一种桂花发酵型烟用香料及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于烟用香料技术领域，具体涉及一种桂花发酵型烟用香料及其制备方 法。 技术背景
[0002] 目前，在香精香料的生物合成中应用最为广泛的是微生物发酵技术，以天然植物 为原料，利用微生物发酵可以生产出各种天然香料。微生物发酵技术跟化工、医药、食品、能 源、环境保护和农牧业等许多领域关系密切，具有较大的经济效益。
[0003] 桂花，系木犀科常绿灌木或小乔木，其品种有金桂、银桂、丹桂、月桂等。桂花生叶 腑间，花冠合瓣四裂，形小。新鲜桂花芳香，可提取芳香油，制桂花浸膏，可用于食品、化妆 品，可制糕点、糖果，并可酿酒。桂花茶可养颜美容，舒缓喉咙，改善多痰、咳嗽症状，治十二 指肠溃疡，荨麻瘆、胃寒胃疼、口臭、视觉不明。在烟用天然香料领域，目前对于桂花的开发 多为提取桂花中的芳樟醇、紫罗兰酮类等物质，然而对于桂花中含量较多的多糖类、蛋白质 类等物质均未利用。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是采用微生物发酵技术，制备出一种桂花发酵型烟用香料，该香料 添加在卷烟中具有柔和细腻烟气、降低刺激、生津回甜的作用。
[0005] 本发明采用的技术方案是：
[0006] -种桂花发酵型烟用香料，它是按照以下方法制备而成的：向酿酒酵母 (3&(^1^1'〇1115^68〇68〇6代￥18136)3乂003中加无菌水配制成重量浓度为0.5~1.5%的酿 酒酵母溶液，备用；将新鲜盐制桂花加水搅匀后提取，过滤，提取液浓缩至密度为1. 10~ 1. 15g/cm3的清膏，向清膏中按重量加入0. 1~5%的葡萄糖、0. 01~0. 5%的氯化妈，混 合均匀后，灭菌，按清膏重量的0. 1~1%接种所述酿酒酵母溶液，发酵，分离发酵液并用 0. 22ym微孔滤膜过滤除菌，最后向滤液中按重量加入2~10%的丙二醇，即得。
[0007]所述酿酒酵母（Saccharomycescescerevisiae)SX003 已于 2012 年 12 月 5 日保 藏在位于湖北省武汉市武昌珞珈山武汉大学内的中国典型培养物保藏中心（CCTCC)，保藏 号为NO:M2012505。
[0008] -种桂花发酵型烟用香料的制备方法，包括以下步骤：向酿酒酵母 (Saccharomycescescerevisiae)SX003中加无菌水配制成重量浓度为0? 5~1. 5 %的酿 酒酵母溶液，备用；将新鲜盐制桂花加水后搅匀提取，过滤，提取液浓缩至密度为1. 10~ 1. 15g/cm3的清膏，向清膏中按重量加入0. 1~5%的葡萄糖、0. 01~0. 5%的氯化妈，混 合均匀后，灭菌，按清膏重量的0. 1~1%接种所述酿酒酵母溶液，发酵，分离发酵液并用 0. 22ym微孔滤膜过滤除菌，最后向滤液中按重量加入2~10%的丙二醇，即得。
[0009] 优选地，所述提取，是按新鲜盐制桂花重量的2~3倍加水回流提取，提取时间为 1~5小时。
[0010] 优选地，所述发酵液是用〇. 8ym微孔滤膜过滤分离的。
[0011] 优选地，所述葡萄糖的加入量为清膏重量的2%，所述氯化钙的加入量为清膏重量 的 0? 2%〇
[0012] 优选地，所述丙二醇的加入量为滤液重量的5%。
[0013] 本发明通过酿酒酵母SX003降解桂花中的多糖、蛋白质，释放出氨基酸以及生成 苯乙醇等香气物质，从而制得桂花发酵型烟用香料，该香料添加在卷烟中能够柔和细腻烟 气、降低刺激、生津回甜，是一种高香、高效且高质的天然香料。
【附图说明】
[0014]图1是本发明桂花发酵型烟用香料的气相色谱-质谱分析谱图。
【具体实施方式】
[0015] 下面结合实施例对本发明进行详细说明。
[0016] 一种桂花发酵型烟用香料的制备方法，包括以下步骤：
[0017] 1、酿酒酵母溶液的配制
[0018] 向酿酒酵母（Saccharomycescescerevisiae)SX003中加无菌水配制成重量浓度 为0. 5~1. 5%的酿酒酵母溶液，备用。
[0019] 2、桂花提取液的制备
[0020] (1)盐制：将新鲜桂花按照桂花：食盐：明矾：冷开水=4 :1 :1:4的比例搅拌均匀 后保鲜处理，沥干后保存，备用。
[0021] (2)提取：将步骤⑴中的新鲜盐制桂花和三倍重量的水混合，回流提取3小时， 过滤，浓缩至密度为1.l〇±〇. 02g/cm3的清膏。
[0022] (3)添加葡萄糖：在步骤⑵的清膏中按重量添加2%的葡萄糖。
[0023] (4)添加CaCl2:继续按清膏重量的0?2%添加CaCl2，混合均匀。
[0024] 3、灭菌
[0025] 将步骤2中制备的桂花提取液在115°C下灭菌20min。
[0026] 4、接种
[0027] 在无菌条件下，按清膏重量的0. 5%接种酿酒酵母溶液。
[0028]5、发酵
[0029] 接种后的发酵工艺条件为：pH值为5. 5,搅拌转速为200rpm，通气量为1VVM，前发 酵温度为20°C，前发酵时间为5d，后发酵温度为10°C，后发酵时间为15d。
[0030] 6、分离
[0031] 将发酵后获得的发酵液于0. 8ym微孔滤膜下过滤，除杂，再取澄清液，于0. 22ym 微孔滤膜下过滤，除菌。
[0032]7、保质处理
[0033] 为防止变质，按发酵液重量的5%添加丙二醇，即得到桂花发酵型烟用香料。
[0034] 8、香气成分分析：
[0035] (1)前处理
[0036] 将200ml桂花发酵型烟用香料装入圆底烧瓶中，加入220ml超纯水用电热套进行 加热至沸腾，另一侧的圆底烧瓶中加入200ml的二氯甲烷，60°C水浴沸腾，待同时蒸馏萃取 仪中间分液管处液面出现分层后计时萃取2h。萃取结束后，向二氯甲烷萃取液中加入无水 硫酸钠吸水，过夜静置，过滤并浓缩至1. 5ml，浓缩液用于进行GC-MS分析。
[0037] (2)气相色谱-质谱联用（GC/MS)分析条件
[0038]色谱柱：HP-5MS，30mX0. 25mmX0.25ym;载气：氦气，lmL/min;进样温度口： 220°C;升温：60°C(2min)4°C/min，250°C(lOmin);进样量：1yL;分流进样，分流比 1 :20 ; IE离子源，70ev，扫描范围50-650amu;使用WILLEY和MAINLIB谱库检索。结果见表1和图 1〇
[0039]表1
[0040]
【主权项】
1. 一种桂花发酵型烟用香料，其特征在于它是按照以下方法制备而成的：向酿酒酵 母SaccharomycescescerevisiaeSX003中加无菌水配制成重量浓度为0? 5~L5%的 酿酒酵母溶液，备用；将新鲜盐制桂花加水搅匀后提取，过滤，提取液浓缩至密度为1. 10~ I. 15g/cm3的清膏，向清膏中按重量加入0. 1~5%的葡萄糖、0. 01~0. 5%的氯化妈，混 合均匀后，灭菌，按清膏重量的0. 1~1%接种所述酿酒酵母溶液，发酵，分离发酵液并用 0. 22ym微孔滤膜过滤除菌，最后向滤液中按重量加入2~10%的丙二醇，即得，所述酿酒 酵母SaccharomycescescerevisiaeSX003保藏在中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏号 为NO:M2012505。
2. -种桂花发酵型烟用香料的制备方法，其特征在于包括以下步骤：向酿酒酵母 SaccharomycescescerevisiaeSX003中加无菌水配制成重量浓度为0.5~L5%的酿 酒酵母溶液，备用；将新鲜盐制桂花加水搅匀后提取，过滤，提取液浓缩至密度为1. 10~ 1. 15g/cm3的清膏，向清膏中按重量加入0. 1~5%的葡萄糖、0. 01~0. 5%的氯化妈，混 合均匀后，灭菌，按清膏重量的0. 1~1%接种所述酿酒酵母溶液，发酵，分离发酵液并用 0. 22ym微孔滤膜过滤除菌，最后向滤液中按重量加入2~10%的丙二醇，即得，所述酿酒 酵母SaccharomycesCescerevisiaeSX004保藏在中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏号 为NO:M2012505。
3. 根据权利要求2所述的桂花发酵型烟用香料的制备方法，其特征在于：所述提取，是 按新鲜盐制桂花重量的2~3倍加水回流提取，提取时间为1~5小时。
4. 根据权利要求2所述的桂花发酵型烟用香料的制备方法，其特征在于：所述发酵液 是用0. 8ym微孔滤膜过滤分离的。
5. 根据权利要求2所述的桂花发酵型烟用香料的制备方法，其特征在于：所述葡萄糖 的加入量为清膏重量的2%，所述氯化钙的加入量为清膏重量的0. 2%。
6. 根据权利要求2所述的桂花发酵型烟用香料的制备方法，其特征在于：所述丙二醇 的加入量为滤液重量的5%。
【专利摘要】本发明公开了一种桂花发酵型烟用香料，它是按照以下方法制备而成的：向酿酒酵母SX003中加无菌水配制成重量浓度为0.5～1.5％的酿酒酵母溶液，备用；将新鲜盐制桂花加水搅匀后回流提取，过滤，提取液浓缩至密度为1.10～1.15g/cm3的清膏，向清膏中加入0.1～5％的葡萄糖、0.01～0.5％的氯化钙，混合均匀后，灭菌，接种所述酿酒酵母溶液，发酵，分离发酵液并过滤除菌，最后向滤液中加入丙二醇，即得，所述酿酒酵母SX003保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为NO：M2012505。本发明制得的香料添加在卷烟中能够柔和细腻烟气，降低刺激，生津回甜，是一种高香、高效且高质的天然香料。M201250520121205
【IPC分类】A24B3-12, C11B9-00
【公开号】CN104762134
【申请号】CN201510209761
【发明人】尹团章, 熊国玺, 庞登红, 喻世涛
【申请人】湖北中烟工业有限责任公司, 黄鹤楼科技园（集团）有限公司
【公开日】2015年7月8日
【申请日】2015年4月27日