一种治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病的药物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于化学药物技术领域，具体涉及一种治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病 的药物。
【背景技术】
[0002] 肿瘤是危害人类健康的常见病、多发病，近几十年来，有关肿瘤的研宄取得了一定 的突破和进展，但是肿瘤的发病率和死亡率仍处于上升趋势。肿瘤的治疗方法有手术治疗、 放射治疗和药物治疗等，其中化学治疗为目前的主要治疗手段。但是，目前的肿瘤药物对癌 症细胞的杀灭率较低或需要较高的浓度，随之带来许多毒副反应。因此发现新的、高效抗肿 瘤化合物显得尤为迫切。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病的药物。
[0004] 本发明的具体技术方案如下：
[0005] -种治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病的药物，有效成分包括二茂铁烯烃衍生 物，其具有如下的结构通式：
[0006]
[0007] 其中R为氢、烷基、卤素、硝基或羟基。
[0008] 在本发明的一个优选实施方案中，所述二茂铁烯烃衍生物的结构式为：
[0009]
[0010] 进一步优选的，所述涉及异常细胞增殖疾病为癌症。
[0011] 一种二茂铁烯烃衍生物在制备用于治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病的药物中 的应用，该二茂铁烯烃衍生物具有如下的结构通式：
[0012]
[0013] 其中R为氢、烷基、卤素、硝基或羟基。
[0014] 在本发明的一个优选实施方案中，所述二茂铁烯烃衍生物的结构式为：
[0015]
[0016]
[0017] 在本发明的一个优选实施方案中，该二茂铁烯烃衍生物通过诱导细胞内活性氧产 生，阻滞细胞周期，诱导肿瘤细胞凋亡来治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病。
[0018] 进一步优选的，所述涉及异常细胞增殖疾病为癌症。
[0019] 本发明的有益效果是：本发明的药物可通过阻滞肿瘤细胞周期，诱导肿瘤细胞凋 亡和诱导肿瘤细胞内活性氧的产生来抑制肿瘤细胞的生长，具有良好的效果。
【附图说明】
[0020] 图1为本发明实施例2的凋亡和细胞周期分布情况分析结果图；
[0021] 图2为本发明实施例2的细胞荧光强度及分布情况结果图。
【具体实施方式】
[0022] 以下通过【具体实施方式】结合附图对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
[0023] 实施例1
[0024] -种治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病的药物，有效成分包括二茂铁烯烃衍生 物，其具有如下的结构通式：
[0025]
[0026] 其中R为氢、烷基、卤素、硝基或羟基。
[0027] 所述涉及异常细胞增殖疾病为癌症。
[0028] 该二茂铁稀径衍生物的制备方法参见Redox of ferrocene controlled asymmetric dehydrogenative Heck reaction via palladium-catalyzed dual C-H bond activation. Chao Pi, Ying Li, Xiuling Cui, Hao Zhang, Yanbing Han and Yangjie ffu. Chem. Sci. , 2013, 4, 2675-2679.
[0029] 实施例2
[0030] 本实施例涉及的二茂铁烯烃衍生物的结构式为：
[0031]
[0032] 上述二茂铁烯烃衍生物溶液的配制：分别先用少量的DMSO将化合物溶解，再用 1640培养液配制成浓度为lmg/mL的原溶液。再根据实验需要分别配制不同的终浓度，分别 避光保存于4°C冰箱备用。
[0033] 1、体外抗癌活性检测
[0034] DLD-1，MCF-7, A549, HUVEC 细胞使用 1640 培养基，10%胎牛血清，5% C02,37°C细 胞培养箱孵育。收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入l〇〇uL，铺板，使待测细胞调 密度至10000个/孔，边缘孔用无菌PBS填充。5% CO2，37°C细胞培养箱孵育，至细胞单层铺 满孔底（96孔平底板），加入浓度梯度的药物，设置6个梯度，分别为1、3、9、27、81、100 μ g/ mL，每孔100uL，设5个复孔。5% C02,37°C孵育48小时，倒置显微镜下观察细胞生长情况。 含100 μ L培养基的96孔板培养孔中每孔加入10 μ L，浓度为5mg/mL的MTT溶液，放回培养 箱中继续培养4h。4h后小心并充分吸除孔内培养基，每孔加入100 μ L DMS0,于震板机中充 分震荡l〇min，以充分溶解紫色结晶。并立即用酶标仪以630nm做参比波长，检测490nm处 的吸光值。以不加细胞而其他条件相同的孔来调零。采用SPSS软件计算IC50值。
[0035] 肿瘤细胞生长抑制率（％) = (1-实验孔测定值/对照孔测定值）X 100%
[0036] 结果参见表1，上述二茂铁烯烃衍生物有较好的抗肿瘤活性。
[0037] 表 1
[0038]
[0039] . 2、阻滞肺癌细胞A549细胞周期检测（采用化合物4、化合物5、化合物7和化合 物8进行）
[0040] 流式细胞仪检测细胞周期：取对数生长期的A549细胞，常规消化制成单细胞悬 液，计数，调整细胞浓度为10000个/ml，以每孔2mL接种于6孔细胞培养板中，置于37°C、 5 % 0)2浓度饱和湿度培养箱中培养，24h后，弃去原培养液，将细胞分为正常对照组、化合物 4组、化合物5组、化合物7组、化合物8组和顺铂组，每组设两个复孔，置于37°C、5% 0)2浓 度饱和湿度培养箱中继续培养24h后，终止培养。按照试剂盒进行染色。流式细胞仪观察 细胞周期的分布特征，采用ModiFit软件进行凋亡和细胞周期分布情况分析。
[0041] 分析结果如图1所示，结果表明化合物4、化合物5、化合物7和化合物8能够导致 细胞周期阻滞，诱导细胞凋亡。
[0042] 3、诱导肺癌细胞A549细胞内活性氧的产生检测（采用化合物4、化合物5、化合物 7和化合物8进行）
[0043] 流式细胞仪检测细胞内活性氧：取对数生长期的A549细胞，常规消化制成单细胞 悬液，计数，调整细胞浓度为10000个/ml，以每孔2ml接种于6孔细胞培养板中，置于37°C、 5% C02浓度饱和湿度培养箱中培养，24h后，弃去原培养液，将细胞分为正常对照组、阳性 对照组（Rosup组、顺铂组）、化合物4组、化合物5组、化合物7组和化合物8组，每组设两 个复孔，置于37°C、5% C02浓度饱和湿度培养箱中继续培养24h后，终止培养。按照1:1000 用无血清培养液稀释阳性对照Rosup，使其终浓度为50 μ g/mL，加入Rosup刺激30min。用 无血清细胞培养液洗涤细胞3次，按照1:1000用无血清培养液稀释DCFH-DA，使终浓度为 lOymol/L。去除细胞培养液，每孔加入1毫升稀释好的DCFH-DA。37°C细胞培养箱内孵育 20分钟。用无血清细胞培养液洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的DCFH-DA。胰酶 消化，收集细胞后流式细胞仪检测，使用488nm激发波长，525nm发射波长，上机检测并观察 细胞荧光强度及分布情况。
[0044] 结果如图2所示，结果表明化合物4、化合物5、化合物7和化合物8能够诱导细胞 内活性氧的产生。
[0045] 本领域技术人员可知，当结构通式：
[0046]
[0047] R为其他烷基、卤素、硝基或羟基时，也能得到与上述实施例2相同或相近的技术 效果。
[0048] 以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即 依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。
【主权项】
1. 一种治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病的药物，其特征在于：有效成分包括二茂铁 烯烃衍生物，其具有如下的结构通式：其中R为氢、烷基、卤素、硝基或羟基。2. 如权利要求1所述的药物，其特征在于：所述二茂铁烯烃衍生物的结构式为：3. 如权利要求1或2所述的药物，其特征在于：所述涉及异常细胞增殖疾病为癌症。4. 一种二茂铁烯烃衍生物在制备用于治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病的药物中的 应用，其特征在于：该二茂铁烯烃衍生物具有如下的结构通式：其中R为氢、烷基、卤素、硝基或羟基。5. 如权利要求4所述的应用，其特征在于：所述二茂铁烯烃衍生物的结构式为：6. 如权利要求4所述的应用，其特征在于：该二茂铁烯烃衍生物通过诱导细胞内活性 氧产生，阻滞细胞周期，诱导肿瘤细胞凋亡来治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病。7. 如权利要求4至6中任一权利要求所述的应用，其特征在于：所述涉及异常细胞增 殖疾病为癌症。
【专利摘要】本发明公开了一种治疗或预防涉及异常细胞增殖疾病的药物，有效成分包括二茂铁烯烃衍生物，其具有如下的结构通式：其中R为氢、烷基、卤素、硝基或羟基。本发明的药物可通过阻滞肿瘤细胞周期，诱导肿瘤细胞凋亡和诱导肿瘤细胞内活性氧的产生来抑制肿瘤细胞的生长，具有良好的效果。
【IPC分类】A61P35/00, A61K31/295, C07F17/02
【公开号】CN104961776
【申请号】CN201510385334
【发明人】崔秀灵, 孙爱静, 许瑞安
【申请人】华侨大学
【公开日】2015年10月7日
【申请日】2015年7月3日