水酶法同时制备油茶籽油和油茶籽蛋白的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及农产品精深加工及其副产物综合利用技术领域，具体涉及一种水酶法从油茶籽柏中同时制备油茶籽油和油茶籽蛋白的方法。
【背景技术】
[0002]油茶籽油是一种特殊的油脂，对其进行精深加工，不仅可以满足人们的需求，还能作为医药用油使用。油茶油中的不饱和脂肪酸超过橄榄油。因其脂肪酸组成、油脂特性及营养成分都可与橄榄油媲美，所以被盛赞为“东方橄榄油”，长期食用有利于防止血管硬化、高血压和肥胖等疾病，为各种食用油之冠。近年来油茶籽油在保健及医药上的用途日见广泛，经特殊工艺精制后的油茶籽油在医药上可用来作为注射用油。
[0003]油茶籽蛋白由17种氨基酸组成，其中苏氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、赖氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸等7种是人体必须的氨基酸。油茶饼柏蛋白较强的乳化性和较强的吸油性，可用于冰激凌、烘焙产品、肉制品、鱼、仿肉制品中及用做蛋白饮料、冲调食品的蛋白质强化剂，是一种良好的具有开发潜力的蛋白质资源。另油茶籽蛋白经酶解还可制备功能性多肽，以油茶籽柏为原料提取蛋白，进行开发和利用是非常有意义的。因此，有必要研宄一种同时制备得到油茶籽油和油茶籽蛋白的方法。
【发明内容】
[0004]针对上述技术中存在的不足之处，本发明提供了一种水酶法从油茶籽柏中同时制备油茶籽油和油茶籽蛋白的方法，其工艺简单安全、且使提取的油茶籽油香味浓、颜色更浅，油茶籽蛋白纯度更高。
[0005]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:一种水酶法同时制备油茶籽油和油茶籽蛋白的方法，包括如下步骤:步骤一、浆液获取:将油茶籽柏原料和水混匀，制得浆液；步骤二、酶解:调节浆液pH调至8?11，加入蛋白酶酶解，酶解反应温度为45?55°C，酶解反应时间为2?5小时，待酶解反应结束，将酶解液升温至85?100°C灭酶10?20分钟，降温至50?60°C后将酶解液离心，依次得到第一层清油、第二层乳化层、第三层蛋白水解液和第四层废渣，逐层吸取得到一次油茶籽油、一次乳化层和蛋白水解液；步骤三、一次破乳:将一次乳化层分离，冷冻再解冻破乳，得到一次乳液并将其离心，依次得到第一层清油、第二层乳化层和第三层废液，逐层吸取得到二次油茶籽油和二次乳化层；步骤四、二次破乳:将二次乳化层分离，冷冻再解冻破乳，得到二次乳液并将其离心，依次得到第一层清油、第二层乳化层和第三层废液，吸取上层清油得到三次油茶籽油，并与一次油茶籽油和二次油茶籽油混匀，制得油茶籽油；步骤五、将步骤二中得到的蛋白水解液冷冻干燥，得到油茶籽蛋白。
[0006]优选的，所述步骤一中的油茶籽柏原料制备过程为:由压榨后的油茶籽饼得到油茶籽柏，并将其粉碎过筛得到颗粒大小为20?40目的油茶籽柏原料。
[0007]优选的，所述步骤一中的浆液通过将油茶籽柏原料和水按料液比Ig:4?6mL混匀制得。
[0008]优选的，所述步骤二中通过在浆液中加入氢氧化钠或氢氧化钾，以将浆液pH调至8 ?11。
[0009]优选的，所述步骤二中的蛋白酶采用碱性蛋白酶，其加酶量为油茶籽柏原料用量的 0.5% ?2%O
[0010]优选的，所述一次破乳和二次破乳条件为:冷冻温度-20°c，冷冻时间24小时，解冻温度45°C，解冻3小时。
[0011]优选的，所述步骤五中冷冻干燥的条件为:冷冻温度_6°C，冷冻时间40h，真空度为 Ipa0
[0012]本发明与现有技术相比，其有益效果是:
(I)本发明采用碱性蛋白酶酶解，破坏细胞结构使油脂释出，相较于单一使用纤维素酶或果胶酶酶解的油脂得率更高；相比使用纤维素酶酶、果胶酶及淀粉酶，其蛋白质提取率低于不加酶的对照试验，蛋白质溶解度很小，大部分以不溶状态存在渣中。而碱性蛋白酶最适PH值远离油茶籽蛋白的等电点，提高了蛋白质体系的溶解度，促进蛋白酶的作用；另外，经过蛋白酶的酶解，蛋白质以多肽的形式存在，蛋白质提取率增加。蛋白酶还可以明显改善乳化现象，增加游离油得率，对细胞中的脂蛋白或者磨浆过程中形成的、包络于油滴外的磷脂和蛋白质结合的蛋白膜进行破坏，使油脂释放出来，实现油水分离，同时得到水解蛋白。
[0013](2)由于水酶法提油时会形成乳状液，其成分为油、水、少量蛋白质、淀粉及纤维素，相比于加热破乳、微波辐照和盐析破乳，本发明采用的连续两次冷冻解冻破乳能较好破坏乳状液的稳定性，由于冷冻过程中乳状液中会出现油相结晶，且这些脂肪晶体可刺入水相，当这些脂肪晶体恰好出现在相邻油滴之间时，将刺穿界面膜引起油滴的聚集，从而大幅度降低乳状液的稳定性，达到破乳的目的，本发明采用连续两次冷冻解冻破乳法大大提高了油脂得率，油茶籽油得率可达85%以上，充分提取了油茶籽中的油脂，且其品质得到很好的保留。
[0014](3)本发明提供的水酶法从油茶籽柏中同时制备油茶籽油和油茶籽蛋白的方法，工艺简单安全，提取的油茶籽油香味浓，颜色浅，质量好；制得的油茶籽蛋白纯度更高，蛋白质含量可达45%左右，可作为一种良好的功能性配料广泛应用于食品加工中。
【附图说明】
[0015]图1是本发明所述的水酶法同时制备油茶籽油和油茶籽蛋白的方法工艺流程图。
【具体实施方式】
[0016]下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
[0017]如图1所示，本发明提供了一种水酶法从油茶籽柏中同时制备油茶籽油和油茶籽蛋白的方法，包括如下步骤:
步骤一、浆液获取:由压榨后的油茶籽饼得到油茶籽柏，并将其粉碎过筛得到颗粒大小为20?40目的油茶籽柏原料，以减小油茶籽柏原料的颗粒大小，增加分子的比表面积，可增大酶解接触面积，从而更好促进反应，有利于出油，将油茶籽柏原料和水按料液比Ig:4?6mL混匀，制得浆液，此料液比范围内能保证酶与底物浓度比例适宜；
步骤二、酶解:在浆液中加入氢氧化钠或氢氧化钾将浆液PH调至8?11，加入蛋白酶解，蛋白酶为碱性蛋白酶，其最适pH在8?10之间，最适温度在45?55°C，碱性蛋白酶的加酶量为油茶籽柏原料用量的0.5%?2%，酶解反应温度为45?55°C，酶解反应时间为2?5小时，待酶解反应结束，将酶解液升温至85?100°C灭酶10?20分钟，降温至50?60°C后离心，离心条件为:转速3500?5000r/min，离心15?30min，依次得到第一层清油、第二层乳化层、第三层蛋白水解液和第四层废渣，逐层吸取得到一次油茶籽油、一次乳化层和蛋白水解液；
步骤三、一次破乳:将一次乳化层分离，冷冻再解冻破乳，一次破乳条件为:冷冻温度-20°C，冷冻时间24小时，解冻温度45°C，解冻3小时，得到一次乳液并将其离心，离心条件为:转速3500?5000r/min，离心10?30min，依次得到第一层清油、第二层乳化层和第三层废液，逐层吸取得到二次油茶籽油和二次乳化层；
步骤四、二次破乳:将二次乳化层分离，冷冻再解冻破乳，所述二次破乳条件为:冷冻温度_20°C，冷冻时间24小时，解冻温度45°C，解冻3小时，得到二次乳液并将其离心，离心条件为:转速3500?5000r/min，离心10?30min，依次得到第一层清油、第二层乳化层和第三层废液，吸取上层清油得到三次油茶籽油，并与一次油茶籽油和二次油茶籽油混匀，制得油茶籽油；
步骤五、使用真空冷冻干燥机将得到的蛋白水解液冷冻干燥，冷冻干燥条件为:冷冻温度_6°C，冷冻时间40h，真空度为lpa，得到油茶籽蛋白。
[0018]本发明采用碱性蛋白解对油茶籽柏进行再一次利用，得到的油茶籽油和蛋白品质均很理想。利用碱性蛋白酶酶解，破坏细胞结构使油脂释出，相较于单一使用纤维素酶或果胶酶酶解的油脂得率更高；相比使用纤维素酶酶、果胶酶及淀粉酶，其蛋白质提取率低于不加酶的对照试验，蛋白质溶解度很小，大部分以不溶状态存在渣中。而碱性蛋白酶最适PH值远离油茶籽蛋白的等电点，提高了蛋白质体系的溶解度，促进蛋白酶的作用；另外，经过蛋白酶的酶解，蛋白质以多肽的形式存在，蛋白质提取率增加。蛋白酶还可以明显改善乳化现象，增加游离油得率，对细胞中的脂蛋白或者磨浆过程中形成的、包络于油滴外的磷脂和蛋白质结合的蛋白膜进行破坏，使油脂释放出来，实现油水分离，同时得到水解蛋白。由于水酶法提油时会形成乳状液，其成分为油、水、少量蛋白质、淀粉及纤维素，相比于加热破乳、微波辐照和盐析破乳，本发明采用的连续两次冷冻解冻破乳能较好破坏乳状液的稳定性，由于冷冻过程中乳状液中会出现油相结晶，且这些脂肪晶体可刺入水相，当这些脂肪晶体恰好出现在相邻油滴之间时，将刺穿界面膜引起油滴的聚集，从而大幅度降低乳状液的稳定性，达到破乳的目的，本发明采用连续两次冷冻解冻破乳法大大提高了油脂得率，油茶籽油得率