穿心莲内酯的大生产工艺的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及穿心莲内酯的大生产工艺。
【背景技术】
[0002] 穿心莲内酯，分子式C20H3005,天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒， 消炎止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素 药物。本品为二萜类内酯化合物，均难溶于水，通常仅能口服给药。
[0003]目前公开的穿心莲内酯的制备方法有：专利申请号200710142800. 7,公开了一种 醇提后用树脂分离的方法。大孔树脂法洗脱时不同浓度乙醇洗脱物均不同程度含有穿心莲 内酯，80%乙醇洗脱物含量较高，但收率较低。鹿萍等的文献（穿心莲内酯的超声波提取法 研究，赤峰学院学报（自然科学版）第24卷第2期，2008)报道了以穿心莲茎杆粉末为原 料，采用超声波辅助提取穿心莲内酯。结果表明最理想的提取溶剂为75%乙醇，料也比为 1:20,超声时间为40分钟效果最佳。马芝玉等的文献（微波和超声波辅助提取穿心莲内 酯，精细化工第24卷第8期，2007)报道了以穿心莲茎叶为原料，分别采用超声辅助提取和 微波辅助提取穿心莲内酯。结果超声辅助提取最佳工艺条件为提取溶剂为75%乙醇，超声 效率为40%、超声时间为50分钟；微波辅助提取最佳工艺条件为温度为40°C，提取溶剂为 75%乙醇，提取时间为8分钟。超声波辅助提取、微波辅助提取法在某些条件下具有积极的 效果，但这两种方法难以应用于工业化大生产。
【发明内容】
[0004] 本发明的技术方案提供了穿心莲内酯的大生产工艺。
[0005] 本发明提供了一种穿心莲内酯的大生产工艺，它包括如下步骤：
[0006] a、取穿心莲粗粉，加入95%乙醇或甲醇浸润，再加入95%乙醇或甲醇，加热回流 提取，过滤，合并滤液；
[0007]b、滤液加蒸馏水调节乙醇浓度至55% - 85%，室温静置，过滤，得滤液；
[0008] c、滤液加0? 4-0. 8 %活性炭粉末，加热回流脱色，过滤；
[0009] d、滤液减压回收乙醇至1 一 10g/ml(药材量/浓缩液体积），4°C静置，过滤，得穿 心连内醋沉淀；
[0010] e、穿心莲内酯沉淀加少量80%乙醇洗涤，洗涤至类白色，再加少量水洗涤至水溶 液无色，得穿心莲内酯白色粉末；
[0011] f、将e步骤制备的穿心莲内酯白色粉末加三氯甲烷静置，过滤，得精制穿心莲内 酯粉末；
[0012] g、加入95%乙醇，加热使精制穿心莲内酯粉末溶解，过滤，减压回收乙醇至半量， 4°C静置过夜，使析晶，过滤，得穿心莲内酯结晶；母液再次减压回收溶剂至半量，过滤，合并 穿心莲内酯结晶，减压干燥，即得。
[0013] 其中，a步骤所述的提取溶剂为95%乙醇。a步骤所述的提取工艺为：每次加入 95%乙醇4倍量，回流提取3次，每次2h。
[0014] 其中，b步骤所述的乙醇浓度至65%。
[0015] b步骤所述的静置时间为36小时。
[0016] c步骤所述的活性炭的用量为0. 5%。
[0017] c步骤所述的活性炭脱色时间0.5 - 3小时。
[0018] d步骤所述的滤液减压回收乙醇至lg/ml。
[0019] f?步骤所述的10倍量三氯甲烷静置1小时，静置3次。
[0020] g步骤所述的减压干燥条件为：50°C减压干燥2小时。
[0021] 本发明采用适宜工业大规模生产的回流法提取穿心莲内酯，提取效率可达80%以 上，可节约大量原药材，节约成本；提取时间仅为2小时每次，提取时间短，避免长时间加热 破坏穿心莲内酯；4倍量95%乙醇提取，提取溶剂用量小，且提取溶剂经回收后，可重复利 用，大量节约成本。
【附图说明】
[0022] 图1工艺流程图
[0023] 图2穿心莲TLC(A_紫外灯下穿心莲TLC ;B_日光下穿心莲TLC ;S1_穿心莲内酯； S2-脱水穿心莲内酯；1-混合对照品；2-穿心莲对照药材；3-CXL1 ;4-CXL2 ;5-CXL3)
[0024] 图3 254nm条件下空白溶剂HPLC色谱图
[0025] 图4 225nm条件下空白溶剂HPLC色谱图
[0026] 图5 254nm条件下混合对照品HPLC色谱图（1-穿心莲内酯；2-脱水穿心莲内酯）
[0027] 图6 225nm条件下混合对照品HPLC色谱图（1-穿心莲内酯；2-脱水穿心莲内酯）
[0028] 图7 254nm条件下样品HPLC色谱图（1-穿心莲内酯；2-脱水穿心莲内酯）
[0029] 图8 225nm条件下样品HPLC色谱图（1-穿心莲内酯；2-脱水穿心莲内酯）
[0030]
[0031] 图9脱水穿心莲内酯标准曲线
[0032] 图10穿心莲内酯标准曲线
[0033] 图11穿心莲浓缩体积考察
[0034]图 12 穿心莲内酯 TLC(1 - J1 ;2_J2 ;3_J3)
[0035] 图13穿心莲内酯对照品HPLC色谱图（1-穿心莲内酯）
[0036] 图14结晶HPLC色谱图（1-穿心莲内酯）
【具体实施方式】
[0037] 实施例1本发明穿心莲内酯的提取工艺（工艺流程图见图1)
[0038]1实验仪器与材料
[0039] 1. 1实验仪器
[0040] Shimadzu LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津公司），SIL-20A自动进样器， Sro-20A检测器，CT0-20A柱温箱，LC solution色谱工作站软件，BP211D电子分析天平（德 国Sartouris股份有限公司），旋转蒸发仪RE-2000B (上海亚荣生化仪器厂）；UPT-I-10T优 普系列超纯水机（成都超纯科技有限公司）；BP211D型电子分析天平（十万分之一）（德国 Sartorius公司）、BP121S型（万分之一）（德国Sartorius公司）、SB25-12D型超声波清 洗器（宁波新艺超声设备有限公司）；电热鼓风干燥箱（型号：DB-211SD)。
[0041] 1.2实验材料
[0042] 1. 2. 1 药材
[0043] 共收集穿心莲药材3批，其中1批购自成都荷花池药材专业市场，产地不详，1批购 自成都中医药大学附属医院，产地不详，1批药材购自清远圣芝堂现代中药有限公司，产地 为广东清远。药材收集情况见表1。
[0044] 表1穿心莲药材收集
[0045]
[0046] 表示不详清
[0047] 1. 2. 2试药与试剂
[0048]穿心莲对照药材（中国食品药品检定院，批号121082-200603)，穿心莲内酯（中 国食品药品检定院，供含量测定用，110797-201108)，脱水穿心莲内酯（中国食品药品检定 院，供含量测定用，批号110854-201308)，水为超纯水，甲醇为色谱纯（国药集团化学试剂 有限公司），其他试剂均为分析纯。
[0049] 2穿心莲药材质量检查
[0050] 21薄层色谱鉴别
[0051] 2. 1. 1供试品溶液的制备
[0052] 取本品粉末（过四号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入40%甲醇 25ml，称定重量，浸泡1小时，超声处理（功率250W，频率33kHz) 30分钟，放冷，再称定重量， 用40%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，置中性氧化铝柱（200~ 300目，5g，内径为1. 5cm)上，用甲醇15ml洗脱，收集洗脱液，置50ml量瓶中，加甲醇至刻 度，摇勾，即得。
[0053] 2. 1. 2对照药材溶液的制备
[0054]取穿心莲对照药材0. 5g，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，作 为对照药材溶液。
[0055] 2. 1. 3对照品溶液的制备
[0056] 再取脱水穿心莲内酯对照品、穿心莲内酯对照品，加无水乙醇制成每1ml各含lmg 的混合溶液，作为对照品溶液。
[0057] 照薄层色谱法（附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液各6 y 1和 对照品溶液4 y 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇（4 :3: 0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药 材色谱和对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点；喷以2% 3, 5-二