0184] c)生存数据采用Kaplan-Meier方法进行作图，log-rank检验进行统计学分析。 Ρ〈0· 05认为有统计学意义，作图分析软件Graphpad prism 5.0。
[0185] (三）实验结果
[0186] 结果见图4,对白念菌SC5314感染的小鼠建立测试模型，在给药的七天里，空白 对照组全部死亡，表1中化合物29具有一定延缓老鼠死亡的效果，有统计学差异（P = 0. 0128)，但与氟康唑单独用药对比其治疗作用还有一定差距。
[0187] 结果见图5,氟康唑临床耐药白念菌0304103感染小鼠建立测试模型，结果显示， 给药七天，第8天空白对照组全部死亡，氟康唑存活率50%，联合用药组存活率均达到 100%;氟康唑组第14天全部死亡，此时联合用药组存活率达到50%。A组平均存活时间为 6. 6d ;B组平均存活时间为9. 5d ;C组平均存活时间为14. 7d。联合用药组与氟康唑单独用 药比较差异明显，C组与A组比较Log-rank检验，P〈0.0 OOl ;C组与B组比较Log-rank检 验，P = 0. 0026 ;B组与A组比较Log-rank检验，P = 0. 0198,均有统计学意义。联合用药 对氟康唑耐药菌感染小鼠具有较好的保护作用，能有效降低小鼠的死亡率，加强了对氟康 唑耐药菌的抵御作用。
[0188] 上述实验结果表明，本发明合成的噻唑酮类化合物具有较好的Sap2抑酶活性，且 具有较好的体内抗真菌活性，说明本发明合成的噻唑酮类化合物是一类新结构类型的Sap2 抑制剂和抗真菌活性化合物，可用于制备治疗抗真菌感染的药物，对氟康唑耐药菌具有较 好的抗真菌联合用药前景。本发明为深入研宄和开发新的抗真菌药物开辟了新的途径。
[0189] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为 本发明的保护范围。
【主权项】
L 一种噻唑酮类化合物，其特征在于，所述的噻唑酮类化合物结构通式为： 其中：札基团位于A、B环上除去连接位置的其它任何位置，在A、B环上是单取代或多取代，R1基团选自氢、羟基、氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、硝基、氰基、三氟甲基或卤素；所述 的卤素为F、Cl、Br或I; 馬基团位于C环上除去连接位置的其它任何位置，在C环上是单取代或多取代，R2基团 选自-0CH2C00H、-CliOCH2COOH或 _0CH2C0NHS02CF3。
2.根据权利要求1所述的噻唑酮类化合物，其特征在于，所述的Ri基团和R2基团选自 下列情形中的任一种： (1) R1基团为H，R2基团为 2-0CH2C00H; (2) R1基团为 4-Me，R2基团为 2-0CH2C00H; (3) 札基团为3-]^，1?2基团为2-0〇12〇)011; (4) R1基团为 2-Me，R2基团为 2-0CH2C00H; (5) R1基团为 2, 4-diMe，R2基团为 2-0CH2C00H; (6) 札基团为2,5-乜]^，1?2基团为2-0〇12〇)011; (7) R1基团为 4-F，R2基团为 2-0CH2C00H; (8) R1基团为 3-F，R2基团为 2-0CH2C00H; (9) R1基团为 2-F，R2基团为 2-0CH2C00H; (10) 札基团为4-(：1，1?2基团为2-0〇12〇)011; (11) 札基团为3-(：1，1?2基团为2-0〇12〇)011; (12) 札基团为2-(：1，1?2基团为2-0〇12〇)011; (13) R1基团为 4-Br，R2基团为 2-0CH2C00H; (14) R1 基团为 3-Br，R2基团为 2-0CH2C00H; (15) R1基团为 2-Br，R2基团为 2-0CH2C00H; (16) R1 基团为 4-OMe，R2基团为 2-0CH2C00H; (17) R1基团为 3-0Me，R2基团为 2-0CH2C00H; (18) R1 基团为 4-OEt，R2基团为 2-0CH2C00H; (19) R1 基团为 3-0Et，R2基团为 2-0CH2C00H; (20) 1^基团为2-(^11?2基团为2-0〇12〇)011; (21) R1基团为 3, 4-diMe，R2基团为 2-0CH2C00H; (22) R1基团为H，R2基团为 4-OCH2C00H; (23) R1基团为H，R2基团为 3-0CH2C00H; (24) R1基团为H，R2基团为 3, 4-diOCH2COOH; (25) R1基团为H，R2基团为 2, 4-diOCH2COOH; (26) R1基团为 4-Me，R2基团为 4-OCH2COOH; (27) R1基团为 4-Me，R2基团为 3-OCH2COOH; (28) R1基团为 4-Me，R2基团为 3, 4-diOCH2COOH; (29) R1基团为 4-Me，R2基团为 2, 4-diOCH2COOH; (30) R1基团为 4-OEt，R2基团为 4-OCH2COOH; (31) R1基团为 4-OEt，R2基团为 3-OCH2COOH; (32) R1基团为 4-OEt，R2基团为 3, 4-diOCH2COOH; (33) R1基团为 4-OEt，R2基团为 2, 4-diOCH2COOH; (34) R1基团为 3, 4-diMe，R2基团为 3, 4-diOCH2COOH; (35) R1基团为 3, 4-diMe，R2基团为 2, 4-diOCH2COOH; (36) R1基团为 2, 5-diMe，R2基团为 3, 4-diOCH2COOH; (37) R1基团为 2, 5-diMe，R2基团为 2, 4-diOCH2COOH; (38) R1基团为 4-F，R2基团为 3, 4-diOCH2COOH; (39) R1基团为 4-F，R2基团为 2, 4-diOCH2COOH; (40) 札基团为4-(：1，1?2基团为3,4-(1100120)011; (41) 札基团为4-(：1，1?2基团为2,4-(1100120)011; (42) R1 基团为 4-Br，R2基团为 3, 4-diOCH2COOH; (43) R1 基团为 4-Br，R2基团为 2, 4-diOCH2COOH; (44) R1基团为 4-OMe，R2基团为 3, 4-diOCH2COOH; (45) R1基团为 4-OMe，R2基团为 2, 4-diOCH2COOH。
3. 根据权利要求2所述的噻唑酮类化合物，其特征在于，所述的Ri基团为4-Me，所述 的R2基团为 2, 4-diOCH2COOH。
4. 权利要求1-3任一所述的噻唑酮类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 制备1，3-二（取代）苯基硫脲 (取代）苯胺和二硫化碳、三乙醇胺和硫粉于水中，回流搅拌反应，生成1，3-二（取代） 苯基硫脈； (2) 制备3-(取代）苯基-2-[(取代）苯亚氨基]噻唑烷-4-酮 1，3-二（取代）苯基硫脲、无水醋酸钠和氯乙酸乙酯于无水乙醇中加热回流反应，乙醇 重结晶得到3-(取代）苯基_2_[(取代）苯亚氨基]噻唑烷-4-酮； (3) 制备5-[(2_氧代乙酸乙酯取代）苯亚烯基]_3_[(取代）苯基]_2_[(取代）苯基 亚氨基]噻唑烷-4-酮 3_(取代）苯基_2_[(取代）苯亚氨基]噻唑烷-4-酮、（2-氧代乙酸乙酯取代）苯甲醛 和哌啶于无水乙醇中，60°C搅拌反应，得到5-[ (2-氧代乙酸乙酯取代）苯亚烯基]-3-[(取 代）苯基]-2-[(取代）苯基亚氨基]噻唑烷-4-酮； (4) 制备所述的噻唑酮类化合物 5_ [(2-氧代乙酸乙酯取代）苯亚烯基]-3-[(取代）苯基]-2-[(取代）苯基亚氨基] 噻唑烷-4-酮和LiOH.H2O于THF、MeOH和H2O的混合溶剂中，室温搅拌反应，得到所述的噻 唑酮类化合物：5-[(2_氧代乙酸取代）苯亚烯基]-3-[(取代）苯基]-2-[(取代）苯基亚 氨基]噻唑烷-4-酮；所述的5-[(2_氧代乙酸乙酯取代）苯亚烯基]_3_[(取代）苯基]_2_[(取代）苯基 亚氨基]噻唑烷-4-酮结构式为：
5. 权利要求1所述的噻唑酮类化合物的药学上可接受的盐类。
6. 根据权利要求5所述的盐类，其特征在于，所述的盐类为有机碱盐或无机碱盐；所述 的有机碱为甲胺或乙胺，所述的无机碱为氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钾或碳酸钠。
7. -种药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有治疗有效量的权利要求1所 述的噻唑酮类化合物或权利要求5所述的盐类，以及余量的药学上可接受的载体。
8. 权利要求1所述的噻唑酮类化合物或权利要求5所述的盐类的用途，其特征在于，用 于制备抑制分泌型天冬氨酸蛋白酶的药物。
9. 权利要求1所述的噻唑酮类化合物或权利要求5所述的盐类的用途，其特征在于，用 于制备抗真菌的药物。
10. 根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述的真菌是白色念珠菌。
【专利摘要】本发明涉及取代噻唑酮类分泌型天冬氨酸蛋白酶抑制剂及其制备方法。具体提供了一种新型的噻唑酮类化合物，结构通式为：。本发明的噻唑酮类化合物具有较好的Sap2抑酶活性，和线虫及小鼠体内抗真菌活性，且对氟康唑耐药菌具有较好的抗真菌联合用药作用，因此可用于制备抗真菌感染的药物或与现有抗真菌药物联用。本发明为深入研究和开发新的抗真菌药物开辟了新途径。
【IPC分类】A61K31/426, A61P31/10, C07D277/54
【公开号】CN104961707
【申请号】CN201510323862
【发明人】盛春泉, 张万年, 刘杨, 董国强, 姚建忠, 缪震元, 刘娜
【申请人】中国人民解放军第二军医大学
【公开日】2015年10月7日
【申请日】2015年6月12日