稳定值，再增加酶用量会造成不必要的浪 费；当酸性木聚糖酶的用量低于穿心莲绝干计的600u/g，则与酸性纤维素酶起不到协同作 用，不会促进穿心莲内酯的溶出，当酸性木聚糖酶的用量高于穿心莲绝干计的2400u/g，穿 心莲内酯提取率达到稳定，不会再增加。另外，酸性纤维素酶用量优选为600 U/g-1200u/g， 酸性木聚糖酶的用量优选为900u/g-2400u/g。
[0028] 优选的，所述酶解预处理的酶解温度为35°C _50°C，酶解时间为0. 5-2小时（h)，酶 液浓度为3% -10%。
[0029] 在此，酶液浓度为酸性纤维素酶和酸性木聚糖酶复合酶的质量与该复合酶的水溶 液的质量比。
[0030] 优选的，在本发明的从穿心莲中提取穿心莲内酯方法中，所述醇提取处理具体包 括：
[0031] 将预处理后的穿心莲全草或穿心莲粗粉加入浓度为70% -95%的乙醇，加热回流 提取两次，每次1. 5小时，第一次乙醇用量为穿心莲干重的8倍，第二次乙醇用量为穿心莲 干重的6倍，合并两次的回流液；
[0032] 对所述回流液进行过滤滤取，得到提取液。
[0033] 优选的，在本发明的从穿心莲中提取穿心莲内酯方法中，在对预处理后的穿心莲 全草或穿心莲粗粉进行醇提取处理之后还包括：
[0034] 在所述提取液中加入硅藻土和活性炭，混匀，搅拌20-40分钟，抽滤制得滤液，其 中娃藻土的用量为0. 1-0. 5g/100ml滤液，活性炭的用量为l-2g/100ml滤液。使用娃藻土 和活性炭对提取液进行杂质去除，仅需采用抽滤即可，避免了使用石油醚、丙酮等有机溶剂 对环境造成的污染，也降低了使用树脂等昂贵设备的成本。
[0035] 优选的，在本发明的从穿心莲中提取穿心莲内酯方法中，在制得滤液之后还包 括：
[0036] 将所述滤液减压真空浓缩至密度为1.20±0. Olg/cm3,制得穿心莲内酯浸膏，在 4°C以下静置过夜，待晶体析出后抽滤，收集晶体，将所述晶体用乙醇回溶，重结晶制得穿心 莲内酯成品。
[0037] 本发明还提供一种穿心莲内酯成品，由上述任一种从穿心莲中提取穿心莲内酯方 法得到，所述穿心莲内酯成品中穿心莲内酯的含量为95 % -98 %。在该穿心莲内酯成品中， 穿心莲内酯的含量较高。
[0038] 以下通过具体的实施例来说明本发明从穿心莲中提取穿心莲内酯方法以及由该 方法得到的穿心莲内酯成品。
[0039] 实施例1
[0040] 制备酸性纤维素酶和酸性木聚糖酶复合酶的酶液，取酸性纤维素酶300u/g(穿心 莲绝干计），酸性木聚糖酶600u/g (穿心莲绝干计），加水搅拌溶解，配置成浓度为3%的复 合酶液。取穿心莲全草IOkg切片成l-2cm，将复合酶液均匀喷洒在穿心莲切片上，混合均 匀，于35°C下保温酶解处理0. 4h、0. 5h、lh、2h、2. 5h，反应结束后，加入浓度为85%的乙醇 回流提取两次，每次1. 5小时，第一次乙醇用量为穿心莲干重的8倍，第二次乙醇用量为穿 心莲干重的6倍，合并两次的回流液，对回流液进行过滤滤取，得到提取液，待用。剩余的 穿心莲残渣（简称残渣）用清水洗涤，烘干，利用高效液相色谱法测定残渣中穿心莲内酯含 量，测定结果见表1，即表1中残渣内酯含量。
[0041] 在提取液中加入0. 5% (g/ml)的娃藻土和2% (g/ml)活性炭，混勾，搅拌30min， 抽滤制得滤液，利用高效液相色谱法测定滤液中穿心莲内酯含量，计算穿心莲内酯的提取 率，其中，提取率=滤液中的穿心莲内酯/穿心莲干重X 100%，滤液中穿心莲内酯的含量 及计算的穿心莲内酯的提取率的结果见表1，即分别为表1中的滤液内酯含量和内酯提取 率。
[0042] 将滤液减压真空浓缩至密度I. 20±0. Olg/cm3,制得穿心莲内酯浸膏，在4°C以下 静置过夜，待晶体析出后抽滤，收集晶体，将收集的晶体用乙醇回溶，重结晶制得穿心莲内 酯成品，利用高效液相色谱法测定穿心莲内酯成品中穿心莲内酯含量，结果见表1，即表1 中的成品内酯含量。
[0043] 其中，高效液相色谱的测试条件按照中国药典（2010版）高效液相色谱法（附录 VI D)测定，以下实施例中也采用该测试条件。
[0044] 表1酶解处理时长对穿心莲内酯含量及提取率的影响
[0045]
【主权项】
1. 一种从穿心莲中提取穿心莲内酯的方法，其特征在于，包括： 采用酸性纤维素酶和酸性木聚糖酶复合酶对穿心莲全草或穿心莲粗粉进行酶解预处 理，所述酶解预处理为喷洒和保温的处理工艺； 对预处理后的穿心莲全草或穿心莲粗粉进行醇提取处理。
2. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酸性纤维素酶的用量为穿心莲绝干计 的300u/g-1200u/g，所述酸性木聚糖酶的用量为穿心莲绝干计的600u/g-2400u/g。
3. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶解预处理的酶解温度为35°C -50°C， 酶解时间为〇. 5-2h，酶液浓度为3% -10%。
4. 如权利要求1-3中的任一项所述的方法，其特征在于，所述醇提取处理具体包括： 将预处理后的穿心莲全草或穿心莲粗粉加入浓度为70% -95%的乙醇，加热回流提取 两次，每次1. 5小时，第一次乙醇用量为穿心莲干重的8倍，第二次乙醇用量为穿心莲干重 的6倍，合并两次的回流液； 对所述回流液进行过滤滤取，得到提取液。
5. 如权利要求4所述的方法，其特征在于，在对预处理后的穿心莲全草或穿心莲粗粉 进行醇提取处理之后还包括： 在所述提取液中加入硅藻土和活性炭，混匀，搅拌20-40分钟，抽滤制得滤液，其中硅 藻土的用量为0. 1-0. 5g/100ml滤液，活性炭的用量为l-2g/100ml滤液。
6. 如权利要求5所述的方法，其特征在于，在制得滤液之后还包括： 将所述滤液减压真空浓缩至密度为1. 20±0. Olg/cm3,制得穿心莲内酯浸膏，在4°C以 下静置过夜，待晶体析出后抽滤，收集晶体，将所述晶体用乙醇回溶，重结晶制得穿心莲内 醋成品。
7. -种穿心莲内酯成品，其特征在于，所述穿心莲内酯成品由权利要求1?6任一项所 述的方法得到，所述穿心莲内酯成品中穿心莲内酯的含量为95% -98%。
【专利摘要】本发明涉及穿心莲内酯的提取技术领域，特别是涉及一种从穿心莲中提取穿心莲内酯的方法以及由该方法得到的穿心莲内酯成品。所述方法包括：采用酸性纤维素酶和酸性木聚糖酶复合酶对穿心莲全草或穿心莲粗粉进行酶解预处理，所述酶解预处理为喷洒和保温的处理工艺；对预处理后的穿心莲全草或穿心莲粗粉进行醇提取处理。本发明的提取方法无需使用昂贵的设备，降低了穿心莲内酯的提取成本。
【IPC分类】C07D307-60
【公开号】CN104529954
【申请号】CN201410763771
【发明人】陈雪娇, 李宏, 岳昌林, 贾英华
【申请人】李宏, 浙江九旭药业有限公司
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月11日