂。在药物组合物中，缀合物可以具有平均载药量。载药量p是每个抗体构建体的髓样细胞激动剂-接头分子的平均数量，或每个抗体构建体的髓样细胞激动剂的数量。变量z的范围可以为1-20、或1-100。在一些缀合物中，z优选为1至8。制剂中中每个抗体构建体的髓样细胞激动剂的平均数量可用常规手段，如质谱、hic、elisa测定和hplc来表征。可以使用包含赋形剂和佐剂的一种或多种生理上可接受的载体来配制药物组合物。可以根据选择的施用途径来改变制剂。包含如本文所述的缀合物的药物组合物可以例如通过冻干缀合物、混合、溶解、乳化、包封或包埋缀合物来制造。药物组合物还可包含呈游离碱形式或药学上可接受的盐形式的本文所述的缀合物。用于配制药物组合物的方法可以包括用一种或多种惰性、药学上可接受的赋形剂或载体配制本文所述的任何缀合物以形成固体、半固体或液体组合物。固体组合物可包括例如散剂、片剂、可分散的颗粒剂和胶囊剂，并且在一些方面，固体组合物还含有无毒的辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、ph缓冲液和其他药学上可接受的添加剂。可选地，可将本文所述的组合物冻干或本文所述的组合物可以是粉末形式以在使用前用适合的媒介物(如无菌无热原水)复溶。本文所述的缀合物的药物组合物可以分别包含至少一种缀合物作为活性成分。活性成分可包埋在例如通过凝聚技术或通过界面聚合制备的微胶囊(如分别为羟甲基纤维素或明胶微胶囊和聚-(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊)中、包埋在胶体药物递送系统(如，脂质体、白蛋白微球、微乳剂、纳米颗粒和纳米胶囊)中或包埋在粗乳剂中。如本文所述的药物组合物通常还可包含正在被治疗的特定适应症所必需的多于一种的活性化合物。活性化合物可以具有互不不利影响的互补活性。例如，药物组合物还可以包含细胞毒剂、细胞因子、生长抑制剂、抗激素剂、抗血管生成剂和/或心脏保护剂。此类分子可以以对于预期目的有效的量组合存在。可以对药物组合物和制剂灭菌。可以通过无菌过滤进行过滤来实现灭菌。可将本文所述的药物组合物配制用于作为注射剂施用。用于注射的制剂的非限制性实例可包括在油性或水性媒介物中的无菌悬浮液、溶液或乳液。适合的油性媒介物可包括但不限于亲脂性溶剂或媒介物，如脂肪油或合成的脂肪酸酯，或脂质体。水性注射悬浮液可含有增加悬浮液粘度的物质。悬浮液还可以含有适合的稳定剂。可以将注射剂配制为弹丸注射或持续输注。可选地，可将本文所述的药物组合物冻干或本文所述的药物组合物可以是粉末形式以在使用前用适合的媒介物，如无菌无热原水复溶。对于肠胃外施用，可将缀合物联合药学上可接受的肠胃外媒介物一起配制为单位剂量可注射形式(如，使用字母溶液、悬浮液、乳液)。此类媒介物可以是固有无毒的和非治疗性的。媒介物可以是水、盐水、林格氏液、右旋糖溶液和5％人血清白蛋白。也可以使用非水性媒介物，如非挥发性油和油酸乙酯。脂质体可用作载体。媒介物可含有少量添加剂，如增强等渗性和化学稳定性的物质(如缓冲液和防腐剂)。也可以制备缓释制剂。缓释制剂的实例可包括可含有抗体的固体疏水性聚合物的半透性基质，并且这些基质可为成形制品的形式(如，薄膜或微胶囊)。缓释基质的实例可以包括聚酯、水凝胶(如聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚丙交酯、l-谷氨酸和γ乙基-l-谷氨酸的共聚物、不可降解的乙烯-醋酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物如luprondepotm(即，由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球)和聚d-(-)-3-羟基丁酸。本文所述的组合物的药物制剂可以通过将缀合物与药物上可接受的载体、赋形剂和/或稳定剂混合而制备以进行储存。这种制剂可以是冻干制剂或水溶液。可接受的载体、赋形剂和/或稳定剂在所用的剂量和浓度下对于接受者可以是无毒的。可接受的载体、赋形剂和/或稳定剂可包括缓冲液，如磷酸盐、柠檬酸盐和其他有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨酸；防腐剂，多肽；蛋白，如血清白蛋白或明胶；亲水性聚合物；氨基酸；单糖，二糖和其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，如edta；糖，如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐抗衡离子，如钠；金属络合物；和/或非离子表面活性剂或聚乙二醇。治疗性应用本公开内容的缀合物、药物组合物和方法可用于治疗多种不同的对象，包括但不限于哺乳动物、人类、非人类哺乳动物、家养动物(如，实验室动物、家庭宠物或牲畜)、非驯化动物(如野生动物)、狗、猫、啮齿动物、小鼠、仓鼠、牛、鸟、鸡、鱼、猪、马、山羊、绵羊、兔及其任何组合。本文所述的缀合物、药物组合物和方法可以用作治疗剂，例如可以施用至有需要的对象的治疗。可以通过减轻、抑制、缓解或根除疾病状态(包括但不限于其症状)而在对象中获得治疗效果。可以通过减轻、抑制、预防、缓解或根除病况或疾病或者病况前或疾病前状态来获得对患有该疾病或病况、或者倾向于患该疾病或病况或者已经开始患有该疾病或疾患的对象的治疗效果。在实施本文所述的方法中，可以将治疗性有效量的本文所述的缀合物或药物组合物施用至有需要的对象，经常用于治疗和/或预防病况或其进展。药物组合物可影响对象的生理，如免疫系统、炎性反应或其他生理作用。治疗有效量可以根据疾病的严重程度、对象的年龄和相对健康、所用化合物的效力以及其他因素而广泛变化。治疗(treat)和/或治疗(treating)可以是指成功治疗或改善疾病或病况的任何指标。治疗可以包括，例如减少、延迟或减轻该疾病或病况的一种或多种症状的严重程度，或者其可以包括降低患者经历疾病、缺陷、病症或不利状况等的症状的频率。治疗可以在本文中用于指代导致疾病或病况的一些水平的治疗或改善的方法，并且可以考虑针对该目的的一系列结果，包括但不限于完全预防该病况。预防(prevent)、预防(preventing)等可以指预防患者中的疾病或病况，如病毒感染。例如，如果使用本公开内容的方法治疗处于感染病毒感染的风险的个体并且该个体后来又未感染该病毒，则该疾病至少在一段时间内已在此个体中得以预防。治疗有效量可以是缀合物或药物组合物或其活性组分的足以向施用了该组合物的个体提供有益作用或以其他方式减少有害的非有益事件的量。治疗有效剂量可以是产生其所施用的一种或多种期望或所需(如有益)效果的剂量，此类施用在给定时间段内发生一次或多次。确切的剂量可以取决于治疗目的，并且可以由本领域技术人员使用已知技术来确定。可以配制可用于疗法中的本文所述的缀合物或药物组合物，并且考虑到待治疗的病症、个体患者的状况、缀合物或药物组合物的递送位点、施用方法和从业人员已知的其他因素，以与良好医学实践一致的方式确定剂量。可以根据本文所述的制备的描述，来制备缀合物或药物组合物。本领域普通技术人员将理解，向有需要的对象施用本文所述的药物组合物或缀合物的量、持续时间和频率取决于几个因素，包括例如但不限于：对象的健康状况、患者的特定疾病或病况、患者的特定疾病或病况的等级或水平、正在施用或已经施用至对象的另外疗法等。本文所述的方法、缀合物和药物组合物可以用于施用至有需要的对象。通常，缀合物或药物组合物的施用可以包括施用途径，施用途径的非限制性实例包括静脉内、动脉内、皮下、硬膜下、肌内、颅内、胸骨内、瘤内或腹膜内。另外，药物组合物或缀合物可以通过另外的施用途径施用至对象，例如通过吸入施用、经口施用、经皮施用、鼻内施用或鞘内施用。本公开内容的药物组合物或缀合物可以在第一次施用中和在一次或多次另外的施用中施用至有需要的对象。可在第一次施用之后数分钟、数小时、数天、数周或数个月将一次或多次另外的施用施用至有需要的对象。可在第一次施用之后小于21天、或小于14天、小于10天、小于7天、小于4天或小于1天将另外施用中的任一者施用至有需要的对象。一次或多次施用可每天发生超过一次、每周发生超过一次或每月发生超过一次。缀合物或药物组合物可以在21天、14天、10天、7天、4天或在一至七天的时间段内每天的周期中施用至有需要的对象。增加的剂量和减少的副作用在某些实施方案中，与单独的髓样细胞激动剂水平相比，使用本公开内容的缀合物可允许以更高水平的呈缀合物形式的髓样细胞激动剂的缀合物的施用。例如，缀合物可以高于在缀合物中不存在缀合至抗体构建体的情况下施用髓样细胞激动剂的最大耐受剂量的水平施用。在某些实施方案中，与当作为单独的髓样细胞激动剂施用时相比，施用缀合物可与更少的副作用相关。疾病、病况等本文提供的缀合物、药物组合物和方法可用于治疗多种疾病、病况，预防对象中的疾病或病况或者有需要的对象的其他治疗性应用。通常，本文提供的缀合物、抗体构建体、药物组合物和方法可用于治疗肝脏病毒性疾病，如乙型肝炎和丙型肝炎。本发明还提供了本文公开的任何缀合物，其用于通过疗法治疗人体或动物体的方法中。可以通过本文公开的任何机制，如通过调节(如，刺激)免疫系统来进行疗法。本发明提供了本文公开的任何缀合物，其用于刺激免疫系统或免疫疗法，包括例如增强免疫应答。本发明还提供了本文公开的任何缀合物，其用于预防或治疗本文公开的任何病况，例如病毒感染。本发明还提供了本文公开的任何缀合物，其用于获得针对本文公开的任何病况的任何临床结果，如减少体内乙型肝炎或丙型肝炎感染。本发明还提供了本文公开的任何缀合物在制备用于预防或治疗本文公开的任何病况的药物中的用途。一般合成方案和实施例为了说明而非限制的目的，提供了以下合成方案。以下实施例说明了制备本文所述的化合物的各种方法。应当理解，本领域技术人员可以能够通过类似方法或通过组合本领域技术人员已知的其他方法来制备这些化合物。还应理解，本领域技术人员将能够以如下所述的类似方式通过使用适当的原材料并根据需要修改合成途径来进行制备。通常，原材料和试剂可从商业供应商获得或根据本领域技术人员已知的来源合成或如本文所述制备。方案1c-8甲酰胺的合成在高温下，使醛(i)与适当的wittig试剂如3-氰基-2-(三苯基亚磷酰基)丙酸叔丁酯反应，得到烯烃(ii)，其通过用还原剂(如于热乙酸中的铁粉)处理烯烃(ii)而经历还原性环化，得到氮杂(iii)。通过使用强酸如hcl使c-4酯基团去保护，得到化合物(iv)，继而使用偶联剂如bop试剂将其与取代的胺偶联。用叔丁氧基羰基基团保护化合物(v)中的2-氨基取代基。用试剂如lioh在thf和甲醇的混合物中水解所得化合物(vi)，得到化合物(vii)。使用已知的试剂如hbtu和叔胺碱将(vii)的c-8羧酸转化为酰胺基团。使用试剂如于二氯甲烷中的tfa进行酸介导的化合物(viii)的去保护，提供目标化合物(ix)。方案2c-8甲酰胺的替代合成使(i)在用于芳基卤的羰基化的标准条件下，如一氧化碳、钯催化剂(如pd(oac)2)和配体(如4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(xantphos))和碱(如磷酸钾)在thf和水的混合物中反应，以提供羧酸(ii)。然后可以以类似于方案1(vii→ix)中所述的方式进行终产物的转化。方案3c-8胺类似物的合成在环境温度下，使醛(i)与适当的wittig试剂如3-氰基-2-(三苯基亚磷酰基)丙酸乙酯反应，得到烯烃(ii)，其通过用还原剂(如于热乙酸中的铁粉)处理烯烃(ii)而经历还原性环化，得到氮杂(iii)。通过使用boc酸酐保护c-2胺基团，得到化合物(iii)，继而使用碱金属氢氧化物如lioh将其皂化以得到羧酸，使用偶联剂(如bop试剂)将羧酸与取代的胺偶联以提供化合物(iv)。使用已知的试剂(如edci/hobt和叔胺碱)，将(v)中的c-8羧酸转化为酰胺基团。可以使用标准方法，如铜介导的或钯催化的偶联(二苯甲酮亚胺/pd(ii))来实现卤素-胺交换，以提供c-8苯胺(vi)。通过酰化或磺酰化来对胺(vi)进行官能化，提供酰苯胺(x＝c)或磺酰胺(x＝so)化合物(vii)。可选地，化合物(vii)可以通过溴化物(v)与适当取代的酰胺或磺酰胺的钯介导的偶联直接制备。使用试剂如于二氯甲烷中的tfa进行酸介导的化合物(vii)的去保护，提供目标化合物(viii)。方案4接头-有效负载的合成接头-有效负载(lp)可通过各种方法合成。例如，lp化合物可如方案4-1所示合成。方案4-1：已经被活化用于酰胺键形成的聚乙二醇化羧酸(i)可以与适当取代的含胺的免疫刺激性化合物反应，得到中间体酰胺。活化酯(ii)的形成可通过在偶联剂如二异丙基碳二亚胺(dic)存在下，使用试剂如n-羟基琥珀酰亚胺或五氟苯酚使含中间体酰胺的羧酸反应以提供化合物(ii)来实现。lp可如方案4-2所示合成。方案4-2：可以使活化的碳酸酯如(i)与适当取代的含胺的免疫刺激性化合物反应，得到氨基甲酸酯(ii)，可以使用标准方法基于r3酯基团的性质对其进行去保护。然后可以将所得的羧酸(iii)与活化剂(如n-羟基琥珀酰亚胺或五氟苯酚)偶联，以提供化合物(iv)。lp化合物可如方案4-3所示合成。方案4-3：可以使活化的羧酸酯如(i-a)与适当取代的含胺的免疫调节刺激性化合物反应以得到酰胺(ii)。可选地，可以在酰胺键形成剂如二环己基碳二亚胺(dcc)存在下，将(i-b)型羧酸与适当取代的含胺的免疫刺激性化合物偶联，以提供所需的lp。lp化合物可以通过各种方法如方案4-4中所示的方法合成。方案4-4：可以使活化的碳酸酯如(i)与适当取代的含胺的免疫调节刺激性化合物反应，以得到氨基甲酸酯(ii)作为目标isc。lp化合物也可以如方案4-5所示合成。方案4-5：可以使活化的羧酸如(i-a、i-b、i-c)与适当取代的含胺的免疫刺激性化合物反应，以得到酰胺(ii-a、ii-b、ii-c)作为目标连接的有效负载(lp)。实施例包括以下实施例以进一步描述本公开内容的一些实施方案，并且不应用于限制本公开内容的范围实施例1用于鉴定肝脏特异性抗原的一般方法正常组织表达数据的概略，例如rna-seq转录组数据库如gtex，用于创建按组织类型分离的样品集。然后将该数据库划分为测试(具有期望表达的组织)和对照(具有不期望表达的组织)子集，在这种情况下，肝脏对比所有其他组织，并且进行方差检验分析如kruskal-wallis单向方差分析以鉴定两个样品集之间显著差异表达的基因。因为得到的基因列表可能包括实例，所述实例虽然在测试组中与正常组相比总体上过表达，但在单独组织类型中的表达也可能比所需的更高，因此应用了第二过滤步骤，其中对照组织集中任何特定组织的平均组织特异性表达高于所需阈值的那些基因从进一步分析中去除。如果需要，可以应用进一步的过滤步骤，以分选和限制基于测试集中的绝对最小平均表达、对照集中的绝对最大平均表达和/或测试与对照表达比返回的基因。从该所得列表中，基于蛋白质产物的细胞定位，根据需要进行最后的过滤步骤以包括或排除基因。例如，可能需要仅包括在细胞表面上表达的蛋白质或那些单通(single-pass)表面蛋白质中的蛋白质。当选择最终列表时，还将另外考虑在一种或多种特定疾病或者肝脏细胞亚群中抗原的表达模式。例如，在肝脏细胞亚群的情况下，将在可获得的肝脏细胞亚群(如肝细胞、库普弗细胞或肝星状细胞)中比较所讨论的抗原的表达，并根据这些表达模式去除、保留或优先考虑抗原。在可能的情况下，通过检查可获得的免疫组织化学数据(如人蛋白图谱中存在的免疫组织化学数据)来进行候选基因表达的蛋白质水平确认。实施例22-氨基-n4,n4-二丙基-n8-(1,2,3,4-四氢喹啉-7-基)-3h-苯并[b]氮杂-4,8-二甲酰胺tfa盐(化合物1.1)的合成步骤a：int1.1a的制备在25℃下向(三苯基亚磷酰基)乙酸叔丁酯(45.0g,119mmol,1.00当量)于etoac(260ml)中的溶液添加溴乙腈(8.60g,71.7mmol,4.78ml)。将反应物在80℃下加热16h，之后tlc(dcm:meoh＝10:1；rf＝0.4)和lcms显示反应完成。将混合物冷却、过滤，用etoac(200ml)洗涤，并浓缩以得到呈红色固体的粗制int1.1a，其不经纯化即可直接使用。步骤b：int1.1b的制备将int1.1a(11.4g,54.4mmol,1.00当量)和4-甲酰基-3-硝基苯甲酸甲酯(24.8g,59.8mmol,1.10当量)于甲苯(200ml)中的溶液在25℃下搅拌18h。tlc(石油醚:etoac＝1:2)显示反应完成并且浓缩混合物以得到粗产物，其通过硅胶色谱(石油醚：etoac＝10:1至8:1至4:1)纯化以得到呈黄色固体的int1.1b(11.3g)。1hnmr(cdcl3)δ8.86(d,j＝1.3hz,1h),8.40(dd,j＝7.9,1.3hz,1h),8.11(s,1h),7.54(d,j＝7.9hz,1h),3.97-4.05(m,3h),3.27(s,2h),1.60ppm(s,9h)。步骤c：int1.1c的制备在60℃下，将铁粉(6.79g,122mmol)添加至int1.1b(23.4g,20.3mmol,1.00当量)在冰醋酸(230ml)中的溶液。将混合物在85℃下搅拌3h。tlc(石油醚:etoac＝1:2；rf＝0.43)显示反应完成，并将混合物冷却、过滤、用乙酸(100ml×2)洗涤并浓缩。将粗残余物用etoac(100ml)稀释，用nahco3水溶液(50ml×3)洗涤，并经na2so4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化以得到15.9g呈黄色固体的int1.1c。1hnmr(cdcl3)δ7.95(s,1h),7.76(dd,j＝8.2,1.5hz,1h),7.70(s,1h),7.46(d,j＝8.2hz,1h),3.93(s,3h),2.99(s,2h),1.56(s,9h)。步骤d：int1.1d的制备将int1.1c(8.00g,25.3mmol)于hcl/二噁烷(160ml)中的溶液在25℃下搅拌16h，之后lcms显示反应完成。将混合物浓缩以得到12.5g呈浅黄色固体的int1.1d，其不经纯化即可直接使用。1hnmr(dmso-d6)。δ13.43(brs,1h),13.00(brs,1h),10.20(s,1h),9.22(s,1h),7.96(s,1h),7.85-7.92(m,2h),7.78-7.83(m,1h),3.90(s,3h),3.52(s,2h)。步骤e：int1.1e的制备在0℃下将5.0g(13.3mmol)的hbtu和7.7ml(44.4mmol)的dipea添加至含3.3g(11.1mmol)int1.1d于60mldmf中的溶液。5分钟后，添加2.2g(21.7mmol)二正丙胺并将反应物搅拌至室温过夜用20ml饱和nh4cl，然后用20ml水猝灭反应。将混合物用etoac(3x30ml)萃取，并将合并的有机萃取物用盐水(2x)洗涤，然后经na2so4干燥。在去除干燥剂并浓缩etoac溶液之后，将残余物在硅胶(80g柱；0％至20％甲醇/dcm)上纯化以得到3.0gint1.1e。1hnmr(cdcl3)δ7.92(d,j＝1.5hz,1h),7.86(dd,j＝8.2,1.5hz,1h),7.38(d,j＝8.2hz,1h),6.89(s,1h),3.92(s,3h),3.39(t,j＝7.5hz,4h),3.22(s,2h),1.68(m,4h),0.91(bs,6h)。esi,m/z343[m+h]。步骤f：int1.1f的制备将含有1.8g(5.3mmol)int1.1e于30ml二氯甲烷中的溶液冷却至0℃并用2.2ml(7.9mmol)tea以及然后用1.7g(7.9mmol)boc2o处理。将反应混合物搅拌至室温过夜，然后用10ml水猝灭。分离各层并将水溶液用二氯甲烷(3x30ml)反萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤并经na2so4干燥。去除溶剂并将残余物通过硅胶色谱(80g柱；0％至75％etoac/己烷)纯化以得到呈白色固体的所需int1.1f。步骤g：int1.1g的制备将含有500mg(1.13mmol)int1.1f于10ml的1:1thf和水的混合物中的溶液冷却至0℃并用1.7ml(1.7mmol)1nlioh处理。搅拌16h后，添加冰屑，然后添加足够的5％柠檬酸溶液以产生沉淀(ph～5.5)。将所得的混合物用etoac洗涤三次，将合并的有机萃取物用盐水洗涤，并经na2so4干燥。将溶液蒸发以得到419mg呈淡黄色固体的int1.1g，其无需纯化即可使用。步骤h：化合物1.1的制备将46mg(0.12mmol)hatu添加至含43mg(0.10mmol)int1.1f于1.0mldmf中的溶液。将反应混合物搅拌5分钟，然后用30mg(0.12mmol)7-n-boc-氨基-1,2,3,4-四氢喹啉和0.022ml(0.20mmol)nmm处理。将反应混合物搅拌16h，然后用5ml饱和nh4cl溶液和5ml水处理。将所得的混合物用etoac萃取三次，并将合并的有机物用盐水洗涤，然后经na2so4干燥。蒸发溶剂后，将粗油状物溶解于3mldcm中，然后冷却至0℃。然后，将0.6ml的tfa添加至混合物。将混合物搅拌4h，蒸发，并将所得残余物通过反相色谱纯化，得到呈白色固体的化合物1.1的tfa盐。1hnmr(cd3od)δ7.96(s,1h),7.95(s,1h),7.85(d,j＝2.4hz,1h),7.79(d,j＝8.8hz,1h),7.38(d,j＝7.5hz,1h),7.25(d,j＝7.5hz,1h),7.10(s,1h),3.55(t,j＝7.5hz,6h),3.33(m,2h),2.90(t,j＝6.6hz,2h),2.10(m,1h),1.69(m,4h),0.77(bs,6h)。lcms[m+h]＝460.25。实施例3髓样激动剂苯并氮杂化合物表1显示了苯并氮杂化合物，其为髓样激动剂。可以通过使用中间体1.1f和适当取代的胺或技术人员已知的其他方法，以类似于用于合成化合物1.1(实施例2)的方式制备化合物1.2-1.67。表1：化合物1.1-1.67实施例48-取代的酰苯胺的合成2-氨基-8-(烟酰氨基)-n,n-二丙基-3h-苯并[b]氮杂-4-甲酰胺(化合物1.62)的制备步骤a：化合物1.62的制备向含有46mg(0.10mmol)(8-溴-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-2-基)氨基甲酸叔丁酯于5mldmf中的溶液中添加65mg(0.20mmol)cs2co3和15mg(0.12mmol)烟酰胺。将溶液脱气，然后用18mg(0.2当量)brettphospdg3和11mg(0.2当量)brettphos处理，并在90℃下加热12h。将反应混合物冷却并通过制备型hplc进行色谱分析以得到6mg所需的呈灰白色固体的偶联和去保护的化合物。1hnmr(dmso-d6)δ10.4(s,1h),9.10(d,j＝1.6hz,1h),8.76(d,j＝8.0hz,1h),8.28(d,j＝8.0hz,1h),7.55(m,1h),7.52(s,1h),7.36(d,j＝8.2hz,1h),7.27(d,j＝8.0hz,1h),6.80(bs,1h),6.68(s,1h),3.44(m,4h),2.69(m,1h),1.54(m,4h),0.89(bs,6h)。lcms(m+h)＝406.2。实施例58-取代的磺酰胺的合成2-氨基-n,n-二丙基-8-(n-(吡啶-3-基)磺酰基)-3h-苯并[b]氮杂-4-甲酰胺(化合物1.63)的合成步骤a：化合物1.63的制备向含有460mg(1.0mmol)(8-溴-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-2-基)氨基甲酸叔丁酯于50ml二噁烷中的溶液中添加210mg(2.0mmol)n,n-二异丙基乙胺和140mg(1.2mmol)苄基硫醇。将溶液脱气，然后用180mg(0.20mmol)pd2(dba)3和116mg(0.20mmol)xantphos处理，并在90℃下加热6h。将反应混合物冷却并通过硅藻土过滤，然后通过反相色谱进行色谱分析，得到250mg所需的硫醇醚，将其立即溶解于dcm(20ml)和乙酸(0.5ml)中。将所得溶液在冰水浴中冷却，并添加1,3-二氯-5,5-二甲基2-咪唑烷二酮(197mg,1.0mmol)。2h后，将混合物用dcm和盐水萃取，并将有机物干燥并蒸发。将残余物在0℃下溶解在mecn中并用1-甲基-1h-咪唑和3-氨基吡啶处理，并经2h搅拌至室温。将溶液用盐水萃取，并经na2so4干燥。然后将残余物溶解在4mldcm中，并用1mltfa处理并搅拌2h。蒸发溶剂，并通过反相hplc纯化，得到30mg所需的化合物1.63。1hnmr(dmso-d6)δ10.5(bs,1h),8.32(s,1h),8.25(d,j＝2.0hz,1h),7.54(d,8.0hz,1h),7.52(d,j＝8.0hz,1h),7.45(s,1h),7.22(dd,j＝8.0,2.0hz,1h),7.07(m,2h),6.73(s,1h),3.30(m,4h),2.95(s,2h),2.11(s,1h),1.54(m,4h),0.85(bs,6h)。lcms(m+h)＝442.1。实施例6接头-修饰的有效负载(lp)的合成：4-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基((5-(2-氨基-4-(二丙基-氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基甲酸酯(化合物-接头2.1)的制备化合物2.1步骤a：化合物2.1的制备将54mg(0.07mmol)mc-val-cit-pab-pnp(cas号159857-81-5)添加至含40mg(0.07mmol)2-氨基-n8-(5-(氨基甲基)吡啶-3-基)-n4,n4-二丙基-3h-苯并[b]氮杂-4,8-二甲酰胺于1.0mldmf和32μl(0.18mmol)dipea中的溶液。将反应混合物搅拌16h，然后通过反相色谱(无tfa)直接纯化。将干净级分冻干以得到60mg(71％)的所需产物，将其溶解于5mldcm中并在室温下用1mltfa处理。将混合物搅拌45分钟，然后蒸发。将所得的残余物通过反相色谱(无tfa)纯化以得到34mg(62％)呈白色固体的化合物-接头2.1。1hnmr(cd3od)δ8.81(s,1h),8.25(s,1h),8.21(s,1h),7.72(s,1h),7.58(m,2h),7.45(d,j＝8.2hz,2h),7.33(d,j＝8.4hz,2h),6.91(s,1h),6.75(s,2h),5.08(s,2h),4.49(m,1h),4.39(m,2h),4.14(d,j＝6.5hz,1h),3.47(t,j＝7.1hz,2h),3.42(m,4h),3.15(m,1h),3.10(m,1h),2.27(t,j＝7.4hz,2h),2.05(m,1h),1.88(m,1h),1.75-1.52(m,13h),1.31(m,2h),0.97(t,j＝6.5hz,6h)。lcms[m+h]＝1033。实施例7含髓样激动剂的接头-修饰的有效负载(lp)的合成：2-氨基-n8-(5-((6-(4-((2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)甲基)环己烷-1-甲酰氨基)己酰氨基)甲基)吡啶-3-基)-n4,n4-二丙基-3h-苯并[b]氮杂-4,8-二甲酰胺(化合物-接头2.2)的制备步骤a：化合物2.2的制备将50mg(0.11mmol)n-琥珀酰亚胺基6-[[4-(马来酰亚氨基甲基)环己基]甲酰氨基]己酸酯(cas号125559-00-4)添加至含60mg(0.11mmol)2-氨基-n8-(5-(氨基甲基)吡啶-3-基)-n4,n4-二丙基-3h-苯并[b]氮杂-4,8-二甲酰胺于2.0mldcm和15μl(0.11mmol)三乙胺的溶液。将反应混合物搅拌16h，然后通过反相色谱(无tfa)直接纯化。将干净级分冻干以得到所需产物，将其溶解于5mldcm中，并在室温下用1mltfa处理。将混合物搅拌2h，然后蒸发。将所得残余物通过反相色谱(无tfa)纯化以得到49mg呈白色固体的化合物-接头2.2。1hnmr(cd3od)δ8.78(s,1h),8.25(s,2h),7.70(d,j＝1.8hz,1h),7.58(dd,j＝1.8,8.1hz,1h),7.46(d,j＝8.3hz,1h),6.91(s,1h),6.77(s,2h),4.42(s,2h),3.43(m,4h),3.13(t,j＝6.9hz,2h),2.85(d,j＝16.6hz,1h),2.29(t,j＝7.3hz,2h),2.05(m,1h),1.8-1.6(m,12h),1.51(m,1h),1.37(m,4h),1.11-0.84(m,9h)。lcms(m+h)＝767。实施例8接头-修饰的有效负载(lp)的合成实施例8a：2-氨基-n8-(5-((6-(4-((2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)甲基)环己烷-1-甲酰氨基)己酰氨基)甲基)吡啶-3-基)-n4,n4-二丙基-3h-苯并[b]氮杂-4,8-二甲酰胺(化合物-接头2.3)的制备将含有58mg(0.10mmol)化合物1.35和30mg(0.1mmol)2,5-二氧代吡咯烷-1-基6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酸酯于2mldcm中的溶液用0.07ml(0.4mmol)dipea处理，并将反应物在室温下搅拌4h。将反应混合物在无处理的情况下通过反相色谱纯化以提供28mg呈白色固体的化合物-接头2.3。1hnmr(cd3od)δ8.81(d,j＝2.3hz,1h),8.19(d,j＝1.9hz,1h),8.08(t,j＝2.1hz,1h),7.90(m,2h),7.64(dd,j＝1.9,8.1hz,1h),7.25-7.15(m,5h),7.06(s,1h),6.77(s,2h),4.62-4.57(m,3h),4.39(s,2h),3.45-3.40(m,4h),3.39(t,j＝7.5hz,2h),3.10(m,1h),2.90(m,1h),2.16(t,j＝7.5hz,2h),1.70(m,4h),1.50(m,4h),1.10(m,4h),0.95(m,6h)。lcms(m+h)＝775.8。可以通过使化合物1.35与适当取代的接头基团反应，以与针对以上化合物-接头2.3所述类似的方式制备以下化合物-接头2.4至2.7。化合物-接头2.4(s)-2-氨基-n8-(5-((2-(6-(4-((2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)甲基)环己烷-1-甲酰氨基)己酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)甲基)吡啶-3-基)-n4,n4-二丙基-3h-苯并[b]氮杂-4,8-二甲酰胺从lc-smcc得到白色固体。1hnmr(cd3od)δ8.79(d,j＝2.0hz,1h),8.17(d,j＝2.0hz,1h),8.09(t,j＝2.0hz,1h),7.78(s,1h),7.69(m,1h),7.55(m,1h),7.25-7.15(m,5h),6.96(s,1h),6.79(s,2h),4.62-4.57(m,1h),4.38(s,2h),3.45-3.40(m,6h),3.14(m,1h),3.05(t,j＝7.5hz,2h),2.90(m,1h),2.18(t,j＝7.5hz,2h),2.10(m,1h),1.80-1.60(m,10h),1.50-1.30(m,6h),1.20-1.10(m,3h),0.95(m,6h)。lcms(m+h)＝914.9。化合物-接头2.5(s)-2-氨基-n8-(5-(4-苄基-24-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-3,6,22-三氧代-9,12,15,18-四氧杂-2,5,21-三氮杂二十四烷基)吡啶-3-基)-n4,n4-二丙基-3h-苯并[b]氮杂-4,8-二甲酰胺从mal-peg4-nhs得到白色固体。1hnmr(cd3od)δ8.91(d,j＝2.0hz,1h),8.24(d,j＝2.0hz,1h),8.15(t,j＝2.0hz,1h),8.01-7.98(m,2h),7.72(d,8.0hz,1h),7.25-7.15(m,5h),7.12(s,1h),6.78(s,2h),4.60(m,1h),4.43(s,2h),3.73(t,j＝7.5hz,2h),3.70-3.40(m,20h),3.39(s,2h),3.15(m,1h),2.95(m,1h),2.45(t,j＝7.5hz,2h),1.70(q,j＝7.5hz,4h),0.97-0.91(m,6h)。lcms(m+h)＝980.9。化合物-接头2.6(s)-2-氨基-n8-(5-((2-(4-(4-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)苯基)丁酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)甲基)吡啶-3-基)-n4,n4-二丙基-3h-苯并[b]氮杂-4,8-二甲酰胺，三氟乙酸盐从smpbnhs酯得到白色固体。1hnmr(cd3od)δ8.95(d,j＝2.0hz,1h),8.63(d,j＝2.0hz,1h),8.28(s,1h),8.24(m,2h),7.98(m,2h),7.70(d,j＝9.0hz,1h),7.25-7.15(m,9h),7.16(s,1h),6.94(s,2h),4.60(m,1h),4.51-4.37(m,2h),3.15(m,1h),2.91(m,1h),2.51(t,j＝7.5hz,2h),2.22(m,2h),1.81(t,j＝7.5hz,2h),1.70(q,j＝7.5hz,4h),0.95(m,6h)。lcms(m+h)＝823.8。化合物-接头2.74-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基((s)-1-(((5-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基甲酸酯从mc-vc-paba-pnp得到白色固体。1hnmr(cd3od)δ8.78(s,1h),8.21(s,1h),8.11(s,1h),7.89(m,2h),7.64(dd,j＝1.9,8.1hz,1h),7.49(d,j＝8.0hz,2h),7.25-7.15(m,7h),7.06(s,1h),6.77(s,2h),4.96(s,2h),4.48(m,1h),4.49-4.34(m,3h),4.14(d,j＝7.5hz,1h),3.46-3.44(m,6h),3.22(m,1h),3.11(m,1h),2.90(m,1h),2.33-2.25(m,2h),2.08(m,1h),1.91(m,1h),1.75-1.50(m,13h),1.30(m,2h),1.00-0.85(m,12h)。lcms(m+h)＝1181.4。化合物-接头2.84-((r)-2-((r)-2-(5-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)戊酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基(2-(1-(5-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酰氨基)乙基)氨基甲酸酯从化合物1.61和mc-vc-paba-pnp得到白色固体。1hnmr(cd3od)δ10.1(s,1h),9.49(s,1h),9.33(bs,2h),7.88(d,j＝8.0hz,1h),7.80(s,1h),7.64(s,1h),7.61(s,1h),7.45(d,j＝8.0hz,1h),7.35(d,j＝8.0hz,1h),7.02(s,1h),6.85-6.80(m,2h),6.75(s,1h),4.25m,2h),3.54-3.34(m,10h),3.05(s,4h),2.85-2.75(m,4h),2.44(m,1h),1.99(m,1h),1.70-1.60(m,12h),0.95(bs,6h)。化合物-接头2.94-((r)-2-((r)-2-(5-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)戊酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基(1-(5-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸酯从化合物1.57和mc-vc-paba-pnp得到白色固体。1hnmr(cd3od)δ8.37(d,j＝2.5hz,1h),7.88(dd,j＝8.0,2.5hz,1h),7.57-7.54(m,3h),7.43(d,j＝8.0hz,1h),7.31(d,j＝8.0hz,2h),6.89(s,1h),6.85-6.80(m,1h),6.78(s,2h),5.03(s,2h),4.45(m,2h),4.12(m,3h),3.65(m,1h),3.54(t,j＝7.5hz,2h),3.44(m,4h),3.20-2.96(m,4h),2.26(t,j＝7.5hz,2h),2.05(m,1h),1.99-1.50(m,18h),1.30(m,2h),0.97(t,j＝7.5hz,6h),0.89(bs,6h)。化合物-接头2.204-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基(2-(((5-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸酯从化合物1.64和mc-vc-paba-pnp得到白色固体。1hnmr(cd3od)□8.81(s,1h),8.25(s,1h),8.21(s,1h),7.72(s,1h),7.58(m,2h),7.45(d,j＝8.2hz,2h),7.33(d,j＝8.4hz,2h),6.91(s,1h),6.75(s,2h),4.96(s,2h),4.48(m,1h),4.49-4.34(m,3h),4.14(d,j＝7.5hz,1h),3.46-3.44(m,6h),3.22(m,1h),3.11(m,1h),2.90(m,1h),2.33-2.25(m,2h),2.08(m,1h),1.91(m,1h),1.75-1.50(m,13h),1.30(m,2h),1.00-0.85(m,12h)。lcms(m+h)＝1090.2。化合物-接头2.212-氨基-n8-(6-(4-((2-(4-((2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)甲基)环己烷-1-甲酰氨基)乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-n4,n4-二丙基-3h-苯并[b]氮杂-4,8-二甲酰胺从化合物1.61和4-(n-马来酰亚氨基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯提供白色固体。1hnmr(dmso-d6)δ10.1(s,1h),8.46(s,1h),8.61(bs,2h),7.92(dd,j＝8.0,2.5hz,1h),7.81(m,1h),7.72(m,1h),7.61(s,1h),7.53(d,j＝8.0hz,1h),7.41(d,j＝8.0hz,2h),7.03(s,2h),6.85-6.80(m,2h),6.78(s,1h),4.25(m,2h),3.65(m,1h),3.54(t,j＝7.5hz,2h),3.44(m,4h),3.20-2.96(m,4h),2.26(t,j＝7.5hz,2h),2.05(m,1h),1.99-1.50(m,18h),1.30(m,2h),0.97(t,j＝7.5hz,6h),0.89(bs,6h)。lcms(m+h)＝794.5。实施例8b：4-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基(2-(4-((3-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)甲基)苯甲酰氨基)乙基)氨基甲酸酯(化合物-接头2.10)的合成步骤a：int7b-1的制备向在冰水浴中冷却的3-硝基-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶二盐酸盐(1.0g,3.97mmol)和4-(溴甲基)苯甲酸叔丁酯(1.18g,4.36mmol)于dmf(40ml)中的搅拌溶液滴加tea(2.76ml,19.8mmol)。在冷却浴终止时，搅拌所得澄清溶液过夜。lc-ms显示出大多数所需的产物以及少量剩余的sm。将反应混合物在真空中浓缩，并将残余物用水(45ml)和饱和nahco3溶液(5ml)稀释，然后用etoac萃取(3x)。将合并的萃取物干燥(na2so4)、过滤和浓缩。将残余物吸附在硅胶上，并通过快速柱色谱(iscogold40g；干负载，0-20％ch2cl2/meoh)纯化，以得到1.32g呈橘色糖浆的4-((3-硝基-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)甲基)苯甲酸叔丁酯。1hnmr(dmso-d6)δ9.15(d,j＝2.5hz,1h),8.36(d,j＝2.5hz,1h),7.88(d,j＝8.0hz,2h),7.49(d,j＝8.0hz,2h),4.00(s,3h),3.79(s,2h),3.71(s,2h),3.04(m,2h),2.85(m,2h),1.55(s,9h)。步骤b：int7b-2的制备在室温下向4-((3-硝基-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)甲基)苯甲酸叔丁酯(1.32g,3.57mmol)于27mldcm中的搅拌溶液添加于二噁烷中的4mhcl(9ml,36.0mmol)。将反应混合物搅拌3h，然后减压浓缩。将残余物真空干燥以得到浅黄色固体，其不经进一步纯化即可直接使用。1hnmr(cd3od)δ9.33(d,j＝2.5hz,1h),8.53(d,j＝2.5hz,1h),8.19(d,j＝8.0hz,2h),7.72(d,j＝8.0hz,2h),4.82(m,2h),4.66(m,2h),4.61(s,2h),3.44(m,2h)。步骤c：int7b-3的制备向在冰水浴中冷却的4-((3-硝基-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)甲基)苯甲酸二盐酸盐(1.28g,3.32mmol)、(9h-芴-9-基)甲基(2-氨基乙基)氨基甲酸酯盐酸盐(1.060g,3.32mmol)和二异丙基乙胺(4.65ml,26.6mmol)于30mldcm中的搅拌溶液滴加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三次膦烷(trioxatriphosphinane)2,4,6-三氧化物(3.0ml,5.0mmol)。在冷却浴终止时，将混合物搅拌过夜。将反应混合物在饱和nahco3和etoac之间分配。用etoac(2x)萃取水层，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到2.2g呈橙红色固体的所需产物。步骤d：int7b-4的制备将(9h-芴-9-基)甲基(2-(4-((3-硝基-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)甲基)苯甲酰氨基)乙基)氨基甲酸酯(2.0g,3.5mmol)和铁(1.930g,34.6mmol)于乙酸(30ml)/水(3ml)中的混合物在50℃下搅拌45min。将反应混合物冷却至室温、过滤并浓缩。将残余物用饱和nahco3(90ml)和etoac(90ml)稀释。将沉淀收集、用水和etoac洗涤，并真空干燥以得到1.9g黄褐色固体，将其悬于1:1ch2cl2/meoh中并吸附在硅胶上。通过快速柱色谱(iscogold80g；干负载,0-50％b于ch2cl2梯度中，b:80:18:2ch2cl2/meoh/浓nh4oh)纯化得到1.12g呈灰白色固体的所需产物。步骤e：int7b-5的制备在室温下向2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-羧酸(350mg,0.815mmol)于dmf(5ml)中的搅拌溶液添加hatu(341mg,0.896mmol)。将反应物搅拌15min，之后添加于dmf(11ml)中的669mg(1.22mmol)(9h-芴-9-基)甲基(2-(4-((3-氨基-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)甲基)苯甲酰氨基)乙基)氨基甲酸酯。将反应物搅拌35min，之后添加0.427ml(2.44mmol)许尼希氏碱(hunig’sbase)。将所得黄色溶液搅拌18h，然后真空浓缩。将残余物通过快速柱色谱(iscogold40g；干负载，含0-50％b的ch2cl2梯度，b:80:18:2ch2cl2/meoh/浓nh4oh)纯化，得到435mg呈浅黄色固体的所需产物。步骤f：int7b-6的制备在室温下向(8-((6-(4-((2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)乙基)氨基甲酰基)苄基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-3-基)氨基甲酰基)-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-2-基)氨基甲酸叔丁酯(435mg,0.454mmol)于3.6mldmf中的搅拌溶液添加0.90ml(9.1mmol)哌啶。将反应物搅拌1h，然后浓缩。将残余物通过快速柱色谱(iscogold24g,含0-50％b的ch2cl2梯度，b:80:18:2ch2cl2/meoh/浓nh4oh)纯化，得到241mg呈浅黄色固体的所需产物。步骤g：化合物-接头2.10的制备向在氮气下在冰水浴中冷却的(8-((6-(4-((2-氨基乙基)氨基甲酰基)苄基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-3-基)氨基甲酰基)-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-2-基)氨基甲酸叔丁酯(80mg,0.109mmol)和许尼希氏碱(0.057ml,0.326mmol)于dmf(3.4ml)中的搅拌溶液中滴加4-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基(4-硝基苯基)碳酸酯(80mg,0.109mmol)于dmf(2ml)中的溶液。在冷却浴终止时，将反应物搅拌过夜。然后将反应混合物浓缩，将残余物用饱和nahco3中和，并通过反相柱(goldc1830g；5-60％ch3cn于水中，无tfa)纯化。汇集级分，浓缩以得到100mg灰黄色固体，将其直接溶解于50mldcm中并用10mltfa处理。将所得溶液搅拌1h，然后减压浓缩。将残余物真空干燥，用饱和nahco3中和，并通过反相柱色谱(iscogoldc1830g；含5-70％mecn的水梯度，无tfa)纯化。将主要级分合并并冻干以提供22mg灰白色固体。1hnmr(cd3od)δ8.67(d,j＝2.5hz,1h),7.91(d,j＝2.5hz,1h),7.80(d,j＝8.0hz,1h),7.69(d,j＝2.5hz,1h),7.58-7.50(m,5h),7.45(d,j＝8.0hz,1h),7.26(d,j＝8.5hz,2h),6.89(s,1h),6.77(s,2h),5.04(s,2h),4.90(m,1h),4.14(d,j＝7.5hz,1h),3.81(s,2h),3.69(s,2h),3.51-3.40(m,8h),3.34(m,2h),3.22(m,1h),3.11(m,2h),2.97(m,2h),2.90(m,3h),2.25(t,j＝7.5hz,2h),2.06(m,1h),1.88(m,1h),1.75-1.52(m,12h),1.28(m,2h),0.95(t,j＝7.5hz,6h),0.89(bs,6h)。lcms(m+h)＝1235.9。实施例8c：4-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基(2-(4-((3-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)甲基)苯甲酰氨基)乙基)氨基甲酸酯(化合物-接头2.11)的合成步骤a：化合物-接头2.11的制备将来自以上步骤f的84.5mg(0.115mmol)(8-((6-(4-((2-氨基乙基)氨基甲酰基)苄基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-3-基)氨基甲酰基)-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-2-基)氨基甲酸叔丁酯、2,5-二氧代吡咯烷-1-基4-((2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)甲基)环己烷-1-羧酸酯(38.3mg,0.115mmol)和许尼希氏碱(0.040ml,0.229mmol)于dcm(2.5ml)中的溶液在室温下搅拌16h。将反应混合物浓缩至干并将残余物通过反相柱色谱(iscogoldc18100g,含5-70％mecn的水梯度，无tfa)纯化。汇集所需级分并浓缩，以提供79mg呈黄色固体的所需产物，其随后在室温下溶解于2.5mldcm中，然后用tfa(500μl,6.49mmol)处理。1h后，将反应混合物浓缩，将残余物真空干燥，用饱和nahco3中和，并通过反相柱色谱(iscogoldc18100g；含5-60％mecn的水，无tfa)纯化。将主要级分汇集并浓缩。将残余物从mecn/水中冻干以得到25mg呈灰白色固体的所需产物。1hnmr(cd3od)δ8.67(d,j＝2.5hz,1h),7.91(d,j＝2.5hz,1h),7.80(d,j＝8.0hz,1h),7.68(d,j＝2.5hz,1h),7.55(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),7.53(d,j＝8.0hz,2h),7.45(d,j＝8.0hz,1h),6.89(s,1h),6.77(s,2h),4.57(s,1h),3.81(s,2h),3.49-3.38(m,8h),3.00(m,2h),2.90(m,2h),2.84(m,1h),2.11(m,1h),1.88(m,1h),1.70-1.58(m,8h),1.39(m,2h),1.0-0.89(m,10h)。lcms(m+h)＝856.8。实施例8d：4-((3-((2-(4-((3-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)甲基)苯甲酰氨基)乙基)硫代)-2,5-二氧代吡咯烷-1-基)甲基)环己烷-1-羧酸全氟苯酯tristfa盐(化合物-接头2.12)的合成化合物-接头2.12的制备将2-氨基-n4,n4-二丙基-n8-(6-(4-((2-(吡啶-2-基二硫烷基)乙基)氨基甲酰基)苄基)-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-3-基)-3h-苯并[b]氮杂-4,8-二甲酰胺(100mg,0.090mmol)(三tfa盐)和3,3',3”-膦三基三丙酸盐酸盐(38.9mg,0.136mmol)于3ml1:1乙腈/水中的溶液在室温下搅拌0.5h。将反应混合物真空浓缩至干，以提供呈黄色泡沫状固体的int7d-1，其不经进一步任何纯化即可直接使用。根据上述方案，该中间体被转化为最终的化合物-接头2.12。1hnmr(cd3od)δ8.77(d,j＝2.0hz,1h),8.22(d,j＝2.5hz,1h),8.00-7.95(m,3h),7.10(s,1h),4.57(bs,2h),4.47(bs,2h),4.11(dd,j＝9.0,3.5hz,1h),3.76-3.62(m,3h),3.45-3.35(m,4h),3.40-3.35(m,4h),3.24-3.18(m,4h),2.98(m,1h),2.71(m,1h),2.54(d,j＝3.5hz,0.5h),2.50(d,j＝3.5hz,0.5h),2.15(m,2h),1.83-1.79(m,2h),1.74-1.64(m,6h),1.55-1.45(m,2h),1.17-1.10(m,2h),0.96(bs,3h),0.91(bs,3h)。lcms(m+h)＝1057.7。实施例8e：4-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基3-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-7-甲氧基-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-羧酸酯(化合物-接头2.14)的制备使用2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-羧酸和可商购获得的3-氨基-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-羧酸叔丁酯(cas号355819-02-2)以类似于化合物1.1的方式制备。1hnmr(dmso-d6)δ12.1(s,1h),10.4(s,1h),10.0(s,1h),9.14(s,1h),8.73(d,j＝2.4hz,1h),8.08(d,j＝7.6hz,2h),7.80(d,j＝8.8hz,1h),7.70(s,1h),7.60(d,j＝8.4hz,2h),7.41(s,1h),7.34(d,j＝8.8hz,2h),7.03(s,1h),7.00(s,1h),5.99(bs,1h),5.07(s,2h),4.65(m,4h),4.40(m,2h),4.21(m,2h),3.97(s,3h),3.74(bt,2h),3.37(t,j＝6.8hz,5h),3.29(s,2h),3.11-2.95(m,4h),2.22-1.95(m,4h),1.60-1.15(m,12h),0.88(d,j＝7.0hz,6h),0.82(d,j＝7.0hz,6h)。lcms[m+h]＝1090.5。实施例8f：4-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基3-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-7-甲氧基-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-羧酸酯(化合物-接头2.15)的制备以类似于化合物1.1的方式从2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-7-甲氧基-3h-苯并[b]氮杂-8-羧酸开始制备。实施例8g：4-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基3-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-7-氟-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-羧酸酯(化合物-接头2.16)的制备以类似于化合物1.1的方式从2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-7-氟-3h-苯并[b]氮杂-8-羧酸开始制备。1hnmr(dmso-d6)δ12.2(s,1h),10.8(s,1h),10.0(s,1h),9.89(s,1h),9.27(s,1h),8.66(s,1h),8.08(d,j＝2.4hz,1h),8.03(s,1h),7.80(d,j＝8.8hz,2h),7.70-7.64(m,2h),7.60(d,j＝8.4hz,1h),7.34(d,j＝8.8hz,2h),7.02(s,1h),7.00(s,2h),5.99(bs,1h),5.07(s,2h),4.65(m,4h),4.40(m,2h),4.21(m,2h),3.73(bt,2h),3.36(m,5h),3.29(s,2h),3.11-2.95(m,4h),2.22-1.95(m,4h),1.60-1.15(m,12h),0.88(d,j＝7.0hz,6h),0.82(d,j＝7.0hz,6h)。lcms[m+h]＝1079.5。实施例8h：4-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄基(3-(4-((3-(2-氨基-4-(二丙基氨基甲酰基)-3h-苯并[b]氮杂-8-甲酰氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)甲基)苯甲酰氨基)-2,2-二氟丙基)氨基甲酸酯(化合物-接头2.17)的制备以类似于化合物1.1的方式制备。表2显示了化合物-接头2.1-2.21。表2：化合物-接头2.1-2.21表3显示了化合物-接头2.23-2.38–这些化合物接头可使用本文所述的方法结合本领域的知识制备。表3：化合物-接头2.23-2.38实施例9经由接头将抗体构建体与髓样细胞激动剂连接该实施例显示了经由接头将抗体构建体与髓样细胞激动剂连接以形成缀合物的不同方法。接头，如马来酰亚氨基己酰基)-(缬氨酸-瓜氨酸)-(对氨基苄基氧基羰基)接头或二硫化物接头(如，如在式ig至il中公开的)可首先连接至髓样细胞激动剂以形成髓样细胞激动剂-接头化合物。随后，髓样细胞激动剂-接头缀合至抗体构建体。将接头连接至抗体构建体，其中接头是二硫化物接头(如，在式ig-il中)或腙接头以形成接头-抗体构建体。随后，髓样细胞激动剂缀合至与抗体构建体连接的接头。实施例10基于赖氨酸的生物缀合将抗体构建体以约2mg/ml至约10mg/ml的浓度交换至适当的缓冲液，例如磷酸盐、硼酸盐、pbs或tris-乙酸盐中。在搅拌下将适当数量的当量的髓样细胞激动剂-接头作为溶液添加。根据髓样细胞激动剂-接头构建体的物理性质，可以在添加髓样细胞激动剂-接头构建体之前引入助溶剂以促进溶解。根据所观察到的反应性，将反应物在室温搅拌2小时至约12小时。反应的进展通过lc-ms监测。一旦认为反应完成，则通过适用的方法去除剩余的髓样细胞激动剂-接头构建体，并将赖氨酸连接的髓样细胞激动剂缀合物交换至所需的配制缓冲液中。使用以下方案34中所述的条件，以10mg的抗体构建体(mab)和10当量的髓样细胞激动剂-接头开始合成赖氨酸-连接的缀合物(adc＝缀合物；atac＝髓样细胞激动剂-接头)。可以通过本文所述的方法确定单体含量和药物-抗体比率。实施例11链间二硫化物的基于半胱氨酸的生物缀合将抗体用适当数量的当量的还原剂(例如，二硫苏糖醇或三(2-羧乙基)膦)以约2mg/ml至约10mg/ml的浓度交换至适当的缓冲液(例如磷酸盐、硼酸盐、pbs或tris-乙酸盐)中。将所得溶液搅拌适当的时间和温度，以实现所需的还原。在搅拌下将髓样细胞激动剂-接头构建体作为溶液添加。根据髓样细胞激动剂-接头构建体的物理性质，在添加髓样细胞激动剂-接头构建体之前引入助溶剂以促进溶解。根据观察到的反应性，将反应物在室温下搅拌约1小时至约12小时。反应的进展通过液相色谱-质谱(lc-ms)监测。一旦认为反应完成，则通过适用的方法去除剩余的游离免疫刺激性化合物-接头构建体，并将缀合物交换至所需的配制缓冲液中。使用以下方案35所述的条件，以10mg的抗体构建体(mab)和7当量的化合物-接头开始合成此类基于半胱氨酸的缀合物。可以通过本文所述的方法确定单体含量和药物-抗体比。方案35：实施例12缀合至工程化的/位点特异性的半胱氨酸将抗体构建体以约2mg/ml至约10mg/ml的浓度交换至适当的缓冲液(例如磷酸盐、hepes、硼酸盐、pbs或tris-乙酸盐)中。向溶液中添加适当数量的当量(10至约40)的适当还原剂，例如二硫苏糖醇或三(2-羧乙基)膦。然后，根据观察到的反应性，将反应物在室温下孵育约1小时至约12小时。然后将还原的抗体构建体以约2mg/ml至约10mg/ml的浓度交换至适当的缓冲液中，例如磷酸盐、hepes、硼酸盐、pbs或tris-乙酸盐(用于去除先前描述的还原剂的目的)。向溶液中添加适当数量的当量(10至约40)的适当氧化剂，例如脱氢抗坏血酸。然后，根据观察到的反应性，将反应物在室温下孵育约1小时至约5小时。在搅拌下将髓样细胞激动剂-接头构建体作为溶液添加。根据化合物-接头构建体的物理性质，可以在添加化合物-接头构建体之前引入助溶剂以促进溶解。根据观察到的反应性，将反应物在室温下搅拌约2小时至约12小时。反应的进展通过lc-ms、疏水性相互作用色谱或其他适当的手段进行监测。一旦认为反应完成，则通过适用的方法去除剩余的髓样细胞激动剂-接头构建体，并将位点特异性半胱氨酸连接的缀合物交换至所需的配制缓冲液中。使用以下方案中描述的条件，从10mg抗体构建体(mab)和7当量的化合物-接头开始合成位点特异性半胱氨酸连接的缀合物。可以通过本文所述的和本领域已知的方法确定单体含量和药物-抗体比率。实施例13kd值的测定使用利用-2000或-3000(biacore,inc.,piscataway,n.j.)的表面等离子体共振测定，在25℃下用固定抗原cm5芯片以约10个响应单位(ru)来测量kd。简而言之，根据供应商的说明，用n-乙基-n'-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(edc)和n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)活化羧甲基化的葡聚糖生物传感器芯片(cm5,biacore,inc.)。将抗原用10mm乙酸钠(ph4.8)稀释至5μg/ml(～0.2μm)，之后以5μl/分钟的流速注射以获得约10个响应单位(ru)的偶联蛋白。在注射抗原之后，将1m乙醇胺注入以封闭未反应的基团。对于动力学测量，在25℃下将fab或缀合物的两倍连续稀释液(0.78nm至500nm)以约25μl/min的流速注入含0.05％聚山梨醇酯20(tween-20tm)表面活性剂的pbs(pbst)中。通过同时拟合缔合和解离传感图，使用简单的一对一langmuir结合模型(评价软件3.2版(evaluationsoftwareversion3.2))计算缔合率(kon)和解离率(koff)。将平衡解离常数(kd)计算为koff/kon的比率。参见，如,chen等人,j.mol.biol.293:865-881(1999)。如果通过以上的表面等离子体共振测定测得的结合速率超过106m-1s-1，则可以通过使用荧光猝灭技术来测定结合速率，所述荧光猝灭技术在25℃下，在如分光计中测量的渐增浓度的抗原存在下，测量ph为7.2的pbs中20nm抗-抗原抗体(fab形式或缀合形式)的荧光发射强度的增加或减少(激发＝295nm；发射＝340nm，16nm通带)，所述分光计如配备停流(stop-flow)的分光光度计(avivinstruments)或具有搅拌的比色杯的8000系列slm-amincotm分光光度计(thermospectronic)。实施例14摩尔比的测定该实施例说明了测定摩尔比的一种方法。将1微克的缀合物注入lc/ms，如配备有与agilent1290infinityuhplc系统耦合的agilent双喷射流esi源的agilent6550ifunnelq-tof。获得原始数据，并使用软件如有bioconfirm的agilentmasshunter定性分析软件(agilentmasshunterqualitativeanalysissoftware)利用最大熵反卷积算法进行反卷积。完整缀合物的平均质量由软件计算，其可以使用25％的高峰高度进行计算。然后将这一数据导入另一程序中，如agilent摩尔比计算器，以计算髓样细胞激动剂:缀合物的摩尔比。实施例15用于测定摩尔比的另外方法用于测定摩尔比的另一种方法如下。首先，将10μl5mg/ml缀合物溶液注入连接有tosohtskgelbutyl-nprtm疏水性相互作用色谱(hic)柱(2.5μm粒径，4.6mmx35mm)的hplc系统设置中。然后，经18分钟的过程，运行一种方法，其中在12分钟的过程中将流动相梯度从100％流动相a运行为100％流动相b，然后在100％流动相a下进行六分钟重新平衡。流速为0.8ml/min并且将检测器设置在280nm。流动相a是1.5m硫酸铵、25mm磷酸钠(ph7)。流动相b是于25mm磷酸钠(ph7)中的25％异丙醇。运行后，对色谱图进行积分，并通过对加权峰面积求和来确定摩尔比。实施例16示例性asgr1抗体的产生将asgr14a2重链和轻链dna克隆到单独表达载体中以用于人igg1抗体产生。将重链载体构建体和轻链载体构建体在expichotm系统中瞬时共表达以生成4a2igg1抗体。使用蛋白a柱，在geaktapuretm系统上将来自收获的expichotm上清液的蛋白纯化至均一，并使用分析性hplc-sec确认纯度。如果需要，可以在制备sec柱上进行另外的纯化以去除聚集体。以相同的方式产生了asgr172g9和176h4igg1抗体。4a2、72g9和176h4抗体的重链和轻链的序列示于wo2017/058944中，将其通过引用整体并出于所有目的并入本文。实施例17含fc结构域突变的示例性asgr1抗体的产生以与实施例16中所述类似的方式产生4a2fc变体。人igg1无效(null)fc结构域包含以下突变：基于eu编号的l234a、l235a、g237a和k322a。igg1self结构域包含以下突变：基于eu编号的s267e和l328f。lf变体含有l328f突变。igg1self和lf构建体还含有k322a突变以禁用cdc功能而不影响fcgr结合。生成以下构建体：a.4a2igg1selfk322ab.4a2igg1lfk322ac.4a2igg1无效d.4a2igg1无效selfe.4a2igg1无效l328f实施例18示例性半胱氨酸工程化的asgr1抗体的产生还生成了两种半胱氨酸工程化的变体(4a2igg1a114c-hc和4a2igg1v205c-lc)并且以与以上实施例15所述类似的方式产生蛋白。4a2igg1a114c-hc在基于eu编号的位置114处在重链上含有丙氨酸至半胱氨酸突变。4a2v205c-lc在位置205处在轻链上含有缬氨酸至半胱氨酸突变。结合数据确认了fc变体和半胱氨酸工程化变体上的突变不影响结合asgr1。实施例19使用elisafcgr结合测定表征半胱氨酸工程化的asgr14a2示例性抗体用50ul在1xpbs中稀释的0.1ug/ml的各种重组fcg受体(人和旱獭)包被elisa板。过夜孵育之后，将板用洗涤缓冲液(1xpbs+0.05％tween20)洗涤，用封闭缓冲液(1％脱脂牛奶于pbs中)封闭，并在室温下孵育1小时。然后用洗涤缓冲液洗涤elisa板，并以稀释3倍的100ug/ml的浓度添加asgr1测试样品(裸mab或半胱氨酸工程化的ab)。然后将板在室温下孵育1小时，并再次用洗涤缓冲液洗涤3次。然后将100ul以1:1000倍稀释的hrp山羊抗人fc抗体添加到每个孔中，并孵育另外一个小时。将板用洗涤缓冲液洗涤4次。然后添加50ul的tmbelisa底物用于显色，并通过添加50ul的2m硫酸终止反应。然后在读板仪上以450nm波长读取板。当在不同人和旱獭fcg受体(人fcgr2a、人fcgr2b、旱獭fcgr1、旱獭fcgr2b和旱獭fcgr3a)中比较4a2igg1和半胱氨酸工程化变体(参见实施例18)时，结合亲和力均是类似的，表明针对半胱氨酸工程化的变体引入的半胱氨酸突变不影响fcgr结合(数据未显示)。实施例20与人fcgr1受体结合的asgr14a2缀合物的表征使用octetred96tm仪器分析4a2igg1和缀合物的人fcγr1相互作用分析。缀合物是2.14缀合物(2.14缀合物是指以在3至5的平均dar经由链间二硫键与抗体缀合的2.14化合物接头。如果注意到a114c或v205c，则2.14缀合物是以约2的平均dar经由引入的半胱氨酸与抗体缀合的2.14化合物接头。除非另外指示，否则缀合的抗体是4a2抗体)。将抗体或缀合物固定在抗人fc生物传感器上，并与于pbs中的范围为1.2nm至1μm的各种浓度的单体fcγr1孵育。使用五步进行实验：(1)基线采集(60s)；(2)抗体或缀合物负载在抗人fc生物传感器上(120s)；(3)第二基线采集(60s)；(4)相互作用蛋白缔合用于kon测量(120s)；和(5)相互作用的fcγr1的解离用于koff测量(300s)。相互作用的单体fcγr1以3倍浓度系列的5-6个浓度使用。使用octet数据分析软件9.0(fortebio)tm分析数据并将其拟合至1:1结合模型。平衡解离常数(kd)由kon与koff的比率计算。从下表可以看出，含有self、lf突变的缀合物具有与具有野生型fc的缀合物和裸抗体相似的kd。仅含有无效fc突变的缀合物对人fcγr1具有极弱的结合。数据示于下表4：表4抗体/缀合物kd(以nm计)4a2igg10.284a2igg12.14缀合物0.294a2igg1self-2.14缀合物0.194a2igg1lf-2.14缀合物0.344a2igg1无效self-2.14缀合物极弱结合4a2igg1无效lf-2.14缀合物极弱结合实施例21在缀合之前和之后与fcgr结合的asgr14a2缀合物的表征用50ul在1xpbs中稀释的0.1ug/ml的各种重组fcg受体(人和旱獭)包被elisa板。过夜孵育之后，将板用洗涤缓冲液(1xpbs+0.05％tween20)洗涤，用封闭缓冲液(1％脱脂牛奶于pbs中)封闭，并在室温下孵育1小时。然后用洗涤缓冲液洗涤elisa板，并以稀释3倍的100ug/ml的浓度添加asgr1测试样品(裸mab或缀合物)。然后将板在室温下孵育1小时，并用洗涤缓冲液再洗涤3次。然后将100ul以1:1000倍稀释的hrp山羊抗人fc抗体添加到每个孔中，并孵育另外一个小时。将板用洗涤缓冲液洗涤4次。然后添加50ul的tmbelisa底物用于显色，并通过添加50ul的2m硫酸终止反应。然后在读板仪上以450nm波长读取板。比较在缀合之前和之后每种蛋白的结合曲线。表5比较了裸4a2fc变体和这些fc变体的2.14缀合物与3种旱獭fcgr(r1、r2b和r3a)的结合。数据显示结合是类似的，意味着tlr8小分子激动剂与抗体的缀合并未改变4a2igg1或其fc变体与旱獭fcγ受体的结合。如表6所示，结合至不同的人fcgr(r1、r21、r2b和r3)也获得了类似的观察结果。将tlr8激动剂(化合物1.50)与4a2或其fc变体的缀合并未显著影响与人fcgr的结合。通常，基于elisa测定，缀合物fc变体显示了类似的与人和旱獭fcgri和fcgr3的结合。然而，fc无效背景中的self和lf突变仅恢复与人fcgr2b的结合而非与旱獭fcgr2b的结合。表5表6实施例22pbmc-肝细胞共培养测定中的缀合物活性测定如下进行pbmc-肝细胞共培养测定。将pbmc通过密度梯度离心从人血中分离，重悬于完全rpmi中，并涂铺于96孔平底微量滴定板(125,000/孔)中。然后添加asgr1阳性hepg2细胞或asgr1阴性skbr3细胞(25,000/孔)以及滴定浓度的asgr1-tlr8激动剂缀合物。asgr1-tlr8激动剂缀合物是2.14缀合物。过夜培养之后，收获上清液，并通过alphalisa测定tnfα水平。参照图1，如通过tnfα产生所测量的，asgr1-tlr8激动剂缀合物对asgr1阳性肝细胞细胞系具有活性，但对asgr1阴性乳腺癌细胞系没有活性。实施例23通过pbmc进行的tnfα产生由免疫刺激性缀合物诱导将pbmc通过ficoll梯度离心从人血中分离，重悬于crpmi中，并涂铺于96孔平底微量滴定板中(125,000/孔)。然后添加hepg2(asgr1+)细胞(25,000/孔)以及滴定浓度的asgr1-tlr8缀合物或未缀合的亲本抗体(作为对照)。过夜培养后，收获上清液，并通过alphalisa测定tnfα水平。图2说明在表达asgr1的肝细胞细胞系存在下，asgr1-tlr82.14缀合物活化人pbmc。实施例24通过pbmc进行的tnfα产生由半胱氨酸工程化的缀合物诱导将pbmc通过ficoll梯度离心从人血中分离，重悬于crpmi中，并涂铺于96孔平底微量滴定板中(125,000/孔)。然后添加hepg2(asgr1+)细胞(25,000/孔)以及滴定浓度的2.14缀合物、2.14半胱氨酸工程化的缀合物(2.14半胱氨酸工程化的缀合物具有约2的平均dar并经由引入的半胱氨酸残基缀合)或未缀合的亲本抗体(作为对照)。过夜培养后，收获上清液，并通过alphalisa测定tnfα水平。如图3所示，在表达asgr1肝细胞细胞系存在下，asgr1半胱氨酸工程化的缀合物活化人pbmc。实施例25通过pbmc进行的tnfα产生由具有各种接头的tlr8缀合物诱导将pbmc通过ficoll梯度离心从人血中分离，重悬于crpmi中，并涂铺于96孔平底微量滴定板中(125,000/孔)。然后添加hepg2(asgr1+)细胞(25,000/孔)以及滴定浓度的具有不同接头的asgr1-tlr8缀合物或未缀合的亲本抗体(作为对照)。过夜培养后，收获上清液，并通过alphalisa测定tnfα水平。图例中的缀合物编号是指表3中的化合物-接头。结果表明，asgr1-tlr8缀合物在多种接头变体(包括可切割和不可切割的接头)的情况下显示出有效的活性。如通过ec50测量的大小和效力都可以通过接头选择来改变。参见图4。实施例26通过pbmc进行的tnfα产生由混合的tlr8-tlr7缀合物诱导将pbmc通过ficoll梯度离心从人血中分离，重悬于crpmi中，并涂铺于96孔平底微量滴定板中(125,000/孔)。然后添加hepg2(asgr1+)细胞(25,000/孔)以及滴定浓度的具有各种比率的tlr8:tlr7激动剂有效负载的asgr1缀合物。过夜培养后，收获上清液，并通过alphalisa测定tnfα水平。缀合物是2.14tlr8缀合物和tlr72.39缀合物(即，经由链间二硫化物缀合至asgr14a2抗体的2.39化合物接头具有4的平均dar)。图5显示了混合的tlr8-tlr7asgr1缀合物诱导肝细胞共培养物中人pbmc产生tnf-a。该实施例和实施例27中使用的tlr7化合物-接头如下所示：实施例27通过pbmc进行的细胞因子产生由混合的tlr8-tlr7缀合物诱导双重有效负载tlr8-tlr7asgr1缀合物诱导肝细胞共培养物中的人pbmc产生细胞因子。将pbmc通过ficoll梯度离心从人血中分离，重悬于crpmi中，并涂铺于96孔平底微量滴定板中(125,000/孔)。然后添加hepg2(asgr1+)细胞(25,000/孔)以及滴定浓度的具有各种比率的tlr8:tlr7激动剂有效负载的asgr1缀合物。过夜培养后，收获上清液，并通过alphalisa测定tnfα、il012p40和ifna水平。结果表明每种tlr配体在混合的缀合物中有活性，其中通过tlr7活化产生ifna并且通过tlr8活化产生tnfa和il12p40。参见图6a-c。实施例28由asgr1缀合物诱导的pbmc产生tnfα是fc依赖性的人pbmc的asgr1缀合物活化是fc依赖性的。将pbmc通过ficoll梯度离心从人血中分离，重悬于crpmi中，并涂铺于96孔平底微量滴定板中(125,000/孔)。然后添加hepg2(asgr1+)细胞(25,000/孔)以及滴定浓度的具有不同fc区的2.14缀合物或未缀合的亲本抗体(作为对照)。过夜培养后，收获上清液，并通过alphalisa测定tnfα水平。结果表明，对于asgr1-tlr8缀合物，fcgr2亲合力增加可以进一步增加活性，并且增加的fcgr2亲合力可以在fcgr1和fcgr3结合不存在下支持活化。参见图7。实施例29tlr7和tlr8小分子诱导旱獭tnfα表达根据制造商的方案，使用微型试剂盒(qiagen,maryland,md)从刺激的美洲旱獭(monax)pbmc中提取总rna。简而言之，将细胞沉淀，并重悬于600ulrlt缓冲液中。将样品涡旋，然后通过qiashredder柱运行。从上清液中提取rna，并以30ul体积洗脱。使用nanodropone分光光度计(thermofisherscientific,waltham,ma,usa)评估rna纯度(a260/a280)。为了去除基因组dna，在37℃下，将800ngrna与2单位的dna酶i(无rna酶)(newenglandbiolabs,ipswich,ma,usa)在dna酶反应缓冲液中一起孵育10min。将反应物在75℃下终止孵育10min。根据制造商的方案，使用用于rt-pcr的superscriptiii第一链合成系统(invitrogen,carlsbad,ca,usa)生成cdna。根据制造商的说明，使用powergreenpcrmaster-mix(fostercity,ca,appliedbiosystems)通过熔融曲线分析评估了每种taqman引物对的寡核苷酸二聚体的生成。设计了导致寡核苷酸二聚体生成的引物并对其进行美洲旱獭tnfa测试。所用的正向引物和反向引物分别是：5’cctgcaaacgggctatacctt3’和5’gtgtgggtgaggagcacgta3’。所用的探针是5’6fam-cagccttggcccttgaagaggacct-tam3’。根据制造商的方案，所有实时pcr测定均使用fastuniversalpcrmastermix(2x)，noamperaseung(appliedbiosystems)进行。每个反应测定1ulcdna样品。每个反应由1个95℃持续20s的循环，然后是50个的95℃持续3s和60℃持续30s的循环组成。美洲旱獭tnfα基因的实时pcr运行包括tnfαcdna标准品、无模板对照和测试样品。使用steponesoftware，2.3版(appliedbiosystems)在steponeplusfastreal-timepcr系统上运行所有实时pcr反应。使用steponesoftware分析数据以生成每个样品的ct值。使用合成的美洲旱獭tnfαcdna标准品产生了ct对比log拷贝数标准曲线的图。然后确定每个数据点的ct值并将其归一化至标准曲线以获得拷贝数。生成了针对不同tlr7和tlr8化合物的每ngmrna拷贝数的图(参见图8)。该图显示了tlr7和tlr8对美洲旱獭tnfα基因的有效活化。tlr8小分子是化合物1.50，并且tlr7小分子是实施例30asgr1tlr8缀合物在靶细胞存在下有条件地活化旱獭pbmc将购自iqbiosciences(目录号iqb-wpb102)的土拨鼠(woodchuck)外周血单核细胞(wpbmc)解冻，并以5:1的比率与hepg2细胞、sk-br-3细胞一起或自身接种于24孔板中，并与2.14缀合物、裸抗体或化合物1.50的连续稀释液(300nm，于含10％fbsrpmi的培养基中)合并，并一起孵育24小时。孵育后，将wpbmc裂解并使用qiagenrneasy试剂盒纯化总rna。根据制造商的方案，使用微型试剂盒(qiagen,maryland,md)从刺激的美洲旱獭pbmc中提取总rna。简而言之，将细胞沉淀，并重悬于600ulrlt缓冲液中。将样品涡旋，然后通过qiashredder柱运行。从上清液中提取rna，并以30ul体积洗脱。使用nanodropone分光光度计(thermofisherscientific,waltham,ma,usa)评估rna纯度(a260/a280)。为了去除基因组dna，在37℃下，将800ngrna与2单位的dna酶i(无rna酶)(newenglandbiolabs,ipswich,ma,usa)在dna酶反应缓冲液中一起孵育10min。将反应物在75℃下终止孵育10min。根据制造商的方案，使用用于rt-pcr的superscriptiii第一链合成系统(invitrogen,carlsbad,ca,usa)生成cdna。根据制造商的说明，使用powergreenpcrmaster-mix(fostercity,ca,appliedbiosystems)通过熔融曲线分析评估了每种taqman引物对的寡核苷酸二聚体的生成。设计了导致寡核苷酸二聚体生成的引物并对其进行美洲旱獭tnfa测试。所用的正向引物和反向引物分别是：5’cctgcaaacgggctatacctt3’和5’gtgtgggtgaggagcacgta3’。所用的探针是5’6fam-cagccttggcccttgaagaggacct-tam3’。根据制造商的方案，所有实时pcr测定均使用fastuniversalpcrmastermix(2x)，noamperaseung(appliedbiosystems)进行。每个反应测定1ulcdna样品。每个反应由1个95℃持续20s的循环，然后是50个的95℃持续3s和60℃持续30s的循环组成。美洲旱獭tnfα基因的实时pcr运行包括tnfαcdna标准品、无模板对照和测试样品。使用steponesoftware，2.3版(appliedbiosystems)在steponeplusfastreal-timepcr系统上运行所有实时pcr反应。使用steponesoftware分析数据以生成每个样品的ct值。生成每种缀合物处理的样品的ct值，并从标准曲线确定拷贝数。将相对于对照样品的拷贝数针对不同的细胞处理作图。仅当存在asrg1+靶细胞(hepg2)和pbmc时，才能观察到美洲旱獭tnfα基因活化。skbr3(asgr1阴性细胞系)+美洲旱獭pbmc或单独的美洲旱獭pbmc不活化tnfα基因。参见图9。实施例31asgr1缀合物该实施例描述了asgr1缀合物治疗乙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合asgr1的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr7激动剂和将tlr7激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有乙型肝炎病毒感染的对象施用asgr1缀合物。对象可以是人或非人动物。asgr1缀合物增强了针对乙型肝炎病毒的免疫应答。实施例32asgr1缀合物该实施例描述了双重有效负载tlr8-tlr7asgr1缀合物治疗乙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合asgr1的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr7激动剂和将tlr7激动剂共价连接至抗体构建体的接头、及tlr8激动剂和将tlr8激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有乙型肝炎病毒感染的对象施用asgr1缀合物。对象可以是人或非人动物。asgr1缀合物增强了针对乙型肝炎病毒的免疫应答。实施例33asgr2缀合物该实施例描述了asgr2缀合物治疗对象中的乙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合asgr2的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr7激动剂和将tlr7激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有乙型肝炎病毒感染的对象施用asgr2缀合物。对象可以是人或非人动物。asgr2缀合物增强了针对乙型肝炎病毒的免疫应答。实施例34trf2缀合物该实施例描述了trf2缀合物治疗对象中的乙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合trf2的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr7激动剂和将tlr7激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有乙型肝炎病毒感染的对象施用trf2缀合物。对象可以是人或非人动物。trf2缀合物增强了针对乙型肝炎病毒的免疫应答。实施例35asgr1缀合物该实施例描述了asgr1缀合物治疗对象中的乙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合asgr1的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr8激动剂和将tlr8激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有乙型肝炎病毒感染的对象施用asgr1缀合物。对象可以是人或非人动物。asgr1缀合物增强了针对乙型肝炎病毒的免疫应答。实施例36asgr2缀合物该实施例描述了asgr2缀合物治疗对象中的乙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合asgr2的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr8激动剂和将tlr8激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有乙型肝炎病毒感染的对象施用asgr2缀合物。对象可以是人或非人动物。asgr2缀合物增强了针对乙型肝炎病毒的免疫应答。实施例37trf2缀合物该实施例描述了trf2缀合物治疗对象中的乙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合trf2的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr8激动剂和将tlr8激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有乙型肝炎病毒感染的对象施用trf2缀合物。对象可以是人或非人动物。trf2缀合物增强了针对乙型肝炎病毒的免疫应答。实施例38asgr1缀合物该实施例描述了asgr1缀合物治疗对象中的丙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合asgr1的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr7激动剂和将tlr7激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有丙型肝炎病毒感染的对象施用asgr1缀合物。对象可以是人或非人动物。asgr1缀合物增强了针对丙型肝炎病毒的免疫应答。实施例39asgr2缀合物该实施例描述了asgr2缀合物治疗对象中的丙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合asgr2的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr7激动剂和将tlr7激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有丙型肝炎病毒感染的对象施用asgr2缀合物。对象可以是人或非人动物。asgr2缀合物增强了针对丙型肝炎病毒的免疫应答。实施例40trf2缀合物该实施例描述了trf2缀合物治疗对象中的丙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合trf2的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr7激动剂和将tlr7激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有丙型肝炎病毒感染的对象施用trf2缀合物。对象可以是人或非人动物。trf2缀合物增强了针对丙型肝炎病毒的免疫应答。实施例41asgr1缀合物该实施例描述了asgr1缀合物治疗对象中的丙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合asgr1的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr8激动剂和将tlr8激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有丙型肝炎病毒感染的对象施用asgr1缀合物。对象可以是人或非人动物。asgr1缀合物增强了针对丙型肝炎病毒的免疫应答。实施例42asgr2缀合物该实施例描述了asgr2缀合物治疗对象中的丙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合asgr2的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr8激动剂和将tlr8激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有丙型肝炎病毒感染的对象施用asgr2缀合物。对象可以是人或非人动物。asgr2缀合物增强了针对丙型肝炎病毒的免疫应答。实施例43trf2缀合物该实施例描述了trf2缀合物治疗对象中的丙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合trf2的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr8激动剂和将tlr8激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有丙型肝炎病毒感染的对象施用trf2缀合物。对象可以是人或非人动物。trf2缀合物增强了针对丙型肝炎病毒的免疫应答。实施例44乙型肝炎病毒抗原缀合物该实施例描述了乙型肝炎病毒抗原缀合物治疗对象中的乙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合乙型肝炎表面病毒抗原的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr7激动剂和将tlr7激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有乙型肝炎病毒感染的对象施用乙型肝炎病毒抗原缀合物。对象可以是人或非人动物。乙型肝炎病毒抗原缀合物增强了针对乙型肝炎病毒的免疫应答。实施例45乙型肝炎病毒抗原缀合物该实施例描述了乙型肝炎病毒抗原缀合物治疗对象中的乙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合乙型肝炎表面病毒抗原的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr8激动剂和将tlr8激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有乙型肝炎病毒感染的对象施用乙型肝炎病毒抗原缀合物。对象可以是人或非人动物。乙型肝炎病毒抗原缀合物增强了针对乙型肝炎病毒的免疫应答。实施例46丙型肝炎病毒抗原缀合物该实施例描述了丙型肝炎病毒抗原缀合物治疗对象中的丙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合丙型肝炎病毒抗原的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr7激动剂和将tlr7激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有丙型肝炎病毒感染的对象施用丙型肝炎病毒抗原缀合物。对象可以是人或非人动物。丙型肝炎病毒抗原缀合物增强了针对丙型肝炎病毒的免疫应答。实施例47丙型肝炎病毒抗原缀合物该实施例描述了丙型肝炎病毒抗原缀合物治疗对象中的丙型肝炎的用途。产生了一种缀合物，其包含含有特异性结合丙型肝炎病毒抗原的靶向结合结构域和共价连接至靶向结合结构域的fc结合结构域的抗体构建体、tlr8激动剂和将tlr8激动剂共价连接至抗体构建体的接头。向具有丙型肝炎病毒感染的对象施用丙型肝炎病毒抗原缀合物。对象可以是人或非人动物。丙型肝炎病毒抗原缀合物增强了针对丙型肝炎病毒的免疫应答。实施例48通过pbmc进行的tnfα表达由髓样细胞激动剂缀合物诱导该实施例显示，在表达肝脏细胞抗原的细胞存在下，髓样细胞激动剂缀合物可增加pbmc产生促炎性细胞因子tnfα。通过标准方法从土拨鼠血液中分离pbmc。简而言之，将pbmc通过ficoll梯度离心分离，重悬于rpmi中，并涂铺于96孔平底微量滴定板(～125,000/孔)中。然后添加表达人肝脏抗原(如，asgr2)的重组细胞(如，hek)(～25,000/孔)以及滴定浓度的缀合物或未缀合的亲本抗体(作为对照)。缀合物含有针对缀合至tlr8苯并氮杂激动剂的肝脏细胞抗原的抗体。过夜培养后，收获上清液，并通过alphalisa测定tnfα水平。tnfα的表达在缀合物存在下增加。实施例49慢性土拨鼠肝炎病毒感染模型该实施例描述了asgr1或asgr2缀合物治疗土拨鼠中慢性土拨鼠肝炎病毒(whv)感染的用途。用抗asgr1或抗asgr2缀合物(包括抗asgr1或抗asgr2抗体缀合的tlr8苯并氮杂激动剂)、对照缀合物或单独的tlr8苯并氮杂激动剂静脉内处理具有慢性whv感染的土拨鼠。每组土拨鼠具有3-5只动物。抗asgr1或抗asgr2抗体结合相应的土拨鼠蛋白。施用递增剂量的抗asgr1或抗asgr2缀合物、对照缀合物或tlr8苯并氮杂激动剂，并监测whvdna或whv表面抗原的水平。抗asgr1或asgr2缀合物增强了针对whv的免疫应答。实施例50慢性土拨鼠肝炎病毒感染模型该实施例描述了抗土拨鼠肝炎缀合物治疗土拨鼠中慢性土拨鼠肝炎病毒(whv)感染的用途。用抗whv缀合物(包括抗whv表面抗原抗体缀合的tlr8苯并氮杂激动剂)、对照缀合物或单独的tlr8苯并氮杂激动剂静脉内处理具有慢性whv感染的土拨鼠。每组土拨鼠具有3-5只动物。施用递增剂量的抗whv缀合物、对照缀合物或tlr8苯并氮杂激动剂，并监测whvdna或whv表面抗原的水平。抗whv缀合物增强了针对whv的免疫应答。尽管已经在本文中示出和描述了本公开内容的方面，但是对于本领域技术人员显而易见的是，这些方面仅以示例的方式提供。在不脱离本公开内容的情况下，本领域技术人员现在将想到许多变化、改变和替代。应当理解，在实践本公开内容中可以采用本文所述的本公开内容的方面的各种替代方案。以下权利要求意图限定本公开内容的范围，并且由此涵盖了这些权利要求及其等效物范围内的方法和结构。当前第1页12