具有降胆固醇作用的鼠李糖乳杆菌及用图
【技术领域】： 本发明涉及一种通过优选所获得一种鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus)SCF 20120718,可用于发酵制备具有降低胆固醇作用的豆浆和相关保健产品及药品。
【背景技术】： 人体内胆固醇通常是游离和胆固醇酯两种形式存在于细胞和组织中，在脑及神经组 织、肾、皮肤、肝脏和胆汁中分布较高，是体内膜结构中的重要组分，参与形成生物膜，在血 浆脂蛋白合成、脂类代谢、神经兴奋的传导过程中也起重要作用，还是胆汁酸，维生素D以 及多种激素的合成原料，因此，胆固醇是维持机体生理机能所不可缺少的重要物质。但是胆 固醇在机体内发挥其重要作用的同时，如在机体尤其血液中过高也会产生一定的危害，影 响到新陈代谢，诱发癌症；还可以导致心血管内皮细胞功能紊乱，特别是低密度脂蛋白过高 会影响到钙离子调控异常，是心血管功能失常，导致心脑血管受损和疾病发生。还有可能诱 发老年痴呆症的发生。
[0003]正常情况下机体胆固醇三分之二主要由肝脏、小肠壁等器官内源合成，其余由饮 食中含有胆固醇的食物主要有家禽蛋类、动物内脏及肌肉组织如猪肝、肥肉外源获取，如果 人们长期饮食结构不合理，摄入高胆固醇食物过高，体内胆固醇的合成与代谢负荷过重，血 液中胆固醇升高，引起包括动脉血管壁胆固醇的沉淀，诱发动脉硬化等心血管等疾病的发 生，严重威胁人类健康。
【发明内容】
： 本发明的目的是提供一株发酵具有降低胆固醇作用豆浆的鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)SCF20120718,提供进一步研宄开发预防和治疗由于胆固醇过 高所引起的心脑血管疾病的益生菌功能性保健食品和药品的原料。
[0005] 上述目的通过以下技术方案实现： 一种来源于发酵豆衆具有降低胆固醇作用豆衆的鼠李糖乳杆菌（Lactobaci 1 lus rhamnosus)SCF 20120718,由采集于自然发酵豆制品中，经分离、纯化、物理诱变、优选获得 的高活性菌株，菌学分类名称Lactobacillus rhamnosus，菌学特性：置于37°C恒温培养 箱的培养基中进行培养，通过培养发现稀释浓度为10-5时菌生长较良好，菌落分散。在相 同条件下菌落生长有大有小，菌落呈圆形，乳白色，边缘整齐，表面光滑，其中较小的菌落微 黄色，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏中心登记入册编号为： CGMCC No. 7085〇
[0006] 所述的来源于发酵豆制品具有降低胆固醇作用豆浆的鼠李糖乳杆菌 (Lactobacillusrhamnosus)SCF20120718,所述的高活性菌株的菌学特性为：革兰氏染色 结果呈阳性；芽孢染色菌体呈绿色；接触酶试验中没有气泡产生；溶钙圈法培养能观察到 菌落周围出现透明圈，具备明显乳酸菌的特征。
[0007] 所述的来源于发酵豆制品具有降低胆固醇作用豆浆的鼠李糖乳杆菌 (Lactobacillus rhamnosus)SCF20120718,菌株经 16S rDNA 部分序列在线进行 BLAST 比 对，结果具有Lactobacillus菌属rhamnosus菌种的主要遗传特性； 16S rDNA测序部分序列如下所示： 具有降胆固醇作用的鼠李糖乳杆菌及用途
【主权项】
1. 一种来源于发酵豆浆具有降胆固醇作用的鼠李糖乳杆菌，其特征是：由采集于 自然发酵豆制品中，经分离、纯化、物理诱变、优选获得的高活性菌株，菌学分类名称 LactobacillusrhamnosusSCF20120718,菌学特性；置于37°C恒温培养箱的培养基中进 行培养，通过培养发现稀释浓度为1(T5时菌生长较良好，菌落分散。在相同条件下菌落生 长有大有小，菌落呈圆形，乳白色，边缘整齐，表面光滑，其中较小的菌落微黄色，保藏号为： CGMCCNo. 7085〇
2. 根据权利要求1所述的来源于发酵豆浆具有降胆固醇作用的鼠李糖乳杆菌，其特征 是；所述的高活性菌株的菌学特性为；革兰氏染色结果呈阳性；芽抱染色菌体呈绿色；接触 酶试验中没有气泡产生；溶巧圈法培养能观察到菌落周围出现透明圈，具备明显乳酸菌的 特征。
3. 根据权利要求1或2所述的来源于发酵豆浆具有降胆固醇作用的鼠李糖乳杆菌，其 特征是；所述的菌株经16SrDNA部分序列在线进行BLAST比对，结果具有Lactobacillus 菌属rhamnosus菌种的主要遗传特性； 16SrDNA测序部分序列如下所示： LactobacillusrhamnosusSCF20120718 <110〉黑龙江大学 <120〉具有降胆固醇作用的鼠李糖乳杆菌及用途 <160>1 <210>LactobacillusrhamnosusSCF20120718 <211>1561 <212>RNA <213〉鼠李糖乳杆菌 <223〉n=a或g或C或t <400〉核巧酸序列和/或氨基酸序列
4. 根据权利要求1或2或3所述的来源于来源于发酵豆浆具有降胆固醇作用的鼠李糖 乳杆菌，其特征是；所述的培养基处方为：
所述的比例为重量份数比。
5. -种利用权利要求1、2、3所述的鼠李糖乳杆菌制作的豆浆，其特征是；将权利要求 1或2或3或4的菌株接种于经大豆浸泡，研磨、匀浆、煮沸，过滤、高温灭菌制得的豆浆中， 37°C-42°C发酵24小时W上，制得酸豆浆。
6. -种权利要求5所述的豆浆的制备方法，其特征是： 称取lOOg大豆清洗后放于250血自来水中于室温下浸泡12h;经去皮后，清水洗净， 将浸泡好的大豆W重量份数1 : 8的豆水比用组织捣碎机磨浆，加热至沸腾10分钟后用， =层纱布过滤后。倒入=角瓶中于121°C灭菌15min，纱布封口冷却后，无菌用接种环挑去 MRS试管斜面培养的李糖乳杆菌SCF20120718菌落五环，振摇均匀后，放置在37°C培养12 小时，冷却至室温，后放入冰箱4°C冷存，备用于后续发酵； 同上称取2000g大豆清洗后放于50000mL自来水中于室温下浸泡12h;经去皮后，清水 洗净，将浸泡好的大豆W重量份数1 : 8的豆水比用豆浆机磨浆，加热至沸腾后，离屯、过滤 出去豆渣。经己±灭菌器135°C灭菌10秒快速灭菌，置于清洗灭菌好的发酵罐中，按5% 体积比例加入上述备用的发酵豆浆，W30r/min，37-40°C的发酵2小时，而后分装、密封，室 温发酵12小时后，放入冰箱4°C冷存； 剩余部分置于清洗灭菌好的烧杯中，纱布封口后室温发酵24个小时W上，当抑达到 4. 9W下，酸豆浆呈凝固状，揽拌器将酸豆浆都揽成可流动性状，平铺2cm厚度的庭巧盘 中，-40°C到30°C冷冻干燥，成松脆黄色固体状，粉碎成100目的粉末，经凯氏定氮法测定蛋 白含量45. 1%。密封低温干燥保存备用。
7. -种将权利要求1或2或3或4所述的来源于发酵豆浆具有降胆固醇作用的鼠李糖 乳杆菌，用于制作包括见底包括胆固醇在内的血脂异常升高，用于开发制作预防和治疗屯、 血管疾病的保健食品和药品的用途。
【专利摘要】本发明提供一种具有降胆固醇作用的鼠李糖乳杆菌及用途。如果人们摄入高胆固醇食物过高，体内胆固醇的合成与代谢负荷过重，血液中胆固醇升高，引起包括动脉血管壁胆固醇的沉淀，诱发动脉硬化等心血管等疾病的发生，本发明由采集于自然发酵豆制品中，经分离、纯化、物理诱变、优选获得的高活性菌株，菌学分类名称：鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus SCF 20120718。菌学特性：置于37℃恒温培养箱的培养基中进行培养，通过培养发现稀释浓度为10-5时菌生长较良好，菌落分散。在相同条件下菌落生长有大有小，菌落呈圆形，乳白色，边缘整齐，表面光滑，其中较小的菌落微黄色，保藏号为：CGMCC No.7085。本发明提供预防和治疗心脑血管疾病的益生菌功能性保健品原料。CGMCC No.708520130104
【IPC分类】A61P3-06, A23C11-10, A61K35-747, C12R1-225, C12N1-20
【公开号】CN104789488
【申请号】CN201510088464
【发明人】邹积宏, 刘红梅, 孙彩凤, 袁杰利, 金涛, 姜岸, 佟立今, 刘长海
【申请人】黑龙江大学
【公开日】2015年7月22日
【申请日】2015年2月26日