具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物及其制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及5, 2' -二羟基-4' -甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物，具体涉及 C环氢化5, 2' -二羟基-4' -甲氧基-3-香叶基黄酮及其制备方法和用途。
【背景技术】
[0002] 宫颈癌是对女性健康和生活质量危险最大的疾病之一，因此寻求高效、高选择和 毒副作用小的抗宫颈癌药物是药物研究的主要方向。黄酮类化合物是一类存在于自然界 的、具有2-苯基色原酮结构的化合物，其生物活性多种多样，并具有很强的药理活性。有研 究表明，黄酮类化合物具有抗肿瘤活性，在肺癌、结肠癌、乳腺癌等治疗和预防中发挥重大 作用，其阻止癌细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抗氧化活性、抑制新生血管形成等机制。但是 目前获取黄酮类化合物主要是通过中药提取，靠分离提取进行量产比较困难，并且黄酮类 化合物结构复杂，作用位点多，造成针对选择性差，其作用机制、物质基础均没有明确的理 论解释，故结构式、靶向性均具有不可操控性。
[0003] 因此，通过化学合成对其结构改造修饰，寻找一种活性更好、副作用更小的多靶 点、多环节、多效应的改性黄酮类化合物，增强其特定药理活性以治疗宫颈癌是目前亟需解 决的技术难题。
【发明内容】
[0004] 作为各种广泛且细致的研究和实验的结果，本发明的发明人已经发现，在合成过 程工艺中控制柱层析的体积比，所述化合物有助于提高治疗宫颈癌的性能。基于这种发现， 完成了本发明。
[0005] 本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优 点。
[0006] 本发明还有一个目的是提供一种具有5, 2'-二羟基-4'-甲氧基-3-香叶基黄酮 骨架的衍生物，其具有良好的抗宫颈癌活性，多靶点、多环节、多相应，毒性低，不易产生耐 药性。
[0007] 本发明还有一个目的是提供一种所述具有5, 2'-二羟基-4'-甲氧基-3-香叶基 黄酮骨架的衍生物的制备方法，通过甲基化、成酯、重排、香叶基化、关环、催化加氢和脱甲 基，制备方法简单、容易控制，提高所述化合物的靶点，以便获得更好的选择性和活性。
[0008] 为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种具有5, 2'-二羟 基_4'_甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物，该衍生物具有以下化学通式（I)或其药学上 可接受的盐；
[0009]
[0010]其中，R 为 札为-0CH 3或-OH，R 2 ,'1 V
\IJ
:， 为 _0〇13或-OH，R 3为-OCH 3或-OH。
[0011] 优选的是，所述的具有5, 2' -二羟基-4' -甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物， 是结构式如下的化合物之一：
[0012]
[0013]
[0014] 一种具有5, 2' -二羟基-4' -甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的制备方法， 包括以下步骤：
[0015] 步骤一、以2, 6-二羟基苯乙酮为起始原料，进行甲基化反应，采用柱层析，V(石油 1〇:1，得无色液体状的第一中间产物；
[0016] 步骤二、取2, 4-二甲氧基苯甲酸和二氯亚砜，回流，减压旋蒸后加入溶解有所述 第一中间产物的无水吡啶中，进行成酯反应，重排反应后，采用柱层析，VmM8i) :V }= 4:1，得到黄色油状的第二中间产物；
[0017] 步骤二、取所述第二中间广物进行香叶基化反应，米用柱层析，:V ( =5:1，得黄色油状液态的第三中间产物；
[0018] 步骤四、取所述第三中间产物进行关环反应，采用柱层析，V(；5M):V = 10:1，得黄色油状液态的第四中间产物；
[0019] 步骤五、取所述第四中间产物和氧化铂，溶于无水甲醇中，进行催化加氢反应，采 用柱层析，:V (= 5:1，得黄色油状液态的弟一目标广物。
[0020] 优选的是，所述的具有5, 2' -二羟基-4' -甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物 的制备方法，还包括以下步骤：
[0021] 步骤六、将所述第一目标产物溶解于六甲基磷酰三胺中，进行脱甲基反应，柱层 析，V(石:V (乙酸乙旨旨；)=4:1，得黄色油状液态的弟二目标广物。
[0022] 优选的是，所述的具有5, 2'-二羟基_4'_甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的 制备方法，所述步骤一中的甲基化反应具体包括：将90~110重量份2, 6-二羟基苯乙酮溶 解于600~700重量份无水丙酮中，于圆底烧瓶中搅拌3~6min，加入98~101重量份无 水碳酸钾搅拌8~12min，用恒压滴液漏斗25~35min内滴加88~92重量份硫酸二甲酯， 回流反应5~7h，冷却至室温，用盐酸调节PH值到2,用乙酸乙酯萃取有机相，依次用水、饱 和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，之后进行柱层析得所述第一中间产物，所述第一中 间产物结构经IR，NMR和MS分析确定；
[0023] 所述步骤二中的成酯反应，重排反应具体指：称取10~15重量份2, 4-二甲氧基 苯甲酸，加入33~37重量份二氯亚砜，回流反应0. 8~1. 2h，减压旋蒸除去过量二氯亚砜， 然后将其加入到溶解8~10重量份所述第一中间产物的6. 5~9重量份的无水吡啶中， 90~110°C反应1. 5~2. 5h，加入乙酸乙酯，冷却倒入水中萃取，依次用稀盐酸、水洗涤有机 相，无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，得中间化合物，所述中间化合物不经纯化，将其溶解在 吡啶中，加入4~6重量份预热过的氢氧化钾粉末，搅拌反应20~40min，冷却到室温，加入 乙酸乙酯，冷却倒入水中萃取，依次用稀盐酸、水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，之后进行柱 层析得所述第二中间产物，所述第二中间产物结构经IR，NMR和MS分析确定。
[0024] 优选的是，所述的具有5, 2' -二羟基-4' -甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物 的制备方法，所述步骤三中的香叶基化反应具体指：将5~8. 5重量份所述第二中间产物溶 解于10~14重量份无水丙酮中，加入7. 5~9. 5重量份无水碳酸钾回流8~12min，滴加 4~6. 5重量份香叶基溴，回流2~4h，冷却旋干溶剂，加入乙酸乙酯，分别水、饱和食盐水 洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，之后柱层析得所述第三中间产物，所述第三中间产物结构经 IR，NMR和MS分析确定。
[0025] 优选的是，所述的具有5, 2' -二羟基-4' -甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物 的制备方法，所述步骤四中的关环反应具体指：将3~5. 5重量份所述第三中间产物溶于 70~88重量份甲醇中，滴加1~3滴浓硫酸，回流反应2~4h，减压蒸馏出溶剂，加入乙酸 乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，之后柱层析得所述第四中间产物，所述第四 中间产物结构经IR，NMR和MS分析确定。
[0026] 优选的是，所述的具有5, 2' -二羟基-4' -甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物 的制备方法，所述步骤五中的催化加氢反应具体指：将3~4重量份所述第四中间产物和 0. 2~0. 4重量份氧化铂溶于10~14重量份无水甲醇中，用氢气置换2~4次，室温反 应6~8h，减压除去甲醇溶液，之后柱层析得所述第一目标产物，所述第一目标产物结构经 IR，NMR和MS分析确定。
[0027] 优选的是，所述的具有5, 2' -二羟基-4' -甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物 的制备方法，所述步骤六中的脱甲基反应具体指：氩气保护下将0. 7~1. 2重量份乙硫醇溶 解于25~35重量份六甲基磷酰三胺于0~2°C搅拌8~12min，加入浓度为2~3M的正 丁基锂反应25~35min，将溶解有1~2重量份所述第一目标产物的六甲基磷酰三胺溶液 加入到新制备的乙硫基锂中，60~80°C反应5~7h，加入50~70重量份饱和氯化铵淬灭 反应，用乙酸乙酯萃取有机相，饱和氯化锂洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，之后柱层析得第 二目标产物，所述第二目标产物结构经IR，NMR和MS分析确定。
[0028] 一种具有5, 2' -二羟基-4' -甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的用途，用于 制备治疗宫颈癌的药物。
[0029] 本发明至少包括以下有益效果：
[0030] 第一、黄酮类化合物干预细胞转到过程中的酶活性，从而抑制宫颈癌细胞增殖，且 对正常细胞无毒害作用，能够表现出抗氧化作用和正向免疫调节作用，由于具有多个可被 取代的位置，可被改性以获取能够增强其特定药理活性的抗宫颈癌药物；
[0031] 第二、取消A环7位的氧代和6位、8位的碳代，引入C环3位碳代碳链，提高了黄 酮类化合物的生物活性，具有好的抗宫颈癌的功效和微弱的细胞毒性；
[0032] 第三、在B环常规碳代位和4位引入羟基或甲氧基，避免与C环碳链形成较大的斥 力，保证化合物的稳定性，并且与骨架协同作用，能够很好地抑制、消除宫颈癌细胞活性；
[0033] 第四、本发明使用的制备方法操作简单、反应时间短，制备的化合物纯度高、形态 好。
[0034] 本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本 发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
【具体实施方式】
[0035] 下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书 文字能够据以实施。
[0036] 实施例1:
[0037] 具有5, 2'-二羟基_4'_甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物，目标产物II、III， 结构式如下：
[0038]
[0039] 制备方法如下：
[0040] 步骤一、将9. 05g 2, 6-二羟基苯乙酮溶解于70mL无水丙酮中，于圆底烧瓶中搅拌 3min，加入9. 812g无水碳酸钾搅拌8min，用恒压滴液漏斗25min内滴加8. 878g硫酸二甲 酯，回流反应5h，冷却至室温，用盐酸调节PH值到2,用乙酸乙酯萃取有机相，依次用水、饱 和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，之后进行柱层析：):V ：) = 1〇: 1，得无色 液体状的第一中间产物（9. 654g产率87. 23% )，结构经IR，NMR和MS分析确定，结构式如 下：
[0041]
[0042] 步骤二、称取1. 024g 2, 4-二甲氧基苯甲酸，加入3. 312g二氯亚砜，回流反应 0. 8h，减压旋蒸除去过量二氯亚砜，然后将其加入到溶解0. 811g所述第一中间产物的6mL 的无水吡啶中，9 0 °C反应1. 5 h，加入乙酸乙酯，冷却倒入水中萃取，依次用稀盐酸、水洗涤 有机相，无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，得中间化合物，所述中间化合物不经纯化，将其溶 解在吡啶中，加入0. 423g预热过的氢氧化钾粉末，搅拌反应20min，冷却到室温，加入乙酸 乙酯，冷却倒入水中萃取，依次用稀盐酸、水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，之后进行柱层析 V(石？心=4:1，得到黄色油状的第二中间产物（0.911g产率44. 78% )，结构经 IR，NMR和MS分析确定，结构式如下：
[0043]
[0044] 步骤三、将0. 534g所述第二中间产物溶解于12mL无水丙酮中，加入0. 754g无水 碳酸钾回流8min，滴加0. 419g香叶基溴，回流2h，冷却旋干溶剂，加入乙酸乙酯，分别水、饱 和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，之后柱层析VWM8i):V = 5:1，得黄色油状液 态的第三中间产物（〇. 657g产率69. 61 % )，结构经IR，NMR和MS分析确定，结构式如下：
[0045]
[0046] 步骤四、将0. 322g所述第三中间产物溶于8mL甲醇中，滴加1滴浓硫酸，回流反 应2h，减压蒸馏出溶剂，加入乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，之后柱层析 V(石油醚)(乙酸乙醋)=10:1，得黄色油状液态的第四中间产物（0? 208g产率60. 13 % )，结构 经IR，NMR和MS分析确定，结构式如下：
[0047]
[0048] 步骤五、将0. 334g所述第四中间产物和0. 024g氧化铂溶于12mL无水甲醇中，用 氢气置换2次，室温反应6h，减压除去甲醇溶液，之后柱层析V(；5M) :V = 5:1，得黄 色油状液态的目标产物II (〇? 205g产率61. 42% )和目标产物III (0? 055g产率22. 12% )， 结构经IR，NMR和MS分析确定，结构式如下：
[0049]
[0050] 目标产物 II :IR(KBr) : 3109, 3000, 2951，2865, 1639, 1606, 1472, 1384, 1277, 1252， 1205, 1160, 1033, 838, 813cm-l。1HNMR(300MHz，Chloroform-d) S 7.47 (t，J = 8. 4Hz, 1H), 7. 26 (d, J = 8. 1Hz, 1H), 6. 94 (d, J = 8. 7Hz, 1H), 6. 75 (d, J = 8. 4Hz, 1H), 6. 63 -6. 48 (m, 2H), 3. 98(s,3H), 3. 86(s,3H),