用于鲍鱼水产养殖的益生菌的生产的制作方法_4

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5X 10 11个细 胞/g和4. 2 X IO11个细胞/g (图10)。
[0120] 液体产品具有381天的半寿期(存储于4°C )。配制成初始计数为2 X IoiidCFUAiI 的终产品,储存寿命为2535天(至计数为I X 10sCFU/ml的终产品)。
[0121] 挤出产品具有27. 5天的半寿期(存储于4°C )。配制成初始计数为2X IOwCFU/ ml的终产品,储存寿命为192. 5天(至计数为I X 10sCFU/ml的终产品)。
[0122] 汉逊德巴利酵母鲍鱼饲料具有101. 2天的半寿期(存储于4°C )。配置为初始计 数为2 X IOwCFUAiI的终产品,储存寿命为708. 4天(至计数为I X 10sCFU/ml的终产品)。
[0123] 此前并不知晓关于汉逊德巴利酵母益生菌的生产技术。文献中没有关于取决于商 业性能参数(如细胞数量或生物质的浓度、产率和产量系数)的实际的酵母生产的报道。 Papouskova和Sychrova (2007)建议在23°C的培养温度和pH 6. 5下进行木糖醇的生产(其 目标并非是生产生物质)。其它文献提到的最佳温度为28-30°C。涉及该酵母的生物质生 产的唯一在先文献是Macey和Coyne (2006)的研究中对该酵母生长的说明。该研究描述了 使用标准YI3D培养基、20°C的温度和7. 0的pH。
[0124] 本发明描述了使用专利的酵母生长培养基对汉逊德巴利酵母进行商业化生产的 工艺,该工艺使细胞产率提高30%并使生产成本降低42. 7%。
[0125] 此外,我们的研究发现使我们得出如下结论:本文所述工艺的最佳温度是24°C, 而不同于此前所述的温度。该新的培养温度使细胞产率提高449倍。通过将pH调节为5. 6, 观察到细胞产率进一步提高95%。
[0126] 通过在最佳pH和温度下使用CSL作为营养源,该工艺的性能得到显著改善,并出 乎预料地使细胞浓度增加176%,细胞产率增加2382倍,并使生产成本降低644%。
[0127] 上述因素的组合使得开发出用于商业化生产作为益生菌的汉逊德巴利酵母的新 工艺,该工艺具有显著提高的产率、浓度和产量,并使生产成本大幅降低。
[0128] 相比于此前已知的生产工艺,本实施例的工艺的累积效果使得产率提高2075倍。 该增高的产出量可归因于新的生长培养基以及最佳温度和PH的使用。通过使用CSL作为 营养物,该工艺的产率进一步提高,与此前的用于生产汉逊德巴利酵母的最佳工艺相比,细 胞产率进一步提高15%且生产的材料成本降低66%。
[0129] 实施例3
[0130] 生产培养基和培养条件的比较性评价
[0131] 对本发明的工艺与Macey&Coyne(2006)描述的工艺进行了比较性评价。本发明人 对根据Macey&Coyne给出的条件和培养基生长的培养物的生产成本和细胞产率以及根据 本发明的生产培养基生长的培养物的生产成本和细胞产率进行了研究。
[0132] Macey&Coyne将Vibrio midae在海洋肉汤(MB)中培养(所述海洋肉汤由如下 物质制成^七八):3%恥(:1、0.23%]\%(:12,6!120、0.03%1((:1、0.2%葡萄糖、0.5%酪蛋白水 解物和0. 1%酵母提取物),在22°C下以IOOrpm摇动,并维持在海洋琼脂(MA)上(补充 有2wt/v%细菌琼脂的MB,Unilab)。所述作者将汉逊德巴利酵母在酵母蛋白胨D-葡萄糖 (YPD)肉汤中培养(所述YH)由如下物质制成(wt/v) : 1 %酵母提取物、2 %蛋白胨、2 % D-葡 萄糖)并维持在YH)琼脂上(补充有I. 5wt/v%细菌琼脂的YPD肉汤,Unilab)。
[0133] 结果
[0134] 在表1中列出了本发明的生长培养基和工艺与现有技术的生长培养基和工艺之 间的比较性评价的结果。
[0135] 本文中所述的培养基和工艺生产的Vibrio midae的生物质浓度可达到46. Og/1 的最大值,生物质产率可达到11. 4g/l/h。类似地,本文中所述的培养基和工艺生产的汉逊 德巴利酵母的生物质浓度可达到133. 7g/l的最大值,生物质产率可达到6. lg/1/h。
[0136] 表1 :利用本发明的方法和培养基与利用Macey和Coyne (2006)描述的方法和培 养基进行鲍鱼益生菌生产的产率和成本的比较性评价。
[0137]
[0138] 从表1中的结果可明显看出,本发明人所开发的用于生产Vibrio midae和汉逊德 巴利酵母(在水产养殖中作为益生菌)的生长培养基和密集型生产工艺使得这些微生物的 商业化生产的成本显著降低,同时,各培养物的产率相应升高。
[0139] 参考文献
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