组织吸收的可能性。综上，继而可以降低奥普佐 米的施用频率，其可以增加患者顺应给药方案的可能性。
[0270] 在某些实施方案中，给予狗的单一剂量的制剂对于含有100mg奥普佐米的制剂而 言产生15. 2±3. 3(ng/mLV(mg/kg)(平均值土平均值的标准误差）的奥普佐米的剂量标 准化峰值血浆浓度（Cmax/D);和/或向狗每日施用制剂产生0. 670±0. 110(min*yg/mL)/ (mg/kg)(平均值土平均值的标准误差）的奥普佐米至最后时间点的剂量标准化浓度时间 曲线下面积（AUC/D)。
[0271] [D]在一些实施方案中，当在40°C/75%相对湿度下实际或模拟储存至少1个月 (例如，至少2个月、至少3个月、至少6个月、至少9个月）时，制剂是稳定的。
[0272] 稳定性研宄是使用以下程序之一来进行：
[0273] (A)将片剂包装于具有用手拧紧的螺旋盖（聚丙烯盖、发泡聚乙烯[PE]内 衬）的25cc玻璃闪烁小瓶中，并且在25°C±2°C/60%相对湿度（RH) ±5%RH以及 40°C±2°C/75%RH±5%RH下储存。测试片剂的外观、硬度、试样和杂质以及在预定时间 点的溶出度。
[0274] (B)将片剂包装于具有外罩和干燥剂罐以及医药卷材的75cc宽嘴圆形白色HDPE 瓶中，并且在 25°C±2°C/60%相对湿度（RH) ±5%RH以及 40°C±2°C/75%RH±5%RH 下储存。测试片剂的外观、硬度、试样和杂质以及在预定时间点的溶出度。
[0275] 特别地，检测并测量杂质PR-059176 (PR-176)和PR-487。
[0277] 「VIII]制剂的用涂
[0278] 有序的蛋白质降解是维持正常细胞功能的关键，并且蛋白酶体在蛋白质降解过 程中是必需的。蛋白酶体控制蛋白质的水平，其对于正常和恶性细胞中的细胞周期进 程和细胞凋亡是重要的；例如，细胞周期素（cyclin)、半胱天冬蛋白酶（caspase)、BCL2 以及NF-KB(Kumatori等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1990)87 :7071-7075;Almond等， Leukemia(2002) 16 :433-443)。因此，并不意外的是，抑制蛋白酶体活性可以转变为疗法以 治疗各种疾病病况，诸如恶性、非恶性以及自体免疫疾病，这取决于所涉及的细胞。
[0279] 体外与体内模型都已经显示，恶性细胞一般易受蛋白酶体抑制的影响。实际上，蛋 白酶体抑制已经被验证为用于治疗多发性骨髓瘤的治疗策略。这可能部分归因于高度增 殖的恶性细胞依赖于蛋白酶体系统来快速地去除蛋白质（Rolfe等，J.Mol.Med. (1997)75 : 5-17 ;Adams，Nature(2004) 4 :349-360)。因此，本发明的某些实施方案涉及一种治疗癌症 的方法，其包括向需要所述治疗的受试者施用有效量的本文所公开的蛋白酶体抑制剂化合 物。如本文所用的术语"癌症"包括（但不限于）血源性和实体肿瘤。癌症指的是血液、骨 骼、器官、皮肤组织以及血管系统的疾病，包括（但不限于）膀胱、血液、骨骼、脑、乳房、子宫 颈、胸部、结肠、子宫内膜、食道、眼睛、头、肾、肝、肺、淋巴结、口、颈、卵巢、胰腺、前列腺、直 肠、肾、皮肤、胃、睪丸、咽喉以及子宫的癌症。特定的癌症包括（但不限于）白血病（急性 淋巴细胞性白血病（ALL)、急性骨髓性白血病（AML)、慢性淋巴细胞性白血病（CLL)、慢性骨 髓性白血病（CML)、毛细胞白血病）、成熟B细胞肿瘤（小淋巴细胞性白血病、B细胞前淋巴 细胞性白血病、淋巴楽?细胞性淋巴瘤（诸如沃尔登斯特伦巨球蛋白血症（Waldenstr6m's macroglobulinemia)或惰性淋巴瘤）、脾边缘区淋巴瘤、浆细胞骨髓瘤、浆细胞白血病、浆 细胞瘤、单克隆免疫球蛋白沉积病、重链病、结外边缘区B细胞淋巴瘤（MALT淋巴瘤）、结 边缘区B细胞淋巴瘤（NMZL)、胃肠肿瘤（例如，胃肠基质肿瘤（GIST))、滤泡性淋巴瘤、套 细胞淋巴瘤/白血病、弥漫性B细胞淋巴瘤、纵隔（胸腺）大B细胞淋巴瘤、血管内大B细 胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤，以及伯基特淋巴瘤（Burkittlymphoma)/白血病）、成熟 T细胞和自然杀手（NK)细胞肿瘤（T细胞前淋巴细胞性白血病、T细胞大颗粒淋巴细胞性 白血病、侵袭性NK细胞白血病、成人T细胞白血病/淋巴瘤、结外NK/T细胞淋巴瘤、肠病 型T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、母细胞性NK细胞淋巴瘤、蕈样肉芽肿（塞扎里综合 征（Sezarysyndrome))、原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤、淋巴瘤样丘瘆病、血管免疫母细 胞性T细胞淋巴瘤、非特指外周T细胞淋巴瘤以及间变性大细胞淋巴瘤）、霍奇金氏淋巴瘤 (Hodgkin'slymphoma)(结节硬化型、混合细胞型、富于淋巴细胞型、淋巴细胞消减型或未 消减型、结节性淋巴细胞为主型）、骨髓瘤（多发性骨髓瘤、惰性骨髓瘤、焖燃型骨髓瘤）、 慢性骨髓增生性疾病、骨髓增生异常/骨髓增生性疾病、骨髓增生异常综合征、免疫缺陷 相关的淋巴增生性障碍、组织细胞和树突状细胞肿瘤、肥大细胞增多症、软骨肉瘤、尤文氏 肉瘤（Ewingsarcoma)、纤维肉瘤、恶性巨细胞肿瘤、骨髓瘤骨病、骨肉瘤、乳癌（激素依赖 型、激素非依赖型）、妇科癌（子宫颈、子宫内膜、输卵管、妊娠滋养细胞疾病、卵巢、腹膜、子 宫、阴道以及外阴）、基底细胞癌（BCC)、鳞状细胞癌（SCC)、恶性黑色素瘤、隆突性皮肤纤维 肉瘤、梅克尔细胞癌（Merkelcellcarcinoma)、卡波西氏肉瘤（Kaposi^ssarcoma)、星 形细胞瘤、毛细胞型星形细胞瘤、胚胎发育不良性神经上皮肿瘤、少突神经胶质瘤、室管膜 瘤、多形性胶质母细胞瘤、混合型胶质瘤、少突星形细胞瘤、髓母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、 神经母细胞瘤、生殖细胞瘤、畸胎瘤、恶性间皮瘤（腹膜间皮瘤、心包间皮瘤、胸膜间皮瘤）、 胃-肠_胰或胃肠胰神经内分泌肿瘤（GEP-NET)、类癌瘤、胰腺内分泌肿瘤（PET)、结直肠腺 癌、结直肠癌、侵袭性神经内分泌肿瘤、平滑肌肉瘤、粘液腺癌、印戒细胞腺癌（SignetRing cel1adenocarcinoma)、肝细胞癌、胆管癌、肝母细胞瘤、血管瘤、肝腺瘤、局灶性结节性增 生（结节性再生性增生、错构瘤）、非小细胞肺癌（NSCLC)(鳞状细胞肺癌、腺癌、大细胞肺 癌）、小细胞肺癌、甲状腺癌、前列腺癌（激素难治型、雄激素非依赖型、雄激素依赖型、激素 不敏感型）、肾细胞癌，以及软组织肉瘤（纤维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、皮肤纤维肉瘤、 脂肪肉瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、血管肉瘤、滑膜肉瘤、恶性外周神经鞘肿瘤/神经纤维 肉瘤、骨外骨肉瘤）。
[0280] 造血和淋巴组织的许多肿瘤的特性为细胞增殖的增加或特定类型的细胞。慢性 骨髓增生性疾病（CMPD)是克隆性造血干细胞病症，其特征为一个或多个髓系的骨髓增 生，导致外周血中的粒细胞、红血细胞和/或血小板的数目增加。这样的话，使用蛋白酶 体治疗这些疾病是有吸引力的并且正在检验当中（Cilloni等，Haematologica(2007)92 : 1124-1229)。CMPD可以包括慢性骨髓性白血病、慢性中性粒细胞性白血病、慢性嗜酸性粒细 胞性白血病、真性红细胞增多症、慢性特发性骨髓纤维化、原发性血小板增多症以及未分类 的慢性骨髓增生性疾病。本发明的一个方面是治疗CMH)的方法，其包括向需要所述治疗的 受试者施用有效量的本文所公开的蛋白酶体抑制剂化合物。
[0281] 骨髓增生异常/骨髓增生性疾病，诸如慢性髓单核细胞性白血病、非典型慢性骨 髓性白血病、幼年型髓单核细胞性白血病以及未分类的骨髓增生异常/骨髓增生性疾病， 特征为因一个或多个髓系的增生所致的骨髓细胞过多。用本文所描述的化合物或组合物抑 制蛋白酶体可以用于治疗这些骨髓增生异常/骨髓增生性疾病，这是通过向需要所述治疗 的受试者提供有效量的化合物或组合物来完成。
[0282] 骨髓增生异常综合征（MDS)是一组造血干细胞病症，其特征为一个或多个主要骨 髓细胞系中的发育异常和无效造血。在这些血液恶性疾病中用蛋白酶体抑制剂靶向NF-kB 诱导细胞凋亡，从而杀死恶性细胞（Braun等CellDeathandDifferentiation(2006) 13: 748-758)。本发明的另一个实施方案是一种治疗MDS的方法，其包括向需要所述治疗的受 试者施用有效量的本文所公开的化合物。MDS包括难治性贫血、伴有环形铁粒幼细胞的难治 性贫血、伴有多系发育异常的难治性血细胞减少症、伴有过量芽细胞的难治性贫血、未分类 的骨髓增生异常综合征，以及与分离的del(5q)染色体异常相关的骨髓增生异常综合征。
[0283] 肥大细胞增多症是肥大细胞的增殖以及其在一个或多个器官系统中的后续积 聚。肥大细胞增多症包括（但不限于）皮肤肥大细胞增多症、惰性系统性肥大细胞增多症 (ISM)、与克隆性血液学非肥大细胞系疾病相关的系统性肥大细胞增多症（SM-AHNMD)、侵袭 性系统性肥大细胞增多症（ASM)、肥大细胞白血病（MCL)、肥大细胞肉瘤（MCS)以及皮肤外 肥大细胞瘤。本发明的另一个实施方案是一种治疗肥大细胞增多症的方法，其包括将有效 量的本文所公开的化合物或组合物施用于诊断有肥大细胞增多症的受试者。
[0284] 蛋白酶体调控NF-kB，其继而调控免疫和发炎反应中所涉及的基因。举例来说， NF-kB是免疫球蛋白轻链k基因、IL-2受体a-链基因、I类主要组织相容性复合物基因， 以及编码例如IL-2、IL_6、粒细胞集落刺激因子以及IFN-0的许多细胞激素基因的表达所 需要的（?&1〇1111^11 &等，(^11(1994)78:773-785)。因此，在某些实施方案中，本发明涉及影 响IL-2、MHC-I、IL-6、TNFa、IFN-0或任何其它先前所提及的蛋白质的表达水平的方法， 每种方法包括向受试者施用有效量的本文所公开的蛋白酶体抑制剂化合物或组合物。在某 些实施方案中，本发明包括一种治疗哺乳动物的自体免疫疾病的方法，其包括施用治疗有 效量的本文所描述的化合物或组合物。"自体免疫疾病"在本文中是由个体自身组织产生 并且针对个体自身组织的疾病或病症。自体免疫疾病或病症的实例包括（但不限于）发炎 反应，诸如包括牛皮癣和皮炎（例如，异位性皮炎）的发炎性皮肤病；系统性硬皮病和硬化； 与发炎性肠病（诸如克罗恩氏病（Crohn'sdisease)和溃疡性结肠炎）相关的反应；呼吸 窘迫综合征（包含成人呼吸窘迫综合征；ARDS);皮炎；脑膜炎；脑炎；葡萄膜炎；结肠炎；肾 小球肾炎；过敏性病状，诸如湿瘆和哮喘以及涉及T细胞浸润和慢性发炎反应的其它病状； 动脉粥样硬化；白细胞粘附缺陷；类风湿性关节炎；系统性红斑狼疮（SLE);糖尿病（例如， I型糖尿病或胰岛素依赖型糖尿病）；多发性硬化；雷诺氏综合征（Reynaud'ssyndrome); 自体免疫甲状腺炎；过敏性脑脊髓炎；休格兰氏综合征（Sjogren'ssyndrome);幼年发 病型糖尿病；以及与由通常在结核病、肉状瘤病、多肌炎、肉芽肿病以及血管炎中发现的细 胞激素和T淋巴细胞介导的急性和迟发型超敏反应相关的免疫反应；恶性贫血（阿狄森氏 病（Addison'sdisease));涉及白细胞渗出的疾病；中枢神经系统（CNS)发炎病症；多器 官损伤综合征；溶血性贫血（包括（但不限于）冷球蛋白血症或库姆斯阳性贫血（Coombs positiveanemia));重症肌无力；抗原-抗体复合物介导的疾病；抗肾小球基底膜疾病；抗 磷脂综合征；过敏性神经炎；格雷夫斯氏病（Graves'disease);兰伯特-伊顿肌无力综合 征（Lambert-Eatonmyasthenicsyndrome);大疱性类天疱疮；天疱疮；自体免疫多内分泌 腺病；赖特尔病（Reiter'sdisease);僵人综合征；白塞氏病（Beheetdisease);巨细胞 动脉炎；免疫复合物肾炎；IgA肾病；IgM多发性神经病；免疫性血小板减少性紫癜（ITP); 或自体免疫血小板减少症。
[0285] 免疫系统屏蔽受病毒感染，已经经历致癌性转化，或在表面上呈递不常见的肽的 自体细胞。细胞内蛋白质水解产生用于呈递至T淋巴细胞以诱导I类MHC介导的免疫反应 的小肽。因此，在某些实施方案中，本发明涉及一种使用化合物作为用于抑制或改变细胞中 的抗原呈递的免疫调节剂的方法，其包括使细胞暴露于（或向受试者施用）本文所描述的 化合物。特定实施方案包括治疗哺乳动物的移植物或移植相关疾病，诸如移植物抗宿主疾 病或宿主抗移植物疾病的方法，其包括施用治疗有效量的本文所描述的化合物。如本文所 用的术语"移植物"指的是来源于供体以供移植至接受体中的生物材料。移植物包括多种 材料，诸如分离的细胞，如胰岛细胞；组织，如新生儿的羊膜、骨髓、造血前驱细胞，以及眼部 组织，如角膜组织；以及器官，如皮肤、心脏、肝脏、脾脏、胰脏、甲状腺叶、肺脏、肾脏、管状器 官（例如，肠道、血管或食道）。管状器官可以用于置换食道、血管或胆管的受损部分。皮肤 移植物不仅可以用于烧伤，而且用作受损肠道的修饰或使诸如横膈疝的某些缺陷闭合。移 植物来源于任何哺乳动物来源，包括人类，不论是来自尸体还是活供体。在一些情况下，供 体和接受体是同一哺乳动物。优选地，移植物是骨髓或诸如心脏的器官，并且移植物的供体 与宿主匹配II类HLA抗原。
[0286] 组织细胞和树突状细胞肿瘤来源于巨噬细胞和辅助细胞，其在抗原加工并呈递至 淋巴细胞中具有主要作用。消耗树突状细胞中的蛋白酶体含量已经显示出改变其抗原诱 导的反应（Chapatte等CancerRes. (2006)66:5461-5468)。因此，本发明的另一个实施方 案包括将有效量的本文所公开的化合物或组合物施用于具有组织细胞或树突状细胞肿瘤 的受试者。组织细胞和树突状细胞肿瘤包括组织细胞肉瘤、朗格汉斯细胞组织细胞增生症 (Langerhanscellhistiocytosis)、朗格汉斯细胞肉瘤（Langerhanscellsarcoma)、并指 树突状细胞肉瘤/肿瘤、滤泡性树突状细胞肉瘤/肿瘤，以及非特指树突状细胞肉瘤。
[0287] 蛋白酶体的抑制已经显示出有益于治疗细胞类型增生的疾病和免疫病症；因此， 本发明的一个实施方案包括治疗与原发性免疫病症（PID)相关的淋巴增生性疾病（LPD)， 其包括将有效量的所公开的化合物施用于有需要的受试者。与淋巴增生性病症（包括B细 胞和T细胞肿瘤和淋巴瘤）的发生率增加相关的免疫缺陷的最常见的临床环境是原发性免 疫缺陷综合征和其它原发性免疫病症、人类免疫缺陷病毒（HIV)感染、已经接受实体器官 或骨髓同种异体移植的患者的医源性免疫抑制，以及与氨甲蝶呤（methotrexate)治疗相 关的医源性免疫抑制。通常与Lro相关的其它pid是（但不限于）共济失调毛细血管扩 张（AT)、威斯科特-奥尔德里奇综合征（Wiskott-Aldrichsyndrome，WAS)、常见变异型免 疫缺陷（CVID)、重症联合免疫缺陷（SCID)、X连锁淋巴增生性病症（XLP)、奈梅亨断裂综合 征（Nijmegenbreakagesyndrome，NBS)、高IgM综合征，以及自体免疫淋巴增生性综合征 (ALPS) 〇
[0288] 本发明的额外实施方案涉及影响癌蛋白的蛋白酶体依赖性调控的方法以及治疗 或抑制癌生长的方法，每种方法包括使细胞（体内，例如在受试者内，或体外）暴露于本文 所公开的蛋白酶体抑制剂组合物。来源于HPV-16和HPV-18的E6蛋白质刺激ATP和泛素 (ubiquitin)依赖性偶联以及粗网织红细胞裂解物中p53的降解。隐性致癌基因p53已经 显示在具有突变的热不稳定E1的细胞系中在非允许的温度下积聚。p53的水平升高可能导 致细胞凋亡。被泛素系统降解的原癌蛋白的实例包括c-Mos、c-Fos以及c-Jun。在某些实 施方案中，本发明涉及一种治疗P53相关的细胞凋亡的方法，其包括向受试者施用有效量 的本文所公开的蛋白酶体抑制剂组合物。
[0289] 本发明的另一个方面涉及本文所公开的蛋白酶体抑制剂组合物用于治疗神经退 化疾病和病状的用途，包括（但不限于）中风、对神经系统的缺血性损伤、神经创伤（例 如，冲击脑损伤、脊髓损伤以及对神经系统的创伤性损伤）、多发性硬化和其它免疫介导的 神经病（例如，格林 -巴利综合征（Guillain-Barresyndrome)和其变型、急性运动轴突 性神经病、急性发炎性脱髓鞘性多发性神经病以及费希尔氏综合征（FisherSyndrome))、 HIV/AIDS痴呆复合症、轴突症（axonomy)、糖尿病性神经病、帕金森氏病（Parkinson's disease)、亨廷顿氏病（Huntington'sdisease)、多发性硬化、细菌性、寄生虫性、真 菌性以及病毒性脑膜炎、脑炎、血管性痴呆、多发梗塞性痴呆、路易体痴呆（Lewybody dementia)、额叶痴呆（诸如皮克氏病（Pick'sdisease))、皮质下痴呆（诸如亨廷顿或进 行性核上麻痹）、局灶性皮质萎缩综合征（诸如原发性失语）、代谢毒性痴呆（诸如慢性甲 状腺功能减退或B12缺乏），以及感染（诸如梅毒或慢性脑膜炎）引起的痴呆。
[0290] 阿兹海默氏病（Alzheimer'sdisease)的特征为|3 -淀粉样蛋白（|3-AP)在老 年斑和脑血管中的细胞外沉积。0 -AP是来源于淀粉样蛋白前体（APP)的具有39至42个 氨基酸的肽片段。APP的至少三个同种型是已知的（695、751以及770个氨基酸）。mRNA的 选择性剪切产生这些同种型：正常的加工影响一部分0-AP序列，从而防止0-AP产生。据 信，蛋白酶体对蛋白质的异常加工致使阿兹海默脑中富含0-AP。大鼠中的APP加工酶含有 约十个不同亚单元（22kDa至 32kDa)。25kDa亚单元具有X-Gln-Asn-Pro-Met-X-Thr-Gly-Thr-Ser的N端序列，其与人类巨蛋白因子（macropain)的|3亚单元相同（Kojima，S等， Fed.Eur.Biochem.Soc.，（1992) 304 :57-60)。APP加工酶在Gln15-Lys16键处裂解；在钙离 子存在下，这种酶也在Mef-Asp1键和AspL-Ala2键处裂解以释放0 -AP的胞外域。
[0291] 因此，本发明的一个方面涉及一种治疗阿兹海默氏病的方法，其包括向受试者施 用有效量的本文所公开的蛋白酶体抑制剂化合物或组合物。所述治疗包括降低0-AP加工 的速率、降低-AP斑块形成的速率、降低-AP产生的速率，以及减少阿兹海默氏病的临 床征象。
[0292] 在一些实施方案中，本文所公开的蛋白酶体抑制剂化合物或组合物可以适用于治 疗淀粉样变性。因此，本文提供了一种治疗受试者的淀粉样变性的方法，其包括向受试者施 用有效量的本文所公开的蛋白酶体抑制剂化合物或组合物。
[0293]纤维化是因纤维母细胞的过度增生性生长而引起的纤维结缔组织的过度和持续 形成，并且与TGF-0信号传导路径的活化相关。纤维化涉及细胞外基质的广泛沉积，并且 可以在几乎任何组织内或跨越若干不同组织发生。通常，在TGF-0刺激后活化靶基因的转 录的细胞内信号传导蛋白（Smad)的水平是由蛋白酶体活性来调控（Xu等，2000)。然而， TGF-0信号传导组分的加速降解已经在纤维化病状中观测到，诸如囊肿性纤维化、注射性 纤维化、心内膜心肌纤维化、特发性肺纤维化、骨髓纤维化、腹膜后纤维化、进行性大块纤维 化、肾源性系统性纤维化。通常与纤维化相关的其它病状包括肝硬化、弥漫性实质性肺病、 输精管切除术后疼痛综合征、结核病、镰状细胞贫血以及类风湿性关节炎。本发明的一个实 施方案是治疗纤维化或纤维化相关病状的方法，其