抗因子XI/XIa抗体的逆转结合剂及其用途的制作方法

本申请要求2017年11月22日提交的美国临时申请号62/589,809的权益，该临时申请在此以其整体引入作为参考。本公开涉及结合剂(例如抗独特型抗体)，其特异性结合抗因子xi和/或抗因子xia(“抗fxi/fxia”)抗体，并逆转抗因子xi和/或抗因子xia抗体的一种或多种抗凝血作用，以及涉及药物组合物及其使用方法，例如逆转此类抗因子xi和/或抗因子xia抗体的抗凝血作用的方法。
背景技术：
：血栓形成是指遗传性和获得性风险因素的组合之后的血管内血栓形成，称为血栓形成或高凝状态。血管壁损伤、淤滞、血小板反应性增强和凝血因子活化是血栓形成的一些基本特征。血栓形成可能同时发生在静脉和动脉循环中，并可能导致深静脉血栓形成(dvt)、肺栓塞和中风。如果在动脉系统中发生血栓，则会发生下游缺血，从而导致急性冠状动脉综合征(acs)、缺血性中风和急性肢体缺血。静脉系统中的血栓形成通常会导致深静脉血栓形成、肺栓塞和慢性血栓栓塞性肺动脉高压。房颤(af)患者的左心耳中也可以形成血栓，血栓移位可以导致潜在的破坏性并发症，即血栓栓塞性中风和全身性栓塞。当前可用的抗血栓药物包括低分子量肝素(lmwh)、凝血酶抑制剂和因子xa(fxa)抑制剂，均具有明显的出血风险(weitzj.i.(2010)thromb.haemost.103,62)。非常需要开发一种不影响止血，并因此不导致出血并发症的抗血栓药，以及特定的逆转药。目前的抗凝剂可以注射或口服。可注射的抗凝剂lmwh被广泛使用，并且与以前使用的普通肝素相比，具有改善的治疗效果。在过去的几十年中，最常用的口服抗凝剂是华法林(warfarin)。华法林具有狭窄的治疗窗口，需要频繁监测凝血状态，并显示多种药物-药物相互作用。最近，可直接口服的fxa和凝血酶抑制剂进入了抗凝剂市场，并得到了越来越多的应用。lmwh、fxa抑制剂和凝血酶抑制剂在预防术后静脉血栓栓塞性疾病中、在治疗自发性dvt和肺栓塞中以及在房颤的中风预防中均有效。但是，这些抗凝剂还与出血并发症相关，这些出血并发症通常与使用较旧药物华法林和普通肝素所观察到的出血并发症相当。在advance-2临床试验中，在全膝关节置换术后患者中比较了fxa抑制剂阿哌沙班(eliquis)和lmwh依诺肝素(enoxaparin)。尽管急性阿哌沙班治疗比依诺肝素在预防静脉血栓栓塞性疾病方面更有效，但两种药物均具有明显的出血风险。临床相关的出血发生在4％接受阿哌沙班的患者中和5％依诺肝素治疗的患者中(lassen,m.r.等(2009)n.engl.j.med.361,594)。在re-ly试验中，在房颤和中风风险患者中将直接凝血酶抑制剂达比加群(pradaxa)与华法林进行了比较(connolly,s.j.等(2009)n.engl.j.med.361,1139)。长期达比加群治疗与中风或全身性栓塞的风险显著降低有关。但是，每天接受150mg达比加群治疗的患者中有3.1％发生了重大出血并发症，接受华法林治疗的患者中有3.4％发生了重大出血并发症(p＝0.31)。房颤(af)仍然是临床实践中最常见的心律不齐，约占心律不齐住院的三分之一。目前，据估计，该病在欧洲影响了超过600万的患者，在美国影响了大约230万患者，并且由于老龄化人口的比例不断增加，这一数字继续迅速增长。据估计，大约65％的65岁以上人口和10％的80岁以上人口会发展为af，但是，af的患病率正在上升，超出了仅以年龄即可解释的范围。诸如高血压、充血性心力衰竭、左心室肥大、冠状动脉疾病和糖尿病以及阻塞性睡眠呼吸暂停的房颤风险因素也在上升。因此，在未来的三十年中，在西方人群中，患有房颤的个体数量预计将增加两到三倍(kannel和benjamin(2008)medclinnortham.2008；92:17-40；bunch等(2012)jinnovationsofcardrhythmmanag2012；3:855–63)。af的主要风险是栓塞性中风增加四到五倍。与af相关的中风风险随着年龄的增长而急剧增加，到80-89岁时达到23.5％。af与两性死亡率倍增相关(kannel和benjamin2008)。af也与认知能力下降和所有形式的痴呆症独立相关(marzona等(2012)cmaj2012；184:329–36；geita等2013；bunch等2012)。大多数af患者需要终生抗凝治疗，以防止心脏栓塞性中风和全身性栓塞。cha2ds2-vasc风险评分是一种经过验证且广泛使用的分层工具，可预测房颤患者的血栓栓塞风险并鉴定可从抗凝治疗获益的患者(lip2011；camm等(2012)eurheartj2012；33:2719–2747)；积累的证据显示，cha2ds2-vasc在鉴定发展为中风和血栓栓塞的患者方面至少与chads2评分一样准确，甚至可能更好，并且在鉴定“真正低风险”的af患者方面绝对更好。据估计，有85至90％的af患者需要抗凝治疗。在包括6个评估维生素k拮抗剂(vka)在减少中风和全身性栓塞中的作用的试验的荟萃分析中，观察到中风发生率高度显著的风险降低(中风的相对风险降低67％)。调整剂量的vka与对照相比，全因死亡率显著降低(26％)(hart,pearce和aguilar(2007)anninternmed2007；146:857–867)。国际标准化比率(inr)目标在2到3之间与最佳收益风险比率相关(hylek等(2003)nengljmed；349:1019–1026)，并已被国际和国家指南普遍采用。近年来，新的口服抗凝剂(noac)(也称为直接口服抗凝剂(doac))已获批准并引入临床实践。这些药物在减少血栓栓塞性疾病方面至少与华法林同样有效或更好(connolly等(2009)nengljmed；361:1139–51；connolly等(2011)nengljmed；364:806–17；patel等(2011)nengljmed2011；365:883–91)。noac还与华法林最具破坏性的并发症(即出血性中风和颅内出血)的大量减少相关。重大出血事件与进行良好的华法林治疗相似或略低。此外，noac发生药物-药物相互作用的可能性比华法林更低，无需常规监测即可使用；预期这将便于其在日常医疗实践中的使用。尽管最近有所改善，但是使用抗凝剂的出血风险仍然很高。例如，在rocket研究中，利伐沙班(rivaroxaban)治疗的患者的重大的和临床相关的非重大出血的年发生率为14.9％，重大出血事件的年发生率为3.6％(patel等,2011)。定义为hasbled风险评分≥3的高出血风险患者中重大出血的年发生率>5％(gallego等(2012)carcarrhythmelectrophysiol.；5:312–318)。重大出血是特别相关的临床结果；例如，在rocket研究中，一旦发生重大出血，利伐沙班组的全因死亡率为20.4％，华法林组为26.1％。一旦发生重大出血事件，利伐沙班和华法林组的中风和全身栓塞分别发生在4.7％和5.4％的患者中(piccini等(2014)eurheartj；35:1873–80)。重大出血的发生也严重影响了住院时间、输血产品和资源利用。出血风险也是合格患者未接受抗凝剂治疗的主要原因。在包含来自35个国家的182家医院以及5333例急诊和住院的af患者的数据的欧洲心脏房颤调查中，只有67％的合格患者出院时接受口服抗凝剂(nieuwlaat等(2005)eurheartj；26,2422–2434)。因此，存在未得到满足的对更安全的疗法的医学需要，该疗法可以降低af血栓栓塞性并发症，如中风、全身性栓塞、认知能力下降和死亡，其疗效与现有疗法相当，但出血风险较低。因子xi(fxi)在内在和外在凝血途径以及桥接血浆止血的起始和放大阶段中都起着重要作用(gailani和renné(2007)arteriosclerthrombvascbiol；27(12):2507-13)。因子xii和凝血酶均可激活fxi，导致持续的凝血酶产生和纤维蛋白溶解抑制。fxi在“血管损伤后”在高组织因子环境中的正常止血中起着次要作用，而在血栓形成中起着关键作用。严重的fxi缺乏与缺血性中风和静脉血栓栓塞事件的发生率较低相关(salomon等(2008)blood；111(8):4113-7；salomon等(2011)thrombhaemost；105(2):269-73)。此外，在一项基于人群的研究中，由于血栓栓塞事件的发生率较低，因此引起了严重fxi缺乏的生存优势(duga和salomon,(2013)seminthrombhemost；39(6):621-31)。具有严重fxi缺乏的个体的出血表现很少见，通常是轻度的，与损伤有关，并且优选影响纤溶活性增强的组织，例如口腔黏膜、鼻黏膜和尿道(bolton-maggs,(2000)haemophilia；6suppl1:100-9)。至关重要的器官出血很少或不存在。因此，作为降低出血倾向的努力的一部分，还存在未得到满足的对用于抗凝剂治疗的特定逆转剂的医学需要，例如，在急诊手术/紧急操作以及危及生命或无法控制的出血需要逆转抗凝剂治疗效果的情况下。发明概述与noac相比，较低的出血风险与涉及抗fxi/fxia抗体的抗凝剂治疗有关。例如，抗因子xi/fxia抗体nov1401是结合fxi的催化结构域的人抗体。nov1401高效抑制酶原(fxi)和活化因子xi(fxia)。在体外和体内研究中，抗fxi/fxia抗体nov1401剂量依赖性地延长了活化的部分凝血致活酶时间(aptt)。以3mg/kg剂量单次皮下(s.c.)施用nov1401后，在食蟹猴中观察到持续的抗凝活性持续超过一个月。此外，抗fxi/fxia抗体nov1401在用人fxi重构的fxi-/-小鼠中防止了由fecl3诱导的实验性颈动脉血栓形成，并诱导了aptt的延长。在食蟹猕猴中进行的为期13周的符合良好实验室规范(glp)要求的毒性研究中，nov1401的耐受性良好。尽管与noac相比，抗fxi/fxia抗体(如抗体nov1401)的出血风险更低，但在某些情况下，由于外伤、手术、操作、联合用药，以及增加出血风险的合并症(如高血压、心力衰竭、肾功能不全、肝功能不全、年龄较大、以前的出血事件、跌倒的风险、使用抗血小板剂或非甾体类抗炎药等)的高发病率，出血事件仍可能发生。因此，作为降低出血倾向的努力的一部分，本公开描述了解决未得到满足的对用于抗因子xi/xia抗体(特异性结合fxi/fxia的催化结构域的抗fxi/fxia抗体)的抗凝剂治疗的特定逆转剂的医学需要的策略。在具体方面，在需要逆转治疗的抗凝作用的情况下，例如在急诊手术/紧急操作中以及在危及生命或无法控制的出血情况下，管理出血或出血风险是有益的。在具体方面，管理出血或出血风险对于被鉴定为具有高出血风险(例如先前的出血史)的患者是有益的。本公开涉及结合剂，其是抗独特型抗体，例如全长igg及其片段，如fab，其特异性结合这样的抗体，所述抗体特异性结合凝血因子xi和xia(活化的因子xi)(下文中有时也称为“fxi”、“fxia”和类似术语)，并且结合剂能够逆转此类抗fxi/fxia抗体的一种或多种抗凝血作用(例如能够减少aptt或出血时间)和/或抑制此类抗fxi/fxia抗体与fxi/fxia的结合。具体而言，本公开还涉及包含此类结合剂的药物组合物，以及在用抗fxi/fxia抗体治疗的患者(例如人患者)中逆转抗fxi/fxia抗体的一种或多种抗凝作用的方法，其包括施用结合剂。在急诊手术/紧急操作以及危及生命或无法控制的出血需要逆转如抗fxi/xia抗体的抗凝作用的情况下，此类能够逆转抗fxi/fxia抗体的一种或多种抗凝作用的结合剂满足了未得到满足的需要。在具体方面，正在用抗fxi/fxia抗体治疗此类患者(例如人患者)，以预防和/或治疗血栓形成或血栓栓塞性疾病/障碍(例如血栓性中风、房颤、房颤中风预防(spaf)、深静脉血栓形成、静脉血栓栓塞、肺栓塞、急性冠脉综合征(acs)、缺血性中风、急性肢体缺血、慢性血栓栓塞性肺动脉高压、全身性栓塞)。在具体方面，本文提供的逆转抗fxi/fxia抗体的一种或多种抗凝作用的结合剂是抗独特型抗体，并且在其他具体方面，此类抗独特型抗体是全长igg。在其他具体方面，此类抗独特型抗体是单克隆抗体，例如人单克隆抗体，例如重组人单克隆抗体。在具体方面，本公开还涉及包含编码本文提供的结合剂的序列的分离的多核苷酸和核酸，涉及包含本文提供的一种或多种多核苷酸或核酸的载体，涉及包含此类载体或多核苷酸或核酸的宿主细胞。在具体方面，该宿主细胞是非人哺乳动物细胞，例如中国仓鼠卵巢(cho)细胞。在以下方面中描述本公开的非限制性实施方案：1.药物组合物，其包含特异性结合靶抗体的结合剂，该靶抗体在催化结构域内结合人因子xi(“fxi”)和/或因子xia(“fxia”)，其中该结合剂抑制该靶抗体的抗凝活性，其中该结合剂选自表2，并且其中该结合剂为包含蔗糖和/或组氨酸的液体制剂。2.实施方案1的药物组合物，其中该液体制剂包含蔗糖和组氨酸。3.实施方案1或2的药物组合物，其中该液体制剂包含至少200、210、220、230、240或250mm蔗糖。4.实施方案3的药物组合物，其中该液体制剂包含220mm蔗糖。5.任一前述实施方案的药物组合物，其中该液体制剂包含至少10mm或至少20mm组氨酸。6.任一前述实施方案的药物组合物，其中该液体制剂包含20mm组氨酸。7.任一前述实施方案的药物组合物，其中该液体制剂的ph为4.5-7。8.任一前述实施方案的药物组合物，其中该液体制剂的ph为5.5。9.任一前述实施方案的药物组合物，其中该结合剂按50mg/ml至150mg/ml范围内的浓度配制。10.任一前述实施方案的药物组合物，其中该结合剂按至少150mg/ml的浓度配制。11.任一前述实施方案的药物组合物，其中该液体制剂包含220mm蔗糖、20mm组氨酸、0.04％聚山梨酯20和150mg/ml浓度的结合剂，ph为5.5。12.任一前述实施方案的药物组合物，其制剂为用于皮下或静脉内施用。13.任一前述实施方案的药物组合物，其中该靶抗体包含：(i)含有氨基酸序列seqidno:12的重链可变区(vh)和含有氨基酸序列seqidno:23的轻链可变区(vl)；或(ii)含有氨基酸序列seqidno:14的重链和含有氨基酸序列seqidno:25的轻链。14.任一前述实施方案的药物组合物，其中该结合剂是包含可变重链区(vh)和轻链可变区(vl)的抗体或其片段，其中：a)含有氨基酸序列seqidno:39的vh和含有氨基酸序列seqidno:55的vl；b)含有氨基酸序列seqidno:71的vh和含有氨基酸序列seqidno:87的vl；c)含有氨基酸序列seqidno:103的vh和含有氨基酸序列seqidno:119的vl；d)含有氨基酸序列seqidno:135的vh和含有氨基酸序列seqidno:151的vl；e)含有氨基酸序列seqidno:167的vh和含有氨基酸序列seqidno:183的vl；f)含有氨基酸序列seqidno:199的vh和含有氨基酸序列seqidno:215的vl；g)含有氨基酸序列seqidno:231的vh和含有氨基酸序列seqidno:247的vl；h)含有氨基酸序列seqidno:263的vh和含有氨基酸序列seqidno:279的vl；i)含有氨基酸序列seqidno:295的vh和含有氨基酸序列seqidno:311的vl；或j)含有氨基酸序列seqidno:327的vh和含有氨基酸序列seqidno:343的vl。15.任一前述实施方案的药物组合物，其中该结合剂是表2中所示的抗体fabidt1、idt2、idt3、idt4、idt5、idt6、idt7、idt8、idt9或idt10，或是表2中所示的抗体iggidt11或idt12。16.结合剂，其特异性结合在催化结构域内结合人fxi和/或fxia的靶抗体，其中该结合剂抑制该靶抗体的抗凝活性，其中该靶抗体包含：(i)含有氨基酸序列seqidno:12的重链可变区(vh)和含有氨基酸序列seqidno:23的轻链可变区(vl)；或(ii)含有氨基酸序列seqidno:14的重链和含有氨基酸序列seqidno:25的轻链；和其中该结合剂是抗体或其抗原结合片段，其包含：(a)含有氨基酸序列seqidno:347的重链和含有氨基酸序列seqidno:57的轻链；或(b)含有氨基酸序列seqidno:349的重链和含有氨基酸序列seqidno:89的轻链。17.结合剂，其特异性结合在催化结构域内结合人fxi和/或fxia的靶抗体，其中该结合剂逆转该靶抗体的抗凝活性，其中该结合剂是表2中所示的抗独特型抗体idt11或idt12。18.多核苷酸，其包含编码任一前述实施方案的结合剂的核苷酸序列。19.载体，其包含实施方案18的多核苷酸。20.宿主细胞，其包含实施方案18的多核苷酸。21.宿主细胞，其包含实施方案19的载体。22.产生结合剂的方法，所述方法包括在适于表达该结合剂或其片段的条件下培养实施方案20或21的宿主细胞，其中该方法任选地包括纯化该结合剂。23.药物组合物，其包含任一前述实施方案的结合剂。24.药物组合物，其用作用于在用抗因子xi/因子xia抗体治疗的患者中逆转抗fxi/fxia抗体的抗凝作用的药物，其中该药物组合物包含有效量的任一前述实施方案的结合剂。25.用于在用抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段治疗的患者中逆转抗fxi/fxia抗体的抗凝作用的方法，其包括对有需要的患者施用有效量的任一前述实施方案的结合剂。26.实施方案25的方法，其中该抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段包含：(i)含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl；或(ii)含有氨基酸序列seqidno:14的重链和含有氨基酸序列seqidno:25的轻链。27.实施方案25的方法，其中该抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段包含：(i)包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh的互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3的vh；及(ii)包含含有氨基酸序列seqidno:23的vl的互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3的vl。28.任一前述实施方案的方法，其中该方法进一步包括对该患者应用以下之一：(i)使用胶体、类晶体、人血浆或血浆蛋白(如白蛋白)进行流体置换；(ii)浓集红细胞(packedredblood)或全血输注；或(iii)施用新鲜的冷冻血浆(ffp)、凝血酶原复合物浓缩物(pcc)、活化的pcc(apcc)，如因子viii抑制剂，和/或重组的活化vii因子。29.任一前述实施方案的方法，其中该患者患有血栓形成或有发展血栓形成的风险。30.任一前述实施方案的方法，其中该患者患有a.房颤；b.疑似或确诊的心律不齐，如阵发性、持续性或永久性房颤或房扑；c.慢性血栓栓塞性肺动脉高压(cteph)；d.有或没有房颤的瓣膜性心脏病；e.肺动脉高压；f.先天性或获得性血友病，包括但不限于因子vleiden、凝血酶原突变、抗凝血酶iii、蛋白c和蛋白s缺乏、因子xiii突变、家族性纤维蛋白原缺乏症、先天性纤溶酶原缺乏、因子xi水平升高、镰状细胞病、抗磷脂综合征、自身免疫病、慢性肠病、肾病综合征、溶血尿毒症、骨髓增生性疾病、弥散性血管内凝血、阵发性夜间血红蛋白尿和肝素诱发的血小板减少症；或g.慢性肾病。31.任一前述实施方案的方法，其中该患者患有非瓣膜性房颤。32.任一前述实施方案的方法，其中该患者表现出高出血风险。33.任一前述实施方案的方法，其中该患者患有慢性肾病。34.实施方案33的方法，其中该患者患有晚期肾病(esrd)。35.实施方案34的方法，其中该患者患有esrd并且正在接受透析。36.实施方案35的方法，其中该患者患有非瓣膜性房颤。37.任一前述实施方案的方法，其中对该患者施用抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段以降低中风和/或全身性栓塞的风险。38.任一前述实施方案的方法，其中对于急诊手术/紧急操作以及危及生命或无法控制的出血，需要逆转抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段的抗凝作用。附图简述图1显示来自实施例中所述12种抗nov1401抗体(fab和igg)中每一种的set实验的代表性结合曲线。如实施例中所述，通过将实验数据拟合至1:1结合模型来确定fab和igg的kd值。显示了来自两个到六个独立实验的平均kd值。图2显示nov1401和三种nov1401/抗nov1401混合物与固定化fxia结合的代表性spr响应曲线。抗nov1401浓度的增加降低nov1401与fxia的结合，10倍摩尔过量完全阻断结合。这些数据表明，抗nov1401能够结合nov1401并阻断其与fxia相互作用。单独的抗nov1401不显示与固定的fxia的任何结合(未显示)。图3显示在将nov1401与抗nov1401预孵育10分钟后加入含fxi的人血浆并触发凝血级联的内在途径时，两种代表性抗nov1401fab的aptt测定结果。两种抗nov1401fab均以浓度依赖性方式阻断nov1401的aptt延长作用，即抑制nov1401的作用。在3倍摩尔过量的抗nov1401下达到100％抑制(虚线)。图4显示在将nov1401与含fxi的人血浆预孵育5分钟后加入抗nov1401fab或igg并触发凝血级联的内在途径时，10种抗nov1401fab和2种抗nov1401igg的aptt测定结果。所有12种抗nov1401均显示nov1401对aptt的作用的浓度依赖性部分逆转。图5显示在将nov1401与含fxi的人血浆预孵育5分钟后加入抗nov1401fab或igg并触发凝血酶反馈环回路时，10种抗nov1401fab和2种抗nov1401igg的tga结果。对于nov1401，在0.05μm的恒定浓度下进行tga，这对应于在分别的实验中确定的ic50值。所有12种抗nov1401均显示浓度依赖性部分逆转nov1401对凝血酶产生的作用。图6显示在研究第1天用单个3mg/kg皮下剂量的nov1401、然后分别在研究第4和5天用两个静脉内(i.v.)剂量的idt3处理的食蟹猴的血液/血浆样品的离体(exvivo)aptt测定结果。发明详述术语除非另有定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员的通常理解相同含义。如说明书和权利要求书中所使用，除非上下文另外明确说明，单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数引用。例如，术语“一个细胞”包括多个细胞，包括其混合物。所有数字名称，例如ph、温度、时间、浓度和分子量，包括范围，都是近似值，它们以0.1的增量(+)或(-)变化。应当理解，尽管并非总是明确地指出，所有数字名称之前均带有术语“约”。还应理解，尽管并非总是明确指出，本文所述的试剂仅是实例，其等同物是本领域已知的。术语“结合剂”、“逆转剂”和“解药(antidote)”可互换使用，并且在特异性结合因子xi和/或因子xia的抗体(“抗fxi/fxia抗体”)的上下文中是指蛋白质、多肽或其复合物，如抗独特型抗体或其片段(如fab片段)，或非活性的fxi/fxia衍生的多肽或蛋白质片段，其特异性结合抗fxi/fxia抗体，如抗fxi/fxia抗体的抗原结合区或可变区。在本文提供的具体方面，该结合剂能够逆转(例如部分逆转至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％)抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401)的一种或多种抗凝作用。在本文提供的其他具体方面，该结合剂能够阻断抗fxi/fxia抗体与其抗原例如fxi/fxia的结合。在具体方面，本文所用的术语“抗nov1401”、“抗nov1401抗体”、“抗nov1401fab”，“抗nov1401igg”，“nov1401结合剂”、“nov1401解药”等可互换使用，是指特异性结合抗因子xi抗体nov1401的结合剂或逆转剂，如抗独特型抗体或其片段(参见表1)。本文例如表2中描述了nov1401结合/逆转剂的非限制性实例。术语“抗独特型抗体”、“抗id抗体”和“抗独特型的抗体”可互换使用，是指特异性结合另一种抗体的抗原结合区的抗体及其片段(例如fab片段)。抗独特型抗体通常针对靶抗体的抗原结合区或互补决定区(cdr)(独特型)产生。抗独特型抗体可以通过先前描述的多种方法来产生，参见例如pan等,1995,fasebj.9:43-49。术语“fxi蛋白”、“fxi抗原”和“fxi”可互换使用，是指不同物种中的因子xi蛋白。因子xi是哺乳动物血浆凝血因子xi，是作为酶原以25-30nm的浓度存在于人血浆中的糖蛋白，在通过有限的蛋白水解转化为活性丝氨酸蛋白酶时参与凝血的内在途径。术语“fxia蛋白”、“fxia抗原”和“fxia”可互换使用，是指不同物种中活化的fxi蛋白。通过凝血的接触相或通过凝血酶介导的血小板表面活化，酶原因子xi转化为其活性形式凝血因子xla(fxia)。在因子xi的此活化过程中，内部肽键在两条链的每条中均被切割，产生活化因子xla，其是由通过二硫键保持在一起的两条重链和两条轻链组成的丝氨酸蛋白酶。此丝氨酸蛋白酶fxia将凝血因子ix转化为ixa，其随后活化凝血因子x(xa)。xa然后可以介导凝血因子ii/凝血酶活化。例如，人fxi具有表1中所示的序列(seqidno:1)，并且已经在先前的报道和文献中描述过(mandlerjjr等(1979)blood；54(4):850；ncbi参考序列:aaa51985)。在本公开的上下文中，术语“fxi”和“fxia”(等)分别包括天然fxi和fxia蛋白的突变体和变体，其具有与上文提到的报道中描述的天然一级结构(氨基酸序列)基本相同的氨基酸序列。术语“催化结构域”、“丝氨酸蛋白酶催化结构域”和本文在人fxi或fxia的上下文中使用的类似术语是指从循环中的成熟蛋白质的n端glu1开始计数的氨基酸ile370到val607。它也可以描述为fxic端的残基388-625。本文所用的术语“活性位点”是指由氨基酸his413、asp462和se557组成的催化三联体。(参见例如bane和gailani(2014)drugdisc.19(9)，在此以其整体引入作为参考)。本文所用的术语“抗体”是指完整抗体及其任何抗原结合片段(即“抗原结合部分”)或其单链，并且源自特异性结合抗原的免疫球蛋白(“ig”)分子。完整抗体是糖蛋白，其包含通过二硫键相互连接的至少两条重(h)链和两条轻(l)链。每条重链由重链可变区(在本文中缩写为vh)和重链恒定区组成。重链恒定区由三个结构域ch1、ch2和ch3组成。每条轻链由轻链可变区(在本文中缩写为vl)和轻链恒定区组成。轻链恒定区由一个结构域cl组成。vh和vl区可以进一步细分为高变区，称为互补决定区(cdr)，其间散布着更为保守的区，称为框架区(fr)。每个vh和vl由三个cdr和四个fr组成，它们从氨基端到羧基端按以下顺序排列：fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3、fr4。重链和轻链的可变区包含与抗原相互作用的结合域。抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，包括免疫系统的多种细胞(例如效应细胞)和经典补体系统的第一组分(c1q)。在一些具体方面，抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体、骆驼源化抗体或嵌合抗体。抗体可以属于任何同种类型(例如免疫球蛋白g(igg)、免疫球蛋白e(ige)、免疫球蛋白m(igm)、免疫球蛋白d(igd)、免疫球蛋白a(iga)和免疫球蛋白y(igy)、种类(例如igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2)或亚类。除非另有说明，本文所用的术语“igg”或“igg抗体”是指g型全抗体或ig。本文所用的术语抗体的“抗原结合部分”或“抗原结合片段”是指完整抗体的一个或多个片段，其保留特异性结合给定抗原的能力(例如抗fxi/fxia抗体，例如nov1401)。抗体的抗原结合功能可以通过完整抗体的片段来执行。术语抗体的抗原结合部分或抗原结合片段内所涵盖的结合片段的实例包括fab片段，其是由vl、vh、cl和ch1结构域组成的单价片段；f(ab)2片段，其是包含两个在铰链区通过二硫键连接的fab片段的二价片段；由vh和ch1结构域组成的fd片段；fv片段，其由抗体单臂的vl和vh结构域组成；单结构域抗体(dab)片段(ward等,1989nature341:544-546)，其由vh结构域或vl结构域组成；和分离的互补决定区(cdr)。此外，尽管fv片段的两个结构域vl和vh由不同的基因编码，但是它们可以用重组方法通过人工肽接头连接，从而使它们能够制备为单条蛋白链，其中vl和vh区配对形成单价分子(称为单链fv(scfv)；参见例如bird等,1988science242:423-426；和huston等,1988proc.natl.acad.sci.85:5879-5883)。此类单链抗体包括抗体的一个或多个抗原结合部分或片段。这些抗体片段使用本领域技术人员已知的常规技术获得，并且以与完整抗体相同的方式筛选片段的效用。抗原结合片段也可掺入到单结构域抗体、巨型抗体(maxibody)、微型抗体(minibody)、胞内抗体(intrabody)、双抗体、三抗体、四抗体、v-nar和bis-scfv中(参见例如hollinger和hudson,2005,naturebiotechnology,23,9,1126-1136)。还可将抗原结合片段移植入基于诸如iii型纤连蛋白(fn3)的多肽的支架(参见美国专利号6,703,199，其描述纤连蛋白多肽微型抗体)。抗原结合片段可以掺入包含一对串联的fv区段(vh-ch1-vh-ch1)的单链分子中，该串联的fv区段与互补的轻链多肽一起形成一对抗原结合区(zapata等,1995proteineng.8(10):1057-1062；和美国专利号5,641,870)。本文所用的术语“亲和力”是指抗体和抗原之间在单个抗原位点的相互作用的强度。在每个抗原位点内，抗体“臂”的可变区通过弱的非共价力与抗原在许多位点相互作用；相互作用越多，亲和力就越强。本文所用的术语对抗体或其抗原结合片段(例如fab片段)的“高亲和力”通常是指kd为10-9m或更小(例如，kd为10-10m或更小，kd为10-11m或更小，kd为10-12m或更小，kd为10-13m或更小，kd为10-14m或更小等)的抗体或其抗原结合片段。术语“氨基酸”是指天然存在的和合成的氨基酸，以及以类似于天然存在的氨基酸的方式起作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然存在的氨基酸是由遗传密码编码的氨基酸，以及后来被修饰的氨基酸，例如羟脯氨酸、γ-羧基谷氨酸和o-磷丝氨酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构的化合物，即与氢、羧基、氨基和r基团结合的α碳，例如高丝氨酸、正亮氨酸、甲硫氨酸亚砜、甲硫氨酸甲基锍。此类类似物具有修饰的r基团(例如正亮氨酸)或修饰的肽主链，但保留了与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸模拟物是指具有与氨基酸的一般化学结构不同的结构，但以类似于天然存在的氨基酸的方式起作用的化合物。本文所用的术语“结合特异性”是指单个抗体结合位点仅与一个抗原决定簇反应的能力。本文所用的术语“免疫特异性结合”、“免疫特异性识别”、“特异性结合”和“特异性识别”在抗体的上下文中是类似术语，是指与抗原(例如表位或免疫复合物)结合的分子，这样的结合为本领域技术人员所理解。例如，如通过例如免疫测定法、biacoretm、kinexa3000仪器(sapidyneinstruments,boise,id)或本领域已知的其他测定法所测定，特异性结合抗原的分子可以通常以较低的亲和力结合其他肽或多肽。在一个具体实施方案中，免疫特异性结合抗原的分子以比该分子结合另一种抗原时的ka大至少2log、2.5log、3log、4log或更大的ka结合该抗原。在另一个具体实施方案中，免疫特异性结合抗原的分子不与其他蛋白质交叉反应。术语“fxi和/或fxia介导的”是指fxi和/或fxia通过直接或间接激活因子ix(也称为fix)、因子x(fx)和/或凝血酶，和/或通过结合血小板受体来介导固有和/或常见的凝血途径的事实。术语“止血”分别表示在损伤部位阻断血流并在创伤愈合过程中恢复血管通畅的主要机制。在正常止血和病理性血栓形成过程中，三种机制同时激活：意指活化的血小板与血管壁的相互作用的初期止血、纤维蛋白的形成以及称为纤维蛋白溶解的过程。术语“凝血和凝血级联”、“凝血级联模型”等指基于蛋白质的系统，其用于稳定已经形成以封闭伤口的凝块。凝血途径是蛋白水解级联。该途径中的每种酶都作为酶原(无活性形式)存在于血浆中，在激活时经历蛋白水解切割，以从前体分子释放活性因子。凝血级联作为一系列控制激活过程的正反馈回路和负反馈回路起作用。该途径的最终目标是产生凝血酶，然后凝血酶可以将可溶性纤维蛋白原转化为形成凝块的纤维蛋白。凝血酶的产生过程可以分为三个阶段：为活性凝血因子fxa(活化的因子x)的产生提供替代途径的内源性途径和外源性途径，以及导致凝血酶形成的最终的共同途径(hoffmanm.m.和monroed.m.(2005)currhematolrep.4:391-396；johnej等(2006)biolchem.387:173-178)。本文所用的术语“管理”是指个体从疗法(例如预防剂或治疗剂)获得的有益作用，其不导致治愈疾病、障碍或病症(例如血栓形成或血栓栓塞性疾病)。在某些实施方案中，对个体施用一种或多种疗法(例如本文所述的结合剂或抗体)以“管理”血栓形成或血栓栓塞性疾病，其一种或多种症状，从而防止病症或障碍的发展或恶化。“血小板聚集”是指在血管发生破裂时暴露通常不与血流直接接触的物质的过程。这些物质(主要是胶原蛋白和vonwillebrand因子)使血小板粘附到破裂的表面。一旦血小板粘附到表面上，它就会释放化学物质，这些化学物质吸引更多的血小板到损伤区域，称为血小板聚集。这两个过程是止血的第一个反应。本文所用的“血栓栓塞性疾病”或类似术语是指任何数目的病症或疾病，其中固有和/或常见的凝血途径异常激活或非自然失活(例如无治疗手段)。这些病症包括但不限于血栓性中风、房颤、房颤中风预防(spaf)、深静脉血栓形成、静脉血栓栓塞和肺栓塞。这些还可以包括导管相关病症(例如肿瘤患者中的hickman导管)，其中导管已形成血栓，以及体外膜氧合作用(ecmo)，其中导管形成了血凝块。本文所用的“血栓栓塞性”或类似术语也可以指任何数目的以下，本公开的抗fxi和/或fxiaab或其抗原结合片段可用于预防或治疗或降低以下风险：-患有疑似或确诊的心律不齐如阵发性、持续性或永久性房颤或房扑的个体的血栓栓塞；-房颤中风预防(spaf)，其中部分群体是接受经皮冠状动脉介入治疗(pci)的af患者；-高出血风险患者的急性静脉血栓栓塞事件(vte)处理和二级vte扩展预防；-短暂性脑缺血发作(tia)或非致残性中风后的二级预防中的脑和心血管事件，以及伴随窦性心律的心力衰竭中血栓栓塞事件的预防；-因心律不齐而接受心脏复律的个体的左心房凝块形成和血栓栓塞；-针对心律不齐的消融术之前、期间和之后的血栓形成；-静脉血栓形成，这包括但不限于下肢或上肢深部或浅静脉血栓形成、腹腔和胸静脉血栓形成、鼻窦血栓形成和颈静脉血栓形成的治疗和二级预防；-静脉内任何人造表面(如导管或起搏器导线)上的血栓形成；-有或没有静脉血栓形成的患者的肺栓塞；-慢性血栓栓塞性肺动脉高压(cteph)；-动脉粥样硬化斑块破裂上的动脉血栓形成、动脉内假体或导管上的血栓形成以及明显正常的动脉中的血栓形成，这包括但不限于急性冠脉综合征、st抬高心肌梗死、非st抬高心肌梗死、不稳定型心绞痛、支架血栓形成、动脉系统中任何人造表面的血栓形成、以及有或没有肺动脉高压的个体中肺动脉的血栓形成；-接受经皮冠状动脉介入治疗(pci)的患者的血栓形成和血栓栓塞；-心脏栓塞和隐源性中风；-浸润性和非浸润性恶性肿瘤患者的血栓形成；-留置导管上的血栓形成；-重症患者的血栓形成和血栓栓塞；-心脏血栓形成和血栓栓塞，这包括但不限于心肌梗塞后的心脏血栓形成，与诸如动脉瘤、心肌纤维化、心脏增大和功能不全、心肌炎和心脏人造表面的病症相关的心脏血栓形成；-伴或不伴房颤的瓣膜性心脏病患者的血栓栓塞；-瓣膜机械或生物假体上的血栓栓塞；-对简单或复杂的心脏畸形进行心脏修复后，具有天然或人造心脏斑块、动脉或静脉导管的患者中的血栓栓塞；-膝关节置换手术、髋关节置换手术、整形外科手术、胸部或腹部手术后的静脉血栓形成和血栓栓塞；-包括颅内和脊髓干预的神经外科手术后的动脉或静脉血栓形成；-先天性或获得性血友病，包括但不限于因子vleiden、凝血酶原突变、抗凝血酶iii、蛋白c和蛋白s缺乏、因子xiii突变、家族性纤维蛋白原缺乏症、先天性纤溶酶原缺乏、因子xi水平升高、镰状细胞病、抗磷脂综合征、自身免疫病、慢性肠病、肾病综合征、溶血尿毒症、骨髓增生性疾病、弥散性血管内凝血、阵发性夜间血红蛋白尿和肝素诱发的血小板减少症；-慢性肾脏疾病中的血栓形成和血栓栓塞；和-进行血液透析的患者和进行体外膜氧合的患者中的血栓形成和血栓栓塞。术语“嵌合抗体”是这样的抗体分子，其中(a)改变、替换或交换恒定区或其一部分，使得抗原结合部位(可变区)连接至具有不同或改变的类别、效应子功能和/或种类的恒定区，或赋予嵌合抗体新特性的完全不同的分子，例如酶、毒素、激素、生长因子、药物等；或(b)用具有不同或改变的抗原特异性的可变区改变、替换或交换可变区或其一部分。例如，可以通过用来自人免疫球蛋白的恒定区替换小鼠抗体恒定区来修饰小鼠抗体。由于用人恒定区取代，因此与原始小鼠抗体相比，嵌合抗体可以保留小鼠抗体识别抗原的特异性，同时在人中的抗原性降低。术语“保守修饰的变体”适用于氨基酸和核酸序列二者。对于具体的核酸序列，保守修饰的变体指编码相同或基本相同的氨基酸序列的那些核酸，或在该核酸不编码氨基酸序列时指基本相同的序列。由于遗传密码的简并性，许多功能相同的核酸编码任何给定的蛋白质。例如，密码子gca、gcc、gcg和gcu都编码氨基酸丙氨酸。因此，在密码子指定丙氨酸的每个位置，可以将密码子改变为所描述的任何相应密码子，而不改变所编码的多肽。此类核酸变异是“沉默变异”，其是保守修饰的变异的一种。本文中编码多肽的每个核酸序列也描述了核酸的每个可能的沉默变异。本领域技术人员将认识到，可以修饰核酸中的每个密码子(aug(通常是蛋氨酸的唯一密码子)以及tgg(通常是色氨酸的唯一密码子)除外)以产生功能相同的分子。因此，编码多肽的核酸的每个沉默变异都隐含在每个所述序列中。对于多肽序列，“保守修饰的变体”包括对多肽序列的各取代、缺失或添加，其导致用化学上类似的氨基酸取代氨基酸。提供功能上类似的氨基酸的保守取代表为本领域公知。此类保守修饰的变体是本发明的多态性变体、种间同源物和等位基因的补充而不排斥所述本发明的多态性变体、种间同源物和等位基因。以下8组包含彼此为保守替换的氨基酸：1)丙氨酸(a)、甘氨酸(g)；2)天冬氨酸(d)、谷氨酸(e)；3)天冬酰胺(n)、谷氨酰胺(q)；4)精氨酸(r)、赖氨酸(k)；5)异亮氨酸(i)、亮氨酸(l)、甲硫氨酸(m)、缬氨酸(v)；6)苯丙氨酸(f)、酪氨酸(y)、色氨酸(w)；7)丝氨酸(s)、苏氨酸(t)；和8)半胱氨酸(c)、甲硫氨酸(m)(参见例如，creighton,proteins(1984))。在一些实施方案中，术语“保守序列修饰”用于指不显著影响或改变包含该氨基酸序列的抗体的结合特征的氨基酸修饰。术语“表位”是指能够特异性结合抗体的蛋白质决定簇。表位通常由分子的化学活性表面分组组成，如氨基酸或糖侧链，通常具有特定的三维结构特征以及特定的电荷特征。构象和非构象表位的区别在于，在存在变性溶剂的情况下，与前者的结合丧失而与后者的结合不丧失。通过本领域技术人员熟知的任何方法，如果一种抗体在竞争性结合测定中显示与第二种抗体结合相同的表位，则可以称两种抗体“竞争”。本文所用的术语“人抗体”旨在包括具有可变区的抗体，其中构架区和cdr区均源自人来源序列。此外，如果抗体包含恒定区，则恒定区也源自此类人序列，例如人种系序列或人种系序列的突变形式。本公开的人抗体可包括不由人序列编码的氨基酸残基(例如通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。术语“人单克隆抗体”是指表现出单一结合特异性的抗体，其具有可变区，其中构架区和cdr区均源自人序列。在一个实施方案中，使用噬菌体展示方法筛选人免疫球蛋白基因的文库来制备人单克隆抗体。“人源化”抗体是保留非人抗体的反应性而在人类中免疫原性较低的抗体。例如，这可以通过保留非人cdr区并用其人对应物(即恒定区以及可变区的构架部分)替换抗体的其余部分来达到。参见例如morrison等,proc.natl.acad.sci.usa,81:6851-6855,1984；morrison和oi,adv.immunol.,44:65-92,1988；verhoeyen等,science,239:1534-1536,1988；padlan,molec.immun.,28:489-498,1991；及padlan,molec.immun.,31:169-217,1994。人体工程技术的其他实例包括但不限于us5,766,886中公开的xoma技术。在两个或多个核酸或多肽序列的上下文中，术语“同一的”或百分比“同一性”是指相同的两个或多个序列或子序列。在为了比较窗内或指定区域内的最大对应而用以下序列比较算法之一或通过手工比对和目检测量来比较和比对时，如果两个序列具有指定百分比的相同氨基酸残基或核苷酸，则两条序列“基本同一的”(即在指定区域内，或在不指定时，在整个序列内具有60％同一性，任选地65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性)。任选地，同一性存在于长度至少约50个核苷酸(或10个氨基酸)的区域内，或更优选地在长度为100至500个或1000个或更多个核苷酸(或20、50、200个或更多个氨基酸)的区域内。对于序列比较，通常将一条序列作为参考序列，将测试序列与其进行比较。当使用序列比较算法时，将测试序列和参考序列输入计算机，根据需要指定子序列坐标，并指定序列算法程序参数。可使用默认程序参数，或可指定备选参数。序列比较算法然后基于程序参数计算测试序列相对于参考序列的百分比序列同一性。本文所用的“比较窗”包括引用选自20至600、通常约50至约200、更通常约100至约150的任一数目的相邻位置的区段，其中可在两条序列最佳比对后将序列与具有相同数目的相邻位置的参考序列进行比较。用于比较的序列比对方法为本领域公知。例如可通过smith和waterman(1970)adv.appl.math.2:482c的局部同源性算法、通过needleman和wunsch,j.mol.biol.48:443,1970的同源性比对算法、通过pearson和lipman,proc.nat’l.acad.sci.usa85:2444,1988的搜索相似性法、通过这些算法的计算机化执行(wisconsingeneticssoftwarepackage,geneticscomputergroup,575sciencedr.,madison,wi中的gap、bestfit、fasta和tfasta)、或通过手工比对和目检(参见例如brent等,currentprotocolsinmolecularbiology,johnwiley&sons,inc.(ringbou编辑,2003))，进行序列最佳比对用于比较。适合用于测定百分比序列同一性和序列相似性的算法的两个实例是blast和blast2.0算法，其分别描述于altschul等,(1977)nuc.acidsres.25:3389-3402和altschul等,(1990)j.mol.biol.215:403-410中。用于进行blast分析的软件可通过nationalcenterforbiotechnologyinformation公开获得。此算法涉及首先通过鉴定查询序列中长度为w的短字串来鉴定高得分序列对(hsp)，当与数据库序列中相同长度的字串比对时，该短字串匹配或满足某一正值阈值得分t。t称为邻近字串得分阈值(altschul等,上文)。这些初始邻近字串命中作为起始搜索的种子，以发现含有它们的更长hsp。只要可增加累积比对得分，则沿每个序列的两个方向延伸字串命中。对于核苷酸序列，用参数m(一对匹配残基的奖励得分；总是大于0)和n(错配残基的罚分；总是小于0)计算累积得分。对于氨基酸序列，用评分矩阵来计算累积得分。在累积比对得分从其最大达到值跌落x量、累积得分由于一个或多个负得分残基比对的累积而到达零或以下、或到达任一序列的末端时，停止字串命中在每一方向上的延伸。blast算法参数w、t和x决定了比对的灵敏度和速度。blastn程序(对于核苷酸序列)用字长(w)11、期望值(e)10、m＝5、n＝-4和两条链的比较作为默认。对于氨基酸序列，blastp程序用字长3、期望值(e)10和blosum62评分矩阵(参见henikoff和henikoff,proc.natl.acad.sci.usa89:10915,1989)比对(b)50、期望值(e)10、m＝5、n＝-4和两条链的比较作为默认。blast算法还进行两个序列之间相似性的统计学分析(参见例如karlin和altschul,proc.natl.acad.sci.usa90:5873-5787,1993)。blast算法提供的一种相似性测量是最小总和概率(p(n))，其提供两个核苷酸或氨基酸序列之间偶然发生匹配的概率的指示。例如，如果测试核酸与参考核酸的比较中最小总和概率低于约0.2、更优选低于约0.01、最优选低于约0.001，则认为核酸与参考序列相似。也可使用已经整合入align程序(版本2.0)的e.meyers和w.miller(comput.appl.biosci.,4:11-17,1988)的算法，使用pam120权重余数表、缺口长度罚分12和缺口罚分4，测定两个氨基酸序列之间的百分比同一性。此外，可使用已经整合入gcg软件包(可在www.gcg.com上获得)中的gap程序的needleman和wunsch(j.mol,biol.48:444-453,1970)算法，使用blossom62矩阵或pam250矩阵，以及缺口权重16、14、12、10、8、6或4和长度权重1、2、3、4、5或6，确定两个氨基酸序列之间的百分比同一性。除了上文指出的百分比序列同一性外，两个核酸序列或多肽基本同一的另一指示是，第一条核酸编码的多肽与针对第二条核酸编码的多肽产生的抗体有免疫交叉反应，如下文所述。因此，例如，在两条肽仅因保守取代而不相同时，一条多肽通常与第二多肽是基本同一的。两个核酸序列基本同一的另一指示是，两个分子或其互补序列在严格条件下彼此杂交，如下文所述。两个核酸序列基本同一的又一指示是，可用相同的引物来扩增该序列。术语“分离的抗体”是指基本上不含具有不同抗原特异性的其他抗体的抗体(例如特异性结合fxi和/或fxia的分离的抗体基本上不含特异性结合fxi和/或fxia以外的抗原的抗体，或特异性结合抗fxi/fxia抗体的分离的抗独特型抗体基本上不含特异性结合抗fxi/fxia抗体以外的抗原的抗体)。但是，特异性结合fxi和/或fxia的分离的抗体可以与其他抗原具有交叉反应性。此外，分离的抗体可以基本上不含其他细胞物质和/或化学物质。术语“同种型”是指由重链恒定区基因提供的抗体种类(例如igm、ige、igg，如igg1或igg4)。同种型也包括这些种类之一的修饰形式，其中已经进行修饰以改变fc功能，例如增强或减少效应子功能或与fc受体的结合。本文所用的术语“kassoc”或“ka”是指特定抗体-抗原相互作用的缔合速率，而本文所用的术语“kdis”或“kd”是指特定抗体-抗原相互作用的解离速率。本文所用的术语“kd”旨在指解离常数，其是从kd与ka的比值(即kd/ka)获得，并表示为摩尔浓度(m)。抗体的kd值可以使用本领域熟知的方法测定。用于测定抗体kd的方法包括使用生物传感器系统(如biacoretm系统)测量表面等离子共振，或通过溶液平衡滴定(set)测量溶液中的亲和力。本文所用的术语“单克隆抗体”或“单克隆抗体组合物”是指单一分子组成的抗体分子的制剂。单克隆抗体组合物显示对特定表位的单一结合特异性和亲和力。术语“核酸”在本文中可与术语“多核苷酸”互换使用，是指单链或双链形式的脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸及其聚合物。该术语涵盖含有已知的核苷酸类似物或修饰的骨架残基或键的核酸，其为合成的、天然存在的和非天然存在的，其具有与参考核酸相似的结合性质，并且其以类似于参考核苷酸的方式代谢。这类类似物的实例包括但不限于硫代磷酸酯、氨基磷酸酯、甲基膦酸酯、手性甲基膦酸酯、2-o-甲基核糖核苷酸、肽核酸(pna)。除非另有说明，特定核酸序列也隐含其保守修饰的变体(例如简并密码子取代)和互补序列，以及明确指出的序列。具体而言，如下文详述，可通过产生这样的序列来达到简并密码子取代，其中用混和碱基和/或脱氧肌苷残基取代一个或多个所选(或全部)密码子的第三个位置(batzer等,nucleicacidres.19:5081,1991；ohtsuka等,j.biol.chem.260:2605-2608,1985；及rossolini等,mol.cell.probes8:91-98,1994)。术语“有效连接”指两个或多个多核苷酸(例如dna)区段的功能关系。通常，该术语指转录调节序列与所转录的序列之间的功能关系。例如，如果启动子或增强子序列刺激或调节编码序列在适当宿主细胞或其他表达系统中的转录，则它与编码序列有效连接。通常，与所转录的序列有效连接的启动子转录调节序列与所转录的序列在物理上相邻，即它们是顺式作用。但是，一些转录调节序列(如增强子)无需与它们增强其转录的编码序列在物理上相邻或位于其附近。本文所用的术语“优化的”是指已用生产细胞或生物中优选的密码子改变以编码氨基酸序列的核苷酸序列，该生产细胞或生物通常是真核细胞，例如毕赤酵母属(pichia)细胞、中国仓鼠卵巢细胞(cho)或人细胞。改造优化的核苷酸序列，以完全或尽可能多地保留起始核苷酸序列(其也称为“亲本”序列)最初编码的氨基酸序列。已改造本文的优化序列，使其具有哺乳动物细胞中优选的密码子。但是，本文中还设想这些序列在其他真核细胞或原核细胞中的优化表达。由优化的核苷酸序列编码的氨基酸序列也称为优化的。术语“多肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，指氨基酸残基的聚合物。该术语适用于氨基酸聚合物，其中一个或多个氨基酸残基是相应天然存在的氨基酸的人工化学模拟物，以及适用于天然存在的氨基酸聚合物和非天然存在的氨基酸聚合物。除非另有说明，特定多肽序列也隐含其保守修饰的变体。本文所用的术语“重组人抗体”包括通过重组方式制备、表达、产生或分离的所有人抗体，如从人免疫球蛋白基因的转基因或转染色体动物(例如小鼠)或从其制备的杂交瘤分离的抗体，从转化以表达人抗体的宿主细胞(例如从转染瘤)分离的抗体，从重组的组合人抗体文库分离的抗体，以及通过涉及将全部或部分人免疫球蛋白基因序列剪接至其他dna序列的任何其他手段制备、表达、产生或分离的抗体。此类重组人抗体具有可变区，其中构架区和cdr区源自人种系免疫球蛋白序列。但是，在某些实施方案中，可以对此类重组人抗体进行体外诱变(或者在使用人ig序列的转基因动物时，进行体内体细胞诱变)，因此该重组抗体的vh和vl区的氨基酸序列是这样的序列，其虽然源自人种系vh和vl序列并与之相关，但可以并非在体内天然存在于人抗体种系库内。术语“重组宿主细胞”(或简称为“宿主细胞”)是指已将重组表达载体引入其中的细胞。应当理解，此类术语不仅旨在指特定的对象细胞，而且还指这种细胞的后代。因为由于突变或环境影响，某些修饰可以在后代中发生，所以这样的后代实际上可以与亲本细胞不同，但是仍然包括在本文所用的术语“宿主细胞”的范围内。术语“个体(subject)”包括人和非人动物。非人类动物包括所有脊椎动物(例如哺乳动物和非哺乳动物)，如非人灵长类(例如食蟹猴)、绵羊、兔子、狗、奶牛、鸡、两栖动物和爬行动物。除非另有说明，术语“患者”或“个体”在本文中可互换使用。本文所用的术语“cyno”或“食蟹猴”是指食蟹猴(macacafascicularis)。在本文提供的一些具体方面，患者或个体是人。本文所用的术语“治疗”任意疾病或障碍(例如血栓栓塞性疾病)在一个实施方案中指改善疾病或障碍(即减慢或阻断或减少疾病或其至少一种临床症状的发展)。在另一实施方案中，“治疗”指缓解或改善至少一个身体参数，包括患者可察觉不到的那些。还在另一实施方案中，“治疗”指在身体上(例如稳定可察觉到的症状)、生理上(例如稳定身体参数)或在身体和生理上调节疾病或障碍。还在另一实施方案中，“治疗”指预防或延迟疾病或障碍的发生或发展或进展。“预防”与本文所述的适应症有关，包括例如血栓栓塞性疾病，是指在处于患上血栓栓塞性疾病的风险或处于所述恶化的风险的患者中预防或减缓例如下文所述的血栓栓塞性疾病参数的恶化的任何行动。术语“载体”旨在指能够转运与其连接的另一多核苷酸的多核苷酸分子。载体的一种类型是“质粒”，其是指环状双链dna环，其中可以连接其他dna区段。载体的另一种类型是病毒载体，如腺相关病毒载体(aav或aav2)，其中可以将另外的dna区段连接入病毒基因组。某些载体能够在它们所引入的宿主细胞中自主复制(例如具有细菌复制起点的细菌载体和游离型哺乳动物载体)。其他载体(例如非游离型哺乳动物载体)可以在引入宿主细胞后整合到宿主细胞的基因组中，从而与宿主基因组一起复制。此外，某些载体能够指导与它们有效连接的基因的表达。此类载体在本文中称为“重组表达载体”(或简称为“表达载体”)。通常，在重组dna技术中有用的表达载体通常是质粒的形式。在本说明书中，“质粒”和“载体”可以互换使用，因为质粒是最常用的载体形式。然而，本公开旨在包括具有等效功能的此类其他形式的表达载体，如病毒载体(例如复制缺陷型逆转录病毒、腺病毒和腺伴随病毒)。因子xi/xia和抗因子xi/fxia抗体本章节描述本文提供的逆转结合剂(例如抗独特型抗体及其片段)特异性结合的示例性抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体)，其中逆转结合剂能够逆转此类抗fxi/fxia抗体的一种或多种抗凝作用和/或抑制此类抗fxi/fxia抗体与fxi和/或fxia的结合。fxi在内在和外在凝血途径以及桥接血浆止血的起始和扩增阶段中都起着重要作用。因子xiia和凝血酶均可激活fxi，导致持续的凝血酶产生和纤维蛋白溶解抑制。fxi在“血管损伤后”在高组织因子环境中的正常止血中起着次要作用，而在血栓形成中起着关键作用。严重的因子xi缺乏与较低的缺血性中风和静脉血栓栓塞事件的发生率相关(salomon等2008；salomon等(2011)thrombhaemost.；105:269-73)。具有严重因子xi缺乏的个体的出血表现很少见，通常是轻度的，损伤诱导的，并且优选影响纤溶活性增强的组织，如口腔黏膜、鼻黏膜和尿道(salomon等2011)。至关重要的器官出血非常罕见或不存在。血浆凝结是连续过程，血液中的凝血因子通过该过程相互作用并激活，最终导致血纤蛋白产生和血凝块形成。在经典凝血级联模型中，纤维蛋白产生的过程可以通过两种不同的途径启动，即分别为内在途径和外在途径(mackman,2008)。在外在途径中，血管损伤允许血管外组织因子(tf)与因子vii(fvii)相互作用并激活因子vii(fvii)，从而依次导致因子x和凝血酶原的激活。活性凝血酶最终将可溶性纤维蛋白原转化为纤维蛋白。外在途径是止血的中心，干扰此途径中的凝血因子导致出血的风险。在内在途径中，因子xii在某些情况下可以通过称为接触激活的过程激活。活化因子xiia的产生导致因子xi和因子ix的顺序活化。当因子ixa激活因子x时，外在和内在途径在此阶段(在共同途径)会合。凝血酶活性通过经前馈回路扩增其自身的产生而增强，其中凝血酶独立于因子xii激活因子xi。此前馈回路促成持续的血栓生长，但仅最小程度涉及止血，因为血管外组织因子的强烈激活足以形成凝块。因此，内在途径不实质性涉及止血作用(gailani和renné(2007)arteriosclerthrombvascbiol.2007,27(12):2507-13,müller,gailiani和renné2011)。使用多种方法来抑制多种物种的fxi或fxia的临床前研究促成了此靶标的验证。fxi-/-小鼠对实验性静脉(wang等(2006)jthrombhaemost；4:1982-8)和动脉(wang等(2005)jthrombhaemost；3:695-702)血栓形成有抗性。用阻断fxiia激活fxi的抗体(ab，14e11)处理小鼠导致实验性血栓形成的抑制(cheng等(2010)blood,116:3981-9)，并减少缺血性中风小鼠模型中的脑梗死面积(leung等(2012)translstrokeres2012；3:381-9)。在施用阻断fxia对fix的结合和激活的抗fxi抗体的狒狒中，在胶原蛋白包被的血管移植物上观察到富含血小板的血栓的生长减少(tucker等(2009)blood2009；113:936-44)，并且用14e11在此模型中发现了类似的结果(cheng2010)。在任意这些研究中均未发现过多出血。在小鼠(zhang等(2010)blood2010；116:4684-92)、食蟹猴(younis等(2012)blood2012；119:2401-8)和狒狒(crosby等(2013)arteriosclerthrombvascbiol2013；33:1670-8)中用反义寡核苷酸阻断fxi合成产生了抗血栓和抗凝作用，而没有过多的出血。此外，在大鼠(schumacher等(2007)eurjpharmacol2007；570:167-74)和兔子(wong等(2011)jthrombthrombolysis2011；32:129-37)的静脉和动脉血栓形成模型中，通过用低分子量抑制剂阻断fxia产生了相似的作用。严重fxi缺乏的患者很少自发性出血，并且除了具有高纤溶活性的组织中之外，他们仅显示轻度的创伤性出血。严重fxi缺乏十分罕见，因此需要使用人群研究来揭示这些患者相对于普通人群的血栓形成情况。值得注意的是，此类研究报告了这些患者中缺血性中风(salomon2008)和深静脉血栓形成(dvt)(salomon等(2011)blood2008；111:4113–17)的发生率降低。因此，在115名严重fxi缺乏患者中观察到的缺血性中风的数目(n＝1)比以色列普通人群中的预期发生率(n＝8.6)少(p<0.003)，而严重fxi缺乏患者中dvt的发生率(n＝0)比对照人群中的期望值(n＝4.7)低(p<0.019)。相反，fxi水平高于第90百分位数的个体具有两倍的风险发展dvt(meijers等(2000)nengljmed.2000；342:696-701)。最近，用fxi反义疗法或标准疗法(依诺肝素)治疗了接受全膝关节置换(易导致dvt的手术)的患者。与标准疗法相比，反义组(300mg)显示静脉血栓形成的发生率降低了7倍，出血事件较少(不显著)(büller等(2014)nengljmed.372(3):232-40.doi:10.1056/nejmoa1405760.epub2014dec7)。已经描述了特异性结合fxi和/或fxia的抗体。参见例如pct国际公开号wo2017/015619、wo2016/207858、wo2013/167669、wo2009/067660、wo2009/154461和wo2010/080623，其各自在此以其整体引入作为参考。抗fxi/fxia抗体的非限制性实例包括：wo2013/167669中所述的076d-m007-h04、076d-m007-h04-cdrl3-n110d和076d-m028-h17；wo2009/067660中所述的1a6；wo2010/080623中所述的14e11。在具体方面，本文提供结合剂，如抗独特型抗体，其特异性结合抗fxi/fxia抗体076d-m007-h04、076d-m007-h04-cdrl3-n110d或076d-m028-h17的结合剂，并且能够抑制抗fxi/fxia抗体与fxi/fxia的结合，和/或能够逆转抗fxi/fxia抗体的抗凝作用。在具体方面，本文提供结合剂，如抗独特型抗体，其特异性结合与076d-m007-h04、076d-m007-h04-cdrl3-n110d或076d-m028-h17竞争(例如以剂量依赖性方式)结合fxi/fxia的抗fxi/fxia抗体，并且能够抑制抗fxi/fxia抗体与fxi/fxia的结合和/或能够逆转抗fxi/fxia抗体的抗凝作用。表1提供了人fxi和抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401和nov1090)的示例性氨基酸序列和相应的编码核苷酸序列。具体而言，表1提供了抗体nov1401、nov1090、am1、am2、am3和am4的以下氨基酸序列，以及相应的编码核苷酸序列：重链可变区(vh)，轻链可变区(vl)，重链，轻链，vh互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3，vl互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3。在具体方面，本文提供的逆转结合剂特异性结合表1中所述的抗fxi/fxia抗体，并能够抑制(例如以剂量依赖性方式)抗fxi/fxia抗体与人fxi/fxia的结合，和/或逆转抗fxi/fxia抗体的一种或多种抗凝活性。在具体方面，本文提供的逆转结合剂(例如抗独特型抗体或其抗原结合片段，如fab)特异性结合抗fxi/fxia抗体nov1401、nov1090、am1、am2、am3和/或am4，并且能够抑制抗fxi/fxia抗体与人fxi/fxia的结合和/或能够逆转抗fxi/fxia抗体的抗凝作用。本文表1中所述的其他抗fxi/fxia抗体包括nov1090、am1、am2、am3和am4。抗体nov1401和nov1090共享相同的cdr。抗体am1、am2、am3和am4是抗体nov1090的示例性亲和力成熟变体。在特定方面，抗fxi/fxia抗体具有一种或多种以下抗凝活性，其可以通过逆转结合剂(例如抗独特型抗体或其片段，如fab)逆转(例如部分逆转)：(i)通过aptt测定法测定的aptt延长；(ii)人血浆中凝血酶产生测定(tga)中凝血酶量的减少；以及(iii)因子xi活性的抑制。这些活性可以容易地用本领域描述和本文提供的测定法来测量。例如，tga和aptt测定法描述于本领域和本文中(例如实施例章节)。在其他方面，可以测量外在凝血途径的其他生物标志物以确定抗凝活性，例如凝血酶原时间(pt)测定和凝血酶时间(tt)测定。抗凝/凝血活性测定的其他非限制性实例包括生色测定，如依卡琳生色测定(eca)、依卡琳凝结时间(ect)测定和抗因子xa活性测定。在具体方面，本文提供的逆转结合剂(例如抗独特型抗体)能够逆转(例如部分逆转)这些抗凝活性中的一种或多种。在具体方面，本文提供的逆转结合剂能够减少施用抗fxi/fxia抗体的患者的出血时间。表1.fxi/fxia抗体、fab和fxi/fxia蛋白的实例结合/逆转剂在一个方面，本公开涉及逆转结合剂，其是抗独特型抗体，如全长igg及其片段(例如fab片段)，其特异性结合结合人因子xi(“fxi”)和/或因子xia(“fxia”)的靶抗体(“抗fxi/fxia抗体”)，例如表1中所述的抗fxi/fxia抗体，如抗体nov1401，或其亲和力成熟变体，如抗体am1、am2、am3或am4。在一个特定方面，本文提供结合剂以及包含这种结合剂的药物组合物，其特异性结合在催化结构域内结合人因子xi(“fxi”)和/或因子xia(“fxia”)的靶抗体(“抗fxi/fxia抗体”，如抗体nov1401)，其中结合剂抑制或逆转靶抗体的抗凝活性，其中结合剂以1nm或更小的解离常数(kd)结合靶抗体，并且其中结合剂能够使靶抗体延迟活化的部分凝血致活酶时间(aptt)的能力抑制至少35％。在其他具体方面，该结合剂能够使靶抗体延迟活化的部分凝血致活酶时间(aptt)的能力抑制至少40％。在其他具体方面，该结合剂能够使靶抗体延迟活化的部分凝血致活酶时间(aptt)的能力抑制至少50％。在其他具体方面，该结合剂能够使靶抗体延迟活化的部分凝血致活酶时间(aptt)的能力抑制至少60％。在其他具体方面，该结合剂能够使靶抗体延迟活化的部分凝血致活酶时间(aptt)的能力抑制至少70％。用于测定aptt和aptt延迟的方法已在本领域中描述，并且在本文中例如实施例章节中也进行了描述。在具体方面，本文提供结合剂以及包含此类结合剂的药物组合物，其抑制或逆转靶标抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的抗凝活性，其中该结合剂为抗原结合人抗体片段，例如人fab。在特定方面，本文提供结合剂以及包含此类结合剂的药物组合物，其抑制或逆转靶标抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的抗凝活性，其中该结合剂是人抗独特型fab。在特定方面，本文提供结合剂，其抑制或逆转靶标抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的抗凝活性，其中该结合剂是人igg1、igg2或igg4抗体或其变体。在其他具体方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体的结合剂(例如抗独特型抗体)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该靶标抗fxi/fxia抗体包含：(i)含有氨基酸序列seqidno:12的重链可变区(vh)和含有氨基酸序列seqidno:23的轻链可变区(vl)；或(ii)含有氨基酸序列seqidno:14的重链和含有氨基酸序列seqidno:25的轻链。在特定方面，本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如idt11或idt12)能够减少、抑制或逆转(例如部分逆转)抗fxi/fxia抗体介导的一种或多种以下抗凝作用：(i)aptt测定中的aptt延长；和(ii)人血浆中的凝血酶产生测定(tga)中凝血酶量的减少。已描述了测量这些抗凝活性的方案和测定法，并且本文在例如实施例章节中描述了示例性测定法。在一个具体方面，本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如idt11或idt12)能够逆转靶标fxi/fxia抗体的抗凝作用，其特征在于使抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的aptt延长降低、抑制或逆转至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％，如通过本领域或本文中所述的aptt测定法所确定。在一个具体方面，本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂能够逆转靶标fxi/fxia抗体的抗凝作用，其特征在于使抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的人血浆中的凝血酶产生测定(tga)中凝血酶的量的减少降低、抑制或逆转至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％。在其他具体方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体的结合剂(例如抗独特型抗体)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该靶标抗fxi/fxia抗体包含：(i)含有氨基酸序列seqidno:12的重链可变区(vh)和含有氨基酸序列seqidno:23的轻链可变区(vl)；或(ii)含有氨基酸序列seqidno:14的重链和含有氨基酸序列seqidno:25的轻链，其中该结合剂是抗体或其抗原结合片段，其包含：(1)含有选自表2中所示的那些的互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3的vh；和(2)含有选自表2中所示的那些的互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3的vl。在特定方面，该结合剂(例如抗独特型抗体)包含选自表2中所示的那些的组合hcdr1、hcdr2和hcdr3，以及选自表2中所示的那些的组合lcdr1、lcdr2和lcdr3。在特定方面，该结合剂(例如抗独特型抗体)包含选自表2中所示的那些的kabathcdr1、hcdr2和hcdr3，以及选自表2中所示的那些的kabatlcdr1、lcdr2和lcdr3。在特定方面，该结合剂(例如抗独特型抗体)包含选自表2中所示的那些的chothiahcdr1、hcdr2和hcdr3，以及选自表2中所示的那些的chothialcdr1、lcdr2和lcdr3。在特定方面，该结合剂(例如抗独特型抗体)包含选自表2中所示的那些的imgthcdr1、hcdr2和hcdr3，以及选自表2中所示的那些的imgtlcdr1、lcdr2和lcdr3。表2.抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗独特型抗体和fab片段)的实例本文所用的术语“互补决定区”和“cdr”是指抗体可变区内的赋予抗原特异性和结合亲和力的氨基酸序列。通常，每个重链可变区中有三个cdr(hcdr1、hcdr2、hcdr3)，每个轻链可变区中有三个cdr(lcdr1、lcdr2、lcdr3)。给定cdr的精确氨基酸序列边界可以使用许多众所周知的方案中的任何一种容易地确定，包括由kabat等(1991),“sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,”第5版publichealthservice,nationalinstitutesofhealth,bethesda,md(“kabat”编号方案)、al-lazikani等,(1997)jmb273,927-948(“chothia”编号方案)或lefranc等,(2003)dev.comp.immunol.,27,55-77(“imgt”编号方案)描述的方案。备选地，可以使用用于描绘cdr区的其他方法。例如，可以组合kabat和chothia二者的cdr定义(“组合”系统)。例如，在kabat下，重链可变结构域(vh)中抗体的cdr氨基酸残基编号为31-35(hcdr1)、50-66(hcdr2)和99-111(hcdr3)；轻链可变结构域(vl)中的cdr氨基酸残基编号为22-35(lcdr1)、51-57(lcdr2)和90-100(lcdr3)。在chothia下，vh中的cdr氨基酸编号为26-32(hcdr1)、52-57(hcdr2)和99-111(hcdr3)；vl中的氨基酸残基编号为25-33(lcdr1)、51-53(lcdr2)和92-99(lcdr3)。通过组合kabat和chothia二者的cdr定义，“组合的”cdr包含人vh中的氨基酸残基26-35(hcdr1)、50-66(hcdr2)和99-108(hcdr3)，以及人vl中的氨基酸残基24-38(lcdr1)、54-60(lcdr2)和93-101(lcdr3)。作为另一个实例，在imgt下，重链可变结构域(vh)中的cdr氨基酸残基编号为26-33(hcdr1)、51-58(hcdr2)和97-108(hcdr3)；轻链可变结构域(vl)中的cdr氨基酸残基编号为27-36(lcdr1)、54-56(lcdr2)和93-101(lcdr3)。表2提供了抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体)例如idt1-idt10的示例性kabat、chothia、组合的和imgthcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2和lcdr3。由于表2中公开的每种抗体都可以结合抗fxi/fxia抗体nov1401，并且抗原结合特异性主要由cdr1、2和3区提供，因此可以“混合和匹配”vhcdr1、2和3序列和vlcdr1、2和3序列(即可以混合和匹配来自不同抗体的cdr)以产生本文提供的其他fxi和/或fxia结合分子，但每种抗体优选包含vhcdr1、2和3和vlcdr1、2和3。可以使用本领域已知的结合测定和实施例中描述的结合测定(例如elisa、set、biacoretm测定)来测试此类“混合和匹配的”抗fxi/fxia抗体结合剂。在混合和匹配vhcdr序列时，应当用结构相似的cdr序列替换来自特定vh序列的cdr1、cdr2和/或cdr3序列。同样，在混合和匹配vlcdr序列时，应当用结构相似的cdr序列替换来自特定vl序列的cdr1、cdr2和/或cdr3序列。对普通技术人员而言显而易见的是，可以通过用来自本文针对本文提供的抗体所示的cdr序列的结构上相似的序列取代一个或多个vh和/或vlcdr区序列来产生新的vh和vl序列。除前述内容外，在一方面，本文提供的结合剂可以是抗体的抗原结合片段，并且可以包含vhcdr1、2和3或vlcdr1、2和3，其中该片段作为单个可变结构域结合抗fxi/fxia抗体(如nov1401)。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该靶标抗fxi/fxia抗体是抗体nov1401(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl)，其中该结合剂是抗体(例如全长igg)或其抗原结合片段，其包含：(1)含有互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3的vh；和(2)含有互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3的vl；其中：a.hcdr1包含氨基酸序列seqidno:27、59、91、123、155、187、219、251、283或315；b.hcdr2包含氨基酸序列seqidno:28、60、92、124、156、188、220、252、284或316；c.hcdr3包含氨基酸序列seqidno:29、61、93、125、157、189、221、253、285或317；d.lcdr1包含氨基酸序列seqidno:43、75、107、139、171、203、235、267、299或331；e.lcdr2包含氨基酸序列seqidno:44、76、108、140、172、204、236、268、300或332；和f.lcdr3包含氨基酸序列seqidno:45、77、109、141、173、205、237、269、301或333。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该靶标抗fxi/fxia抗体是抗体nov1401(包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl)，其中该结合剂是抗体或其抗原结合片段，其包含：(1)含有互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3的vh；和(2)含有互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3的vl；其中：a.hcdr1包含氨基酸序列seqidno:30、62、94、126、158、190、222、254、286或318；b.hcdr2包含氨基酸序列seqidno:31、63、95、127、159、191、223、255、287或319；c.hcdr3包含氨基酸序列seqidno:32、64、96、128、160、192、224、256、288或320；d.lcdr1包含氨基酸序列seqidno:46、78、110、142、174、206、238、270、302或334；e.lcdr2包含氨基酸序列seqidno:47、79、111、143、175、207、239、271、303或335；和f.lcdr3包含氨基酸序列seqidno:48、80、112、144、176、208、240、272、304或336。由于表2中公开的每种结合剂(例如抗体)都可以结合抗fxi/fxia抗体nov1401，因此可以“混合和匹配”vh、vl、全长轻链和全长重链序列(氨基酸序列和编码氨该基酸序列的核苷酸序列)以产生其他抗fxi/fxia抗体结合剂。可以使用本领域已知的结合测定(例如elisa和实施例章节中描述的其他测定)来测试此类“混合和匹配的”抗fxi/fxia抗体结合剂。在混合和匹配这些链时，应当用结构相似的vh序列替换来自特定vh/vl配对的vh序列。同样，应当用结构相似的全长重链序列替换来自特定全长重链/全长轻链配对的全长重链序列。同样，应当用结构相似的vl序列替换来自特定vh/vl配对的vl序列。同样，应当用结构相似的全长轻链序列替换来自特定全长重链/全长轻链配对的全长轻链序列。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:39、71、103、135、167、199、231、263、295或327，该vl包含氨基酸序列seqidno:55、87、119、151、183、215、247、279、311或343。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含vh氨基酸序列seqidno:39、71、103、135、167、199、231、263、295或327的3个vhcdr，该vl包含vl氨基酸序列seqidno:55、87、119、151、183、215、247、279、311或343的3个vlcdr。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:39，该vl包含氨基酸序列seqidno:55。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:71，该vl包含氨基酸序列seqidno:87。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:103，该vl包含氨基酸序列seqidno:119。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:135，该vl包含氨基酸序列seqidno:151。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:167，该vl包含氨基酸序列seqidno:183。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:199，该vl包含氨基酸序列seqidno:215。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:231，该vl包含氨基酸序列seqidno:247。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:263，该vl包含氨基酸序列seqidno:279。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:295，该vl包含氨基酸序列seqidno:311。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno：12的vh和含有氨基酸序列seqidno：23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，其中该vh包含氨基酸序列seqidno:327，该vl包含氨基酸序列seqidno:343。在特定方面，本文提供结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)或包含这种结合剂的药物组合物，其特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:347，该轻链包含氨基酸序列seqidno:57。在特定方面，本文提供结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)或包含这种结合剂的药物组合物，其特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:349，该轻链包含氨基酸序列seqidno:89。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:41、73、105、137、169、201、233、265、297或329，且该轻链包含氨基酸序列seqidno:57、89、121、153、185、217、249、281、313或345。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:41，该轻链包含氨基酸序列seqidno:57。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:73，该轻链包含氨基酸序列seqidno:89。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:105，该轻链包含氨基酸序列seqidno:121。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:137，该轻链包含氨基酸序列seqidno:153。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:169，该轻链包含氨基酸序列seqidno:185。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:201，该轻链包含氨基酸序列seqidno:217。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:233，该轻链包含氨基酸序列seqidno:249。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:265，该轻链包含氨基酸序列seqidno:281。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:297，该轻链包含氨基酸序列seqidno:313。在特定方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:329，该轻链包含氨基酸序列seqidno:345。在某些方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体如nov1401(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是表2中所示的例如抗体idt1、idt2、idt3、idt4、idt5、idt6、idt7、idt8、idt9或idt10的抗体fab片段。在某些方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体如nov1401(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是表2中所示的例如抗体idt1、idt2、idt3、idt4、idt5、idt6、idt7、idt8、idt9或idt10的抗体fab片段，并且是重组单克隆人抗体。在某些方面，本文提供药物组合物，其包含特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体如nov1401(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是表2中所示的例如抗体idt1、idt2、idt3、idt4、idt5、idt6、idt7、idt8、idt9、idt10、idt11或idt12，其中该结合剂为液体制剂，其包含150mm至300mm范围内的蔗糖(例如220mm蔗糖)和5mm至35mm范围内的组氨酸(例如20mm组氨酸)，其中该制剂具有4.5至6.5范围内的ph(例如ph为5.5)。在一个具体方面，该药物组合物包含浓度为150mg/ml的结合剂(例如表2中所示的结合剂)。如果抗体的可变区或全长链获自使用人种系免疫球蛋白基因的系统，则本文所用的人抗体包含是特定种系序列的“产物”或“衍生自”特定种系序列的重链或轻链可变区或全长重链或轻链。此类系统包括用目的抗原免疫携带人免疫球蛋白基因的转基因小鼠或用目的抗原筛选展示在噬菌体上的人免疫球蛋白基因文库。通过将人抗体的氨基酸序列与人种系免疫球蛋白的氨基酸序列进行比较，并选择在序列上与该人抗体的序列最接近(即最大％同一性)的人种系免疫球蛋白序列，可以鉴定是人种系免疫球蛋白序列“的产物”或“衍生自”人种系免疫球蛋白序列的人抗体。由于例如天然存在的体细胞突变或有意引入的定点突变，作为特定人种系免疫球蛋白序列的“产物”或“衍生自”特定人种系免疫球蛋白序列的人抗体与种系序列相比可以包含氨基酸差异。然而，在具体方面，在vh或vl构架区中，所选择的人抗体通常在氨基酸序列上与由人种系免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列至少90％同一，并且包含在与其他物种的种系免疫球蛋白氨基酸序列(例如鼠种系序列)相比时将该人抗体鉴定为人源抗体的氨基酸残基。在某些情况下，人抗体在氨基酸序列上可以与由种系免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列至少60％、70％、80％、90％或至少95％、或甚至至少96％、97％、98％或99％同一。在具体方面，通常，重组人抗体在vh或vl构架区中可以与人种系免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列显示不超过10个氨基酸差异。在某些情况下，该人抗体可以与种系免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列显示不超过5个、或甚至不超过4、3、2或1个氨基酸差异。人种系免疫球蛋白基因的实例包括但不限于本文所述的可变结构域种系片段以及dp47和dpk9。同源抗体在另一方面，本公开提供包含与表2中所述的序列同源的氨基酸序列的结合剂，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂结合抗fxi/fxia抗体，并保留表2中所述的那些抗体(如抗体idt1-idt12中的任一种)的所需功能特性(例如逆转一种或多种抗凝作用)。在具体方面，此类同源抗体保留表2中所述的cdr氨基酸序列(例如kabatcdr、chothiacdr、imgtcdr或组合cdr)。在具体方面，此类同源抗体是人全长igg。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含该结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh和vl包含与选自表2的vh和vl序列至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％同一的氨基酸序列。在其他具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含该结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh包含与氨基酸序列seqidno:39至少90％或至少95％同一的氨基酸序列，该vl包含与氨基酸序列seqidno:55至少90％或至少95％同一的氨基酸序列。在另一具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含该结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh包含与氨基酸序列seqidno:71至少90％或至少95％同一的氨基酸序列，该vl包含氨基酸序列seqidno:87。在另一具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh包含与氨基酸序列seqidno:103至少90％或至少95％同一的氨基酸序列，该vl包含氨基酸序列seqidno:119。在另一具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh包含与氨基酸序列seqidno:135至少90％或至少95％同一的氨基酸序列，该vl包含与氨基酸序列seqidno:151至少90％或至少95％同一的氨基酸序列。在另一具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh包含与氨基酸序列seqidno:167至少90％或至少95％同一的氨基酸序列，该vl包含与氨基酸序列seqidno:183至少90％或至少95％同一的氨基酸序列。在另一具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh包含与氨基酸序列seqidno:199至少90％或至少95％同一的氨基酸序列，该vl包含与氨基酸序列seqidno:215至少90％或至少95％同一的氨基酸序列。在另一具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh包含与氨基酸序列seqidno:231至少90％或至少95％同一的氨基酸序列，该vl包含与氨基酸序列seqidno:247至少90％或至少95％同一的氨基酸序列。在另一具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh包含与氨基酸序列seqidno:263至少90％或至少95％同一的氨基酸序列，该vl包含与氨基酸序列seqidno:279至少90％或至少95％同一的氨基酸序列。在另一具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh包含与氨基酸序列seqidno:295至少90％或至少95％同一的氨基酸序列，该vl包含与氨基酸序列seqidno:311至少90％或至少95％同一的氨基酸序列。在另一具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含vh和vl的抗体或其抗原结合片段，并且其中该vh包含与氨基酸序列seqidno:327至少90％或至少95％同一的氨基酸序列，该vl包含与氨基酸序列seqidno:343至少90％或至少95％同一的氨基酸序列。在另一具体方面，该结合剂的vl和/或vh中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体，其中该重链包含与氨基酸序列seqidno:347至少90％或至少95％或至少98％同一的氨基酸序列，该轻链包含与氨基酸序列seqidno:57至少90％或至少95％或至少98％同一的氨基酸序列。在另一具体方面，该结合剂的重链和/或轻链中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体，其中该重链包含与氨基酸序列seqidno:349至少90％或至少95％或至少98％同一的氨基酸序列，该轻链包含与氨基酸序列seqidno:89至少90％或至少95％或至少98％同一的氨基酸序列。在另一具体方面，该结合剂的重链和/或轻链中的氨基酸序列差异不在互补决定区内。本文所用的两个序列间的百分比同一性是该序列所共有的相同位置数的函数(即％同一性等于相同位置数/位置总数x100)，考虑为了两个序列的最佳比对而需引入的缺口数以及每个缺口的长度。序列的比较和两个序列间百分比同一性的确定可以使用下文非限制性实施例中所述的数学算法来达到。此外或备选地，可以进一步用本发明的蛋白质序列作为“查询序列”来搜索公共数据库，以例如鉴定相关序列。例如，可以使用altschul等,1990j.mol.biol.215:403-10的blast程序(2.0版)进行这类搜索。本公开还提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂是包含(或备选地由其组成)表2中所列的vh氨基酸序列的抗体或其抗原结合片段，其中突变了构架序列(例如不是cdr的序列)中的不超过约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、15、16、17、18、19或20个氨基酸(其中作为多种非限制性实例，突变是添加、取代或缺失)。本公开还提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂是包含(或备选地由其组成)表2中所列的vl氨基酸序列的抗体或其抗原结合片段，其中突变了构架序列(例如不是cdr的序列)中的不超过约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、15、16、17、18、19或20个氨基酸(其中作为多种非限制性实例，突变是添加、取代或缺失)。具有保守修饰的抗体在某些方面，本公开涉及结合剂，其是特异性结合抗fxi/fxia抗体(如nov1401)的抗体或其抗原结合片段(例如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂包含含有cdr1、cdr2和cdr3序列的vh和含有cdr1、cdr2和cdr3序列的vl，其中这些cdr序列中的一个或多个具有基于本文所述抗体(如表2中所述的抗体)的指定氨基酸序列或其保守修饰，并且其中该结合剂保留了本文所述结合剂(例如结合剂idt1、idt2、idt3、idt4、idt5、idt6、idt7、idt8、idt9、idt10、idt11或idt12)的所需功能特性(例如逆转抗fxi/fxia抗体的一种或多种抗凝作用)。在具体方面，本文所述的结合剂，其是特异性结合抗fxi/fxia抗体(如nov1401)的抗体(例如全长igg)或其抗原结合片段(例如fab片段)，包含在一个或多个cdr中具有1、2、3或更多个保守修饰的表2中所示的含有cdr1、cdr2和cdr3序列的vh和含有cdr1、cdr2和cdr3序列的vl，并且其中该结合剂保留了本文所述结合剂(例如结合剂idt1、idt2、idt3、idt4、idt5、idt6、idt7、idt8、idt9、idt10、idt11或idt12)的所需功能特性(例如结合抗fxi/fxia抗体和/或逆转抗fxi/fxia抗体的一种或多种抗凝作用)。在其他具体方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(如nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是抗体或其抗原结合片段，其包含：(1)含有选自表2中所示的那些及其保守修饰的互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3的vh；和(2)含有选自表2中所示的那些的互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3的vl。在特定方面，该结合剂(例如抗独特型抗体)包含选自表2中所示的那些及其保守修饰的组合hcdr1、hcdr2和hcdr3，以及选自表2中所示的那些及其保守修饰的组合lcdr1、lcdr2和lcdr3。在特定方面，该结合剂(例如抗独特型抗体)包含选自表2中所示的那些及其保守修饰的kabathcdr1、hcdr2和hcdr3，以及选自表2中所示的那些及其保守修饰的kabatlcdr1、lcdr2和lcdr3。在特定方面，该结合剂(例如抗独特型抗体)包含选自表2中所示的那些及其保守修饰的chothiahcdr1、hcdr2和hcdr3，以及选自表2中所示的那些及其保守修饰的chothialcdr1、lcdr2和lcdr3。在特定方面，该结合剂(例如抗独特型抗体)包含选自表2中所示的那些及其保守修饰的imgthcdr1、hcdr2和hcdr3，以及选自表2中所示的那些及其保守修饰的imgtlcdr1、lcdr2和lcdr3。在一个具体方面，该结合剂是全长igg。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(如nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是抗体或其抗原结合片段，其包含：(1)含有互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3的vh；和(2)含有互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3的vl；其中：a.hcdr1包含氨基酸序列seqidno:27、59、91、123、155、187、219、251、283或315或其保守修饰；b.hcdr2包含氨基酸序列seqidno:28、60、92、124、156、188、220、252、284或316或其保守修饰；c.hcdr3包含氨基酸序列seqidno:29、61、93、125、157、189、221、253、285或317或其保守修饰；d.lcdr1包含氨基酸序列seqidno:43、75、107、139、171、203、235、267、299或331或其保守修饰；e.lcdr2包含氨基酸序列seqidno:44、76、108、140、172、204、236、268、300或332或其保守修饰；和f.lcdr3包含氨基酸序列seqidno:45、77、109、141、173、205、237、269、301或333或其保守修饰。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(如nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是抗体或其抗原结合片段，其包含：(1)含有互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3的vh；和(2)含有互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3的vl；其中：a.hcdr1包含氨基酸序列seqidno:30、62、94、126、158、190、222、254、286或318或其保守修饰；b.hcdr2包含氨基酸序列seqidno:31、63、95、127、159、191、223、255、287或319或其保守修饰；c.hcdr3包含氨基酸序列seqidno:32、64、96、128、160、192、224、256、288或320或其保守修饰；d.lcdr1包含氨基酸序列seqidno:46、78、110、142、174、206、238、270、302或334或其保守修饰；e.lcdr2包含氨基酸序列seqidno:47、79、111、143、175、207、239、271、303或335或其保守修饰；和f.lcdr3包含氨基酸序列seqidno:48、80、112、144、176、208、240、272、304或336或其保守修饰。本公开还提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂是抗体或其抗原结合片段，其包含(或备选地由其组成)表2中所列的vh氨基酸序列，其中构架序列(例如不是cdr的序列)中的不超过约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、15、16、17、18、19或20个氨基酸具有保守修饰。本公开还提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段，如fab片段)，其中该结合剂是抗体或其抗原结合片段，其包含(或备选地由其组成)表2中所列的vl氨基酸序列，其中构架序列(例如不是cdr的序列)中的不超过约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、15、16、17、18、19或20个氨基酸具有保守修饰。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:347，其具有一个、两个、三个或四个基本上不影响活性的突变，如保守氨基酸突变，和/或该轻链包含氨基酸序列seqidno:57，其具有一个、两个、三个或四个基本上不影响活性的突变，如保守氨基酸突变。在另一具体方面，该突变不在互补决定区内。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl的nov1401)的结合剂(例如抗独特型抗体)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制该靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂是包含重链和轻链的抗体，其中该重链包含氨基酸序列seqidno:349，其具有一个、两个、三个或四个基本上不影响活性的突变，如保守氨基酸突变，和/或该轻链包含氨基酸序列seqidno:89，其具有一个、两个、三个或四个基本上不影响活性的突变，如保守氨基酸突变。在另一具体方面，该突变不在互补决定区内。改造和修饰的抗体可以用具有本文所示的一个或多个vh和/或vl序列的抗体作为起始材料来改造修饰抗体，制备本文提供的作为抗体(如全长igg或fab片段)的结合剂(例如抗fxi/fxia抗体结合剂)，该修饰抗体可以具有从起始抗体改变的特性。可以通过修饰一个或两个可变区(即vh和/或vl)内，例如一个或多个cdr区内和/或一个或多个构架区内的一个或多个残基来改造抗体。此外或备选地，可以通过修饰恒定区域内的残基来改造抗体，例如以改变抗体的效应子功能。可以进行的一类可变区改造是cdr移植。抗体主要通过定位在六个重链和轻链互补决定区(cdr)中的氨基酸残基与靶抗原相互作用。因此，各个抗体之间cdr内的氨基酸序列比cdr外部的序列差异更大。由于cdr序列负责大多数抗体-抗原相互作用，因此可以通过构建表达载体来表达模拟特定天然存在的抗体的特性的重组抗体，该表达载体包括来自特定天然存在的抗体的cdr序列，并将其移植到来自具有不同特性的不同抗体的构架序列上(参见例如riechmann,l.等,1998nature332:323-327；jones,p.等,1986nature321:522-525；queen,c.等,1989proc.natl.acad.,u.s.a.86:10029-10033；winter的美国专利号5,225,539；queen等的美国专利号5,530,101；5,585,089；5,693,762和6,180,370)。构架序列可以从公共dna数据库或包括种系抗体基因序列的公开参考文献获得。例如，人重链和轻链可变区基因的种系dna序列可见于“vbase”人种系序列数据库中(可在万维网上找到，网址为mrc-cpe.cam.ac.uk/vbase)，以及kabat,e.a.等,1991sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,第5版,u.s.departmentofhealthandhumanservices,nihpublicationno.91-3242、tomlinson,i.m.等,1992j.mol.biol.227:776-798和cox,j.p.l等,1994eur.jimmunol.24:827-836中；其中每一个的内容在此明确引入作为参考。用于本公开的抗体的构架序列的实例是在结构上与本文描述的所选抗体使用的构架序列相似的那些，例如本发明的单克隆抗体使用的共有序列和/或构架序列。可以将vhcdr1、2和3序列以及vlcdr1、2和3序列移植到具有与见于衍生该构架序列的种系免疫球蛋白基因中的序列相同的序列的框架区上，或者可以将cdr序列移植到与种系序列相比包含一个或多个突变的构架区上。例如，已经发现在某些情况下，突变构架区内的残基以维持或增强抗体的抗原结合能力是有益的(参见例如queen等的美国专利号5,530,101、5,585,089、5,693,762和6,180,370)。可用作支架来在其上构建本文所述抗体和抗原结合片段的构架包括但不限于vh1a、vh1b、vh3、vk1、vl2和vk2。其他构架为本领域已知，并且可见于例如vbase.mrc-cpe.cam.ac.uk/index.php？&mmn_position＝1:1的万维网上的vbase数据库中。因此，在具体方面，本公开涉及结合剂，如结合抗fxi/fxia抗体(如nov1401)的分离的抗体，以及包含此类结合剂的药物组合物，其包含重链可变体区，该重链可变区含有选自seqidno:39、71、103、135、167、199、231、263、295和327的氨基酸序列，或在此类序列的构架区中具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列，并且进一步包含轻链可变区，该轻链可变区包含选自seqidno:55、87、119、151、183，215、247、279、311和343的氨基酸序列，或在此类序列的构架区中具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列。另一类可变区修饰是突变vh和/或vlcdr1、cdr2和/或cdr3区内的氨基酸残基，从而改善目的抗体的一种或多种结合特性(例如亲和力)，称为“亲和力成熟”。可以进行定点诱变或pcr介导的诱变以引入突变，并且可以在本文中所述并在实施例章节中提供的体外或体内测定中评估对抗体结合或其他目的功能特性的影响。可以引入保守修饰(如上文所讨论)。突变可以是氨基酸取代、添加或缺失。此外，通常改变cdr区中的不超过一个、两个、三个、四个或五个残基。因此，在具体方面，本文提供结合剂，其是抗体idt1、idt2、idt3、idt4、idt5、idt6、idt7、idt8、idt9、idt10、idt11或idt12的亲和力成熟变体，以及包含此类结合剂的药物组合物，其中该亲和力成熟变体对抗fxi/fxia抗体nov1401的亲和力高于亲本，并且能够逆转nov1401的一种或多种抗凝作用。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该靶标抗fxi/fxia抗体是抗体nov1401(包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl)，其中该结合剂是抗体或其抗原结合片段，其包含：(1)含有互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3的vh；和(2)含有互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3的vl；其中：a.hcdr1包含氨基酸序列seqidno:27、59、91、123、155、187、219、251、283或315，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列；b.hcdr2包含氨基酸序列seqidno:28、60、92、124、156、188、220、252、284或316，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列；c.hcdr3包含氨基酸序列seqidno:29、61、93、125、157、189、221、253、285或317，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列；d.lcdr1包含氨基酸序列seqidno:43、75、107、139、171、203、235、267、299或331，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列；e.lcdr2包含氨基酸序列seqidno:44、76、108、140、172、204、236、268、300或332，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列；和f.lcdr3包含氨基酸序列seqidno:45、77、109、141、173、205、237、269、301或333，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列。在特定方面，本文提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体的结合剂(例如抗独特型抗体及其片段)，以及包含这种结合剂的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该靶标抗fxi/fxia抗体是抗体nov1401(包含含有氨基酸序列seqidno:12的vh和含有氨基酸序列seqidno:23的vl)，其中该结合剂是抗体或其抗原结合片段，其包含：(1)含有互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3的vh；和(2)含有互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3的vl；其中：a.hcdr1包含氨基酸序列seqidno:30、62、94、126、158、190、222、254、286或318，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列；b.hcdr2包含氨基酸序列seqidno:31、63、95、127、159、191、223、255、287或319，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列；c.hcdr3包含氨基酸序列seqidno:32、64、96、128、160、192、224、256、288或320，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列；d.lcdr1包含氨基酸序列seqidno:46、78、110、142、174、206、238、270、302或334，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列；e.lcdr2包含氨基酸序列seqidno:47、79、111、143、175、207、239、271、303或335，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列；和f.lcdr3包含氨基酸序列seqidno:48、80、112、144、176、208、240、272、304或336，或其具有一个、两个、三个、四个或五个氨基酸取代、缺失或添加的氨基酸序列。抗原结合结构域移植入备选的构架或支架对于本文提供的作为抗体的抗fxi/fxia抗体结合剂，可以利用多种抗体/免疫球蛋白构架或支架，只要所得到的多肽包含至少一个特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体的结合区。此类构架或支架包括5种主要独特型的人免疫球蛋白或其片段，并且包括其他动物物种的免疫球蛋白，优选具有人源化方面。在这方面，单重链抗体如在骆驼科动物中鉴定的那些尤其引人关注。在一方面，本公开涉及使用非免疫球蛋白支架产生基于非免疫球蛋白的抗体，可将诸如表2中所述的cdr移植到该非免疫球蛋白支架上。可以使用已知的或有待发现的非免疫球蛋白构架和支架，只要它们包含对靶标抗fxi/fxia抗体(如nov1401)特异的结合区。已知的非免疫球蛋白构架或支架包括但不限于纤连蛋白(compoundtherapeutics,inc.,waltham,ma)、锚蛋白(molecularpartnersag,zurich,瑞士)、结构域抗体(domantis,ltd.,cambridge,ma,andablynxnv,zwijnaarde,比利时)、脂质运载蛋白(pierisproteolabag,freising,德国)、小模块免疫药物(trubionpharmaceuticalsinc.,seattle,wa)、maxybodies(avidia,inc.,mountainview,ca)、蛋白a(affibodyag,瑞典)和affilin(γ-晶状体蛋白或泛素)(scilproteinsgmbh,halle,德国)。纤连蛋白支架基于纤连蛋白iii型结构域(例如纤连蛋白iii型的第十模块(10fn3结构域))。纤连蛋白iii型结构域具有分布在两个β折叠之间的7或8个β链，它们自身彼此堆叠以形成蛋白质的核心，并且还包含将β链彼此连接并暴露在溶剂中的环(类似于cdr)。在β折叠三明治的每个边缘上至少有三个这样的环，其中该边缘是垂直于β链方向的蛋白质边界(参见us6,818,418)。这些基于纤连蛋白的支架不是免疫球蛋白，但总体折叠与最小功能性抗体片段(重链的可变区)的总体折叠紧密相关，重链的可变区在骆驼和美洲驼igg中包括整个抗原识别单元。由于这种结构，该非免疫球蛋白抗体模拟与抗体的性质和亲和力相似的抗原结合特性。这些支架可用于体外环随机化和改组策略，类似于体内抗体亲和力成熟的过程。这些基于纤连蛋白的分子可以用作支架，其中可以使用标准克隆技术将分子的环区替换为本发明的cdr。锚蛋白技术基于使用具有锚蛋白衍生的重复模块的蛋白质作为携带可变区的支架，该可变区可用于结合不同靶标。锚蛋白重复模块是由两个反平行的α螺旋和一个β转角组成的33个氨基酸的多肽。可变区的结合大多通过使用核糖体展示来优化。avimer衍生自包含天然a结构域的蛋白质，如lrp-1。这些结构域自然用于蛋白质-蛋白质相互作用，在人类中，超过250种蛋白质在结构上基于a结构域。avimer由通过氨基酸接头连接的许多不同的“a结构域”单体(2-10)组成。可以使用例如美国专利申请公开号20040175756、20050053973、20050048512和20060008844中所述的方法来产生可以与靶抗原结合的avimers。亲和体亲和配体是小的简单蛋白质，其由基于蛋白a的igg结合结构域之一的支架的三螺旋束组成。蛋白a是来自金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)的表面蛋白。此支架结构域包含58个氨基酸，其中13个氨基酸随机化以产生具有大量配体变体的亲和体文库(参见例如us5,831,012)。亲合体分子模拟抗体，与抗体的分子量150kda相比，它们的分子量为6kda。尽管体积小，但亲和体分子的结合部位与抗体的结合部位相似。anticalin是由pierisproteolabag公司开发的产品。它们衍生自脂质运载蛋白，脂质运载蛋白是一组广泛的小而强力的蛋白质，通常涉及化学敏感或不溶性化合物的生理转运或贮存。在人体组织或体液中存在几种天然的脂质运载蛋白。蛋白质结构让人联想到免疫球蛋白，在刚性构架的顶部具有高变环。然而，与抗体或它们的重组片段相反，脂质运载蛋白由具有160至180个氨基酸残基的单条多肽链组成，仅比单个免疫球蛋白结构域略大。四个环组成一组，构成结合袋，显示明显的结构可塑性，并能耐受多种侧链。结合部位因此可以在专有方法中重塑，以便以高亲和力和特异性识别不同形状的指定靶分子。脂质运载蛋白家族的一种蛋白质，大菜粉蝶(pierisbrassicae)的后胆色素结合蛋白(bbp)，已通过诱变四个环的组合用于开发anticalin。描述anticalin的专利申请的一个实例在pct公开号wo199916873中。affilin分子是小的非免疫球蛋白蛋白质，其设计为对蛋白质和小分子具有特异性亲和力。可以从两个文库中快速选择新的affilin分子，每个文库均基于不同的人源支架蛋白。affilin分子与免疫球蛋白蛋白质不显示任何结构同源性。目前，使用两种affilin支架，其中一种是γ-晶状体，一种人眼结构的晶状体蛋白质，另一种是“泛素”超家族蛋白质。两种人支架都非常小，显示高温稳定性，并且几乎能抵抗ph变化和变性剂。这种高稳定性主要是由于蛋白质扩展的β折叠结构。γ晶状体衍生的蛋白的实例在wo200104144中描述，“泛素样”蛋白质的实例在wo2004106368中描述。蛋白质表位模拟物(pem)是模拟蛋白质的β-发夹二级结构的中等大小环状肽样分子(mw1-2kda)，主要二级结构参与蛋白质-蛋白质相互作用。在具体方面，本公开提供特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(如nov1401)的全人抗体。与嵌合或人源化抗体相比，在对人个体施用时，人抗体的抗原性进一步降低。fc改造本公开的抗体可以改造以在fc区内包含修饰，通常用于改变抗体的一种或多种功能特性，如血清半衰期、补体固定、fc受体结合和/或抗原依赖性细胞毒性。此外，本公开的抗体可以进行化学修饰(例如可将一个或多个化学部分连接至抗体)或修饰以改变其糖基化，同样用于改变抗体的一种或多种功能特性。这些实施方案中的每一个实施方案将在下文进一步详细描述。fc区中的残基编号是kabat的eu索引的编号。在一方面，这样修饰ch1的铰链区，使得铰链区中的半胱氨酸残基的数目改变，例如增加或减少。bodmer等人的美国专利号5,677,425中进一步描述了这种方法。改变ch1的铰链区中的半胱氨酸残基的数目，例如以便于轻链和重链的组装或增加或降低抗体的稳定性。在另一方面，突变抗体的fc铰链区以降低抗体的生物学半衰期。更具体而言，将一个或多个氨基酸突变引入fc-铰链片段的ch2-ch3结构域界面区，使得相对于天然fc铰链结构域spa结合，抗体具有受损的葡萄球菌蛋白a(spa)结合。这种方法在ward等人的美国专利号6,165,745中有更详细的描述。在另一方面，修饰抗体以增加其生物学半衰期。多种方法都是可能的。例如，可以使用ward的美国专利号6,277,375中所述的一种或多种突变。备选地，为了增加生物学半衰期，可以按presta等人的美国专利号5,869,046和6,121,022中所述，在ch1或cl区内改变抗体，以包含取自igg的fc区域的ch2结构域的两个环的补救受体结合表位。还在其他方面，通过用不同的氨基酸残基替换至少一个氨基酸残基来改变fc区，以改变抗体的效应子功能。例如，可以用不同的氨基酸残基取代一个或多个氨基酸，使得抗体对效应子配体具有改变的亲和力，但保留亲本抗体的抗原结合能力。亲和力改变的效应子配体可以是例如fc受体或补体的c1成分。此方法在winter等人的美国专利号5,624,821和5,648,260中有更详细的描述。在另一方面，可以用不同的氨基酸残基替换选自氨基酸残基的一个或多个氨基酸，使得抗体改变c1q结合和/或减少或消除补体依赖性细胞毒性(cdc)。此方法在idusogie等人的美国专利号6,194,551中有更详细的描述。在另一方面，改变一个或多个氨基酸残基，从而改变抗体固定补体的能力。此方法在bodmer等人的pct公开wo94/29351中有更详细的描述。在具体方面，本文所述的结合剂(例如表2中所述的结合剂，如idt11或idt12)，例如结合抗fxi/fxia抗体(如抗体nov1401)的抗体结合剂包含人igg(例如igg1)fc区，该fc区包含氨基酸取代d265a和/或p329a，以减少由任何表面结合的fxi引起的adcc或cdc的可能性。这些丙氨酸取代已显示降低adcc和cdc(参见例如idosugie等,j.immunol.164:4178-4184,2000；shields等,j.biol.chem.276:6591-6604,2001)。在其他方面，本文所述的结合剂包含具有fc沉默突变的人igg(例如iggl)fc区，该fc沉默突变如234和235位的亮氨酸(l)至丙氨酸(a)的取代(lala)和/或297位的丙氨酸(a)至天冬酰胺(n)的取代(n297a)(参见例如leabman等,mabs.5:896–903,2013)。在另一方面，修饰本文所述的抗体的fc区以增加抗体介导抗体依赖性细胞毒性(adcc)的能力和/或通过修饰一个或多个氨基酸来增加抗体对fcγ受体的亲和力。此方法在presta的pct公开wo00/42072中有更详细的描述。此外，已经定位了人igg1上的fcγr1、fcγrii、fcγriii和fcrn结合部位，并且描述了具有改善的结合的变体(参见shields,r.l.等,2001j.biol.chen.276:6591-6604)。还在另一方面，修饰抗体的糖基化。例如，可以制备无糖基化的抗体(即该抗体缺乏糖基化)。可以改变糖基化以例如增加抗体对“抗原”的亲和力。这类糖修饰可通过例如改变抗体序列内的一个或多个糖基化位点来实现。例如，可以进行一个或多个氨基酸取代，其导致消除一个或多个可变区构架糖基化位点，从而消除该位点的糖基化。这种无糖基化可以增加抗体对抗原的亲和力。这种方法在co等人的美国专利号号5,714,350和6,350,861中有更详细的描述。此外或备选地，可以制备具有改变的糖基化类型的抗体，如具有减少的岩藻糖基残基量的低岩藻糖基化抗体或具有增加的二等分glcnac结构的抗体。已经证明这类改变的糖基化模式增加了抗体的adcc能力。这类糖修饰可以通过例如在具有改变的糖基化机制的宿主细胞中表达抗体来实现。具有改变的糖基化机制的细胞已经在本领域中描述，并且可以用作在其中表达本发明的重组抗体从而产生具有改变的糖基化的抗体的宿主细胞。例如，hang等人的ep1,176,195描述了具有功能性破坏的fut8基因的细胞系，fut8基因编码岩藻糖基转移酶，使得在这种细胞系中表达的抗体显示低岩藻糖基化。presta的pct公开wo03/035835描述了一种变体cho细胞系lecl3细胞，其将岩藻糖附着至asn(297)连接糖的能力降低，也导致该宿主细胞中表达的抗体的低岩藻糖基化(还参见shields,r.l.等,2002j.biol.chem.277:26733-26740)。umana等人的pct公开wo99/54342描述了改造以表达修饰糖蛋白的糖基转移酶(例如β(1,4)-n乙酰葡糖氨基转移酶iii(gntiii))的细胞系，使得在该改造的细胞系中表达的抗体显示增加的二等分glcnac结构，其导致抗体的adcc活性增加(还参见umana等,1999nat.biotech.17:176-180)。产生抗体的方法本文提供核酸分子(例如基本上纯化的核酸分子)，其编码本文所述的结合剂的多肽，如表2中所示的idt11或idt12，包含该核酸分子的载体(例如表达载体)，包含这类载体或核酸分子的宿主细胞，以及产生本文所述的结合剂(例如特异性结合抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的抗体或其抗原结合片段)的方法。在具体方面，本文提供包含本文(例如表2)所述的多核苷酸(例如编码idt11或idt12的重链和/或idt11或idt12的轻链的多核苷酸)的载体(例如表达载体)。在某些方面，本文提供宿主细胞，其包含本文所述的载体或本文所述的多核苷酸，例如编码idt11或idt12的重链和/或idt11或idt12的轻链的多核苷酸。在具体方面，该宿主细胞是真核细胞。在某些方面，该宿主细胞是哺乳动物细胞(例如非人哺乳动物细胞，如cho细胞)。在特定方面，宿主细胞包含：(i)含有编码idt11或idt12的vh或重链的核苷酸序列的载体或多核苷酸；和(ii)含有编码idt11或idt12的vl或轻链的核苷酸序列的载体或多核苷酸。在具体方面，第一宿主细胞包含含有编码idt11或idt12的vh或重链的核苷酸序列的载体或多核苷酸，第二宿主细胞包含含有编码idt11或idt12的vl或轻链的核苷酸序列的载体或多核苷酸。在特定方面，本文提供产生结合剂的方法，该结合剂例如是结合抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的抗体或抗原结合片段，其包括在适于表达该结合剂的条件下培养本文所述的宿主细胞的步骤。在某些方面，产生本文提供的结合剂(例如idt11或idt12)或其片段的方法还包括纯化该结合剂或其片段。编码结合剂的核酸本公开提供包含编码本文所述结合剂的核苷酸序列的多核苷酸。在具体方面，本公开提供多核苷酸，其包含编码本文所述特异性结合靶标抗fxi/fxia抗体(例如抗体idt11和idt12)的抗体的vh、vl、全长重链和/或全长轻链的核酸序列。可以优化此类核酸序列以在哺乳动物细胞中表达(例如，参见表2)。在结合剂是抗体或其抗原结合片段的具体方面，本文提供包含编码本文所述抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体idt11或idt12)的重链、轻链或重链和轻链的核苷酸序列的多核苷酸。在一方面，本文提供的多核苷酸包含编码本文所述抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体idt11或idt12)的重链的核苷酸序列。在一方面，本文提供的多核苷酸包含编码本文所述抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体idt11或idt12)的轻链的核苷酸序列。在一方面，本文提供的多核苷酸包含编码本文所述抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体idt11或idt12)的重链和轻链的核苷酸序列。在特定方面，本文提供包含表2中所示的一个或多个核苷酸序列的多核苷酸，例如包含编码重链的核苷酸序列seqidno:42、74、106、138、170、202，234、266、298、330、348或350及包含编码轻链的核苷酸序列seqidno:58、90、122、154、186、218、250、282、314或346的多核苷酸。在某些方面，本文提供的多核苷酸包含与在表2中所示的那些核苷酸序列(例如编码idt11或idt12的重链的seqidno:348或350；及编码idt11或idt12的轻链的seqidno:58或90)基本同一(例如至少65％、80％、80％、90％、95％、98％或99％)的核苷酸序列。当从适当的表达载体表达时，由这些多核苷酸编码的多肽能够结合抗fxi/fxia抗体，如抗体nov1401。由于密码的简并性，多种核酸序列编码每个免疫球蛋白氨基酸序列。多核苷酸序列可以通过从头固相dna合成或通过pcr诱变编码结合剂(例如是结合抗fxi/fxia抗体的抗体或其抗原结合片段(例如fab片段)的结合剂)的现有序列(例如本文所述的序列)来产生。核酸的直接化学合成可以通过本领域已知的方法来完成，如narang等,1979,meth.enzymol.68:90的磷酸三酯法；brown等,meth.enzymol.68:109,1979的磷酸二酯法；beaucage等,tetra.lett.,22:1859,1981的二乙基亚磷酰胺方法；以及美国专利号4,458,066的固体支持物法。通过pcr将突变引入多核苷酸序列中可以按例如pcrtechnology:principlesandapplicationsfordnaamplification,h.a.erlich(编辑),freemanpress,ny,ny,1992；pcrprotocols:aguidetomethodsandapplications,innis等(编辑),academicpress,sandiego,ca,1990；mattila等,nucleicacidsres.19:967,1991；及eckert等,pcrmethodsandapplications1:17,1991中所述进行。本公开中还提供表达载体和宿主细胞，其用于产生本文所述的结合剂，例如是结合抗fxi/fxia抗体的抗体的结合剂。可以利用多种表达载体来表达编码fxia结合抗体链或结合片段的多核苷酸。基于病毒的表达载体和非病毒表达载体均可用于在哺乳动物宿主细胞中产生抗体。非病毒载体和系统包括质粒、附加型载体(通常具有用于表达蛋白质或rna的表达盒)和人工染色体(参见例如harrington等,natgenet15:345,1997)。例如，可用于在哺乳动物(例如人)细胞中表达多核苷酸和多肽的非病毒载体包括pthiohisa、b和c，pcdna3.1/his，pebvhisa、b和c(invitrogen,sandiego,ca)，mpsv载体，以及本领域已知的用于表达其他蛋白质的许多其他载体。有用的病毒载体包括基于逆转录病毒、腺病毒、腺伴随病毒、疱疹病毒的载体，基于sv40、乳头瘤病毒、hbpeb病毒的载体，牛痘病毒载体和塞姆利基森林病毒(sfv)。参见brent等,上文；smith,annu.rev.microbiol.49:807,1995；和rosenfeld等,cell68:143,1992。表达载体的选择取决于要在其中表达载体的预期宿主细胞。通常，表达载体包含与编码本文所述结合剂(例如是结合抗fxi/fxia抗体如nov1401的抗体的结合剂)的多核苷酸有效连接的启动子和其他调节序列(例如增强子)。在一些实施方案中，采用诱导型启动子来防止插入序列除了在诱导条件下的表达。诱导型启动子包括例如阿拉伯糖、lacz、金属硫蛋白启动子或热激启动子。可以在非诱导条件下扩增转化的生物的培养物，而无需使群体偏向于宿主细胞更好地耐受其表达产物的编码序列。除启动子外，还可能需要或期望其他调节元件以有效表达结合剂，例如是结合抗fxi/fxia抗体如nov1401的抗体结合剂。这些元件通常包括atg起始密码子和相邻的核糖体结合位点或其他序列。另外，可以通过包含适合使用中的细胞系统的增强子来增强表达的效率(参见例如scharf等,resultsprobl.celldiffer.20:125,1994；和bittner等,meth.enzymol.,153:516,1987)。例如，sv40增强子或cmv增强子可用于增加在哺乳动物宿主细胞中的表达。表达载体还可提供分泌信号序列位置，以与由插入的抗fxi/fxia抗体结合剂序列编码的多肽形成融合蛋白。在具体方面，在包含在载体中之前，将插入的抗fxi/fxia抗体结合剂序列与信号序列连接。在某些方面，用于接收编码抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体nov1401结合剂)的轻链和重链可变结构域的序列的载体还编码恒定区或其部分。此类载体允许可变区表达为与恒定区的融合蛋白，从而导致完整抗体或其片段的产生。通常，这类恒定区是人恒定区。用于携带和表达抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体nov1401结合剂)的宿主细胞可以是原核细胞或真核细胞。大肠杆菌是一种可用于克隆和表达本公开的多核苷酸的原核宿主。其他适用的微生物宿主包括杆菌，如枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)，以及其他肠杆菌科如沙门氏菌属(salmonella)、沙雷氏菌属(serratia)和多种假单胞菌属(pseudomonas)物种。在这些原核宿主中，还可以制备表达载体，其通常包含与宿主细胞相容的表达控制序列(例如复制起点)。另外，将存在任意数目的多种众所周知的启动子，如乳糖启动子系统、色氨酸(trp)启动子系统、β-内酰胺酶启动子系统或来自噬菌体λ的启动子系统。启动子通常任选地用操纵子序列控制表达，并具有核糖体结合位点序列等，用于启动和完成转录和翻译。其他微生物如酵母也可以用于表达本公开的fxia结合多肽。还可将昆虫细胞与杆状病毒载体结合使用。在一些具体实施方案中，用哺乳动物宿主细胞来表达和产生本公开的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体nov1401结合剂)多肽。这些包括任何正常死亡或正常或异常永生化的动物细胞或人细胞。例如，已经开发了许多能够分泌完整免疫球蛋白的适宜的宿主细胞系，包括cho细胞系、多种cos细胞系、hela细胞、骨髓瘤细胞系和转化的b细胞。例如winnacker,fromgenestoclones,vchpublishers,n.y.,n.y.,1987中一般性地讨论了哺乳动物组织细胞培养物表达多肽的用途。用于哺乳动物宿主细胞的表达载体可包括表达控制序列，如复制起点、启动子和增强子(参见例如queen等,immunol.rev.89:49-68,1986)，及必要的加工信息位点，如核糖体结合位点、rna剪接位点、聚腺苷酸化位点和转录终止子序列。这些表达载体通常包含源自哺乳动物基因或源自哺乳动物病毒的启动子。适宜的启动子可以是组成型、细胞类型特异性、阶段特异性和/或可调整或可调节启动子。有用的启动子包括但不限于金属硫蛋白启动子、组成型腺病毒主要晚期启动子、地塞米松诱导型mmtv启动子、sv40启动子、mrppoliii启动子、组成型mpsv启动子、四环素诱导型cmv启动子(如人立即早期cmv启动子)、组成型cmv启动子和本领域已知的启动子-增强子组合。用于引入包含目的多核苷酸序列的表达载体的方法取决于细胞宿主的类型而变。例如，氯化钙转染通常用于原核细胞，而磷酸钙处理或电穿孔可用于其他细胞宿主。(一般参见sambrook等,上文)。其他方法包括例如电穿孔、磷酸钙处理、脂质体介导的转化、注射和显微注射、射弹法、病毒体、免疫脂质体、聚阳离子:核酸缀合物、裸dna、人工病毒体、与疱疹病毒结构蛋白vp22的融合(elliot和o'hare,cell88:223,1997)、药物增强dna摄取和离体转导。为了长期、高产率地产生重组蛋白，通常需要稳定表达。例如，可以使用本公开的表达载体制备稳定表达fxia结合抗体链或结合片段的细胞系，该表达载体包含病毒复制起点或内源性表达元件和选择标记基因。引入载体后，可先使细胞在丰富的培养基中生长1-2天，然后将细胞转换为选择性培养基。选择标记的目的是赋予选择抗性，并且其存在允许成功表达所引入的序列的细胞在选择培养基中生长。抗性、稳定转染的细胞可以使用适合于该细胞类型的组织培养技术进行增殖。因此，在另一方面，本公开提供用于制备针对在哺乳动物细胞中表达而优化的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体nov1401结合剂)的方法，其包括：具有选自表2中提供的那些的序列的全长重链抗体序列；具有选自表2中提供的那些的序列的全长轻链抗体序列；改变该全长重链抗体序列和/或该全长轻链抗体序列内的至少一个氨基酸残基以产生至少一个改变的抗体序列；将该改变的抗体序列表达为蛋白质。在一个实施方案中，该重链或轻链的改变是在重链或轻链的构架区中。改变的抗体序列也可以通过筛选具有如us2005/0255552中所述的固定的cdr3序列或最小的必需结合决定簇以及cdr1和cdr2序列的多样性的抗体文库来制备。可以按照适于从抗体文库中筛选抗体的任何筛选技术(如噬菌体展示技术)进行筛选。可以用标准分子生物学技术来制备和表达改变的抗体序列。由改变的抗体序列编码的抗体这样的抗体，其保留本文所述的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体nov1401结合剂)的一种、一些或全部功能特性，该功能特性包括但不限于例如特异性结合抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401)，并且接触抗fxi/fxia的一个或多个cdr氨基酸残基；抑制靶标抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401)与人fxi和/或fxia的结合；抑制靶标抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401)阻断fxia活性的能力；及抑制或逆转靶标抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401)的一种或多种抗凝作用。在本公开的改造抗体的方法的某些实施方案中，可以沿着全部或部分抗fxi/fxia抗体结合剂编码序列随机或选择性地引入突变，并可以针对本文所述结合活性和/或其他功能特性筛选所得到的修饰的抗fxi/fxia抗体。突变方法已在本领域中描述。例如，short的pct公开wo02/092780描述了使用饱和诱变、合成连接组装或其组合来产生和筛选抗体突变的方法。备选地，lazar等人的pct公开wo03/074679描述了使用计算筛选方法来优化抗体的理化性质的方法。在本公开的某些方面，已经改造抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体nov1401结合剂)以去除脱酰胺位点。已知脱酰胺作用会引起肽或蛋白质的结构和功能变化。脱酰胺作用可导致生物活性降低，以及蛋白质药物的药代动力学和抗原性改变。(analchem.2005年3月1日；77(5):1432-9)。在本公开的某些方面，已经改造本文所述的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如抗体nov1401结合剂)以提高pi并改善其药物样特性。蛋白质的pi是分子整体生物物理特性的关键决定因素。已知具有低pi的抗体和多肽溶解度较低，稳定性较差且易于聚集。此外，具有低pi的抗体和多肽的纯化具有挑战性，并且可能是有问题的，尤其是在扩大规模用于临床用途期间。提高本公开的结合剂如抗体或fab的pi改善了它们的溶解性，使得能够将抗体以更高的浓度(>100mg/ml)配制。以高浓度(例如>100mg/ml)配制抗体具有能够施用更高剂量抗体的优势，这反过来又可以降低给药频率，这对于治疗包括血栓性和/或血栓栓塞性疾病的慢性病具有明显优势。较高的pi还可以增加fcrn介导的抗体igg形式的循环利用，从而使药物在体内的存留时间更长，从而需要的注射次数更少。最后，由于较高的pi导致更长的货架期和体内生物活性，抗体的整体稳定性得到显著改善。在具体方面，抗fxi/fxia抗体结合剂的pi大于或等于8.2。可以使用本领域可获得的和/或本文描述的标准测定法，例如实施例中所示的那些标准测定法(例如elisa、aptt测定法、tga测定法)来评估改变的抗体的功能特性。预防和治疗用途本公开涉及用于在用抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段治疗的患者中逆转(例如部分逆转)或减少抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401)的抗凝作用的方法，其包括施用有效量的本文提供的结合剂，例如结合抗fxi/fxia抗体并且能够逆转一种或多种抗凝作用的结合剂(例如抗体idt11或idt12)。在某些方面，本公开涉及用于在用抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段治疗的患者中逆转(例如部分逆转)或减少抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401)的抗凝作用的方法，其包括施用有效量的包含本文提供的结合剂的药物组合物，该结合剂例如结合抗fxi/fxia抗体并且能够逆转一种或多种抗凝作用的结合剂(例如表2中所示的抗体或其抗原结合片段)。在具体方面，为进行急诊手术/紧急操作以及在危及生命或无法控制的出血中，患者可以需要逆转抗fxi/fxia抗体的抗凝作用。在某些方面，在无法控制的出血如胃肠道(gi)出血、颅内(ic)出血或出血性中风的情况下，患者可以需要逆转(例如部分逆转)抗fxi/fxia抗体的抗凝作用。在具体方面，正在用抗fxi/fxia抗体治疗患者以管理、治疗、预防或降低血栓栓塞性疾病或障碍的风险，例如在房颤(例如非瓣膜性房颤)、慢性肾病如正在进行血液透析的终末期肾衰竭(esrd)患者中降低中风或血栓形成(例如全身性栓塞)的风险。在其他具体方面，患者显示高出血风险。在具体方面，用于这些方法的抗fxi/fxia抗体结合剂的非限制性实例包括本文(例如表2)所述的抗体(例如抗独特型抗体)和抗原结合片段，例如抗体idt11和idt12。在某些方面，本公开涉及用于在施用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的个体中减少凝血时间的方法，其包括施用有效量的本文提供的结合剂，例如结合抗fxi/fxia抗体并且能够抑制抗fxi/fxia抗体与人fxi/fxia的结合的结合剂(例如表2中所示的抗独特型抗体或其抗原结合片段)。在某些方面，本公开涉及用于在施用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的个体中减少凝血时间的方法，其包括施用有效量的包含本文提供的结合剂的药物组合物，抗fxi/fxia抗体的药物组合物，例如结合抗fxi/fxia抗体并且能够抑制抗fxi/fxia抗体与人fxi/fxia的结合的结合剂(例如表2中所示的抗独特型抗体或其抗原结合片段)。在具体方面，本公开涉及用于在正在用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)治疗的患者中管理出血或出血风险或降低出血或出血风险的方法，其包括施用有效量的本文提供的结合剂，例如结合抗fxi/fxia抗体并且能够逆转一种或多种抗凝作用的结合剂(例如表2中所述的抗体或其抗原结合片段)，或施用有效量的包含本文提供的这种结合剂的药物组合物。在具体方面，为进行急诊手术/紧急操作以及在危及生命或无法控制的出血(例如gi出血、ic出血或出血性中风)中，患者可以需要逆转抗fxi/fxia抗体的抗凝作用。在特定方面，正在用抗fxi/fxia抗体治疗患者以管理、治疗、预防或降低血栓栓塞性疾病或障碍的风险，例如在房颤(例如非瓣膜性房颤)、慢性肾病如正在进行血液透析的终末期肾衰竭(esrd)患者中降低中风或血栓形成(例如全身性栓塞)的风险。在其他具体方面，患者显示高出血风险。在具体方面，用于这些方法的抗fxi/fxia抗体结合剂的非限制性实例包括本文(例如表2)所述的抗体(例如抗独特型抗体及其片段，如fab)和抗原结合片段，例如抗体idt11和idt12；包含此类抗体的vhcdr和vlcdr的抗体；与此类抗体结合靶标抗体nov1401内的相同表位的抗体。在特定方面，本文提供在治疗或施用本文所述的抗fxi抗体(例如表1中所述的抗体，如nov1401，或包含nov1401的hcdr和lcdr的抗fxi抗体)的患者中管理出血或出血风险的方法，其包括对有需要的患者施用抗fxi抗体的抗独特型抗体或其抗原结合片段(例如fab)的步骤，其中抗独特型抗体或其抗原结合片段(例如fab)特异性结合抗fxi抗体，并阻断抗fxi抗体结合fxi。在具体实施方案中，抗独特型抗体(例如idt11或idt12)或其抗原结合片段逆转本文所述的抗fxi抗体的作用，以减轻例如在紧急大手术或创伤期间的出血风险。在具体方面，抗独特型抗体或其抗原结合片段逆转(例如部分逆转)或抑制抗fxi抗体的抗凝作用。在特定方面，对有需要的患者施用抗独特型抗体或其抗原结合片段以暂时逆转本文所述的抗fxi抗体(例如表1中所述的抗体，如nov1401或包含nov1401的hcdr和lcdr的抗fxi抗体)的抗凝作用。在一个特定方面，本文提供在治疗或施用抗fxi抗体如nov1401(例如seqidno:14和25)的患者中管理出血或出血风险的方法，其包括以下步骤：对有需要的患者施用该抗fxi抗体如nov1401(例如seqidno:14和25)的抗独特型抗体(例如idt11或idt12)或其抗原结合片段，其中该抗独特型抗体或其抗原结合片段(例如fab)特异性结合抗fxi抗体如nov1401(例如seqidno:14和25)的抗原结合区，并阻断抗fxi抗体与fxi和/或fxia结合。在一个具体实施方案中，抗fxi抗体如nov1401(例如seqidno:14和25)的抗独特型抗体(例如idt11或idt12)或其抗原结合片段逆转或抑制抗fxi抗体(例如nov1401)的一种或多种抗凝作用。在某些实施方案中，达到了抗fxi抗体(例如nov1401)的一种或多种抗凝作用的暂时逆转或抑制。在具体实施方案中，在暂时逆转或抑制抗fxi抗体(例如nov1401)之后，再次对患者施用抗fxi抗体(例如nov1401)。本文所用的术语“有效量”或“治疗有效量”是指治疗剂(例如本文提供的结合剂，如结合抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的抗独特型抗体或本文提供的药物组合物)的量，其足以降低和/或改善给定病症、障碍或疾病和/或与之相关的症状的严重度和/或持续时间。这些术语还涵盖减少、减慢或改善给定病症、障碍或疾病的进展或进行，减少、减慢或改善给定病症、障碍或疾病的复发、发展或发作，和/或改善或增强另一种治疗(例如本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂以外的治疗)的预防或治疗效果所必需的量。在一些方面，本文所用的“有效量”还指本文所述抗体达到指定结果的量，所述指定结果例如减少或逆转靶标抗fxi/fxia抗体的一种或多种抗凝作用(例如aptt延长和人血浆中凝血酶产生测定(tga)中的凝血酶量的减少)；以及减少或阻断靶标抗fxi/fxia抗体与fxi/fxia的结合。在具体方面，可能需要或可能受益于本文所述的方法(例如用抗fxi/fxia抗体结合剂逆转抗凝作用的方法)的患者已经用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)治疗，以管理、治疗、预防或降低血栓栓塞性疾病或障碍(例如血栓性中风、房颤、房颤中风预防(spaf)、深静脉血栓形成、静脉血栓栓塞、肺栓塞、急性冠脉综合征(acs)、缺血性中风、急性肢体缺血、慢性血栓栓塞性肺动脉高压或全身性栓塞)的风险。在其他具体方面，该患者显示高出血风险。在其他方面，可能需要或可能受益于本文所述的方法(例如用抗fxi/fxia抗体结合剂逆转抗凝作用的方法)的患者已经用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)治疗，以治疗急性vte、对vte的一级和长期二级预防、预防接受透析的患者(有或没有房颤)的重大不良血栓栓塞事件、预防接受pci并接受单一或双重抗血小板治疗的cad患者的重大心血管和脑事件(macce)、急性期后冠脉综合征(acs)患者、肝素诱导的血小板减少症(hit)、预防心力衰竭患者的血栓栓塞事件和继发中风预防。在具体方面，以下个体组之一正在用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)治疗，并且可以需要或受益于本文所述的方法(例如用抗fxi/fxia抗体结合剂逆转抗凝作用的方法)：患有长期抗凝治疗适应症(例如af、左心室血栓、过往心脏栓塞性中风)的个体；处于中度到高度重大出血风险的个体；可以需要接受双重抗血小板治疗(阿司匹林和p2y12受体拮抗剂)以预防支架血栓形成的接受选择性或原发性经皮冠状动脉介入治疗(pci)的具有支架植入的个体。在具体方面，可能需要或受益于本文所述的方法(例如用抗fxi/fxia抗体结合剂逆转抗凝作用的方法)的个体已经用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)治疗，以管理、治疗、预防或降低以下病症之一的风险：-患有疑似或确诊的心律不齐如阵发性、持续性或永久性房颤或房扑的个体的血栓栓塞；-房颤中风预防(spaf)，其中部分群体是接受经皮冠状动脉介入治疗(pci)的af患者；-高出血风险患者的急性静脉血栓栓塞事件(vte)处理和长期二级vte预防；-短暂性脑缺血发作(tia)或非致残性中风后的二级预防中的脑和心血管事件，以及伴随窦性心律的心力衰竭中血栓栓塞事件的预防；-因心律不齐而接受心脏复律的个体的左心房凝块形成和血栓栓塞；-针对心律不齐的消融术之前、期间和之后的血栓形成；-静脉血栓形成，这包括但不限于下肢或上肢深部或浅静脉血栓形成、腹腔和胸静脉血栓形成、鼻窦血栓形成和颈静脉血栓形成的治疗和二级预防；-静脉内任何人造表面(如导管或起搏器导线)上的血栓形成；-有或没有静脉血栓形成的患者的肺栓塞；-慢性血栓栓塞性肺动脉高压(cteph)；-动脉粥样硬化斑块破裂上的动脉血栓形成、动脉内假体或导管上的血栓形成以及明显正常的动脉中的血栓形成，这包括但不限于急性冠脉综合征、st抬高心肌梗死、非st抬高心肌梗死、不稳定型心绞痛、支架血栓形成、动脉系统中任何人造表面的血栓形成、以及有或没有肺动脉高压的个体中肺动脉的血栓形成；-接受经皮冠状动脉介入治疗(pci)的患者的血栓形成和血栓栓塞；-心脏栓塞和隐源性中风；-浸润性和非浸润性恶性肿瘤患者的血栓形成；-留置导管上的血栓形成；-重症患者的血栓形成和血栓栓塞；-心脏血栓形成和血栓栓塞，这包括但不限于心肌梗塞后的心脏血栓形成，与诸如动脉瘤、心肌纤维化、心脏增大和功能不全、心肌炎和心脏人造表面的病症相关的心脏血栓形成；-伴或不伴房颤的瓣膜性心脏病患者的血栓栓塞；-瓣膜机械或生物假体上的血栓栓塞；-对简单或复杂的心脏畸形进行心脏修复后，具有天然或人造心脏斑块、动脉或静脉导管的患者中的损伤或创伤；-膝关节置换手术、髋关节置换手术、整形外科手术、胸部或腹部手术后的静脉血栓形成和血栓栓塞；-包括颅内和脊髓干预的神经外科手术后的动脉或静脉血栓形成；-先天性或获得性血友病，包括但不限于因子vleiden、凝血酶原突变、抗凝血酶iii、蛋白c和蛋白s缺乏、因子xiii突变、家族性纤维蛋白原缺乏症、先天性纤溶酶原缺乏、因子xi水平升高、镰状细胞病、抗磷脂综合征、自身免疫病、慢性肠病、肾病综合征、溶血尿毒症、骨髓增生性疾病、弥散性血管内凝血、阵发性夜间血红蛋白尿和肝素诱发的血小板减少症；-慢性肾脏疾病中的血栓形成和血栓栓塞；-终末期肾病(esrd)中的血栓形成和血栓栓塞；-进行血液透析的慢性肾病或esrd患者中的血栓形成和血栓栓塞；和-进行血液透析和/或体外膜氧合的患者中的血栓形成和血栓栓塞。在一个具体方面，抗fxi/fxia抗体结合剂(例如idt11或idt12)或包含这种结合剂的药物组合物用于减少出血或出血风险或管理出血或出血风险的方法中，在接受治疗或施用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)以降低中风和/或全身性栓塞的风险的患者中，其中该患者患有非瓣膜性房颤。在一个具体方面，抗fxi/fxia抗体结合剂(例如idt11或idt12)或包含这种结合剂的药物组合物用于减少出血或出血风险或管理出血或出血风险的方法中，在接受治疗或施用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)以降低中风和/或全身性栓塞的风险的患者中，其中该患者患有显示高出血风险的非瓣膜性房颤。在一个具体方面，抗fxi/fxia抗体结合剂(例如idt11或idt12)或包含这种结合剂的药物组合物用于减少出血或出血风险或管理出血或出血风险的方法中，在接受治疗或施用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)以降低中风和/或全身性栓塞的风险的患者中，其中该患者患有esrd并且正在进行透析。在一个具体方面，抗fxi/fxia抗体结合剂(例如idt11或idt12)或包含这种结合剂的药物组合物用于减少出血或出血风险或管理出血或出血风险的方法中，在接受治疗或施用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)以降低中风和/或全身性栓塞的风险的患者中，其中该患者患有非瓣膜性房颤和esrd，并且正在进行透析。在具体方面，可以需要或受益于本文所述方法(例如用抗fxi/fxia抗体结合剂逆转抗凝作用的方法)的个体已经用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)与其他用于预防、治疗或改善血栓栓塞性疾病的药物联合治疗。例如，他汀类治疗可以与本公开的fxia抗体和抗原结合片段联合用于治疗患有血栓形成和/或血栓栓塞性疾病的患者。进行联合治疗的此类个体可以需要或受益于本文所述的方法(例如用抗fxi/fxia抗体结合剂逆转抗凝作用的方法)。在一个具体的方面，本文提供在正在治疗或施用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的患者中减少出血或出血风险或管理出血或出血风险的方法，所述方法包括施用特异性结合抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401)的结合剂，并逆转该抗fxi/fxia抗体的抗凝作用。在特定方面，出血或出血风险与创伤、手术或分娩后有关。在另一个特定方面，出血或出血风险与急诊手术或紧急操作有关。在其他特定方面，出血会危及生命或无法控制，如gi出血或ic出血。在具体方面，该结合剂是特异性结合抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的抗体，如抗独特型抗体(例如idt11或idt12)。在其他具体方面，该结合剂是特异性结合抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的可变区内的一个或多个表位的抗独特型抗体。在更具体的方面，该结合剂是特异性结合抗fxi/fxia抗体(例如nov1401)的全长igg抗独特型抗体。在特定方面，该结合剂是包含选自表2的氨基酸序列的抗独特型抗体或其抗原结合片段。在特定方面，该结合剂是如表2中所示的抗独特型抗体或其抗原结合片段，如抗体idt11或idt12。在特定方面，该结合剂是如表2中所列的抗独特型抗体或其抗原结合片段，如idt11。在特定方面，结合剂是如表2中所列的抗独特型抗体或其抗原结合片段，如idt12。在具体方面，出血通常与但不限于创伤、手术、月经或分娩后有关。因此，在这些情况下，已经用抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如nov1401)治疗的个体可以需要快速而有效的治疗，如本文所述的抗fxi/fxia抗体结合剂，以减少出血或降低出血风险。在具体方面，在重大创伤之后或在手术之后，如涉及具有高纤溶区域的器官如颊、鼻、生殖器或泌尿粘膜的手术，可以发生长时间的出血。拔牙、扁桃体切除术和子宫或前列腺消融术是涉及高出血风险的手术的非限制性实例。在具体方面，同时使用抗血小板药、其他抗凝药和纤溶剂可增加出血风险。在某些方面，需要暂时逆转或抑制抗fxi抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的一种或多种抗凝作用。在一个特定方面，本文提供在治疗或施用抗fxi/fxia抗体如抗体nov1401的患者中减少或管理出血或出血风险的方法，其包括以下步骤：在一段时间(例如1小时至24小时或48小时)内对有需要的患者施用一次或两次包含本文所述结合剂(如抗体idt1、idt2、idt3、idt4、idt5、idt6、idt7、idt8、idt9或idt10)的药物组合物，然后施用抗fxi/fxia抗体，其中达到了抗fxi抗体的一种或多种抗凝作用的暂时逆转或抑制。在一个特定方面，本文提供在治疗或施用抗fxi/fxia抗体如抗体nov1401的患者中减少或管理出血或出血风险的方法，其包括以下步骤：在一段时间(例如1小时至24小时或至48小时)内对有需要的患者施用一次或两次或多次idt11或idt12或包含idt11或idt12的药物组合物，然后施用抗fxi/fxia抗体，其中达到了抗fxi抗体的一种或多种抗凝作用的暂时逆转或抑制。在某些方面，本文所述的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如idt11或idt12)可以与另一种抗凝剂逆转治疗联合施用。用于逆转抗凝作用的常规策略的非限制性实例包括：(i)使用胶体、类晶体、人血浆或血浆蛋白(如白蛋白)进行流体置换；或(ii)浓集红细胞或全血输注。例如在严重紧急情况下，用于逆转抗凝剂的作用的治疗的实例包括但不限于促止血血液成分，如新鲜冷冻血浆(ffp)、凝血酶原复合物浓缩物(pcc)及活化的pcc[(apcc)；例如因子viii抑制剂旁路活性(feiba)]和重组活化因子vii(rfviia)。在具体方面，本公开涉及用于在用抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段治疗的患者中逆转抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的抗凝作用的方法，其包括：(i)对该患者施用有效量的本文提供的结合剂，例如结合抗fxi/fxia抗体并且能够逆转一种或多种抗凝作用的结合剂(例如idt11或idt12)；(ii)对该患者施用另一种抗凝剂逆转治疗，例如新鲜冷冻血浆(ffp)、凝血酶原复合物浓缩物(pcc)、活化的pcc或重组活化因子vii(rfviia)。在具体方面，本公开涉及用于在用抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段治疗的患者中逆转抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401)的抗凝作用的方法，其包括：(i)对该患者施用有效量的本文提供的结合剂，例如结合抗fxi/fxia抗体并且能够逆转一种或多种抗凝作用的结合剂(例如抗体或其抗原结合片段，如fab片段)；和(ii)对该患者施用新鲜冷冻血浆(ffp)。在具体方面，这种方法达到了体内稳态。在某些方面，本文提供在用本文提供的抗fxi抗体(例如表1中所述的抗体，如包含nov1401的vlcdr和vhcdr的抗fxi抗体)治疗的患者中管理出血的方法，所述方法包括暂时逆转抗凝作用足够的时间以管理出血。在具体实施方案中，逆转抗凝作用的步骤包括：(i)使用胶体、类晶体、人血浆或血浆蛋白(如白蛋白)进行流体置换；或(ii)浓集红细胞或全血输注。在具体方面，例如在严重紧急情况下，用于逆转抗凝剂的作用的治疗剂包括但不限于促止血血液成分，如新鲜冷冻血浆(ffp)、凝血酶原复合物浓缩物(pcc)及活化的pcc[(apcc)；例如因子viii抑制剂旁路活性(feiba)]和重组活化因子vii(rfviia)。在一个特定方面，在用抗fxi抗体(例如nov1401或包含nov1401的vlcdr和vhcdr的抗体)治疗的进行大手术的个体中以及在具有活动性难接近出血部位的患者中，除了氨甲环酸(tranexamicacid)每6小时1g持续5至7天之外，还包括按30μg/kg剂量施用rfviia然后每2-4小时按15－30μg/kg剂量施用rfviia持续24-48小时的方案可具有恢复止血和停止出血的潜能。例如，riddell等人报道了4名严重fxi缺乏且没有抑制剂的患者接受手术的经历(riddell等,2011,thromb.haemost.,106:521–527)；患者在诱导麻醉时静脉内施用rfviia30μg/kg和氨甲环酸1g。随后按旋转血栓弹力测定(rotem)结果的指导，以2-4小时的间隔施用rfviia15-30μg/kg的推注剂量(bolusdoses)。在具体实例中，用上述剂量的rfviia治疗患者24-48小时。在特定实例中，继续每6小时1g氨甲环酸，持续5天。在这个小系列研究中，在本研究中，剂量低至15-30μg/kg的rfviia联合氨甲环酸对纠正严重fxi缺乏的止血缺陷安全而有效。在另一项包含4名经历了5次手术的严重fxi缺乏患者的具有抑制剂(自体中和fxi抗体通常在对严重fxi缺乏患者输血或施用血液制品后获得)的研究中，作者(livnat等,2009,thromb.haemost.；102:487–492)应用了以下方案：术前两个小时口服1g氨甲环酸，然后患者在介入前立即接受另外1g静脉内氨甲环酸。在手术完成后输注剂量范围为15至30μg/kg的重组fviia。随后，每6小时给予1g口服氨甲环酸至少7天。一名患者将纤维蛋白胶喷洒在已切除胆囊的床上。此方案可确保抑制剂对具有严重fxi缺乏患者的正常止血。一方面，纤维蛋白胶可用于在患有fxi缺乏的患者的牙科手术期间恢复局部止血(bolton-maggs(2000)haemophilia；6(s1):100-9)。在关于在用本文提供的抗fxi抗体(例如表1中所述的抗体，例如nov1401)治疗的患者中管理出血的方法的某个实施方案中，包含氨甲环酸(例如每6小时1g持续5至7天)结合纤维蛋白胶的使用的方案可用于在进行小手术的个体中以及具有可及近出血部位(包括口腔和鼻腔出血事件)的个体中建立局部止血。在某些方面，本文提供在用本文提供的抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如nov1401或包含nov1401的vlcdr和vhcdr抗fxi/fxia抗体)治疗的患者中管理出血或出血风险的方法，所述方法包括对该患者施用能够逆转(例如部分逆转)该抗fxi/fxia抗体的抗凝作用的抗凝剂逆转治疗。在具体方面，能够逆转该抗fxi/fxia抗体的抗凝作用的抗凝剂逆转治疗是rfviia(重组因子viia)、emicizumab(ace910)、氨甲环酸、新鲜冷冻血浆(ffp)、hemoeleven、凝血酶原复合物浓缩物(pcc)、活化的pcc或feiba(fviii抑制剂复合物)。在具体方面，该抗凝剂逆转治疗可单独施用，或与本文提供的结合剂(例如表2中所述的结合剂，如idt11或idt12)或包含这种结合剂的药物组合物联合施用。在具体方面，本公开涉及用于在用抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段治疗的患者中逆转(例如部分逆转)抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗fxi/fxia抗体，如抗体nov1401或包含nov1401的vhcdr和vlcdr抗fxi/fxia抗体)的抗凝作用的方法，其包括对该患者施用抗凝剂逆转治疗，如rfviia(重组因子viia)、emicizumab(ace910)、氨甲环酸、新鲜冷冻血浆(ffp)、hemoeleven、凝血酶原复合物浓缩物(pcc)、活化的pcc或feiba(fviii抑制剂复合物)。在具体方面，本公开涉及用于在用抗fxi/fxia抗体或其抗原结合片段治疗的患者中逆转抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗fxi/fxia抗体，如抗体nov1401或包含nov1401的vhcdr和vlcdr抗fxi/fxia抗体)的抗凝作用的方法，其包括：(i)对该患者施用有效量的本文提供的结合剂，例如结合抗fxi/fxia抗体并且能够逆转一种或多种抗凝作用的结合剂(例如表2中所示的抗体或其抗原结合片段，如idt11或idt12)，或包含这种结合剂的药物组合物；和(ii)对该患者施用另一种抗凝剂逆转治疗，如rfviia(重组因子viia)、emicizumab(ace910)、氨甲环酸、新鲜冷冻血浆(ffp)、hemoeleven、凝血酶原复合物浓缩物(pcc)、活化的pcc或feiba(fviii抑制剂复合物)。在具体方面，血栓栓塞事件包括中风、全身性栓塞、冠状动脉或外周动脉血栓形成、静脉血栓形成和肺栓塞的风险随着诸如血栓形成、血管壁损伤和淤滞的易患因素的存在而增加。病史、熟悉的先例和相关合并症的评估可以帮助根据患者的血栓栓塞风险对患者进行分层。在房颤患者中，已经开发了几种评分系统例如chads2和cha2ds2-vasc来评估中风风险。每项都是根据来自随机试验以及临床和流行病学群组研究的数据开发，并将中风危险因素的加权多元公式转换为简化的易于使用的助记设备、算法、计算器或在线工具。chads2风险评分是用于预测房颤患者的血栓栓塞风险的分层工具(lip(2011)amjmed；124(2):111-4；camm等(2012)eurheartj；33:2719–2747)；但是，积累的证据表明，cha2ds2-vasc在鉴定发生中风和血栓栓塞的患者方面至少与chads2评分一样好，甚至可能更好，并且在鉴定“真正低风险”的房颤患者方面绝对更好。指南(camm等(2012)eurheartj33,2719–2747；january等,aha/acc/hrsatrialfibrillationguideline；jamcollcardiol2014；64:2246–80)目前建议cha2ds2-vasc评分来指导关于应受益于抗凝治疗的患者的决定，以及鉴定不需要抗凝治疗的低风险患者。开发了房颤患者专用的出血风险评估工具(如has-bled、atria、hemorr2hages、orbit和abc风险评分)来预测房颤患者的出血风险。不幸的是，由于出血风险与中风风险紧密相关，因此这些风险评分在指导使用维生素k拮抗剂(如华法林或noacs)的治疗决策方面价值有限。但是，出血风险评分可以对鉴定哪些患者可以受益于减少出血风险的新治疗(例如抗fxi/fxia抗体(例如抗体nov1401))有很大帮助。在某些方面，可以通过先前的出血病史(例如手术期间或术后的出血或在用抗凝剂(例如华法林)治疗时的出血)来鉴定具有出血风险，例如表现出高出血风险的个体。此外，可以通过本领域已知的体外/离体测定，例如使用个体的血浆测量aptt和其他外在凝血途径的生物标志物的测定，如凝血酶原时间(pt)和凝血酶时间(tt)，来鉴定具有出血风险，例如表现出高出血风险的个体。在特定方面，中风和全身性栓塞风险中至高的个体cha2ds2vasc风险评分≥2。在其他特定方面，hasbled风险评分≥3个体表征为出血风险高(参见gallego等,(2012)carcarrhythmelectrophysiol.；5:312–318和friberg等,(2012)circulation.；125:2298-2307)。在特定方面，通过本文提供的方法治疗的个体的cha2ds2vasc风险评分≥2。在具体方面，通过本文提供的方法治疗的个体是至少18岁的人个体。在另一方面，通过本文提供的方法治疗的个体是至少50岁的人个体。在另一方面，通过本文提供的方法治疗的个体是至少55岁的人个体。在另一方面，通过本文提供的方法治疗的个体是至少60岁的人个体。在另一方面，通过本文提供的方法治疗的个体是至少65岁的人个体。在特定方面，通过本文提供的方法(例如用于治疗vte或用于vte的二级预防的方法)治疗的个体的年龄在2至18岁之间。在特定方面，通过本文提供的方法(例如用于治疗vte或用于vte的二级预防的方法)治疗的个体的年龄在12至18岁之间。在特定方面，通过本文提供的方法(例如用于治疗vte或用于vte的二级预防的方法)治疗的个体是至少2岁且未满18岁的儿童。在特定方面，通过本文提供的方法(例如用于治疗vte或用于vte的二级预防的方法)治疗的个体是至少12岁且未满18岁的儿童。在具体方面，通过本文提供的方法治疗的个体(例如人个体)的体重指数(bmi)大于或等于18kg/m2。在另一方面，通过本文提供的方法治疗的个体的bmi大于或等于30kg/m2。在另一方面，通过本文提供的方法治疗的个体的bmi大于或等于35kg/m2。在另一方面，通过本文提供的方法治疗的个体的bmi大于或等于40kg/m2。在某些方面，用本文所述的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如idt11或idt12)或包含这种抗fxi/fxia抗体结合剂的药物组合物逆转抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的抗凝作用的方法导致：(i)用人血浆aptt测定法测定的aptt延长的减少或逆转；(ii)人血浆中凝血酶产生测定(tga)中凝血酶的量的减少；和/或(iii)出血或出血风险的减少或逆转。在具体方面，抗凝作用的逆转小于100％，但是足以达到临床有益的结果，例如减少或停止出血。在某些方面，用本文所述的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如idt11或idt12)或包含这种抗fxi/fxia抗体结合剂的药物组合物逆转抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的抗凝作用的方法导致用人血浆aptt测定法测定的aptt延长减少或逆转至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％。在某些方面，用本文所述的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如idt11或idt12)或包含这种抗fxi/fxia抗体结合剂的药物组合物逆转抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的抗凝作用的方法导致用人血浆aptt测定法测定的aptt延长减少或逆转至少40％、至少50％、至少60％或至少70％。在某些方面，用本文所述的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所示的抗体，如idt11或idt12)或包含这种抗fxi/fxia抗体结合剂的药物组合物逆转抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的抗凝作用的方法导致血清游离fxi/fxia水平相对于施用该抗fxi/fxia抗体结合剂之前的水平提高。在某些方面，用本文所述的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所示的抗体，如idt11或idt12)或包含这种抗fxi/fxia抗体结合剂的药物组合物逆转抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的抗凝作用的方法导致血清游离fxi/fxia水平相对于施用该抗fxi/fxia抗体结合剂之前的水平提高至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％。在某些方面，用本文所述的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所示的抗体，如idt11或idt12)或包含这种抗fxi/fxia抗体结合剂的药物组合物逆转抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如抗体nov1401)的抗凝作用的方法导致血清游离fxi/fxia水平相对于施用该抗fxi/fxia抗体结合剂之前的水平提高至少40％、至少50％、至少60％或至少70％。血清游离fxi/fxia水平可以通过先前描述的任何方法来测定，例如通过elisa测定。药物组合物本公开提供包含与可药用载体配制在一起的本文所述抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所述的抗体及其fab片段)的药物组合物。该组合物可以另外包含一种或多种适于治疗或预防例如血栓栓塞性疾病(例如血栓形成性障碍)的其他治疗剂。可药用载体增强或稳定该组合物，或可用于便于该组合物的制备。可药用载体包括生理上相容的溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。本公开的药物组合物可以通过本领域已知的多种方法施用。施用途径和/或方式取决于所希望得到的结果。优选静脉内、肌内、腹腔内或皮下施用或在靶部位附近施用。可药用载体应适合于静脉内、肌内、皮下、肠胃外、脊柱或表皮施用(例如通过注射或输注)。取决于施用途径，可以将活性化合物即抗体、双特异性和多特异性分子包封在一种材料中，以保护该化合物免受酸和可以使该化合物失活的其他自然条件的作用。在具体方面，组合物应无菌并且是流体。可以例如通过使用诸如卵磷脂的包衣、在分散液的情况下通过维持所需的粒径以及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。在许多情况下，优选在组合物中包含等渗剂，例如糖、多元醇(如甘露醇或山梨糖醇)和氯化钠。可通过在组合物中包含延迟吸收的试剂例如单硬脂酸铝或明胶来实现可注射组合物的长期吸收。在特定方面，本文提供包含本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所列的抗体)的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂处在包含组氨酸和/或糖(如蔗糖)的液体制剂中。在具体方面，本文提供包含本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所列的抗体)的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂处在包含蔗糖的液体制剂中。在特定方面，该液体制剂中的蔗糖浓度在150mm至300mm或200mm至250mm的范围内。在特定方面，该液体制剂包含至少200、210、220、230、240或250mm蔗糖。在特定方面，该液体制剂中的蔗糖浓度为220mm。在具体方面，本文提供包含本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所列的抗体fab或igg)的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂处在包含组氨酸的液体制剂中。在具体方面，该液体制剂中的组氨酸浓度在5mm至35mm或10mm至30mm的范围内。在具体方面，该液体制剂中的组氨酸浓度在15mm至25mm的范围内。在具体方面，该液体制剂包含至少10mm组氨酸、或至少15mm组氨酸、或至少20mm组氨酸。在具体方面，该液体制剂包含至少20mm组氨酸。在具体方面，本文提供包含本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所列的抗体)的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂处在包含组氨酸和蔗糖的液体制剂中。在特定方面，该液体制剂中的蔗糖浓度在150mm至300mm或200mm至250mm的范围内；该液体制剂中的组氨酸浓度在5mm至35mm或10mm至30mm或15mm至25mm的范围内。在特定方面，该液体制剂包含至少200、210、220、230、240或250mm蔗糖；及至少10mm组氨酸、或至少15mm组氨酸、或至少20mm组氨酸。在特定方面，该液体制剂包含220mm蔗糖和20mm组氨酸。在特定方面，本文提供包含本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所示的抗体)的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂处在ph在4至6.5、或4.5至7、或4.5至6范围内的液体制剂中。在某些方面，液体制剂的ph范围为5至6。在特定方面，液体制剂的ph为至少4.0。在特定方面，液体制剂的ph为至少4.5。在特定方面，液体制剂的ph为至少5.0。在特定方面，液体制剂的ph为至少5.5。在特定方面，液体制剂的ph为至少6.6。在特定方面，液体制剂的ph为5。在特定方面，液体制剂的ph为5.5。在特定方面，液体制剂的ph为6.0。在具体方面，本文提供包含本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所列的抗体)的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂在液体制剂中的浓度为约50mg/ml至200mg/ml或约100mg/ml至200mg/ml。在特定方面，该结合剂在液体制剂中的浓度为至少50mg/ml、至少100mg/ml、至少110mg/ml、至少120mg/ml、至少130mg/ml、至少140mg/ml或至少150mg/ml。在特定方面，该结合剂在液体制剂中的浓度为150mg/ml。在特定方面，该结合剂在液体制剂中的浓度为140mg/ml。在特定方面，该结合剂在液体制剂中的浓度为130mg/ml。在具体方面，本文提供包含本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所列的抗体)的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂处在包含聚山梨酯20例如0.01％至0.08％聚山梨酯20的液体制剂中。在特定方面，该液体制剂包含0.02％至0.06％聚山梨酯20。在特定方面，该液体制剂包含约0.03％聚山梨酯20、0.04％聚山梨酯20或0.05％聚山梨酯20。在特定方面，该液体制剂包含约0.04％聚山梨酯20。在具体方面，本文提供包含本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所示的抗体)的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂在液体制剂中的浓度为150mg/ml，并且其中该液体制剂在ph5.5下包含220mm蔗糖和20mm组氨酸。在具体方面，本文提供的药物组合物用于皮下施用。在某些方面，本文提供的药物组合物用于静脉内施用。在具体方面，本文提供包含本文提供的抗fxi/fxia抗体结合剂(例如表2中所示的抗体)的药物组合物，其中该结合剂抑制靶标抗fxi/fxia抗体的抗凝活性，其中该结合剂在液体制剂中的浓度为150mg/ml，并且其中该液体制剂在ph5.5下包含220mm蔗糖、20mm组氨酸和0.04％聚山梨酯20。在具体方面，本文提供的药物组合物用于皮下施用。在某些方面，本文提供的药物组合物用于静脉内施用。本公开的药物组合物可以按照本领域众所周知和常规实践的方法制备。参见例如remington:thescienceandpracticeofpharmacy,mackpublishingco.,第20版,2000及sustainedandcontrolledreleasedrugdeliverysystems,j.r.robinson编辑,marceldekker,inc.,newyork,1978。药物组合物优选在gmp条件下制备。通常，在本公开的药物组合物中采用治疗有效剂量或有效剂量的fxia结合抗体。通过本领域技术人员已知的常规方法将fxia结合抗体配制成可药用剂型。调整剂量方案以提供最佳的所需反应(例如治疗反应)。例如，可以施用单次推注，可以随时间推移施用数个分开的剂量，或者可以根据治疗情况的紧急程度按比例减少或增加剂量。以剂量单位形式配制肠胃外组合物特别有利，以易于施用和剂量均匀。本文所用的剂量单位形式是指适合作为待治疗个体的单位剂量的物理上离散的单位；每个单位包含预定量的活性化合物，该活性化合物经计算可与所需的药物载体一起产生所所希望得到的治疗效果。本公开的药物组合物中活性成分的实际剂量水平可以改变，以获得对针对特定患者、组合物和施用方式达到所希望得到的治疗反应有效的活性成分的量，而对患者无毒性。所选择的剂量水平取决于多种药代动力学因素，包括所利用的本公开的特定组合物的活性、施用途径、施用时间、所利用的特定化合物的排泄速率、治疗持续时间、与所利用的特定组合物联合使用的其他药物、化合物和/或材料、所治疗患者的年龄、性别、体重、病症、一般健康状况以及既往病史，以及类似因素。医师可以在低于达到所希望得到的治疗效果所需的水平开始药物组合物中使用的本发明抗体的剂量，并逐渐增加剂量直至达到所希望得到的效果。通常，用于治疗本文所述的血栓形成和/或血栓栓塞性疾病的本公开的组合物的有效剂量取决于许多不同因素而不同，该因素包括施用方式、靶部位、患者的生理状态、所施用的其他药物、以及治疗是预防性还是治疗性。需要调整治疗剂量以优化安全性和有效性。对于抗体全身施用，在某些方面，剂量可以在约0.01至15mg/kg宿主体重的范围内。对于抗体施用，剂量可以在0.1mg至500mg的范围内。在某个方面，本文所述的抗fxi/fxia抗体例如按5mg至600mg范围内的剂量通过静脉内或皮下途径施用。在某个方面，本文所述的抗fxi/fxia抗体例如按约5mg、10mg、15mg、20mg、30mg、40mg、50mg、60mg、90mg、100mg、120mg、150mg、180mg、200mg、210mg、240mg、250mg、270mg、300mg、330mg、350mg、360mg、390mg、400mg、420mg、450mg、480mg、500mg、510mg、540mg、550mg、570mg或600mg的剂量通过静脉内或皮下途径施用。在特定方面，抗体通常在多种场合下施用。间隔也可以是如通过测量患者的血液抗体水平所显示的不规律的。另外，备选的给药间隔可以由医生确定，并且每月一次或根据有效性的需要施用。在一些全身施用的方法中，应调整剂量以使血浆抗体浓度达到1-1000μg/ml，在一些方法中达到25-500μg/ml。剂量和频率取决于患者体内抗体的半衰期。通常，人源化抗体的半衰期比嵌合抗体和非人抗体的半衰期更长。施用的剂量和频率可以取决于治疗是预防性还是治疗性而变化。在预防性应用的某些方面，在很长一段时间内以相对不频繁的间隔施用相对较低的剂量。一些患者终生继续接受治疗。在治疗性应用的某些方面，有时需要以相对短的间隔施用相对高的剂量，直到减少或终止出血或出血风险的进展，并且在某些情况下，直到患者显示出血或出血风险的部分或完全减轻。在具体方面，在希望逆转抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如nov1401)的抗凝作用时，短时或短期施用本文所述的抗fxi/fxia结合剂(例如表2中所示的抗体，如idt11或idt12)。在希望抗fxi/fxia抗体(例如表1中所述的抗体，如nov1401)的抗凝作用的逆转达到体内稳态时，短时或短期(例如1小时至24小时或48小时，但通常不超过7天)施用本文所述的抗fxi/fxia结合剂(例如表2中所示的抗体，如idt11或idt12)一次或若干次。实施例提供以下实施例以进一步说明本公开，但不限制其范围。对本领域普通技术人员而言，本公开的其他变型将是显而易见的，并且为所附权利要求所涵盖。实施例1人fab噬菌体文库淘选使用市售噬菌体展示文库morphosyshucal文库作为抗体来源，通过选择与nov1401结合的克隆来产生针对nov1401的抗体。噬菌粒文库基于概念((knappik等,2000,jmolbiol296:57-86)，并利用cysdisplaytm技术在噬菌体表面展示fab(wo01/05950)。为了分离抗nov1401抗体，利用了固相淘选策略，将nov1401直接包被到maxisorptm(nunc)96孔板上，然后逐渐提高洗涤严格性进行三轮淘选。所选择的fab片段的亚克隆和微表达为便于可溶性fab的快速表达，将所选择的hucal噬菌体的fab编码插入片段从展示载体亚克隆到表达载体中。为了进行初步筛选和表征，使用补充了2.5mg/ml溶菌酶的2xbbs溶液(400mm硼酸、300mm氯化钠、5mmedta)裂解表达fab的单个大肠杆菌克隆的过夜培养物。含有fab的大肠杆菌裂解物用于elisa筛选。elisa筛选使用elisa筛选，从与nov1401结合的淘选输出鉴定出单个fab克隆。使用含有fab的粗制大肠杆菌裂解物测试fab。为了鉴定结合nov1401的fab片段，直接用5ug/mlnov1401包被maxisorptm(nunc)384孔板。用封闭板后，加入含fab的大肠杆菌裂解物。使用attophos荧光底物(roche，目录号11681982001)，通过与碱性磷酸酶缀合的f(ab)2特异性山羊抗人igg(1:5000稀释)检测fab的结合。在430nm激发下记录535nm的荧光发射。改造去除潜在的脱酰胺位点为了去除长期保存中的潜在不利之处，通过将天冬酰胺替换为丝氨酸或谷氨酰胺去除了潜在的脱酰胺位点(例如asn-gly或asn-ser)。通过基因合成产生包含改变的氨基酸的基因。fab片段的表达和纯化在大肠杆菌tg1f-细胞中进行fab片段的表达。将培养物在37℃下孵育直至od600达到0.5的值。通过添加iptg至终浓度0.75mm诱导fab表达，并将培养物在30℃和180rpm进一步过夜孵育。收获细胞并破碎。通过imac和凝胶过滤分离带有his6标签的fab片段，并通过280nm紫外分光光度法测定蛋白质浓度。产生了fab片段的哺乳动物表达载体。还产生了fab的全长igg形式(例如表2中所述的idt1-idt10)。产生了idt1和idt2的示例性全长igg形式。具体而言，idt11是idt1的示例性全长igg形式，idt12是idt2的示例性全长igg形式。idt3是在vh的30位突变的idt2变体，具体而言，在vh(seqidno:71)或重链(seqidno:73)的30位的s至q突变。因此，idt3的示例性全长igg形式(idt3-igg)包含：(i)重链，其包含在30位具有突变(如s至q突变)的seqidno：349的氨基酸序列；和(ii)包含氨基酸序列seqidno：89的轻链。在具体方面，可以通过将以下fc区克隆到fab重链的c端来产生表2中所述的任何一种fab(例如idt1-idt10)的示例性全长igg形式：dkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvavshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalaapiektiskakgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk(seqidno:351)。在某些方面，idt1的其他示例性全长igg形式可与具有可比活性的idt11具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性。在某些方面，idt2的其他示例性全长igg形式可与具有可比活性的idt12具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性。实施例2结合数据抗nov1401fab与nov1401结合的表面等离子共振(spr)结合分析在proteonxpr36仪器(bio-radlaboratories,inc.)上于25℃在pbs/t缓冲液(50mm磷酸盐，150mmnacl，ph7.4，0.005％v/vtween-20)中进行spr结合实验。使用厂家所述的标准胺偶联程序将nov1401(“配体”)固定在已活化的proteonglc传感器芯片(bio-radlaboratories,inc.)上。简言之，以30μl/分钟的流速注入ph5.0的20mm乙酸钠中浓度10μg/ml的nov140110分钟。通过注入1m乙醇胺封闭未反应的基团。对于动力学研究，将抗nov1401fab(“分析物”)在pbs/t缓冲液中稀释以产生浓度范围为0.125-4nm的稀释系列。将fab以100μl/分钟的流速注入固定有nov1401的表面，并记录传感图，结合和解离时间分别为220s和1800s。空白表面用于背景校正。由于proteon蛋白质相互作用阵列系统允许在同一表面上并行进行多达6个结合实验，因此无需再生表面。使用proteonmanagertm软件版本3.1.0.6进行包括kon、koff和kd确定的数据处理和分析。通过应用langmuir1:1结合模型(rmax设置为全局)拟合传感图，并从kon和koff计算解离常数。表3显示通过spr测定的10种抗nov1401fab的解离常数。表3.spr结合数据总结抗nov1401平均kd[nm]标准差[nm]nidt10.440.022idt20.23na1idt30.240.022idt40.310.022idt50.350.042idt610.080.132idt70.330.012idt82.150.152idt91.920.002idt105.970.032结合nov1401的抗nov1401fab和igg的溶液平衡滴定(set)结合分析在样品缓冲液(含有0.5％(w/v)bsa和0.02％tween20的pbsph7.4)中制备nov1401的14份系列(2x)稀释液，并向40pm至240pm范围的每个nov1401浓度加入恒定浓度的抗nov1401fab或igg。在预实验中确定了最佳恒定抗nov1401fab或igg浓度和nov1401稀释系列的最佳起始浓度。起始浓度为10nm的nov1401用于较弱的结合剂(kd～1nm或更高)，起始浓度为2nm用于较强的结合剂(kd<0.2nm)。对于抗nov1401igg(kd<0.01nm)，使用0.5或0.25nm的起始浓度。将30μl/孔的每种稀释混合物一式两份分配至384孔聚丙烯eppendorf微孔板(mtp)。样品缓冲液用作阴性对照，不含抗原的样品用作阳性对照(bmax)。密封板并在室温下在板振荡器上孵育过夜。通过加入30μl/孔的pbs中稀释的0.5μg/ml生物素化nov1401包被来自的链霉抗生物素蛋白(sa)板(预封闭的链霉抗生物素蛋白高结合能力384孔板，#15505)，密封并在mtp摇床上在室温孵育2小时。孵育并用pbst(含0.05％tween20的pbs)洗涤三遍后，将30μl/孔的nov1401/抗nov1401fab或igg制备物从聚丙烯mtp转移到nov1401包被的sa板中，并在mtp摇床上在室温下孵育30分钟。在另外三个洗涤步骤后，将稀释在样品缓冲液中的30μl0.5μg/ml检测抗体(山羊抗人κlc-hrp，bethyl#a80-115p)加至每个孔中，并在室温下摇动孵育1小时。再次洗涤板3次后，向每个孔中加入30μl检测试剂(lumiglo过氧化物酶化学发光底物，kpl#54-61-01)。产生化学发光(ecl)信号并立即用发光成像仪(spectramaxm5,moleculardevices,llc)检测。从每个测定中的重复测量值计算平均ecl信号。通过从所有数据点减去最低值来对数据进行基线调整，并针对相应的抗原浓度作图。按照haenel等2005用以下非线性曲线拟合模型以1:1结合拟合图来确定kd值：其中，y是减去空白的ecl信号，[fab]是应用的fab浓度，x是应用的总可溶性抗原(此处为nov1401)，bmax是x＝0时减去空白的ecl信号，kd为解离常数。表4总结了9种抗nov1401fab和2种igg的set结果，图1显示代表性结合反应曲线。idt6的set数据不可拟合，未包括在内。表4.抗nov1401抗体的set结果总结解药平均kd(nm)标准差nidt10.110.012idt20.100.0033idt30.100.012idt40.970.042idt50.140.023idt70.960.012idt80.160.023idt90.680.052idt101.190.092idt110.00070.00025idt120.00510.00086实施例3spr结合竞争基本上按照实施例2中所述进行spr实验，但有以下变化。将人血浆来源的fxia用作配体，并使用所述标准胺偶联程序，按30μl/分钟流速注入ph5.0的20mm醋酸钠中浓度为10μg/ml的fxia10分钟固定在活化的proteonglc传感器芯片(bio-radlaboratories,inc.)上。对于结合竞争研究，在pbs/t缓冲液中制备摩尔比为1:1、1:2和1:10的nov1401与抗nov1401fab的三种混合物，并以100μl/分钟的流速同时注射到固定有fxi的表面上。记录传感器图，结合时间和解离时间分别为220s和1800s。空白表面用于背景校正。nov1401/抗nov1401fab混合物产生的与固定化fxia的结合反应比单独使用nov1401明显更低，1/10混合物(nov1401/抗nov1401fab)显示不结合fxia。由于spr中的响应单位(ru)与芯片结合的质量直接成比例，因此抗nov1401fab浓度的增加似乎阻止nov1401与fxia结合，这表明抗nov1401可以与nov1401结合并阻断nov1401与fxia结合。图2显示抗nov1401fab(idt1、idt3)的两个代表性实例。抗nov1401fab明显减少了nov1401与其抗原fxia的结合，因此与fxia竞争结合nov1401。以10倍摩尔过量(每个nov1401结合位点5倍摩尔过量)加入到nov1401溶液中，抗nov1401fab完全阻止nov1401与fxia结合，表明抗nov1401fab能够中和溶液中的游离nov1401。实施例4nov1401在人血浆中的抗凝活性的逆转通过使用活化的部分凝血致活酶时间(aptt)测定法和凝血酶产生测定法(tga)来测试抗nov1401抗体对nov1401的抗凝活性的作用。aptt测定法：冻干的正常人血浆“coagulationcontroln”(目录号5020050)购自technoclonegmbh(奥地利维也纳)。它是从选定的健康供体的柠檬酸盐血浆合并而来。用该正常血浆获得的凝血时间反映了参与凝血的凝血因子的正常浓度。将冻干的血浆保存在4℃。在使用之前，通过小心旋转小瓶然后将其在室温下放置10分钟，将血浆重新悬浮在1ml蒸馏水中。触发内在途径的dapttintc(cat#5035090)购自technoclonegmbh(奥地利维也纳)，其包含磷脂、硫化物和硅酸盐。将冻干的触发物按小瓶上标明的体积在蒸馏水中复溶。在蒸馏水中以25mm的母液浓度配制氯化钙(fluka，目录号21115)。磷酸缓冲盐溶液(pbs，lifetechnologies，目录号10010-023)用作抗体稀释缓冲液。在型号为mc10的球凝血仪(merlinmedical,德国)上进行凝血时间的测量，该凝血仪是半自动机械凝块检测系统。该系统利用一个特殊的比色杯，其中分布有一个不锈钢球(merlinmedical,目录号z05100)。将比色杯放置在球凝血仪的测量孔中。将样品、血浆和触发物加入到比色杯后，测量孔缓慢旋转，使比色杯沿其纵轴旋转。由于比色杯的位置略微倾斜，因此重力和惯性始终将球定位在比色杯的最低点。球位置的正对面是一个磁传感器。在适当的孵育期后，加入氯化钙溶液开始计时。当发生凝血时，在反应混合物中形成纤维蛋白链。纤维蛋白链将球拉离其惯性位置，从而触发磁传感器中的脉冲。这种脉冲以电子方式停止计时器。在pbs中制备nov1401的系列稀释液。将复溶的人血浆、触发剂(dapttin)、氯化钙在37℃的水浴中温育10分钟。仅在包含不锈钢球的专用比色杯中进行该测定法。表5列出移液方案。表5.用于在aptt测定法中测量nov1401活性的移液方案在上述merlin球凝血仪中在37℃的温度下一式两份测量样品。对每种浓度的nov1401凝块形成进行计时，并对相应的抗体浓度作图。使用非线性回归程序graphpadprism(graphpadsoftwareinc.,lajolla,ca,usa)拟合所得到的剂量反应曲线。通过拟合剂量反应曲线，可以确定初始凝结时间(包含无抗体血浆的样品)加倍的nov1401浓度，也称为“2xaptt”。抗nov1401fab阻断nov1401的抗凝活性：为了在aptt测定中确定抗nov1401fab是否可以阻断nov1401延长凝血时间的能力，产生了pbs中的几种nov1401/抗nov1401fab混合物，其中nov1401的浓度保持恒定，保持在上述独立实验中确定的2xaptt所需的值。以等摩尔量(1/1)或摩尔过量(通常为1/3或1/5和1/10(n/n))加入抗nov1401fab。表6中显示移液方案。表6.用于在aptt测定法中测量抗nov1401fab对nov1401活性影响的移液方案。在上述merlin球凝血仪中在37℃的温度下一式两份测量样品。图3显示两种抗nov1401fab(idt1和idt3)的结果。在0.096μm的恒定nov1401浓度下，增加nov1401fab的量阻断在aptt测定法中测量的nov1401对凝血的影响。三倍摩尔过量的idt1或idt3(每个结合位点1.5倍摩尔过量)足以完全抑制nov1401对aptt的影响。这些数据确认并扩展了spr竞争实验的结果，因为它们表明抗nov1401fab在与nov1401预混合后阻断nov1401的功能。这些结果共同表明，抗nov1401fab能够阻止游离nov1401与fxi结合并阻断fxi的作用。抗nov1401fab和igg部分逆转nov1401的抗凝活性：为了确定抗nov1401fab和igg是否可以逆转nov1401在aptt中延长凝血时间的能力，在加入抗nov1401fab或igg之前，先将nov1401与含fxi的人血浆预孵育5分钟。与阻断实验一样，nov1401的浓度保持恒定，保持在上述剂量反应实验中分开确定的2xaptt所需的值。以等摩尔量(1/1)或摩尔过量(通常为1/3和1/10(n/n))加入抗nov1401fab或igg。表7显示移液方案。表7.用于测量抗nov1401fab和igg逆转nov1401对aptt的移液方案。在上述merlin球凝血仪中在37℃的温度下一式两份测量样品。使用以下公式确定每种抗nov1401抗体对nov1401凝血时间的逆转百分比：逆转百分比＝(nov1401凝血时间-解药凝血时间)/(nov1401凝血时间-初始凝血时间)*100。图4显示10种抗nov1401fab(idt1-idt10)和2种抗nov1401igg(idt11和idt12)的结果。在0.096μm的恒定nov1401浓度下，在nov1401与含fxi的人血浆孵育后增加所加入的抗nov1401fab的量部分逆转了aptt测定法中测量的nov1401对凝血的作用。尽管所有抗nov1401都显示出一定程度的逆转，但在给定浓度下的逆转程度会有所不同，在10倍摩尔过量时观察到最大逆转为55-65％。表8中总结了所有抗nov1401fab和igg的逆转百分比。这些结果表明抗nov1401fab和igg能够逆转(至少部分逆转)在aptt测定法中测量的nov1401的抗凝作用。在这些aptt测定法中，与idt3相比，抗nov1401iggidt11和idt12达到了相似的最大逆转效应(观察到最大逆转约为50-60％)。但是，在～3倍摩尔过量以及10倍摩尔过量时，已经达到接近最大效应的值。此数据表明全长igg形式(例如表2中所述的fabidt1-idt10中任一个的全长igg形式)可以在较低浓度下有效。表8.抗nov1401抗体的aptt逆转数据总结凝血酶产生测定法：为了确认在另一种功能测定法中观察到在aptt测定法中nov1401抗凝活性的逆转，利用tga来测量通过凝血酶反馈回路产生的凝血酶，这取决于fxia的活性。对于tga，冻干的正常人血浆(coagulationcontroln)购自technoclonegmbh(目录号5020040)，并以厂家建议的体积在蒸馏水中复溶。使用来自technoclonegmbh(cat#5006230)的荧光底物z-gly-gly-arg-amc制备底物溶液。将冻干的底物的等分试样保持在4℃。在用于测定法之前，将底物新鲜溶解在小瓶上标明的蒸馏水体积中20分钟。复溶的底物溶液包含浓度为1mm的荧光肽和浓度为15mm的cacl2。触发试剂“血小板不足血浆(ppp)-试剂低”购自thrombinoscope(cat#ts31.00)，并按照小瓶上的指示在蒸馏水中复溶。“ppp试剂低”包含非常低浓度的磷脂和组织因子的混合物。即将使用前，将试剂在80mmtris/hclph7.4、0.05％(w/v)chaps中稀释8倍。将样品分装并在购自costar(产品编号3603)的96孔黑色/透明底板中进行测量。对于自动化转移，将样品置于v型底96孔板(costar，3894)中，并使用cybio自动化系统(analytikjenaus,woburn,ma,美国)转移。在37℃的水浴中，将复溶的人血浆、触发试剂“ppp-试剂低”和底物预温10分钟。在96孔板中制备系列1:3抗体pbs稀释液，从nov1401浓度为5μm(最高终浓度1μm的5倍)开始，总共8个稀释度。将222μl触发试剂与1108μl底物溶液混合以产生10+50触发试剂底物混合物。将每孔80μl加入v型底96孔板中，以便随后使用自动化系统进行转移。将板保持在37℃。按照表9中给出的方案加入试剂。表9.使用nov1401的tga的移液方案使用自动化转移触发剂/底物混合物。加入混合物后，立即使用synergyneo仪器(biotekinstrumentinc.,winooski,vt,usa)分别记录在360nm、460nm的激发和发射。在酶标仪中于37℃的温度下以55秒的间隔一式两份测量样品90分钟。为了产生峰值凝血酶浓度值，使用由technoclone提供的tga评估软件文件处理数据。为了产生峰值凝血酶浓度对抗体浓度的图，使用graphpad软件拟合数据。将这些数据拟合至graphpadprism5软件(graphpadsoftwareinc.,lajolla,ca,usa)中的非线性回归模型。使用内置的四参数剂量反应曲线方程(可变斜率)确定ic50值：y＝底部+(顶部－底部)/(1+10^((logic50-x)*hillslope))，其中y是在抑制剂浓度x下形成的凝血酶的最大浓度，顶部和底部分别表示不含抑制剂和最高抑制剂浓度下的凝血酶浓度。nov1401剂量依赖性地降低了tga中的凝血酶，并且将通过此方法测定的ic50值用作抗nov1401fab和igg的逆转实验中的nov1401浓度。抗nov1401fab和igg部分逆转nov1401对tga中凝血酶产生的影响：为了确定抗nov1401抗体(fab和igg)是否可以逆转nov1401减少tga中凝血酶产生的能力，在加入抗nov1401fab或igg之前，先将nov1401与含fxi的人血浆预孵育5分钟。nov1401的浓度保持恒定，保持在上文所述剂量反应实验中分开确定的ic50值。以等摩尔量(1/1)或摩尔过量(通常为1/3和1/10(n/n))加入抗nov1401fab或igg。表10显示移液方案。表10.用于测量抗nov1401fab和igg逆转nov1401对tga的移液方案。绘制每种测定条件下产生的凝血酶的最大浓度，并使用以下方程确定百分比逆转：y＝(a–b)/(c–b)*100.其中y是百分比逆转，a是具有抗nov1401的测定条件的凝血酶浓度，b是没有抗nov1401的测定条件的凝血酶浓度，c是初始凝血酶浓度。图5显示10种抗nov1401fab(idt1-idt10)和2种抗nov1401igg(idt11和idt12)的结果。在0.05μm的恒定nov1401浓度下，在nov1401与含fxi的人血浆孵育后增加所加入的抗nov1401fab或igg的量导致凝血酶浓度增加，因此逆转(例如至少部分逆转)了tga测定中nov1401对凝血酶产生的作用。尽管所有抗nov1401都显示出一定程度的逆转，但在给定浓度下的逆转程度会有所不同，在10倍摩尔过量时观察到最大逆转为37-72％。表11中总结了所有抗nov1401fab和igg的逆转百分比。这些结果表明抗nov1401fab和igg能够逆转(例如，至少部分逆转)tga测定中nov1401引起的凝血酶减少。表11.抗nov1401抗体的tga逆转数据总结抗nov1401fab在食蟹猴中迅速逆转nov1401的抗凝作用：为了测试抗nov1401fab是否可以逆转nov1401在体内延长凝血时间的能力，我们在研究第一天对食蟹猴施用了单次3mg/kg皮下剂量的nov1401，然后分别在研究第4天和第5天施用两个静脉内剂量的idt3。选择nov1401剂量为皮下3mg/kg，因为已证明此剂量可在食蟹猴中导致持续aptt延长。根据我们用人血浆进行的体外实验，按摩尔过量施用抗nov1401fab，例如按10mg/kg静脉内施用idt3，然后一只动物施用30mg/kg，另一只动物施用30mg/kg后施用90mg/kg。还对其他动物(n＝2)也仅施用nov1401(在研究第一天施用一个3mg/kg皮下剂量)或仅施用idt3(分别在研究第4和第5天施用30mg/kg和90mg/kg的两个静脉内剂量)。对于离体(exvivo)aptt分析，在研究第3天、以及研究第4和5天的idt3剂量后30分钟、2小时、8小时和12小时将血样采集到柠檬酸钠凝血管中。在研究第6、7、8和9天采集另外的样品。将所有血样离心；获得血浆样品并冷冻在约-70℃或更低的温度下。在单独用nov1401治疗的动物中，在整个研究结束时，单次3mg/kg的皮下剂量使aptt延长了1.7至1.8倍，表明nov1401在食蟹猴中具有有效的抗凝作用，并确认了较早的研究。在nov1401后三天用idt3按10mg/kg的剂量静脉内给药的动物中，aptt立即正常化，并在给药后30分钟的最早时间点达到基线水平(图6)。8-12小时后，nov1401的aptt延长作用恢复到接近最大水平，但在施用第二剂30mg/kg后再次降低至基线。在按30mg/kg和90mg/kg剂量施用idt3时观察到非常相似的效果。更高的剂量似乎延长了逆转作用。在仅按30mg/kg和90mg/kg施用idt3的动物中未观察到对aptt的影响(图6)。这些数据表明抗nov1401fab如idt3能够在体内迅速逆转nov1401对aptt的作用，并且本文提供的抗nov1401fab如idt3可以用作抗fxi/fxia抗体nov1401的有效逆转剂，例如在需要快速中和抗fxi/fxia抗体nov1401的情况下。这些数据还表明，在此项猴子研究中体内观察到的迅速逆转与在体外用人血浆进行的实验(如本文所述的aptt测定)中观察到的部分逆转相关。实施例5可开发性和制剂评估将抗nov1401fab和igg的重链和轻链克隆到适于在哺乳动物细胞中分泌的表达载体系统中。进行了抗nov1401fab和igg的生产过程和制剂研究，以评估特征，如高分子量种类(hmw)的形成，作为溶液中聚集、溶解度和剪切的指示。从cho细胞重组表达并纯化抗nov1401fab和igg，尤其是idt1-idt12。为了进行配方研究，在含220mm蔗糖、20mm组氨酸、0.04％聚山梨酯20(ph5.5)、浓度为150mg/ml的液体配方中评估了抗nov1401fab和igg，尤其是idt1-idt12，发现表现良好，例如低聚集趋势、低剪切和高溶解度。例如，发现诸如hmw形成、溶解度和剪切的参数在液体制剂中的典型fab和igg的可接受范围内。在稍有不同的ph下进行测试时，可达到相似的结果。这些结果表明，所测试的液体制剂及其某些变体适合用于抗nov1401fab和igg。参考文献引用本文所引用的所有参考文献，包括专利、专利申请、论文、出版物、教科书等，以及其中所引用的参考文献，如果尚未被引用，则在此以其整体引入作为参考。当前第1页12